CN106770108B - 一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法 - Google Patents
一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106770108B CN106770108B CN201611143809.5A CN201611143809A CN106770108B CN 106770108 B CN106770108 B CN 106770108B CN 201611143809 A CN201611143809 A CN 201611143809A CN 106770108 B CN106770108 B CN 106770108B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bsa
- toxic substances
- detection
- solution
- fluorescence
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 53
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 title claims abstract description 35
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 title claims abstract description 26
- 239000013307 optical fiber Substances 0.000 title abstract description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 72
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 41
- 230000005284 excitation Effects 0.000 claims abstract description 35
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 claims abstract description 34
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 claims abstract description 13
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 63
- 229920000877 Melamine resin Polymers 0.000 claims description 30
- JDSHMPZPIAZGSV-UHFFFAOYSA-N melamine Chemical compound NC1=NC(N)=NC(N)=N1 JDSHMPZPIAZGSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 claims description 25
- OQIQSTLJSLGHID-WNWIJWBNSA-N aflatoxin B1 Chemical compound C=1([C@@H]2C=CO[C@@H]2OC=1C=C(C1=2)OC)C=2OC(=O)C2=C1CCC2=O OQIQSTLJSLGHID-WNWIJWBNSA-N 0.000 claims description 21
- LINOMUASTDIRTM-QGRHZQQGSA-N deoxynivalenol Chemical compound C([C@@]12[C@@]3(C[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1C=C(C([C@@H](O)[C@@]13CO)=O)C)C)O2 LINOMUASTDIRTM-QGRHZQQGSA-N 0.000 claims description 21
- LINOMUASTDIRTM-UHFFFAOYSA-N vomitoxin hydrate Natural products OCC12C(O)C(=O)C(C)=CC1OC1C(O)CC2(C)C11CO1 LINOMUASTDIRTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N T-2 toxin Chemical compound C([C@@]12[C@]3(C)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@]3(COC(C)=O)C[C@@H](C(=C1)C)OC(=O)CC(C)C)O2 BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N 0.000 claims description 19
- MBMQEIFVQACCCH-UHFFFAOYSA-N trans-Zearalenon Natural products O=C1OC(C)CCCC(=O)CCCC=CC2=CC(O)=CC(O)=C21 MBMQEIFVQACCCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- MBMQEIFVQACCCH-QBODLPLBSA-N zearalenone Chemical compound O=C1O[C@@H](C)CCCC(=O)CCC\C=C\C2=CC(O)=CC(O)=C21 MBMQEIFVQACCCH-QBODLPLBSA-N 0.000 claims description 18
- VYLQGYLYRQKMFU-UHFFFAOYSA-N Ochratoxin A Natural products CC1Cc2c(Cl)cc(CNC(Cc3ccccc3)C(=O)O)cc2C(=O)O1 VYLQGYLYRQKMFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- RWQKHEORZBHNRI-BMIGLBTASA-N ochratoxin A Chemical compound C([C@H](NC(=O)C1=CC(Cl)=C2C[C@H](OC(=O)C2=C1O)C)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 RWQKHEORZBHNRI-BMIGLBTASA-N 0.000 claims description 13
- DAEYIVCTQUFNTM-UHFFFAOYSA-N ochratoxin B Natural products OC1=C2C(=O)OC(C)CC2=CC=C1C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 DAEYIVCTQUFNTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- SBIBMFFZSBJNJF-UHFFFAOYSA-N selenium;zinc Chemical compound [Se]=[Zn] SBIBMFFZSBJNJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- UVBUBMSSQKOIBE-DSLOAKGESA-N fumonisin B1 Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)CC(=O)O[C@H]([C@H](C)CCCC)[C@@H](OC(=O)C[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)C[C@@H](C)C[C@H](O)CCCC[C@@H](O)C[C@H](O)[C@H](C)N UVBUBMSSQKOIBE-DSLOAKGESA-N 0.000 claims description 9
- QZIADBYRQILELJ-UHFFFAOYSA-N fumonisin B1 Natural products CCCCC(C)C(OC(=O)CC(CC(=O)O)C(=O)O)C(C)(CC(C)CC(O)CCCCC(O)CC(O)C(C)N)OC(=O)CC(CC(=O)O)C(=O)O QZIADBYRQILELJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- UHYPYGJEEGLRJD-UHFFFAOYSA-N cadmium(2+);selenium(2-) Chemical compound [Se-2].[Cd+2] UHYPYGJEEGLRJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 7
- 239000002121 nanofiber Substances 0.000 claims description 6
- 239000002115 aflatoxin B1 Substances 0.000 claims description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 5
- 229930020125 aflatoxin-B1 Natural products 0.000 claims description 4
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 25
- 239000002245 particle Substances 0.000 abstract description 11
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 9
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 9
- 239000004464 cereal grain Substances 0.000 abstract description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 96
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 73
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 46
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 38
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 25
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 24
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 24
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 24
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 24
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 21
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 19
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 18
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 18
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 18
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 17
- 229920001410 Microfiber Polymers 0.000 description 16
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 16
- 239000003008 fumonisin Substances 0.000 description 16
- 239000003658 microfiber Substances 0.000 description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 14
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 11
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 9
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 9
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 9
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 8
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 8
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- 229930183344 ochratoxin Natural products 0.000 description 7
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 7
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 5
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C(CN1CC2=C(CC1)NN=N2)=O HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 description 3
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- 206010007269 Carcinogenicity Diseases 0.000 description 2
- 206010043275 Teratogenicity Diseases 0.000 description 2
- 239000005409 aflatoxin Substances 0.000 description 2
- 231100000260 carcinogenicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000007670 carcinogenicity Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 231100000211 teratogenicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 2
- 229930191978 Gibberellin Natural products 0.000 description 1
- 206010019851 Hepatotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 101710138657 Neurotoxin Proteins 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- WASQWSOJHCZDFK-UHFFFAOYSA-N diketene Chemical compound C=C1CC(=O)O1 WASQWSOJHCZDFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001779 embryotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000238 embryotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- CCGKOQOJPYTBIH-UHFFFAOYSA-N ethenone Chemical compound C=C=O CCGKOQOJPYTBIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N gibberellic acid GA3 Natural products OC(=O)C1C2(C3)CC(=C)C3(O)CCC2C2(C=CC3O)C1C3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003448 gibberellin Substances 0.000 description 1
- 231100000304 hepatotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007686 hepatotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000171 higher toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000618 neurotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 210000004916 vomit Anatomy 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
- G01N2021/6484—Optical fibres
Abstract
本发明公开了一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法，包括多种量子点分别与多种不同的BSA全抗原的偶联、基底包被、有毒物质抗体与包被基底偶联，在370nm激发波长下采用不同粒径的量子点对粮谷和饲料中的7种有毒有害物质进行检测，检测结果表明方法的灵敏度、准确度较好，特异性较强。本发明还公开了一种荧光强度检测仪，通过荧光强度检测仪，可以同时检测七种有毒物质，操作过程简便，且各检测物彼此并不干扰，检测结果准确度好。
Description
技术领域
本发明属于免疫技术及卫生检测技术领域，具体涉及一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法。
背景技术
近年来，我国养殖业的发展越来越迅速，产生了巨大的经济效益。众所周知，饲料是养殖业发展的物质基础，在养殖生产成本中所占比例较大，确保饲料中的营养物质和具有有毒有害物质的检测方法是保证养殖业发展的关键环节之一。在养殖业繁荣发展的背后，我们发现市场上的动物源性产品存在的安全隐患越来越多，对社会造成了很大的负面影响。出现这种现象的主要原因是养殖业所使用的饲料中有毒有害物质严重超标，这种存在于饲料中的有毒有害物质被饲养动物食用后，可能在体内转化为毒性更大的物质并且被蓄积，通过食物链到达人体体内后，对人体的健康造成了极大的危害。通过调查研究发现，饲料中最常见、危害最大的有毒有害物质有三聚氰胺、伏马毒素B1、T-2毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素及玉米赤霉烯酮，其中，三聚氰胺在体内可形成较大的网状结构，造成结石；赭曲霉素A对人体有强烈的肾脏毒性、肝脏毒性、致癌性和致畸性等；T-2毒素能抑制人体重要器官蛋白质和DNA的合成；玉米赤霉烯酮对人体具有生殖发育毒性，免疫毒性和致癌性等；伏马毒素B1对肝、肾、肺及神经系统具有较大毒性；黄曲霉毒素B1对人体的肝脏具有破坏作用，严重时可导致肝癌甚至死亡；呕吐毒素对人体具有致畸性，神经毒素和胚胎毒性等；上述7种有毒物质在粮谷、饲料中的含量很低时就会对人体产生毒性。
量子点是多电子体系，发光效率远高于单个分子，可以经受多次激发，且标记后对生物大分子的生理活性影响很小，因此为研究生物大分子之间的长期作用提供了可能。量子点可以经受反复多次激发，而不像有机荧光分子那样容易发生荧光漂白或荧光碎灭。因此结合量子点研究上述物质的检测方法对于提高动物源性食品质量，改善人类健康，促进养殖业的发展具有重要意义。
本专利采用的是不同粒径的量子点对粮谷和饲料中的7种有毒有害物质进行检测，这七种量子点在370nm的激发波长下，会在不同的发射波长下呈现不同颜色的荧光，从而可以避免待检测物的相互干扰。
发明内容
本发明的目的是提供一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法。
一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法，它包括：
1）量子点和BSA全抗原的偶联：BSA全抗原分别与不同规格量子点偶联，得多个量子点-BSA全抗原偶联物；
2）基底包被：多微孔板的微孔基底包被不同的抗有毒物质抗体，洗涤，封闭；
3）有毒物质与包被基底偶联：按国家标准处理样品，处理后的样品，加入已包被基底的微孔内，清洗；
4）量子点-BSA全抗原分别加入相对应的微孔中，PBS洗涤后，再加入PBS缓冲液；
5）检测：在370或450nm激发波长下，用荧光强度检测仪同时检测每个微孔中量子点发射峰强度；
所述的BSA全抗原为BSA有毒物质全抗原，所述的有毒物质为三聚氰胺、伏马毒素B1、T-2毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和\或玉米赤霉烯酮，所述的抗体为单克隆抗体；
所述的量子点为ZnSe/ZnS（紫色）、CdS/ZnS（蓝色）、CdSe/ZnS（青色）、CdSe/ZnS（绿色）、CdSe/ZnS（绿色）、CdSe/ZnS（黄色）、CdSe/ZnS（橙色）和\或CdSe/ZnS（红色）；
步骤5）所述的激发波长为370 nm；
步骤5）所述的发射峰强度为405nm时的发射峰强度。
本发明又一个目的是为实现一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法而专门提供的一种荧光强度检测仪。
一种荧光强度检测仪包括：台架1、多个激发光源2、多微孔板3、荧光检测装置4和荧光光谱仪5；所述的多微孔板3上设有微孔31，微孔31为锥形圆柱凹槽，呈圆周排列在八微孔板3上；所述的台架1包括底板14、载物台13、可调支架12、光源固定板11；所述的载物台13、设置在底板14上方，可调支架12固定在载物台13上，光源固定板11设置载物台在上方，固定在可调支架12上；激发光源2固定在光源固定板11；所述的荧光检测装置4固定在载物台13上；所述的荧光检测装置4包括荧光检测探头41、凸透镜42、锥孔43；荧光检测装置4上部设有与微孔31外形相对应的锥孔43，下部设有荧光检测探头41；
所述的锥孔43下部、荧光检测探头41上部设有凸透镜42；
所述的激发光源2、微孔板3的微孔31、荧光检测装置4均为8个；
所述的微孔31为锥形圆柱凹槽，上底面直径为6.8mm，下底面直径为6.21mm，高11.7mm。
本发明提供了一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法，包括多种量子点分别与多种BSA全抗原的偶联、基底包被、有毒物质抗体与包被基底偶联，在370nm激发波长下采用不同粒径的量子点对粮谷和饲料中的7种有毒有害物质进行检测，检测结果表明方法的灵敏度、准确度较好，特异性较强。本发明还提供了一种荧光强度检测仪，通过荧光强度检测仪，可以同时检测七种有毒物质，操作过程简便，且各检测物彼此并不干扰，检测结果准确度好。
附图说明
图1为本发明一种荧光强度检测仪整体结构立体图；
图2为本发明一种荧光强度检测仪整体结构立体图；
图3为本发明一种荧光强度检测仪原理图；
图4为本发明一种荧光强度检测仪局部结构图；
图5为本发明一种荧光强度检测仪检测检测传感器剖面图；
图6为本发明一种荧光强度检测仪检测检测八孔板立体图；
图7本发明一种荧光强度检测仪检测检测八孔板剖面图；
图8 三聚氰胺的标准曲线；
图9伏马毒素B1的标准曲线；
图10 T-2毒素的标准曲线；
图11黄曲霉毒素B1的标准曲线；
图12赭曲霉毒素A的标准曲线；
图13呕吐毒素的标准曲线；
图14玉米赤霉烯酮的标准曲线。
具体实施方式
实施例1 荧光强度检测仪
请参见图1-7；一种荧光强度检测仪，包括：台架1、激发光源2、八孔板3、荧光检测装置4；
其中所述的八孔板3上设有微孔31，微孔31为锥形圆柱凹槽，呈圆周排列在八孔板3上；
所述的台架1包括底板14、载物台13、可调支架12、光源固定板11；
所述的载物台13、设置在底板14上方，可调支架12固定在载物台13上，光源固定板11设置载物台在上方，固定在可调支架12上；
所输的可调支架12可以调节载物台13与光源固定板11之间的高度；
所述的载物台13、光源固定板11上均设有与八孔板3位置相对应的通孔；
所述的激发光源2固定在光源固定板11的通孔上；
所述的荧光检测装置4固定在载物台13上的通孔内；
所述的荧光检测装置4包括荧光检测探头41、凸透镜42、锥孔43；
荧光检测装置4上部设有与微孔31外形相对应的锥孔43，锥孔43下部设有凸透镜42，凸透镜42下部设有荧光检测探头41；
所述的荧光检测探头41设置在凸透镜42焦点处；
荧光检测探头41的输出光纤与荧光光谱仪5连接，荧光光谱仪5与电脑6连接；
所述的微孔31为锥形圆柱凹槽，上底面直径为6.8mm，下底面直径为6.21mm，高11.7mm。
使用时，将待测液体注入八孔板3的微孔31中，液面低于微孔31，调节可调支架12，升高激发光源2，将八孔板3放在荧光检测装置4上，使微孔31完全进入锥孔43内，节可调支架12，降低激发光源2，使激发光源2的探头位于待测液体上表面；打开激发光源2，待测液体发出的荧光经荧光检测探头42传递至荧光光谱仪5，最后输送至电脑6。
实施例2 量子点和抗体的偶联
1）量子点选择：ZnSe/ZnS（粒径 4nm，紫色）、CdS/ZnS（粒径 8nm，蓝色）、CdSe/ZnS（粒径 10nm，青色）、CdSe/ZnS（粒径 12nm，绿色）、CdSe/ZnS（粒径 5nm，黄色）CdSe/ZnS（粒径 6nm，橙色）、CdSe/ZnS（粒径 7nm，红色）（苏州星烁纳米科技有限公司提供）
2）量子点的活化：
取1mLPBS缓冲溶液，加入量子点ZnSe/ZnS 100μL，加入EDC20μL，加入NHS20μL，涡旋，放于避光处活化30min；
3）量子点与BSA全抗原的偶联:
加入20μLBSA全抗原，30℃，10rpm摇床避光偶联2h；
4）封闭：
加入50μL10%BSA封闭30min；
5）终洗：
15000rpm 离心30min，收集沉淀，向沉淀中加入500μL PBS缓冲溶液后重悬回收，4℃避光备用。
实施例3基底的包被与检测
1)八孔板处理:
在紫外灯下，用254nm波长的紫外光照射八孔板1h；
2)包被:
三聚氰胺单抗包被于八孔板的微孔中，用0.01 M，pH7.4 PBS 缓冲液将三聚氰胺单抗稀释为10μg/mL，每孔加入200μL，4°C包被过夜；
3) 纯化:
由于量子点-BSA全抗原的粒径要比游离的量子点大很多，所以截留分子质量为100000的超滤膜可以使游离的量子点通过，而截留下ZnSe/ZnS -三聚氰胺-BSA全抗原的量子点，加入100μL PBS缓冲溶液后重悬回收，4℃避光备用；
4)封闭：
加入200 μL 5%BSA封闭微孔中未被包被的位点，防止非特异性吸附，37°C孵育2h后取出；PBS洗涤除去多余的BSA溶液，洗涤3次，每次3分钟，甩干，4℃保存。
实施例4 应用荧光强度检测仪检测三聚氰胺
1)应用荧光强度检测仪检测三聚氰胺的方法
加入100μL待测液到采用实施例3中的方法制备的三聚氰胺单抗基底上，37°C下孵育2h，每孔加入200μL由实施例2提供的方法制备的浓度为200ng/mL的ZnSe/ZnS-三聚氰胺-BSA全抗原偶联量子点，经PBS洗涤离心3次，去除未与基底结合的量子点-三聚氰胺-BSA全抗原后每个微孔中加入0.01M，pH7.4的PBS缓冲液200μL，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测405nm时的发射峰强度。
2）检测灵敏度的确定
采用上述检测方法，分别在基底中加入浓度为0μg/L、0.1μg/L、0.2μg/L、0.3μg/L、0.4μg/L、0.5μg/L、0.6μg/L的三聚氰胺溶液及空白溶液，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测405nm时的发射峰强度。测试结果如图8所示，检出限为0.1μg/L。
3）特异性试验
根据实施例2和实施例3制备好ZnSe/ZnS -三聚氰胺-BSA全抗原和三聚氰胺单抗基底，将三聚氰胺、伏马毒素B1、T-2毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮分别配成系列浓度采用上述的检测方法进行特异性交叉试验，同时空白对照。计算各竞争物的 IC50。计算公式为：交叉反应率 (％)＝[IC50(三聚氰胺)/IC50(待测药物 )]×100。
测定及计算结果如表 1 所示，结果表明该方法异性较强，只对三聚氰胺发生反应，而对其他毒性化合物没有交叉反应。
4）待测液的制备
用粉碎机粉碎待测谷物，粒度小于2mm。称取5g试样(精确到0.01 g)加入不同浓度的三聚氰胺水平的标准品，置于具塞塑料离心管中，加人PBS溶液25 mL，超声振荡15 min后4000 r/min离心10 min。取上层17. 5 mL PBS溶液于干净的容器，通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器(提取液A)。向下层固体样品中加人17. 5 mL甲醇，超声振荡15 min后4 000 r/min离心10 min，取上层溶液10 mL，用90 mL PBS溶液稀释后通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器（提取液B）。
将免疫亲和柱连接于10mL玻璃针筒下，准确移取50mL提取液B过免疫亲和柱，以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mLPBS溶液以每秒1～2滴的流速通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；准确移取5mLA以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mL超纯水以每秒1～2滴的流速淋洗柱子，直至空气流经亲和柱；弃去全部流出液。将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将洗脱液收集于玻璃试管中，当甲醇大部分过柱后，不要完全过柱，停止加压，静止5min，再将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将全部洗脱液收集于同一玻璃试管中，待测。
5）准确度和精密度的检测
以重复测定某一浓度样品的检测结果变异系数（CV%）作为精密度评价指标。以回收率作为准确度评价指标。变异系数 CV% 计算公式为：CV% =SD/ X ×100% ；其中 SD 为标准偏差，X 为测定数据的平均值。回收率计算公式为：回收率（%）= 实际测定值/理论值×100%。其中理论值为模拟样品的添加浓度。
采用上述待测液的制备方法，对玉米样品进行三聚氰胺阳性添加，三聚氰胺分别添加0.1μg/kg、0.2μg/kg、0.5μg/kg三个浓度水平的样品，每个添加水平做4个平行，选取PBSS作为空白对照1，再选取未添加的玉米样品做空白对照2，利用实施例1中的荧光强度检测仪，参照实施例4中1）的试验步骤进行添加回收测定。样品的平均回收率及精密度结果见表2。
实验结果表明：平均回收率在90.6～91.5之间。变异系数均小于11%，说明方法精密度和准确度好，检测效果好。
实施例5应用荧光强度检测仪检测伏马毒素B1
1)应用荧光强度检测仪检测伏马毒素B1的方法
加入100μL待测液到采用实施例3中的方法制备的伏马毒素B1单抗基底上，37°C下孵育2h，每孔加入200μL由实施例2提供的方法制备的浓度为200ng/mL的ZnSe/ZnS-伏马毒素B1-BSA全抗原偶联量子点，经PBS洗涤离心3次，去除未与基底结合的量子点-伏马毒素B1-BSA全抗原后，每个微孔中加入0.01M，pH7.4的PBS缓冲液200μL，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测450nm时的发射峰强度。
2）检测灵敏度的确定
采用上述检测方法，分别在基底中加入浓度为0μg/L、0.25μg/L、0.3μg/L、0.35μg/L、0.4μg/L、0.45μg/L、0.5μg/L的伏马毒素B1溶液及空白溶液，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测450nm时的发射峰强度。测试结果如图9所示，检出限为0.25μg/L。
3）交叉反应试验
根据实施例2和实施例3制备好CdS/ZnS-伏马毒素B1-BSA全抗原和伏马毒素B1单抗基底，将三聚氰胺、伏马毒素B1、T-2毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮分别配成系列浓度采用上述的检测方法进行特异性交叉试验，同时空白对照。计算各竞争物的 IC50。计算公式为：交叉反应率 (％) ＝ [IC50(伏马毒素B1)/IC50(待测药物 )]×100。
测定及计算结果如表3所示，结果表明该方法异性较强，只对伏马毒素B1发生反应，而对其他毒性化合物没有交叉反应。
4）待测液的制备
用粉碎机粉碎待测谷物，粒度小于2mm。称取5g试样(精确到0.01 g)加入不同浓度的伏马毒B1水平的标准品，置于具塞塑料离心管中，加人PBS溶液25 mL，超声振荡15 min后4000 r/min离心10 min。取上层17. 5 mL PBS溶液于干净的容器，通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器(提取液A)。向下层固体样品中加人17. 5 mL甲醇，超声振荡15 min后4 000 r/min离心10 min，取上层溶液10 mL，用90 mL PBS溶液稀释后通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器（提取液B）。
将免疫亲和柱连接于I0mL玻璃针筒下，准确移取50mL提取液B过免疫亲和柱，以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mLPBS溶液以每秒1～2滴的流速通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；准确移取5mLA以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mL超纯水以每秒1～2滴的流速淋洗柱子，直至空气流经亲和柱；弃去全部流出液。将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将洗脱液收集于玻璃试管中，当甲醇大部分过柱后，不要完全过柱，停止加压，静止5min，再将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将全部洗脱液收集于同一玻璃试管中，待测。
5）准确度和精密度的检测
以重复测定某一浓度样品的检测结果变异系数（CV%）作为精密度评价指标。以回收率作为准确度评价指标。变异系数 CV% 计算公式为：CV% =SD/ X ×100% ；其中 SD 为标准偏差，X 为测定数据的平均值。回收率计算公式为：回收率（%）= 实际测定值/理论值×100%。其中理论值为模拟样品的添加浓度。
采用上述待测液的制备方法，对玉米样品进行伏马毒素B1阳性添加，伏马毒素B1分别添加0.25μg/kg、0.35μg/kg、0.45μg/kg三个浓度水平的样品，每个添加水平做4个平行，选取PBS作为空白对照1，再选取未添加的玉米样品做空白对照2，利用实施例1中的荧光强度检测仪，参照实施例5中1）的试验步骤进行添加回收测定。样品的平均回收率及精密度结果见表4。
实验结果表明：平均回收率在87.7～90.5之间。变异系数均小于11%，说明方法精密度和准确度好，检测效果好。
实施例6应用荧光强度检测仪检测T-2毒素
1)应用荧光强度检测仪检测T-2毒素的方法
加入100μL待测液到采用实施例3中的方法制备的T-2毒素单抗基底上，37°C下孵育2h，每孔加入加入200μL浓度为200ng/mL的ZnSe/ZnS-T-2毒素-BSA全抗原偶联量子点，经PBS洗涤离心3次，去除未与基底结合的量子点-T-2毒素-BSA全抗原后每个微孔中加入0.01M，pH7.4的PBS缓冲液200μL，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测500nm时的发射峰强度。
2）检测灵敏度的确定
采用上述检测方法，分别在基底中加入浓度为0μg/L、0.25μg/L、0.3μg/L、0.35μg/L、0.4μg/L、0.45μg/L、0.5μg/L的T-2毒素溶液及空白溶液，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测500nm时的发射峰强度。测试结果如图10所示，检出限为0.25μg/L。
3）交叉反应试验
根据实施例2和实施例3制备CdSe/ZnS-T-2毒素-BSA全抗原和-T-2毒素单抗基底，将三聚氰胺、伏马毒素B1、T-2毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮分别配成系列浓度采用上述的检测方法进行特异性交叉试验，同时空白对照。计算各竞争物的 IC50。计算公式为：交叉反应率 (％) ＝ [IC50(T-2毒素)/IC50( 待测药物 )]×100。
测定及计算结果如表5所示，结果表明该方法异性较强，只对T-2毒素发生反应，而对其他毒性化合物没有交叉反应。
4）待测液的制备
用粉碎机粉碎待测谷物，粒度小于2mm。称取5g试样(精确到0.01 g)加入不同浓度的三聚氰胺水平的标准品，置于具塞塑料离心管中，加人PBS溶液25 mL，超声振荡15 min后4000 r/min离心10 min。取上层17. 5 mL PBS溶液于干净的容器，通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器(提取液A)。向下层固体样品中加人17. 5 mL甲醇，超声振荡15 min后4 000 r/min离心10 min，取上层溶液10 mL，用90 mL PBS溶液稀释后通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器（提取液B）。
将免疫亲和柱连接于10mL玻璃针筒下，准确移取50mL提取液B过免疫亲和柱，以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mLPBS溶液以每秒1～2滴的流速通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；准确移取5mLA以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mL超纯水以每秒1～2滴的流速淋洗柱子，直至空气流经亲和柱；弃去全部流出液。将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将洗脱液收集于玻璃试管中，当甲醇大部分过柱后，不要完全过柱，停止加压，静止5min，再将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将全部洗脱液收集于同一玻璃试管中，待测。
5）准确度和精密度的检测
以重复测定某一浓度样品的检测结果变异系数（CV%）作为精密度评价指标。以回收率作为准确度评价指标。变异系数 CV% 计算公式为：CV% =SD/ X ×100% ；其中 SD 为标准偏差，X 为测定数据的平均值。回收率计算公式为：回收率（%）= 实际测定值/理论值×100%。其中理论值为模拟样品的添加浓度。
采用上述待测液的制备方法，对玉米样品进行T-2毒素阳性添加，T-2毒素分别添加0.25μg/kg、0.35μg/kg、0.45μg/kg三个浓度水平的样品，每个添加水平做4个平行，选取PBS作为空白对照1，再选取未添加的玉米样品做空白对照2，利用实施例1中的荧光强度检测仪，参照实施例6中1）的试验步骤进行添加回收测定。样品的平均回收率及精密度结果见表6。
实验结果表明：平均回收率在88.2～89.6之间。变异系数均小于11%，说明方法精密度和准确度好，检测效果好。
实施例7应用荧光强度检测仪检测黄曲霉毒素B1
1)应用荧光强度检测仪检测黄曲霉毒素B1的方法
加入100μL待测液到采用实施例3中的方法制备的黄曲霉毒素B1单抗基底上，37°C下孵育2h，每孔加入200μL由实施例2提供的方法制备的浓度为200ng/mL的ZnSe/ZnS-黄曲霉毒素B1-BSA全抗原偶联量子点，经PBS洗涤离心3次，去除未与基底结合的量子点-黄曲霉毒素B1-BSA全抗原后每个微孔中加入0.01M，pH7.4的PBS缓冲液200μL，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测520nm时的发射峰强度。
2）检测灵敏度的确定
采用上述检测方法，分别在基底中加入浓度为0μg/L、0.3μg/L、0.35μg/L、0.4μg/L、0.45μg/L、0.5μg/L、0.55μg/L的黄曲霉毒素B1溶液及空白溶液，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测520nm时的发射峰强度。测试结果如图11所示，检出限为0.3μg/L。
3）交叉反应试验
根据实施例2和实施例3的方法制备好CdSe/ZnS-黄曲霉毒素B1-BSA全抗原和-黄曲霉毒素B1单抗基底，将三聚氰胺、伏马毒素B1、T-2毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮分别配成系列浓度采用上述的检测方法进行特异性交叉试验，同时空白对照。计算各竞争物的 IC50。计算公式为：交叉反应率 (％) ＝ [IC50(黄曲霉毒素B1)/IC50( 待测药物 )]×100。
测定及计算结果如表7所示，结果表明该方法异性较强，只对黄曲霉毒素B1发生反应，而对其他毒性化合物没有交叉反应。
4）待测液的制备
用粉碎机粉碎待测谷物，粒度小于2mm。称取5g试样(精确到0.01 g)加入不同浓度的三聚氰胺水平的标准品，置于具塞塑料离心管中，加人PBS溶液25 mL，超声振荡15 min后4000 r/min离心10 min。取上层17. 5 mL PBS溶液于干净的容器，通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器(提取液A)。向下层固体样品中加人17. 5 mL甲醇，超声振荡15 min后4 000 r/min离心10 min，取上层溶液10 mL，用90 mL PBS溶液稀释后通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器（提取液B）。
将免疫亲和柱连接于10mL玻璃针筒下，准确移取50mL提取液B过免疫亲和柱，以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mLPBS溶液以每秒1～2滴的流速通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；准确移取5mLA以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mL超纯水以每秒1～2滴的流速淋洗柱子，直至空气流经亲和柱；弃去全部流出液。将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将洗脱液收集于玻璃试管中，当甲醇大部分过柱后，不要完全过柱，停止加压，静止5min，再将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将全部洗脱液收集于同一玻璃试管中，待测。
5）准确度和精密度的检测
以重复测定某一浓度样品的检测结果变异系数（CV%）作为精密度评价指标。以回收率作为准确度评价指标。变异系数 CV% 计算公式为：CV% =SD/ X ×100% ；其中 SD 为标准偏差，X 为测定数据的平均值。回收率计算公式为：回收率（%）= 实际测定值/理论值×100%。其中理论值为模拟样品的添加浓度。
采用上述待测液的制备方法，对玉米样品进行黄曲霉毒素B1阳性添加，黄曲霉毒素B1分别添加0.30μg/kg、0.40μg/kg、0.50μg/kg三个浓度水平的样品，每个添加水平做4个平行，选取PBS作为空白对照1，再选取未添加的玉米样品做空白对照2，利用实施例1中的荧光强度检测仪，参照实施例7中1）的试验步骤进行添加回收测定。样品的平均回收率及精密度结果见表8。
实验结果表明：平均回收率在91.2～94.7之间。变异系数均小于9%，说明方法精密度和准确度好，检测效果好。
实施例8应用荧光强度检测仪检测赭曲霉毒素A
1)应用荧光强度检测仪检测赭曲霉毒素A的方法
加入100μL待测液到采用实施例3中的方法制备的赭曲霉毒素A单抗基底上，37°C下孵育2h，每孔加入200μL由实施例2提供的方法制备的浓度为200ng/mL的ZnSe/ZnS-赭曲霉毒素A-BSA全抗原偶联量子点，经PBS洗涤离心3次，去除未与基底结合的量子点-赭曲霉毒素A-BSA全抗原后每个微孔中加入0.01M，pH7.4的PBS缓冲液200μL，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测550nm时的发射峰强度。
2）检测灵敏度的确定
采用上述检测方法，分别在基底中加入浓度为0μg/L、0.2μg/L、0.25μg/L、0.3μg/L、0.35μg/L、0.4μg/L、0.45μg/L的赭曲霉毒素A溶液及空白溶液，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测550nm时的发射峰强度。测试结果如图12所示，检出限为 0.2μg/L。
3）交叉反应试验
根据实施例2和实施例3制备好CdSe/ZnS-赭曲霉毒素A-BSA全抗原和-赭曲霉毒素A单抗基底，将三聚氰胺、伏马毒素B1、T-2毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮分别配成系列浓度采用上述的检测方法进行特异性交叉试验，同时空白对照。计算各竞争物的 IC50。计算公式为：交叉反应率 (％) ＝ [IC50(赭曲霉毒素A)/IC50( 待测药物 )]×100。
测定及计算结果如表9所示，结果表明该方法异性较强，只对赭曲霉毒素A发生反应，而对其他毒性化合物没有交叉反应。
4）待测液的制备
用粉碎机粉碎待测谷物，粒度小于2mm。称取5g试样(精确到0.01 g)加入不同浓度的三聚氰胺水平的标准品，置于具塞塑料离心管中，加人PBS溶液25 mL，超声振荡15 min后4000 r/min离心10 min。取上层17. 5 mL PBS溶液于干净的容器，通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器(提取液A)。向下层固体样品中加人17. 5 mL甲醇，超声振荡15 min后4 000 r/min离心10 min，取上层溶液10 mL，用90 mL PBS溶液稀释后通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器（提取液B）。
将免疫亲和柱连接于10mL玻璃针筒下，准确移取50mL提取液B过免疫亲和柱，以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mLPBS溶液以每秒1～2滴的流速通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；准确移取5mLA以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mL超纯水以每秒1～2滴的流速淋洗柱子，直至空气流经亲和柱；弃去全部流出液。将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将洗脱液收集于玻璃试管中，当甲醇大部分过柱后，不要完全过柱，停止加压，静止5min，再将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将全部洗脱液收集于同一玻璃试管中，待测。
5）准确度和精密度的检测
以重复测定某一浓度样品的检测结果变异系数（CV%）作为精密度评价指标。以回收率作为准确度评价指标。变异系数 CV% 计算公式为：CV% =SD/ X ×100% ；其中 SD 为标准偏差，X 为测定数据的平均值。回收率计算公式为：回收率（%）= 实际测定值/理论值×100%。其中理论值为模拟样品的添加浓度。
采用上述待测液的制备方法，对玉米样品进行赭曲霉毒素A阳性添加，赭曲霉毒素A分别添加0.20μg/kg、0.30μg/kg、0.40μg/kg三个浓度水平的样品，每个添加水平做4个平行，选取PBSS作为空白对照1，再选取未添加的玉米样品做空白对照2，利用实施例1中的荧光强度检测仪，参照实施例8中1）的试验步骤进行添加回收测定。样品的平均回收率及精密度结果见表10。
实验结果表明：平均回收率在83.3～89.3之间。变异系数均小于10%，说明方法精密度和准确度好，检测效果好。
实施例9 应用荧光强度检测仪检测呕吐毒素
1)应用荧光强度检测仪检测呕吐毒素的方法
加入100μL待测液到采用实施例3中的方法制备的呕吐毒素单抗基底上，37°C下孵育2h，每孔加入200μL由实施例2提供的方法制备的浓度为200ng/mL的ZnSe/ZnS-呕吐毒素-BSA全抗原偶联量子点，经PBS洗涤离心3次，去除未与基底结合的量子点-呕吐毒素-BSA全抗原后每个微孔中加入0.01M，pH7.4的PBS缓冲液200μL，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测580nm时的发射峰强度。
2）检测灵敏度的确定
采用上述检测方法，分别在基底中加入浓度为0μg/L、0.35μg/L、0.4μg/L、0.45μg/L、0.5μg/L、0.55μg/L、0.6μg/L的呕吐毒素溶液及空白溶液，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测580nm时的发射峰强度。测试结果如图13所示，检出限为0.35μg/L。
3）交叉反应试验
根据实施例2和实施例3制备好CdSe/ZnS-呕吐毒素-BSA全抗原和呕吐毒素单抗基底，将三聚氰胺、伏马毒素B1、T-2毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮分别配成系列浓度采用上述的检测方法进行特异性交叉试验，同时空白对照。计算各竞争物的 IC50。计算公式为：交叉反应率 (％) ＝ [IC50(呕吐毒素)/IC50( 待测药物 )]×100。
测定及计算结果如表11所示，结果表明该方法异性较强，只对呕吐毒素发生反应，而对其他毒性化合物没有交叉反应。
4）待测液的制备
用粉碎机粉碎待测谷物，粒度小于2mm。称取5g试样(精确到0.01 g)加入不同浓度的三聚氰胺水平的标准品，置于具塞塑料离心管中，加人PBS溶液25 mL，超声振荡15 min后4000 r/min离心10 min。取上层17. 5 mL PBSS溶液于干净的容器，通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器(提取液A)。向下层固体样品中加人17. 5 mL甲醇，超声振荡15min后4 000 r/min离心10 min，取上层溶液10 mL，用90 mL PBS溶液稀释后通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器（提取液B）。
将免疫亲和柱连接于10mL玻璃针筒下，准确移取50mL提取液B过免疫亲和柱，以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mLPBS溶液以每秒1～2滴的流速通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；准确移取5mLA以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mL超纯水以每秒1～2滴的流速淋洗柱子，直至空气流经亲和柱；弃去全部流出液。将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将洗脱液收集于玻璃试管中，当甲醇大部分过柱后，不要完全过柱，停止加压，静止5min，再将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将全部洗脱液收集于同一玻璃试管中，待测。
5）准确度和精密度的检测
以重复测定某一浓度样品的检测结果变异系数（CV%）作为精密度评价指标。以回收率作为准确度评价指标。变异系数 CV% 计算公式为：CV% =SD/ X ×100% ；其中 SD 为标准偏差，X 为测定数据的平均值。回收率计算公式为：回收率（%）= 实际测定值/理论值×100%。其中理论值为模拟样品的添加浓度。
采用上述待测液的制备方法，对玉米样品进行呕吐毒素阳性添加，呕吐毒素分别添加0.35μg/kg、0.45μg/kg、0.55μg/kg三个浓度水平的样品，每个添加水平做4个平行，选取PBS作为空白对照1，再选取未添加的玉米样品做空白对照2，利用实施例1中的荧光强度检测仪，参照实施例9中1）的试验步骤进行添加回收测定。样品的平均回收率及精密度结果见表12。
实验结果表明：平均回收率在83.5～91.5之间。变异系数均小于10%，说明方法精密度和准确度好，检测效果好。
实施例10 应用荧光强度检测仪检测玉米赤霉烯酮
1)应用荧光强度检测仪检测玉米赤霉烯酮的方法
加入100μL待测液到采用实施例3中的方法制备的玉米赤霉烯酮单抗基底上，37°C下孵育2h，每孔加入200μL由实施例2提供的方法制备的浓度为200ng/mL的ZnSe/ZnS-玉米赤霉烯酮-BSA全抗原偶联量子点，经PBSST洗涤离心3次去除未与基底结合的量子点-玉米赤霉烯酮-BSA全抗原后，每个微孔中加入0.01M，pH7.4的PBS缓冲液200μL，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测620nm时的发射峰强度。
2）检测灵敏度的确定
采用上述检测方法，分别在基底中加入浓度为0μg/L、0.35μg/L、0.4μg/L、0.45μg/L、0.5μg/L、0.55μg/L、0.6μg/L的玉米赤霉烯酮溶液及空白溶液，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测620nm时的发射峰强度。测试结果如图14所示，检出限为0.35μg/L。
3）交叉反应试验
根据实施例2和实施例3制备好CdSe/ZnS-玉米赤霉烯酮-BSA全抗原和玉米赤霉烯酮单抗基底，将三聚氰胺、伏马毒素B1、T-2毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮分别配成系列浓度采用上述的检测方法进行特异性交叉试验，同时空白对照。计算各竞争物的 IC50。计算公式为：交叉反应率 (％) ＝ [IC50(玉米赤酮)/IC50( 待测药物 )]×100。测定及计算结果如表13所示，结果表明该方法异性较强，只对玉米赤霉烯酮发生反应，而对其他毒性化合物没有交叉反应。
4）待测液的制备
用粉碎机粉碎待测谷物，粒度小于2mm。称取5g试样(精确到0.01 g)加入不同浓度的三聚氰胺水平的标准品，置于具塞塑料离心管中，加人PBS溶液25 mL，超声振荡15 min后4000 r/min离心10 min。取上层17. 5 mL PBS溶液于干净的容器，通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器(提取液A)。向下层固体样品中加人17. 5 mL甲醇，超声振荡15 min后4 000 r/min离心10 min，取上层溶液10 mL，用90 mL PBS溶液稀释后通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器（提取液B）。
将免疫亲和柱连接于10mL玻璃针筒下，准确移取50mL提取液B过免疫亲和柱，以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mLPBS溶液以每秒1～2滴的流速通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；准确移取5mLA以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mL超纯水以每秒1～2滴的流速淋洗柱子，直至空气流经亲和柱；弃去全部流出液。将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将洗脱液收集于玻璃试管中，当甲醇大部分过柱后，不要完全过柱，停止加压，静止5min，再将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将全部洗脱液收集于同一玻璃试管中，待测。
5）准确度和精密度的检测
以重复测定某一浓度样品的检测结果变异系数（CV%）作为精密度评价指标。以回收率作为准确度评价指标。变异系数 CV% 计算公式为：CV% =SD/ X ×100% ；其中 SD 为标准偏差，X 为测定数据的平均值。回收率计算公式为：回收率（%）= 实际测定值/理论值×100%。其中理论值为模拟样品的添加浓度。
采用上述待测液的制备方法，对玉米样品进行玉米赤霉烯酮阳性添加，玉米赤霉烯酮分别添加0.35μg/kg、0.45μg/kg、0.55μg/kg三个浓度水平的样品，每个添加水平做4个平行，选取PBSS作为空白对照1，再选取未添加的玉米样品做空白对照2，利用实施例1中的荧光强度检测仪，参照实施例10中1）的试验步骤进行添加回收测定。样品的平均回收率及精密度结果见表14。
实验结果表明：平均回收率在90.2～91.4之间。变异系数均小于10%，说明方法精密度和准确度好，检测效果好。
实施例11玉米中添加七种有毒物质的平均回收率检测
用粉碎机粉碎待测玉米，粒度小于2mm。称取5g试样(精确到0.01 g)一次加入0.1μg/kg的三聚氰胺标准品、0.3μg/kg伏马毒素B1标准品、0.3μg/kgT-2毒素标准品、0.4μg/kg黄曲霉毒素B1标准品、0.4μg/kg赭曲霉毒素A标准品、0.4μg/kg呕吐毒素标准品、04μg/kg玉米赤霉烯酮标准品，置于具塞塑料离心管中，加人PBS溶液25 mL，超声振荡15 min后4000r/min离心10 min。取上层17. 5 mL PBS溶液于干净的容器，通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器(提取液A)。向下层固体样品中加人17. 5 mL甲醇，超声振荡15 min后4000 r/min离心10 min，取上层溶液10 mL，用90 mL PBSS溶液稀释后通过微纤维滤纸过滤，将滤液收集于干净的容器（提取液B）。
将免疫亲和柱连接于10mL玻璃针筒下，准确移取50mL提取液B过免疫亲和柱，以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mLPBS溶液以每秒1～2滴的流速通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；准确移取5mLA以每秒1～2滴的流速全部通过亲和柱，直至空气流经亲和柱；将20mL超纯水以每秒1～2滴的流速淋洗柱子，直至空气流经亲和柱；弃去全部流出液。将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将洗脱液收集于玻璃试管中，当甲醇大部分过柱后，不要完全过柱，停止加压，静止5min，再将1.5mL甲醇以每秒1滴的流速洗脱亲和柱，将全部洗脱液收集于同一玻璃试管中，待测。
采用实施例2和实施例3的方法，制备各有毒物质的多克隆抗体偶联物、并在八孔板上制备各自单抗基底。选取未添加的玉米样品做空白对照，利用实施例1中的荧光强度检测仪，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测相应的发射峰强度。经计算得到平均回收率如表15所示。从表15中可以看出7种有毒物质的平均回收率，均在实施例4～10检测的平均回收率范围内，因此，利用实施例1中的荧光强度检测仪同时检测7种有毒物质时，各检测物彼此并不干扰，准确度好。
实施例12玉米中七种有毒物质的检测
用粉碎机粉碎待测玉米，粒度小于2m。称取5g试样，参照实施例11的提取方法提取，将全部洗脱液收集于同一玻璃试管中，待测。
采用实施例2和实施例3的方法，制备各有毒物质的多克隆抗体偶联物、并在八孔板上制备各自单抗基底。选取PBS缓冲液做空白对照，采用实施例1中的荧光强度检测仪，在370nm激发波长下用荧光强度检测仪检测相应的发射峰强度。测定的玉米中有毒物质的含量如表16所示。
/>
Claims (5)
1.一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法，它包括：
1）量子点和BSA全抗原的偶联：各BSA全抗原分别与不同规格量子点偶联，得多个量子点-BSA全抗原偶联物；所述的BSA全抗原为BSA有毒物质全抗原；
2）基底包被：多微孔板的微孔基底包被不同的抗有毒物质抗体，洗涤，封闭；
3）有毒物质与包被基底偶联：按国家标准处理样品，处理后的样品，加入已包被基底的微孔内，清洗；
4）量子点-BSA全抗原分别加入包被了相对应抗有毒物质抗体的微孔中，PBS洗涤后，再加入PBS缓冲液；
5）检测：在370或450nm激发波长下，用荧光强度检测仪同时检测每个微孔中的量子点发射峰强度；
所述的荧光强度检测仪，包括：台架（1）、多个激发光源（2）、多微孔板(3)、荧光检测装置(4)和荧光光谱仪(5)；所述的多微孔板(3)上设有微孔(31)，微孔(31)为锥形圆柱凹槽，呈圆周排列在八微孔板（3）上；所述的台架（1）包括底板（14）、载物台（13）、可调支架（12）、光源固定板（11）；所述的载物台（13）、设置在底板（14）上方，可调支架（12）固定在载物台（13）上，光源固定板（11）设置载物台在上方，固定在可调支架（12）上；激发光源（2）固定在光源固定板（11）；所述的荧光检测装置（4）固定在载物台（13)上；所述的荧光检测装置(4)包括荧光检测探头(41）、凸透镜（42）、锥孔（43）；荧光检测装置（4）上部设有与微孔（31）外形相对应的锥孔（43），下部设有荧光检测探头（41）。
2.根据权利要求1所述的一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法，其特征在于：所述的激发光源（2）、微孔板（3）的微孔（31）、荧光检测装置（4）均为8个。
3.根据权利要求2所述的一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法，其特征在于：所述的微孔（31）为锥形圆柱凹槽，上底面直径为6.8mm，下底面直径为6.21mm，高11.7mm。
4.根据权利要求1、2或3所述的一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法，其特征在于：
所述的有毒物质为三聚氰胺、伏马毒素B1、T-2毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和或玉米赤霉烯酮，所述的抗体为单克隆抗体。
5.根据权利要求4所述的一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法，其特征在于：所述的量子点为ZnSe/ZnS、CdS/ZnS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnS和或CdSe/ZnS。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201611143809.5A CN106770108B (zh) | 2016-12-13 | 2016-12-13 | 一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201611143809.5A CN106770108B (zh) | 2016-12-13 | 2016-12-13 | 一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106770108A CN106770108A (zh) | 2017-05-31 |
| CN106770108B true CN106770108B (zh) | 2023-10-27 |
Family
ID=58876223
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201611143809.5A Active CN106770108B (zh) | 2016-12-13 | 2016-12-13 | 一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106770108B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108872175A (zh) * | 2018-07-19 | 2018-11-23 | 湖北大学 | 一种绿色荧光碳量子点和其制备方法、应用 |
Citations (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2003344290A (ja) * | 2002-05-27 | 2003-12-03 | Aisin Cosmos R & D Co Ltd | 温度調節付蛍光検出装置 |
| CN101551398A (zh) * | 2008-11-26 | 2009-10-07 | 中国计量学院 | 药物残留竞争型量子点标记免疫层析试纸条及其观测装置 |
| CN101634632A (zh) * | 2008-07-14 | 2010-01-27 | 马义才 | 一种基于cmos图像传感器的量子点标记试条定量检测系统 |
| CN101828104A (zh) * | 2007-10-08 | 2010-09-08 | 托克斯梅特有限公司 | 用于检测和测量诸如食物毒素的目标化合物的设备和方法 |
| CN201653906U (zh) * | 2010-04-17 | 2010-11-24 | 上海交通大学 | 生物免疫层析芯片检测仪 |
| CN101900605A (zh) * | 2009-05-26 | 2010-12-01 | 奥林巴斯株式会社 | 荧光相关光谱设备和方法 |
| AU2010237532A1 (en) * | 2009-04-15 | 2011-08-18 | Biocartis Nv | Optical detection system for monitoring rtPCR reaction |
| CN102520192A (zh) * | 2011-12-29 | 2012-06-27 | 深圳康美生物科技股份有限公司 | 一种定量检测肌钙蛋白i/肌酸激酶同工酶/肌红蛋白的荧光免疫层析方法及其试剂盒 |
| CN102636473A (zh) * | 2012-04-27 | 2012-08-15 | 四川大学 | 激发光偏离共线型光学系统检测装置及其检测方法 |
| CN103616508A (zh) * | 2013-11-25 | 2014-03-05 | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA快速检测方法和试剂盒 |
| CN103884700A (zh) * | 2014-03-24 | 2014-06-25 | 长春美泰仪器有限公司 | 荧光增白剂检测仪及检测方法 |
| CN103901008A (zh) * | 2014-04-18 | 2014-07-02 | 吉林大学 | 利用荧光内滤效应检测鸡蛋中的三聚氰胺 |
| CN103913577A (zh) * | 2014-03-07 | 2014-07-09 | 吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 一种基于光纤倏逝波生物传感器检测大肠杆菌o157：h7的方法 |
| CN104136914A (zh) * | 2011-12-15 | 2014-11-05 | 海因生命科学股份有限公司 | 用于光学测量试样中核酸的荧光的装置及该装置的使用 |
| CN104380084A (zh) * | 2012-04-10 | 2015-02-25 | 普林斯顿大学理事会 | 超灵敏传感器 |
| CN104897629A (zh) * | 2015-05-15 | 2015-09-09 | 吉林大学 | 一种荧光增白剂迁移量的原位检测方法 |
| CN104991070A (zh) * | 2015-06-25 | 2015-10-21 | 浙江大学 | 量子点阳离子交换信号放大技术检测真菌毒素的方法 |
| CN105158477A (zh) * | 2015-06-15 | 2015-12-16 | 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 | 一种量子点荧光探针及其应用 |
| CN105911036A (zh) * | 2016-04-18 | 2016-08-31 | 曲阜师范大学 | 基于空心布拉格光纤的小型化荧光光谱检测装置 |
| CN106118662A (zh) * | 2015-05-08 | 2016-11-16 | 凯熙医药（天津）有限公司 | 脑胶质瘤靶向量子点及其制备方法和应用 |
| CN106290362A (zh) * | 2016-07-29 | 2017-01-04 | 江苏量点科技有限公司 | 用于量子点试纸条质检的设备及其使用方法 |
| CN106906137A (zh) * | 2017-03-19 | 2017-06-30 | 北京化工大学 | 一种基于微流控芯片的高通量核酸分析装置 |
-
2016
- 2016-12-13 CN CN201611143809.5A patent/CN106770108B/zh active Active
Patent Citations (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2003344290A (ja) * | 2002-05-27 | 2003-12-03 | Aisin Cosmos R & D Co Ltd | 温度調節付蛍光検出装置 |
| CN101828104A (zh) * | 2007-10-08 | 2010-09-08 | 托克斯梅特有限公司 | 用于检测和测量诸如食物毒素的目标化合物的设备和方法 |
| CN101634632A (zh) * | 2008-07-14 | 2010-01-27 | 马义才 | 一种基于cmos图像传感器的量子点标记试条定量检测系统 |
| CN101551398A (zh) * | 2008-11-26 | 2009-10-07 | 中国计量学院 | 药物残留竞争型量子点标记免疫层析试纸条及其观测装置 |
| AU2010237532A1 (en) * | 2009-04-15 | 2011-08-18 | Biocartis Nv | Optical detection system for monitoring rtPCR reaction |
| CN101900605A (zh) * | 2009-05-26 | 2010-12-01 | 奥林巴斯株式会社 | 荧光相关光谱设备和方法 |
| CN201653906U (zh) * | 2010-04-17 | 2010-11-24 | 上海交通大学 | 生物免疫层析芯片检测仪 |
| CN104136914A (zh) * | 2011-12-15 | 2014-11-05 | 海因生命科学股份有限公司 | 用于光学测量试样中核酸的荧光的装置及该装置的使用 |
| CN102520192A (zh) * | 2011-12-29 | 2012-06-27 | 深圳康美生物科技股份有限公司 | 一种定量检测肌钙蛋白i/肌酸激酶同工酶/肌红蛋白的荧光免疫层析方法及其试剂盒 |
| CN104380084A (zh) * | 2012-04-10 | 2015-02-25 | 普林斯顿大学理事会 | 超灵敏传感器 |
| CN102636473A (zh) * | 2012-04-27 | 2012-08-15 | 四川大学 | 激发光偏离共线型光学系统检测装置及其检测方法 |
| CN103616508A (zh) * | 2013-11-25 | 2014-03-05 | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA快速检测方法和试剂盒 |
| CN103913577A (zh) * | 2014-03-07 | 2014-07-09 | 吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 一种基于光纤倏逝波生物传感器检测大肠杆菌o157：h7的方法 |
| CN103884700A (zh) * | 2014-03-24 | 2014-06-25 | 长春美泰仪器有限公司 | 荧光增白剂检测仪及检测方法 |
| CN103901008A (zh) * | 2014-04-18 | 2014-07-02 | 吉林大学 | 利用荧光内滤效应检测鸡蛋中的三聚氰胺 |
| CN106118662A (zh) * | 2015-05-08 | 2016-11-16 | 凯熙医药（天津）有限公司 | 脑胶质瘤靶向量子点及其制备方法和应用 |
| CN104897629A (zh) * | 2015-05-15 | 2015-09-09 | 吉林大学 | 一种荧光增白剂迁移量的原位检测方法 |
| CN105158477A (zh) * | 2015-06-15 | 2015-12-16 | 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 | 一种量子点荧光探针及其应用 |
| CN104991070A (zh) * | 2015-06-25 | 2015-10-21 | 浙江大学 | 量子点阳离子交换信号放大技术检测真菌毒素的方法 |
| CN105911036A (zh) * | 2016-04-18 | 2016-08-31 | 曲阜师范大学 | 基于空心布拉格光纤的小型化荧光光谱检测装置 |
| CN106290362A (zh) * | 2016-07-29 | 2017-01-04 | 江苏量点科技有限公司 | 用于量子点试纸条质检的设备及其使用方法 |
| CN106906137A (zh) * | 2017-03-19 | 2017-06-30 | 北京化工大学 | 一种基于微流控芯片的高通量核酸分析装置 |
Non-Patent Citations (12)
| Title |
|---|
| Antigen/Antibody Immunocomplex from CdTe Nanoparticle Bioconjugates;Shaopeng Wang;《NANO LETTERS》;第2卷(第8期);818-822 * |
| 刘佳佳 ; 郭祥群 ; .高通量便携式荧光检测装置的研制与应用.分析化学.2013,41(第10期),全文. * |
| 复色量子点的制备与免疫分析应用;张兵波;《科学通报》;第52卷(第24期);2846-2851 * |
| 庞俊峰 ; 于卓 ; 梁哲 ; 阴翠翠 ; 刘昊 ; 裴东 ; 唐益雄 ; 吴燕民 ; .量子点荧光探针的应用及其在植物中的发展前景.中国农业科技导报.2009,11(第01期),全文. * |
| 张兵波 ; 刘旭辉 ; 李德娜 ; 田惠 ; 马贵平 ; 常津 ; .复色量子点的制备与免疫分析应用.科学通报.2007,(第24期),全文. * |
| 许琳等.量子点探针应用于粮油中黄曲霉毒素免疫检测的研究.《中国油料作物学报》.2015,第37卷(第37期),量子点探针应用于粮油中黄曲霉毒素免疫检测的研究. * |
| 量子点标记荧光免疫法检测花生中黄曲霉毒素B_1;李园园;李培武;张奇;张文;丁小霞;张兆威;;中国油料作物学报(第04期);123-127 * |
| 量子点荧光分析法在食品污染物分析中的应用;马良;贺亚萍;张宇昊;;食品科学(第21期);398-402 * |
| 量子点荧光探针用于汉坦病毒重组抗原的检测;陈琼;郑锦峰;孙军红;姚苹苹;王洁;李晶;邓小昭;王长军;朱函坪;张云;;东南国防医药(第06期);7-10 * |
| 量子点荧光探针的应用及其在植物中的发展前景;庞俊峰;于卓;梁哲;阴翠翠;刘昊;裴东;唐益雄;吴燕民;;中国农业科技导报(第01期);23-30 * |
| 陈琼 ; 郑锦峰 ; 孙军红 ; 姚苹苹 ; 王洁 ; 李晶 ; 邓小昭 ; 王长军 ; 朱函坪 ; 张云 ; .量子点荧光探针用于汉坦病毒重组抗原的检测.东南国防医药.2012,14(第06期),全文. * |
| 高通量便携式荧光检测装置的研制与应用;刘佳佳;郭祥群;;分析化学(第10期);1-4 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN106770108A (zh) | 2017-05-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| USRE45274E1 (en) | Synthetic mycotoxin adsorbents and methods of making and utilizing the same | |
| Hu et al. | Detection of melamine in milk using molecularly imprinted polymers–surface enhanced Raman spectroscopy | |
| Rodriguez et al. | Sensing food contaminants: advances in analytical methods and techniques | |
| Yue et al. | Simultaneous detection of Ochratoxin A and fumonisin B1 in cereal samples using an aptamer–photonic crystal encoded suspension Array | |
| CN106457090B (zh) | 粪便中寄生虫卵的定量方法 | |
| CN110763834B (zh) | 一种检测免疫标志物含量的方法、试剂和试剂盒 | |
| CN102928590A (zh) | 一种快速检测沙门氏菌的荧光量子点筛选分离检测试剂盒 | |
| CN103852460A (zh) | 基于适配体的磁纳米荧光传感器检测抗生素多残留的方法 | |
| Anh et al. | Gold nanoparticle-based optical nanosensors for food and health safety monitoring: recent advances and future perspectives | |
| CN106770108B (zh) | 一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法 | |
| Capolungo et al. | Photoluminescence‐Based Techniques for the Detection of Micro‐and Nanoplastics | |
| KR101149418B1 (ko) | 세균양 측정 방법 | |
| Jia et al. | Immunosensor of nitrofuran antibiotics and their metabolites in animal-derived foods: A review | |
| EP3129784B1 (fr) | Utilisation d'un colorant pour améliorer la détection du signal dans un procédé d'analyse | |
| CN108732158A (zh) | 适用于检测农产品中三嗪类农药残留的MIPs-SERS检测方法 | |
| CN107085096B (zh) | 基于量子点标记敌百虫仿生免疫吸附检测方法 | |
| CN104502481A (zh) | 一种检测粮食和饲料中呕吐霉素和玉米赤霉烯酮的方法 | |
| Kong et al. | Fluorescence detection of three types of pollutants based on fluorescence resonance energy transfer and its comparison with colorimetric detection | |
| CN206515239U (zh) | 一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的装置 | |
| AU2014200349B2 (en) | Synthetic mycotoxin adsorbents and methods of making and utilizing the same | |
| CN107110759B (zh) | 通过溶剂提取测定样品基质中的分析物 | |
| CN113418882A (zh) | 一种用于检测氨基糖苷类抗生素的纳米金比色阵列传感器及其制备方法 | |
| KR102196281B1 (ko) | 에디펜포스(edifenphos)에 특이적으로 결합하는 DNA 앱타머 및 그의 용도 | |
| WO2014081265A1 (ko) | 자성 나노입자와 고점성 용액을 이용한 식중독균 검출방법 | |
| JP2007232501A (ja) | 環境試料中の検出対象物の調整方法及び検出方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: No. 45 Puyang Street, Lvyuan District, Changchun City, Jilin Province, 130062 Applicant after: Changchun Customs Technical Center Applicant after: JILIN LANDING LUHE TECHNOLOGY CO.,LTD. Applicant after: CHANGCHUN University OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Address before: Luyuan District in Jilin province Changchun Puyang Street 130062 No. 1301 Applicant before: INSPECTION AND QUARANTINE TECHNOLOGY CENTER OF JILIN ENTRY-EXIT INSPECTION AND QUARANTINE BUREAU Applicant before: JILIN LANDING LUHE TECHNOLOGY CO.,LTD. Applicant before: CHANGCHUN University OF SCIENCE AND TECHNOLOGY |
|
| CB02 | Change of applicant information | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |