CN103616508A - 基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA快速检测方法和试剂盒 - Google Patents
基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA快速检测方法和试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103616508A CN103616508A CN201310597843.XA CN201310597843A CN103616508A CN 103616508 A CN103616508 A CN 103616508A CN 201310597843 A CN201310597843 A CN 201310597843A CN 103616508 A CN103616508 A CN 103616508A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ochratoxin
- fluorescence
- quantum dot
- concentration
- relative intensity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54393—Improving reaction conditions or stability, e.g. by coating or irradiation of surface, by reduction of non-specific binding, by promotion of specific binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54373—Apparatus specially adapted for solid-phase testing involving physiochemical end-point determination, e.g. wave-guides, FETS, gratings
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/588—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with semiconductor nanocrystal label, e.g. quantum dots
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明公开了一种基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA(sandwich fluorescence-linked immunosorbent assay)快速检测方法和检测试剂盒;方法包括下列步骤:首先用2.5μg/mL的抗OTA多克隆抗体100μL包被酶标板(黑色底透);用1×PBST200μL洗涤后,用1×BSA PBS封闭酶标板;用1×PBST200μL洗涤后,加入被检测抗原样品溶液100μL;用1×PBST200μL洗涤后,加入生物素标记的抗OTA单克隆抗体100μL;用1×PBST200μL洗涤后,加入100μL1:100稀释的量子点标记的链霉亲和素;用1×PBST200μL洗涤甩干后,用荧光分光光度计(390nm激发波长,605nm发射波长),测定相对荧光强度(RFU),根据样品的RFU代入标准曲线,得出样品的OTA含量。本发明所建立基于量子点的赭曲霉毒素AsFLISA快速检测方法,具有准确、快速、荧光稳定性好、灵敏、特异性高的特点。
Description
技术领域:
本发明属于食品安全检测技术领域的方法,涉及基于量子点标记技术的赭曲霉毒素A的sFLISA检测方法。
背景技术:
赭曲霉毒素(OA)是曲霉属和青霉属的某些菌种产生的次级代谢有毒产物,属烈性的肝脏和肾脏毒素,并具有致癌、致畸和致突变性。OA广泛存在于各种食物中,花生、谷物及其副产品是OA 的主要来源;此外,在可可、咖啡、肉类、乳汁、干果、调味品、酒类中也存在OA。这类毒素包括7种结构类似的化合物,其中毒性最大、分布最广泛、对农作物污染最严重、与人类健康关系最为密切的是赭曲霉毒素A(ochratoxin,OTA),OTA被证实有致癌、致畸、致突变的作用,还具有免疫抑制性,国际癌症研究机构LARC将OTA定位为2B类致癌物(即可能引起人类癌症的物质)。
OTA的产毒菌株广泛地存在于自然界中,且能经食物链进入人体,在谷类和人血清等样品中都检出过OTA残留,严重危害人类的健康。由于OTA的危害性,各国都立法对食品中OTA的残留进行限定。至今已有多个国家制定了食品(1~50μg/kg)和动物饲料(100~1000μg/kg)的OA限量标准。因此,研究灵敏度高、检测限低的快速检测方法显得尤为重要。
目前对赭曲霉毒素A的检测方法有免疫亲和柱-高效液相色谱法(IAC-HPLC)、时间分辨荧光免疫法(TRFIA)、酶联免疫法(ELISA)、免疫亲和柱-荧光光度法等。传统的检测方法存在样品前处理过程中使用多种有毒、异味有机溶剂,毒害操作人员和污染环境;试剂昂贵,成本高;检测结果重现性差,存在交叉反应而易造成假阳性等缺点。
量子点(QDs),又称无机半导体纳米晶体,是一类由II-VI 族( 如CdSe、CdTe、CdS、ZnSe 等) 或III-V 族( 如InP、InAs 等) 元素组成的纳米颗粒,是近年发展起来的一种新型荧光纳米材料。与传统有机荧光染料相比,具有很多优良的荧光性能,吸收光谱宽、发射光谱窄而对称,斯托克斯位移( Stoke’s shift) 大及较高的荧光稳定性和较长的衰减寿命。现在,量子点作为一种新型的荧光标记材料和重要的纳米材料之一,经常被用作生物标记及成像过程中的光学探针,在生物领域中的应用越来越受到关泛关注,特别是在临床诊断方法取得了长足的进展。
本发明利用多克隆抗体的强富集能力,通过量子点标记的链霉亲和素与生物素标记的OTA检测抗体相互作用的级联放大效应(亲和素与生物素互作效应),巧妙设计了一种灵敏度高、特异性强的赭曲霉毒素A三明治夹心荧光免疫检测(sandwich fluorescence-linked immunosorbent assay,sFLISA)方法,为赭曲霉毒素A在食品安全等应用领域提供技术基础和参考依据。
发明内容:
本发明所要解决的技术问题是提供一种赭曲霉毒素A的基于量子点标记技术的sFLISA定量检测方法,即通过量子点荧光标记的链霉亲和素-生物素之间的级联放大效应,能灵敏特异地进行赭曲霉毒素A的定量检测,以克服现有检测技术的不足。
为解决上述技术问题,本发明利用量子点多波长激发、高强度荧光发射、发射峰窄、峰形对称、发光稳定性好的荧光特性,提供了一种基于量子点标记的赭曲霉毒素A的检测方法,对被测物进行定量检测;主要原理是利用多克隆抗体的强富集能力,通过量子点标记的链霉亲和素与生物素标记的OTA检测抗体相互作用的级联放大效应(亲和素与生物素互作效应),设计了一种灵敏度高、特异性强的赭曲霉毒素A的sFLISA定量检测方法。
一种基于量子点的赭曲霉毒素A sFLISA快速检测方法,具体包括下列步骤:
具体包括下列步骤:
(一)兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体的包被
用pH 9.6的0.05 mol/L碳酸盐缓冲液将兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体稀释成浓度为2.5μg/mL包被酶标板,每孔100μL。42℃孵育0.5 h,倒去包被液,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(二)封闭
用1X BSA-PBS溶液封闭板上的空白位点,每孔200μL,37℃孵育2 h,倒去封闭液,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(三)加待检样品
各孔加倍比稀释的标准品或待测样品各100μL,阴性对照孔加100μL的1X BSA-PBS,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(四)加生物素标记的鼠抗赭曲霉毒素A单克隆抗体
除试剂空白孔外,其余各孔加生物素化抗体100μL ,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(五)加量子点标记的链霉亲和素
所有各孔加100μL用TBS缓冲液稀释的适合稀释倍数的量子点标记的链霉亲和素,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(六)相对荧光强度检测
在多功能荧光酶标仪上以390nm为激发波长,605nm为发射波长,选择底读模式,测量相对荧光强度(RFU,relative fluorescence units),减去试剂空白孔的相对荧光强度,得到相对荧光强度值。
(七)建立标准曲线
根据赭曲霉毒素A浓度和相应的相对荧光强度建立了标准曲线,在0.39 μg/L~125 μg/L之间,赭曲霉毒素A浓度与相对荧光强度呈线性关系,线性回归方程为y=0.0207x+0.196(线性相关系数R2=0.9938,y为相对荧光强度,x为赭曲霉毒素A的浓度(μg/L));根据标准曲线回归方程可计算出样品的赭曲霉毒素A的浓度。
本发明所建立基于量子点的赭曲霉毒素A sFLISA快速检测方法,能够快速地对赭曲霉毒素A进行定量检测,加标回收试验结果表明,加标回收率范围在90.1%~110%之间,变异系数均小于10%。具有较高的特异性;该方法具有快速、稳定性好、灵敏、特异高的特点,具有很好的推广应用价值。
本发明还提供了一种基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA检测试剂盒,包括:
(1)酶标板1块:包括12条,每条含有8个小孔,每个孔中均包被有兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体;
(2)稀释板1块:没有包被的12条8孔板;
(3)6瓶赭曲霉毒素A标准品浓度分别为:0、0.39、0.79、1.56、3.125、6.25、12.5、25、50、125 μg/L,每瓶1.5 mL;
(4)生物素标记的赭曲霉毒素A抗体:10 mL;
(5)量子点标记的链霉亲和素:10 mL。
发明所建立的基于量子点的赭曲霉毒素A sFLISA快速检测方法,具有准确、快速、荧光稳定性好、灵敏、特异性高的特点。
附图或附表说明:
图1为本发明实施例1,基于量子点的赭曲霉毒素A sFLISA快速检测方法建立的标准曲线,图中,横坐标为赭曲霉毒素A的浓度(μg/L),纵坐标为相对荧光强度(RFU)。
图2为实施例4中样品应用HPLC的检测图谱。
具体实施方式:
下面通过具体实施例并结合附图或附表进一步阐述本发明。
实施例1:基于量子点的赭曲霉毒素A sFLISA快速检测方法建立的标准曲线
(一)兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体的包被
用pH 9.6的0.05 mol/L碳酸盐缓冲液将兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体稀释成浓度为2.5μg/mL包被酶标板,每孔100μL。42℃孵育0.5 h,倒去包被液,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(二)封闭
用1X BSA-PBS溶液封闭板上的空白位点,每孔200μL,37℃孵育2 h,倒去封闭液,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(三)加待检样品
各孔分别加一定稀释倍数的标准品:0.39、0.79、1.56、3.125、6.25、12.5、25、50、125、250、500μg/L 100μL,阴性对照孔加100μL的1X BSA-PBS,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(四)加生物素标记的鼠抗赭曲霉毒素A单克隆抗体
除试剂空白孔外,其余各孔加生物素标记的鼠抗赭曲霉毒素A单克隆抗体100μL ,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(五)加量子点标记的链霉亲和素
所有各孔加100μL用TBS缓冲液稀释的适合稀释倍数的量子点标记的链霉亲和素,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(六)相对荧光强度检测
在多功能荧光酶标仪上以390nm为激发波长,605nm为发射波长,选择底读模式,测量相对荧光强度(RFU,relative fluorescence units),减去试剂空白孔的相对荧光强度,得到相对荧光强度值。
(七)建立标准曲线
在0.39 μg/L~125 μg/L之间,赭曲霉毒素A浓度与相对荧光强度呈线性关系,推导出线性回归方程为y=0.0207x+0.196(线性相关系数R2=0.9938,y为相对荧光强度,x为赭曲霉毒素A的浓度(μg/L))。在此浓度范围内,赭曲霉毒素A浓度可进行定量分析。
实施例2:基于量子点的赭曲霉毒素A sFLISA快速检测方法的重现性试验
(一)兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体的包被
用pH 9.6的0.05 mol/L碳酸盐缓冲液将兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体稀释成浓度为2.5μg/mL包被酶标板,每孔100μL。42℃孵育0.5 h,倒去包被液,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(二)封闭
用1X BSA-PBS溶液封闭板上的空白位点,每孔200μL,37℃孵育2 h,倒去封闭液,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(三)加待检样品
各孔分别加一定稀释倍数的标准品:6.25、25、50μg/L 100μL,平行重复3次,阴性对照孔加100μL的1X BSA-PBS,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(四)加生物素标记的鼠抗赭曲霉毒素A单克隆抗体
除试剂空白孔外,其余各孔加生物素标记的鼠抗赭曲霉毒素A单克隆抗体100μL ,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(五)加量子点标记的链霉亲和素
所有各孔加100μL用TBS缓冲液稀释的适合稀释倍数的量子点标记的链霉亲和素,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(六)相对荧光强度检测
在多功能荧光酶标仪上以390nm为激发波长,605nm为发射波长,选择底读模式,测量相对荧光强度(RFU,relative fluorescence units),减去试剂空白孔的相对荧光强度,得到相对荧光强度值。
(七)根据标准曲线计算赭曲霉毒素A含量
选择3个OTA浓度(6.25、25和50μg/L),每个浓度反复测定4次。计算相对标准差分别为5.63%、2.77%、5.65%,平均相对标准差为4.68%;回收率分别为109.5%、100.6%、95.9%,平均回收率为102.0%,具有良好的重现性,具体结果见表1。
表1 方法重现性试验结果
浓度(μg/L) | 测定值(μg/L) | 相对标准差(%) | 回收率(%) |
50 | 54.73±3.09 | 5.65 | 109.5 |
25 | 25.14±0.70 | 2.77 | 100.6 |
6.25 | 5.99±0.34 | 5.63 | 95.9 |
实施例3:基于量子点的赭曲霉毒素A sFLISA快速检测方法的加标回收试验
(一)标样添加和OTA提取
不含OTA的1g花生粉中加入不同量的OA标准品(6.25μg/L、25μg/L、50μg/L),密封,室温过夜。次日按每管1800μL加入甲醇(含0.01%乙酸)溶液萃取1h,10000g离心10 min后取上清液,加入等体积的PBS稀释,取100μL进行sFLISA测定,根据建立的标准曲线,推导出浓度值,计算添加回收率。
添加回收率(%)= 实测OTA含量/添加OTA含量×100%
(二)兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体的包被
用pH 9.6的0.05 mol/L碳酸盐缓冲液将兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体稀释成浓度为2.5μg/mL包被酶标板,每孔100μL。42℃孵育0.5 h,倒去包被液,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(三)封闭
用1X BSA-PBS溶液封闭板上的空白位点,每孔200μL,37℃孵育2 h,倒去封闭液,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(四)加待检样品
各孔分别加待检样品 100μL,平行重复3次,阴性对照孔加100μL的1X BSA-PBS,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(五)加生物素标记的鼠抗赭曲霉毒素A单克隆抗体
除试剂空白孔外,其余各孔加生物素标记的鼠抗赭曲霉毒素A单克隆抗体100μL ,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(六)加量子点标记的链霉亲和素
所有各孔加100μL用TBS缓冲液稀释的适合稀释倍数的量子点标记的链霉亲和素,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干。
(七)相对荧光强度检测
在多功能荧光酶标仪上以390nm为激发波长,605nm为发射波长,选择底读模式,测量相对荧光强度(RFU,relative fluorescence units),减去试剂空白孔的相对荧光强度,得到相对荧光强度值。
(七)根据标准曲线计算赭曲霉毒素A含量
通过加标回收的结果,见表2,建立的sFLISA 能够对3个不同浓度的赭曲霉毒素A进行准确的测定,回收率范围在90.1%~110%之间,变异系数均小于10%。表明该方法可用于赭曲霉毒素A的定量检测。
表2 样品添加回收试验结果
添加量(μg/kg) | 检测结果(μg/kg) | 回收率(%) | 变异系数(%) |
6.25 | 5.63±0.43 | 90.1 | 7.63 |
25 | 24.56±0.56 | 98.2 | 2.29 |
50 | 54.94±1.30 | 110 | 2.36 |
实施例4:基于量子点的赭曲霉毒素A sFLISA检测方法和检测试剂盒对花生样品检测
(一)样品OTA提取
花生样品买自青岛市团岛市场。
10g花生粉,次日按每管18 mL加入甲醇(含0.01%乙酸)溶液萃取1h,10000g离心10 min后取上清液,加入等体积的PBS稀释,分别取100μL进行sFLISA和HPLC测定,重复3次,比较结果的显著性差异。
利用本发明的检测方法和试剂盒进行sFLISA检测。
利用HPLC进行色谱检测,色谱条件:色谱柱:Hypersil C18 ( 150 mm×4.6 mm,3 μm);柱温:室温;流动相:乙腈/水/乙酸( 99/99/2,体积比);流速:0.4 mL/min;进样量:20 μL;激发波长:333 nm;发射波长:477 nm。
(二)结果分析
根据图2和表3,实测花生样品结果表明,应用本发明获得的OTA检测结果为6.98±0.12 μg/kg,HPLC检测结果为7.10±0.13 μg/kg,无显著性差异,。
表3 花生试验结果
检测方法 | 检测结果(μg/kg) | 变异系数(%) |
本发明 | 6.98±0.12 | 1.7 |
HPLC | 7.10±0.13 | 1.8 |
Claims (2)
1.一种基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA快速检测方法,其特征在于:兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体作为捕获抗体,生物素标记的鼠抗赭曲霉毒素A单克隆抗体作为检测抗体,量子点标记的链霉亲和素作为荧光探针,通过亲和素-生物素之间的级联放大效应,能灵敏特异地进行赭曲霉毒素A的定量检测,与黄曲霉毒素B1等无交叉反应;
具体包括下列步骤:
(一)兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体的包被
用pH 9.6的0.05 mol/L碳酸盐缓冲液将兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体稀释成浓度为2.5μg/mL包被酶标板,每孔100μL,42℃孵育0.5 h,倒去包被液,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干;
(二)封闭
用1× BSA-PBS溶液封闭板上的空白位点,每孔200μL,37℃孵育2 h,倒去封闭液,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干;
(三)加待检样品
相应孔加一定稀释倍数的标准品或待测样品100μL,阴性对照孔加100μL的1× BSA-PBS,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干;
(四)加生物素标记的鼠抗赭曲霉毒素A单克隆抗体
除试剂空白孔外,其余各孔加生物素化抗体100 μL ,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3 min/次,甩干;
(五)加量子点标记的链霉亲和素
所有相应孔加100 μL用TBS缓冲液1:100稀释的量子点标记的链霉亲和素,37℃孵育1 h,用1×PBST洗涤3次,3min/次,甩干;
(六)相对荧光强度检测
在多功能荧光酶标仪上以390nm为激发波长,605nm为发射波长,选择底读模式,测量相对荧光强度(RFU,relative fluorescence units),减去试剂空白孔的相对荧光强度,得到相对荧光强度值;
(七)建立标准曲线并计算待测样品中的赭曲霉毒素A的浓度
根据赭曲霉毒素A浓度和相应的相对荧光强度建立了标准曲线,在0.39 μg/L~125 μg/L之间,赭曲霉毒素A浓度与相对荧光强度呈线性关系,线性回归方程为y=0.0207x+0.196(线性相关系数R2=0.9938,y为相对荧光强度,x为赭曲霉毒素A的浓度(μg/L));根据标准曲线回归方程可计算出样品的赭曲霉毒素A的浓度。
2.一种基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA检测试剂盒,包括:
(1)酶标板1块:包括12条,每条含有8个小孔,每个孔中均包被有兔抗赭曲霉毒素A多克隆抗体;
(2)稀释板1块:没有包被的12条8孔板;
(3)6瓶赭曲霉毒素A标准品浓度分别为:0、0.39、0.79、1.56、3.125、6.25、12.5、25、50、125 μg/L,每瓶1.5 mL;
(4)生物素标记的鼠抗赭曲霉毒素A单克隆抗体:10 mL;
(5)量子点标记的链霉亲和素:10 mL。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310597843.XA CN103616508B (zh) | 2013-11-25 | 2013-11-25 | 基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA快速检测方法和试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310597843.XA CN103616508B (zh) | 2013-11-25 | 2013-11-25 | 基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA快速检测方法和试剂盒 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103616508A true CN103616508A (zh) | 2014-03-05 |
CN103616508B CN103616508B (zh) | 2015-09-30 |
Family
ID=50167214
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201310597843.XA Active CN103616508B (zh) | 2013-11-25 | 2013-11-25 | 基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA快速检测方法和试剂盒 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103616508B (zh) |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103983622A (zh) * | 2014-04-16 | 2014-08-13 | 南昌大学 | 基于两种量子点之间能量转移的赭曲霉毒素a检测方法 |
CN105277707A (zh) * | 2015-01-12 | 2016-01-27 | 深圳市森塔医疗器械有限公司 | 基于量子点标记的结直肠癌细胞的检测方法和试剂盒 |
CN105510595A (zh) * | 2015-12-01 | 2016-04-20 | 邹检平 | 基于量子点CdTe检测人血清中VEGF浓度的试剂盒及其使用方法 |
CN106568967A (zh) * | 2016-11-02 | 2017-04-19 | 南昌大学 | 一种针对赭曲霉毒素a的灵敏检测方法 |
CN106770108A (zh) * | 2016-12-13 | 2017-05-31 | 吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法 |
CN113341149A (zh) * | 2021-06-09 | 2021-09-03 | 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所 | 一种用于检测氟喹诺酮类抗生素的试剂盒和检测方法 |
CN113341147A (zh) * | 2021-05-08 | 2021-09-03 | 郑州大学 | 玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素a的双重荧光免疫检测体系的构建与应用 |
CN114088675A (zh) * | 2021-11-17 | 2022-02-25 | 浙江科技学院 | 包裹荧光染料的免疫脂质体及应用 |
CN114295591A (zh) * | 2021-12-01 | 2022-04-08 | 无锡市第二人民医院 | 双信号纳米探针及其在检测前列腺特异性抗原中的应用 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1515909A (zh) * | 2003-08-27 | 2004-07-28 | 魏景艳 | 量子点标记的夹心免疫检测法及其诊断试剂盒 |
CN101706496A (zh) * | 2009-11-13 | 2010-05-12 | 江苏省原子医学研究所 | 一种检测赭曲霉毒素a的试剂盒及其检测方法 |
US20100266603A1 (en) * | 2009-04-17 | 2010-10-21 | Chung Shan Medical University | Monoclonal Antibody Specific to Ochratoxin A |
US8211715B1 (en) * | 2011-11-15 | 2012-07-03 | Harrogate Holdings, Ltd. Co. | Consumer food testing device providing remote monitoring |
-
2013
- 2013-11-25 CN CN201310597843.XA patent/CN103616508B/zh active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1515909A (zh) * | 2003-08-27 | 2004-07-28 | 魏景艳 | 量子点标记的夹心免疫检测法及其诊断试剂盒 |
US20100266603A1 (en) * | 2009-04-17 | 2010-10-21 | Chung Shan Medical University | Monoclonal Antibody Specific to Ochratoxin A |
CN101706496A (zh) * | 2009-11-13 | 2010-05-12 | 江苏省原子医学研究所 | 一种检测赭曲霉毒素a的试剂盒及其检测方法 |
US8211715B1 (en) * | 2011-11-15 | 2012-07-03 | Harrogate Holdings, Ltd. Co. | Consumer food testing device providing remote monitoring |
Cited By (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103983622A (zh) * | 2014-04-16 | 2014-08-13 | 南昌大学 | 基于两种量子点之间能量转移的赭曲霉毒素a检测方法 |
CN105277707A (zh) * | 2015-01-12 | 2016-01-27 | 深圳市森塔医疗器械有限公司 | 基于量子点标记的结直肠癌细胞的检测方法和试剂盒 |
CN105510595A (zh) * | 2015-12-01 | 2016-04-20 | 邹检平 | 基于量子点CdTe检测人血清中VEGF浓度的试剂盒及其使用方法 |
CN106568967A (zh) * | 2016-11-02 | 2017-04-19 | 南昌大学 | 一种针对赭曲霉毒素a的灵敏检测方法 |
CN106568967B (zh) * | 2016-11-02 | 2018-08-03 | 南昌大学 | 一种针对赭曲霉毒素a的灵敏检测方法 |
CN106770108A (zh) * | 2016-12-13 | 2017-05-31 | 吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法 |
CN106770108B (zh) * | 2016-12-13 | 2023-10-27 | 长春海关技术中心 | 一种基于纳米光纤生物传感器检测有毒物质的方法 |
CN113341147A (zh) * | 2021-05-08 | 2021-09-03 | 郑州大学 | 玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素a的双重荧光免疫检测体系的构建与应用 |
CN113341149A (zh) * | 2021-06-09 | 2021-09-03 | 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所 | 一种用于检测氟喹诺酮类抗生素的试剂盒和检测方法 |
CN113341149B (zh) * | 2021-06-09 | 2023-08-22 | 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所 | 一种用于检测氟喹诺酮类抗生素的试剂盒和检测方法 |
CN114088675A (zh) * | 2021-11-17 | 2022-02-25 | 浙江科技学院 | 包裹荧光染料的免疫脂质体及应用 |
CN114295591A (zh) * | 2021-12-01 | 2022-04-08 | 无锡市第二人民医院 | 双信号纳米探针及其在检测前列腺特异性抗原中的应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103616508B (zh) | 2015-09-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103616508B (zh) | 基于量子点的赭曲霉毒素A的sFLISA快速检测方法和试剂盒 | |
Wei et al. | Simultaneous detection of aflatoxin B1, ochratoxin A, zearalenone and deoxynivalenol in corn and wheat using surface plasmon resonance | |
Tripathi et al. | Recent advancements in lateral flow immunoassays: A journey for toxin detection in food | |
Adunphatcharaphon et al. | The evolution of multiplex detection of mycotoxins using immunoassay platform technologies | |
Hassan et al. | SERS based sensor for mycotoxins detection: challenges and improvements | |
Zangheri et al. | Smartphone biosensor for point-of-need chemiluminescence detection of ochratoxin A in wine and coffee | |
Bueno et al. | Determination of mycotoxins in food: A review of bioanalytical to analytical methods | |
Shao et al. | Biotin–streptavidin system-mediated ratiometric multiplex immunochromatographic assay for simultaneous and accurate quantification of three mycotoxins | |
Lattanzio et al. | Current analytical methods for trichothecene mycotoxins in cereals | |
Li et al. | Immunoassays for aflatoxins | |
Wang et al. | Development and application of a quantitative fluorescence-based immunochromatographic assay for fumonisin B1 in maize | |
Wang et al. | Application of suspension array for simultaneous detection of four different mycotoxins in corn and peanut | |
Rahman et al. | Specific antigen‐based and emerging detection technologies of mycotoxins | |
Zhang et al. | Rapid on-site sensing aflatoxin B1 in food and feed via a chromatographic time-resolved fluoroimmunoassay | |
Guan et al. | Multiplex optical bioassays for food safety analysis: Toward on‐site detection | |
Tang et al. | One-step detection of ochratoxin A in cereal by dot immunoassay using a nanobody-alkaline phosphatase fusion protein | |
He et al. | Phage-borne peptidomimetics as immunochemical reagent in dot-immunoassay for mycotoxin zearalenone | |
Jiang et al. | Multiplexed lateral flow immunoassay based on inner filter effect for mycotoxin detection in maize | |
Li et al. | Simultaneous determination of β2-agonists clenbuterol and salbutamol in water and swine feed samples by dual-labeled time-resolved fluoroimmunoassay | |
Kim et al. | Detection of pathogenic Salmonella with nanobiosensors | |
Gondhalekar et al. | Detection of E. coli labeled with metal-conjugated antibodies using lateral-flow assay and laser-induced breakdown spectroscopy | |
Li et al. | An immunoassay for ochratoxin A using tetramethylrhodamine-labeled ochratoxin A as a probe based on a binding-induced change in fluorescence intensity | |
Bian et al. | Sensitive and homogenous immunoassay of fumonisin in foods using single molecule fluorescence correlation spectroscopy | |
Mousseau et al. | Luminescent lanthanide nanoparticle-based imaging enables ultra-sensitive, quantitative and multiplexed in vitro lateral flow immunoassays | |
Anfossi et al. | Lateral flow immunoassays for aflatoxins B and G and for aflatoxin M1 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |