CN106692692A - 一种铁皮石斛提取物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种铁皮石斛提取物及其制备方法。以铁皮石斛为原料，经干燥、粉碎、水煎煮法提取、过滤、活性炭脱色纯化、过滤、浓缩、干燥，即得石斛提取物。本发明的提取物除富含铁皮石斛多糖、氨基酸外还含有矿物质、黏液质等组分，各组分均为化妆品的常用添加剂，可应用于化妆品，具有保湿、营养皮肤等功效，且安全无毒副作用。本发明的提取方法具有提取纯化工艺简单，不使用有机溶剂，安全环保，生产成本低的特点。

Description

一种铁皮石斛提取物及其制备方法

技术领域：

本发明属于日化产品领域，具体涉及一种铁皮石斛提取物，及其制备方法，更具体地，涉及一种铢皮石斛中生物活性多糖、氨基酸成分等的提取、纯化方法。

背景技术：

铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo为兰科石斛属植物铁皮石斛的茎，又名黑节草。始载于《神农本草经》列为上品，因其特殊的生存环境和卓著的滋补功效而名列“中华九大仙草”之首。《中国药典》2010版将其单列，具有清热利湿，解毒消肿的功效，主要用于湿热黄疸，中暑腹泻，石淋血淋，痈肿疮毒，跌扑损伤等。研究表明，铁皮石斛多糖成分与铁皮石斛的药效，如提高机体的免疫能力、抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、降血糖等有着密切的关系。

铁皮石斛富含多糖，为其重要的功能性成分，2010年版《中国药典》以多糖为其含量控制指标，并规定多糖含量不得低于25％。多糖是重要的生物活性大分子，是人体皮肤真皮层的重要组成成分。多糖在皮肤新陈代谢过程中具有突出的调节作用，其生物学活性和理化性质为其在化妆品中的应用提供了依据，能产生保湿、改善肤色、抗衰老和抗菌等功能，且高分子多糖无毒副作用，与常用化妆品成分配伍性好。因此，生物活性多糖作为功效型化妆品添加剂将有着广阔的前景。

铁皮石斛另一富含成分为氨基酸。氨基酸及其衍生物广泛应用于医药、食品、添加剂、化妆品、科学研究等领域。人体可以通过食物或者专门的氨基酸制品摄入必需氨基酸，而氨基酸化妆品另辟蹊径，它通过在皮肤表层涂抹、喷洒，让皮肤或者头发直接吸收，从而达到美容、保湿的效果。在化妆品工业中，氨基酸产品有护肤品、清洁用品、护发素等，应用广泛，氨基酸化妆品也被越来越多的人所接受和追捧。

铁皮石斛的提取纯化已有多项专利和参考文献报道，但基本都集中于石斛多糖的提取纯化方面。中国专利申请主要有许江“一种铁皮石斛多糖的提取方法”(申请号201410010334.7)，陈绍瑗“铁皮石斛多糖提取工艺及所用的响应面法优化法”(申请号201210080911.0)，石秀伟“一种铁皮石斛多糖提取物、其药物组合物和其制备方法及其应用”(申请号200610145677.X)，崔武卫“一种石斛多糖的分离纯化方法”(申请号201110365323.7)。近年报道关于铁皮石斛的参考文献主要有黄晓君“铁皮石斛多糖提取工艺优化及其成分分析”(食品科学，2013，34：21-26.)，尚喜雨“正交实验优选铁皮石斛多糖提取工艺的研究”(辽宁中医杂志，2010，37：708-709)，王培培“正交实验法优化铁皮石斛多糖的提取工艺”(时珍国医国药，2012，23：2781-2782.)等。这些专利申请文件及文献报道丰富了铁皮石斛多糖的提取纯化手段，但大部分专利申请及其它文献只涉及到多糖的提取纯化方法，主要为脱脂、水提、醇沉、除蛋白、干燥等步骤，醇沉方法石斛多糖得率低，除蛋白过程导致部分多糖、氨基酸等物质的损失，整体提取工艺相对复杂，得率低，生产成本高。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种工艺简单、制备成本低、得率较高的从铁皮石斛中提取石斛多糖、氨基酸等活性物质的方法，该方法以铁皮石斛为原料，从中提取石斛多糖、氨基酸等活性物质，提取液仅用活性炭纯化，保留植物最本色生物活性成分，多糖和氨基酸提取率高。本发明的提取物可应用于化妆品，具有保湿及营养皮肤等功效，无毒副作用。本发明的目的还在于提供上述方法所得到的铁皮石斛提取物。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

一种铁皮石斛提取物，由下述方法制备而得：

(1)提取：将铁皮石斛干燥、粉碎成粗粉，用水煎煮提取2次，第一次水的用量为样品重量的40～80倍，第二次水的用量为样品重量的20～40倍，提取时间为2小时，过滤，合并滤液；

(2)纯化：向步骤(1)中得到的提取液中加入提取液重量的0.2％～0.5％的活性炭，加热至70℃～沸腾，搅拌1小时，过滤，收集滤液；

(3)浓缩：将步骤(2)得到的滤液浓缩至比重为1.05～1.2(30℃)；

(4)干燥：将步骤(3)得到的浓缩物干燥，得铁皮石斛提取物，提取物中的多糖含量为25-35％。

一种铁皮石斛提取物，由下述方法制备而得：

取铁皮石斛粗粉，用水煎煮提取2次，第一次水的用量为药材重量的60倍，第二次水的用量为药材重量的30倍，提取时间为2小时，过滤，合并滤液，向滤液中加入滤液重量的0.5％的活性炭，加热至80℃，搅拌1小时，过滤，收集滤液，将滤液浓缩至比重为1.2，30℃，得浓缩物，将浓缩物真空干燥，得提取物，折算成药材中多糖含量计，提取物中的多糖含量为28-32％。

本发明同时提供了一种铁皮石斛提取物的制备方法，包括下述步骤：

(1)提取：将铁皮石斛干燥、粉碎成粗粉，用水煎煮提取2次，第一次水的用量为样品重量的40～80倍，第二次水的用量为样品重量的20～40倍，提取时间为2小时，过滤，合并滤液；

(2)纯化：向步骤(1)中得到的提取液中加入提取液重量的0.2％～0.5％的活性炭，加热至70℃～沸腾，搅拌1小时，过滤，收集滤液；

(3)浓缩：将步骤(2)得到的滤液浓缩至比重为1.05～1.2，30℃；

(4)干燥：将步骤(3)得到的浓缩物干燥，得铁皮石斛提取物，提取物中的多糖含量为25-35％。

根据所述的方法，其中步骤(4)中的干燥方法为真空干燥、喷雾干燥和微波干燥中的一种。

根据所述的方法，其中步骤(4)中的真空干燥方法为真空度-0.06～-0.08MPa、温度60℃～80℃。

根据所述的方法，其中步骤(4)中的喷雾干燥方法为进风温度170～185℃，进料速度200ml/h。

根据所述的方法，其中步骤(4)中的微波干燥方法为功率400～600W，加热温度40～60℃，自动控温80℃。

另外，本发明还提供了所述的铁皮石斛提取物在制备治疗或预防皮肤病的药物中的应用。

根据所述的铁皮石斛提取物在制备治疗或预防皮肤病的药物或保健品中的应用，其中所述皮肤病为皮肤炎症、过敏、水肿、红班病、干性皮肤、皮肤搔痒、皮肤发炎、红斑、皮肤过敏、瘙痒症、蜘蛛血管、雀斑、老年斑、老年性紫癜、角化症、黑斑病、疙瘩、细纹或皱纹、结节、皮肤太阳损伤、牛皮癣、毛囊炎、红斑痤疮、痤疮、脓胞病、丹毒、红癣、湿疹、日光灼伤、皮肤烧伤、开放性伤口、感染性皮肤病，和它们的任意组合。

所述的铁皮石斛提取物在制备保湿、营养皮肤的化妆品或保健品中的应用。

所述的铁皮石斛提取物在制备麻醉剂、抗真菌剂、抗炎剂、抗氧化剂、防腐剂、螯合剂、着色剂、脱色剂、软化剂、乳化剂、脱落剂、成膜剂、芳香剂、湿润剂、驱虫剂、润滑剂、增湿剂、药剂、光稳定剂、防腐剂、皮肤保护剂、皮肤渗透增强剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂、维生素中的应用。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明采用水提、脱色及干燥的方式获取铁皮石斛提取物，既保留了多糖类、氨基酸等成分，同时还保留矿物质、黏液质等水溶性活性成分，这两组成分均为化妆品的功能性成分。提取液经活性炭纯化后未改变植物本色成分配比，有效保留石斛的生物活性物质，提取纯化过程未使用任何有机溶剂，保证了其安全性，安全环保，工艺简单，技术路线简明，流水化程度高，适合工业化生产。提取物各组分均为化妆品的常用添加物，常应用于化妆品，具有保湿、营养皮肤等功效，且安全无毒副作用。本发明提取物经试验证明具有较好保湿活性，经家兔皮肤刺激性试验和豚鼠皮肤过敏性试验证明铁皮石斛提取物对皮肤无刺激性和过敏性反应，无毒副作用，使用安全。

具体实施方式：

下面用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。

实施例1：

铁皮石斛提取物的制备：

用粉碎机将干燥的铁皮石斛样品进行粉碎，过2号筛，取铁皮石斛粗粉300g，煎煮法提取2次，第一次加样品重量的60倍量水，第二次加样品重量的30倍量水，提取时间为2小时，合并滤液，加入0.5％的活性炭，加热至80℃，搅拌1小时，过滤，收集滤液，将滤液浓缩至比重为1.2(30℃)，真空干燥(真空度为-0.07MPa，温度为80℃)，即得。

干燥后得铁皮石斛提取物158.6g，照《中国药典》2010版第一部铁皮石斛项下多糖含量测定方法，多糖含量为30.75％(折算成药材中多糖含量计)，提取率为92.9％。

实施例2：

铁皮石斛提取物的制备：

用粉碎机将干燥的铁皮石斛样品进行粉碎，过2号筛，取铁皮石斛粗粉200g，煎煮法提取2次，第一次加样品重量的80倍量水，第二次加样品重量的20倍量水，提取时间为2小时，合并滤液，加入0.2％的活性炭，加热至沸腾，搅拌1小时，过滤，收集滤液，将滤液浓缩至比重为1.1(30℃)，微波干燥(功率600W，加热温度50℃，自动控温80℃)，即得。

干燥后得铁皮石斛提取物108.7g，照《中国药典》2010版第一部铁皮石斛项下多糖含量测定方法，多糖含量为28.92％，提取率为87.4％。

实施例3：

铁皮石斛提取物的制备：

用粉碎机将干燥的铁皮石斛样品进行粉碎，过2号筛，取铁皮石斛粗粉400g，煎煮法提取2次，第一次加样品重量的40倍量水，第二次加样品重量的40倍量水，提取时间为2小时，合并滤液，加0.3％的活性炭，加热至70℃，搅拌1小时，过滤，收集滤液，将滤液浓缩至比重为1.05(30℃)，将浓缩物喷雾干燥(进风温度180℃，进料速度200ml/h)，即得。

干燥后得铁皮石斛提取物212.3g，照《中国药典》2010版第一部铁皮石斛项下多糖含量测定方法，多糖含量为30.42％，提取率为91.9％。

实施例4：

铁皮石斛提取物保湿吸湿活性试验：

铁皮石斛提取物干燥后粉碎，准确称取提取物粉0.5g，4份，置于直径为25mm的称量瓶中，称定重量，其中2份分别加入提取物粉重量的3倍量水，充分混匀后，称定重量后敞口放入相对湿度为RH 43％的密闭干燥器中，放置一定时间后测定水分经时减少量与吸水量，计算其保湿率与吸湿率，以甘油、聚乙二醇400为对照。试验结果显示铁皮石斛提取物具有较强的保湿活性和吸湿活性，其保湿率介于甘油和聚乙二醇400之间，24小时内保湿率在92％以上(见表1)；铁皮石斛提取物的吸湿活性，8小时内石斛提取物的吸湿速率较快，8小时内石斛提取物吸湿率达到10％以上，24小时内吸湿率达20％以上，表现出较强的吸湿活性(见表2)。

表1 铁皮石斛提取物在相对湿度RH43％下保湿率(％)

表2 铁皮石斛提取物在相对湿度RH43％下吸湿率(％)

实施例5：

铁皮石斛提取物家兔刺激性试验：

为观察铁皮石斛提取物(浓度为17.6mg/ml)与家兔刺激性试验，将12只家兔分为完整皮肤给药组和破损皮肤给药组，每只动物的背部皮肤去毛后均分为2块：左中、右中。两组均取生理盐水0.5ml涂于去毛区左中部；铁皮石斛提取物0.5ml涂于去毛区右中部，连续7天。停药三天后先处死2/3的动物作为给药末期动物，停药7天后处死剩余1/3动物作为恢复期动物。试验结果显示完整皮肤组给药末期及恢复期，生理盐水对照组及铁皮石斛提取液受试药组家兔皮肤组织结构清晰，被覆鳞状上皮结构正常，无炎性细胞浸润及渗出，各组均未观察到病变。破损皮肤组给药末期及恢复期，对照组及受试药组家兔皮肤，皮损均已经恢复，愈合状态较好，均无观察到炎症等病理情况改变。铁皮石斛提取液对家兔完整表皮和破损表皮均无明显的刺激作用(见表3、表4、表5)。

表3 皮肤刺激反应评分标准

表4 家兔皮肤刺激性试验评分表一(破损皮肤组给药末期)

表5 家兔皮肤刺激性试验评分表二(破损皮肤组恢复期)

实施例6：

铁皮石斛提取物豚鼠皮肤过敏试验：

为观察铁皮石斛提取物(浓度为17.6mg/ml)与豚鼠皮肤接触后有无皮肤过敏反应，将30只豚鼠按体重和性别随机分为3组：空白对照组(生理盐水)、阳性对照组(2,4-二硝基氯苯，1％为致敏浓度，0.1％为激发浓度)和铁皮石斛提取物组，每组10只。于试验第1、7、14天分别在背部皮肤致敏给药，第28天在肋腹部皮肤激发给药。结果显示：空白对照组、铁皮石斛提取物组在激发给药后6、24、48、72h未见皮肤红斑和水肿发生；阳性对照组所有动物在激发给药后6、24、48、72h均有不同程度的皮肤红斑、水肿反应出现。与阳性对照相比，铁皮石斛提取物与豚鼠皮肤接触后无皮肤过敏反应发生(见表6、表7、表8)。

表6 皮肤过敏反应程度的评分标准

表7 皮肤过敏性评价标准

表8 豚鼠皮肤过敏试验过敏评分结果

实施例7：

按实施例1-3制得铁皮石斛提取物，按提取物与赋形剂重量比1:1的比例加入赋形剂，制粒压片。

实施例8：

按实施例1制得铁皮石斛提取物，按提取物与赋形剂重量比1:2的比例加入赋形剂，制粒压片。

实施例9：

按实施例1制得铁皮石斛提取物，按常规胶囊制剂方法制成胶囊。

实施例10：

先按实施例1制得铁皮石斛提取物，再按下述方法制成片剂：

实施例11：

胶囊剂：铁皮石斛提取物 100mg

淀粉 适量

硬脂酸镁 适量

制备方法：将铁皮石斛提取物与淀粉、硬脂酸镁混合，过筛，在合适的容器中均匀混合，把得到的混合物装入硬明胶胶囊。

实施例12：

制备方法：搅拌下于适当体积的重蒸馏水中每次加入一种成分，直至完全深解，然后再加入另一种成分。加水至2ml后，将该溶液在无菌过滤器上过滤，装入瓶中并按照适当的剂量分隔。

实施例13：

滴丸：铁皮石斛提取物 1g

聚乙二醇6000 9g

制法：铁皮石斛提取物6000熔融液的制备：按上述处方量称取铁皮石斛提取物，加入适量无水乙醇，微热溶解后，加入处方量的聚乙二醇熔融液中(60℃水浴保温)，搅拌混合均匀，直至乙醇挥尽为止，静置于60℃水浴中保温30分钟，待气泡除尽，然后将除尽气泡的上述混匀熔融液转入贮液筒内，在保温80-85℃的条件下，控制滴速，一滴滴地滴入冷凝液中，等冷凝完全，倾去冷凝液，收集滴丸，沥净和用滤纸除去丸上的冷凝液，放置硅胶干燥器中或自然干燥即可。

实施例14：

片剂：实施例1所得铁皮石斛提取物10mg，乳糖180mg，淀粉55mg，硬脂酸镁5mg；

制备方法：将提取物、乳糖和淀粉混合，用水均匀湿润，把湿润后的混合物过筛并干燥，再过筛，加入硬脂酸镁，然后将混合物压片，每片重250mg，化合物含量为10mg。

实施例15：

安瓿剂：实施例1所得铁皮石斛提取物2mg，氯化钠10mg；

制备方法：将铁皮石斛提取物和氯化钠溶解于适量的注射用水中，过滤所得溶液，在无菌条件下装入安瓿瓶中。

实施例16：

胶囊剂：实施例1所得铁皮石斛提取物10mg，乳糖187mg，硬脂酸镁3mg；

制备方法：将铁皮石斛提取物与助剂混合，过筛，均匀混合，把得到的混合物装入硬明胶胶囊，每个胶囊重200mg，活性成分含量为10mg。

实施例17：

含有铁皮石斛提取物的美白霜配方(W％)：

按常规制作化妆品的方法制得本发明上述配方的化妆品。

实施例18：

含有铁皮石斛提取物的乳剂配方(W％)：

按常规制作化妆品的方法制得本发明上述配方的化妆品。

前述的实施例应当理解为仅仅是说明本发明。各种选择和修正可由本领域熟练人员不背离本发明而设计。从而，本发明意图包括所有落入以下权利要求范围内的这种选择和修正以及变化。

Claims (11)

1.一种铁皮石斛提取物，其特征在于该提取物由下述方法制备而得：

(1)提取：将铁皮石斛干燥、粉碎成粗粉，用水煎煮提取2次，第一次水的用量为样品重量的40～80倍，第二次水的用量为样品重量的20～40倍，提取时间为2小时，过滤，合并滤液；

(2)纯化：向步骤(1)中得到的提取液中加入提取液重量的0.2％～0.5％的活性炭，加热至70℃～沸腾，搅拌1小时，过滤，收集滤液；

(3)浓缩：将步骤(2)得到的滤液浓缩至比重为1.05～1.2(30℃)；

(4)干燥：将步骤(3)得到的浓缩物干燥，得铁皮石斛提取物，提取物中的多糖含量为25-35％。

2.一种铁皮石斛提取物，其特征在于该提取物由下述方法制备而得：

取铁皮石斛粗粉，用水煎煮提取2次，第一次水的用量为药材重量的60倍，第二次水的用量为药材重量的30倍，提取时间为2小时，过滤，合并滤液，向滤液中加入滤液重量的0.5％的活性炭，加热至80℃，搅拌1小时，过滤，收集滤液，将滤液浓缩至比重为1.2，30℃，得浓缩物，将浓缩物真空干燥，得提取物，折算成药材中多糖含量计，提取物中的多糖含量为28-32％。

3.一种铁皮石斛提取物的制备方法，其特征在于该方法包括下述步骤：

(1)提取：将铁皮石斛干燥、粉碎成粗粉，用水煎煮提取2次，第一次水的用量为样品重量的40～80倍，第二次水的用量为样品重量的20～40倍，提取时间为2小时，过滤，合并滤液；

(2)纯化：向步骤(1)中得到的提取液中加入提取液重量的0.2％～0.5％的活性炭，加热至70℃～沸腾，搅拌1小时，过滤，收集滤液；

(3)浓缩：将步骤(2)得到的滤液浓缩至比重为1.05～1.2，30℃；

(4)干燥：将步骤(3)得到的浓缩物干燥，得铁皮石斛提取物，提取物中的多糖含量为25-35％。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(4)中的干燥方法为真空干燥、喷雾干燥和微波干燥中的一种。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(4)中的真空干燥方法为真空度-0.06～-0.08MPa、温度60℃～80℃。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(4)中的喷雾干燥方法为进风温度170～185℃，进料速度200ml/h。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(4)中的微波干燥方法为功率400～600W，加热温度40～60℃，自动控温80℃。

8.权利要求1或2所述的铁皮石斛提取物在制备治疗或预防皮肤病的药物中的应用。

9.根据权利要求8所述的铁皮石斛提取物在制备治疗或预防皮肤病的药物或保健品中的应用，其特征在于所述皮肤病为皮炎、过敏、水肿、红班病、干性皮肤、皮肤搔痒、皮肤发炎、红斑、皮肤过敏、瘙痒症、蜘蛛血管、雀斑、老年斑、老年性紫癜、角化症、黑斑病、疙瘩、细纹或皱纹、结节、皮肤太阳损伤、牛皮癣、毛囊炎、红斑痤疮、痤疮、脓胞病、丹毒、红癣、湿疹、日光灼伤、皮肤烧伤、开放性伤口、感染性皮肤病，和它们的任意组合。

10.权利要求1或2所述的铁皮石斛提取物在制备保湿、营养皮肤的化妆品或保健品中的应用。

11.权利要求1或2所述的铁皮石斛提取物在制备麻醉剂、抗真菌剂、抗炎剂、抗氧化剂、防腐剂、螯合剂、着色剂、脱色剂、软化剂、乳化剂、脱落剂、成膜剂、芳香剂、湿润剂、驱虫剂、润滑剂、增湿剂、药剂、光稳定剂、防腐剂、皮肤保护剂、皮肤渗透增强剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂、维生素中的应用。