CN102526754A - 从黄蜀葵中提取胶质作为中药凝胶剂基质的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及中药制药技术,特别是一种从黄蜀葵中提取胶质作为妇科凝胶剂基质的应用以及黄蜀葵胶质的制备方法。本发明从黄蜀葵中提取胶质作为中药凝胶剂基质的应用,是从黄蜀葵植株中提取黄蜀葵胶质,用作中药凝胶剂基质。本发明可充分利用黄蜀葵作物的废弃植株,扩大中药凝胶剂基质的制取途径、降低成本、减少废弃物处理污染,同时可获得对阴道炎、宫颈炎等妇科疾病具有较好辅助治疗效果的中药凝胶剂基质。
Description
技术领域
本发明涉及中药制药技术,特别是一种从黄蜀葵中提取胶质作为妇科凝胶剂基质的应用以及黄蜀葵胶质的制备方法。
背景技术
黄蜀葵(Abelmoschus manihot(L.)Medic)为锦葵科秋葵属植物,广泛分布于热带和亚热带地区,在我国主产于华东、中南、西南、华北等地区。现在江苏、安徽、江西等地栽培量较大。黄蜀葵药用始载于《嘉佑本草》,“黄蜀葵花,治小便淋之及催生。又主诸恶疮脓水,久不差者,作末傅之即愈”,《本草纲目》记载其“气味甘寒滑,无毒。主治小便淋及催生。治诸恶疮脓水久不瘥者,作末傅之即愈,为疮家要药。……花、子与根性功效相同,可以互用。无花用子,无子用根。”
近年来,对黄蜀葵花的化学成分、药理功效和新药研究等领域进行了较多研究。黄蜀葵花富含黄酮类物质,含量在3%~5%之间。黄蜀葵花中黄酮类成分主要包括:槲皮素及其同系物,如槲皮素、芦丁、金丝桃苷、槲皮素-3′-O-β-D-葡萄糖苷等,其中金丝桃苷的含量在1.0%~1.2%;棉皮素及其同系物,如棉皮素、棉皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷等;杨梅素及其同系物,如杨梅素、杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷等。另还含有机酸类、甾类等成分。国内以黄蜀葵花为原料开发的中药有江苏苏中药业集团股份有限公司的“黄葵胶囊”、江西沿海药业有限公司的“黄蜀葵花总黄酮胶囊”等。
近年来,为保证制药原料供应,黄蜀葵种植面积逐年扩大,仅苏中药业在江苏地区种植黄蜀葵的面积就达6000多亩。但目前黄蜀葵的利用仅是摘取其花瓣与雄蕊做原料,而占其植株总生物量90%的根、茎、叶在产区被做柴火、或者直接当垃圾废弃掉,造成较大的环境污染。
关于其根、茎等部位的利用,前人做过一些探索性工作,主要在食品、化妆品生产中作为增稠剂、稳定剂使用,未能充分发挥其药用价值。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是,提供一种从黄蜀葵中提取胶质作为中药凝胶剂基质的应用以及黄蜀葵胶质的制备方法,使得可充分利用黄蜀葵作物的废弃植株,扩大中药凝胶剂基质的制取途径、降低成本、减少废弃物处理污染,同时可获得对 阴道炎、宫颈炎等妇科疾病具有较好辅助治疗效果的中药凝胶剂基质。
本发明从黄蜀葵中提取胶质作为中药凝胶剂基质的应用,是从黄蜀葵植株中提取黄蜀葵胶质,用作中药凝胶剂基质。
黄蜀葵植株来自黄蜀葵采摘完花瓣后剩余的根、茎、叶器官中的一种或几种组合。
本发明的黄蜀葵胶质的制备方法的一个技术方案是:以新鲜黄蜀葵植株为原料,将新鲜黄蜀葵根、茎、叶切碎、匀浆,加入相当于黄蜀葵原料10倍重量的蒸镏水,50-70℃保温浸泡8小时,并不断搅拌,离心除去不溶性的成分;将可溶性成分以40目筛过滤后,加入乙醇至药液含醇量达30%~45%重量比,进行沉淀;离心收集沉淀,沉淀经过真空干燥,得到黄褐色的黄蜀葵粗胶质;进一步精制,将沉淀溶解于适量体积的冷水中,在15~20倍体积的蒸馏水中透析2天,每天换液3~4次,然后冷冻干燥;冷冻干燥后的粗多糖溶于蒸馏水后,用鞣酸除蛋白,再分别用重量比15%~20%H2O2和0.5%~1%活性炭脱色,浓缩后再上样于微晶纤维素柱,用蒸馏水洗脱,浓缩洗脱液,再用体积比1∶4的水-乙醇溶液重结晶,干燥得白色粉末状的精制品即为黄蜀葵胶质。
本发明的黄蜀葵胶质的制备方法的另一个技术方案是:以干燥黄蜀葵植株为原料,将干燥的黄蜀葵根、茎、叶原料切成小段,加入相当于药材8倍重量的蒸镏水,50-70℃保温浸泡8小时,并不断搅拌,过40目筛,得第一次药液;将滤出药渣加分别以5倍量水,60°保温浸泡4小时,过40目筛,得第二次滤液;合并两次滤液,加入乙醇至药液含醇量达30%~45%重量比,进行沉淀;离心收集沉淀,沉淀经过真空干燥,得到黄褐色的黄秋葵粗胶质;进一步精制,将沉淀溶解于适量体积的冷水中,在15~20倍体积的蒸馏水中透析2天,每天换液3~4次,然后冷冻干燥;冷冻干燥后的粗多糖溶于蒸馏水后,用鞣酸除蛋白,再分别用重量比15%~20%H2O2和0.5%~1%活性炭脱色,浓缩后再上样于微晶纤维素柱,用蒸馏水洗脱,浓缩洗脱液,再用体积比1∶4水-乙醇溶液重结晶,干燥得白色粉末状的精制品即为黄蜀葵胶。
本发明获得的凝胶剂作为一种纯天然提取的水溶性胶质,在偏酸性条件下性质稳定,尤其适宜于阴道给药,可以在患者身体的局部进行持续给药,保持局部血液中的药物浓度在有效的治疗范围内,对于口服后血药浓度低的部位治疗非常适合,保证了用药的有效性。凝胶剂可经过皮肤或粘膜扩散吸收,有利于保持血药浓度的 平稳,避免了胃肠及肝脏对药物的首过效应和对胃肠道的刺激,避免了口服给药后血药浓度的波动,保证了用药的安全性;可以降低给药频率,减少吸收代谢的个体差异,从而缩短治疗周期、提高治疗效率。
本发明提供了一种中医理论指导下的中药凝胶剂基质,充分利用黄蜀葵滑利之功效,起到增强药效的作用,尤其适宜于阴道炎、宫颈炎等妇科疾病的治疗与保健。仅以萎缩性阴道炎为例,其在绝经妇女中的发病率达30%以上,占所有阴道炎的5%,且复发率高,且目前尚无理想的特效制剂。本发明获得的中药凝胶剂基质,可有效解决目前中药凝胶剂基质匮乏的局面,用于相关产品的开发与生产。
具体实施方式
以下通过实例对本发明作进一步的说明。
取新鲜黄蜀葵根10kg切碎、匀浆,加入相当于药材10倍量的蒸镏水,60℃保温浸泡8小时,并不断搅拌,离心除去不溶性的成分。将溶液以40目筛过滤后,加入95%乙醇至药液含醇量达40%的乙醇进行沉淀。离心收集沉淀,沉淀经过真空干燥,得到黄褐色的黄秋葵粗胶质。进一步精制,将沉淀溶解于适量体积的冷水中,在18倍体积的蒸馏水中透析2天,每天换液3~4次,然后冷冻干燥。冷冻干燥后的粗多糖溶于蒸馏水后,用鞣酸除蛋白,再分别用15%%H2O2和0.5%活性炭脱色,浓缩后再上样于微晶纤维素柱,用蒸馏水洗脱,浓缩洗脱液,再用水-乙醇(体积比1∶4)重结晶,干燥得白色粉末状的精制黄蜀葵胶1.6kg。经检测,其中含有半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖3种单糖组分,红外吸收光谱法分析鉴定黄蜀葵胶的糖苷键为α-吡喃糖苷键,并测定了其比旋光度[α],D为+122.2~+123.0。
从黄蜀葵中提取胶质作为基质,可单独用作中药凝胶剂基质,也可与海藻酸钠、西黄耆胶、阿拉伯胶、黄原胶、瓜尔豆胶、羟丙甲基纤维素、羟甲甲基纤维素、交联型聚丙烯酸钠、聚乙二醇、卡波姆中的一种或一种以上联用;与其联合使用的保湿剂包括甘油、丙二醇中的一种或两种;增溶剂包括聚山梨酯、羟丙基-β-环糊精中的一种;pH调节剂包括三乙醇胺、NaOH中的一种或两种;防腐剂包括尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、苯甲酸钠、山梨酸钾、氮酮中的一种;溶剂包括水、不同浓度的乙醇、聚乙二醇中的一种或一种以上。
适用于本发明凝胶剂的药物可用于局部使用或全身治疗作用。药物可选自清热燥湿、清热解毒、芳香开窍、活血化瘀等,也可使用中药提取物、单一化合物,如白芷、蛇床子、苦参、薄荷、冰片、莪术油、花椒、木香、白鲜皮、黄柏、苦楝、 百部、益母草提取物、黄蜀葵总黄酮提取物、苦豆子总生物碱等。
黄蜀葵胶用量筛选:
黄蜀葵胶是一种化学结构复杂的酸性蛋白质多糖混合物,未磨碎的黄蜀葵胶呈带状或粉末状,通常为弯曲的碎片或直的螺旋形扭曲的长条形断片;白色半透明状,角质组织;无臭,无味,口感黏滑。水分散体被中和后呈极大的膨胀状态,并被增稠,在凝胶剂中用量较少,为了制得适宜于外用、内置等不同用途的凝胶剂,需调整其粘稠度至合适。
分别将不同量的黄蜀葵胶加入水液中,搅拌均匀,结果如下:
黄蜀葵胶用量优选表
根据表中结果,黄蜀葵胶用量在0.2%~1%时,凝胶较稀,涂抹效果较好,适宜于做外用涂抹;当用量在2%~3%时,粘稠度适中,适宜于内用;用量在4.0%以上则粘稠度过高。
萎缩性阴道炎凝胶剂的制备实施例如下:
实施例1:
以制备1000g凝胶剂为例,将黄蜀葵胶25g、聚山梨酯2g加入适量超纯水中混匀,再加入搅匀,然后取黄蜀葵花总黄酮提取物60g逐渐加入搅匀,加超纯水至1000g,不断搅拌至均匀,放置12~24h,使充分溶胀,即得。
实施例2:
以制备1000g凝胶剂为例,将黄蜀葵胶15g、丙二醇200g与氮酮1g加入适量超纯水中混匀,再加入搅匀,然后取黄蜀葵花总黄酮提取物60g逐渐加入搅匀,加超纯水至1000g,不断搅拌至均匀,放置12~24h,使充分溶胀,即得。
实施例3:
以制备1000g凝胶剂为例,将黄蜀葵胶30、聚乙二醇50g与尼泊金乙酯0.2g加入适量超纯水中混匀,再加入搅匀,然后取黄蜀葵花总黄酮提取物60g逐渐加入搅匀,加超纯水至1000g,不断搅拌至均匀,放置12~24h,使充分溶胀,即得。
实施例4:
以制备1000g凝胶剂为例,将黄蜀葵胶15g、甘油200g与氮酮10g加入适量超纯水中混匀,再加入搅匀,然后取黄蜀葵花总黄酮提取物50g逐渐加入搅匀,加超纯水至1000g,不断搅拌至均匀,放置12~24h,使充分溶胀,即得。
实施例5:
以制备1000g凝胶剂为例,将黄蜀葵胶20g、甘油50g与聚山梨酯2g加入适量超纯水中混匀,再加入搅匀,然后取黄蜀葵花总黄酮提取物60g逐渐加入搅匀,加超纯水至1000g,不断搅拌至均匀,放置12~24h,使充分溶胀,即得。
与本发明有关的毒理学试验:
为保证用药安全,对采用本发明制备实施的凝胶剂进行急性毒性试验、阴道粘膜刺激性试验、皮肤过敏试验、皮肤刺激试验,结果表明,本发明的中药凝胶剂,急性毒性实验未见异常及病理学改变,对皮肤、粘膜无刺激及致敏等毒副作用。
1.1急性毒性试验
(1)药物:按制备实施例1制成的凝胶剂。
(2)动物:新西兰种白兔10只,体重2.0±0.2kg,南京中医药大学实验动物中心提供。
(3)方法:将实验动物随机分为两组,每组5只。一次性阴道给药,药物组给与本发明的凝胶剂2ml(为成人临床日用量的30倍),对照组给予同体积的蒸馏水,使凝胶与粘膜充分接触4小时,即刻及每日观察一次,连续观察7天局部及全身反应,随后处死动物,取出阴道组织,观察有无充血、红肿等现象。
(4)结果:两组动物给药后饮食良好,皮毛光泽,活动如常,外阴部未见红肿等不良反应,体重增加,全部动物健存。整个阴道组织及粘膜呈粉红色或淡紫色,未见有红肿、出血点、溃烂等刺激反应;由于毒性小,未测出中药凝胶剂基质的LD50,本品外用安全。
1.2阴道粘膜的刺激试验
(1)药物:按制备实施例1制成的凝胶剂。
(2)动物:新西兰种白兔10只,体重2.0±0.2kg,南京中医药大学实验动物中心提供。
(3)方法:将实验动物随机分为两组,每组5只。将本发明的凝胶剂1ml注入给药组动物阴道中,对照组给予同体积的蒸馏水,每日一次,连续给药7天,观 察局部及全身反应,于末次给药后24小时后处死动物,取出阴道组织,进行外观及病理组织学检查。
(4)结果:给药后的两组动物未见有异常的全身性反应,外阴部无充血、红肿等现象,阴道组织及粘膜呈粉红色或淡紫色,未见有充血、红肿等刺激反应。组织切片镜下观察,未见凝胶剂组与空白对照组有病理改变,试验表明,本发明的中药凝胶剂基质对阴道粘膜无不良刺激。
1.3皮肤过敏试验
(1)药物:按制备实施例1制成的凝胶剂。
(2)动物:白色豚鼠30只,雌雄各半,体重250-300g,由南京中医药大学实验动物中心提供。
(3)阳性致敏物:2,4-二硝基氯化苯(化学纯)。配制成1%的致敏浓度和0.1%的激发浓度备用。
(4)方法:将实验动物随机分为三组,分别为本发明的中药凝胶剂组、蒸馏水空白组、阳性致敏组,每组10只。实验前24小时仔细剪去豚鼠背部两侧的毛,每侧去毛区约3×3cm。实验时,按皮肤涂抹法给药,各组分别涂抹药液于动物背部左侧脱毛区,一日两次(每次涂0.2ml,给药间隔3小时),试验第7天和第14天以同样方法重复给药。第28天激发给药,将三种受试物(阳性用0.1%的2,4-二硝基氯化苯溶液)0.2ml涂抹于动物背部右侧脱毛区。6小时后洗去受试物,即刻观察,然后分别于24小时、48小时、72小时再次观察皮肤过敏反应情况。
(5)结果:按《新药临床前研究指导原则汇编》中“皮肤过敏反应评分标准”评分,并评价致敏程度。结果见下表:
本发明中药凝胶剂基质对豚鼠皮肤过敏的影响
由试验可见,阳性药2,4-二硝基氯化苯组动物皮肤受试区自激发给药6小时后 有明显轻度红斑出现,水肿不明显,个别动物出现明显轻度皮肤损伤,72小时后红斑好转,但皮肤损伤未完全恢复,致敏率100%。本发明的凝胶剂组动物皮肤受试区自激发给药6-72小时未出现红斑及水肿,与空白对照组无差异,可见本发明的中药凝胶剂基质不产生致敏作用。
Claims (4)
1.一种黄蜀葵中提取胶质作为中药凝胶剂基质的应用,其特征是:从黄蜀葵植株中提取黄蜀葵胶质,用作中药凝胶剂基质。
2.根据权利要求1所述的黄蜀葵中提取胶质作为中药凝胶剂基质的应用,其特征是:黄蜀葵植株来自黄蜀葵采摘完花瓣后剩余的根、茎、叶器官中的一种或几种组合。
3.一种黄蜀葵胶质的制备方法,其特征是:以新鲜黄蜀葵植株为原料,将新鲜黄蜀葵根、茎、叶切碎、匀浆,加入相当于黄蜀葵原料10倍重量的蒸镏水, 50-70℃保温浸泡8小时,并不断搅拌,离心除去不溶性的成分;将可溶性成分以40目筛过滤后,加入乙醇至药液含醇量达30%~45%重量比,进行沉淀;离心收集沉淀,沉淀经过真空干燥,得到黄褐色的黄蜀葵粗胶质;进一步精制,将沉淀溶解于适量体积的冷水中,在15~20倍体积的蒸馏水中透析2天,每天换液3~4次,然后冷冻干燥;冷冻干燥后的粗多糖溶于蒸馏水后,用鞣酸除蛋白,再分别用重量比15%~20% H2O2和0.5%~1%活性炭脱色,浓缩后再上样于微晶纤维素柱,用蒸馏水洗脱,浓缩洗脱液,再用体积比1∶4的水-乙醇溶液重结晶,干燥得白色粉末状的精制品即为黄蜀葵胶质。
4.一种黄蜀葵胶质的制备方法,其特征是:以干燥黄蜀葵植株为原料,将干燥的黄蜀葵根、茎、叶原料切成小段,加入相当于药材8倍重量的蒸镏水, 50-70℃保温浸泡8小时,并不断搅拌,过40目筛,得第一次药液;将滤出药渣加分别以5倍量水, 60°保温浸泡4小时,过40目筛,得第二次滤液;合并两次滤液,加入乙醇至药液含醇量达30%~45%重量比,进行沉淀;离心收集沉淀,沉淀经过真空干燥,得到黄褐色的黄秋葵粗胶质;进一步精制,将沉淀溶解于适量体积的冷水中,在15~20倍体积的蒸馏水中透析2天,每天换液3~4次,然后冷冻干燥;冷冻干燥后的粗多糖溶于蒸馏水后,用鞣酸除蛋白,再分别用重量比15%~20% H2O2和0.5%~1%活性炭脱色,浓缩后再上样于微晶纤维素柱,用蒸馏水洗脱,浓缩洗脱液,再用体积比1∶4水-乙醇溶液重结晶,干燥得白色粉末状的精制品即为黄蜀葵胶。
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