JP2019533717A - 子宮頸管粘液の代用品としてのオクラ抽出物 - Google Patents
子宮頸管粘液の代用品としてのオクラ抽出物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019533717A JP2019533717A JP2019535201A JP2019535201A JP2019533717A JP 2019533717 A JP2019533717 A JP 2019533717A JP 2019535201 A JP2019535201 A JP 2019535201A JP 2019535201 A JP2019535201 A JP 2019535201A JP 2019533717 A JP2019533717 A JP 2019533717A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- mucus
- sperm
- extract
- mol
- fruit
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
- A01N1/0221—Freeze-process protecting agents, i.e. substances protecting cells from effects of the physical process, e.g. cryoprotectants, osmolarity regulators like oncotic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
- A61B17/42—Gynaecological or obstetrical instruments or methods
- A61B17/425—Gynaecological or obstetrical instruments or methods for reproduction or fertilisation
- A61B17/43—Gynaecological or obstetrical instruments or methods for reproduction or fertilisation for artificial insemination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F6/00—Contraceptive devices; Pessaries; Applicators therefor
- A61F6/02—Contraceptive devices; Pessaries; Applicators therefor for use by males
- A61F6/04—Condoms, sheaths or the like, e.g. combined with devices protecting against contagion
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0034—Urogenital system, e.g. vagina, uterus, cervix, penis, scrotum, urethra, bladder; Personal lubricants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0608—Germ cells
- C12N5/061—Sperm cells, spermatogonia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Surgery (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
Abstract
Description
別段の定義がなければ、本明細書で使用される全ての用語(科学技術用語など)は、本開示の技術分野の当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有する。一般に使用される辞典において定義されるような用語は、本明細書の文脈における意味と整合する意味を有するものとして解釈されるべきであり、本明細書で明示的にそのように定義されない限り、理想化されたまたは過度に形式的な意味で解釈されるべきではないことがさらに理解されるであろう。周知の機能または構造は、簡潔性または明確性のために詳細に記載されないことがある。
A.エスクレンツス(本明細書では、その一般的名称であるオクラと称する)の果実の粘液抽出物から作られた人工的なCFが提供される。CFそれ自体と同様に、抽出物には、性的潤滑剤、精子貯蔵培地、補助された生殖手順用の培地、精子透過試験の培地、および抗菌剤などの、生殖および性に関する多くの用途がある。
上記の人工的なCFには、精子用の凍結保存培地としての用途がある。凍結保存培地は、上記の人工的なCFの任意の実施形態を含み、かつ複数の精子をさらに含み得る。培地はまた、グリセロール、クエン酸塩、卵黄、および抗菌剤などの1つまたは複数の成分などの、いくつもの有用な凍結保存用成分のいずれかも含み得る。冷凍時に細胞の生存能力を保護するために、当該技術分野において公知の任意の濃度でグリセロールが存在してもよく、そのような濃度の例としては、約5〜25%v/v、より具体的には、約10〜20%v/v、12%v/v、および15%v/vが挙げられる。クエン酸塩および卵黄を使用してグリセロールの透過の間の細胞への浸透圧ストレスを低減させることができる。抗生物質を使用して試料の微生物汚染の可能性を低減させることができる。そのような成分は、組成物の残余を人工的なCFとした、標準的なグリセロールおよびグリセロール−卵黄凍結保存剤において使用される濃度で使用することができる。
抽出物および凍結保存培地を使用する様々な方法が提供される。
オクラ粘液を透過する能力を測定することによって精子の運動性を測定する試験が提供される。試験は、精液試料を粘液のオクラ抽出物に接触させること、ある期間にわたっておおよそ生理的な温度で試料をインキュベートすること、および精液試料が導入された場所からの先頭の精子の距離を測定することを含む。試験は、ガラススライドとカバーガラスとの境界面によって形成された表面などのガラス表面上で実行することができる。精子を閉じ込めるための経路または「トラック」を形成してもよく、それにより、集団が移動した距離の容易な測定が増進される。インキュベーション条件は、精子運動性試験の間に典型的に使用される任意のものであってよく、特定の実施形態では、インキュベーションは、空気とCO2との5%v/vの混合物下、37℃で実行される。精液試料は、基準距離に基づいて正常な運動性または正常以下の運動性として分類することができる。基準距離は、試験時に対象試料を使用することによって確立されてもよいし、または、以前に確立された標準基準を使用してもよい。精液試料の分類は、中心傾向の測定およびばらつきの測定を組み込んだ統計試験にしたがって行うことができ、そのような試験としては、スチューデントのt検定、分散分析、および信頼限界が挙げられる。
コーティングされたコンドームが提供され、該コーティングされたコンドームは、該コンドームを少なくとも部分的にコーティングするために充分な量の上記の抽出物の任意の実施形態と接触したコンドームを含む。コンドームの一部の実施形態は、抽出物によって完全にコーティングされている。コンドームのさらなる実施形態は、少なくともその外側表面が抽出物でコーティングされている。コンドームは、当該技術分野において好適なものとして公知の任意の材料、例えば、ラテックス、ポリウレタン、ポリイソプレン、羊腸、およびニトリルゴムで構築され得る。
生存可能な精子を収集するための装置が提供され、該装置は、精液容器、および、精液容器に接続された、または液体連通した、中空の細長い導管を含み、中空の細長い導管は、上記の抽出物の任意の実施形態を含有することを意図するものである。複数の精子を含有する試料を精液容器中に入れ、運動性精子が抽出物を透過するために充分な期間にわたって抽出物と接触したままにする。下記の実施例においてより詳細に説明するように、抽出物は、形態的に正常かつ運動性の精子に対して選択的に透過性であることが観察されている。
8”×8”のアルミニウム箔シートを70%エタノールで滅菌し、KIMWIPESなどのタスクワイプで拭いて乾燥させた。6個のオクラ果実を穏やかな石鹸溶液で充分に洗浄した後、水道水(5×500mL)、その後にDI水(1×500mL)で充分にすすぎ、70%エタノール中に予め浸したタスクワイプで拭いて滅菌した。オクラ果実上のエタノールフィルムを乾燥させた後(15〜20分)、果実を滅菌されたアルミニウム箔上に置き、滅菌された外科用メスの刃を用いてオクラのスライス(1〜2mm)を調製した。10グラムのスライスしたオクラ果実部分を、15、20、または25mLのHTF重炭酸溶液(0.5%のヒト血清アルブミンを含有する緩衝化ヒト卵管液[HTF]中の25mMのNa2CO3)を含有する3つの50mL遠心チューブのそれぞれに入れた。抽出チューブを組織ロッカー/シェーカーで4℃で4時間にわたって振とうした。各抽出遠心分離チューブを反転させ、底部を70%エタノールワイプで滅菌した。予備加熱した18G針を使用して、約1.0mmの孔径(液体が抜けるのを可能とするために充分に大きいが、オクラ種子が抜けるのを防止するために充分に小さい−図1A)の小穴をチューブの底部の中心に作った。各抽出チューブをキャップを外した別の50mL遠心分離チューブの上で反転させた(キャップ側が上)(図1B)。抽出チューブのキャップを緩めて、透明な抽出されたオクラ粘液が重力により収集チューブ中に落ちるようにした(図1C)。抽出された粘液は透明であり、クロロフィル色素を欠いていた。
本出願において使用した精子透過試験プロトコールは上掲のTangら(1999年)の改変方法である。別段の特定がなければ、全ての培地は37℃に予備平衡化した。長さ75mmおよび内径1.1mmの非処理Kimble円形横断面キャピラリーチューブ(Fisher Scientific、PA)を使用した。キャピラリーの下端部をA.エスクレンツス粘液(100μL)または同等の体積の対照培地(5%ヒト血清アルブミンを含有する重炭酸緩衝化HTF)に浸しながら上端部に取り付けた1mLのツベルクリンシリンジおよびプラスチックチューブを使用した吸引によって各チューブを充填した。カラム内に空気の泡が入り込まないように注意しながら、上メニスカスがチューブの最上部から1〜2cmとなるようにA.エスクレンツス粘液または対照培地の約6.0cmのカラムをチューブ中に吸引した。各チューブの最上部をPLASTICINEなどの粘土で密封し、任意の垂れ下がった培地を下端部から切り離して平らな境界面を作った。約100μLの液化された精液を小さいコニカルプラスチックチューブの底部に置き、そしてA.エスクレンツス粘液または対照培地を含有するキャピラリーチューブをその開端部と共に精液中に入れた。異なるドナーからの精液試料を用いてこの調製を5回繰り返した。WHOのマニュアル(WHO、1999年)に実証される通りに、2つの精液リザーバおよびキャピラリーチューブを顕微鏡のスライドに取り付けた。次いで、スライドをペトリ皿中に置き、加湿空気中5% CO2の雰囲気下37℃で60分間水平の配置でインキュベートした。
粘液抽出物中の約10μLの分離された運動性精子を、0.5%のヒト血清アルブミン(HSA)および20mMのHEPESを含有する190μLのヒト卵管液(HTF)培地(HTF−HEPES;pH、7.4)中に希釈した各キャピラリーチューブから取り出し、結果として得られた溶液の滴を顕微鏡のスライド上に置いた。位相差顕微鏡を用いて精子運動性のパーセンテージを手動で定量化した。精子は、ある点から別の点へと直線状に動いた場合に前進運動性であると考えた。異なる視野中の100個の細胞に対して実験用カウンターを用いて有資格の臨床男性病学者によって各試料について2回、前進運動性の精子のパーセンテージを決定し、平均化した。2回のカウントのそれぞれが10%異なっていない場合、カウントは正確であると認めた。0〜4の尺度での運動のグレードを主観的に決定した。対照の場合(それぞれ2.5〜3.0、47.7%)と比較した、粘液抽出物を透過した精子のグレードおよび前進運動性のパーセンテージはそれぞれ3.5〜4.0および86.8%であった。生殖力の評価を受けている患者(N=5)からの精子を使用して上記手順を実行し、彼らの精子が粘液抽出物を透過するかどうかを判定した。図5は、粘液抽出物を透過しなかった非生殖性患者からの精子を示す。これらのデータは、粘液抽出物が精子の機能を試験するためにCFを代用できることを示唆する。
有資格の臨床男性病学者によって、粘液抽出物中の精子の精子形態評価を実行した。ヒト精子およびマッチさせた精液(対照;N=5/群)を含有するそれぞれ約10μLの非希釈の粘液抽出物の羽状(Feathered)の塗抹標本をエタノールで洗浄したガラススライド上に調製し、ダストフリーのチャンバー中で乾燥させた。その後に、塗抹標本を固定し、改変したパパニコロウ染色キット(Spermac、Stain Enterprises、南アフリカ)中の試薬を製造者の説明書にしたがって用いて染色し、スケーラーを備えた位相差顕微鏡を用い、クルーガー厳密判定基準(Kruger strict criteria)を使用して精子の形態を評価した。頭部が滑らかな楕円形状を有し、頭部の面積の約40〜70%を構成する明瞭な先体を有する場合に、精子は正常であると考えた。形態的に、正常であると考えられるためには、精子頭部は5.0〜6.0μMの長さおよび2.5〜3.5μMの幅でなければならない。加えて、精子は、頸部、中片部、または尾部の欠陥がなく、かつ頭部の大きさの半分より大きい細胞質小滴が無い場合に正常であると考えた。どちらとも言えない形態の全ての精子を異常であると考えた。スライドを図3に示す。粘液抽出物試料中の正常な形態の精子の平均パーセンテージは、精液試料(対照;図4を参照)中よりもはるかに大きい。
方法
オクラ粘液の抽出:新鮮なオクラを当地の食料雑貨店で購入し、上記の通りに粘液を抽出した。
予備冷凍期間(PF)の間、塩基性冷凍緩衝液(対照;PF対照;FB)中で冷却した精子は、オクラ粘液を添加した冷却した塩基性冷凍緩衝液(PF OK)中または未加工精液(RS)中の精子と比べて運動性の平均パーセンテージの有意な低減を持続させた(p<0.02)。さらに、塩基性冷凍緩衝液へのオクラ粘液の添加は、RSにおいて観察されたものと類似の運動性比率のパーセンテージを維持した。(異なる上の文字を有するグラフは統計的に異なる;図7;異なる上の文字を有するグラフは統計的に異なる)。抽出されたアベルモスクス・エスクレンツス粘液(EAEM)中でのヒト精液の冷凍は、FBと比べて解凍後の運動性精子集団のパーセンテージを増加させた(P<0.03;図8;異なる上の文字を有するグラフは統計的に異なる)。図9は、冷凍および解凍された精子の顕微鏡像を示す。
オクラ粘液が精子透過を測定するための効果的な培地として機能するかどうかを判定するための試験を実行した。顕微鏡のスライドを70%エタノールで洗浄し、タスクワイプで充分に拭いて乾燥させた。その後に、両面テープを透明なガラススライドに適用し、約50×2mmを覆わないままにして長手方向のストリップとした(「精子ローン」(sperm lawn))。その後にカバーガラスを適用し、穏やかに押して空気の泡を取り除き、カバーガラスを堅固に固定した。その後、上記の通りに抽出したオクラ粘液をガラススライドの10°の角度の覆われていない側に安定的に適用して、空気の泡なしで粘液が精子ローンに進入するのを可能にした。粘液を載せたスライドを100×20mmのFALCON式のポリスチレン非発熱性ペトリ皿(Corning,Inc.、Corning、NY)に置き、37℃および5.0% CO2の雰囲気の加湿インキュベーター中に約45分置いて、粘液が動かないようにした(定常状態の獲得)。その後に、カバーガラスの縁部のすぐ手前に、10μLの精液を注意深くオクラ粘液中に置き、上記の通りに30分間インキュベートした。インキュベーション後、調製物を200倍の倍率での位相差顕微鏡観察に供して、粘液の精子透過性、指骨(2つの物質間の境界面を作る、オクラ粘液中への精液の指状突起)の形成、および載せたゾーンからの精子ローンでの移動距離について観察した。
本発明の開示された実施形態の任意の所与の要素は、単一の構造、単一のステップ、単一の物質などにおいて具現化してもよいことが理解されるべきである。同様に、開示された実施形態の所与の要素は、複数の構造、ステップ、物質などにおいて具現化してもよい。
Claims (38)
- アベルモスクス・エスクレンツスの果実の粘液抽出物を製造する方法であって、(a)水性培地中でA.エスクレンツスの果実を抽出して、第1の抽出物を製造すること、(b)前記第1の抽出物から実質的に透明な粘液を分離すること、および(c)前記第1の抽出物を約1mmまたはそれ未満の有効孔径を有する1つまたは複数の孔で濾すことを含む、方法。
- (a)水性培地中でA.エスクレンツスの果実を抽出して、第1の抽出物を製造すること、(b)前記第1の抽出物から実質的に透明な粘液を分離することという方法の製造物であるアベルモスクス・エスクレンツスの果実の粘液抽出物であって、前記実質的に透明な粘液が、以下の特性:本明細書に開示される試験にしたがって測定された時に少なくとも約10cmの牽糸性であること、シダ試験に供された時にシダ状化を示すこと、および子宮頸管粘液の代わりに前記透明な粘液を使用する精子粘液透過試験に精液試料を供した時に、前記透明な粘液を透過する精子が前記精液試料中の精子よりも有意に良好な生殖力を指し示すことの少なくとも1つを有する、粘液抽出物。
- 前記実質的に透明な粘液が、本明細書に開示される試験にしたがって測定された時に少なくとも約10cmの牽糸性であること、シダ試験に供された時にシダ状化を示すこと、可視性の緑色の呈色を欠くこと、および子宮頸管粘液の代わりに前記透明粘液を使用する精子粘液透過試験に精液試料を供した時に、前記透明粘液を透過する精子が前記精液試料中の精子よりも有意に良好な生殖力を指し示すことの全ての特性を有する、請求項2に記載の粘液抽出物。
- 前記抽出することが、前記水性培地中でA.エスクレンツスの前記果実を煮沸することを含む、請求項1〜2のいずれか1項。
- 前記抽出することが、A.エスクレンツスの前記果実を前記水性培地と約4℃の温度で約4時間接触させることを含む、請求項1〜2のいずれか1項。
- 前記水性培地が、重炭酸緩衝化ヒト卵管液を含む、請求項1〜2のいずれか1項。
- 前記水性培地が、重炭酸緩衝化ヒト卵管液および哺乳動物の血清アルブミンを含む、請求項1〜2のいずれか1項。
- アベルモスクス・エスクレンツスの果実の粘液抽出物および複数の精子を含む、精子用の貯蔵培地。
- 24時間の冷凍後に40%より高い精子運動性を維持するために効果的な濃度の凍結保存剤を含む、請求項8に記載の貯蔵培地。
- 24時間の冷凍後に40%より高い精子運動性を維持するために効果的な濃度の、グリセロール、クエン酸塩、および卵黄からなる群から選択される凍結保存剤を含む、請求項8に記載の貯蔵培地。
- 約5〜25%v/vのグリセロールを含む、請求項8に記載の貯蔵培地。
- 約10〜20%v/vのグリセロールを含む、請求項8に記載の貯蔵培地。
- 12〜15%v/vのグリセロールを含む、請求項8に記載の貯蔵培地。
- 抗菌剤を含む、請求項8に記載の貯蔵培地。
- 微生物汚染の可能性を低減させるために効果的な濃度のゲンタマイシンを含む、請求項8に記載の貯蔵培地。
- 重炭酸緩衝化HTF培地を含む、請求項8に記載の貯蔵培地。
- 精液、重炭酸緩衝化HTF培地、凍結保存に効果的な濃度のグリセロール、卵黄、および、微生物汚染の可能性を低減させるために効果的な濃度のゲンタマイシンをさらに含む、請求項8に記載の貯蔵培地。
- 前記貯蔵培地が凍結保存培地である、請求項8に記載の貯蔵培地。
- 請求項8に記載の貯蔵培地を冷凍することを含む、精子を保存する方法。
- コンドームを少なくとも部分的にコーティングするために充分な量のアベルモスクス・エスクレンツスの果実の粘液抽出物と接触した前記コンドームを含む、コーティングされたコンドーム。
- 対象に精子の懸濁液を注入することを含み、前記懸濁液が、アベルモスクス・エスクレンツスの果実の粘液抽出物およびその中に懸濁された複数の精子を含む、人工授精の方法。
- 精子粘液透過試験において、アベルモスクス・エスクレンツスの果実の粘液抽出物によって子宮頸管粘液を代用するという改良。
- アベルモスクス・エスクレンツスの果実の粘液抽出物を対象の膣に塗布することを含む、人工的な膣潤滑性を提供する方法。
- 精液から精子を単離する方法であって、(a)精液試料をアベルモスクス・エスクレンツスの果実の粘液抽出物と接触させること、(b)充分な期間にわたって前記精液試料中の複数の精子によって前記抽出物を透過させて、精子/抽出物の懸濁液を作製すること、および(c)前記精子/抽出物の懸濁液を前記精液試料から分離することを含む、方法。
- 前記粘液抽出物が、(a)水性培地中でA.エスクレンツスの果実を抽出して、第1の抽出物を製造すること、および(b)前記第1の抽出物から実質的に透明な粘液を分離することを含む方法の製造物である、請求項8〜24のいずれか1項。
- 前記粘液抽出物が、以下の特性:本明細書に開示される試験にしたがって測定された時に少なくとも約10cmの牽糸性であること、シダ試験に供された時にシダ状化を示すこと、可視性の緑色の呈色を欠くこと、および子宮頸管粘液の代わりに透明な粘液を使用する精子粘液透過試験に精液試料を供した時に、前記透明な粘液を透過する精子が前記精液試料中の精子よりも有意に良好な生殖力を指し示すことの少なくとも1つを有する、請求項1〜2、および8〜24のいずれか1項。
- 前記有意に良好な生殖力を指し示すことが、正常な形態の比率が有意により高いことである、請求項26に記載の主題。
- 前記有意に良好な生殖力を指し示すことが、前進運動性の比率が有意により高いことである、請求項26に記載の主題。
- 前記有意に良好な生殖力を指し示すことが、運動性のグレードが有意により高いことである、請求項26に記載の主題。
- 前記方法が、前記第1の抽出物を約1mmまたはそれ未満の有効孔径を有する1つまたは複数の孔で濾すことを含む、請求項25に記載の主題。
- 前記水性培地が、重炭酸緩衝化ヒト卵管液を含む、請求項25に記載の主題。
- 前記水性培地が、
(a)重炭酸緩衝化ヒト卵管液、および
(b)ウシ血清アルブミンおよびヒト血清アルブミンの少なくとも1つ
を含む、請求項25に記載の主題。 - 前記粘液抽出物が複数の多糖を含み、かつ、前記抽出物が、前記多糖を加水分解した時に、少なくとも10%mol/molのガラクトース、ウロン酸、およびタンパク質である、請求項1〜2および8〜24のいずれか1項に記載の主題。
- 前記粘液抽出物が複数の多糖を含み、かつ、前記抽出物が、前記多糖を加水分解した時に、7〜28%mol/molのラムノース、12〜50%mol/molのガラクトース、14〜56%mol/molのウロン酸、および12〜48%mol/molのタンパク質を含む、請求項1〜2および8〜24のいずれか1項に記載の主題。
- 前記粘液抽出物が複数の多糖を含み、かつ、前記抽出物が、前記多糖を加水分解した時に、11.0〜16.6%mol/molのラムノース、19.8〜29.6%mol/molのガラクトース、22.8〜34.2%mol/molのウロン酸、および19.0〜28.4%mol/molのタンパク質を含む、請求項1〜2および8〜24のいずれか1項に記載の主題。
- 前記粘液抽出物が複数の多糖を含み、かつ、前記抽出物が、前記多糖を加水分解した時に、13.8%mol/molのラムノース、24.7%mol/molのガラクトース、28.5%mol/molのウロン酸、および23.7%mol/molのタンパク質を含む、請求項1〜2および8〜24のいずれか1項に記載の主題。
- 前記粘液抽出物が、図6A、図6B、図6C、および図6Dに示される群から選択される多糖を含む、請求項1〜2および8〜24のいずれか1項に記載の主題。
- 前記粘液抽出物が、図6A、図6B、図6C、および図6Dに示される4つの多糖を含む、請求項1〜2および8〜24のいずれか1項に記載の主題。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662393932P | 2016-09-13 | 2016-09-13 | |
US62/393,932 | 2016-09-13 | ||
PCT/US2017/050978 WO2018052848A1 (en) | 2016-09-13 | 2017-09-11 | Okra extract as a substitute for cervical mucus |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019533717A true JP2019533717A (ja) | 2019-11-21 |
JP7194441B2 JP7194441B2 (ja) | 2022-12-22 |
Family
ID=61619721
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019535201A Active JP7194441B2 (ja) | 2016-09-13 | 2017-09-11 | 子宮頸管粘液の代用品としてのオクラ抽出物 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11241466B2 (ja) |
EP (1) | EP3512534A4 (ja) |
JP (1) | JP7194441B2 (ja) |
WO (1) | WO2018052848A1 (ja) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3512534A4 (en) | 2016-09-13 | 2020-04-15 | Meharry Medical College | EXTRACT OF OKRA AS A SUBSTITUTE FOR CERVICAL MUCLE |
CN110467741A (zh) * | 2018-04-20 | 2019-11-19 | 中科艾玛科技成都有限公司 | 一种亲水超滑的避孕套 |
CN109053925B (zh) * | 2018-08-13 | 2021-01-15 | 合肥工业大学 | 一种碱性黄秋葵多糖的分离提取方法及其用途 |
EP3852777A4 (en) * | 2018-09-21 | 2022-06-29 | Meharry Medical College | Okra-derived antiviral composition and uses thereof |
US20200263128A1 (en) * | 2019-02-15 | 2020-08-20 | Michael C. Doody | In Vitro Fertilization Media with Antiviral Medicine |
CN110393692B (zh) * | 2019-09-04 | 2023-03-31 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 拉丝植物增稠剂及其制备方法和应用 |
AU2022309285A1 (en) * | 2021-07-16 | 2024-02-01 | Lifestyles Healthcare Pte. Ltd. | Long-lasting lubrication composition |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1854812A1 (en) * | 2006-05-10 | 2007-11-14 | Bohus Bio Tech AB | Pectic polysaccharides isolated from fruit pods of okra |
US8202558B2 (en) * | 2005-04-05 | 2012-06-19 | Membrane Protective Technologies, Inc. | Reproductive cell function preservation system |
CN102526754A (zh) * | 2011-12-19 | 2012-07-04 | 段金廒 | 从黄蜀葵中提取胶质作为中药凝胶剂基质的应用 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3506286B2 (ja) * | 1995-06-01 | 2004-03-15 | 義雄 中島 | 潤滑液 |
MY119235A (en) * | 2000-12-21 | 2005-04-30 | Matang Mfg Sdn Bhd | Aloe vera impregnated elastomeric article and method of manufacture |
FR2818652B1 (fr) | 2000-12-22 | 2004-09-10 | Ct D Etudes Sur Le Recyclage D | Copolymeres a base d'olefines greffes et procede d'obtention |
CN102688265A (zh) | 2012-06-13 | 2012-09-26 | 浙江农林大学 | 一种含黄秋葵的抗病毒颗粒型冲剂 |
CN105497572A (zh) | 2014-10-11 | 2016-04-20 | 栾晓明 | 一种洁阴卫生洗液 |
CN104983616B (zh) * | 2015-06-26 | 2018-09-25 | 东方福尚福养生有限公司 | 一种人体润滑液及其制备方法 |
US10117826B2 (en) * | 2016-03-31 | 2018-11-06 | Peter Angia Pham | Bodily lubricating and moisturizing compositions containing plant mucilage |
EP3512534A4 (en) | 2016-09-13 | 2020-04-15 | Meharry Medical College | EXTRACT OF OKRA AS A SUBSTITUTE FOR CERVICAL MUCLE |
-
2017
- 2017-09-11 EP EP17851373.5A patent/EP3512534A4/en active Pending
- 2017-09-11 WO PCT/US2017/050978 patent/WO2018052848A1/en unknown
- 2017-09-11 JP JP2019535201A patent/JP7194441B2/ja active Active
-
2019
- 2019-03-06 US US16/294,839 patent/US11241466B2/en active Active
-
2021
- 2021-12-28 US US17/563,350 patent/US11986504B2/en active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8202558B2 (en) * | 2005-04-05 | 2012-06-19 | Membrane Protective Technologies, Inc. | Reproductive cell function preservation system |
EP1854812A1 (en) * | 2006-05-10 | 2007-11-14 | Bohus Bio Tech AB | Pectic polysaccharides isolated from fruit pods of okra |
CN102526754A (zh) * | 2011-12-19 | 2012-07-04 | 段金廒 | 从黄蜀葵中提取胶质作为中药凝胶剂基质的应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20190201464A1 (en) | 2019-07-04 |
US11241466B2 (en) | 2022-02-08 |
JP7194441B2 (ja) | 2022-12-22 |
EP3512534A1 (en) | 2019-07-24 |
US11986504B2 (en) | 2024-05-21 |
EP3512534A4 (en) | 2020-04-15 |
US20220193166A1 (en) | 2022-06-23 |
WO2018052848A1 (en) | 2018-03-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11986504B2 (en) | Okra as a substitute for cervical mucus | |
JP4421681B2 (ja) | 生殖細胞および胚の生存および機能を改善する方法および組成物 | |
Yusoff et al. | Effect of seminal plasma removal, washing solutions, and centrifugation regimes on Boer goat semen cryopreservation | |
Robert et al. | Collection and evaluation of canine semen-a review | |
EP2651424B1 (en) | Reproductive cell maintenance system | |
de Freitas Guaitolini et al. | Post-thaw viability of in vivo-produced canine blastocysts cryopreserved by slow freezing | |
CN105519521B (zh) | 一种马精液冷冻保存液及其配制方法 | |
KR20140137753A (ko) | 글루코오스를 포함하는 개 정액 동결용 희석액 | |
Kumaresan et al. | The effect of oviductal fluid on protein tyrosine phosphorylation in cryopreserved boar spermatozoa differs with the freezing method | |
Kuzan et al. | Cryopreservation of mammalian embryos | |
WO2003022046A1 (en) | Method for cryopreserving mammalian cells and tissues | |
Sonar et al. | Characteristics and freezability of Gir bull semen | |
García-Vázquez et al. | Reproductive Biotechnologies Applied to Artificial Insemination in Swine | |
Raseona | Comparative evaluation of different extenders of bull semen stored under different conditions | |
Mann et al. | Collection, examination, quality rating and storage of ejaculated semen | |
Kalobo | Presevation of boer goat semen in liquid nitrogen vapour in comparison to the conventional freezing method using different extenders, freezing and thawing regimes | |
Borges | Comparison of canine sperm quality under different temperature storage | |
Miranda | Semen cryopreservation as a tool for preserving genetic biodiversity of avian and rabbit species: National cryobank launch | |
EP0987941B1 (fr) | Perfectionnement aux procedes de preparation d'embryons d'equides en vue de leur cryoconservation | |
Sathananthan | Microscopic Images of Human Sperm, Oocytes and Embryos for Assisted Reproductive Technology Including Embryonic Stem Cells:(multi-Author) | |
Selwood | Culture of Marsupial Oocytes and Conceptuses | |
Van den Berghe et al. | Improved sperm freezing in the endangered African wild dog (Lycaon pictus) using a two-step dilution TRIS-egg yolk extender containing Equex STM | |
Pankaj et al. | Critical control points at the level of collection, processing and preservation of Sahiwal bull semen | |
CA3113637A1 (en) | Okra-derived antiviral composition and uses thereof | |
Hoogewijs | Automated and standardized analysis of equine semen and influences of centrifugation on equine semen preservation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190924 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200904 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210817 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211117 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20220208 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220601 |
|
C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20220601 |
|
C11 | Written invitation by the commissioner to file amendments |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C11 Effective date: 20220621 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20220926 |
|
C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20221004 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20221129 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20221205 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7194441 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |