CN108635300A - 一种含有小分子石斛多糖的化妆品及制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含有小分子石斛多糖的化妆品及制备方法及应用。所述制剂的主药含有经过水解得到的小分子石斛多糖。所述小分子石斛多糖的分子量范围为25‑75KDa。所述小分子多糖可通过酸水解或酶水解来制备，其中以酶水解所得产物疗效更佳，具有显著抗皱和抗黄褐斑的疗效。所述制剂的配方为：所述小分子石斛多糖15g、甘油硬脂酸酯10克、甘油50ml、纯水850毫升。本发明意外地发现：未水解石斛多糖组对于皮肤皱纹和黄褐斑而言，会对症状产生加重；而石斛多糖经过水解后制备得到的小分子石斛多糖才有显著的治疗作用。

Description

一种含有小分子石斛多糖的化妆品及制备方法与应用

技术领域

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种用于抗皱、祛斑的含有小分子石斛多糖的化妆品其制备方法及应用。

背景技术

皱纹是指皮肤受到外界环境影响，形成游离自由基，自由基破坏正常细胞膜组织内的胶原蛋白、活性物质，氧化细胞而形成的小细纹、皱纹。皱纹渐渐出现。出现的顺序一般是前额、上下眼睑、眼外眦、耳前区、颊、颈部、下颏、口周。

产生皱纹的原因主要分两大类：内因老化(自然老化)和外因老化(光老化及吸烟、酗酒、不良饮食等)。一般认为，手臂内侧的皮肤基本反映了自然老化的进度；如果脸上的皮肤比手臂内侧皮肤糟糕，出现肤色不均、松弛起皱等，都是外因老化带来的，尤其是防晒不足带来的光老化，占了80％以上。常见的祛皱方法不外乎整形手术、注射祛皱、医学美容、护肤美容品几个大类。

面部黄褐斑是面部黑变病的一种症状，是发生在颜面的色素沉着斑。面部黄褐斑形成的原因主要是因内分泌失调，精神压力大，各种疾病(肝肾功能不全，妇科病、糖尿病)等以及体内缺少维生素及外用化学药物刺激引起。

石斛为兰科植物石斛的干燥茎，具有“滋阴清热，益胃生津”之功效，民间素有“救命仙草”之称，成书于一千多年前的《道藏》尊其为“中华九大仙草”之首。石斛药用历史悠久，早在秦汉时期的《神农本草经》就有“主伤中，除痹，下气，补五脏虚劳羸瘦，强阴，久服厚肠胃”的记载。其中特别是铁皮石斛，由于其滋阴补益作用，铁皮石斛更是被视为石斛中的珍品，2010年版《中国药典》将其从原来的石斛项下单列为一种药材。

石斛多糖的水解一般分为酸水解法和酶水解法。

酸水解法是降解植物多糖的传统方法。植物多糖在酸性溶液中不稳定，会发生糖苷键的断裂，形成聚合度不等的片段。通常采用硫酸、盐酸、三氯乙酸等来水解。盐酸水解法：盐酸是水解植物多糖的最常用的酸，一般是用浓盐酸在较高的温度下水解，降解得到低聚合度的寡糖。研究表明，盐酸浓度和温度越高，水解速度也越快。盐酸水解法虽然工艺简单易行，但较难控制，得到的寡糖主要为单糖和双糖，4糖以上的寡糖含量非常低。此外，该方法对环境的污染也相当严重。

酶水解法提取石斛多糖是近年来发展起来的一种新技术，一般是用纤维素酶处理石斛组织，加速细胞壁降解，促使多糖分子等有效成分释放。与其他提取石斛多糖的方法相比，酶法的操作条件比较温和，在一定程度上能够保护多糖的生物活性。此外，植物组织中的多糖一般会与蛋白质结合成糖蛋白，酶本质上是蛋白质，所以，酶法的利用可以大大提高石斛多糖的得率。范明才等研究了添加少量纤维素酶来提取铁皮石斛中的生物碱和多糖，在pH5.0，纤维素酶用量0.6％，温度50℃，酶水解时间90min下，生物碱的提取率为19％，多糖的提取率为0.35％。尚喜雨研究了水提法和酶法提取石斛多糖，并确定了两种方法的最好提取条件，在最优的条件下酶提取法要显著优于水提法，实验还发现，纤维素酶和木瓜蛋白酶联合起来使用比单独使用纤维素酶的效果更好。一般而言，所有的酶都有一个最适的pH，只有在最适pH附近酶才能发挥最大效应，所以，石斛多糖提取过程中酶水解pH对多糖得率有着很大的影响。

在石斛应用研究方面，特别是制备工艺研究方面，一般认为，未经过水解的石斛多糖分子结构具有更好的药理作用，但是本发明意外地发现：未水解的大分子石斛多糖对皮肤皱纹和黄褐斑非但没有改善作用，还一定程度会加重症状；而石斛多糖经过水解后制备得到的外用制剂对于皮肤皱纹和黄褐斑具有治疗作用。水解有两种水解方式：酸水解和酶水解。在这两种水解方法中，以酶水解得到的产物的缓解皮肤皱纹和祛黄褐斑效果更佳，具有显著性疗效。本发明的创造性在于突破了前人的技术偏见，采用一般认为疗效不好的水解石斛多糖反而取得了良好的治疗效果。

发明内容

针对现有技术中存在的不足，本发明提供一种含有疗效更好的含有小分子石斛多糖的化妆品及其制备方法与应用。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

一种含有小分子石斛多糖的化妆品，所述化妆品的主药含有经过水解得到的小分子石斛多糖，所述小分子石斛多糖的分子量范围为：25-75KDa之间。

所述小分子石斛多糖是采用石斛药材先经过提取制备得到未水解大分子石斛多糖，再经过酸水解或酶水解而来。

所述石斛药材为铁皮石斛。

所述未水解大分子石斛多糖的提取制备方法为：取石斛药材干品5000g，粉碎，加30倍水，加热煮沸提取2h，提取2次，离心得离心液，离心液浓缩至15L，加4倍体积乙醇，即总60L乙醇，醇沉析出多糖，离心得多糖沉淀，收集即得未水解大分子石斛多糖。

所述酸水解的方法具体为：取所述未水解大分子石斛多糖，加入1mol/L的盐酸，80℃水浴加热，保温1小时，再加NaOH溶液中和至中性，用透析膜，透析出NaCl，离心得多糖沉淀，即得酸水解的小分子石斛多糖。

所述酶水解的方法具体为：取所述未水解大分子石斛多糖，制成浓缩液，含量为相当于每1ml浓缩液含每1g石斛生药，调节溶液PH值为PH6左右，加入相当于石斛多糖含量1％的果胶酶和纤维素酶，两种酶比例为1∶1，对大分子多石斛糖进行酶水解，酶水解温度40℃左右、酶水解时间1.5h；酶水解结束，煮沸将酶灭活，离心，离心沉淀即得酶水解的小分子石斛多糖。

所述的化妆品可以为面霜、面膜、精华液、洗面奶等。

所述面霜的制备方法如下：将所述小分子石斛多糖15份、甘油硬脂酸酯10份、甘油50份、纯水850份均匀搅拌即得。

所述面膜的制备方法如下：将所述小分子石斛多糖15份、甘油10份、EDTA-2Na0.05份、丁二醇5份、红没药醇0.2份、吐温80为0.5份、纯水850份混合均匀，涂敷于无纺布上即得。

所述的化妆品的应用在于，可制备为抗皮肤衰老、抗皱、抗黄褐斑的化妆品的应用。

有益作用：本发明对三种为主药成分(没有经过水解的大分子石斛多糖、酸水解的小分子石斛多糖、酶水解的小分子石斛多糖)搭配适当辅料制备得到的化妆品进行了药效对比试验。实验发现：未水解的大分子石斛多糖对皮肤皱纹和黄褐斑非但没有改善作用，还一定程度会加重症状。但是经过水解的小分子石斛多糖却对皮肤皱纹和黄褐斑有显著性改善，其中以酶水解得到的小分子石斛多糖提取物为主药的化妆品疗效更佳。本发明的小分子石斛多糖化妆品制备方法简单易行、疗效可靠。

具体实施方式

下面将结合实施例，对本发明采用的方法进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

取同一批的石斛药材，进行不同的处理，制备样品，进行比较：

实施例1

制备未水解的大分子铁皮石斛多糖

取铁皮石斛干品5000g，粉碎，加30倍水，加热煮沸提取2h，提取2次，离心得离心液，离心液浓缩至15L，加4倍体积乙醇，即总60L乙醇，醇沉析出多糖，离心得多糖沉淀，收集即得未水解大分子铁皮石斛多糖。

实施例2：制备酸水解小分子铁皮石斛多糖

取部分实施例1制备的未水解大分子铁皮石斛多糖，加入1mol/L的盐酸，80℃水浴加热，保温1小时，再加NaOH溶液中和至中性，用透析膜，透析出NaCl，离心得多糖沉淀，即酸水解的小分子铁皮石斛多糖。用蒸发光散射检测器(ELSD)，测定的酸水解的小分子铁皮石斛多糖，分子量峰值为41.42KDa，分子量宽度为29.83-75.25KDa。

实施例3：制备酶水解小分子铁皮石斛多糖

取部分实施例1制备的未水解大分子铁皮石斛多糖，制成浓缩液(含量为相当于每1ml浓缩液含每1g铁皮石斛生药)调节溶液PH值为PH6左右，加入相当于铁皮石斛多糖含量1％的果胶酶和纤维素酶(1∶1)，对铁皮石斛多糖进行酶水解，酶水解温度40℃左右、酶水解时间1.5h。酶水解结束，煮沸将酶灭活，离心，离心沉淀即得酶水解的小分子铁皮石斛多糖。用蒸发光散射检测器(ELSD)，测定的酶水解的小分子铁皮石斛多糖，分子量峰值为34.37KDa，分子量宽度为24.83-49.25KDa。

实施例4：未水解的大分子铁皮石斛多糖面霜制备

配方：未水解铁皮石斛多糖28g(相当于100g生药量)、甘油硬脂酸酯10克、甘油50ml、纯水850毫升。

制备方法步骤：将实施例1所得的未水解铁皮石斛多糖、甘油硬脂酸酯、甘油、纯水置于干净的空瓶中，均匀搅拌即得。

实施例5：酸水解铁皮石斛多糖面霜制备

配方：酸水解铁皮石斛多糖15g(相当于100g生药量)、甘油硬脂酸酯10克、甘油50ml、纯水850毫升。

制备方法步骤：将实施例2所得的酸水解铁皮石斛多糖、甘油硬脂酸酯、甘油、纯水置于干净的空瓶中，均匀搅拌即得。

实施例6、酶水解铁皮石斛多糖面霜制备

配方：酶水解铁皮石斛多糖15g(相当于100g生药量)、甘油硬脂酸酯10克、甘油50ml、纯水850毫升。

制备方法步骤：将实施例3所得的酶水解铁皮石斛多糖、甘油硬脂酸酯、甘油、纯水置于干净的空瓶中，均匀搅拌即得。

实施例7、空白对照组面霜制备

配方：甘油硬脂酸酯10克、甘油50ml、纯水850毫升。

制备方法步骤：将甘油硬脂酸酯、甘油、纯水置于干净的空瓶中，均匀搅拌即得。

实施例8、小分子石斛多糖为主药的面膜制备

配方：酶水解铁皮石斛多糖15g(相当于100g生药量)、甘油10g、EDTA-2Na0.05g、丁二醇5g、红没药醇0.2g、吐温80为0.5g、纯水850毫升。

制备方法步骤：将酶水解铁皮石斛多糖、甘油、EDTA-2Na、丁二醇、红没药醇、吐温80混合均匀，涂敷于无纺布上即可。

实施例9：验证皮肤抗皱的疗效

志愿受试者入组要求：年龄35～65岁；性别 男女不限；

入组症状要求：面部有皮肤皱纹者。

使用方法：1、首先洗脸，将面部清洁干净；2、取出本发明制备的面霜，均匀涂敷于面部左侧；3、每天涂敷一次，时间固定为同一时间点，连续30天，左右两边脸颊对比观察结果。

志愿受试者120人参与了本发明的观察，将志愿受试者随机分成4组，分别用本发明实施例制备的面霜进行观察，其对改善症状的观察结果如下：

表1：皮肤皱纹改善效果比较

根据对上述4组志愿受试者试用效果的观察数据来看：两组经过水解处理得到的小分子石斛多糖制成的面霜，对皮肤皱纹有非常显著改善。其中酸水解所得小分子石斛多糖面霜组改善有效率为50.00％，酶水解所得的小分子石斛多糖面霜组改善有效率高达86.67％。而未水解的铁皮石斛多糖制成面霜后改善率低于空白面霜对照组，实际应用中还出现了加重症状的情形。

实施例10：验证祛黄褐斑的疗效

志愿受试者入组要求：年龄35～65岁；性别 男女不限；

入组症状要求：面部有黄褐斑者。

使用方法：1、首先洗脸，将面部清洁干净；2、取出本发明制备的面霜，均匀涂敷于面部左侧；3、每天涂敷一次，时间固定为同一时间点，连续30天，左右两边脸颊对比观察结果。

志愿受试者120人参与了本发明的观察，将志愿受试者随机分成4组，分别用本发明实施例制备的面霜进行观察，其对改善症状的观察结果如下：

表2：皮肤黄褐斑改善效果比较

根据对上述4组志愿受试者试用效果的观察数据来看：两组经过水解处理得到的小分子石斛多糖制成的面霜，对皮肤黄褐斑有非常显著改善。其中酸水解所得小分子石斛多糖面霜组改善有效率为40.00％，酶水解所得的小分子石斛多糖面霜组改善有效率高达66.67％。而未水解的铁皮石斛多糖制成面霜后改善率低于空白面霜对照组，实际应用中还出现了加重症状的情形。

对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种含有小分子石斛多糖的化妆品，其特征在于，所述化妆品的主药含有经过水解得到的小分子石斛多糖，所述小分子石斛多糖的分子量范围为：25-75KDa之间。

2.根据权利要求1所述的化妆品，其特征在于，所述小分子石斛多糖是采用石斛药材先经过提取制备得到未水解大分子石斛多糖，再经过酸水解或酶水解而来。

3.根据权利要求2所述的化妆品，其特征在于，所述石斛药材为铁皮石斛。

4.根据权利要求2所述的化妆品，其特征在于，所述未水解大分子石斛多糖的提取制备方法为：取石斛药材干品5000g，粉碎，加30倍水，加热煮沸提取2h，提取2次，离心得离心液，离心液浓缩至15L，加4倍体积乙醇，即总60L乙醇，醇沉析出多糖，离心得多糖沉淀，收集即得未水解大分子石斛多糖。

5.根据权利要求2所述的化妆品，其特征在于，所述酸水解的方法具体为：取所述未水解大分子石斛多糖，加入1mol/L的盐酸，80℃水浴加热，保温1小时，再加NaOH溶液中和至中性，用透析膜，透析出NaCl，离心得多糖沉淀，即得酸水解的小分子石斛多糖。

6.根据权利要求2所述的化妆品，其特征在于，所述酶水解的方法具体为：取所述未水解大分子石斛多糖，制成浓缩液，含量为相当于每1ml浓缩液含每1g石斛生药，调节溶液PH值为PH6左右，加入相当于石斛多糖含量1％的果胶酶和纤维素酶，两种酶比例为1∶1，对大分子多石斛糖进行酶水解，酶水解温度40℃左右、酶水解时间1.5h；酶水解结束，煮沸将酶灭活，离心，离心沉淀即得酶水解的小分子石斛多糖。

7.根据权利要求1-6中任一所述的化妆品，其特征在于，所述的化妆品可以为面霜、面膜、精华液、洗面奶等。

8.一种如权利要求7所述的化妆品的制备方法，其特征在于，所述面霜的制备方法如下：将所述小分子石斛多糖15份、甘油硬脂酸酯10份、甘油50份、纯水850份均匀搅拌即得。

9.一种如权利要求7所述的化妆品的制备方法，其特征在于，所述面膜的制备方法如下：将所述小分子石斛多糖15份、甘油10份、EDTA-2Na0.05份、丁二醇5份、红没药醇0.2份、吐温80为O.5份、纯水850份混合均匀，涂敷于无纺布上即得。

10.一种如权利要求1-9中任一所述的化妆品的应用，其特征在于，可制备为抗皮肤衰老、抗皱、抗黄褐斑的化妆品的应用。