CN105147718A - 桑葚多糖提取物在制备药物或保健品中的应用 - Google Patents

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周欣
陈华国
邓青芳
赵超
龚小见
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Abstract

本发明公开了桑葚多糖提取物在制备预防或抑制化学性肝损伤的药物或保健品中的应用。本发明的桑葚多糖提取物具有较为广泛的生物活性,活性高,能明显降低血清中丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶的水平,有效提高肝脏中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性,明显降低肝脏中谷胱甘肽和丙二醛的含量。本发明的桑葚多糖提取物可用于制备药物或保健品,尤其是用于制备对化学性肝损伤有抑制或预防作用的药物或保健品。

Description

桑葚多糖提取物在制备药物或保健品中的应用
技术领域
本发明涉及一种桑葚多糖提取物的新用途,特别是在制备预防或抑制化学性肝损伤的药物或保健品中的应用,属于中药技术领域。
背景技术
桑葚(FructusMori)又名桑枣、桑果、葚子、乌葚等,是桑科桑属多年生落叶乔木桑树的成熟果穗的统称,原产于中国中部约有四千年的栽培史,品种较多栽培范围广泛,资源较为丰富。新鲜桑葚不但有甘美的滋味,并且含有大量的维生素、氨基酸、矿物元素、微量元素、无机盐类、果胶、黄酮、生物碱、酚类及糖类等多种营养成分,又具有食用和医疗保健的作用,因而被广大人群所喜爱。桑葚是被国家卫生部列为首批“既是食品又是药品”的农产品之一。我国许多中医名著如《本草纲目》、《中药大辞典》等,认为桑葚性寒,具有滋阴养血、镇静安神、补肝益肾、养颜益智、乌发明目、生津止渴、延年祛斑、降压消渴和解酒的功效,还可以用于治疗肝肾阳虚、心悸失眠、肠燥便秘、须发早白等症。随着现代医学对桑葚进行药理、药效毒理测试的研究,发现桑葚具有促进造血细胞的生长,提高动物体内酶的活性,抗诱变,抗菌,抗病毒,抗辐射,抑制肿瘤及有害物质的生成,增强免疫力、抗寒功能及耐劳能力,抗氧化,延缓细胞衰老,防止血管硬化,调节血糖和血脂,护肝等功效。
桑葚多糖提取物是从桑葚中提取出来的以桑葚多糖为主要成分的混合物,其中桑葚多糖是由多个相同或不同的单糖以糖苷键连接而成的高聚合物,具有较为广泛的生物活性,主要包括参与机体代谢、调节机体免疫力、延缓细胞衰老、防止血管硬化、防衰老、调节血糖、抗菌、抗病毒、抗辐射、抑制肿瘤、抗氧化等作用。
虽然已发现桑葚有护肝功效,但现有技术中并没有桑葚护肝作用的深入研究报道,即尚未明确具体是桑葚中的那种或哪些有效成分发挥了护肝作用,因而也尚未有桑葚多糖提取物用于化学性肝损伤保护产品的相关报道。
发明内容
为解决现有技术的不足,本发明的目的在于提供桑葚多糖提取物在制备药物或保健品中的应用,所得药物或保健品能有效抑制或预防化学性肝损伤。
为了实现上述目标,本发明采用如下的技术方案:
桑葚多糖提取物在制备预防或抑制化学性肝损伤的药物或保健品中的应用。
桑葚多糖提取物在制备预防或抑制酒精性肝损伤的药物或保健品中的应用。
前述桑葚多糖提取物的应用中,桑葚多糖提取物中含有多糖、糖醛酸、蛋白质和硫酸酯,其中多糖的重量百分含量大于55%。
前述桑葚多糖提取物的应用中,桑葚多糖提取物中糖醛酸的重量百分含量大于12%。
前述桑葚多糖提取物的应用中,按照重量百分数计,桑葚多糖提取物中含有多糖65%~70%、糖醛酸16%~21%、蛋白质1%~2%和硫酸酯5%~7%。
前述桑葚多糖提取物的应用中,多糖由质量比为1.8~2.4∶0.3~1∶1.9~2.5∶60~61∶2.8~3.4∶18~18.8∶12.2~13的鼠李糖残基、岩藻糖残基、木糖残基、甘露糖残基、半乳糖残基、半乳糖醛酸残基和葡萄糖残基组成。
前述桑葚多糖提取物的应用中,桑葚多糖提取物是由桑葚的干燥果穗经脱脂、脱色、生物酶酶解和超声提取之后浓缩、醇沉得到的。
具体地,前述桑葚多糖提取物的应用中,桑葚多糖提取物是按以下方法步骤制得的:
(1)除杂:将桑葚原料进行水洗,干燥,粉碎,备用;
(2)脱脂、脱色:将步骤(1)所得原料置于容器中,先后加入乙醇、乙醚进行回流,回流完毕后,晾干,备用;
(3)将步骤(2)所得产物置于容器中,加入水,调节pH值,保温,加入葡萄糖氧化酶进行酶解;
(4)将步骤(3)中酶解产物进行超声处理,得提取液;
(5)将提取液趁热过滤,得滤液,将滤液浓缩,醇沉两次,离心,收集沉淀物,沉淀物用无水乙醇反复洗涤,干燥,即得。
进一步地,前述桑葚多糖提取物的应用中,桑葚多糖提取物是按以下方法步骤制得的:
(1)除杂:将桑葚原料进行水洗,干燥,粉碎,备用;
(2)脱脂、脱色:将步骤(1)所得原料置于容器中,先加入75%~100%乙醇回流两次,再加入90%~100%乙醚回流两次,每次回流60~150分钟,回流完毕后,晾干,备用;
(3)将步骤(2)所得产物置于容器中,加入步骤(2)所得产物重量6~25倍的水,调节pH值为3~7,保持温度在25℃~75℃,加入步骤(2)所得产物重量0.001~0.006倍的葡萄糖氧化酶进行酶解,酶解时间为15~120分钟;
(4)将步骤(3)中酶解产物进行超声处理,超声频率为20~100KHz,时间为10~40分钟,得提取液;
(5)将提取液趁热过滤,得滤液,将滤液浓缩至原体积的1/5~1/3,乙醇沉淀两次,两次均加入4~6倍体积、浓度为90%~100%的乙醇,均放置于3℃~5℃下保持12h~48h;醇沉后离心,收集沉淀物,沉淀物用无水乙醇反复洗涤,干燥,即得。
优选地,前述桑葚多糖提取物的应用中,桑葚多糖提取物是按以下方法步骤制得的:
(1)除杂:将桑葚原料进行水洗,干燥,粉碎,备用;
(2)脱脂、脱色:将步骤(1)所得原料置于容器中,先加入无水乙醇回流两次,再加入无水乙醚回流两次,每次回流105分钟,回流完毕后,晾干,备用;
(3)将步骤(2)所得产物置于容器中,加入步骤(2)所得产物重量11倍的水,调节pH值为5,保持温度在58℃,加入步骤(2)所得产物重量0.003倍的葡萄糖氧化酶进行酶解,酶解时间为38分钟;所述葡萄糖氧化酶配制成0.2wt%~0.4wt%的水溶液使用;
(4)将步骤(3)中酶解产物进行超声处理,超声频率为80KHz,时间为20分钟,得提取液;
(5)将提取液趁热过滤,得滤液,将滤液浓缩至原体积的1/4,乙醇沉淀两次,两次均加入5倍体积、浓度为95%的乙醇,均放置于4℃下保持30h;醇沉后离心,收集沉淀物,沉淀物用无水乙醇反复洗涤,冷冻干燥,即得。
前述桑葚多糖提取物的应用中,所述药物或保健品可采用汤剂、混悬剂、片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂、糖浆剂、乳剂、冲剂或丸剂等口服制剂形式;也可采用膜剂、凝胶剂、喷雾剂、膏剂或海绵剂等外用制剂形式;还可以采用注射给药、局部给药形式。
为了验证桑葚多糖提取物对化学性肝损伤抑制作用效果,申请人进行了一系列试验研究,具体如下:
1、桑葚多糖提取物的制备:桑葚多糖提取物经以下步骤提取得到:
(1)除杂:将桑葚原料进行水洗,干燥,粉碎,备用;
(2)脱脂、脱色:将步骤(1)所得原料置于容器中,先加入75%~100%乙醇回流两次,再加入90%~100%乙醚回流两次,每次回流60~150分钟,回流完毕后,晾干,备用;
(3)将步骤(2)所得产物置于容器中,加入步骤(2)所得产物重量6~25倍的水,调节pH值为3~7,保持温度在25℃~75℃,加入步骤(2)所得产物重量0.001~0.006倍的葡萄糖氧化酶进行酶解,酶解时间为15~120分钟;
(4)将步骤(3)中酶解产物进行超声处理,超声频率为20~100KHz,时间为10~40分钟,得提取液;
(5)将提取液趁热过滤,得滤液,将滤液浓缩至原体积的1/5~1/3,乙醇沉淀两次,两次均加入4~6倍体积、浓度为90%~100%的乙醇,均放置于3℃~5℃下保持12h~48h;醇沉后离心,收集沉淀物,沉淀物用无水乙醇反复洗涤,干燥,得到桑葚多糖提取物。
申请人在制备桑葚多糖提取物的过程中,对提取条件进行了试验筛选,得到最佳提取条件为:酶解时间为38分钟、酶的用量为0.3%、水的用量为11倍、酶解温度为58℃。
2、桑葚多糖提取物组成成分分析
取桑葚多糖提取物,采用苯酚-硫酸法检测,测得多糖含量在65%~70%之间。采用Bradford法检测,测得蛋白质含量在1%~2%之间。采用氯化钡-明胶法检测,测得硫酸酯含量在5%~7%之间。采用间羟基联苯比色法检测,测得糖醛酸的含量在16%~21%之间。采用斐林试验和碘化钾试验检测,发现该提取物中不含淀粉和单糖类物质。其中一个桑葚多糖提取物样品的成分含量数据用图形表示如图1。
采用HPLC法对上述1项提取得到的桑葚多糖提取物中多糖成分进行测定。具体测试条件和方法如下:
(1)水解:取10mg桑葚多糖提取物,加入4mL的2mol/L的三氟乙酸,于120℃下水解2小时,然后用甲醇萃取3~5次,干燥,得到水解产物;
(2)衍生化:取桑葚多糖水解产物和对照品(葡萄糖、鼠李糖、L-岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖和半乳糖醛酸)适量,按照以下步骤分别衍生化:置于水解管中,加入200μL的蒸馏水,溶解,再加入200μL的0.50mol/L1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉(PMP)和200μL的0.30mol/L的NaOH溶液,摇匀,于70℃下反应100min,冷却至室温,加入200μL的0.3mol/L的HCl溶液中和,再用蒸馏水补充到1mL,加入2倍体积的CHCl3,涡旋,去除有机相,萃取3次-5次;
(3)HPLC测定:将步骤(2)衍生化后所得溶液经0.22μL的微孔滤膜滤过,注入高效液相色谱仪,进行测试。
其中,色谱条件为:Agilent高效液相系统,WelchUItimate色谱柱(4.6×250mm,5μm),DAD检测器,在线脱气装置,四元泵;流动相A:pH=6.7的磷酸盐缓冲液;流动相B:乙腈;梯度洗脱:0~5min,A∶B=95~91∶5~9;5~17min,A∶B=91~85∶9~15;17~22min,A∶B=85~78∶15~22;22~47min,A∶B=78~55∶22~45;流速:1mL/min;检测波长:250nm;柱温:25℃;进样量:10μL;对照品溶液为葡萄糖、鼠李糖、L-岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖和半乳糖醛酸对照品经步骤(2)衍生化后所得到的溶液。
测试结果如图2和图3所示。由色谱图可知,该提取物中的多糖由鼠李糖残基、岩藻糖残基、木糖残基、甘露糖残基、半乳糖残基、半乳糖醛酸残基和葡萄糖残基组成,其质量比为2.1∶0.6∶2.2∶60.5∶3.1∶18.4∶12.5。
3、桑葚多糖提取物对化学性肝损伤抑制作用试验:
(1)急性酒精性肝损伤模型实验
急性酒精性肝损伤模型实验造模方法:昆明种小鼠(SPS级,许可证号SCXK(湘)2009-0012),体重20±2g,在温度为22±0.5℃,光照周期为12h:12h,环境中饲养10天后实验,实验前24h禁食,任意饮水。随机将每10只小鼠分为一组,共6组,分别为:病理模型组、常规对照组、阳性对照组和桑葚多糖提取物组(低剂量组、中剂量组和高剂量组)。桑葚多糖提取物组:分别灌胃给药50mg/kg/天(低剂量组),100mg/kg/天(中剂量组),150mg/kg/天(高剂量组),阳性对照组:灌胃给药150mg/kg/天,病理模型组与常规对照组灌胃给予同体积的蒸馏水,连续灌胃30天,末次给药后4小时后除对照组外其余各组均按14mL/kg的量给予50%的酒精,末次灌胃禁食不禁水16小时后,摘眼球取血分离血清,按ALTElisa试剂盒、ASTElisa试剂盒(均购自Elisa试剂盒公司)说明书分别测定丙氨酸转氨酶(Calanineaminotransferase,ALT)和天冬氨酸转氨酶(Caspartateaminotransferase,AST)的水平。取血后断颈处死小鼠立即取出肝脏,按1:10加入冰生理盐水,冰浴下匀浆,4000r/min离心5min,取上清液按SODElisa试剂盒、GSH-PxElisa试剂盒、GSHElisa试剂盒和MDAElisa试剂盒说明书分别测超氧化物歧化酶(Csuperoxidedismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Cglutathioneperoxidase,GSH-Px)的活性及谷胱甘肽(Cglutathione,GSH)和丙二醛(Cmalondialdehyde,MDA)的含量。结果见表1、图4和图5。
表1桑葚多糖提取物对小鼠急性酒精性肝损伤SOD和GSH-Px活性及GSH和MAD含量的影响
(2)亚急性酒精性肝损伤模型实验
亚急性酒精性肝损伤模型实验造模方法:昆明种小鼠(SPS级,许可证号SCXK(湘)2009-0012)),体重20±2g,在温度为22±0.5℃、光照周期为12h:12h,环境中饲养10天后实验,实验前24h禁食,任意饮水。随机将每10只小鼠分为一组,共6组,分别为:病理模型组、常规对照组、阳性对照组和桑葚多糖提取物组(低剂量组、中剂量组和高剂量组)。桑葚多糖提取物组:分别灌胃给药50mg/kg/天(低剂量组),100mg/kg/天(中剂量组),150mg/kg/天(高剂量组),阳性对照组:灌胃给药150mg/kg/天,病理模型组与常规对照组灌胃给予同体积的蒸馏水,连续灌胃20天,从第21天起,除对照组外其余各组每天给药4小时后,均按14mL/kg的量给予38%的酒精,末次灌胃禁食不禁水16小时后,摘眼球取血分离血清,按ALTElisa试剂盒、ASTElisa试剂盒说明书分别测定丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的水平。取血后断颈处死小鼠立即取出肝脏,按1:10加入冰生理盐水,冰浴下匀浆,4000r/min离心5min,取上清液按SODElisa试剂盒、GSH-PxElisa试剂盒、GSHElisa试剂盒和MDAElisa试剂盒说明书分别测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量。结果见表2、图6和图7。
表2桑葚多糖提取物对小鼠急性酒精性肝损伤SOD和GSH-Px活性及GSH和MAD含量的影响
由表1、表2、图4~图7可知,本发明所述的桑葚多糖提取物能明显降低血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的水平,有效提高肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,明显降低肝脏中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量,且具有明显的剂量依赖性。表明桑葚多糖提取物可以作为活性成分用于制备对化学性肝损伤有抑制或预防作用的药物或保健品。
本发明的桑葚多糖提取物给予病人时,优选纯化的形式,以促进本发明桑葚多糖提取物作为治疗剂的功效,降低给药剂量。
本发明的有益之处在于:本发明的桑葚多糖提取物由多糖、糖醛酸、蛋白质和硫酸酯组成,具有较为广泛的生物活性。本发明提取物活性高,能明显降低血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的水平,有效提高肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,明显降低肝脏中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量;因而可用于制备对化学性肝损伤有抑制或预防作用的药物或保健品。
附图说明
图1是本发明一个桑葚多糖提取物样品的成分含量数据示意图;
图2是桑葚多糖提取物与对照品的HPLC图;
图3是桑葚多糖提取物中组成多糖的单糖残基比例示意图;
图4是急性酒精性肝损伤模型的AST指标图;
图5是急性酒精性肝损伤模型的ALT指标图;
图6是亚急性酒精性肝损伤模型的AST指标图;
图7是亚急性酒精性肝损伤模型的ALT指标图;
图中附图标记的含义:图1:1-多糖,2-糖醛酸,3-硫酸酯,4-蛋白质,5-其他成分;图2:1-对照品,2-桑葚多糖提取物;图3:1-甘露糖残基,2-半乳糖醛酸残基,3-葡萄糖残基,4-半乳糖残基,5-木糖残基,6-鼠李糖残基,7-岩藻糖残基;图4~图7:1-常规对照组,2-病理模型对照组,3-阳性对照组,4-桑葚多糖提取物高剂量组,5-桑葚多糖提取物中剂量组,6-桑葚多糖提取物低剂量组。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步的介绍。
实施例1桑葚多糖提取物按以下方法步骤制备:
(1)除杂:将100g桑葚原料进行水洗,干燥,粉碎,备用;
(2)脱脂、脱色:将步骤(1)所得原料置于容器中,先加入200mL75%乙醇回流两次,再加入200mL90%乙醚回流两次,每次回流60分钟,回流完毕后,晾干,备用;
(3)将步骤(2)所得产物置于容器中,加入步骤(2)所得产物重量25倍的水,调节pH值为7,保持温度在75℃,加入步骤(2)所得产物重量0.006倍的葡萄糖氧化酶进行酶解,酶解时间为120分钟;
(4)将步骤(3)中酶解产物进行超声处理,超声频率为20KHz,时间为10分钟,得提取液;
(5)将提取液趁热过滤,得滤液,将滤液浓缩至原体积的1/5,乙醇沉淀两次,两次均加入4倍体积、浓度为90%的乙醇,均放置于3℃下保持12h,醇沉后离心,收集沉淀物,沉淀物用无水乙醇反复洗涤,干燥,得到桑葚多糖提取物。
经检测,提取得到的桑葚多糖提取物中含有多糖65wt%(苯酚-硫酸法)、糖醛酸16wt%(间羟基联苯比色法)、蛋白质2wt%(Bradford法)和硫酸酯7wt%(氯化钡-明胶法)。其中多糖由质量比为1.8∶0.3∶1.9∶60∶2.8∶18∶12.2的鼠李糖残基、岩藻糖残基、木糖残基、甘露糖残基、半乳糖残基、半乳糖醛酸残基和葡萄糖残基组成。
实施例2桑葚多糖提取物按以下方法步骤制备:
(1)除杂:将150g桑葚原料进行水洗,干燥,粉碎,备用;
(2)脱脂、脱色:将步骤(1)所得原料置于容器中,先加入200mL90%乙醇回流两次,再加入200mL95%乙醚回流两次,每次回流150分钟,回流完毕后,晾干,备用;
(3)将步骤(2)所得产物置于容器中,加入步骤(2)所得产物重量6倍的水,调节pH值为3,保持温度在25℃,加入步骤(2)所得产物重量0.001倍的葡萄糖氧化酶进行酶解,酶解时间为15分钟;
(4)将步骤(3)中酶解产物进行超声处理,超声频率为100KHz,时间为40分钟,得提取液;
(5)将提取液趁热过滤,得滤液,将滤液浓缩至原体积的1/3,乙醇沉淀两次,两次均加入6倍体积的无水乙醇,均放置于5℃下保持48h,醇沉后离心,收集沉淀物,沉淀物用无水乙醇反复洗涤,干燥,得到桑葚多糖提取物。
经检测,提取得到的桑葚多糖提取物中含有多糖70wt%(苯酚-硫酸法)、糖醛酸21wt%(间羟基联苯比色法)、蛋白质1wt%(Bradford法)和硫酸酯5wt%(氯化钡-明胶法)。其中多糖由质量比为2.4∶1∶2.5∶61∶3.4∶18.8∶13的鼠李糖残基、岩藻糖残基、木糖残基、甘露糖残基、半乳糖残基、半乳糖醛酸残基和葡萄糖残基组成。
实施例3桑葚多糖提取物按以下方法步骤制备:
(1)除杂:将200g桑葚原料进行水洗,干燥,粉碎,备用;
(2)脱脂、脱色:将步骤(1)所得原料置于容器中,先加入400mL无水乙醇回流两次,再加入400mL无水乙醚回流两次,每次回流105分钟,回流完毕后,晾干,备用;
(3)将步骤(2)所得产物置于容器中,加入步骤(2)所得产物重量11倍的水,调节pH值为5,保持温度在58℃,加入步骤(2)所得产物重量0.003倍的葡萄糖氧化酶进行酶解,酶解时间为38分钟;所述葡萄糖氧化酶配制成0.2wt%~0.4wt%的水溶液使用;
(4)将步骤(3)中酶解产物进行超声处理,超声频率为80KHz,时间为20分钟,得提取液;
(5)将提取液趁热过滤,得滤液,将滤液浓缩至原体积的1/4,乙醇沉淀两次,两次均加入5倍体积、浓度为95%的乙醇,均放置于4℃下保持30h;醇沉后离心,收集沉淀物,沉淀物用无水乙醇反复洗涤,冷冻干燥,即得。
经检测,提取得到的桑葚多糖提取物中含有多糖67.9wt%(苯酚-硫酸法)、糖醛酸18.5wt%(间羟基联苯比色法)、蛋白质1.6wt%(Bradford法)和硫酸酯6.2wt%(氯化钡-明胶法)。其中多糖由质量比为2.1∶0.6∶2.2∶60.5∶3.1∶18.4∶12.5的鼠李糖残基、岩藻糖残基、木糖残基、甘露糖残基、半乳糖残基、半乳糖醛酸残基和葡萄糖残基组成。
实施例4桑葚多糖提取物的应用
按质量比8:6:5:0.4:8:0.3称取桑葚多糖提取物(实施例1制得)、葛根提取物、益智仁提取物、糊精、蔗糖和羧甲基纤维素钠,混匀,制成颗粒剂。用于预防或治疗急性酒精性肝损伤,每日服用量:5~10g。
实施例5桑葚多糖提取物的应用
按质量比8:4:3:0.4:0.2:0.3称取桑葚多糖提取物(多糖含量63wt%)、葛根提取物、益智仁提取物、淀粉、蔗糖和羧甲基纤维素钠,混匀,制成片剂,0.3~0.5g/片。用于预防或治疗亚性酒精性肝损伤,每日服用量:3~5片。
实施例6桑葚多糖提取物的应用
按质量比8:5:0.4:6:0.3称取桑葚多糖提取物(多糖含量60wt%、糖醛酸含量14wt%)、益智仁提取物、糊精、蔗糖和羧甲基纤维素钠,混匀,制成颗粒剂。用于预防或治疗药物性肝损伤,每日服用量:5~10g。
实施例7桑葚多糖提取物的应用
按质量比8:4:0.4:0.1:0.3称取桑葚多糖提取物(实施例2制得)、葛根提取物、淀粉、蔗糖和羧甲基纤维素钠,混匀,制成片剂,0.3~0.5g/片。用于预防或治疗化学毒物造成的肝损伤,每日服用量:3~5片。
实施例8桑葚多糖提取物的应用
按质量比8:0.2:0.1:0.2称取桑葚多糖提取物(实施例3制得)、淀粉、蔗糖和羧甲基纤维素钠,混匀,制成片剂,0.3~0.5g/片。用于预防或治疗亚性酒精性肝损伤,每日服用量:3~5片。

Claims (10)

1.桑葚多糖提取物在制备预防或抑制化学性肝损伤的药物或保健品中的应用。
2.桑葚多糖提取物在制备预防或抑制酒精性肝损伤的药物或保健品中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的桑葚多糖提取物的应用,其特征在于:所述桑葚多糖提取物中含有多糖、糖醛酸、蛋白质和硫酸酯,其中多糖的重量百分含量大于55%。
4.根据权利要求3所述的桑葚多糖提取物的应用,其特征在于:所述桑葚多糖提取物中糖醛酸的重量百分含量大于12%。
5.根据权利要求4所述的桑葚多糖提取物的应用,其特征在于:按照重量百分数计,所述桑葚多糖提取物中含有多糖65%~70%、糖醛酸16%~21%、蛋白质1%~2%和硫酸酯5%~7%。
6.根据权利要求3所述的桑葚多糖提取物的应用,其特征在于:所述多糖由质量比为1.8~2.4∶0.3~1∶1.9~2.5∶60~61∶2.8~3.4∶18~18.8∶12.2~13的鼠李糖残基、岩藻糖残基、木糖残基、甘露糖残基、半乳糖残基、半乳糖醛酸残基和葡萄糖残基组成。
7.根据权利要求3所述的桑葚多糖提取物的应用,其特征在于:所述桑葚多糖提取物是由桑葚的干燥果穗经脱脂、脱色、生物酶酶解和超声提取之后浓缩、醇沉得到的。
8.根据权利要求7所述的桑葚多糖提取物的应用,其特征在于:所述桑葚多糖提取物是按以下方法步骤制得的:
(1)除杂:将桑葚原料进行水洗,干燥,粉碎,备用;
(2)脱脂、脱色:将步骤(1)所得原料置于容器中,先后加入乙醇、乙醚进行回流,回流完毕后,晾干,备用;
(3)将步骤(2)所得产物置于容器中,加入水,调节pH值,保温,加入葡萄糖氧化酶进行酶解;
(4)将步骤(3)中酶解产物进行超声处理,得提取液;
(5)将提取液趁热过滤,得滤液,将滤液浓缩,醇沉两次,离心,收集沉淀物,沉淀物用无水乙醇反复洗涤,干燥,即得。
9.根据权利要求8所述的桑葚多糖提取物的应用,其特征在于:所述桑葚多糖提取物是按以下方法步骤制得的:
(1)除杂:将桑葚原料进行水洗,干燥,粉碎,备用;
(2)脱脂、脱色:将步骤(1)所得原料置于容器中,先加入75%~100%乙醇回流两次,再加入90%~100%乙醚回流两次,每次回流60~150分钟,回流完毕后,晾干,备用;
(3)将步骤(2)所得产物置于容器中,加入步骤(2)所得产物重量6~25倍的水,调节pH值为3~7,保持温度在25℃~75℃,加入步骤(2)所得产物重量0.001~0.006倍的葡萄糖氧化酶进行酶解,酶解时间为15~120分钟;
(4)将步骤(3)中酶解产物进行超声处理,超声频率为20~100KHz,时间为10~40分钟,得提取液;
(5)将提取液趁热过滤,得滤液,将滤液浓缩至原体积的1/5~1/3,乙醇沉淀两次,两次均加入4~6倍体积、浓度为90%~100%的乙醇,均放置于3℃~5℃下保持12h~48h;醇沉后离心,收集沉淀物,沉淀物用无水乙醇反复洗涤,干燥,即得。
10.根据权利要求9所述的桑葚多糖提取物的应用,其特征在于:所述桑葚多糖提取物是按以下方法步骤制得的:
(1)除杂:将桑葚原料进行水洗,干燥,粉碎,备用;
(2)脱脂、脱色:将步骤(1)所得原料置于容器中,先加入无水乙醇回流两次,再加入无水乙醚回流两次,每次回流105分钟,回流完毕后,晾干,备用;
(3)将步骤(2)所得产物置于容器中,加入步骤(2)所得产物重量11倍的水,调节pH值为5,保持温度在58℃,加入步骤(2)所得产物重量0.003倍的葡萄糖氧化酶进行酶解,酶解时间为38分钟;所述葡萄糖氧化酶配制成0.2wt%~0.4wt%的水溶液使用;
(4)将步骤(3)中酶解产物进行超声处理,超声频率为80KHz,时间为20分钟,得提取液;
(5)将提取液趁热过滤,得滤液,将滤液浓缩至原体积的1/4,乙醇沉淀两次,两次均加入5倍体积、浓度为95%的乙醇,均放置于4℃下保持30h;醇沉后离心,收集沉淀物,沉淀物用无水乙醇反复洗涤,冷冻干燥,即得。
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