CN106613287B

CN106613287B - 绿豆抗蚜性快速鉴定的方法

Info

Publication number: CN106613287B
Application number: CN201710058965.XA
Authority: CN
Inventors: 刘昌燕; 万正煌; 李阳; 焦春海; 李莉; 陈宏伟; 刘良军; 伍广洪; 王兴敏
Original assignee: Hubei Academy Of Agricultural Sciences Institute Of Food Crops
Current assignee: Hubei Academy Of Agricultural Sciences Institute Of Food Crops
Priority date: 2017-01-23
Filing date: 2017-01-23
Publication date: 2020-09-04
Anticipated expiration: 2037-01-23
Also published as: CN106613287A

Abstract

本发明公开了一种绿豆抗蚜性的快速鉴定方法，该方法为将绿豆种子进行表面消毒，将表面消毒后的绿豆种子点播到培养盘内；光照黑暗交替下培养，并定期观察绿豆苗生长情况；待绿豆长到两叶一心期时，接种2‑3头无翅蚜虫于正面叶片上，观察其感虫情况。蚜虫的生长繁殖受季节影响较大，由于培养室的环境条件较稳定，加之本发明的鉴定体系本身是一个完全封闭的系统，使得鉴定结果的重复性和可靠性得到保证。

Description

绿豆抗蚜性快速鉴定的方法

技术领域

本发明涉及作物抗性育种技术领域，具体地指一种绿豆抗蚜性快速鉴定的方法。

背景技术

豆蚜(Aphis craccivora Koch)属半翅目蚜科，别名苜蓿蚜、花生蚜，在全世界广泛分布，寄主植物可达200种以上，主要有豇豆、菜豆、蚕豆、豌豆、绿豆、大豆、花生、苜蓿等，是豆科植物的重要害虫。该虫以刺吸式口器吸取嫩茎、幼芽、顶端嫩叶、心叶、花器及荚果处汁液。受害严重时，植株生长不良，叶片卷缩，影响开花结实。又因该虫大量排泄“蜜露”，而引起煤污病，并可传播植物病毒病40多种，严重影响作物产量和品质。

目前对于豆蚜的防治主要是化学药剂防治。培育抗虫品种是解决这一虫害的有效途径，而建立快速简便的抗蚜性鉴定方法对抗蚜虫育种具有重要的意义。

发明内容

本发明目的在于针对绿豆抗虫育种的特点和现有技术的不足，提供了一种绿豆抗蚜性快速鉴定的方法，该方法能在室内重复、快速准确鉴定绿豆资源对豆蚜的抗性。

为实现上述目的，本发明提供的一种绿豆对蚜虫抗性的快速鉴定方法，包括以下步骤：

1)挑选颗粒饱满，大小相似的绿豆种子进行表面消毒，备用；

2)将培养土装袋后进行高压灭菌，灭菌后的有机培养土分装到培养盘内，将表面消毒后的绿豆种子点播到培养盘内；光照黑暗交替下培养，并定期观察绿豆苗生长情况；

3)待绿豆长到两叶一心期时，接种2-3头无翅蚜虫于正面叶片上；

4)接种蚜虫7d，采用计数法统计每株绿豆植株上的蚜虫数量，求相同品种绿豆植株上蚜虫数量的平均值，从而按以下分级标准进行抗性评价，

以每株的平均单株蚜量比值定级，共分5级：

1)0级：平均绿豆单株蚜虫量比值为0-0.25；

2)1级：平均绿豆单株蚜量比值为0.26-0.50；

3)2级：平均绿豆单株蚜量比值为0.51-0.90；

4)3级：平均单株蚜量比值为0.91-1.25；

5)4级：平均绿豆单株蚜量比值为＞1.25；

经上统计得知，0级属于高抗虫型，记以HR，1级属于抗虫型，记以R，2级属于中抗虫型，记以MR，3级属于感虫型，记以S，4级属于高感虫型，记以HS。

进一步地，所述步骤1)中，先用体积分数为75％的酒精消毒2s，然后用质量分数1％的NaClO溶液消毒3min，最后无菌水洗3次。

再进一步地，所述步骤2中，将培养土装袋经121℃，20min高压灭菌。

再进一步地，所述步骤2中，培养环境的温度为23±1℃。

本发明的有益效果在于：

1、本发明可在较短时间内连续鉴定较大数量的绿豆苗，有利于大规模筛选绿豆抗豆蚜品种。

2、本发明可以让豆蚜在一个可控、密闭的环境中繁殖，保证了鉴定结果的重复性和可靠性。

3、本发明可以直接观察绿豆苗的感虫情况。

4、本发明能够使绿豆保持正常生长，绿豆抗蚜虫鉴定技术可以准确统计蚜虫的繁殖数量，鉴定区分绿豆品种的抗豆蚜性。

5、用本发明提供的方法鉴定绿豆品种的抗豆蚜性，能够大量、快速、准确的区分品种间抗豆蚜性间的差异，为抗虫亲本选择提供依据，是选育抗豆蚜绿豆品种资源最经济有效的方法，进而从根本上减少豆蚜对绿豆产量和质量的损失。

附图说明

图1为豆蚜室内饲养图；

图2为供试豆蚜的准备图；

图3绿豆蚜虫抗性鉴定图。

具体实施方式

为了更好地解释本发明，以下结合具体实施例进一步阐明本发明的主要内容，但本发明的内容不仅仅局限于以下实施例。

实施例1供试豆蚜的准备

1)豆蚜的室内大量饲养：豆蚜为绿豆上田间采集，在本实验室种植的蚕豆苗上继代饲养，温度为(23±1)℃，光照周期为16L:8D。

2)供试豆蚜的准备：采用改进的叶子圆片法，在人工光照培养箱中培养供试若蚜。具体为：将新鲜的绿豆叶片用巴斯消毒液浸泡10min后放在含有琼脂层(1.5％)的培养皿内，挑选健康的成蚜置于叶片上，盖上盖子，并用封口膜封上以防止豆蚜爬出。24h后，将培养皿内的成蚜取出。第4天后取4日龄若蚜进行人工接虫实验。蚜虫培养条件为：温度为(23±1)℃，光照周期为16L:8D。

实施例2室内抗虫性鉴定

将各绿豆品种为实验材料，待绿豆长到两叶一心期时，接种2-3头无翅蚜虫于正面叶片。接蚜7d后，采用计数法统计每株绿豆植株上的蚜虫数量，求得每20株相同品种蚕豆植株上蚜虫数量的平均值，从而按以下分级标准进行抗性评价，

以每株的平均单株蚜量比值定级，共分5级：

1)0级：平均绿豆单株蚜虫量比值为0-0.25；

2)1级：平均绿豆单株蚜量比值为0.26-0.50；

3)2级：平均绿豆单株蚜量比值为0.51-0.90；

4)3级：平均单株蚜量比值为0.91-1.25；

5)4级：平均绿豆单株蚜量比值为＞1.25；

实施例3绿豆资源抗性鉴定结果

利用上述方法对生产上应用的4绿豆品种开展抗豆蚜的鉴定评价，鉴定结果见表1。

表1绿豆对豆蚜室内抗性鉴定结果

品种	平均单株蚜量比值	抗性程度
			冀绿2号	0.4208	R
中绿3号	0.5372	MR
			中绿1号	0.9094	S
潍绿05-08	1.6347	HS

由上表可知，供试各品种抗蚜性表现显著的差异，证明应用本发明提供的鉴定方法能够快速、准确地区分绿豆抗豆蚜品种和感豆蚜品种。

由此可见，关于品种抗蚜性鉴定，利用室内人工接虫的方法，使材料感虫。实验结果表明，绿豆的抗蚜性存在差异，其中培养条件对感虫程度有很大的影响。因此以后在对育种材料进行抗蚜性鉴定时，应控制温度和湿度，提供具有实际育种意义的抗性评价。该方法可以用来快速地筛选出抗豆蚜的绿豆品种，为以后的绿豆生产上种子品系的选择提供参考。

其它未详细说明的部分均为现有技术。尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims

1.一种绿豆对蚜虫抗性的快速鉴定方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)挑选颗粒饱满，大小相似的绿豆种子先用体积分数为75％的酒精消毒2s，然后用质量分数1％的NaClO溶液消毒3min，最后无菌水洗3次，备用；

2)将培养土装袋后经121℃，20min进行高压灭菌，灭菌后的有机培养土分装到培养盘内，将表面消毒后的绿豆种子点播到培养盘内；在温度为23±1℃，光照黑暗交替下培养，并定期观察绿豆苗生长情况；

4)接种蚜虫10～15d，采用计数法统计每株绿豆植株上的蚜虫数量，求相同品种绿豆植株上蚜虫数量的平均值，从而按以下分级标准进行抗性评价，

以每株的平均单株蚜量比值定级，共分5级：

1)0级：平均绿豆单株蚜虫量比值为0-0.25；

2)1级：平均绿豆单株蚜量比值为0.26-0.50；

3)2级：平均绿豆单株蚜量比值为0.51-0.90；

4)3级：平均单株蚜量比值为0.91-1.25；

5)4级：平均绿豆单株蚜量比值为>1.25；

经上统计得知，

0级属于高抗虫型，记以HR，1级属于抗虫型，记以R，2级属于中抗虫型，记以MR，3级属于感虫型，记以S，4级属于高感虫型，记以HS；

其中，所述无翅蚜虫的准备为采用改进的叶子圆片法，在人工光照培养箱中培养供试若蚜；具体为，将新鲜的绿豆叶片用巴斯消毒液浸泡10min后放在含有琼脂层1.5％的培养皿内，挑选健康的成蚜置于叶片上，盖上盖子，并用封口膜封上以防止豆蚜爬出；24h后，将培养皿内的成蚜取出；第4天后取4日龄若蚜进行人工接虫试验；蚜虫培养条件为：温度23±1℃，光照周期为16L：8D。