KR102309624B1 - 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법 - Google Patents

백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은, 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법에 관한 것으로, 백합 구근에서 생장점을 절취하는 (1)과정과; 절취한 생장점을 배지에 치상하는 (2)과정과; 설정기간 후 배발생세포가 발생하면 평판배지에서 증식하는 (3)과정과; 상기 (3)과정에서 상기 배발생세포의 일부를 채취하여 바이러스를 검증하는 (4)과정과; 상기 (4)과정에서 바이러스가 검증되지 않은 경우 본격적으로 증식하는 현탁배양을 하는 (5)과정;을 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 초미세한 생장점만을 적출하고 무병 종구를 선택하여 생산할 수 있고, 생장점을 적출하고, 일반적으로 1개의 구근을 유도하는 것이 아니라 바로 다수의 배발생 세포를 유도하여 증식에 시간을 단축할 수 있다.

Description

백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법 {Lily tissue somatic cell meristem Culture quick proliferation Method}
본 발명은 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법에 관한 것으로, 백합의 백합 생장점 배양체로부터 배발생 세포를 유도한 후 바이러스 검정을 하여 증식 단계로 진입 가능성을 확인하여 무병주 확인까지 증식과 동시에 바이러스 검정을 할 수 있는 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법에 관한 것이다.
인간은 오랫동안 다양한 종류의 동식물을 사육 내지 재배하고 있다.
이 중에서 원예(horticulture)는 생활주변의 작은 토지나 공간에서 경제성이 큰 채소 과수 화훼 식물을 집약적으로 재배하는 농업생산 활동이다.
화훼 원예(floriculture)는 원예의 한 분야로 화초와 화목 등을 집약적이고 기술적으로 재배하는 것으로 절화 분화 종묘 등을 생산하여 판매하는 것을 목적으로 한다.
이러한 화훼의 번식 방법은 일년초나 숙근초, 그리고 관상수처럼 종자로 파종하는 경우도 있고, 구근류나 화목류처럼 주로 영양 번식에 의존하는 경우도 있다. 구근류의 경우에는 비대하진 영양 번식기관의 종류에 따라 인경, 구경, 괴경, 근경 등으로 나누기도 한다.
영양번식은 식물영양기관의 일부를 모체로부터 분리하여 새로운 개체를 만들어 가는 번식이다. 영양번식에는 감자 마늘 딸기 백합 국화 등에서 보는 것처럼 자연 상태로 생성된 생장점이나 개체를 떼어 내어 증식하는 방법이 있는가 하면, 접목이나 다층 순화재배상자처럼 재배편의상 인위적으로 번식을 조절하는 방법도 있다.
영양번식이 갖는 큰 의의는 종자에 의존하지 않고 개체를 늘려 나갈 수 있다는 것이다. 즉, 수분이나 수정 없이 번식하는 것으로 동물과 구분되는 독특한 번식방법이다. 식물의 잎이나 줄기 또는 뿌리의 일부를 잘라 적절한 환경에 두면 그로부터 새 싹과 새 뿌리가 생기며, 결국에는 하나의 완전한 개체로 발전하게 된다. 이러한 재생능력은 식물체의 부위별로 다르고 환경조건에 따라서도 다르기 때문에, 실제로 영양번식을 할 때는 이런 점을 충분히 고려해야 한다.
백합은 국내 4대 화훼작물로 수출도 18’년에는 약 820만불에 달할 정도로 큰 비중을 차지하고 있다. 백합 구근은 전 세계적으로 약 15억개구가 유통되고 있으며, 이 중 일본에서 1억 5천 만구, 중국이 약 1억 만구이상을 수입하는 년간 3,000억원 이상의 소비 시장을 형성하고 있어, 국내 육성 나리 신품종을 이용한 새로운 잠재적 화훼 수출 시장의 공략이 필요하다.
주요 절화 수입국인 일본이 수입 절감을 위해, 값싼 노동력을 바탕으로 한 중국의 절화가 일본시장에 진출함에 따라 국내 백합 수출의 위기가 예상된다.
국내 일부 농가에서는 인편번식을 이용해 백합 종구를 자가 공급하나, 이 자구가 다시 개화구가 되어 성장되는 비율이 매우 낮고, 품질이 균일하지 못하며, 특히 바이러스 등 병해충의 감염이 극심하여 산업화 하는데 문제가 심각한 실정이다.
국내는 네덜란드로부터 구입되는 구근에 의존하여 유통되고 있고, 유통되는 많은 구는 다종, 다량의 바이러스가 감염이 되어 있는 실정이다. 따라서 농가는 연작이 불가하여 매년 영농비의 53%이상을 구근 구입비로 사용하고 있다.
이를 개선하고, 생산 단가 절감을 위해서는 영농비의 절감을 위해 무병묘의 보급이 필요하다.
또한, 개화구에서 절화의 품질을 개선하기 위해서는 재배적 기술 개선 뿐 아니라 바이러스 집적 문제를 해결해하고, 구근 무병 종구 생산의 중요성이 매우 높다 하겠다.
그러나, 현재까지 보고되어 있는 백합 생장점 배양은 생장점(1개) → 소식물체 (1개) → 바이러스 검정 가능 크기까지 배양 → 바이러스 검정 → 인편배양증식 방법으로 증식 → 조직배양묘 순화 → 보급 과정을 거치고 있다.
백합 생장점 1개에서 소식물체 1개를 얻고 바이러스 검정이 가능한 크기까지 배양하려면 적어도 5개월 이상이 소요되어 1개의 생장점이 1개의 소식물체가 되는 데까지 2달 이상이 소요되며, 구근의 인편, 뿌리, 잎으로 바이러스 검정이 가능한 시료를 획득할 수 있을 정도의 크기로 성장이 될 때까지 2~3개월의 기간이 소요되기 때문에 5개월의 기간 동안은 증식 과정에 들어갈 수 없고, 획득한 소식물체를 배발생 세포를 유도할 수 있도록 처리하는 기간 2개월을 포함하여 거의 약 7개월의 기간이 소요되므로 생장점 배양체를 급속으로 대량 증식하는 데는 어려움이 있는 실정이다.
[참고문헌]
공개특허공보 특1999-0074043호 (199.10.05. 공개)
공개특허공보 10-2017-0140251호 (2017.12.20. 공개)
본 발명의 목적은, 초미세한 생장점만을 적출하고 무병 종구를 선택하여 생산할 수 있는 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 다른 목적은, 생장점을 적출하고, 일반적으로 1개의 구근을 유도하는 것이 아니라 바로 다수의 배발생 세포를 유도하여 증식에 시간을 단축할 수 있는 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 또 다른 목적은, 생산성을 향상시켜 개화구로 키우는 (양구)농가에 대량으로 안정적으로 보급할 수 있는 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 또 다른 목적은, 생장점에서 바로 배발생 세포로 유도하기 때문에 별도의 배발생 세포를 유도하는 전처리 과정을 생략하여 현탁배양을 통해 급속으로 증식 가능한 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 목적은, 백합 구근에서 생장점을 절취하는 (1)과정과; 절취한 생장점을 배지에 치상하는 (2)과정과; 설정기간 후 배발생세포가 발생하면 평판배지에서 증식하는 (3)과정과; 상기 (3)과정에서 상기 배발생세포의 일부를 채취하여 바이러스를 검증하는 (4)과정과; 상기 (4)과정에서 바이러스가 검증되지 않은 경우 본격적으로 증식하는 현탁배양을 하는 (5)과정;을 포함하는 것을 특징으로 하는 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법에 의하여 달성된다.
또한, 상기 (1)과정에서 상기 생장점은, 기외구근에서 절취하는 방법 또는 기내구근에서 절취하는 방법을 포함하고, 상기 기외구근에서 절취하는 방법은 상기 구근에서 슈트(shoot)를 유도하여 슈트를 절취하며, 상기 기내구근에서 절취하는 방법은 상기 구근에서 뿌리 및 잎을 제거한 위 인편을 벗겨 절취하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 (2)과정 또는 상기 (3)과정에서 사용되는 배지는 1/4 MS로, 2,4-D(2,4-dichlorophenoxy acetic acid)가 0.1~0.05mg/L, 젠틴리보사이드(Zeatin riboside)가 0.5~2mg/L, 수크로오스(Sucrose)가 1~2wt%, 0.3wt% 카세인(Casein)이 0.5g/L, 젤라이트(Gelrite)가 0.3wt%로 첨가되는 것이 바람직하다.
또한, 상기 배지는 아울러 고온 고압 멸균 후 5.8 pH를 유지할 수 있도록 하기 위하여 고온 고압 멸균 전 pH 6.3에 맞추고 고온 고압 멸균을 실시하고, 50ml SPL tube에 배지 7.5ml~10ml을 부어 굳힌 뒤 사용하거나 평판형 배지를 포함하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 현탁배양에 접어들면 액체배지에 체세포를 접종하고 배지를 첨가한 후 회전배양기에서 배양하여 대량의 체세포를 유도하여 증식하는 (6)과정;을 포함하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 (6)과정에서의 액체배지는 1/4 ~1/2 MS 배지에 엔에이에이(NAA)를 0.1~0.05mg/L, 제틴리보사이드(Zeatin riboside)를 0.5~2mg/L, 수크로오스를 2%wt, 카세인(Casein)을 0.5g/L로 첨가하여 pH 5.8로 조정된(Autoclave 전 pH 6.3으로 맞춤) 것을 포함하는 것이고, 상기 액체배지에 상기 체세포 0.5g를 접종하고 배지 5ml ~ 15ml을 첨가, 상기 회전 배양기에서 90~120rpm으로 배양하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 (6)과정의 체세포로부터 구근을 유도하는 (7)과정과; 유도된 구근을 무병구로 증식하는 (8)과정;를 포함하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 (7)과정에서 1/2MS 배지에 수크로오스 3~6wt%, 한천(plant agar) 0.75wt%, Casein 0.5g/L를 첨가하고, pH 5.8(Autoclave 전 pH 6.3으로 조절) 상태에서 체세포배로부터 구근을 유도하며, 상기 (8)과정에서 1/2MS 배지에 수크로오스 6~9wt%, 한천(plant agar) 0.75wt%, Casein 0.5g/L 배지에 이동하여 직경 5mm~8mm의 상기 무병구를 확보하는 것이 바람직하다.
이에, 본 발명에 따르면, 초미세한 생장점만을 적출하고 무병 종구를 선택하여 생산할 수 있는 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공할 수 있다.
또한, 생장점을 적출하고, 일반적으로 1개의 구근을 유도하는 것이 아니라 바로 다수의 배발생 세포를 유도하여 증식에 시간을 단축할 수 있는 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공할 수 있다.
또한, 생산성을 향상시켜 개화구로 키우는 (양구)농가에 대량으로 안정적으로 보급할 수 있는 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공할 수 있다.
또한, 생장점에서 바로 배발생 세포로 유도하기 때문에 별도의 배발생 세포를 유도하는 전처리 과정을 생략하여 현탁배양을 통해 급속으로 증식 가능한 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 백합 생장점 및 유도된 배발생세포를 보여주는 사진,
도 2a 및 도 2b는 1개의 생장점으로부터 본 발명에 따른 증식 방법과 종래의 증식 방법을 모식적으로 비교한 그림,
도 3은 본 발명에 따른 과정을 도시한 흐름도이다.
본 발명의 일실시예에 따른 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법에 대하여 도 1 내지 도 2b를 참조하여 구체적으로 설명하면 다음과 같다.
도 1은 본 발명에 따른 백합 생장점 및 유도된 배발생세포를 보여주는 사진이고, 도 2a 및 도 2b는 1개의 생장점으로부터 본 발명에 따른 증식 방법과 종래의 증식 방법을 모식적으로 비교한 그림이며, 도 3은 본 발명에 따른 과정을 도시한 흐름도이다.
이하의 본 발명은 다양한 식물 중에서 백합과 관련되어 있다.
식물의 조직 배양(tissue culture)은 세포의 전체형성능을 이용하여 식물의 세포·조직·기관 등으로부터 완전한 식물체를 분화시키는 배양기술이다.
조직 배양은 무균상태에서 이루어져야 한다. 배지와 사용기구를 고압멸균기(autoclave)에서 멸균한다.
조직 배양은 하는 배지는 식물체의 성분분석 결과를 기초로 만든다. 배양배지의 조성은 식물의 조직에 따라 약간의 차이가 있으나, N·P·K 등 다량원소와 Mn·Zn·Cu·Mo 등 미량원소 및 당·아미노산·비타민 등 유기물질, 그리고 옥신(NAA· 2.4-D) ·아브시스산(ABA) ·시토키닌(kinetin) 등 식물 호르몬을 포함한다.
본 발명에 따른 실시예를 구체적으로 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 백합 생장점 배양을 통한 급속 대량 무병종구 생산 방법을 도출하기 위함이다. 본 발명은 백합 기내 조직배양구 또는 기외 식물체에서 바이러스 감염이 없는 무병종구 생산을 위해서 초미세한 생장점만을 적출하고 바이러스가 없는 생장점을 선택하여 바로 배발생 세포를 유도하여 증식에 시간이 오래 걸리는 기존 배양의 문제점을 해결하여 조직배양 무병종구를 다량으로 급속 생산할 수 있도록 하였다.
본 발명은 백합 기내배양 조직배양구 또는 기외 식물체에서 초미세 생장점을 적출하여 배발생 세포를 유도하는 단계, 배발생 세포를 진탕배양하여 대량의 배발생 세포를 증식하는 단계, 증식된 배발생 세포에서 조직배양구를 유도하는 재 분화단계, 이를 토양 순화하는 단계를 모두 포함한다.
본 발명에 사용된 식물 재료는 백합 기내배양 조직배양 구 또는 백합 식물체이다.
이하에서 <실시예 1> 및 <실시예 2>에서 사용된 배지는 1/4 MS로 여기에 2,4-D(2,4-dichlorophenoxy acetic acid)가 0.1~0.05mg/L, 젠틴리보사이드(Zeatin riboside)가 0.5~2mg/L, 수크로오스(Sucrose)가 1~2wt%, 0.3wt% 카세인(Casein)이 0.5g/L, 젤라이트(Gelrite)가 0.3wt%로 첨가된다. 아울러 고온 고압 멸균 후 5.8 pH를 유지할 수 있도록 하기 위하여 고온 고압 멸균 전 pH 6.3에 맞추고 고온 고압 멸균을 실시하고, 50ml SPL tube에 배지 7.5ml~10ml을 부어 굳힌 뒤 사용한다. 또는 지름 2.5cm 평판배지에 배지를 부어 사용한다. 배양은 25도, 배양실내에 습도는 45%로 유지한다.
<실시예 1>
기외구근의 슈트(Shoot)에서 생장점을 절취(切取)할 경우에는, 구근을 냉장보관하여 슈트(Shoot)를 4cm가량 유도한다(기간은 약 2주 정도 소요). 이 경우 사전 소독이나, 별도의 세척을 필요로 하지 않으나, 겉에 묻은 흙 등은 털어주는 것이 바람직하다.
다음, 실체현미경을 이용하여 2mm이하로 생장점을 절취하고(S110) 절취한 생장점을 전술한 배지에 치상한다(S120).
4주 후 배발생세포가 발생되기 시작하면, 평판배지에 옮겨 계속 증식한다.
4주 후 배발생 세포가 발생된 일부 중 0.5g의 시료를 채취하여 바이러스 검정에 사용한다. 나머지 시료는 현탁배양을 통해 바로 증식에 사용한다.
바이러스 검정에 2일정도의 시간밖에 소요되지 않으므로 현탁배양 적응기에 만약 바이러스가 확인되면 폐기하고, 무병주로 확인되면 본격적인 증식이 이루어진다.
<실시예 2>
기내구근에서 생상점을 절취(切取)할 경우에는 기내구근에서 뿌리와 잎을 제거한 뒤 인편을 한 겹씩 벗겨낸다.
실체현미경 하에서 2mm이하로 생장점을 절취하고(S110) 절취한 생장점을 전술한 배지에 치상한다(S120).
4주 후 배발생세포가 발생되기 시작하면, 평판배지에 옮겨 계속 증식한다(S130).
4주 후 배발생 세포가 발생된 일부 중 0.5g의 시료를 채취하여 바이러스 검정에 사용한다(S140). 나머지 시료는 현탁배양을 통해 바로 증식에 사용한다(150).
바이러스 검정에 2일 정도의 시간밖에 소요되지 않으므로 현탁배양 적응기에 만약 바이러스가 확인되면(S143) 폐기하고(S147), 무병주로 확인되면(S145) 본격적인 증식이 이루어진다(S150).
도 1의 좌측 사진은 실험에 사용된 생장점 사진이고, 도 1의 우측 사진은 4주 후 배발생세포가 유도된 사진이다.
<실시예 3>
유도된 배발생 세포가 현탁배양 단계로 접어들면, 품종에 따라 1/4 ~1/2 MS 배지에 엔에이에이(NAA)를 0.1~0.05mg/L, 제틴리보사이드(Zeatin riboside)를 0.5~2mg/L, 수크로오스를 2%wt, 카세인(Casein)을 0.5g/L로 첨가하여 pH 5.8로 조정된(Autoclave 전 pH 6.3으로 맞춤) 액체 배지에 체세포 0.5g를 접종하고 액체배지 5ml ~ 15ml을 첨가, 회전 배양기에서 90~120rpm으로 배양하여 대량의 체세포배를 유도하여 증식한다(S160). 배양실 온도 25도, 습도는 45%에서 배양한다.
이 단계에서 증식하고자 하는 수량만큼 단기간, 제한된 공간에서 대량으로 무병묘를 생산할 수 있다.
<실시예 4> (유도, 증식된 배발생 세포 분화 단계)
유도, 증식된 체세포배를 1/2MS 배지에 수크로오스 3~6wt%, 한천(plant agar) 0.75wt%, Casein 0.5g/L를 첨가하고, pH 5.8(Autoclave 전 pH 6.3으로 조절) 상태에서 체세포배로부터 구근을 유도하여 준다(S170). 배양실 온도 23도, 습도는 45%를 유지한다.
구근이 유도되면, 1/2MS 배지에 수크로오스 6~9wt%, 한천(plant agar) 0.75wt%, Casein 0.5g/L 배지에 이동하여 직경 5mm~8mm의 무병구를 다량 확보할 수 있다(S180). 배양실 온도 23도, 습도는 45%를 유지한다.
한편 도 2a는 본 발명에 따라 생장점을 이용하여 배발생세포 유도 배양 방법을, 도 2b는 종래기술에 따라 일반적으로 생장점의 배양 방법을 모식적으로 보여주는 그림이다.
이에, 본 발명에 따르면, 초미세한 생장점만을 적출하고 무병 종구를 선택하여 생산할 수 있는 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공할 수 있다.
또한, 생장점을 적출하고, 일반적으로 1개의 구근을 유도하는 것이 아니라 바로 다수의 배발생 세포를 유도하여 증식에 시간을 단축할 수 있는 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공할 수 있다.
또한, 생산성을 향상시켜 개화구로 키우는 (양구)농가에 대량으로 안정적으로 보급할 수 있는 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공할 수 있다.
또한, 생장점에서 바로 배발생 세포로 유도하기 때문에 별도의 배발생 세포를 유도하는 전처리 과정을 생략하여 현탁배양을 통해 급속으로 증식 가능한 백합 구근 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법을 제공할 수 있다
여기서, 본 발명의 일 실시예를 도시하여 설명하였지만, 본 발명의 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 원칙이나 정신에서 벗어나지 않으면서 본 실시예를 변형할 수 있음을 알 수 있을 것이다. 발명의 범위는 첨부된 청구항과 그 균등물에 의해 정해질 것이다.

Claims (8)

  1. 백합 구근에서 생장점을 절취하는 (1)과정과;
    절취한 생장점을 배지에 치상하는 (2)과정과;
    설정기간 후 배발생세포가 발생하면 평판배지에서 증식하는 (3)과정과;
    상기 (3)과정에서 상기 배발생세포의 일부를 채취하여 바이러스를 검증하는 (4)과정과;
    상기 (4)과정에서 바이러스가 검증되지 않은 경우 본격적으로 증식하는 현탁배양을 하는 (5)과정;을 포함하되,
    상기 (2)과정 또는 상기 (3)과정에서 사용되는 배지는 1/4 MS로,
    2,4-D(2,4-dichlorophenoxy acetic acid)가 0.1~0.05mg/L, 젠틴리보사이드(Zeatin riboside)가 0.5~2mg/L, 수크로오스(Sucrose)가 1~2wt%, 0.3wt% 카세인(Casein)이 0.5g/L, 젤라이트(Gelrite)가 0.3wt%로 첨가되는 것을 특징으로 하는 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 (1)과정에서 상기 생장점은, 기외구근에서 절취하는 방법 또는 기내구근에서 절취하는 방법을 포함하고,
    상기 기외구근에서 절취하는 방법은 상기 구근에서 슈트(shoot)를 유도하여 생장점을 절취하며,
    상기 기내구근에서 절취하는 방법은 상기 구근에서 뿌리 및 잎을 제거한 위 인편을 벗겨 절취하는 것을 특징으로 하는 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법.
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 백합 구근에서 생장점을 절취하는 (1)과정과;
    절취한 생장점을 배지에 치상하는 (2)과정과;
    설정기간 후 배발생세포가 발생하면 평판배지에서 증식하는 (3)과정과;
    상기 (3)과정에서 상기 배발생세포의 일부를 채취하여 바이러스를 검증하는 (4)과정과;
    상기 (4)과정에서 바이러스가 검증되지 않은 경우 본격적으로 증식하는 현탁배양을 하는 (5)과정과;
    상기 현탁배양에 접어들면 액체배지에 체세포를 접종하고 배지를 첨가한 후 회전배양기에서 배양하여 대량의 체세포를 유도하여 증식하는 (6)과정;을 포함하되,
    상기 (6)과정에서의 액체배지는 1/4 ~1/2 MS 배지에 엔에이에이(NAA)를 0.1~0.05mg/L, 제틴리보사이드(Zeatin riboside)를 0.5~2mg/L, 수크로오스를 2%wt, 카세인(Casein)을 0.5g/L로 첨가하여 pH 5.8로 조정된(Autoclave 전 pH 6.3으로 맞춤) 것을 포함하며,
    상기 액체배지에 상기 체세포 0.5g를 접종하고 배지 5ml ~ 15ml을 첨가, 상기 회전 배양기에서 90~120rpm으로 배양하는 것을 특징으로 하는 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법.
  6. 삭제
  7. 제5항에 있어서,
    상기 (6)과정의 체세포로부터 구근을 유도하는 (7)과정과;
    유도된 구근을 무병구로 증식하는 (8)과정;를 포함하는 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 (7)과정에서 1/2MS 배지에 수크로오스 3~6wt%, 한천(plant agar) 0.75wt%, Casein 0.5g/L를 첨가하고, pH 5.8(Autoclave 전 pH 6.3으로 조절) 상태에서 체세포배로부터 구근을 유도하며,
    상기 (8)과정에서 1/2MS 배지에 수크로오스 6~9wt%, 한천(plant agar) 0.75wt%, Casein 0.5g/L 배지에 이동하여 직경 5mm~8mm의 상기 무병구를 확보하는 것을 특징으로 하는 체세포 생장점 배양체 급속 증식 방법.
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20070113618A (ko) * 2006-05-25 2007-11-29 씨제이 주식회사 양송이 균사체를 배양하는 방법 및 양송이 균사체 배양용배지
KR20190046554A (ko) * 2017-10-26 2019-05-07 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 체세포배 유래 자구를 인편번식 과정 없이 바로 재배하여 백합 개화구를 조기 생산하는 방법

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