CN106551391B - 一种鹿茸深加工方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种鹿茸深加工方法。本发明以传统保健滋补品鹿为原料，建立了以去骨化鹿茸提取物脂质体及鹿茸骨化物为主要成分的鹿茸组合物制备方法。与传统鹿茸，利用本发明制备的鹿茸组合物不仅保留了鹿茸原有的功效还使鹿茸具有新功能，同时解决了鹿茸服用过程中可能被消化道酶降解的难题，具有广阔的应用前景。

Description

一种鹿茸深加工方法
技术领域
本发明涉及鹿茸，具体地说是一种鹿茸深加工方法。
背景技术
鹿茸为鹿科动物梅花鹿或马鹿的尚未骨化的幼角。鹿茸作为滋补品在我国有悠久的历史，《中医大辞典》中记载鹿茸的功用：壮元阳，补气血，益精髓，强筋骨；主治：虚劳赢瘦，精深倦乏，眩晕，耳聋，目暗，腰膝酸痛，阳痿，滑精；子宫虚冷，崩漏，带下。传统的鹿茸加工方法是“热炸”，即将新鲜鹿茸反复用沸水煮数次，晾干后在烫数次，然后再风干或者烤干。反复煮烫、风干、烤干等工艺的主要是为了使鹿茸脱水易于保存及运输，但是在高温下鹿茸中的活性成分极易变性失活。随着科技发展冷冻干燥逐渐成为鹿茸加工的一种方式，冷冻干燥避免了热炸对鹿茸活性组分的破坏。文献(不同加工工艺鹿茸的蛋白成分和活性，中药材，2008,31:11-13)比较了传统热炸、冷冻干燥、冷冻等不同加工工艺对鹿茸蛋白含量及其生物活性，结果表明与热炸相比，冷冻干燥和冷冻均能较大程度地保持了鹿茸的生物活性，冷冻干燥鹿茸与热炸鹿茸相比对大鼠成骨样细胞增殖活性提高了22倍，抑制肝癌细胞活性提高了1.4倍。但是无论是热炸还是冷冻干燥所得到的成品都非常坚硬，需经过磨粉、煎煮等进一步加工才能食用，营养成分不能被人体充分吸收利用。
文献(专利：一种鲜鹿茸酶降解提取有效成分的方法，申请号201110191774.3)公布了将鹿茸磨粉后酶解制备有效成分的方法，这类方法均是将鹿茸磨粉酶解、分离、纯化，获得鹿茸提取物，所获得的鹿茸酶解物进入人体消化系统后易于被消化道蛋白酶降解而失去活性，而具有增强骨密度及补钙功能的鹿茸骨粉也被浪费，使鹿茸失去其主要功能——强筋骨。
发明内容
本发明的目的是提供一种鹿茸深加工方法，本发明是一个多技术的集成，将鹿茸分别制备成为去骨化鹿茸脂质体及鹿茸骨粉，再将这两个组分混合，既保留了鹿茸原有的生物功能，又增加了了鹿茸新功能，同时脂质体对鹿茸提取物的包埋作用使其具备抵御消化系统降解能力。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种鹿茸深加工方法，将鹿茸酶解、分离成为去骨化鹿茸提取物以及鹿茸骨粉两个组分，去骨化鹿茸提取物制备成为去骨化鹿茸脂质体，去骨化鹿茸脂质体和鹿茸骨粉混合成为鹿茸活性组合物。
以上所述的鹿茸深加工方法，将鹿茸粉碎为100～500目的粉末，加入pH 2～7的磷酸缓冲液溶，鹿茸质量与缓冲液的体积比为1：1～10(g：ml)；鹿茸与缓冲液搅拌均匀后加入鹿茸质量0.01～5％的蛋白酶，在20～80℃温度下酶解0.5～24小时。酶解结束后升温至80～100℃并保持10～60分钟。酶解液以1000－10000转/分钟的速度离心10－60分钟；上清冷冻干燥得到去骨化鹿茸提取物，沉淀冷冻干燥后为鹿茸骨粉。
取干燥磷脂与胆固醇混合物，磷脂与胆固醇的质量比为1：0.01～1，混合物溶于氯仿中并混合均匀，混合物与氯仿的质量体积比为1:0.1～20(mg：ml)；混合溶液于20～80℃真空旋转蒸发，形成一层脂膜。加入去离子水水化脂膜，磷脂与胆固醇混合物质量与去离子水体积的比例为1：0.1～10(mg：ml)，加入直径0.5～3mm的玻璃珠于30～90℃搅拌3～60分钟，在室温下搅拌5～60分钟，形成脂质体。上述制备的去骨化鹿茸提取物溶于pH 7.4磷酸缓冲液中，制备成为浓度为5～20mg/ml的溶液；取去骨化鹿茸提取物加入脂质体混合，去骨化鹿茸提取物与脂质体的体积比为1：1～50。混合物分散均匀后冷冻干燥，加入去离子水水化，去离子水体积是去骨化鹿茸提取物溶液体积的0.5～20倍，并在30～50℃孵育5～30分钟。混合物于4℃、30000g转速下离心120分钟，收集上清即为去骨化鹿茸脂质体。
去骨化鹿茸脂质体与鹿茸骨粉按照第一步提取收率的比例混合，制备成为鹿茸活性组合物。
所述蛋白水解酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等蛋白酶中的一种或几种组合。
与传统鹿茸，利用本发明制备的鹿茸组合物不仅保留了鹿茸原有的功效还使鹿茸具有新功能，同时解决了鹿茸服用过程中可能被消化道酶降解的难题，具有广阔的应用前景。
本发明具有如下优点：
1.不仅保留了鹿茸固有的生物功能、还赋予了新的功能。本发明根据鹿茸成分特点，通过酶解法将鹿茸制备成为水溶性及不溶性两个组分；酶解物具有降血压、降血糖、抗氧化等新功能，脂质体包埋技术使鹿茸酶解物具有抵御消化道酶降解的能力；鹿茸骨粉保留了鹿茸原有了强筋骨功能，因此去骨化鹿茸脂质体与鹿茸骨粉混合物不仅保留了鹿茸固有的生物功能，又赋予了新的功能。
2.反应条件温和、方法简便可行。本发明通过活性肽的制备是通过酶解的方法，反应条件温和，既可制备活性肽又可保留鹿茸中原有的活性组分，反应方法简单可行。
3.具有良好的应用前景。本发明按照传统滋补保健品鹿茸的功效，将鹿茸按照功能活性进行了组分精制，与直接食用鹿茸相比，通过本工艺制得的活性成分更容易被人体吸收、食用更方便，因此作为药品、功能食品、食品具有广泛的应用前景。
具体实施方式
实施例1
以新鲜梅花鹿鹿茸为原料，按照以下工艺制备：
将1公斤鹿茸粉碎为100目的粉末，加入1升pH 2的磷酸缓冲液，搅拌均匀，加入鹿茸质量10克的胃蛋白酶，在20℃温度下酶解0.5小时。酶解结束后升温至80℃并保持10分钟。酶解液以1000转/分钟的速度离心10分钟；上清冷冻干燥得到去骨化鹿茸提取物，沉淀冷冻干燥后为鹿茸骨粉。
取50g干燥磷脂与胆固醇混合物，磷脂与胆固醇的质量比为1：1，混合物溶于5升氯仿中并混合均匀，于30℃真空旋转蒸发，形成一层脂膜。用10升去离子水水化脂膜，加入直径0.5～3mm的玻璃珠于30℃搅拌20分钟，再在室温下搅拌5分钟，形成脂质体。上述制备的去骨化鹿茸提取物溶于pH 7.4的磷酸缓冲液中，制备成为浓度为5mg/ml的溶液；取1升的去骨化鹿茸提取物溶液加入1升脂质体混合。混合物分散均匀后冷冻干燥，加入2升去离子水水化，并在30℃孵育5分钟。混合物于4℃、30000g转速下离心120分钟，收集上清即为去骨化鹿茸脂质体。
去骨化鹿茸脂质体与鹿茸骨粉按照原提取物比例混合，制备成为鹿茸活性组合物。
实施例2
以新鲜马鹿鹿茸为原料，按照以下工艺制备：
将100克鹿茸粉碎为500目的粉末，加入1升pH 7的磷酸缓冲液溶，搅拌均匀后加入5克的木瓜蛋白酶，在80℃温度下酶解24小时。酶解结束后升温至100℃并保持60分钟。酶解液以10000转/分钟的速度离心60分钟；上清冷冻干燥得到去骨化鹿茸提取物，沉淀冷冻干燥后为鹿茸骨粉。
取50mg干燥磷脂与胆固醇混合物，磷脂与胆固醇的质量比为1：0.1，混合物溶于50ml氯仿中并混合均匀，于80℃真空旋转蒸发，形成一层脂膜。用500ml去离子水水化脂膜，加入直径0.5～3mm的玻璃珠于90℃搅拌60分钟，再在室温下搅拌60分钟，形成脂质体。上述制备的去骨化鹿茸提取物溶于pH 7.4磷酸缓冲液中，制备成为浓度为20mg/ml的去骨化鹿茸提取物溶液；取50ml的去骨化鹿茸提取物溶液加入500ml脂质体混合。混合物分散均匀后冷冻干燥，加入1000ml去离子水水化，并在50℃孵育30分钟。混合物于4℃、30000g转速下离心120分钟，收集上清即为去骨化鹿茸脂质体。
去骨化鹿茸脂质体与鹿茸骨粉按照原提取物比例混合，制备成为鹿茸活性组合物。
实施例3
以干燥的梅花鹿鹿茸为原料，按照以下工艺制备：
将100克鹿茸粉碎为300目的粉末，加入500ml、pH6的磷酸缓冲液溶，搅拌均匀后加入鹿茸质量10克的胰蛋白酶，在40℃温度下酶解5小时。酶解结束后升温至80℃并保持20分钟。酶解液以5000转/分钟的速度离心20分钟；上清冷冻干燥得到去骨化鹿茸提取物，沉淀冷冻干燥后为鹿茸骨粉。
取50mg干燥磷脂与胆固醇混合物，磷脂与胆固醇的质量比为1：0.01，混合物溶于1000ml氯仿中并混合均匀，于40℃真空旋转蒸发，形成一层脂膜。加入500ml去离子水水化脂膜，加入直径0.5～3mm的玻璃珠于90℃搅拌60分钟，再在室温下搅拌60分钟，形成脂质体。上述制备的去骨化鹿茸提取物溶于pH 7.4磷酸缓冲液中，制备成为浓度为20mg/ml的去骨化鹿茸提取物溶液；取50ml的去骨化鹿茸提取物溶液加入500ml脂质体混合。混合物分散均匀后冷冻干燥，加入1000ml去离子水水化，并在50℃孵育15分钟。混合物于4℃、30000g转速下离心120分钟，收集上清即为去骨化鹿茸脂质体。
去骨化鹿茸脂质体与鹿茸骨粉按照原提取物比例混合，制备成为鹿茸活性组合物。
实施例4
以干燥的马鹿鹿茸为原料，按照以下工艺制备：
将100克鹿茸粉碎为500目的粉末，加入鹿茸质量1升、pH6的磷酸缓冲液溶，搅拌均匀后加入5克的木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶混合物，在60℃温度下酶解10小时。酶解结束后升温至90℃并保持30分钟。酶解液以8000转/分钟的速度离心40分钟；上清冷冻干燥得到去骨化鹿茸提取物，沉淀冷冻干燥后为鹿茸骨粉。
取50mg干燥磷脂与胆固醇混合物，磷脂与胆固醇的质量比为1：0.5，混合物溶于5ml氯仿中并混合均匀，于60℃真空旋转蒸发，形成一层脂膜。用300ml去离子水水化脂膜，加入直径0.5～3mm的玻璃珠于80℃搅拌20分钟，再在室温下搅拌10分钟，形成脂质体。上述制备的去骨化鹿茸提取物溶于pH 7.4磷酸缓冲液中，制备成为浓度为10mg/ml的溶液；取5ml的去骨化鹿茸提取物溶液加入100ml脂质体混合。混合物分散均匀后冷冻干燥，加入100ml去离子水水化，并在40℃孵育20分钟。混合物于4℃、30000g转速下离心120分钟，收集上清即为去骨化鹿茸脂质体。
去骨化鹿茸脂质体与鹿茸骨粉按照原提取物比例混合，制备成为鹿茸活性组合物。

Claims (2)

1.一种鹿茸深加工方法，其特征在于：将鹿茸酶解、分离成为去骨化鹿茸提取物以及鹿茸骨粉两个组分，去骨化鹿茸提取物制备成为去骨化鹿茸脂质体，去骨化鹿茸脂质体和鹿茸骨粉混合成为鹿茸活性组合物，具体操作如下：
(1)将鹿茸粉碎为100～500目的粉末，加入pH 2～7的磷酸缓冲溶液，鹿茸质量与缓冲液的体积比为1g：1～10mL；鹿茸与缓冲液搅拌均匀后加入鹿茸质量0.01～5％的蛋白酶，在20～80℃温度下酶解0.5～24小时；酶解结束后升温至80～100℃并保持10～60分钟；酶解液以1000－10000转/分钟的速度离心10－60分钟；上清冷冻干燥得到去骨化鹿茸提取物，沉淀冷冻干燥后为鹿茸骨粉；
(2)取干燥磷脂与胆固醇混合物，磷脂与胆固醇的质量比为1：0.01～1，混合物溶于氯仿中并混合均匀，混合物与氯仿的质量体积比为1mg:0.1～20mL；混合溶液于20～80℃真空旋转蒸发，形成一层脂膜；加入去离子水水化脂膜，磷脂与胆固醇混合物质量与去离子水体积的比例为1mg：0.1～10mL，加入直径0.5～3mm的玻璃珠于30～90℃搅拌3～60分钟，在室温下搅拌5～60分钟，形成脂质体；上述步骤(1)制备的去骨化鹿茸提取物溶于pH 6～8磷酸缓冲液中，制备成为浓度为5～20mg/mL的溶液；取去骨化鹿茸提取物溶液加入脂质体混合，去骨化鹿茸提取物溶液与脂质体的体积比为1：1～50；混合物分散均匀后冷冻干燥，加入去离子水水化，去离子水体积是去骨化鹿茸提取物溶液体积的0.5～20倍，并在30～50℃孵育5～30分钟；混合物于4℃、10000～30000g转速下离心60～120分钟，收集上清即为去骨化鹿茸脂质体；
(3)步骤(2)制备的去骨化鹿茸脂质体与步骤(1)制备的鹿茸骨粉混合，制备成为鹿茸活性组合物。
2.按照权利要求1所述的加工方法，其特征在于：所述蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶中的一种或二种以上组合。
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