CN107752005A - 一种鹿茸双酶解提取方法 - Google Patents
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Abstract
一种鹿茸双酶解提取方法,属于特种经济动物鹿产品的深加工技术领域。本发明所提供的方法为将新鲜鹿茸或者干鹿茸除毛后切片,然后加入蒸馏水进行研磨;将经过研磨后的液体先后用胃蛋白酶和胰蛋白酶进行消化;其中胃蛋白酶按照质量比为鹿茸干物质:胃蛋白酶=(50‑70):1添加,胰蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胰蛋白酶=(175‑200):1添加;将经过消化后的液体进行干燥处理,获得鹿茸提取物。本发明的鹿茸提取率超过75%,相比于传统提取方法提高了近4倍。本发明方法提取的鹿茸提取物可以用于制备保健品。
Description
技术领域
本发明涉及一种鹿茸双酶解提取方法,属于特种经济动物鹿产品的深加工技术领域。
背景技术
鹿茸雄性梅花鹿或马鹿未骨化的幼角,是我国名贵的传统中药,与人参齐名,被称为动物药之首。《本草纲目》曰:生精补髓、养血益阳、强健筋骨、治一切虚损虚痢等。常常用于“壮元阳,补气血,益精髓,强筋骨。治虚劳羸瘦、精神倦乏、眩晕、耳聋、目暗、腰膝酸痛、阳痿、滑精、子宫虚冷、崩漏、带下。”现在生物学认为:鹿茸能增强神经兴奋性,促进恢复神经系统和改善神经、肌肉系统之功能;改善心血管系统的功能;对青春期的性功能障碍,壮老年期的前列腺萎缩症、女性更年期障碍的治疗均有效;具有较强的抗疲劳作用,能增强耐寒能力;使血液中血红蛋白增加;能兴奋离体肠管及子宫,增强肾脏的利尿功能。
然而目前鹿茸的应用还处在原材料初加工阶段,如:切片直接服用、煎煮或者泡酒。鹿茸服用困难,加之腥味较大,因此,直接服用的方式已经很难满足现代消费者的需求。虽然市场上也有鹿茸精、鹿茸口服液等提取产品,但是大多采用的是传统的水煮法进行提取,由于鹿茸属于动物组织,只有极少量的成分能够用于水或者酒精,因此采用传统水煮方法的提取率很低。
发明内容
为解决现有技术中鹿茸提取方法的提取率低的问题,本发明提供了一种鹿茸双酶解提取方法,采用的技术方案如下:
本发明的目的在于提供一种鹿茸双酶解提取方法,该方法是包括如下步骤:
1)将新鲜鹿茸或干鹿茸除毛后切片,然后加入蒸馏水进行研磨;
2)将经过步骤1)研磨后的悬液先后用胃蛋白酶和胰蛋白酶进行消化;其中:胃蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胃蛋白酶=(50-70):1添加,胰蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胰蛋白酶=(175-200):1添加;所述新鲜鹿茸按照其1/3的质量核算为干鹿茸;
3)将经过步骤2)消化后的液体进行干燥处理,获得鹿茸提取物。
进一步地,步骤1)研磨是按照质量比为干鹿茸:水=1:9加入蒸馏水,然后通过胶体磨研磨至颗粒细度为10μm-50μm。
进一步地,所述干鹿茸是指经过65℃烘干至恒重获得的鹿茸。
进一步地,步骤2)中胃蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胃蛋白酶=(55-65):1,胰蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胰蛋白酶=(180-190):1。
进一步地,步骤2)中胃蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胃蛋白酶=60:1,胰蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胰蛋白酶=185:1。
更进一步地,步骤2)中胃蛋白酶消化完成后进行灭酶处理,在胰蛋白酶消化完成后进行灭酶处理;所述灭酶处理是指:将消化后的液体升温至95℃以上,维持至少15min。
进一步地,步骤2)所述胃蛋白酶的消化条件为37℃、pH值1.0-2.0、恒温消化12h以上。
进一步地,步骤2)所述胰蛋白酶的消化条件为37℃、pH值7.8-8.4、恒温消化2小时以上。
进一步地,步骤3)中,在干燥处理前,先将消化后的液体进行沉降处理成滤液和滤渣,然后对滤液进行喷雾干燥。
进一步地,所述沉降处理的方式为离心或膜过滤。
上述任意一项所述方法获得的鹿茸提取物用于制备保健品。
例如:
1)将按照本发明方法制备的鹿茸提取物能够溶于酒基中,滤膜过滤后,形成高溶解度鹿茸酒;与其它保健药材制备的酒混合,即可形成某种特殊功效的保健酒。
2)将按照本发明方法制备的鹿茸提取物溶于制备口服液的基液中,滤膜过滤后,按照口服液制备所需的流程,制备成高鹿茸含量口服液。
3)将按照本发明方法制备的水溶性速溶鹿茸提取物和醇溶性速溶鹿茸提取物,分别按照压片工艺制备成片剂,即可制备成用于水溶性速溶鹿茸片和醇溶性速溶鹿茸片,咀嚼服用,开水冲服,或者加入白酒中,将普通白酒瞬时制成鹿茸酒。
4)将按照本发明方法制备的鹿茸提取物作为制备含鹿茸成分的保健品、中成药的鹿茸提取物原材料。
5)将按照本发明方法制备的鹿茸提取物制备老汤,直接或加入其它药膳材料后,制备药膳食品。该方法与传统方法相比的好处是,更多的鹿茸溶于老汤中,大幅度提高药膳食品的效果。
本发明有益效果:
1、本发明在鹿茸前期处理过程中引入了胶体研磨技术,是为了最大化的将鹿茸粉碎,形成10μm-50μm的细度的颗粒(在该细度条件下鹿茸能够充分得到酶解),增加鹿茸与酶接触的表面积,提高酶解效率。
2、在现有鹿茸酶解提取方法中,常常采用非消化酶。本发明分别采用胃蛋白酶和胰蛋白酶进行酶解,该种方法能够有效避免营养成分和活性成分的流失,并充分保留营养成分:首先,本方法将不可溶的大分子降解成可溶性的小分子,不仅能够使得酶解后制备的鹿茸提取物具有高溶解度。其次,该方法没有引入非哺乳动物消化酶,保证了鹿茸中的活性成分不受非正常消化降解的破坏,减少了营养成分和活性成分的损失,最大限度的保存了鹿茸中的活性成分和营养成分,进而最大限度的保存了鹿茸粉的保健效果。
3、本发明所述的方法克服了现有鹿茸提取率低的难题,并且取得了预料不到的技术效果:本发明经过双酶解后鹿茸的提取率达到75%以上,相比于传统提取工艺,本发明方法的提取率提高了近4倍;本发明方法与现有方法相比,能够更多的保留鹿茸中的活性成分和营养成分。本发明方法为鹿茸深加工产品的开发提供了新的方法。
4、现有技术中多采用将鹿茸先溶于水,将可溶性大蛋白溶解出来,然后再将可溶性大蛋白水解成小肽,而本发明方法是直接对鹿茸进行酶解,可以将鹿茸中的不溶于水的蛋白水解成可溶性的蛋白。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明,但本发明不受实施例的限制。
以下实施例中提取率的计算公式如下:
δ=(A-B/A)×100%
δ:提取率;A:提取前干鹿茸的重量(65℃烘干至恒重);B:提取后渣子的重量(65℃烘干至恒重)。
实施例1:
本实施例提供了一种干鹿茸双酶解提取方法,该方法是通过下述步骤实现的:
1)胶体磨研磨:将干鹿茸除毛,切片;然后按照质量比干鹿茸:水=1:9的比例加入蒸馏水,通过胶体磨研磨,胶体磨颗粒细度为10μm-50μm。
2)消化:将研磨后的液体用10M的浓HCl调节PH至2.0,通过水浴加热至37℃,并维持恒温;按干鹿茸:胃蛋白酶=50:1(质量比)的比例加入胃蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化12小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活;然后将温度降至37℃后,用20M的浓NaOH调节PH至8.4,按干鹿茸:胰蛋白酶=175:1(质量比)的比例加入胰蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化2小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活。
3)沉降和喷雾干燥:将消化后的液体进行离心(少量可以离心,大量生产可以用膜过滤),获得滤液和滤渣,除去不溶性物质,将滤液通过喷雾干燥,制备成粉剂,获得鹿茸提取物。
本实施例中鹿茸的提取率高达76.8%。
实施例2
本实施例提供了一种干鹿茸双酶解提取方法,该方法是通过下述步骤实现的:
1)胶体磨研磨:将干鹿茸除毛,切片;然后按照质量比干鹿茸:水=1:9的比例加入蒸馏水,通过胶体磨研磨,胶体磨颗粒细度为10μm-50μm。
2)消化:将研磨后的液体用10M的浓HCl调节PH至2.0,通过水浴加热至37℃,并维持恒温;按干鹿茸:胃蛋白酶=55:1(质量比)的比例加入胃蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化12小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活;然后将温度降至37℃后,用20M的浓NaOH调节PH至8.4,按干鹿茸:胰蛋白酶=180:1(质量比)的比例加入胰蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化2小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活。
3)沉降和喷雾干燥:将消化后的液体进行离心(少量可以离心,大量生产可以用膜过滤),获得滤液和滤渣,除去不溶性物质,将滤液通过喷雾干燥,制备成粉剂,获得鹿茸提取物。
本实施例中鹿茸的提取率高达76.7%。
实施例3
本实施例提供了一种干鹿茸双酶解提取方法,该方法是通过下述步骤实现的:
1)胶体磨研磨:将干鹿茸除毛,切片;然后按照质量比干鹿茸:水=1:9的比例加入蒸馏水,通过胶体磨研磨,胶体磨颗粒细度为10μm-50μm。
2)消化:将研磨后的液体用10M的浓HCl调节PH至2.0,通过水浴加热至37℃,并维持恒温;按干鹿茸:胃蛋白酶=65:1(质量比)的比例加入胃蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化12小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活;然后将温度降至37℃后,用20M的浓NaOH调节PH至8.4,按干鹿茸:胰蛋白酶=190:1(质量比)的比例加入胰蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化2小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活。
3)沉降和喷雾干燥:将消化后的液体进行离心(少量可以离心,大量生产可以用膜过滤),获得滤液和滤渣,除去不溶性物质,将滤液通过喷雾干燥,制备成粉剂,获得鹿茸提取物。
本实施例中鹿茸的提取率高达76.2%。
实施例4
本实施例提供了一种干茸双酶解提取方法,该方法是通过下述步骤实现的:
1)胶体磨研磨:将干鹿茸除毛,切片;然后按照质量比干鹿茸:水=1:9的比例加入蒸馏水,通过胶体磨研磨,胶体磨颗粒细度为10μm-50μm。
2)消化:将研磨后的液体用10M的浓HCl调节PH至2.0,通过水浴加热至37℃,并维持恒温;按鲜鹿茸:胃蛋白酶=70:1(质量比)的比例加入胃蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化12小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活;然后将温度降至37℃后,用20M的浓NaOH调节PH至8.4,按干鹿茸:胰蛋白酶=200:1(质量比)的比例加入胰蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化2小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活。
3)沉降和喷雾干燥:将消化后的液体进行离心(少量可以离心,大量生产可以用膜过滤),获得滤液和滤渣,除去不溶性物质,将滤液通过喷雾干燥,制备成粉剂,获得鹿茸提取物。
本实施例中鹿茸的提取率高达75.9%。
实施例5
本实施例提供了一种干茸双酶解提取方法,该方法是通过下述步骤实现的:
1)胶体磨研磨:将干鲜鹿茸除毛,切片;然后按照质量比鲜鹿茸:水=1:3的比例加入蒸馏水,通过胶体磨研磨,胶体磨颗粒细度为10μm-50μm。
2)消化:将研磨后的液体用10M的浓HCl调节PH至2.0,通过水浴加热至37℃,并维持恒温;按鲜鹿茸:胃蛋白酶=60:1(质量比)的比例加入胃蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化12小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活;然后将温度降至37℃后,用20M的浓NaOH调节PH至8.4,按干鹿茸:胰蛋白酶=185:1(质量比)的比例加入胰蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化2小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活。
3)沉降和喷雾干燥:将消化后的液体进行离心(少量可以离心,大量生产可以用膜过滤),获得滤液和滤渣,除去不溶性物质,将滤液通过喷雾干燥,制备成粉剂,获得鹿茸提取物。
本实施例中鹿茸的提取率高达76.6%。
实施例6
本实施例提供了一种新鲜茸双酶解提取方法,该方法是通过下述步骤实现的:
1)胶体磨研磨:将新鲜鹿茸除毛,切片;然后按照质量比鲜鹿茸:水=1:3的比例加入蒸馏水,通过胶体磨研磨,胶体磨颗粒细度为10μm-50μm。
2)消化:将研磨后的液体用10M的浓HCl调节PH至2.0,通过水浴加热至37℃,并维持恒温;按鲜鹿茸:胃蛋白酶=60:1(质量比)的比例加入胃蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化12小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活;然后将温度降至37℃后,用20M的浓NaOH调节PH至8.4,按干鹿茸:胰蛋白酶=185:1(质量比)的比例加入胰蛋白酶,搅拌均匀,37℃恒温消化2小时;升温至95℃以上,至少15分钟,使酶灭活。
3)沉降和喷雾干燥:将消化后的液体进行离心(少量可以离心,大量生产可以用膜过滤),获得滤液和滤渣,除去不溶性物质,将滤液通过喷雾干燥,制备成粉剂,获得鹿茸提取物。
本实施例中鹿茸的提取率高达78.2%。
通过以下实验证明本发明所能取得的有益效果:
对照实验1:本实验提供了一种传统中药材干鹿茸的提取方法,该方法是通过下述步骤实现的:
1)粉碎:干鹿茸去毛,切片,烘干,粉碎机粉碎,过100目筛子。
2)提取:将上述粉碎的鹿茸粉按照1:10的料液比加入蒸馏水,加热至沸腾,并保持恒温提取2小时;按相同程序提取5次,合并滤液。
3)干燥:喷雾干燥,获得鹿茸提取物;将滤渣烘干,计算提取率为15.4%。
对照实验2:本实验提供了一种传统新鲜鹿茸的提取方法,该方法是通过下述步骤实现的:
1)粉碎:鹿茸去毛,切片,冻干,粉碎机粉碎,过100目筛子。
2)提取:将上述粉碎的鹿茸粉按照1:3的料液比加入蒸馏水,加热至沸腾,并保持恒温提取2小时;按相同程序提取5次,合并滤液。
3)干燥:喷雾干燥,获得鹿茸提取物;将滤渣烘干,计算提取率为18.6%。
对照试验3、本实验使用董万超等在文章《梅花鹿茸蛋白质酶法水解研究》中提供的酶解最优化方法,测定鹿茸酶解的提取率,具体方法如下:
1)粉碎:鹿茸去毛,切片,冻干,粉碎机粉碎,配制成7.5%的混浊液。
2)酶解:最佳酶解调剂如下:胰蛋白酶底物浓度比6000u/g,温度45℃、pH=8.0,酶
解时间6h。
3)95度15分钟终止酶活。
4)4 000r/min条件下离心15min,分离滤液和滤渣;将滤渣烘干,计算提取率为43.8%;
将实施例1-4和对照实验1-3的溶解度进行比较,结果如表1所示。
表1实施例1-4与对照实验1-3效果比较
对照试验1为利用传统方法提取干鹿茸,对照试验2位利用传统方法提取新鲜鹿茸,对照试验3为单独采用胰蛋白酶酶解的,通过对比表1中对照实验1、照实验2和实施例1-5可知,本发明方法可以显著提高鹿茸的提取率,相比于传统方法提高了近4倍;通过对比对照实验3和实施例1-5可知,本发明采用双酶酶解超过胰蛋白酶单酶解,可以显著提高鹿茸的提取率。
通过比较实施例1-5可知,当干鹿茸与胃蛋白酶的质量比为60:1且干鹿茸与胰蛋白酶的质量比为185:1时,提取率已经达到一个相对较好的水平,当继续增加胃蛋白酶和胰蛋白酶的添加量时,提取率已经升高的不明显了,因此综合考虑,选择干鹿茸与胃蛋白酶的质量比为60:1且干鹿茸与胰蛋白酶的质量比为185:1时为最优方案。
将本发明方法提取获得的鹿茸提取物溶于40%乙醇发现,本发明方法获得的鹿茸提取物能够全部溶于40%乙醇。
通过比较实施例5和实施例6可知,新鲜鹿茸比干鹿茸的提取率更高。
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上,但其并非用以限定本发明,任何熟悉此技术的人,在不脱离本发明的精神和范围内,都可以做各种改动和修饰,因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
Claims (10)
1.一种鹿茸双酶解提取方法,其特征在于,所述提取方法包括如下步骤:
1)将新鲜鹿茸或者干鹿茸除毛后切片,然后加入蒸馏水进行研磨;
2)将经过步骤1)研磨后的液体先后用胃蛋白酶和胰蛋白酶进行消化;其中:胃蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胃蛋白酶=(50-70):1,胰蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胰蛋白酶=(175-200):1;所述新鲜鹿茸按照其1/3的质量核算为干鹿茸;
3)将经过步骤2)消化后的液体进行干燥处理,获得鹿茸提取物。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)研磨是按照质量比为干鹿茸:水=1:9加入蒸馏水,然后通过胶体磨研磨至颗粒细度为10μm-50μm。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)所述干鹿茸是指经过65℃烘干至恒重获得的鹿茸。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中胃蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胃蛋白酶=(55-65):1,胰蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胰蛋白酶=(180-190):1。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中胃蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胃蛋白酶=60:1,胰蛋白酶按照质量比为干鹿茸:胰蛋白酶=185:1。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中胃蛋白酶消化完成后进行灭酶处理,在胰蛋白酶消化完成后进行灭酶处理;所述灭酶处理是指:将消化后的液体升温至95℃以上,维持至少15min。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)所述胃蛋白酶的消化条件为37℃、pH值1.0-2.0、恒温消化12h以上。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)所述胰蛋白酶的消化条件为37℃、pH值7.8-8.4、恒温消化2小时以上。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)中,在干燥处理前,先将消化后的液体进行沉降处理成滤液和滤渣,然后对滤液进行喷雾干燥。
10.权利要求1-9中的任意一项所述方法获得的鹿茸提取物用于制备保健品。
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