CN106525996A

CN106525996A - 一种用气相色谱技术分离测定盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的方法

Info

Publication number: CN106525996A
Application number: CN201610836227.9A
Authority: CN
Inventors: 孙冬雪; 王宇杰
Original assignee: Beijing Wanquan Dezhong Medical Biological Technology Co Ltd
Current assignee: Beijing Wanquan Dezhong Medical Biological Technology Co Ltd
Priority date: 2016-09-21
Filing date: 2016-09-21
Publication date: 2017-03-22
Anticipated expiration: 2036-09-21
Also published as: CN106525996B

Abstract

本发明属分析化学领域，本发明公开了一种用气相色谱技术分离检测盐酸鲁拉西酮中间体3‑(1‑piperazinyl)‑1,2‑benzisothiazole有关物质的方法，该方法采用甲基聚硅氧烷类中等极性毛细管色谱柱，氢火焰离子化检测器，可以定量测定盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的含量，从而有效控制合成盐酸鲁拉西酮过程中反应物的纯度，减少副反应的发生和杂质的生成，提高产物收率。本发明方法分离检测快，专属性强，准确度高，操作简便。

Description

一种用气相色谱技术分离测定盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的方法

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及气相色谱技术分离测定盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的方法。

背景技术

盐酸鲁拉西酮是一种具有双重作用的新型抗精神病药物，它对5-HT2A受体和多巴胺D2受体均具有高度亲和力，对精神病患者的阳性和阴性症状均具有显著疗效。盐酸鲁拉西酮化学名为（3aR,4S,7R,7aS）-2-｛（1R,2R）-2-［4-（1,2-苯并异噻唑-3-基）哌嗪-1-亚甲基］环己基甲基｝六氢化-4,7-桥亚甲基-2H-异吲哚-1,3-二酮盐酸盐，分子式为C₂₈H₃₆N₄O₂S·HCl。盐酸鲁拉西酮中间体化学名3-(1-piperazinyl)-1,2-benzisothiazole，分子式为C₁₁H₁₃N₃S，结构式为：

在合成盐酸鲁拉西酮的过程中，需要控制一些重要中间体的纯度，以减少副反应的发生和杂质的生成，从而提高产物收率和纯度。盐酸鲁拉西酮中间体3-(1-piperazinyl)-1,2- benzisothiazole的合成过程中可能引入的杂质有哌嗪、正丁醇和乙酸乙酯。

盐酸鲁拉西酮中间体中的杂质去除不完全，将会影响最终药物纯度和质量。因此，实现分离测定盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质，保证合成盐酸鲁拉西酮过程中反应物的纯度，减少副反应的发生，提高产物收率和纯度，在盐酸鲁拉西酮的生产及其质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离测定盐酸鲁拉西酮中间体3-(1-piperazinyl)-1,2-benzisothiazole有关物质的方法，从而实现对盐酸鲁拉西酮中间体纯度的有效控制，减少副反应的发生，提高产物纯度和收率。

本发明所述的一种测定盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的方法，是利用气相色谱技术，用合适的溶剂将样品溶解，采用聚硅氧烷类毛细管色谱柱；

上述所说的溶剂可以为二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺和四氢呋喃中的一种或几种。

上述所说的色谱柱选自Agilent、OHIO VALLEY或SGE等品牌的色谱柱。

上述所说的色谱柱为中等极性或极性甲基聚硅氧烷类毛细管色谱柱。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

1）取盐酸鲁拉西酮适量，加二甲基亚砜溶解制成每1ml中含盐酸鲁拉西酮100mg的溶液，作为供试品溶液；另取哌嗪、正丁醇和乙酸乙酯适量，加二甲基亚砜溶解制成每1ml中含哌嗪、正丁醇和乙酸乙酯各约0.5mg的溶液，作为对照品溶液；

2）设置进样口温度为150~200℃，载气流速为0.5~2.0mL/min，程序升温法，升温程序为初始温度50℃，维持3~5min，以每分钟5℃~10℃的升温速率至180℃，维持5~10min，检测器温度为250~320℃，分流比为1:1~50:1；

3）取1）的样品溶液1～3μL，注入气相色谱仪，采用外标法计算各有关物质的含量，完成盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的分离测定。其中：

气相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为Agilent 7890A气相色谱仪

检测器：氢火焰离子化检测器；

色谱柱：DB-624毛细管色谱柱（Agilent，30m´0.32mm, 1.8mm）；

进样口温度：180℃；

检测器温度：250℃；

载气（氮气）流速：1.0mL/min；

分流比：10:1；

进样体积：1μL

柱箱升温程序：

本发明利用气相色谱技术，采用甲基聚硅氧烷类中等极性毛细管色谱柱（30m´0.32mm, 1.8mm），能快速有效地分离测定盐酸鲁拉西酮中间体的有关物质。本发明解决了盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的分离测定问题，从而减少了合成盐酸鲁拉西酮过程中副反应的发生，提高了产物的收率，结果见附图1~6。

附图说明：

图1为实施例1时空白溶剂（二甲基亚砜）的气相色谱图；

图2为实施例1时盐酸鲁拉西酮中间体各有关物质气相色谱图；

图3为实施例1时盐酸鲁拉西酮中间体气相色谱图；

图4为实施例1时盐酸鲁拉西酮中间体中加入了各有关物质的气相色谱图；

图5为实施例2时盐酸鲁拉西酮中间体各有关物质气相色谱图；

图6为实施例3时盐酸鲁拉西酮中间体各有关物质气相色谱图。

具体实施方式：

以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。以下通过实例形式，对本发明涉及的盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质检测方法作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1

仪器与条件

色谱仪：Agilent 7890A气相色谱仪；

检测器：氢火焰离子化检测器；

色谱柱：DB-624毛细管色谱柱（Agilent，30m´0.32mm, 1.8mm）；

进样口温度：180℃；

检测器温度：250℃；

载气（氮气）流速：1.0mL/min；

分流比：10:1；

进样体积：1μL。

柱箱升温程序：

升温速率（℃/min）	温度（℃）	保持时间（min）
			/	50	5
10	180	7

实验步骤：

取盐酸鲁拉西酮适量，加二甲基亚砜溶解制成每1ml中含盐酸鲁拉西酮100mg的溶液，作为供试品溶液；取哌嗪、正丁醇和乙酸乙酯适量，加二甲基亚砜溶解制成每1ml中含哌嗪、正丁醇和乙酸乙酯各约0.5mg的溶液，作为对照品溶液；另取二甲基亚砜作为空白溶液。按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。结果见附图1~4，图1为空白溶剂色谱图；图2中保留时间8.501min、10.494min、和14.898min的色谱峰分别为乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪。图3中保留时间8.497min的色谱峰为乙酸乙酯，14.894min的色谱峰为哌嗪。图4中保留时间8.498min、10.489min、和14.896min的色谱峰分别为乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪。图1~图4表明：本发明的方法，可以有效地将盐酸鲁拉西酮中间体各有关物质分离，并可以准确定量检测各有关物质。

实施例2

仪器与条件

色谱仪：Agilent 7890A气相色谱仪；

检测器：氢火焰离子化检测器；

色谱柱：DB-624毛细管色谱柱（Agilent，30m´0.32mm, 1.8mm）；

进样口温度：190℃；

检测器温度：250℃；

载气（氮气）流速：1.0mL/min；

分流比：10:1；

进样体积：1μL

柱箱升温程序：

升温速率（℃/min）	温度（℃）	保持时间（min）
			/	50	5
10	180	7

实验步骤：

取哌嗪、正丁醇和乙酸乙酯适量，加二甲基亚砜溶解制成每1ml中含哌嗪、正丁醇和乙酸乙酯各约0.5mg的溶液，作为供试品溶液；另取二甲基亚砜作为空白溶液。将上述供试品溶液和空白溶液分别注入气相色谱仪，按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。结果见附图5，图5中保留时间8.500min、10.485min、和14.902min的色谱峰分别为乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪，此方法可以有效地分离测定盐酸鲁拉西酮中间体各有关物质。

实施例3

仪器与条件

色谱仪：Agilent 7890A气相色谱仪；

检测器：氢火焰离子化检测器；

色谱柱：DB-624毛细管色谱柱（Agilent，30m´0.32mm, 1.8mm）；

进样口温度：180℃；

检测器温度：250℃；

载气（氮气）流速：1.1mL/min；

分流比：10:1；

进样体积：1μL。

柱箱升温程序：

升温速率（℃/min）	温度（℃）	保持时间（min）
			/	50	5
10	180	7

实验步骤：

取哌嗪、正丁醇和乙酸乙酯适量，加二甲基亚砜溶解制成每1ml中含哌嗪、正丁醇和乙酸乙酯各约0.5mg的溶液，作为供试品溶液；另取二甲基亚砜作为空白溶液。将上述供试品溶液和空白溶液分别注入气相色谱仪，按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。结果见附图5，图5中保留时间8.097min、10.101min、和14.516min的色谱峰分别为乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪，此方法可以有效地分离测定盐酸鲁拉西酮中间体各有关物质。

本发明对所述盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质分析方法的以下项目进行了验证：

1、系统适用性实验

取盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质适量，分别用二甲基亚砜溶解样品，配制成含盐酸鲁拉西酮中间体及其有关物质的供试液。按实施例1的色谱条件进行分析，记录色谱图。由图1~图4可知，在此条件下乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪与其相邻峰之间分离度良好，溶剂和盐酸鲁拉西酮中间体其他杂质均不干扰乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪的测定，此方法用于分离测定盐酸鲁拉西酮中间体各有关物质系统适用性良好。

2、进样重复性试验

将盐酸鲁拉西酮中间体的有关物质乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪供试液，按实施例1的色谱条件，重复进样6次，考察方法的重复性。由结果可加，该方法进样重复性良好：

3、定量限、检测限

取盐酸鲁拉西酮的有关物质乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪适量，精密称定，分别用二甲基亚砜溶解样品，配制成响应的供试液，再精密量取供试液适量，逐级稀释，按实施例1的色谱条件进样考察。各有关物质的定量限和检测限数据如下表所示：

4、线性

取盐酸鲁拉西酮有关物质乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪适量，精密称定，分别用二甲基亚砜溶解，配制成各有关物质贮备液；精密量取各有关物质贮备液，分别稀释成定量限浓度、50%、80%、100%和120%限度浓度的供试品溶液，将各溶液按实施例1的色谱条件进样考察，结果见下表：

。

5、准确度

取盐酸鲁拉西酮有关物质乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪适量，精密称定，分别用二甲基亚砜溶解，配制成各有关物质贮备液；精密量取各有关物质贮备液适量，用二甲基亚砜稀释，分别配成80%、100%和120%限度浓度的准确度试验溶液。取盐酸鲁拉西酮约100mg，分别用上述80%、100%和120%限度浓度的准确度试验溶液1mL溶解，作为80%、100%和120%供试品溶液，各浓度水平供试品溶液平行配制3份；另取盐酸鲁拉西酮约100mg，加入1mL 二甲基亚砜溶解，作为空白样品溶液。将上述溶液按实施例1的色谱条件进样考察，进样结果见下表：

。

6、耐用性

通过微调进样口温度、载气流速、检测器温度和色谱柱品牌等色谱条件，我们进一步考察了方法的耐用性。结果发现，该方法对不同品牌的色谱柱、进样口温度变化±5℃、载气流速变化±0.1mL/min、检测器温度变化±5℃等条件下耐用性良好。在不同品牌色谱柱、不同进样口温度、载气流速及检测器温度条件下，盐酸鲁拉西酮有关物质乙酸乙酯、正丁醇和哌嗪的保留时间变化不大，且均能达到有效分离。

Claims

1.一种用气相色谱技术分离检测盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的方法，其特征在于：选用气相色谱技术，用合适的溶剂将样品溶解，采用聚硅氧烷类毛细管色谱柱，氢火焰离子化检测器检测，外标法进行定量分析。

2.根据权利要求1所述的分离测定方法，溶剂可以为二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺和四氢呋喃中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的分离测定方法，色谱柱选自品牌为Agilent、OHIO VALLEY或SGE的气相色谱柱。

4.根据权利要求1所述的分离测定方法，色谱柱为中等极性或极性甲基聚硅氧烷类毛细管色谱柱。

5.根据权利要求4所述的分离测定方法，色谱柱优选中等极性聚硅氧烷类毛细管色谱柱。

6.根据权利要求1所述的分离测定方法，其特征在于，包括以下几个步骤：

2）设置进样口温度为150~200℃，载气流速为0.5~2.0mL/min，程序升温法，升温程序为初始温度50℃，维持3~10min，以每分钟5℃~10℃的升温速率至180℃，维持5~10min，检测器温度为250~320℃，分流比为1:1~50:1；

3）取1）的样品溶液1～3μL，注入气相色谱仪，采用外标法计算各有关物质的含量，完成盐酸鲁拉西酮中间体有关物质的分离测定。

7.根据权利要求6所述的分离分析方法，步骤2）所说的载气为氮气或氦气。

8.根据权利要求6所述的分离分析方法，步骤2）所说的程序升温法，优选以下升温程序：

。