CN106501387A

CN106501387A - 一种用气相色谱法分离测定阿立哌唑中间体有关物质的方法

Info

Publication number: CN106501387A
Application number: CN201610836198.6A
Authority: CN
Inventors: 孙冬雪; 王宇杰
Original assignee: Beijing Wanquan Dezhong Medical Biological Technology Co Ltd
Current assignee: Beijing Wanquan Dezhong Medical Biological Technology Co Ltd
Priority date: 2016-09-21
Filing date: 2016-09-21
Publication date: 2017-03-15

Abstract

本发明属分析化学领域，本发明公开了一种用气相色谱法快速分离检测阿立哌唑中间体7‑(4‑bromobutoxy)‑3,4‑dihydro‑2(1H)‑quinolinone的有关物质的方法，该方法采用甲基聚硅氧烷类强极性毛细管色谱柱，电子捕获检测器，可以定量测定阿立哌唑中间体的有关物质的含量，从而达到对阿立哌唑中间体化学纯度的有效控制，减少副反应的发生和杂质的生成，进而保证阿立哌唑的纯度和质量。本发明方法专属性强，准确度高，耐用性好，且操作简单快速。

Description

一种用气相色谱法分离测定阿立哌唑中间体有关物质的方法

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及气相色谱法分离测定阿立哌唑中间体有关物质的方法。

背景技术

阿立哌唑是一种新型的非典型抗精神分裂症药物，对DA能神经系统具有双向调节作用，是DA递质的稳定剂。阿立哌唑与D2、D3、5-HT1A和5-HT2A受体有很高的亲和力。通过对D2和5-HT1A受体的部分激动作用及对5-HT2A受体的拮抗作用来产生抗精神分裂症作用的。国外临床试验表明，阿立哌唑对精神分裂症的阳性和阴性症状均有明显疗效，也能改善伴发的情感症状，降低精神分裂症的复发率。阿立哌唑中间体化学名为7-(4-bromobutoxy)-3,4-dihydro-2(1H)-quinolinone，分子式为C₁₃H₁₆BrNO₂，结构式为：

。

分离测定阿立哌唑中间体化学纯度，可以保证合成阿立哌唑过程中反应物的纯度，减少副反应的发生和杂质的生成，在阿立哌唑的生产及其质量控制方面具有重要的现实意义。

合成阿立哌唑中间体工艺中引入的有机杂质有1，4-二溴丁烷，其结构式为：

。

1，4-二溴丁烷为毒性物质，在合成阿立哌唑的中间体中就要严格控制。因此，选择合适的分析方法，准确地分离和测定1，4-二溴丁烷的含量，对提高阿立哌唑质量、保证用药安全具有重大的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离、检测阿立哌唑中间体7-(4-bromobutoxy)-3,4-dihydro-2(1H)-quinolinone的有关物质的方法，从而达到对阿立哌唑中间体化学纯度的有效控制，减少副反应的发生和杂质的生成，保证终产品的质量及用药安全性。

本发明所述的一种分离、测定阿立哌唑中间体有关物质的方法，是采用气相色谱分析技术，选用合适的溶剂将样品溶解，根据待分析杂质的结构及理化性质，选用合适极性的聚硅氧烷类毛细管色谱柱和检测器。

上述所说的溶剂可以为甲醇、乙醇、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或二氯甲烷中的一种或几种。

上述所说的色谱柱选自Agilent、OHIO VALLEY、Phenomenex或SGE等品牌。

上述所说的色谱柱为强极性或中等级性聚硅氧烷类毛细管色谱柱。

上述所说的检测器为电子捕获检测器。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

1）取阿立哌唑中间体适量，加N，N-二甲基甲酰胺溶解制成每1ml中含阿立哌唑中间体100mg的溶液，作为供试品溶液；另取阿立哌唑中间体有关物质1，4-二溴丁烷适量，加N，N-二甲基甲酰胺溶解制成每1ml中含1，4-二溴丁烷 0.01mg的溶液，作为对照品溶液；

2）设置进样口温度为150~180℃，载气流速为各0.8~1.2mL/min，程序升温法，升温程序为初始温度100°C，以每分钟10~25°C的升温速率至200°C，恒温4~10min，检测器温度为250~300℃，分流比为10:1~50:1；

3）取1）中的供试品溶液和对照品0.8～2μL，注入气相色谱仪，利用外标法完成阿立哌唑中间体的有关物质的分离测定。其中：

气相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的气相色谱仪为Agilent 6890N气相色谱仪

检测器：电子捕获检测器；

色谱柱：HP-FFAP毛细管色谱柱（50m*0.32mm，0.5μm）；

进样口温度：150℃；

检测器温度：250℃；

载气（氮气）流速：1.0mL/min；

分流比：20:1；

进样体积：1μL

柱箱升温程序：

升温速率（℃/min）	温度（℃）	保持时间（min）
			/	100	0
10	200	4

本发明采用气相色谱法，选用甲基聚硅氧烷类强极性毛细管色谱柱（50m*0.32mm，0.5μm），能快速有效地分离测定阿立哌唑中间体的有关物质，本发明解决了阿立哌唑中间体工艺中引入的有机杂质1，4-二溴丁烷的分离测定，从而达到对阿立哌唑中间体杂质的有效控制，保证阿立哌唑的质量及用药安全性。结果见附图1~5。

附图说明

图1为实施例1时溶剂（N，N-二甲基甲酰胺）的气相色谱图；

图2为实施例1时阿立哌唑中间体空白样品的气相色谱图；

图3为实施例1时阿立哌唑中间体有关物质（1，4-二溴丁烷）的气相色谱图；

图4为实施例2时阿立哌唑中间体有关物质（1，4-二溴丁烷）的气相色谱图；

图5为实施例3时阿立哌唑中间体有关物质（1，4-二溴丁烷）的气相色谱图；

图6为实施例1时阿立哌唑中间体含有其有关物质（1，4-二溴丁烷）的气相色谱图。

具体实施方式：

以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。以下通过实例形式，对本发明涉及的阿立哌唑中间体的有关物质检测方法作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1

仪器与条件

色谱仪：Agilent 6890N气相色谱仪；

检测器：电子捕获检测器；

色谱柱：HP-FFAP毛细管色谱柱（50m*0.32mm，0.5μm）；

进样口温度：150℃；

检测器温度：250℃；

载气（氮气）流速：1.0mL/min；

分流比：20:1；

进样体积：1μL

柱箱升温程序：

实验步骤

取阿立哌唑中间体适量，加N，N-二甲基甲酰胺溶解制成每1ml中含阿立哌唑中间体100mg的溶液，作为阿立哌唑中间体样品溶液；取阿立哌唑中间体有关物质1，4-二溴丁烷适量，加N，N-二甲基甲酰胺溶解制成每1ml中含1，4-二溴丁烷 0.01mg的溶液，作为对照品溶液；另取N，N-二甲基甲酰胺作为空白溶液。按上述色谱条件进行分析，记录色谱图，按外标法以峰面积计算阿立哌唑中间体中有关物质1，4-二溴丁烷的含量。结果见附图1~3，图1为空白溶液色谱图；图2为阿立哌唑中间体样品溶液色谱图。图3中保留时间8.692min的色谱峰为1，4-二溴丁烷。图1~图3表明：本发明提供的方法能快速有效地分离测定阿立哌唑中间体的有机杂质1，4-二溴丁烷，并可以准确进行定量检测，从而达到对阿立哌唑中间体化学纯度的有效控制。

实施例2

仪器与条件

色谱仪：Agilent 6890N气相色谱仪；

检测器：电子捕获检测器；

色谱柱：HP-FFAP毛细管色谱柱（50m*0.32mm，0.5μm）；

进样口温度：150℃；

检测器温度：250℃；

载气（氮气）流速：0.9mL/min；

分流比：20:1；

进样体积：1μL

柱箱升温程序：

实验步骤

取阿立哌唑中间体有关物质1，4-二溴丁烷适量，加N，N-二甲基甲酰胺溶解制成每1ml中含有1，4-二溴丁烷 0.01mg的溶液，作为对照品溶液；另取N，N-二甲基甲酰胺作为空白溶液。按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。结果见附图4，图4中保留时间9.096min的色谱峰为1，4-二溴丁烷。

实施例3

仪器与条件

色谱仪：Agilent 6890N气相色谱仪；

检测器：电子捕获检测器；

色谱柱：HP-FFAP毛细管色谱柱（50m*0.32mm，0.5μm）；

进样口温度：145℃；

检测器温度：250℃；

载气（氮气）流速：1.0mL/min；

分流比：20:1；

进样体积：1μL

柱箱升温程序：

实验步骤

取阿立哌唑中间体有关物质1，4-二溴丁烷适量，加N，N-二甲基甲酰胺溶解制成每1ml中含有1，4-二溴丁烷 0.01mg的溶液，作为对照品溶液；另取N，N-二甲基甲酰胺作为空白溶液。按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。结果见附图5，图5中保留时间8.691min的色谱峰为1，4-二溴丁烷。

本发明对所述阿立哌唑中间体的有关物质分析方法的以下项目进行了验证：

系统适用性实验

取阿立哌唑中间体及其有关物质1，4-二溴丁烷适量，分别用N，N-二甲基甲酰胺溶解样品，配制成含阿立哌唑中间体及其有关物质的供试液。按实施例1的色谱条件进行气相色谱分析，记录色谱图。由图1~图3可知，在此条件下1，4-二溴丁烷与相邻峰之间分离度良好，溶剂和阿立哌唑中间体其他杂质均不干扰1，4-二溴丁烷的测定。

进样重复性试验

将阿立哌唑中间体的有关物质1，4-二溴丁烷供试液，按实施例1的色谱条件，重复进样6次，考察方法的重复性。由结果可加，该方法进样重复性良好：

进样次数	1	2	3	4	5	6	平均值	RSD%
									1，4-二溴丁烷(A)	7858.7	7785.8	7865.2	7757.4	7780.9	7829.5	7812.92	0.57

定量限、检测限

取阿立哌唑中间体的有关物质1，4-二溴丁烷适量，精密称定，分别用N，N-二甲基甲酰胺溶解样品，配制成响应的供试液，再精密量取供试液适量，逐级稀释，按实施例1的色谱条件进样考察。1，4-二溴丁烷定量限和检测限数据如下表所示：

项目	1，4-二溴丁烷
		定量限（ng/μL）	0.298
检测限(ng/μL)	0.199

线性

取阿立哌唑中间体的有关物质1，4-二溴丁烷适量，精密称定，分别用N，N-二甲基甲酰胺溶解，配制成1，4-二溴丁烷贮备液；精密量取1，4-二溴丁烷贮备液，分别稀释成3%（定量限浓度）、50%、80%、100%和120%限度浓度的1，4-二溴丁烷供试品溶液，将各溶液按实施例1的色谱条件进样考察，结果见下表：

准确度

取阿立哌唑中间体的有关物质1，4-二溴丁烷适量，精密称定，分别用N，N-二甲基甲酰胺溶解，配制成1，4-二溴丁烷贮备液；精密量取1，4-二溴丁烷贮备液适量，用N，N-二甲基甲酰胺稀释，分别配成80%、100%和120%限度浓度的准确度试验溶液。取阿立哌唑中间体约100mg，分别用上述80%、100%和120%限度浓度的准确度试验溶液1mL溶解，作为80%、100%和120%供试品溶液，各浓度水平供试品溶液平行配制3份；另取阿立哌唑中间体约100mg，加入1mL N，N-二甲基甲酰胺溶解，作为空白样品溶液。将上述溶液按实施例1的色谱条件进样考察，图6为100%供试品溶液（即阿立哌唑中间体含有1，4-二溴丁烷）的色谱图，进样结果见下表：

耐用性

通过微调进样口温度、载气流速、检测器温度和色谱柱品牌等色谱条件，我们进一步考察了方法的耐用性。结果发现，该方法对不同品牌的色谱柱、进样口温度变化±5℃、载气流速变化±0.1mL/min、检测器温度变化±5℃等条件下耐用性良好。在不同品牌色谱柱、不同进样口温度、载气流速及检测器温度条件下，阿立哌唑中间体的有关物质保留时间无显著变化，且均能达到有效分离。

Claims

1.一种利用气相色谱法分离检测阿立哌唑中间体有关物质的方法，其特征在于：选用合适的溶剂将样品及其有关物质溶解，根据待分析杂质的结构及理化性质，选用合适极性的聚硅氧烷类毛细管色谱柱和检测器。

2.根据权利要求1所述的分离测定方法，溶剂可以为甲醇、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或二氯甲烷中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的分离测定方法，色谱柱选自品牌为Agilent、OHIO VALLEY、Phenomenex或SGE的色谱柱。

4.根据权利要求1所述的分离测定方法，色谱柱为强极性或中等级性聚硅氧烷类毛细管色谱柱。

5.根据权利要求1所述的分离测定方法，检测器选用电子捕获检测器（ECD）。

6.根据权利要求1所述的分离测定方法，其特征在于，包括以下几个步骤：

取阿立哌唑中间体适量，加N，N-二甲基甲酰胺溶解制成每1ml中含阿立哌唑中间体100mg的溶液，作为供试品溶液；另取阿立哌唑中间体有关物质1，4-二溴丁烷适量，加N，N-二甲基甲酰胺溶解制成每1ml中含1，4-二溴丁烷0.01mg的溶液，作为对照品溶液；

2）设置进样口温度为150~180℃，载气流速为0.8~1.2mL/min，程序升温法，升温程序为初始温度100°C，以每分钟10~25°C的升温速率至200°C，恒温4~10min，检测器温度为250~300℃，分流比为10:1~50:1；

3）取1）中供试品溶液和对照品溶液各0.8～3μL，按2）的色谱条件，注入气相色谱仪，采用外标法计算阿立哌唑中间体有关物质的含量。

7.根据权利要求6所述的分离分析方法，步骤2）所说的载气为氮气或氦气。

8.根据权利要求6所述的分离分析方法，步骤2）所说的程序升温法，优选以下升温程序：

升温速率（℃/min）温度（℃）保持时间（min） / 100 0 10 200 4

。