CN106038797A - 一种防治膀胱癌的药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种防治膀胱癌的药物组合物及其制备方法，本发明药物组合物是以鹅蛋壳、蓝锭果、斑唇马先蒿、仙鹤草内酯、假金丝桃双蒽醌、紫堇醇灵碱为原料药，配比而成，可按常规制剂工艺制成各种剂型，防治膀胱癌疗效显著。

Description

一种防治膀胱癌的药物组合物
技术领域
本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种防治膀胱癌的药物组合物及其制备方法。
背景技术
膀胱癌是泌尿生殖系统中最常见的恶性肿瘤，其发病率居男性肿瘤的第4位，女性肿瘤的第9位。非肌层浸润型膀胱癌约占75%-85%，预后较好，但仍有70%的复发率，1%-45%可在数年内进展为肌浸润型的膀胱癌，目前多采用经尿道膀胱肿瘤切除术，术后膀胱内灌注化疗药物及免疫抑制剂等以起到防止复发、延迟进展和消灭残余肿瘤和原位癌的目的。化疗药物失效、病人对化疗药物出现的不良反应及化疗药物对正常细胞的影响是制约其临床应用发展的原因。免疫抑制剂如白细胞介素-2、干扰素等也因不良反应较多，对部分病人无效、价格因素等原因也未能得到广泛应用。因此，不断寻找理想的抗膀胱癌药物意义重大。
鹅蛋壳：本品为为鸭科雁属动物家鹅Anser cygnoides domestica Brisson.的卵壳。食用鹅蛋时，收集蛋壳，洗净，晒干或烘干。【性味】甘；淡；平。【归经】肺经。【功能主治】拔毒排脓；理气止痛。主痈疽脓成难溃；疝气；难产。【性状】多呈现碎片状，外表面白色稍粗糙，易破裂；内表面光滑，质脆易碎。气微，味淡。收载于中药大辞典。
蓝锭果：为忍冬科忍冬属植物蓝锭果Lonicera caerulea L.var .edulisTurcdz. Ex Herd.的果实。8-9月果实成熟后采集，晒干。【性味】味苦；性凉。【功能主治】清热解毒；散痈消肿。主疔疮；乳痈；肠痈；丹毒；湿热痢疾。【药理作用】 降压作用：蓝锭果浓缩果汁每只80ml,十二指肠导管给药,对血压正常的麻醉犬的血压无明显影响,但对静脉滴注盐酸肾上腺素使血压升高的犬,给药后26分钟血压开始缓慢下降,2小时平均下降3.58kPa（27mmHg）,而未用药组动物的高血压几乎不降低。蓝锭果汁降压作用的特点是起效快,作用温和而持久,无不良反应。【原植物形态】蓝锭果 落叶灌木，高1.5m。幼枝被毛，老枝红棕色，壮枝节部常有大形盘状的托叶。叶对生；叶柄极短；叶厚纸质，叶片长圆形、卵状长圆形、卵状椭圆形、稀卵形，长2-5cm，宽1-3cm，先端尖或稍钝，基部圆形，叶缘近全缘，具纤毛，两面疏被生短毛，下面中脉毛较密，有时几无毛。总花梗长2-10mm；苞片条形，长为萼筒的2-3倍；花冠黄白色，筒状漏斗形，长1-1.3cm，外被柔毛，基部具浅囊，裂片5；雄蕊5，稍伸出花冠之外；花柱无毛，伸出花冠外。浆果蓝黑色，椭圆形，长约1.5cm，稍被白粉。花期5-6月，果期8-9月。收载于中药大辞典。
斑唇马先蒿：本品为玄参科植物斑唇马先蒿Pedicularis longifloraRudolph.var.tubiformis(Klotz.) Tsoong及其同属多种植物的干燥花。花盛期采集，晒干。【性味】 微苦、涩，寒。【功能与主治】 清热解毒，强筋利水，固精。用于风热症，肉食中毒，高烧神昏谵语，水肿，遗精等症。【性状】本品为皱缩的花，棕黄色或棕褐色。花梗短，黑褐色。萼管状，前方开裂，齿2枚，裂片有少数锯齿，管长5～8cm，其上被毛。花冠膨大部内含有雄蕊,前端为半环状卷曲的细喙，喙指向花喉。下唇有缘毛,宽过于长且近喉处有棕红色的斑点2个。花丝2对，均有密毛，着生于花管端,花柱明显伸出于喙端。气微，味微苦、辣。收载于卫生部颁藏药标准（第一册），标准编号：WS3-BC-0099-95。
仙鹤草内酯 （Agrimonolide）：CAS号21499-24-1，分子式C18H18O5，分子量314.34。【药理作用】能降低离体兔肠的收缩幅度及张力，并使肠运动停止于松弛状态；也能抑制在体小鼠肠的蠕动。【用途】解除平滑肌痉挛 。【成分来源】蔷薇科植物(日本)龙芽草(仙鹤草)Agrimonia pilosa Ledeb. var. japonica (MIq.) Nakai 根。
假金丝桃双蒽醌（Pseudohypericin）：CAS号55954-61-5，分子式C30H16O9，分子量520.44。【药理作用】抗菌。【成分来源】金丝桃科植物Hypericum triquetrifolium全草。
紫堇醇灵碱 (Corynoline ): CAS号18797-79-0，分子式C21H21NO5，分子量367.39。【物理性质】无色颗粒状结晶，熔点218-219℃。UVλMeOH maxnm(logε):238(3.97)，289(3.93)；IRγKBrmax cm-1:3240(OH)，922；MS m/e:367(M+)，349，334，318，202，190，176，162。【药理作用】其硫酸盐经药理试验证明， 给小鼠腹腔注射 10mg/kg， 有显著的镇静作用。1/8000浓度本品有抗钩端螺旋体的作用。【用途】镇静， 抗钩端螺旋体 。【成分来源】罂粟科植物尖距紫堇 corydalis sheareri S. Moore块根，刻叶紫堇 Corydalis incisa (Thunb.) Pers。
3个原料药的化学结构：
假金丝桃双蒽醌（Pseudohypericin）
仙鹤草内酯 （Agrimonolide） 紫堇醇灵碱 (Corynoline)。
发明内容
本发明的目的是克服背景技术的不足，提供一种有效防治膀胱癌的药物组合物及其制备方法。
本发明是采用如下技术方案实现的：
制成该防治膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：
鹅蛋壳800-810重量份 蓝锭果750-758重量份 斑唇马先蒿740-750重量份 仙鹤草内酯65-70重量份 假金丝桃双蒽醌30-40重量份 紫堇醇灵碱20-24重量份。
优选的用于防治膀胱癌的药物组合物，是由如下重量份的原料药组成：
鹅蛋壳805重量份 蓝锭果754重量份 斑唇马先蒿745重量份 仙鹤草内酯68重量份 假金丝桃双蒽醌35重量份 紫堇醇灵碱22重量份。
一种防治膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
一种防治膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成的防治膀胱癌药物。
一种防治膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：鹅蛋壳800-810重量份 蓝锭果750-758重量份 斑唇马先蒿740-750重量份 仙鹤草内酯65-70重量份 假金丝桃双蒽醌30-40重量份 紫堇醇灵碱20-24重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取蓝锭果、斑唇马先蒿、鹅蛋壳、仙鹤草内酯、假金丝桃双蒽醌、紫堇醇灵碱，混匀，用重量百分比浓度33%乙醇作为溶剂，在20.5℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为16小时，每次溶剂用量为原料药总重量的23倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.02，滤过，药液通过DM21 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM21 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取16次，每次提取时间为0.8小时，每次溶剂用量为药渣A重量的24倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.08，滤过，药液通过XDA-7大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度94%乙醇溶液洗脱XDA-7大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度94%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
优选的一种防治膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：鹅蛋壳805重量份 蓝锭果754重量份 斑唇马先蒿745重量份 仙鹤草内酯68重量份 假金丝桃双蒽醌35重量份 紫堇醇灵碱22重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取蓝锭果、斑唇马先蒿、鹅蛋壳、仙鹤草内酯、假金丝桃双蒽醌、紫堇醇灵碱，混匀，用重量百分比浓度33%乙醇作为溶剂，在20.5℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为16小时，每次溶剂用量为原料药总重量的23倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.02，滤过，药液通过DM21 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM21 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取16次，每次提取时间为0.8小时，每次溶剂用量为药渣A重量的24倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.08，滤过，药液通过XDA-7大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度94%乙醇溶液洗脱XDA-7大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度94%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
一种防治膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
一种防治膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成防治膀胱癌药物。
药物组合物防治膀胱癌作用显著。
具体实施方式
实施例1：防治膀胱癌的药物组合物及其制备方法
防治膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：鹅蛋壳805g 蓝锭果754g 斑唇马先蒿745g 仙鹤草内酯68g 假金丝桃双蒽醌35g 紫堇醇灵碱22g；
制备方法：
（1）按原料药配比取蓝锭果、斑唇马先蒿、鹅蛋壳、仙鹤草内酯、假金丝桃双蒽醌、紫堇醇灵碱，混匀，用重量百分比浓度33%乙醇作为溶剂，在20.5℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为16小时，每次溶剂用量为原料药总重量的23倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.02，滤过，药液通过DM21 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM21 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取16次，每次提取时间为0.8小时，每次溶剂用量为药渣A重量的24倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.08，滤过，药液通过XDA-7大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度94%乙醇溶液洗脱XDA-7大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度94%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例2：防治膀胱癌的药物组合物及其制备方法
防治膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：鹅蛋壳800g 蓝锭果758g 斑唇马先蒿740g 仙鹤草内酯70g 假金丝桃双蒽醌30g 紫堇醇灵碱24g；
制备方法：
（1）按原料药配比取蓝锭果、斑唇马先蒿、鹅蛋壳、仙鹤草内酯、假金丝桃双蒽醌、紫堇醇灵碱，混匀，用重量百分比浓度33%乙醇作为溶剂，在20.5℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为16小时，每次溶剂用量为原料药总重量的23倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.02，滤过，药液通过DM21 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM21 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取16次，每次提取时间为0.8小时，每次溶剂用量为药渣A重量的24倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.08，滤过，药液通过XDA-7大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度94%乙醇溶液洗脱XDA-7大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度94%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例3：防治膀胱癌的药物组合物及其制备方法
防治膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：鹅蛋壳810g 蓝锭果750g 斑唇马先蒿750g 仙鹤草内酯65g 假金丝桃双蒽醌40g 紫堇醇灵碱20g；
制备方法：
（1）按原料药配比取蓝锭果、斑唇马先蒿、鹅蛋壳、仙鹤草内酯、假金丝桃双蒽醌、紫堇醇灵碱，混匀，用重量百分比浓度33%乙醇作为溶剂，在20.5℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为16小时，每次溶剂用量为原料药总重量的23倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.02，滤过，药液通过DM21 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM21 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取16次，每次提取时间为0.8小时，每次溶剂用量为药渣A重量的24倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.08，滤过，药液通过XDA-7大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度94%乙醇溶液洗脱XDA-7大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度94%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例4：片剂的制备
取实施例1药物组合物250g，加入淀粉350g，混匀，制粒，干燥，加微晶纤维素20g，硬脂酸镁8g，混匀，压制成2000片， 即得药物组合物片剂。
实施例5：胶囊的制备
取实施例2药物组合物190g，加入淀粉140g，混匀，制粒，干燥，整粒，加入适量硬脂酸镁，混匀，装胶囊1000粒，即得药物组合物胶囊。
实施例6：滴丸的制备
称取聚乙二醇 6000 250g水浴(80℃)加热煮熔，加入实施例3药物组合物11g，充分搅拌均匀，以液体石蜡为冷却剂，置玻璃管（4*80cm）中，冷却温度为3℃，滴口内外径为7.0/2.0(mm/mm)，滴口距液面为2.7cm，滴速以每分47滴为最佳条件，用棉布吸干滴丸表面的冷凝剂，即得药物组合物滴丸。
实验例1：防治膀胱癌的试验研究
一、材料与方法
1. 细胞株
人膀胱癌细胞株T24来源于由云南省泌尿外科研究所细胞库。
2. 试剂
药物组合物（实施例1药物组合物 批号20120411）。丝裂霉素（分子量300.05，浙江海正药业股份有限公司），磷酸盐缓冲液（PBS，0.01mol/L pH7.4）、胰蛋白酶（0.25%）、RPMI1640、胎牛血清、胰蛋白酶购自美国GIBCO公司。兔抗单克隆抗体、人抗兔IgG购自美国Santa Cruz公司。
3. 实验动物
BALB/c裸小鼠，6-8周龄，雌雄不限，体质量16-21g，平均19g，购自北京维通利华公司，于昆明医科大学重点实验室SPF环境中饲养，控制温度20-22℃，湿度30%-35%。
4. 细胞培养
T24细胞使用含10%胎牛血清RPMI1640完全培养液，置于37℃、湿度95%、5%CO2细胞培养箱培养，BIU-87细胞呈单层贴壁生长。每天镜下观察细胞形态、细胞是否长满、培养液的颜色及透明度，待细胞生长汇合至80%左右传代，细胞冻存于-70℃冰箱或液氮罐保存。
5. MTT法检测药物组合物对T24细胞增殖的影响
胰酶消化对数期细胞，终止后离心收集，制成细胞悬液，按每孔4×103的数目接种到96孔平底细胞培养板，培养箱中培养24h后，加入前预先配好的含不同浓度的药物组合物的完全培养液（0、0.25、0.5、1、2、4、8、16μmol/L），之后将96孔板置于5%CO2，37℃细胞培养箱孵育24、48、72h。之后每孔加入10μL MTT溶液（5mg/mL，即0.5%MTT）继续培养4h后，每孔加入150μL二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，在酶联免疫检测仪OD 570nm处测量各孔的吸光值。细胞增殖抑制率（%）=[1-（用药组OD值-空白孔OD值）/（对照组OD值-空白孔OD值）]×100%。对照设置：设相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜为空白对照，丝裂霉素（MMC）为阳性对照药，阳性对照药MMC的终浓度梯度同样品，阴性对照为未用药组，实验重复3次。
6. 动物模型的建立
取对数生长期的细胞，以0.25%的胰酶消化液消化细胞后收集细胞悬液，800r/min，离心10min，吸出离心管中液体，加入0.9%氯化钠溶液，用吸管轻轻吹打，制成单细胞悬液，离心洗涤细胞1次，调整细胞浓度到1.5×107个/mL。消毒裸鼠右侧肩背部皮肤，每只动物皮下注射细胞悬液0.2mL。动物接种后置于无特定病原体（specific-pathogen free，SPF）环境下饲养。当皮下移植瘤生长到直径约6cm时，全部成瘤后随机分为4组：对照组：未予治疗，让肿瘤自然生长；生理盐水组：瘤体局部注射0.9%氯化钠溶液5mg/kg，1次/周；药物组合物组：瘤体局部注射药物组合物，5mg/kg，1次/周；丝裂霉素C对照组：瘤体局部注射丝裂霉素C，1.5mg/kg，1次/周，每组10只动物。根据公式V=a×b2/2计算肿瘤体积，其中a为瘤体长径，b为瘤体短径。按下列公式计算瘤重抑制率（%）=（1-给药组平均瘤重/对照组平均瘤重）×100%。观察记录不同组别荷瘤鼠60d内存活的只数，以时间（d）为横坐标，存活率（%）为纵坐标，绘制生存曲线。
7. 移植瘤标本
用10%甲醛固定，常规做成石蜡切片，HE染色（苏木素-伊红染色）及免疫组化染色后，用光学显微镜观察肿瘤的病理组织学特征。
8. 统计学方法
两样本间的比较采用t检验，定量测定结果以x±s表示，正态分布资料以F检验检测其方差齐性，经Kaplan-meier分析，得出生存率曲线，比较各组裸鼠平均生存时间。统计学处理通过SPSS 18.0统计软件完成。以P＜0.05为差异有统计学意义。
二、结果
1. 药物组合物抑制T24细胞的增殖
结果表明，浓度≥1μmol/L的药物组合物对人膀胱癌T24细胞的生长抑制率与未用药组相比具有统计学差异，并表现出明显的时间和浓度依赖性。药物组合物对T24细胞作用24、48、72h时的IC50值分别为：7.932、4.005、3.208μmol/L。
2. 皮下移植瘤生长曲线
结果表明，未用药对照组皮下移植瘤生长迅速，30d时肿瘤直径已达18mm左右，药物组合物在用药后2周后，肿瘤体积开始缩小，但是没见完全消失。药物组合物组肿瘤体积减小的趋势与MMC组相仿。与对照组和生理盐水组相比，有显著性差异（P<0.05）；与丝裂霉素组相比无显著性差异。
3. 平均瘤重和瘤重抑制率
荷人膀胱癌BALB/c裸鼠皮下移植瘤瘤重未治疗组高于药物组合物治疗组和MMC治疗组（P＜0.01），药物组合物治疗组与MMC治疗组相比无计学差异。
4. 各组裸鼠生存分析
未用药组平均生存时间为（31.7±1.07）d，生理盐水组为（32.6±0.95）d，药物组合物组的平均生存时间为（49.55±3.08）d，丝裂霉素组的平均生存时间为（49.78±3.12）d。未用药组和生理盐水组生存中位数时间为30d，药物组合物治疗组的生存中位数为44d，MMC治疗组的生存中位数时间为45d。使用药物组合物瘤内注射组裸鼠平均生存时间和生存中位数较对照组延长（P＜0.01），与丝裂霉素组相比未见显著差异。
5. 病理组织学检查
HE染色光镜下见肿瘤细胞呈长梭形、卵圆形，核大深染，核膜清晰，核浆比例增大，异型性明显，核分裂相易见，胞浆丰富，呈中度分化。药物组合物治疗后，可见广泛的细胞核浓缩，核碎裂，胞浆红染，部分区域呈现均质红染。免疫组化见cytochrome c表达显著增加。
结果表明，药物组合物在体外、体内的实验中均见到其能抑制膀胱癌细胞的生长。药物组合物可能是通过线粒体凋亡途径引起细胞的凋亡，从而发挥抗膀胱癌的作用。

Claims (8)

1.一种防治膀胱癌的药物组合物，其特征在于制成该药物组合物的原料药的组成和重量份为：
鹅蛋壳800-810重量份 蓝锭果750-758重量份 斑唇马先蒿740-750重量份 仙鹤草内酯65-70重量份 假金丝桃双蒽醌30-40重量份 紫堇醇灵碱20-24重量份。
2.根据权利要求1所述一种防治膀胱癌的药物组合物，其特征在于制成该药物组合物的原料药的组成和重量份为：
鹅蛋壳805重量份 蓝锭果754重量份 斑唇马先蒿745重量份 仙鹤草内酯68重量份 假金丝桃双蒽醌35重量份 紫堇醇灵碱22重量份。
3.根据权利要求1所述一种防治膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
4.根据权利要求1所述一种防治膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成的防治膀胱癌药物。
5.一种防治膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
鹅蛋壳800-810重量份 蓝锭果750-758重量份 斑唇马先蒿740-750重量份 仙鹤草内酯65-70重量份 假金丝桃双蒽醌30-40重量份 紫堇醇灵碱20-24重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取蓝锭果、斑唇马先蒿、鹅蛋壳、仙鹤草内酯、假金丝桃双蒽醌、紫堇醇灵碱，混匀，用重量百分比浓度33%乙醇作为溶剂，在20.5℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为16小时，每次溶剂用量为原料药总重量的23倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.02，滤过，药液通过DM21 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM21 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取16次，每次提取时间为0.8小时，每次溶剂用量为药渣A重量的24倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.08，滤过，药液通过XDA-7大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度94%乙醇溶液洗脱XDA-7大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度94%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
6.根据权利要求5所述一种防治膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
鹅蛋壳805重量份 蓝锭果754重量份 斑唇马先蒿745重量份 仙鹤草内酯68重量份 假金丝桃双蒽醌35重量份 紫堇醇灵碱22重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取蓝锭果、斑唇马先蒿、鹅蛋壳、仙鹤草内酯、假金丝桃双蒽醌、紫堇醇灵碱，混匀，用重量百分比浓度33%乙醇作为溶剂，在20.5℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为16小时，每次溶剂用量为原料药总重量的23倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.02，滤过，药液通过DM21 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM21 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度64%乙醇作为溶剂，加热回流提取16次，每次提取时间为0.8小时，每次溶剂用量为药渣A重量的24倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.08，滤过，药液通过XDA-7大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度94%乙醇溶液洗脱XDA-7大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度94%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
7.根据权利要求5所述一种防治膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
8.根据权利要求5所述一种防治膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成防治膀胱癌药物。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106668121A (zh) * 2016-12-10 2017-05-17 济南昊雨青田医药技术有限公司 治疗失眠的药物组合物及其制备方法

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