CN101176779B - 一种治疗妇科炎症的灌肠剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

一种治疗妇科炎症的灌肠剂的制备方法，它包括以下步骤：1、选取下述重量份的原料药：赤芍60份、土茯苓克100份、三棱60份、川楝子60份、莪术60份、延胡索60份、芡实(炒)100份、当归100份、苦参60份、香附40份、黄柏60份、丹参100份、山药120份；2、取峩术和山药粉碎成40～100目细粉，备用；其余药材加水煎煮三次，第一次加入5～20倍量的水，煎煮2小时，第二次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，第三次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，合并数次水煎液，滤过，得滤液；3、滤液浓缩；4、浓缩后的滤液中加入峩术和山药的细粉灭菌，冷却，即得灌肠剂。本发明的制备方法可以显著提高产品有效成分，制备的药物组合物生药量高，起效快，治疗效果好。

Description

一种治疗妇科炎症的灌肠剂的制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗妇科炎症的中药组合物的制备方法，尤其是涉及灌肠剂的制备方法。

背景技术

妇科炎症主要是指女性生殖器官的炎症，包括各种原因引起的女性盆腔炎、附件炎、宫颈炎、阴道炎、尿道炎等，为妇科常见病，成年女性患病率高达80％以上。妇科炎症可蔓延至宫颈、子宫、附件等邻近器官，引起感染；慢性炎症还可造成不孕或流产。该病严重影响妇女的工作、学习、生活，给患者、家庭和社会带来沉重的精神负担和经济压力。目前，妇科炎症的现代医学治疗主要用抗生素治疗，但抗生素常易产生耐药菌，且疗效欠佳，致使病情易于反复发作。

妇炎康片是法定中成药品种，为国家二级中药保护品种，对妇科炎症疗效较佳，具有较广泛的临床应用基础；现有妇炎康片的改剂型品种如：妇炎康丸、妇炎康胶囊、妇炎康颗粒等均在原妇炎康片工艺基础上改变剂型而成，以上剂型均通过口服给药，生物利用度较低，临床使用存在服药量较大，起效慢，疗程长等缺点，不能满足广大患者的需要，而且在制备时，需要对滤液进行浓缩，长时间的高温作用，使有效成份分解变性，所得产品的有效成分含量较低，使用时血药浓度低，起效慢，治疗效果差，疗程长。

发明内容

本发明的目的是提供一种可以显著提高产品有效成分、生产安全可靠的一种治疗妇科炎症的灌肠剂的制备方法，使用该方法制备的药物组合物生药量高，起效快，治疗效果好。

本发明的技术解决方案是：一种治疗妇科炎症的灌肠剂的制备方法，包括以下步骤：

1)、选取下述重量份的原料药：赤芍60份、土茯苓克100份、三棱(醋炙)60份、川楝子(炒)60份、莪术(醋炙)60份、延胡索(醋炙)60份、芡实(炒)100份、当归100份、苦参60份、香附(醋炙)40份、黄柏60份、丹参100份、山药120份，并将其中的峩术和山药粉碎成40～100目细粉，备用；

2)、赤芍、土茯苓、三棱、川楝子、延胡索、芡实、当归、苦参、香附、黄柏、丹参加水煎煮三次，第一次加入5～20倍量的水，煎煮2小时，第二次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，第三次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，合并数次水煎液，滤过，滤液备用；

3)、将上述滤液浓缩；

4)、浓缩后的滤液中加入峩术和山药的细粉灭菌，冷却，即得灌肠剂。

作为一种优化方案，步骤4中的浓缩后滤液与原滤液的比例为1/1～1/60，此时可以直接加入防腐剂后分装，得到液体型灌肠剂。

作为又一种优化方案，步骤4中的滤液浓缩至密度为1.05～1.15的清膏，加入峩术和山药的细粉，搅拌均匀，干燥，粉碎，灭菌分装，即得干燥粉型灌肠剂。

作为再一种优化方案，步骤4中的滤液浓缩至密度为1.05～1.15的清膏，加入峩术和山药的细粉，搅拌均匀，干燥，粉碎，制粒，制粒过程添加或不添加辅料，经过烘干、整粒、分装、灭菌等工艺制成颗粒剂型灌肠剂。

所述的防腐剂为苯甲酸钠或羟苯丁酯。

所述的辅料为下列中的一种或一种以上：乳糖、淀粉、羧甲基淀粉钠、预胶化淀粉、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、糖浆、微晶纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钙、硫酸钙、磷酸氢钙、磷酸钙、碳酸钙、轻质氧化镁、滑石粉、微晶硅胶、氢氧化铝、硼酸、氯化钠、糊精、硬脂酸镁、氢化植物油、聚乙二醇、低取代羟丙基纤维素、维膨淀5000、交联聚维酮1NF-10、聚乙烯吡咯烷酮类、邻苯二甲基醋酸纤维素、苯二甲基羟丙基甲基纤维素、羟甲基乙基纤维素、枸橼酸、胆酸、富马酸、琥珀酸、酒石酸。

使用本发明的制备方法所制得的灌肠剂，不会破坏有效成分的药效，成药中含有效生药量高，使用中有效成分可以直接通过直肠静脉网吸收进入盆腔静脉网，有效避免了口服剂型的肝脏“首过效应”，生物利用度显著提高，主要应用于用于治疗慢性附件炎、盆腔炎、阴道炎、膀胱炎、慢性阑尾炎、尿路感染等疾病，相比丸、片、胶囊、颗粒、滴丸等口服剂型，能显著提高治疗效果和缩短疗程。

具体实施方式

以下结合药效学试验对本发明作进一步的详细说明。

1.组方

本发明选用以下原料药材，即赤芍60份、土茯苓份100份、三棱(醋炙)60份、川楝子(炒)60份、莪术(醋炙)60份、延胡索(醋炙)60份、芡实(炒)100份、当归100份、苦参60份、香附(醋炙)40份、黄柏60份、丹参100份、山药120份，上述组分之和为980份。

上述灌肠剂液体型每100毫升含有相当于6～300克原药材，干燥粉或干燥颗粒型每克相当于1～20克原药材，申请人将其命名为“妇炎康灌肠剂”。

2.制备工艺

将上述各原料按处方准确称取莪术、山药粉碎成40～100目细粉，备用；将赤芍、土茯苓、三棱、川楝子、延胡索、芡实、当归、苦参、香附、黄柏、丹参加水煎煮三次，第一次加入5～20倍量的水，煎煮2小时，第二次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，第三次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，合并数次水提取液，滤过，滤液浓缩至原体积的1/1～1/60，加入上述药材细粉及防腐剂，灭菌，冷却；无菌分装于5～300mL塑料瓶中，包装，即得液体型灌肠剂。

若制备干燥粉型，工艺路线则包括：将收集的滤液浓缩至一定密度的清膏，加入上述药材细粉，搅拌均匀，进行干燥，粉碎、灭菌、分装等工艺制成干燥粉型灌肠剂。

若制备干燥颗粒型，工艺路线则包括：将收集的滤液浓缩至一定密度的清膏，加入上述药材细粉，搅拌均匀，进行干燥，添加辅料适量，再按常规的制粒方法制成颗粒，经烘干、整粒、分装、灭菌等工艺制成干燥颗粒型灌肠剂。

本发明之液体型灌肠剂为深褐色混悬液，具有中药芳香气味，每100毫升含有相当于6～300克原药材，干燥粉或干燥颗粒型每克相当于1～20克原药材，干燥粉型灌肠剂或干燥颗粒型灌肠剂加一定比例水，加热溶解后使用，加水比例为1/2～1/10。

3.主要药效学试验内容

(1)抗炎试验

1)小鼠耳廓二甲苯致炎试验

2)大鼠足跖角叉菜胶致炎试验

3)大鼠棉球肉芽肿试验

(2)抗炎试验

1)小鼠热板法镇痛试验

2)小鼠扭体法镇痛试验

(3)活血化瘀试验

1)血瘀模型大鼠血液流变参数试验

2)大鼠在体肠系膜微循环试验

(4)对免疫功能影响试验

试验方法及结果

抗炎试验：

(1)本发明灌肠剂对小鼠耳廓二甲苯性炎症作用

取NIH小鼠，体重18～22g，60只，雌雄各半，随机分成6组，即空白对照组，醋酸泼尼松组，妇炎康片组，本发明灌肠剂高剂量组，本发明灌肠剂中剂量组，本发明灌肠剂低剂量组。本发明灌肠剂高、中、低剂量组均用大鼠灌胃针从小鼠肛门灌肠给药(在针头4cm处作一清晰标线)，其余各组按表1剂量分别灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，每天给药1次，连续4天，末次给药0.5h后，将二甲苯100μl滴于小鼠右耳两面，左耳不涂作为对照，致炎0.5h后处死动物，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9mm打孔器打下双耳同一部位圆片，电子分析天平，精密称重，以左、右耳片重量之差作为肿胀度，比较各组间差异，结果见表1。

表1本发明的药物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响(x±s)

组别	N(只)	剂量(药物/kg)	耳肿胀度(mg)
				空白对照	10	-	13.11±1.38
醋酸泼尼松	10	40mg	4.69±1.08**
				妇炎康片	10	5.88g	8.60±1.88**
本发明灌肠剂高剂量组	10	11.76g	5.21±1.59**##

本发明灌肠剂中剂量组	10	5.88g	5.69±1.08**##
				本发明灌肠剂低剂量组	10	2.94g	6.48±1.17**##

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与妇炎康片组比较#P＜0.05，##P＜0.01。

表1结果表明，与空白对照组比较，醋酸泼尼松组、妇炎康片组、本发明灌肠剂高剂量组、本发明灌肠剂中剂量组、本发明灌肠剂低剂量组，均能显著减轻二甲苯致炎小鼠的耳肿胀度(P值均＜0.01)，提示各实验组均有较好的抗炎作用。与妇炎康片组比较，本发明灌肠剂高、中、低剂量组作用强度均有显著增强(P值均＜0.05)，提示本发明灌肠剂抗炎作用强于妇炎康片。

(2)本发明灌肠剂对大鼠足跖肿胀的影响

取SD大鼠，体重为180～200g，60只，雌雄各半，随机分成6组，即空白对照组，醋酸泼尼松组，妇炎康片组，本发明灌肠剂高剂量组，本发明灌肠剂中剂量组，本发明灌肠剂低剂量组。本发明灌肠剂高、中、低剂量组均灌肠给药，其余各组按表2剂量分别灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，连续给药7天，每天1次。用改良容积法测量各组大鼠右后足正常体积(在足正面下作一清晰标线)，末次给药后在右后足跖皮下注入0.1ml角叉菜胶(0.2％)，测定致炎后0.5h、1h、2h、4h、6h右后足体积，计算肿胀率。

结果见表2、3。比较各给药组足跖肿胀率与空白对照组足跖肿胀率的差异，并进行t检验。

表2本发明药物对大鼠足跖肿胀率的影响(x±s)

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与妇炎康片组比较#P＜0.05，##P＜0.01。

表3本发明药物对大鼠足跖肿胀抑制率的影响

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与妇炎康片组比较#P＜0.05，##P＜0.01。

表2结果表明，与空白对照组比较，醋酸泼尼松组、妇炎康片组、本发明灌肠剂高剂量组、本发明灌肠剂中剂量组、本发明灌肠剂低剂量组在各时间点，均能显著抑制角叉菜胶引起大鼠足趾肿胀(P值均＜0.01＝。与妇炎康片组比较，本发明灌肠剂高、中剂量组在0.5h、1h、2h作用强度均有显著增强(P值均＜0.01＝，而在4h、6h时间点无显著性差异(P值均＞0.05)，提示本发明灌肠剂起效较妇炎康片快。

(3)妇炎康灌肠剂对大鼠棉球肉芽肿性炎症作用

取SD大鼠，体重190-210g，雌雄各半，60只，随机分成6组，每组10只，即空白对照组，醋酸泼尼松组，妇炎康片组，本发明灌肠剂高剂量组，本发明灌肠剂中剂量组，本发明灌肠剂低剂量组。先称10mg的脱脂棉球制成形状大致相同的棉球，高压灭菌后烘干备用。每只大鼠腹腔注射乌拉糖0.2ml麻醉，手术将1个棉球植入大鼠腋窝部皮下。术后第二天开始给药，本发明灌肠剂高、中、低剂量组均灌肠给药，其余各组按表3剂量分别灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，每天1次，连续7天。第八天脱臼处死大鼠，取出棉球，置60℃烤箱至恒重，减去原棉球重量即为肉芽肿重量。肉芽肿重量以mg(肉芽肿)表示，比较各给药组肉芽肿与空白对照组肉芽肿重量差异，并进行方差检验；结果见表4。

表4本发明的药物对大鼠棉球肉芽肿的影响(x±s)

组别	N(只)	剂量(药物/kg)	肉芽肿重量(mg)
				空白对照	10	-	36.14±2.81
醋酸泼尼松	10	40.0mg	19.93±1.49**
				妇炎康片	10	5.88g	29.07±2.32**
本发明灌肠剂高剂量组	10	11.76g	22.12±2.72**##
				本发明灌肠剂中剂量组	10	5.88g	25.82±3.42**##
本发明灌肠剂低剂量组	10	2.94g	28.77±2.82**

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与妇炎康片组比较#P＜0.05，##P＜0.01。

表4结果表明，与空白对照组比较，醋酸泼尼松组、妇炎康片组、本发明灌肠剂高剂量组、本发明灌肠剂中剂量组、本发明灌肠剂低剂量组，均能显著抑制棉球肉芽组织的生长(P值均＜0.01)。与妇炎康片组比较，本发明灌肠剂高、中剂量组作用强度均有显著增强(P值均＜0.01)，提示本发明灌肠剂抑制棉球肉芽组织的生长作用强于妇炎康片。

镇痛作用：

(1)热板法

调节恒温装置使水温控制在(55±0.5)℃，热板预热30min。测小鼠正常痛阈值：取18～22g雌性小鼠数只，每次一只放在热板上，记录其开始舔后足所需时间(秒)为此鼠的正常痛阈值(小于5秒或大于30秒或中跳跃者不用)。将合格小鼠随机分为6组，测量其痛阈值为其给药前痛阈值。随机分为空白对照组，消炎痛组，妇炎康片组，本发明灌肠剂高剂量组，本发明灌肠剂中剂量组，本发明灌肠剂低剂量组。本发明灌肠剂高、中、低剂量组均灌肠给药，其余各组按表5剂量分别灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，每天给药1次，连续4天。末次给药60min后，分别测量小鼠痛阈值。若60秒无反应，其痛阈值按60秒计算，比较各组间差异，结果见表5。

痛阈值＝给药前痛阈值-给药后痛阈值

表5本发明药物对小鼠热板法痛阈值的影响(x±s)

组别	动物只数(只)	剂量(药物/kg)	痛阈值(s)
				空白对照	10	-	4.27±1.45
消炎痛	10	1.67mg	12.28±1.12**
				妇炎康片	10	5.88g	8.78±0.96**
本发明灌肠剂高剂量组	10	11.76g	12.23±0.84**##
				本发明灌肠剂中剂量组	10	5.88g	10.84±1.06**##
本发明灌肠剂低剂量组	10	2.94g	7.87±1.46**#

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与妇炎康片组比较#P＜0.05，##P＜0.01。

表5结果表明，与空白对照组比较，消炎痛组、妇炎康片组、本发明灌肠剂高剂量组、本发明灌肠剂中剂量组、本发明灌肠剂低剂量组，均能显著抑制热板所致小鼠的疼痛(P值均＜0.01)，并呈良好的量效关系，提示各实验组均有较好的镇痛作用。与妇炎康片组比较，本发明灌肠剂高、中剂量组作用强度均有显著增强(P值均＜0.01)，提示本发明灌肠剂镇痛作用强于妇炎康片。

(2)扭体法

取NIH小鼠60只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为6组，随机分组同上。本发明灌肠剂高、中、低剂量组均灌肠给药，其余各组按表5剂量分别灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，每天给药1次，连续4天。末次给药30min后，各鼠均腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/只，观察10min内每鼠出现扭体反应(腹部内凹、伸展后肢、臂部抬高)时间及出现扭体反应的次数，比较各组间差异，结果见表6。

表6本发明药物对醋酸致痛小鼠的影响(x±s)

组别	动物只数(只)	剂量(药物/kg)	扭体潜伏期(s)	10min内扭体数(次)
					空白对照	10	-	234.4±116.3	29.4±6.38
消炎痛	10	1.67mg	860.7±112.5**	5.5±3.37**
					妇炎康片	10	5.88g	553.0±118.2**	15.5±4.25**
本发明灌肠剂高剂量组	10	11.76g	730.8±121.9**##	7.2±5.01**##
					本发明灌肠剂中剂量组	10	5.88g	617.8±118.2**##	10.3±5.20**##
本发明灌肠剂低剂量组	10	2.94g	533.3±91.5**	14.1±3.95**#

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与妇炎康片组比较#P＜0.05，##P＜0.01。

表6结果表明，与空白对照组比较，消炎痛组、妇炎康片组、本发明灌肠剂高剂量组、本发明灌肠剂中剂量组、本发明灌肠剂低剂量组，均能显著延长醋酸致痛小鼠的潜伏期，减少10min内扭体次数(P值均＜0.01)，并呈良好的量效关系，提示各实验组均有较好的镇痛作用。与妇炎康片组比较，本发明灌肠剂高、中剂量组作用强度均有显著增强(P值均＜0.01)，提示本发明灌肠剂镇痛作用强于妇炎康片。

活血化瘀试验：

(1)对血液流变参数的影响

取SD大鼠，体重190-210g，雌雄各半，70只，随机分成7组，每组10只：分别为空白对照组，每天一次自来水灌肠(1ml/100g)；模型组，每天一次自来水灌肠(1ml/100g)；阳性药对照组，每天一次阿司匹林灌胃(50mg/kg、1.0ml/100g)；妇炎康片组，每天一次妇炎康片药液灌胃(5.88g生药/kg、1.0ml/100g)；本发明灌肠剂高剂量组、本发明灌肠剂中剂量组、本发明灌肠剂低剂量组，每天一次灌肠(1.0ml/100g)，剂量分别为11.76g生药/kg、5.88g生药/kg、2.94g生药/kg。连续给药8天，于第9天除空白对照组外，对其余各组均复制血瘀模型。

模型复制：SC盐酸肾上腺素(Adr)8μg/kg两次，中间间隔4h，两次注射Adr之间(前后各隔2h)，将大鼠浸入冰水内5min，处置后停食。于第10天将大鼠断头取血3.5ml/只，其中2ml注入肝素抗凝管中(1.39×10^-2mol/L血，即38.25单位/mL血)，轻微摇动，待均匀抗凝后，置入30±1℃恒温水浴锅中待测，每只大鼠血样从采血到测量结束约15min，另外1.5mL血注入枸橼酸钠抗凝管中(3.8％，试管预先硅化)。

将1mL肝素抗凝血注入粘度仪转筒内，旋转高切变率(简称高切)、低切变率(简称低切)(高切变率为200S^-1，低切变率为40S^-1)开关，记录相应数据，输入计算机算得高切粘度、低切粘度、血浆粘度、还原粘度。

将肝素抗凝血吸入微量毛细管中，用高速微量离心机经12000r/min离心5min后，用压积板测红细胞压积。

将测量压积后的毛细管放入56±1℃的水浴箱中水浴5min，再用高速离心机离心5min(12000r/min)，用读数显微镜读数并依此计算出纤维蛋白原(该方法称为热沉淀法)。

将1mL枸橼酸钠抗凝血注入5mL长颈玻璃球管中，将该球管安放在血小板粘附仪上，旋转(5r/min)15min后取下，将旋转前后的抗凝血加血小板稀释液(1％草酸铵溶液)，测量粘附前后的血小板数，并依据下式计算出血小板粘附率：

结果经统计处理后：

1)模型组与正常组比较，全血高切粘度、低切粘度、还原粘度、血浆粘度、血小板粘附率等高度显著增高(P＜0.01)，纤维蛋白原也显著增高(P＜0.05)，说明血瘀模型复制成功。

2)丹参阳性组与模型组比较：全血高切粘度、低切粘度、还原粘度、血浆粘度均显著降低(P＜0.05)，其余各项指标均有降低，但没有显著性(P＜0.05)。

3)本发明灌肠剂高、中、低剂量组与模型组比较：高、中剂量组全血高切粘度、低切粘度、还原粘度、血浆粘度、血小板粘附率等五项指标均具有高度显著性下降(P＜0.01)，低剂量组除高切粘度和还原粘度有显著降低外，其余各项指标均无显著变化。从以上结果可以看出，本发明灌肠剂具有剂量依赖关系。

4)本发明灌肠剂高、中、低剂量组与妇炎康片组比较，高、中剂量组全血高切粘度、低切粘度、还原粘度、血浆粘度、血小板粘附率等五项指标均具有显著性下降(P＜0.05)，低剂量组各项指标无显著变化。从以上结果可以看出，本发明灌肠剂抗凝血作用强于妇炎康片。

(2)对微循环的影响

选用正常大鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，分别为空白对照组，山莨菪碱组，妇炎康片组，本发明灌肠剂高剂量组，本发明灌肠剂中剂量组，本发明灌肠剂低剂量组。山莨菪碱浓度为1mg/mL，其余浓度同上。实验时用3.0％的戊巴比妥钠按1mL/kg腹腔注射麻醉大鼠，侧位固定于手术台上，于正中切开腹壁长约3cm左右，轻轻拉出一段空肠，使肠系膜覆盖于透明小池上，用37℃洛氏液充满灌流槽，采用双目倒置显微镜放大100倍进行观察(借助于测微尺)，选择良好的视区固定观测，将配制好的药液分别注入灌流槽内。高、中、低剂量组各1mL，空白对照组组生理盐水1mL，山莨菪碱注射液1mL，作用5min后进行观察记录，采用给药前后自身对照，并与空白对照组比较，结果进行t检验统计处理，并选择细而直的血管观察给药前后管径及流速的变化，结果表明，与空白对照组比较，本发明灌肠剂高、中剂量可显著增加固定视野毛细血管条数(P＜0.01)，小剂量组(P＜0.05)，对血管内血液的流态无改变；高、中、低剂量均可增加毛细血管的口径(P＜0.01)；高、中、低剂量组均能增加血管内血液的流速(P＜0.01或P＜0.05)：表明该药具有促进微循环的作用。与妇炎康片组比较，本发明灌肠剂高、中、低剂量组在增加固定视野毛细血管条数、增加毛细血管的口径、增加血管内血液的流速方面均显著强于妇炎康片组(P＜0.01或P＜0.05)：表明本发明灌肠剂促进微循环作用强于妇炎康片。

免疫功能试验：

小鼠网状内皮系统碳粒廓清实验

取NIH小鼠，体重为18～22g，雌雄各半，80只，随机分成6组，即空白对照组，醋酸泼尼松组，妇炎康片组，本发明灌肠剂高剂量组，本发明灌肠剂中剂量组，本发明灌肠剂低剂量组。本发明灌肠剂高、中、低剂量组均灌肠给药，其余各组按表7剂量分别灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，每天1次，连续7天。末次给药后0.5小时，于尾静脉注入稀释中华墨汁(用1％明胶液稀释4倍)0.1ml/10g，于注入墨汁后2min及12min，用特制吸管从小鼠眼眶后静脉丛取血20μl，立刻吹入0.1％Na₂CO₃溶液10ml中，用吸管于该液中吸入催促数次充分洗出吸管壁附着之血液，以0.025ml正常小鼠血容于10ml0.1％Na₂CO₃溶液校零，于576nm处测定吸收度(A)值，于注入墨汁后12min处死小鼠，摘取胸腺和脾脏，计算吞噬指数K、胸腺系数、脾系数、校正廓清指数α，结果见表7。

$K=\frac{\log \mathrm{OD}1-\log \mathrm{OD}2}{t2-t1}$

表7本发明药物对小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响(x±s)

组别	动物数只	剂量药物/kg	吞噬指数K	校正廓清指数α
					空白对照	10	-	0.007±0.001	23.54±3.69
醋酸泼尼松	10	40mg	0.024±0.001**	27.78±6.50
					妇炎康片	10	5.88g	0.012±0.005**	23.56±3.04
妇炎康灌肠剂高剂量组	10	11.76g	0.019±0.003**	24.19±4.52
					妇炎康灌肠剂中剂量组	10	5.88g	0.016±0.004**	23.09±1.87
妇炎康灌肠剂低剂量组	10	2.94g	0.013±0.004**	20.73±1.52

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与妇炎康片组比较#P＜0.05，##P＜0.01。

表7结果表明，与空白对照组比较，妇炎康片组，本发明灌肠剂高、中、低剂量组，均能显著提高小鼠网状内皮系统的吞噬功能(P值均＜0.01)，提示各实验组均有明显的提高免疫功能的作用。与妇炎康片组比较，本发明灌肠剂高、中剂量组作用强度显著增强(P值均＜0.01)，提示本发明灌肠剂提高小鼠网状内皮系统的吞噬功能作用强于妇炎康片。

4.动物长期毒性实验

选用SD大鼠，给予不同浓度(29.4、58.8、117.6g药物/kg)的本发明的药物，每天灌肠给药一次，连续60天，末次给药后24小时各组活杀10只动物(雌雄各半)，其余10只动物继续观察2周后活杀。试验期间观察动物的外观、一般行为、体重变化，给药后60天和停药2周进行血液学(RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、HB、PLT、CT、WBC及分类、凝血时间)和血清生化(AST、ALT、ALP、Glu、BUN、Crea、TP、T.BIL、ALB、GLOB、A/G、CHOL、Na、K、Cl)、尿液生化、脏器系数、病理组织学等指标检查。试验结果表明：各组动物一般状态良好，外观体征、行为活动、体重增长均无异常变化；三个剂量组及对照组血液学检查、血液生化学、尿液生化检查均在正常范围，组间无显著差异；各组主要脏器组织，特别仔细观察了盆腔中下结肠、直肠、膀胱、卵巢、输卵管及子宫，结果未见与药物相关的病理学变化。上述指标停药2周后也未见改变。本试验用药剂量分别为临床用药剂量的10、20、40倍，根据试验结果表明：本发明的药物高、中、低三个剂量(29.4、58.8、117.6g药物/kg)连续90天给药对大鼠无明显影响，恢复期观察也未见延迟性毒性反应，提示本品临床应用的剂量安全性较高。

5.初步稳定性试验

为了考察本发明，即本发明灌肠剂的质量稳定性情况，根据卫生部新药审批办法中的“新药(中药)稳定性试验资料的补充规定和卫生部药品卫生标准中的有关规定”及“本发明灌肠剂质量标准”，对本发明灌肠剂产品进行了初步稳定性考察，现将实验方法及结果报告如下：

(1)试验方法：

正常室温留样观察法。

(2)实验用供试品：

妇炎康灌肠液(批号：20060301、20060305、20060309)、妇炎康灌肠颗粒(批号：20060301、20060305、20060309)、妇炎康灌肠粉针剂(批号：20060301、20060305、20060309)。

(3)实验用仪器及试剂试药

1)实验用仪器

安捷伦高效液相色谱仪、酸度计、韦氏比重称、水浴锅、紫外灯、烘箱、分析天平、层析缸、培养箱等。

2)实验用试剂试药

三氯化铝、甲醇、醋酸乙酯、甲酸、甲苯、正丁醇、氯仿、乙醇、硅胶C等。

(4)实验用对照品

延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、氧化苦参碱、苦参碱、阿魏酸(中国药品生物制品检定所提供)。

(5)正常室温留样观察室条件

留样室面积18m²，室内通风、防潮、照明设施良好，室内温度保持在25℃左右，相对湿度25-35％。

(6)检测方法

依据本发明灌肠剂质量标准及卫生部药品卫生标准，对不同贮存期的本发明灌肠剂系列产品进行全面检验，进行了3个月的初步稳定性考察，结果表明，本发明灌肠剂系列产品质量稳定，各项指标均符合质量标准下及药品卫生标准项下有关各项规定。

提示：本品稳定性良好。

6.该药使用方法

本发明灌肠剂系列产品的使用方法：使用时，患者应先排空大小便，并将妇炎康灌肠液加热至38-40℃，若是颗粒剂，每剂用适量开水溶化，待温度降低至38-40℃即可使用。临床上用肛管及注射器或其他灌肠专用工具保留灌肠，患者在家自行治疗时可用配备的灌肠器保留灌肠，每晚睡前一次，10天为一个疗程。每10mL灌肠液含有0.6～30克原药材，经加热灌肠，药物作用直接迅速安全，且有一定理疗作用。

7.安全性

临床应用150例观察结果为：痊愈96例，显效31例，有效19例，无效4例，总有效率97％，未见其他毒副作用或过敏反应。临床应用观察表明，本发明制备的本发明灌肠剂，通过保留灌肠使药物大面积被肠粘膜迅速吸收，药物利用率高，疗程较原片剂缩短，见效快。

实施例1：

(1)、选取下述重量份的原料药：赤芍60份、土茯苓克100份、三棱(醋炙)60份、川楝子(炒)60份、莪术(醋炙)60份、延胡索(醋炙)60份、芡实(炒)100份、当归100份、苦参60份、香附(醋炙)40份、黄柏60份、丹参100份、山药120份，并将其中的峩术和山药粉碎成40～100目细粉，备用；

(2)、赤芍、土茯苓、三棱、川楝子、延胡索、芡实、当归、苦参、香附、黄柏、丹参加水煎煮三次，第一次加入5～20倍量的水，煎煮2小时，第二次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，第三次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，合并数次水煎液，滤过，滤液备用；

(3)将上述滤液与药材细粉及防腐剂苯甲酸钠0.5克/100mL混匀，浓缩至每1毫升含3克原药材，灭菌，冷却，备用；

(4)无菌分装于5mL塑料瓶中，包装，即得液体型灌肠剂；

(5)若制备干燥粉型，工艺路线则包括：将收集的滤液浓缩至1.05～1.15的清膏，加入上述药材细粉，搅拌均匀，进行干燥(添加或不添加辅料适量)，粉碎、灭菌、分装等工艺制成干燥粉型灌肠剂。

(6)若制备干燥颗粒型，工艺路线则包括：将收集的滤液浓缩至1.05～1.15的清膏，加入上述药材细粉，搅拌均匀，进行干燥，添加或不添加辅料适量，再按常规的制粒方法制成颗粒，经烘干、整粒、分装、灭菌等工艺制成干燥颗粒型灌肠剂。

所述的辅料为下列中的一种或一种以上：乳糖、淀粉、羧甲基淀粉钠、预胶化淀粉、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、糖浆、微晶纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钙、硫酸钙、磷酸氢钙、磷酸钙、碳酸钙、轻质氧化镁、滑石粉、微晶硅胶、氢氧化铝、硼酸、氯化钠、糊精、硬脂酸镁、氢化植物油、聚乙二醇、低取代羟丙基纤维素、维膨淀5000、交联聚维酮1NF-10、聚乙烯吡咯烷酮类、邻苯二甲基醋酸纤维素、苯二甲基羟丙基甲基纤维素、羟甲基乙基纤维素、枸橼酸、胆酸、富马酸、琥珀酸、酒石酸。

本发明之液体型灌肠剂为深褐色混悬液，具有中药芳香气味，每100毫升药液含有300克原药材。干燥颗粒或干燥粉产品在使用时需要加一定比例开水，溶化成的灌肠液每100毫升药液含有300克原药材。

实施例2：

(1)、选取下述重量份的原料药：赤芍60份、土茯苓克100份、三棱(醋炙)60份、川楝子(炒)60份、莪术(醋炙)60份、延胡索(醋炙)60份、芡实(炒)100份、当归100份、苦参60份、香附(醋炙)40份、黄柏60份、丹参100份、山药120份，并将其中的峩术和山药粉碎成40～100目细粉，备用；

(2)、赤芍、土茯苓、三棱、川楝子、延胡索、芡实、当归、苦参、香附、黄柏、丹参加水煎煮三次，第一次加入5～20倍量的水，煎煮2小时，第二次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，第三次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，合并数次水煎液，滤过，滤液备用；

(3)将上述滤液与药材细粉及防腐剂羟苯丁酯0.5克/100mL混匀，灭菌，冷却，备用；

(4)无菌分装于300mL塑料瓶中，包装，即得液体型灌肠剂；

(5)若制备干燥粉型，工艺路线则包括：将收集的滤液浓缩至一定密度的清膏，加入上述药材细粉，搅拌均匀，进行干燥，粉碎、灭菌、分装等工艺制成干燥粉型灌肠剂。

(6)若制备干燥颗粒型，工艺路线则包括：将收集的滤液浓缩至一定密度的清膏，加入上述药材细粉，搅拌均匀，进行干燥，添加或不添加辅料适量，再按常规的制粒方法制成颗粒，经烘干、整粒、分装、灭菌等工艺制成干燥颗粒型灌肠剂。

本发明的灌肠液的液体为浅褐色，具有中药芳香气味，每100mL药液含有6g原药材。干燥颗粒或干燥粉产品在使用时需要加一定比例开水，溶化成的灌肠液每100mL也含有6g原生药量的有效成分。

实施例3：

(1)～(2)步骤同实施例1。

(3)将上述滤液与药材细粉及防腐剂苯甲酸钠0.5克/100mL混匀，加水稀释至每100毫升含6克原药材，灭菌，冷却，备用；

(4)无菌分装于300mL塑料瓶中，包装，即得液体型灌肠剂；

(5)若制备干燥粉型，工艺路线则包括：将收集的滤液浓缩至一定密度的清膏，加入上述药材细粉，搅拌均匀，进行干燥，添加辅料适量，所用辅料同实施例1，粉碎、灭菌、分装等工艺制成干燥粉型灌肠剂。

(6)若制备干燥颗粒型，工艺路线则包括：将收集的滤液浓缩至一定密度的清膏，加入上述药材细粉，搅拌均匀，进行干燥，添加辅料适量，所用辅料同实施例1再按常规的制粒方法制成颗粒，经烘干、整粒、分装、灭菌等工艺制成干燥颗粒型灌肠剂。本发明的灌肠液的液体为浅褐色，具有中药芳香气味，每100mL药液含有6g原生药量的有效成分。干燥颗粒或干燥粉产品在使用时需要加一定比例开水，溶化成的灌肠液每100mL也含有6g原生药量的有效成分。

实施例4：

(1)～(2)步骤同实施例2。

(3)将上述滤液浓缩至每1毫升含3克原药材，与药材细粉及防腐剂羟苯丁酯0.5克/100mL混匀，灭菌，冷却，备用；

(4)无菌分装于1mL塑料瓶中，包装，即得灌肠剂；

(5)若制备干燥粉型，工艺路线则包括：将收集的滤液浓缩至一定密度的清膏，加入上述药材细粉，搅拌均匀，进行干燥，添加辅料适量，所用辅料同实施例1，粉碎、灭菌、分装等工艺制成干燥粉型灌肠剂。

(6)若制备干燥颗粒型，工艺路线则包括：将收集的滤液浓缩至一定密度的清膏，加入上述药材细粉，搅拌均匀，进行干燥，所用辅料同实施例1，再按常规的制粒方法制成颗粒，经烘干、整粒、分装、灭菌等工艺制成干燥颗粒型灌肠剂。

本发明的灌肠液的液体为深褐色，具有中药芳香气味，每100毫升药液含有300克原药材。干燥颗粒或干燥粉产品在使用时需要加一定比例开水，溶化成的灌肠液每100毫升药液含有300克原药材。

上列详细说明是针对本发明的可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本案的专利范围中。

Claims (2)

1.一种治疗妇科炎症的灌肠剂的制备方法，其特征在于：

取下述重量份的原料药：赤芍60份、土茯苓100份、醋炙三棱60份、炒川楝子60份、醋炙莪术60份、醋炙延胡索60份、炒芡实100份、当归100份、苦参60份、醋炙香附40份、黄柏60份、丹参100份、山药120份，并将其中的莪术和山药粉碎成40～100目细粉，备用；

赤芍、土茯苓、三棱、川楝子、延胡索、芡实、当归、苦参、香附、黄柏、丹参加水煎煮三次，第一次加入5～20倍量的水，煎煮2小时，第二次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，第三次加入5～20倍量的水，煎煮1小时，合并数次水煎液，滤过，滤液备用；

将上述滤液浓缩；滤液浓缩至密度为1.05～1.15的清膏，加入莪术和山药的细粉，搅拌均匀，添加或不添加辅料，干燥，粉碎，灭菌分装，即得干燥粉型灌肠剂；或者：将上述滤液浓缩；滤液浓缩至密度为1.05～1.15的清膏，加入莪术和山药的细粉，搅拌均匀，干燥，粉碎，制粒，制粒过程添加或不添加辅料，经过烘干、整粒、分装、灭菌工艺制成颗粒剂型灌肠剂。

2.根据权利要求1所述的一种治疗妇科炎症的灌肠剂的制备方法，其中所述的辅料为下列中的一种或一种以上：乳糖、淀粉、羧甲基淀粉钠、预胶化淀粉、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、糖浆、微晶纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、硫酸钙、磷酸氢钙、磷酸钙、碳酸钙、轻质氧化镁、滑石粉、微晶硅胶、氢氧化铝、硼酸、氯化钠、糊精、硬脂酸镁、氢化植物油、聚乙二醇、低取代羟丙基纤维素、维膨淀5000、交联聚维酮1NF-10、聚乙烯吡咯烷酮类、邻苯二甲基醋酸纤维素、苯二甲基羟丙基甲基纤维素、羟甲基乙基纤维素、枸橼酸、胆酸、富马酸、琥珀酸、酒石酸。