CN105861359A - 一株产絮的异养硝化-好氧反硝化耐高温菌株及其应用 - Google Patents

一株产絮的异养硝化-好氧反硝化耐高温菌株及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种能够进行异养硝化和好氧反硝化、并具有絮凝能力的门多萨假单胞菌耐温菌株HAD‑2(Pseudomonas mendocina HAD‑2)。该菌株来源于石化污水处理厂的活性污泥，于2016年1月20日保藏于中国微生物菌种保藏中心，保藏号：CGMCC 1.15625。本发明属于环保技术领域，针对解决污水处理中氨氮、硝态氮和总氮的同步去除问题。该菌株能在好氧条件下，同时进行异养硝化和好氧反硝化，快速去除异养硝化体系、好氧反硝化体系、及模拟污水中的氨氮、硝态氮、亚硝态氮。并且，能利用LB、发酵培养基或者含氮培养基发酵产絮。该菌株适用范围广，应用于较高温度和偏碱性污水的处理中有优势。

Description

一株产絮的异养硝化 - 好氧反硝化耐高温菌株及其应用
技术领域
本发明属于环保技术领域，具体涉及到一株产絮的异养硝化-好氧反硝化门多萨门单胞菌耐温菌株HAD-2，及其在污水处理中的应用。
背景技术
生物脱氮技术在污水处理中得到了广泛的应用。传统的生物脱氮方法需要通过微生物好氧硝化和厌氧反硝化耦合作用来实现。硝化细菌和反硝化细菌对氧气的需求不同、对环境条件的要求也不同。因此，在污水处理的工程实践中需要设置硝化池和反硝化池，工艺较为复杂。异养硝化-好氧好硝化(Heterotrophic Nitrification-Aerobic Denitrification,HN-AD)是一种新型的生物脱氮技术，能够在同一反应空间进行硝化和反硝化作用。HN-AD微生物同时具备硝化和反硝化的能力，能够单独完成不同种类如氨氮、硝酸氮和亚硝酸氮的去除，好氧条件下就能将不同类型的氮污染物去除。在自然环境中和污水生物脱氮中，HN-AD能够作为自养硝化和厌氧反硝化过程的有益补充。在污水处理实践中，异养硝化-好氧反硝化的优势体现在：能够在同一反应器中进行，能够大大减少设备占地面积和建设资金、降低成本；整个过程中可以减少加入调节系统pH的化学物质；异养硝化-好氧反硝化过程硝酸氮和亚硝酸氮的积累少；异养硝化-好氧反硝化菌在脱氮的同时能够去除COD、总磷、其它污染物等。
此外，传统的生物脱氮A/O技术中涉及到的自养硝化菌和厌氧反硝化菌，在富集纯化和发酵生产中都存在极大的困难。自养硝化细菌生长缓慢、传代时间长；厌氧反硝化需要严格控制溶氧浓度。而异养硝化-好氧反硝化菌培养条件易于控制、菌株容易获得、生长速度快、能够方便的扩大培养，都展示出其在污水处理实践中的广阔前景。
来自不同环境的异养硝化好氧反硝化菌株，为生物脱氮的试剂应用提供了丰富的种源。如如耐低温的荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens wsw-1001、耐酸碱的气单胞菌Aeromonas sp.HN-02、嗜盐的弧菌Vibrio diabolicus SF16、海洋中的盐单胞菌Halomonas sp.X3、耐高氨氮的不动杆菌Acinetobacter sp.TN_14、贫营养的代尔夫特菌Delftia lacustris SF 9。某些假单胞菌能够同步降解污染物，如施氏假单胞菌Pseudomonas stutzeri YG-24可同步去除磷、Diaphorobacer sp.PDB3可同步降解苯酚、假单胞菌Pseudomonas sp.BN5可以同步降解苯，等。这些优点使得人们越来越关注HN-AD菌株的发掘和在生物脱氮中的影响因素。
微生物絮凝剂可使水中不易沉淀的固体悬浮颗粒凝聚沉降，广泛应用于水处理中。它是一类由微生物或者分泌物产生的代谢产物，具有生物分解性和安全性，高效、无毒、无二次污染的优点。1986年Kurane等人开发的微生物絮凝剂NOC-1，对微生物、泥浆水、河水、粉煤灰水、活性炭粉水、膨胀污泥、纸浆污水等均有极好的絮凝效果。
目前，同时具有较强异养硝化-好氧反硝化性能和产生物絮凝剂的菌株目前报道很少，能够应用于较高温度和偏碱性污水的菌株尚未见报道，非常需要提供这样的菌株资源应用于污水处理工业。
发明内容
本发明要解决的问题是针对现有研究的缺点与不足，提供了一株能产生物絮凝剂的异养硝化-好氧反硝化的耐高温菌种，以及其在污水处理中的应用。
本发明提供的异养硝化好氧反硝化菌株，为革兰氏阴性菌，具有以下菌落特征：菌落大小中等、黄色、不透明、边缘不规则、中央隆起、表面平滑、湿润、易挑起。经透射电镜观察(图 1)，菌株HAD-2呈杆状、两端钝圆，大小为(0.2～0.4)μm×(2～4)μm。在15℃到45℃可以快速生长，为耐热菌。
本发明提供的异养硝化好氧反硝化菌株，其16S rRNA基因及看家基因rpoB序列使用美国国立生物技术信息中心(NCBI)的BLAST程序与GenBank数据库中已收录的序列进行同源性比对，结合生理生化实验结果，鉴定该菌株为门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocia)，并命名为门多萨假单胞菌HAD-2(Pseudomonas mendocia HAD-2)，于2016年3月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普 通微生物中心，保藏中心登记入册编号为：CGMCC 1.15625。
本发明所提供的门多萨假单胞菌能够在好氧情况下，进行异养硝化和好氧反硝化，并能够产生物絮凝剂，可应用于含氮污水的处理。
所述菌株应用于污水处理的方法为：挑取门多萨假单胞菌HAD-2单菌落，于异养硝化培养基中活化培养20～30h，按照1～5％的接种量接种到待处理污水中，120～200rpm下培养12～24h。
所述污水pH在6.0～9.0之间，优选7.5～8.5；温度在25～45℃之间，优选30～40℃。
上述的异养硝化培养基中含有(g/L)：琥珀酸钠4.7,NH4Cl 1.0，KH2PO4 1.5，NaHPO4 7.9，Mg2SO4··7H2O 0.5，微量元素溶液1mL；微量元素溶液中含有(g/L)：EDTA 50.0，ZnSO4 2.2，CaCl2 5.5g/L，MnCl2·4H2O 5.06，FeSO4·7H2O 5.0，(NH4)6Mo7O24·4H2O 1.1，CuSO4·5H2O 1.57，CoCl2·6H2O1.61。
本发明所提供的门多萨假单胞菌在LB、发酵培养基或者含氮培养基中生产絮凝剂的方法：挑取门多萨假单胞菌HAD-2单菌落，接种到LB、发酵培养基或者含氮培养基中，在30～40℃，120rpm培养24h以上。
每升所述LB培养基中含有：蛋白胨10g，酵母抽提物5g，氯化钠5g；每升所述发酵培养基中含有：葡糖糖20g，磷酸二氢钾2g，磷酸氢二钾5g，硫酸铵0.2g，氯化钠0.1g，七水硫酸镁0.5g，尿素0.2g，酵母膏0.5g；每升所述含氮培养基中含有：琥珀酸钠3.75g，氯化铵(或者硝酸钾、亚硝酸钠)0.5g，磷酸二氢钾1.5g，磷酸氢二钠7.9g，0.5g酵母提取物，七水硫酸镁0.5g，pH＝7.0-8.5。
查阅文献，尚未发现具有耐高温、产絮和同步异养硝化-好氧反硝化性能的门多萨假单胞菌在污水处理中的应用。
本发明提供一种产絮的异养硝化好氧反硝化耐高温菌株，以及在污水处理中的应用。在异养硝化体系中，12h内对氨氮的去除率达到92.29％，硝酸盐和亚硝酸盐积累少；在反硝化体系中，12h内对硝酸氮、亚硝酸氮的去除率分别达到86.40％和84.92％；在模拟污水中，对氨氮、硝酸氮、亚硝酸氮的去除率分别达到92.04％、65.47％和72.40％。该菌株能够产生生物絮凝剂，其LB、发酵培养基和含氮培养液对高龄土的絮凝率分别达到92％、94％和88％。菌株在污水处理领域特别是较高温度和偏碱性的含氮污水处理中有良好的应用前景。
附图说明
下面结合附图对本发明的产絮异养硝化好氧反硝化菌株及应用作进一步说明。
图 1是本菌株的透射电镜照片；
图 2是基于本菌株与亲缘关系较近模式菌株的16S rRNA基因构建的系统发育树；
图 3是基于本菌株与亲缘关系较近模式菌株的rpoB基因构建的系统发育树；
图 4是本菌株在不同pH和碳氮比条件下的异养硝化性能图；
图 5是本菌株的异养硝化脱氮时间动力曲线图；
图 6是本菌株的好氧反硝化脱氮时间动力曲线图；
图 7本菌株在LB培养基中絮凝能力动力曲线图。
具体实施方式
以下结合具体实施方式对本发明进行详细描述，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并予以实施，但所举实例不作为对本发明的限定。
实施例一：异养硝化-好氧反硝化的门多萨假单胞菌菌株HAD-2的分离纯化
样品从东营垦利石化污水处理厂稳定运行的活性污泥中筛选和分离获得。
培养基配方：反硝化培养基(g/L)：琥珀酸钠4.7,KNO3 1.5，KH2PO4 1.5，NaHPO4 7.9，Mg2SO4··7H2O 0.5，微量元素溶液1mL；pH 7.5。微量元素溶液(g/L)：EDTA 50.0，ZnSO4 2.2，CaCl2 5.5g/L，MnCl2·4H2O 5.06，FeSO4·7H2O 5.0，(NH4)6Mo7O24·4H2O 1.1，CuSO4·5H2O 1.57，CoCl2·6H2O 1.61。溴酚蓝(BTB)筛选培养基(g/L)：L-天冬酰胺1.0，KNO3 1.0，CH3COONa 8.5，KH2PO4 1.0，FeCl2·6H2O0.05，CaCl2·2H2O 0.2，MgSO4·7H2O 1.0，溴酚蓝(BTB)溶液(1％BTB与99％乙醇)5mL；pH7.0～ 7.3。异养硝化培养基(g/L)：以NH4Cl代替KNO3，其它成分同反硝化培养基。
菌株筛选方法：取5mL新鲜活性污泥样品，用匀浆器打碎5min后，接种到含有100mL液体反硝化培养基中，于30℃、150rpm/min培养3d后，转接到新鲜反硝化培养基中进行富集培养，共转接3次。菌液梯度稀释涂布BTB平板，于30℃培养箱倒置培养2-3d。挑取周围培养基出现蓝色的单克隆菌落划线分离，能够使培养基变色的单菌落为好氧反硝化菌株。将筛选出来的反硝化菌株接种入异养硝化液体培养基中，于30℃、150rpm/min培养24h，检测其氨氮浓度和OD600值，生长良好并能够降低氨氮含量的菌株即为异养硝化-好氧反硝化菌株。菌株HAD-2表现出较高的硝化和反硝化能力，进行进一步分析。
实施例二：菌株HAD-2的鉴定
菌株形态：观察纯化后的菌株HAD-2单菌落的菌落形态，革兰氏染色，并进行透射电镜观察。菌株用2.5％戊二醛固定，用缓冲液充分漂洗，滴在铜网上，用磷钨酸染色，在高真空条件下进行透射电镜观察。结果见附图 1。
生理生化实验：依据《伯杰细菌鉴定手册》、《常见细菌鉴定手册》进行生理生化鉴定，结果见表 1。并在不同温度下进行生长的测定，发现菌株在15～45℃可生长，为耐高温菌株，在45℃条件下生长迅速。
表 1菌株HAD的生理生化特征
实验项目 结果 实验项目 结果
氧化酶 - 吲哚 -
淀粉水解 - VP -
葡萄糖发酵 - 明胶降解 +
七叶苷 + 葡糖糖 +
硝酸盐产气 + 甘露醇 +
ONPG - 肌醇 -
精氨酸 + 山梨醇 -
赖氨酸 + 鼠李糖 -
鸟氨酸 + 蔗糖 -
柠檬酸 + 蜜二糖 -
硫化氢 + 苦杏仁甙 -
脲酶 - 阿拉伯糖 +
乳糖 - 4℃生长 -
基因的扩增：菌株16S rRNA基因的扩增：实验细菌基因组DNA提取试剂盒提取菌株HAD-2的基因组，采用细菌16S rRNA基因的通用引物27F：5’-AGAGMTGATCATGGCTCAG-3’，1492R：5’-GGGYTACCTTGTTACGACTT-3’)进行PCR扩增。PCR反应条件为：95℃ 5min；95℃ 30s，55℃30s，72℃ 90s，循环30次；72℃ 10min。菌株看家基因rpoB的扩增：由于菌株HAD-2的16S rRNA基因与四个种属的细菌同源性都达到99.8％，无法确定该菌株的分类地位，构建的系统树其分类地位也不明确。因此扩增了HAD-2菌的看家基因rpoB，使用的引物为：LAPS：5’–TGGCCGAGAACCAGTTCCGCGT-3’及LAPS27：5’–CGGCTTCGTCCAGCTTGTTCAG-3’。PCR扩增条件为：94℃ 5min；94℃ 30s,50℃ 30s,72℃ 50s，循环35次；72℃ 10min。
扩增产物的序列测定：符合预期大小的PCR产物经过1％琼脂糖电泳后切胶回收，进行序列测定。获得的16S rRNA基因片段和rpoB基因片段在GenBank中的序列登录号分别为KX034121和KX034122。
系统发育树的构建及分析：菌株的16S rRNA基因序列在网站http://www.ezbiocloud.net/eztaxon中与模式菌株的16S rRNA基因序列进行同源性比较。通过软件ClustalX将菌株的16S rRNA、rpoB基因序列与亲缘关系较近Pseudomonas属的菌株进行多重序列比对，并使用MEGA 5.0软件构建邻接法系 统进化树。得到的系统发育树分别见附 图 2 和 3。结合形态特征和生理生化结果，鉴定该菌株为门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)。
实施例三、菌株HAD-2菌悬液的制备
将单个HAD-2菌落接种到LB培养基中，35℃培养12～16小时，离心去上清。使用0.9％灭菌生理盐水重悬菌体沉淀，得到HAD-2菌悬液。所述LB培养基含有(g/L)：10g蛋白胨，5g酵母提取物，10g氯化钠，调pH至7.0，121℃条件下灭菌20分钟。
实施例四、菌株异养硝化的适应范围
按照5％的接种量，将上述菌悬液接种至异养硝化培养基中，研究不同碳源种类、C/N、温度、盐度、pH值对其硝化性能的影响，得到的结果为：琥珀酸钠、柠檬酸钠、乙酸钠、葡萄糖都可作为碳源，最适碳源为琥珀酸；碳氮比从10:1到30:1皆可，最适碳氮比为25:1；温度从15℃到45℃皆可，最适温度为30–40℃；盐度0～20g/L氯化钠皆可，最适盐度为0～10g/L；pH值从6.0到9.0皆可，最适pH值为7.0～8.5。
实施例五、菌株HAD-2在异养硝化系统中的脱氮能力
将上述菌悬液按照5％的接种量接种至异养硝化培养基中，120rpm/min，35℃振荡培养。每隔6h取样，分别测定NH4-N+，NO2-N-和NO3-N-浓度和pH值，同时测定菌体生长OD600，结果如图 5所示。经测试计算，菌株HAD-2可在12小时内快速去除氨氮，去除率可达到92.29％，硝酸氮和亚硝酸氮的积累很少。
实施例六、菌株HAD-2在好氧反硝化系统中的脱氮能力
将单个HAD-2菌落接种到异养硝化培养基中，35℃，120rpm/min培养12-16小时。菌液按照5％的接种量接种至反硝化培养基中，120rpm/min，35℃振荡培养。每隔6h取样，分别测定NO2-N-和NO3-N-浓度和pH值，同时测定菌体生长OD600，结果如图 6所示，经测试计算，菌株HAD-2在12小时内，对硝酸氮、亚硝酸氮的去除率分别达到86.40％和84.92％。
实施例七、菌株HAD-2在模拟污水中的脱氮能力
将单个HAD-2菌落接种到异养硝化培养基中，35℃，120rpm/min培养12-16小时。菌液按照5％的接种量接种至模拟污水中，120rpm/min，35℃振荡培养。模拟废水中同时含有NH4-N+，NO2-N-和NO3-N-。分别测定测试液中NH4-N+，NO2-N-和NO3-N-浓度和pH值，同时测定菌体生长OD600。经测试计算，菌株HAD-2对模拟废水中氨氮、硝酸氮和亚硝酸氮的去除率分别达到92.04％、65.47％和72.40％
实施例八、菌株HAD-2的产絮性能
将单个HAD-2菌落接种到异养硝化培养基中，30～40℃，120rpm/min培养12～16小时。菌液按照5％的比例接种到LB培养基中，120rpm/min下振荡培养，每隔6h取其上清液按照体积比为(0.5-1)：100投加到4g/L高岭土悬浊液中，1％CaCl2做助凝剂，pH值为7.0，快速200rpm/min，1min；慢速80rpm/min，30s进行搅拌。静置十分钟后，吸取上清液以蒸馏水做空白于紫外分光光度计550nm处测定吸光值。结果如图7所示，絮凝率可达92％。絮凝率计算公式为：
式中，A为对照上清液的吸光值；B为絮凝后上清液的吸光值。
同样的方法将菌株HAD按照5％的比例接种到发酵培养基或者含氮培养基中。每升所述发酵培养基中含有：葡糖糖20g，磷酸二氢钾2g，磷酸氢二钾5g，硫酸铵0.2g，氯化钠0.1g，七水硫酸镁0.5g，尿素0.2g，酵母膏0.5g；每升所述含氮培养基中含有：琥珀酸钠3.75g，氯化铵(或者硝酸钾、亚硝酸钠)0.5g，磷酸二氢钾1.5g，磷酸氢二钠7.9g，0.5g酵母提取物，七水硫酸镁0.5g，pH＝7.0-8.5。培养24h后测定发酵培养基和含氮培养基对高岭土的絮凝率，分别为94％和88％。

Claims (5)

1.一种高效异养硝化、好氧反硝化并能产絮的门多萨假单胞菌HAD-2，其特征是：该菌株于2016年3月25日保藏于中国微生物菌种保藏中心，保藏号：CGMCC 1.15625。
2.根据权利要求1所述的门多萨假单胞菌HAD-2，其特征是：在LB培养基上的菌落大小中等、黄色、不透明、边缘不规则、中央隆起、表面平滑、湿润、易挑起，革兰氏染色成阴性。透射电镜下，菌株HAD-2呈杆状、两端钝圆，大小为(0.2～0.4)μm×(2～4)μm。该菌株可以在15℃～45℃生长，为耐热菌。
3.根据权利要求1所述的门多萨假单胞菌HAD-2在污水处理中的应用，其特征是：该菌株接种于含有氨氮、硝酸盐、亚硝酸盐的基础培养基中，能够在中到偏碱性条件下进行好氧硝化及反硝化，同时去除氨氮、硝态氮和亚硝态氮，达到去除总氮的目的。并且，该菌株在LB培养基、或者发酵培养基、或者含氮培养基中可产生生物絮凝剂。
4.根据权利要求3所述的门多萨假单胞菌HAD-2的应用，其特征是：所述菌株应用于污水处理的方法为，挑取门多萨假单胞菌HAD-2单菌落，于异养硝化培养基中活化培养20～30h，按照1～5％的比例接种于待处理污水中，120～200rpm下培养12～24h。适合的污水pH在7.0～8.5之间、碳氮比10～30、温度30～45℃。
5.根据权利要求3所述的门多萨假单胞菌HAD-2产生物絮凝剂的应用，其特征是：每升所述LB培养基中含有：蛋白胨10g，酵母抽提物5g，氯化钠5g；每升所述发酵培养基中含有：葡糖糖20g，磷酸二氢钾2g，磷酸氢二钾5g，硫酸铵0.2g，氯化钠0.1g，七水硫酸镁0.5g，尿素0.2g，酵母膏0.5g；每升所述含氮培养基中含有：琥珀酸钠3.75g，氯化铵(或者硝酸钾、亚硝酸钠)0.5g，磷酸二氢钾1.5g，磷酸氢二钠7.9g，酵母提取物0.5g，七水硫酸镁0.5g，pH＝7.0-8.5。
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Cited By (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106520624A (zh) * 2016-12-07 2017-03-22 暨南大学 一株门多萨假单胞菌mkc‑02菌株及其在废水脱氮中的应用
CN107244742A (zh) * 2017-05-10 2017-10-13 上田环境修复股份有限公司 一种工业污水中污染物的微生物降解的方法
CN107983304A (zh) * 2017-11-28 2018-05-04 重庆科技学院 高效耐高温型活性炭吸附剂
CN108034622A (zh) * 2017-06-26 2018-05-15 彭昆国 一株好氧反硝化菌zj-17及其应用
CN108545829A (zh) * 2018-04-25 2018-09-18 中国科学院烟台海岸带研究所 一种水产养殖污水原位好氧脱氮处理净化的方法
CN109055259A (zh) * 2018-08-07 2018-12-21 重庆大学 假单胞菌xd-3及其应用以及微生物絮凝剂
CN109385388A (zh) * 2018-12-29 2019-02-26 中蓝连海设计研究院有限公司 嗜盐反硝化菌yl5-2及其应用
CN110106108A (zh) * 2019-04-25 2019-08-09 黄山市益天士生物科技有限公司 用于提高净化水体菌落繁殖速度的方法
CN110499270A (zh) * 2019-09-02 2019-11-26 华东理工大学 一株嗜碱兼氧反硝化细菌及其应用
CN110656059A (zh) * 2018-06-29 2020-01-07 龙岩学院 一株假单胞菌菌株yg8、种子液及其制备方法和应用
CN110655200A (zh) * 2018-06-29 2020-01-07 龙岩学院 利用假单胞菌菌株yg8处理含氮废水的方法
CN110655197A (zh) * 2018-06-29 2020-01-07 龙岩学院 一种利用异养硝化-好氧反硝化的假单胞菌菌株处理硝酸盐氮废水的方法
CN110734878A (zh) * 2019-11-13 2020-01-31 重庆理工大学 一种耐高氨氮hn-ad的菌株分离方法
CN110846254A (zh) * 2019-11-27 2020-02-28 深圳大学 用于脱氮的复合微生物菌剂及其制备方法和应用
CN111534450A (zh) * 2019-12-26 2020-08-14 广东石油化工学院 一种异养硝化-好氧反硝化菌及其培养方法和应用
CN112175879A (zh) * 2020-10-19 2021-01-05 南京师盛生态环境研究院有限公司 一种同步异养硝化-好氧反硝化门多萨假单胞菌的培养方法及应用
CN113174345A (zh) * 2021-05-13 2021-07-27 安徽省农业科学院水产研究所 一种高效脱氮的异养硝化-好氧反硝化菌株及其应用
CN113528382A (zh) * 2021-07-05 2021-10-22 中国成套设备进出口集团有限公司 一种可利用低成本碳源的复合脱氮菌剂构建及应用
CN113998832A (zh) * 2020-11-02 2022-02-01 呼伦贝尔东北阜丰生物科技有限公司 氨基酸废水深度处理总氮的方法
CN114395505A (zh) * 2021-12-21 2022-04-26 江苏南资环保科技有限公司 一种低温反硝化菌及其应用
CN115806909A (zh) * 2022-11-08 2023-03-17 哈尔滨工业大学（深圳） 一种假单胞菌及其分离方法、应用
CN115851540A (zh) * 2022-12-13 2023-03-28 广州大学 具有耐盐特性的异养硝化好氧反硝化脱氮除磷菌株及应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101787353A (zh) * 2009-12-24 2010-07-28 中国水产科学研究院长江水产研究所 高效去除水体中亚硝态氮、硝态氮和氨氮的门多萨假单胞菌cy004及其应用
CN103484398A (zh) * 2013-08-28 2014-01-01 温州大学 异养硝化-好氧反硝化的门多萨假单胞菌及其培养和应用
CN103497905A (zh) * 2013-07-29 2014-01-08 成都信息工程学院 一种高效脱氮产絮菌株及其应用
CN104531583A (zh) * 2014-12-30 2015-04-22 盐城工学院 一种假单胞菌及由其发酵制得的微生物絮凝剂

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101787353A (zh) * 2009-12-24 2010-07-28 中国水产科学研究院长江水产研究所 高效去除水体中亚硝态氮、硝态氮和氨氮的门多萨假单胞菌cy004及其应用
CN103497905A (zh) * 2013-07-29 2014-01-08 成都信息工程学院 一种高效脱氮产絮菌株及其应用
CN103484398A (zh) * 2013-08-28 2014-01-01 温州大学 异养硝化-好氧反硝化的门多萨假单胞菌及其培养和应用
CN104531583A (zh) * 2014-12-30 2015-04-22 盐城工学院 一种假单胞菌及由其发酵制得的微生物絮凝剂

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LIANG ZHU ET AL.: "Characteristics of an aerobic denitrifier that utilizes ammonium and nitrate simultaneously under the oligotrophic niche", 《ENVIRON SCI POLLUT RES》 *
蔡亚君 等: "多功能水处理菌Pseudomonas stutzeri CDN1的筛选分离与性质鉴定", 《湖北农业科学》 *

Cited By (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106520624A (zh) * 2016-12-07 2017-03-22 暨南大学 一株门多萨假单胞菌mkc‑02菌株及其在废水脱氮中的应用
CN107244742B (zh) * 2017-05-10 2021-02-12 江苏长三角环境科学技术研究院有限公司 一种工业污水中污染物的微生物降解的方法
CN107244742A (zh) * 2017-05-10 2017-10-13 上田环境修复股份有限公司 一种工业污水中污染物的微生物降解的方法
CN108034622A (zh) * 2017-06-26 2018-05-15 彭昆国 一株好氧反硝化菌zj-17及其应用
CN108034622B (zh) * 2017-06-26 2020-08-25 彭昆国 一株好氧反硝化菌zj-17及其应用
CN107983304A (zh) * 2017-11-28 2018-05-04 重庆科技学院 高效耐高温型活性炭吸附剂
CN108545829A (zh) * 2018-04-25 2018-09-18 中国科学院烟台海岸带研究所 一种水产养殖污水原位好氧脱氮处理净化的方法
CN108545829B (zh) * 2018-04-25 2021-08-17 中国科学院烟台海岸带研究所 一种水产养殖污水原位好氧脱氮处理净化的方法
CN110655197B (zh) * 2018-06-29 2022-01-28 龙岩学院 一种利用异养硝化-好氧反硝化的假单胞菌菌株处理硝酸盐氮废水的方法
CN110656059A (zh) * 2018-06-29 2020-01-07 龙岩学院 一株假单胞菌菌株yg8、种子液及其制备方法和应用
CN110655200A (zh) * 2018-06-29 2020-01-07 龙岩学院 利用假单胞菌菌株yg8处理含氮废水的方法
CN110655197A (zh) * 2018-06-29 2020-01-07 龙岩学院 一种利用异养硝化-好氧反硝化的假单胞菌菌株处理硝酸盐氮废水的方法
CN110656059B (zh) * 2018-06-29 2022-08-09 龙岩学院 一株假单胞菌菌株yg8、种子液及其制备方法和应用
CN109055259B (zh) * 2018-08-07 2020-12-29 重庆大学 假单胞菌xd-3及其应用以及微生物絮凝剂
CN109055259A (zh) * 2018-08-07 2018-12-21 重庆大学 假单胞菌xd-3及其应用以及微生物絮凝剂
CN109385388A (zh) * 2018-12-29 2019-02-26 中蓝连海设计研究院有限公司 嗜盐反硝化菌yl5-2及其应用
CN109385388B (zh) * 2018-12-29 2021-09-14 中蓝连海设计研究院有限公司 嗜盐反硝化菌yl5-2及其应用
CN110106108A (zh) * 2019-04-25 2019-08-09 黄山市益天士生物科技有限公司 用于提高净化水体菌落繁殖速度的方法
CN110499270B (zh) * 2019-09-02 2021-05-11 华东理工大学 一株嗜碱兼氧反硝化细菌及其应用
CN110499270A (zh) * 2019-09-02 2019-11-26 华东理工大学 一株嗜碱兼氧反硝化细菌及其应用
CN110734878A (zh) * 2019-11-13 2020-01-31 重庆理工大学 一种耐高氨氮hn-ad的菌株分离方法
CN110846254A (zh) * 2019-11-27 2020-02-28 深圳大学 用于脱氮的复合微生物菌剂及其制备方法和应用
CN111534450A (zh) * 2019-12-26 2020-08-14 广东石油化工学院 一种异养硝化-好氧反硝化菌及其培养方法和应用
CN111534450B (zh) * 2019-12-26 2022-12-16 广东石油化工学院 一种异养硝化-好氧反硝化菌及其培养方法和应用
CN112175879A (zh) * 2020-10-19 2021-01-05 南京师盛生态环境研究院有限公司 一种同步异养硝化-好氧反硝化门多萨假单胞菌的培养方法及应用
CN113998832A (zh) * 2020-11-02 2022-02-01 呼伦贝尔东北阜丰生物科技有限公司 氨基酸废水深度处理总氮的方法
CN113174345A (zh) * 2021-05-13 2021-07-27 安徽省农业科学院水产研究所 一种高效脱氮的异养硝化-好氧反硝化菌株及其应用
CN113528382A (zh) * 2021-07-05 2021-10-22 中国成套设备进出口集团有限公司 一种可利用低成本碳源的复合脱氮菌剂构建及应用
CN113528382B (zh) * 2021-07-05 2023-04-14 中国成套设备进出口集团有限公司 一种可利用低成本碳源的复合脱氮菌剂构建及应用
CN114395505A (zh) * 2021-12-21 2022-04-26 江苏南资环保科技有限公司 一种低温反硝化菌及其应用
CN114395505B (zh) * 2021-12-21 2023-08-18 江苏南资环保科技有限公司 一种低温反硝化菌及其应用
CN115806909A (zh) * 2022-11-08 2023-03-17 哈尔滨工业大学（深圳） 一种假单胞菌及其分离方法、应用
CN115806909B (zh) * 2022-11-08 2023-08-18 哈尔滨工业大学（深圳） 一种假单胞菌及其分离方法、应用
CN115851540A (zh) * 2022-12-13 2023-03-28 广州大学 具有耐盐特性的异养硝化好氧反硝化脱氮除磷菌株及应用
CN115851540B (zh) * 2022-12-13 2023-06-06 广州大学 具有耐盐特性的异养硝化好氧反硝化脱氮除磷菌株及应用

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