CN104531583A

CN104531583A - 一种假单胞菌及由其发酵制得的微生物絮凝剂

Info

Publication number: CN104531583A
Application number: CN201410844663.1A
Authority: CN
Inventors: 董锐; 周冰倩
Original assignee: Yangcheng Institute of Technology
Current assignee: Yangcheng Institute of Technology
Priority date: 2014-12-30
Filing date: 2014-12-30
Publication date: 2015-04-22
Anticipated expiration: 2034-12-30
Also published as: CN104531583B

Abstract

本发明提供一种假单胞菌及其应用。本发明提供的假单胞菌的保藏编号为CGMCC No.9379，具有生长速度快、稳定性强、絮凝剂产量高、高效等特点，可以用于发酵生产微生物絮凝剂，特别是发酵生产用于絮凝漆雾废水的微生物絮凝剂。

Description

一种假单胞菌及由其发酵制得的微生物絮凝剂

技术领域

本发明属于微生物絮凝剂领域。具体而言，本发明涉及一种能够发酵生产微生物絮凝剂的新型假单胞菌，以及由其发酵制得的微生物絮凝剂。

背景技术

喷漆室是专供喷涂液态涂料的涂装室，是工业涂装车间的关键设备之一。随着现代涂装工艺的发展，喷涂用量日益增加，由此在喷涂过程中也出现喷漆不能涂覆到工件上而成为“过喷”漆雾的问题。

“过喷”漆雾含有大量不利于人体健康的挥发性有机溶剂，严重污染周围环境和空气。涂料粘在地上难以清理，还会进入循环水中造成环境污染，并且涂料资源被浪费，对设备、管道也造成腐蚀堵塞等危害。

对于喷漆室内循环水处理的方式主要包括机械刮除法、吸附絮凝分离法等。絮凝剂是一类可以使液体中的胶体和悬浮颗粒絮凝成较大的絮凝体沉淀或者上浮的物质。絮凝剂主要分为三大类：无机絮凝剂、有机絮凝剂和微生物絮凝剂。无机絮凝剂主要包括铝盐和铁盐。但铝盐产生的污泥广泛应用于农业，导致土壤中铝含量升高，植物出现铝害，从而影响植物正常生长，甚至死亡；同时伴随这些农作物进入食物链影响到人体的健康。铁盐对金属有腐蚀作用，也可造成处理水中带有颜色，且高浓度的铁对人体健康和生态环境均有不利影响。并且有机絮凝剂中得到最广泛应用的是聚丙烯酰胺，其单体更是具有强烈的神经毒性与致癌性。

微生物絮凝剂是一类由微生物产生的有絮凝活性的高分子代谢产物，成分有糖蛋白、多糖、蛋白质、纤维素和DNA等。它是利用微生物技术，通过细菌、真菌等微生物发酵、提取、精制而得到的，具有生物分解性和安全性的新型、高效、无毒、无二次污染的水处理剂。微生物絮凝剂是目前国内外研究的热点。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种新型假单胞菌，该假单胞菌具有生长速度快、稳定性强的特点，并且可以发酵制得能够高效絮凝漆雾废水的新的微生物絮凝剂，因此本发明的假单胞菌具有良好的应用前景。

本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：

一方面，本发明提供一种假单胞菌(Pseudomonas sp.)FL-1，所述假单胞菌种的保藏编号为CGMCC No.9379。

本发明所提供的菌株为门多萨假单胞菌FL-1，是从江苏韩一模塑有限公司的废水中分离得到的，已于2014年6月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏号为CGMCC No.9379。其具有以下生物学特性：在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，37℃下培养24h，菌落产生，呈现为圆形，乳白色，边缘规整，光滑，有粘性。

该菌株的16S rDNA基因序列测定结果如下序列所示：

SEQ ID NO:1

CTACAATGCAAGTCGAGCGGTGAAGGGAGCTTGCTCCCTGATTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAATGCCTAGGAATCTGCCTGGTAGTGGGGGATAACGTTCCGAAAGGAACGCTAATACCGCATACGTCCTACGGGAGAAAGCAGGGGACCTTCGGGCCTTGCGCTATCAGATGAGCCTAGGTCGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGACGATCCGTAACTGGTCTGAGAGGATGATCAGTCACACTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAAGCACTTTAAGTTGGGAGGAAGGGCAGTAAGTTAATACCTTGCTGTTTTGACGTTACCGACAGAATAAGCACCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCGCGTAGGTGGTTCGTTAAGTTGGATGTGAAAGCCCCGGGCTCAACCTGGGAACTGCATCCAAAACTGGCGAGCTAGAGTACGGTAGAGGGTGGTGGAATTTCCTGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATAGGAAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACCACCTGGACTGATACTGACACTGAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCAACTAGCCGTTGGAATCCTTGAGATTTTAGTGGCGCAGCTAACGCATTAAGTTGACCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGCCTTGACATGCTGAGAACTTTCCAGAGATGGATTGGTGCCTTCGGGAACTCAGACACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGTAACGAGCGCAACCCTTGTCCTTAGTTACCAGCACCTCGGGTGGGCACTCTAAGGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGGCCAGGGCTACACACGTGCTACAATGGTCGGTACAAAGGGTTGCCAAGCCGCGAGGTGGAGCTAATCCCATAAAACCGATCGTAGTCCGGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGTGAATCAGAATGTCACGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGGTTGCTCCAGAAGTAGCTAGTCTAACCTTCGGGGGGACGGTTACCACGGAGTGATTCATGACTGGGGTGAAAGTCGAAACAAAATTCC

可以下述方式培养或保存本发明假单胞菌：

(1)普通培养保存采用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基斜面，培养基配方为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15-20g，蒸馏水1000mL。

(2)实验室液体培养采用牛肉膏蛋白胨液体培养基，培养基配方为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，蒸馏水1000mL。

(3)大量发酵培养采用大量发酵培养基，培养基配方为葡萄糖20g，KH₂PO₄2g，K₂HPO₄5g，(NH₄)₂SO₄0.2g，NaCl 0.1g，MgSO₄﹒7H₂O 0.5g，尿素0.2g，酵母膏0.5g，蒸馏水1000mL。

实验证明，本发明提供的假单胞菌能够发酵产生高效絮凝漆雾废水的微生物絮凝剂，因此，另一方面，本发明提供所述的假单胞菌在制备用于絮凝漆雾废水的微生物絮凝剂中的用途。所述漆雾废水主要包含大量漆雾颗粒，取决于使用的漆料和溶剂、助溶剂等，包含例如聚丙烯酸树脂、聚氨酯、醇酸树脂、芳香族溶剂等。另外，实验证明，除絮凝作用之外，本发明提供的微生物絮凝剂还可以具有降解废水中难降解化合物的作用，可以有效降低废水COD。因此，尽管本发明采用术语“絮凝剂”，但应理解所述术语还有“降解剂”的含义。

又一方面，本发明提供一种用于絮凝和/或降解漆雾废水的微生物絮凝剂，所述微生物絮凝剂由本发明所述的假单胞菌发酵制得。

优选地，所述微生物絮凝剂是本发明所述假单胞菌的发酵液，或者是所述发酵液的离心上清液，或者是从所述离心上清液中提取的物质。例如，将从上清液中提取出来的物质在水中溶解成一定浓度的溶液，即可直接作为絮凝剂使用。

优选地，所述微生物絮凝剂由包括以下步骤的方法进行制备：

在大量发酵培养基中，在25-35℃下，以120-200r/min的转速，培养本发明所述的假单胞菌60-80h，得到发酵液。

进一步优选地，所述微生物絮凝剂由包括以下步骤的方法进行制备：

(1)采用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，制备所述假单胞菌的斜面；

(2)从步骤(1)制备的斜面挑取菌落接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基，37℃下恒温培养24h得到种子液，其中所述种子液中的菌浓度为2.3×10⁶个/mL；

(3)将步骤(2)制备的种子液按照3％的量接种至大量发酵培养基，在30℃、160r/min的条件下培养72h；

任选地，所述方法还包括：

(4)将步骤(3)制备的发酵液在4℃下以8000r/min离心20min得到上清液；

(5)任选地，向步骤(4)制备的上清液中加入两倍体积的4℃下预冷的无水乙醇，4℃下静置过夜，然后在与步骤(4)相同的条件下离心，倾去上清液，将沉淀于透析袋中透析48h，然后冷冻干燥。

所述步骤(1)中牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的配方为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15-20g，蒸馏水1000mL；所述步骤(2)中牛肉膏蛋白胨液体培养基的配方为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，蒸馏水1000mL；所述步骤(3)中大量发酵培养基的配方为葡萄糖20g，KH₂PO₄2g，K₂HPO₄5g，(NH₄)₂SO₄0.2g，NaCl 0.1g，MgSO₄﹒7H₂O 0.5g，尿素0.2g，酵母膏0.5g，蒸馏水1000mL。本发明采用的各种培养基在使用前均进行常规灭菌。

又一方面，本发明提供一种用于絮凝和/或降解漆雾废水的微生物絮凝组合物，所述微生物絮凝组合物包含本发明所述的微生物絮凝剂；

优选地，所述微生物絮凝组合物还包含阳离子，所述阳离子选自Na⁺、K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Al³⁺中的一种或多种。阳离子作为辅助絮凝剂，可以进一步增强絮凝作用。优选地，所述阳离子选自Na⁺、Ca²⁺、Fe³⁺、Al³⁺中的一种或多种，更优选为Fe³⁺。

再一方面，本发明提供一种絮凝和/或降解漆雾废水的方法，所述方法包括将本发明所述的假单胞菌接种至漆雾废水中培养，或者将本发明所述的微生物絮凝剂与漆雾废水混合，或者将本发明所述的微生物絮凝组合物与漆雾废水混合。

还一方面，本发明还提供所述假单胞菌或者微生物絮凝剂或者微生物絮凝组合物在絮凝和/或降解漆雾废水中的用途；

漆雾废水悬浮物浓度高且含有大量的难降解的高分子聚合物，其成分比较复杂。目前国内外涂装生产线絮凝产生的固废主要采用填埋、焚烧等方法处理，容易导致二次污染；也有个别厂家采用混凝沉淀-化学氧化法来消减固废。由于上述方法中过氧化氢的使用费用高，此法只适合于废水生产量小、浓度低的工厂；且过氧化氢的强氧化性和腐蚀性，存在安全隐患。它虽然可使废水中的有机物降解到排放标准，但总体来说，用于漆雾废水的处理仍有很多不足：处理设备比较复杂，占地面积较广，一次性投资很高。采用微生物法来分解漆雾废水中的高分子有机物，尚未看见有关文献报道，主要是由于大多数高分子聚合物可生化性差、分子链难以在微生物的作用下断裂，因此难以降解。

对此，本发明提供了一种新的假单胞菌。该假单胞菌由废水中分离得到，具有生长速度快、稳定性强的特点，并且可以发酵制得能够高效絮凝漆雾废水的新的微生物絮凝剂。实验证明，针对漆雾废水，本发明的门多萨假单胞菌FL-1发酵制得的发酵液可以实现近90％的絮凝效果，絮凝效果十分显著。并且，由门多萨假单胞菌FL-1发酵制得的发酵液无毒无害，减少了由化学型絮凝剂导致的固废量大、带来二次污染的问题，生产成本低，保证环境安全。而且，从降解前后的漆雾废水COD降低的幅度来看，该微生物对水中可溶性有机物有较好的降解效果；并且，从对降解前后漆渣的质谱分析结果看，漆渣的成分发生了很大的改变，这种改变主要是由该微生物引起的。由于漆渣中的主要成分为高分子成膜物质，因此可以推断该菌对漆渣中高分子物质具有一定的降解能力。综上所述，本发明的门多萨假单胞菌FL-1既能絮凝漆雾废水，又能减少对环境的负荷，具有良好的应用前景。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的具体实施方案，其中：

图1示出了本发明假单胞菌的菌落形态。

图2示出了本发明实施例2中制得的干燥微生物絮凝剂的红外光谱图。

图3示出了实施例3中发酵液投加量对絮凝率的影响。

图4示出了实施例3中假单胞菌对漆雾废水絮凝前(左)后(右)的效果对比。

图5示出了实施例3中温度对絮凝率的影响。

图6示出了实施例3中各种阳离子对絮凝率的影响。

图7中的7a示出了实施例2中制得的干燥微生物絮凝剂不同放大倍数(1000倍和10000倍)下的扫描电镜图；7b示出了实施例2中制得的干燥微生物絮凝剂(左)与实施例3中絮凝了油漆的微生物絮凝剂(右)干燥后的扫描电镜图(10000倍)。

图8示出了实施例4中假单胞菌FL-1的发酵液、上清液、菌体的絮凝活性。

图9示出了实施例5中漆雾废水COD的变化。

图10示出了实施例5中漆渣降解前和降解30天后质谱的变化。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是示例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

实施例中采用以下培养基：

(1)牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，培养基配方为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15-20g，蒸馏水1000mL。

(2)牛肉膏蛋白胨液体培养基，培养基配方为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，蒸馏水1000mL。

(3)大量发酵培养基，培养基配方为葡萄糖20g，KH₂PO₄2g，K₂HPO₄5g，(NH₄)₂SO₄0.2g，NaCl 0.1g，MgSO₄﹒7H₂O 0.5g，尿素0.2g，酵母膏0.5g，蒸馏水1000mL。

漆雾废水絮凝方法及絮凝率的计算：

采用紫外-可见分光光度计法测定漆雾废水处理前后吸光度值的变化来计算漆雾絮凝率。首先对漆雾废水进行紫外光谱全波长扫描，找到其特征吸收峰，本发明中确定为波长520nm。将此波长定为分光光度计上的设定波长，测定处理前后520nm吸光度值的变化，从而计算出絮凝率。计算公式如下：

其中，S₁、S₂分别表示漆雾废水处理前后的520nm吸光度值。

高岭土絮凝方法及絮凝率的计算：

取4g/L的高岭土溶液50mL，调节pH至8左右，再加入假单胞杆菌发酵液8mL，再加入1％CaCl₂溶液2mL作为辅助絮凝剂，摇匀，静置10min后观察絮凝效果。取液面下2cm的液体，测定其在550nm(最大吸收峰)的吸光度值，根据加入絮凝剂处理与空白的吸光度值变化得到絮凝率。计算公式如下：

高岭土絮凝率＝(A-B)/A×100％

A与B分别代表空白与加入絮凝剂处理后的550nm吸光度值。

实施例1

1、本发明的假单胞菌的分离与纯化

本发明的假单胞菌是从江苏韩一模塑有限公司的废水中采用平板划线法分离得到的。

絮凝菌的分离：将取来的废水接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，37℃恒温培养24h。用接种针沾取少量菌液在牛肉膏蛋白胨琼脂平板上划线，定时观察菌落生长情况。然后采用平板划线法，挑取单个菌落，分别转接到牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上保存备用。

产微生物絮凝剂的假单胞菌的筛选：通过对高岭土悬浊液的絮凝效果进行筛选。

(1)初筛：将挑出的各个单菌落接种到大量发酵培养基中，30℃下160r/min培养72h，得到发酵液。

在每个150mL三角瓶中加入50mL 4g/L的高岭土悬浊液，再加入8mL发酵液，快速振荡1min后静置10min，然后观察各个瓶中高岭土悬浊液的絮凝情况。根据絮体的多少与大小来决定是否保留该菌。保留有絮凝活性的菌株再进行复筛，淘汰无絮凝活性的菌株。

(2)复筛：将初筛得到的具有絮凝作用的菌种再次分离纯化，分别接种于大量发酵培养基中，30℃下160r/min培养72h，得到发酵液。

按照高岭土絮凝方法进行复筛，计算高岭土絮凝率，絮凝率大于60％的保留，反之舍弃。挑选絮凝率最高的菌株进行多次传代，筛选得到絮凝性能稳定的菌株FL-1，作为本发明的目标菌株。

2、菌种鉴定

(1)微生物学特性

在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基平板上，37℃下培养24h，菌落呈现圆形，凸起，乳白色，边缘光滑，有粘性。菌落形态见图1。

(2)生理生化特性

经检测，该菌株革兰氏染色为阴性，V-P试验阳性，甲基红试验阴性，吲哚试验阳性，明胶液化试验阴性，淀粉水解试验阳性，卵磷脂酶试验阳性，氧化酶试验阳性，尿酶试验阴性，接触酶试验阳性，硝酸盐还原试验阳性，亚硝酸盐还原试验阴性，葡萄糖氧化发酵试验阴性，有菌膜形成。

(3)分子生物学特性

该菌株的16S rDNA基因序列测定结果如下SEQ ID NO:1所示：

鉴定为门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)FL-1，在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基斜面中保存得到的门多萨假单胞菌，将其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.9379。

实施例2

菌种种子液培养：从门多萨假单胞菌FL-1的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基斜面中挑取少量菌，接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，37℃下恒温培养24h，即为种子液，其中所述种子液中的菌浓度为2.3×10⁶个/mL。

大量液体发酵：将种子液按3％的比例接种到大量发酵培养基中(250mL三角瓶装入100mL发酵培养基中，30℃下摇床160r/min培养72h。

将得到的发酵液在高速冷冻离心机上在4℃下以8000r/min离心20min，得到上清液，在上清液中加入两倍体积4℃下预冷的无水乙醇，4℃下静置过夜，再在相同的离心条件下离心，倾去上清，将沉淀在透析袋中透析48h后，在冷冻干燥机上干燥得到，即为该门多萨假单胞菌FL-1微生物絮凝剂纯品，用于红外分析及扫描电镜表征。红外光谱图见图2，扫描电镜图见图7a。

实施例3

本实施例提供了门多萨假单胞菌FL-1产生的微生物絮凝剂对漆雾废水的絮凝实验。

1、模拟漆雾废水的制备

取日常的塑料饮料瓶，加入自来水100mL，用1mol/L的NaOH溶液调节pH至12，然后用一次吸管滴入6滴油漆，剧烈摇匀，得到的即为模拟漆雾废水。

2、微生物絮凝剂溶液及辅助阳离子溶液的配制

如实施例2所述，制备本发明30℃下摇床160r/min培养72h的发酵液，直接作为絮凝试验的药剂。

另外，分别配制1％的含有Na⁺、K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、Fe³⁺、Al³⁺的NaCl、KCl、MgSO₄、CaCl₂、FeCl₃、Al₂(SO₄)₃溶液作为辅助阳离子溶液。

3、试验设计及结果

第一组：发酵液投加量对絮凝率的影响

向含制备的漆雾废水的瓶中分别加入发酵液5mL，10mL，15mL，20mL，25mL，摇匀，静置10min，观察絮凝效果。

结果表明，当发酵投加量为20mL时，絮凝率可达到最高为89.7％。结果示于图3。含漆雾废水的瓶中在絮凝前后的废水情况见图4。

第二组：温度对絮凝率的影响

将20mL发酵液分别在20℃，35℃，60℃，80℃，100℃水溶中保持30min，然后加入含制备的漆雾废水的瓶中，摇匀，静置10min，观察絮凝效果。

结果表明，当絮凝剂经过35℃处理后，絮凝率最高达到87.4％，结果示于图5。

第三组：辅助阳离子对絮凝率的影响

先向含制备的漆雾废水的瓶中分别加入各种辅助阳离子溶液2mL，再加入发酵液10mL，观察各种阳离子溶液加入对絮凝率的影响。

结果表明，阳离子Na+、Fe³⁺、Al³⁺较其它阳离子有更为明显的促絮凝作用，并且当投加Fe³⁺溶液时，絮凝率达到最高86.4％。结果示于图6。

将絮凝后的微生物絮凝剂沉淀后烘干，与实施例2絮凝前的干燥絮凝剂相比较，二者扫描电镜图见图7b。

实施例4

本实施例提供了门多萨假单胞菌FL-1絮凝活性物质的分布情况。

将100mL大量发酵培养基装于250mL三角瓶中，121℃下灭菌20min。采用实施例2的种子液，将本发明的假单胞菌种子液按3％的比例接种于三角瓶中，30℃下摇床160rpm培养72h。将发酵液置于4℃高速冷冻离心机上8000r/min离心20min，得到上清液与菌体沉淀。分别测定发酵液、上清液与菌体沉淀对高岭土悬浊液的絮凝率。其中上清液的测法与发酵液基本相同，区别仅在于直接取上清液8mL加入高岭土悬液；而菌体沉淀的测法为，将菌体沉淀粉碎，再加入100mL的蒸馏水，将此溶液8mL加入高岭土悬液。加入100mL蒸馏水是因为实验中均采用100mL发酵培养基进行发酵。

絮凝剂在微生物培养液中的分布不仅能够显示絮凝机制，也决定着絮凝剂的提纯方法。图8示出了发酵液、上清液和菌体沉淀三者对高岭土悬浊液的絮凝率。从图中可以看出发酵液的絮凝率最高，达到92.4％。而菌体沉淀的絮凝率最低，上清液的絮凝率处于中间。这说明微生物絮凝剂是菌生长过程中生物合成并分泌到胞外的代谢产物。但从整体来看，絮凝物质的整体分布在菌体外，但又不全在胞外，菌体表面或者菌体内部也存在未释放到外部的活性物质。

实施例5

本实施例提供了门多萨假单胞菌FL-1对漆雾废水的降解作用。

1、漆雾废水COD的测定

采用实施例3第一组的漆雾废水，以絮凝前及絮凝后连续几天的废水为样品，室温下，分别取液面以下2cm处的液体，采用重铬酸钾法测定废水中的COD，观察其变化。

漆雾废水COD变化如图9所示。絮凝后废水中仍存在一部分的门多萨假单胞菌FL-1，而从图中可以看出，废水中的COD随时间的推移逐步降低了，说明废水中存在的絮凝菌对废水中可溶性的有机物有一定的降解作用，且降解效果较好。

2、絮凝后漆渣的成分测定

将实施例3中第一组絮凝后的漆渣捞起，滤去多余水分，备用。

在室温条件下，以锯末与漆渣按照质量比1:1的比例混合作为堆肥物料，采用实施例2的种子液，接种5％(按照菌液和堆肥物料的质量比)的门多萨假单胞菌FL-1后装入密闭容器中，放置30天。

分别将密闭前的油漆废渣混合物和密闭30天后的混合物用二甲苯溶解，离心、过滤2-3次，稀释到一定比例后，用美国Finnigan公司LCQ advantageI型电喷雾质谱仪、ESI离子源，检测漆渣样品在降解前后的成分变化。

降解前后质谱图如图10所示。从图中可以看出m/z＝511.18的峰消失了，m/z＝121.08的峰未变化。511.18的峰代表分子量为510的分子(分子量＝峰值-1)。此外，降解后还多出了不少分子量在152、176、224、298、316等的分子。从峰的变化可以判断本发明的絮凝剂对漆渣中的化学物质产生了一定的降解作用。

Claims

1.一种假单胞菌(Pseudomonas sp.)FL-1，其特征在于，所述假单胞菌的保藏编号为CGMCC No.9379。

2.权利要求1所述的假单胞菌在制备用于絮凝和/或降解漆雾废水的微生物絮凝剂中的用途。

3.一种用于絮凝和/或降解漆雾废水的微生物絮凝剂，其特征在于，所述微生物絮凝剂由权利要求1所述的假单胞菌发酵制得。

4.根据权利要求3所述的微生物絮凝剂，其特征在于，所述微生物絮凝剂是权利要求1所述的假单胞菌的发酵液，或者是所述发酵液的离心上清液，或者是从所述离心上清液中提取的物质；

在大量发酵培养基中，在25-35℃下，以120-200r/min的转速，培养权利要求1所述的假单胞菌60-80h，得到发酵液。

5.根据权利要求3或4所述的微生物絮凝剂，其特征在于，所述微生物絮凝剂由包括以下步骤的方法进行制备：

(3)将步骤(2)制备的种子液按照种子液与大量发酵培养基的体积比为3％的量接种至大量发酵培养基，在30℃、160r/min的条件下培养72h；

任选地，所述方法还包括：

6.根据权利要求3至5中任一项所述的微生物絮凝剂，其特征在于，所述步骤(1)中牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的配方为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15-20g，蒸馏水1000mL；所述步骤(2)中牛肉膏蛋白胨液体培养基的配方为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，蒸馏水1000mL；所述步骤(3)中大量发酵培养基配方的配方为葡萄糖20g，KH₂PO₄2g，K₂HPO₄5g，(NH₄)₂SO₄0.2g，NaCl 0.1g，MgSO₄，7H₂O 0.5g，尿素0.2g，酵母膏0.5g，蒸馏水1000mL。

7.一种用于絮凝和/或降解漆雾废水的微生物絮凝组合物，其特征在于，所述微生物絮凝组合物包含根据权利要求3至6中任一项所述的微生物絮凝剂。

8.根据权利要求7所述的微生物絮凝组合物，其特征在于，所述微生物絮凝组合物还包含阳离子，所述阳离子选自Na⁺、K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Al³⁺中的一种或多种；

优选地，所述阳离子选自Na⁺、Ca²⁺、Fe³⁺、Al³⁺中的一种或多种；更优选地，所述阳离子为Fe³⁺。

9.一种絮凝和/或降解漆雾废水的方法，其特征在于，所述方法包括将权利要求1所述的假单胞菌接种至漆雾废水中培养，或者将权利要求3至7中任一项所述的微生物絮凝剂与漆雾废水混合，或者将权利要求7或8所述的微生物絮凝组合物与漆雾废水混合。

10.权利要求1所述的假单胞菌或者权利要求3至7中任一项所述的微生物絮凝剂或者权利要求7或8所述的微生物絮凝组合物在絮凝和/或降解漆雾废水中的用途。