CN105358546B - 用作激酶抑制剂的经取代的四氢咔唑及咔唑甲酰胺化合物 - Google Patents

用作激酶抑制剂的经取代的四氢咔唑及咔唑甲酰胺化合物 Download PDF

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Abstract

本发明公开式(I)化合物，其中：两个虚线表示两个单键或两个双键；Q为：或R1为F、Cl、CN或CH3；R2为Cl或CH3；R3为C(CH3)2OH或CH2CH2OH；Ra为H或CH3；各Rb独立地为F、Cl、CH3和/或OCH3；且n为0、1或2。本发明还公开使用所述化合物作为布鲁顿酪氨酸激酶(Btk)的抑制剂的方法，及包含所述化合物的药物组合物。这些化合物用于治疗、预防各种治疗领域中的疾病或病症(诸如自身免疫疾病及血管疾病)或减缓其进展。(I)。

Description

用作激酶抑制剂的经取代的四氢咔唑及咔唑甲酰胺化合物
相关申请的交叉引用
本申请要求于2013年6月25日提交的美国申请61/839,141的权益，将其内容并入本申请。
技术领域
本发明大体上涉及可用作激酶抑制剂(包括调节布鲁顿酪氨酸激酶(Bruton'styrosine kinase,Btk)和其它Tec家族激酶诸如ItK)的经取代的四氢咔唑及咔唑甲酰胺化合物。本申请提供了经取代的四氢咔唑及咔唑甲酰胺化合物、包含所述化合物的组合物和使用它们的方法。本发明还涉及含有可用于治疗激酶调节相关病症的至少一种本发明化合物的药物组合物以及在哺乳动物中抑制激酶(包括Btk和其它Tec家族激酶诸如ItK)的活性的方法。
背景技术
蛋白激酶，人类酶中的最大家族，包括远远超过500种蛋白质。Btk是酪氨酸激酶中Tec家族的成员，并且是早期B细胞发育以及成熟B细胞活化、信号转导和存活的调节剂。
B细胞通过B细胞受体(BCR)的信号转导导致宽范围的生物结果，而这些结果取决于B细胞的发育阶段。BCR信号的大小和持续时间必须受到精确的调节。异常的BCR介导的信号转导可引起错误调节的(disregulated)B细胞活化和/或病原性自身抗体的形成，这导致多种自身免疫性和/或炎性疾病。人类中Btk的突变导致与X相关的无γ球蛋白血症(X-linked agammaglobulinaemia,XLA)。这种疾病与受损的B细胞成熟、减少的免疫球蛋白产生、缺乏免疫力的T细胞依赖性免疫应答和BCR刺激时持续钙信号的显著衰减相关。
已经在缺乏Btk的小鼠模型中建立了有关Btk在变应性紊乱和/或自身免疫疾病和/或炎性疾病中的作用的证据。例如，已经在系统性红斑狼疮(SLE)的标准鼠类临床前模型中显示出Btk的缺乏导致疾病进展的显著改善。此外，缺乏Btk的小鼠也对发展成胶原诱发的关节炎具有抵抗力，并且较不易患上葡萄球菌诱发的关节炎(Staphylococcus-induced arthritis)。
大量证据支持了B细胞和体液免疫系统在自身免疫和/或炎性疾病的发病中的作用。基于蛋白质的疗法(如)发展成用于减少B细胞，这代表了治疗多种自身免疫和/或炎性疾病的重要途径。由于Btk在B细胞活化中的作用，Btk的抑制剂可用作B细胞介导的病原活性(如产生自身抗体)的抑制剂。
Btk也在肥大细胞和单核细胞中表达，并且已显示对于这些细胞的机能是重要的。例如，小鼠中的Btk缺乏与受损的IgE介导的肥大细胞活化(TNF-α和其它炎性细胞因子释放的显著减少)相关，并且人类中的Btk缺乏与大大降低的由活化的单核细胞引起的TNF-α产生相关。
由此，对Btk活性的抑制可用于治疗变应性紊乱和/或自身免疫和/或炎性疾病，这些疾病包括但不限于SLE、类风湿性关节炎、多发性血管炎(multiple vasculitide)、特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura(ITP))、重症肌无力、变应性鼻炎、多发性硬化(MS)、移植排斥、I型糖尿病、膜性肾炎(membranous nephritis)、炎性肠病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性甲状腺炎、冷凝集素和温凝集素疾病(cold andwarm agglutinin disease)、埃文斯综合征(Evans syndrome)、溶血性尿毒症综合征(hemolytic uremic syndrome)/血栓性血小板减少性紫癜(thromboticthrombocytopenic purpura)(HUS/TTP)、结节病(sarcoidosis)、斯耶格伦综合征(syndrome)、外周神经病(例如吉-巴综合征(Guillain-Barre syndrome))、寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris)和哮喘。
此外，已报道Btk在某些B细胞癌症中对控制B细胞存活起作用。例如，已显示Btk对于BCR-Abl阳性B细胞急性成淋巴细胞性白血病细胞的存活是重要的。由此，对Btk活性的抑制可用于治疗B细胞淋巴瘤和白血病。
鉴于预期受益于涉及对蛋白激酶进行调节的治疗的多种病症，非常明显的是，调节蛋白激酶如Btk的新化合物和使用这些化合物的方法可将实质上的治疗益处提供给众多的患者。
美国专利8,084,620及WO 2011/159857公开了可用作激酶抑制剂包括调节Btk及其它Tec家族激酶的三环甲酰胺化合物。
仍然需要可用作Btk抑制剂而具有优于Jak2酪氨酸激酶的选择性的化合物。另外，仍然需要具有优于Jak2酪氨酸激酶的选择性且也具有在全血BCR刺激的CD69表达测定中的改善效能的可用作Btk抑制剂的化合物。
申请人已发现具有作为Btk抑制剂的活性的有效化合物。另外，申请人已发现具有作为Btk抑制剂的活性且具有优于Jak2酪氨酸激酶的选择性的化合物。另外，申请人已发现具有作为Btk抑制剂的活性、具有优于Jak2酪氨酸激酶的选择性且具有在全血BCR刺激的CD69表达测定中的改善效能的化合物。提供这些化合物以用作具有对其可药用性至关重要的理想的稳定性、生物利用度、治疗指数及毒性值的药物。
发明内容
本发明提供经取代的四氢咔唑及咔唑化合物包括其前药，其可用作Btk的抑制剂且可用于治疗增殖性疾病、变应性疾病、自身免疫疾病及炎性疾病。
本发明还提供包含至少一种式(I)化合物及药用载体的药物组合物。
本发明还提供抑制Btk活性的方法，其包括向有需要的哺乳动物给予至少一种式(I)化合物。
本发明还提供治疗变应性病症和/或自身免疫和/或炎性疾病的方法，其包括向有需要的哺乳动物给予至少一种式(I)化合物。
本发明还提供治疗增殖性疾病(诸如癌症)的方法，其包括向有需要的哺乳动物给予至少一种式(I)化合物。
本发明还提供治疗与Btk活性相关的疾病或病症的方法，该方法包括向有需要的哺乳动物给予至少一种式(I)化合物。
本发明还提供用于制备式(I)化合物的方法及中间体。
本发明还提供式(I)化合物，其用于疗法中。
本发明还提供式(I)化合物在制备用于治疗或预防Btk相关病症(诸如增殖性疾病、变应性疾病、自身免疫疾病及炎性疾病)的药物中的用途。
本发明还提供式(I)化合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
式(I)化合物及包含式(I)化合物的组合物可用于治疗、预防或治愈各种Btk相关病症。包含所述化合物的药物组合物可用于治疗、预防各种治疗领域中的疾病或病症(诸如增殖性疾病、变应性疾病、自身免疫疾病及炎性疾病)或减缓其进展。
随着本公开内容的继续，可以展开形式阐述本发明的这些及其它特征。
附图说明
通过参照下文所阐述的附图来阐释本发明。
图1显示中间体30二乙酸溶剂化物的绝对立体化学。
图2显示中间体35的绝对立体化学。
图3显示实施例2甲醇化物晶体形式M-1的绝对立体化学。
图4显示实施例11甲醇化物晶体形式M-1的绝对立体化学。
图5显示实施例28二甲醇化物晶体形式M2-1的绝对立体化学。
图6显示实施例33二甲醇化物晶体形式M2-1的绝对立体化学。
图7显示实施例11一水合物晶体形式H-1在室温的实验及模拟PXRD图(Cu Kα辐射)。
图8显示实施例11的晶体形式N-2在室温的模拟PXRD图(Cu Kα辐射)。
图9显示实施例11甲醇化物晶体形式M-1在室温的实验及模拟PXRD图(Cu Kα辐射)。
图10显示实施例28二甲醇化物晶体形式M2-1在173K的模拟PXRD图(Cu Kα辐射)。
图11显示实施例33二甲醇化物晶体形式M2-1在室温的实验PXRD图及在173K的模拟PXRD图(Cu Kα辐射)。
具体实施方式
本发明的第一方面提供至少一种式(I)化合物：
其中：
两个虚线表示两个单键或两个双键；
Q为
R1为F、Cl、-CN或-CH3；
R2为Cl或-CH3；
R3为-C(CH3)2OH或-CH2CH2OH；
Ra为H或-CH3；
各Rb独立地为F、Cl、-CH3和/或-OCH3；且
n为0、1或2。
阻转异构体为由关于单键轴的位阻旋转获得的立体异构体，其中旋转能垒高至足以允许分离单独的旋转异构体。(LaPlante等人，J.Med.Chem.,54:7005-7022(2011))。
式(A)化合物：
具有两个立体轴：三环四氢咔唑/咔唑基团与苯基之间的键(a)；及不对称杂环二酮基团Q与苯基之间的键(b)。由于通过标记a及b的单键连接的环上的取代具有不对称性质，且由于通过空间位阻造成的围绕这些键的旋转受限，故式(A)化合物可形成旋转异构体。若旋转能垒足够高，则围绕键(a)和/或键(b)的位阻旋转以慢至足以使所分开的阻转异构体分离为不同化合物的速率发生。因此，式(A)化合物可形成四种旋转异构体，可在某些条件下(例如在手性固定相上进行色谱法)将所述异构体分离为单独的阻转异构体。在溶液中，式(A)化合物可作为四种非对映异构体的混合物或两对非对映异构体的混合物或单一阻转异构体提供。
对于式(A)化合物，通过围绕立体轴(a)的位阻旋转形成的旋转异构体对可通过具有以下结构的式(I)化合物及式(B)化合物来表示：
发现式(I)化合物及式(B)化合物是可分离的且其在环境温度及生理温度在溶液中是稳定的。另外，通过围绕立体轴(b)的位阻旋转形成旋转异构体。还发现式(I)化合物的这两种阻转异构体是可分离的且其在环境温度及生理温度在溶液中是稳定的。
可通过各种技术(包括超临界流体色谱法(SFC))分离诸如式(A)化合物的手性化合物。SFC为正相HPLC形式，其使用超临界/次临界流体CO2及极性有机改性剂(例如醇)作为流动相的分离技术。(White等人，J.Chromatography A,1074:175-185(2005))。
其中Q为的式(I)化合物可通过式(II)的结构表示：
其中Q为的式(A)化合物的四种旋转异构体可通过具有式(II-1)及(II-2)的结构的式(II)化合物：
及具有式(B-1)及(B-2)的结构的式(B)化合物表示：
其中Q为的式(I)化合物可通过式(III)的结构表示：
其中Q为的式(A)化合物的四种旋转异构体可通过具有式(III-1)及(III-2)的结构的式(III)化合物：
及具有式(B-3)及(B-4)的结构的式(B)化合物表示：
其中Q为的式(I)化合物可通过式(IV)的结构表示：
其中Q为的式(A)化合物的四种旋转异构体可通过具有式(IV-1)及(IV-2)的结构的式(IV)化合物：
及具有式(B-5)及(B-6)的结构的式(B)化合物表示：
其中Q为的式(I)化合物可通过式(V)的结构表示：
其中Q为的式(A)化合物的四种旋转异构体可通过具有式(V-1)及(V-2)的结构的式(V)化合物：
及具有式(B-7)及(B-8)的结构的式(B)化合物表示：
可通过单晶x射线结晶学确定阻转异构体的绝对空间构型。
式(I)化合物可作为单独的阻转异构体或作为包含呈任何比例的式(I)的两种阻转异构体的混合物提供。式(I)的两种阻转异构体的混合物可任选含有呈任何比例的式(B)的一或两种阻转异构体。
其中R1为F、Cl或-CH3的式(I)化合物对应于相对键(a)形成的立体轴的(R)-阻转异构体。其中R1为F、Cl或-CH3的式(B)化合物对应于相对键(a)形成的立体轴的(S)-阻转异构体。
其中R1为-CN的式(I)化合物对应于相对键(a)形成的立体轴的(S)-阻转异构体。其中R1为-CN的式(B)化合物对应于相对键(a)形成的立体轴的(R)-阻转异构体。
如本文所使用，短语“两个虚线表示两个单键或两个双键”是指其中两个虚线同时为单键或两个虚线同时为双键的式(A)、(B)、(I)、(II)、(III)、(IV)及(V)的化合物。例如，其中两个虚线同时为单键的式(I)化合物为具有式(IA)的结构的四氢咔唑化合物，且其中两个虚线同时为双键的式(I)化合物为具有式(IB)的结构的咔唑化合物：
通过式(IA)表示的四氢咔唑化合物还在连接取代基R3的碳原子处具有手性中心，且因此其可作为于此手性中心处的S-异构体及R-异构体存在。
所述异构体是可分离的且稳定的。一个实施方案提供作为S-异构体的具有连接R3取代基的碳手性中心的式(IA)化合物。一个实施方案提供作为R-异构体的具有连接R3取代基的碳手性中心的式(IA)化合物。
一个实施方案提供式(I)化合物，其中R3为-C(CH3)2OH；且R1、R2及Q如第一方面中所定义。其中Q为：且Ra、Rb及n如第一方面所定义的化合物包括在此实施方案内。式(IA)化合物还包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供式(II)化合物，其中R3为-C(CH3)2OH；且R1、R2、Ra、Rb及n如第一方面中所定义。其中Ra为-CH3(包括-CD3)的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供式(III)化合物，其中R3为-C(CH3)2OH；且R1、R2、Rb及n如第一方面中所定义。其中各Rb独立地为F或Cl的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供式(IV)化合物，其中R3为-C(CH3)2OH；且R1及R2如第一方面中所定义。其中R1为F、Cl或-CH3的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供式(V)化合物，其中R3为-C(CH3)2OH；且R1及R2如第一方面中所定义。其中R1为F、Cl或-CH3的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供其中R1为F的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供其中R1为Cl的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供其中R1为F或Cl的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供其中R1为-CH3的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供其中R1为-CN的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供其中R1为F、Cl或-CN的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供其中R1为-CH3或-CN的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供其中R1为F、Cl或-CH3的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供其中R2为Cl的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。另外，其中R3为-C(CH3)2OH的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供其中R2为-CH3的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。另外，其中R3为-C(CH3)2OH的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供其中R3为-C(CH3)2OH的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供其中各Rb独立地为F和/或Cl的式(I)化合物。其中n为1或2的化合物包括在此实施方案内。其中n为2且各Rb为F的化合物还包括在此实施方案内。
一个实施方案提供其中n为1且Rb为-CH3或-OCH3的式(I)化合物。
一个实施方案提供其中n为0的式(I)化合物。式(IA)化合物包括在此实施方案内。式(IB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供式(II)化合物，其中两个虚线同时为单键且R1、R2、R3、Ra、Rb及n如第一方面中所定义。此实施方案的化合物具有式(IIA)的结构：
式(IIA)化合物的两种旋转异构体通过式(IIA-1)及(IIA-2)的结构表示：
其中R3为-C(CH3)2OH的式(IIA)、(IIA-1)及(IIA-2)的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供式(II)化合物，其中两个虚线同时为双键且R1、R2、R3、Ra、Rb及n如第一方面中所定义。此实施方案的化合物具有式(IIB)的结构：
式(IIB)化合物的两种旋转异构体通过式(IIB-1)及(IIB-2)的结构表示：
其中R3为-C(CH3)2OH的式(IIB)、(IIB-1)及(IIB-2)的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供其中Ra为H的式(II)化合物。式(IIA)化合物包括在此实施方案内。式(IIB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供其中Ra为-CH3的式(II)化合物。其中Ra为-CD3的化合物包括在此实施方案内。另外，式(IIA)化合物包括在此实施方案内。式(IIB)化合物为包括在此实施方案内的其他化合物。
一个实施方案提供式(III)化合物，其中两个虚线同时为单键且R1、R2、R3、Rb及n如第一方面中所定义。此实施方案的化合物具有式(IIIA)的结构：
式(IIIA)化合物的两种旋转异构体通过式(IIIA-1)及(IIIA-2)的结构表示：
其中R3为-C(CH3)2OH的式(IIIA)、(IIIA-1)及(IIIA-2)的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供式(III)化合物，其中两个虚线同时为双键且R1、R2、R3、Rb及n如第一方面中所定义。此实施方案的化合物具有式(IIIB)的结构：
式(IIIB)化合物的两种旋转异构体通过式(IIIB-1)及(IIIB-2)的结构表示：
其中R3为-C(CH3)2OH的式(IIIB)、(IIIB-1)及(IIIB-2)的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供式(IV)化合物，其中两个虚线同时为单键且R1、R2及R3如第一方面中所定义。此实施方案的化合物具有式(IVA)的结构：
式(IVA)化合物的两种旋转异构体通过式(IVA-1)及(IVA-2)的结构表示：
其中R3为-C(CH3)2OH的式(IVA)、(IVA-1)及(IVA-2)的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供式(IV)化合物，其中两个虚线同时为双键且R1、R2及R3如第一方面中所定义。此实施方案的化合物具有式(IVB)的结构：
式(IVB)化合物的两种旋转异构体通过式(IVB-1)及(IVB-2)的结构表示：
其中R3为-C(CH3)2OH的式(IVB)、(IVB-1)及(IVB-2)的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供式(V)化合物，其中两个虚线同时为单键且R1、R2及R3如第一方面中所定义。此实施方案的化合物具有式(VA)的结构：
式(VA)化合物的两种旋转异构体通过式(VA-1)及(VA-2)的结构表示：
其中R3为-C(CH3)2OH的式(VA)、(VA-1)及(VA-2)的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供式(V)化合物，其中两个虚线同时为双键且R1、R2及R3如第一方面中所定义。此实施方案的化合物具有式(VB)的结构：
式(VB)化合物的两种旋转异构体通过式(VB-1)及(VB-2)的结构表示：
其中R3为-C(CH3)2OH的式(VB)、(VB-1)及(VB-2)的化合物包括在此实施方案内。
一个实施方案提供具有以下结构的式(I)化合物：
其中R1为Cl或F；且Ra为-CH3(包括-CD3)。
一个实施方案提供具有以下结构的式(I)化合物：
其中R1为Cl或F；且Ra为-CH3(包括-CD3)。
一个实施方案提供具有以下结构的式(I)化合物：
其中R1为Cl或F；且Ra为-CH3(包括-CD3)。
一个实施方案提供具有以下结构的式(I)化合物：
一个实施方案提供具有以下结构的式(I)化合物：
一个实施方案提供具有以下结构的式(I)化合物：
一个实施方案提供选自在第一方面的范围内的示例性实施方案的化合物。
一个实施方案提供选自在第一方面或上述实施方案中的任一者的范围内的化合物的任一子集列表的化合物。
一个实施方案提供式(II)化合物，其中该化合物为：3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(1)；3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(2)；3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(2-甲基-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(3)；3-氯-4-(R)-(3-(1,8-二甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(4)；3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(R)-(7-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(5)；3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(S)-(7-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(6)；3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(8-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(7)；3-氯-4-(R)-(3-(6-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(8)；3-氯-4-(R)-(3-(7-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(9)；3-氯-4-(R)-(3-(6,8-二氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(10)；3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(11)；3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(12)；3-氯-4-(R)-(3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(13)；3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(14)；3-氰基-4-(S)-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(15及16)；3-氟-4-(R)-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(17)；3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(18)；3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(19)；3-氟-4-(R)-(3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(20)；3-氟-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(21)；3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(22)；6-氯-5-(R)-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(25)；6-氯-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(26)；6-氟-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(R)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(27)；6-氟-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(28)；4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-3-甲基-9H-咔唑-1-甲酰胺(29)；3-氯-4-(2-氯-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(42)；3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(R)-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(43)；3-氯-4-(2-氯-3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(44)；3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(R)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(45)；4-(2-氯-3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(46)；3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(47)；
一个实施方案提供式(III)化合物，其中该化合物为：3-氯-4-(R)-(3-(3-(4-氟苯基)-2,6-二氧代-2,3-二氢嘧啶-1(6H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(23)；4-(R)-(3-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(30和31)；3-氯-4-(R)-(3-(R)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(32)；3-氯-4-(R)-(3-(S)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(33)；3-氯-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(34)；3-氯-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(35和36)；3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(5-甲氧基-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(37)；3-氟-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(40和41)；
一个实施方案提供式(IV)化合物，其中该化合物为：3-氯-4-(R)-(3-(5,7-二氧代-5H-噻唑并[3,2-c]嘧啶-6(7H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(38和39)。
一个实施方案提供式(V)化合物，其中该化合物为：3-氯-4-(R)-(3-(3-(4-氟苯基)-2,6-二氧代-2,3-二氢嘧啶-1(6H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(24)。
在一个实施方案中，提供包含式(I)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(I)化合物及(ii)式(B)化合物的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(I)化合物及其阻转异构体式(B)化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(I)化合物的组合物。基于式(I)化合物及其阻转异构体式(B)化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(I)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(II)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(II)化合物及(ii)其阻转异构体式(B-1)及(B-2)的化合物中的一或两者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(II)化合物及其阻转异构体式(B-1)及(B-2)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(II)化合物的组合物。基于式(II)化合物及其阻转异构体式(B-1)及(B-2)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(II)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(III)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(III)化合物及(ii)其阻转异构体式(B-3)及(B-4)的化合物中的一或两者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(III)化合物及其阻转异构体式(B-3)及(B-4)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(III)化合物的组合物。基于式(III)化合物及其阻转异构体式(B-3)及(B-4)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(III)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(IV)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(IV)化合物及(ii)其阻转异构体式(B-5)及(B-6)的化合物中的一或两者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(IV)化合物及其阻转异构体式(B-5)及(B-6)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(IV)化合物的组合物。基于式(IV)化合物及其阻转异构体式(B-5)及(B-6)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(IV)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(V)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(V)化合物及(ii)其阻转异构体式(B-7)及(B-8)的化合物中的一或两者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(V)化合物及其阻转异构体式(B-7)及(B-8)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(V)化合物的组合物。基于式(V)化合物及其阻转异构体式(B-7)及(B-8)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(V)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(II-1)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(II-1)化合物及(ii)其阻转异构体式(II-2)、式(B-1)及(B-2)的化合物中的一或多者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(II-1)、(II-2)、(B-1)及(B-2)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(II-1)化合物的组合物。基于式(II-1)、(II-2)、(B-1)及(B-2)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(II-1)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(II-2)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(II-2)化合物及(ii)其阻转异构体式(II-1)、式(B-1)及(B-2)的化合物中的一或多者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(II-1)、(II-2)、(B-1)及(B-2)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(II-2)化合物的组合物。基于式(II-1)、(II-2)、(B-1)及(B-2)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(II-2)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(III-1)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(III-1)化合物及(ii)其阻转异构体式(III-2)、式(B-3)及(B-4)的化合物中的一或多者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(III-1)、(III-2)、(B-3)及(B-4)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(III-1)化合物的组合物。基于式(III-1)、(III-2)、(B-3)及(B-4)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(III-1)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(III-2)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(III-2)化合物及(ii)其阻转异构体式(III-1)、式(B-3)及(B-4)的化合物中的一或多者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(III-1)、(III-2)、(B-3)及(B-4)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(III-2)化合物的组合物。基于式(III-1)、(III-2)、(B-3)及(B-4)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(III-2)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(IV-1)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(IV-1)化合物及(ii)其阻转异构体式(IV-2)、式(B-5)及(B-6)的化合物中的一或多者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(IV-1)、(IV-2)、(B-5)及(B-6)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(IV-1)化合物的组合物。基于式(IV-1)、(IV-2)、(B-5)及(B-6)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(IV-1)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(IV-2)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(IV-2)化合物及(ii)其阻转异构体式(IV-1)、式(B-5)及(B-6)的化合物中的一或多者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(IV-1)、(IV-2)、(B-5)及(B-6)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(IV-2)化合物的组合物。基于式(IV-1)、(IV-2)、(B-5)及(B-6)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(IV-2)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(V-1)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(V-1)化合物及(ii)其阻转异构体式(V-2)、式(B-7)及(B-8)的化合物中的一或多者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(V-1)、(V-2)、(B-7)及(B-8)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(V-1)化合物的组合物。基于式(V-1)、(V-2)、(B-7)及(B-8)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(V-1)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
在一个实施方案中，提供包含式(V-2)化合物的组合物。包含呈任一比例的(i)式(V-2)化合物及(ii)其阻转异构体式(V-1)、式(B-7)及(B-8)的化合物中的一或多者的混合物的组合物包括在此实施方案内。
在一个实施方案中，提供基于式(V-1)、(V-2)、(B-7)及(B-8)的化合物的总当量重量的包含至少98当量重量％的式(V-2)化合物的组合物。基于式(V-1)、(V-2)、(B-7)及(B-8)的化合物的总当量重量的包含99当量重量％、99.5当量重量％、99.8当量重量％及99.9当量重量％的式(V-2)化合物的组合物包括在此实施方案内。此实施方案的组合物包括药物组合物。
晶体形式
表1
实施例 形式
2 M-1
11 H-1
11 N-2
11 M-1
28 M2-1
33 M2-1
在一个实施方案中，实施例2的化合物作为包含形式M-1的结晶物质提供。实施例2的化合物的该结晶形式包含甲醇溶剂化物结晶形式，其在本文中称作实施例2的“形式M-1”或“M-1形式”。实施例2的M-1形式对于每分子的实施例2而言包含一个分子的甲醇。
在一个实施方案中，实施例2的化合物的M-1形式的特征在于约等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝90.0°
γ＝90.0°
空间群：P212121
实施例2的分子/不对称单位：1
密度(经计算)＝1.391g/cm3，
其中形式M-1的晶胞参数在约203K的温度测得。
在又一实施方案中，实施例2的M-1形式的特征在于实质上如表2中所列的原子份数坐标(fractional atomic coordinate)。
表2
在约203K的温度计算的实施例2形式M-1的原子份数坐标；原子坐标(×104)
在一个实施方案中，实施例11的化合物作为包含形式H-1的结晶物质提供。实施例11的化合物的该结晶形式包含一水合物结晶形式，其在本文中称作实施例11的“形式H-1”或“H-1形式”。实施例11的H-1形式对于各分子的实施例11而言包含一个分子的水。
在一个实施方案中，实施例11的化合物的H-1形式的特征在于约等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝90.0°
γ＝90.0°
空间群：P212121
实施例11的分子/不对称单位：1
密度(经计算)＝1.396g/cm3，
其中形式H-1的晶胞参数在约室温的温度测得。
在另一实施方案中，实施例11的H-1形式的特征在于实质上根据显示于图7中的图的模拟粉末x射线衍射(PXRD)图和/或实质上根据显示于图7中的图的实验PXRD图。
在又一实施方案中，实施例11的H-1形式的特征在于实质上如表3中所列的原子份数坐标。
表3
在室温计算的实施例11形式H-1的原子份数坐标；原子坐标(×104)
在一个实施方案中，实施例11的化合物作为包含形式N-2的结晶物质提供。实施例11的化合物的该结晶形式包含纯净结晶形式，其在本文中称作实施例11的“形式N-2”或“N-2形式”。
在一个实施方案中，实施例11的化合物的N-2形式的特征在于约等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝105.5°
γ＝90.0°
空间群：P21
实施例11的分子/不对称单位：1
密度(经计算)＝1.369g/cm3，
其中形式N-2的晶胞参数在约室温的温度测得。
在另一实施方案中，实施例11的N-2形式的特征在于实质上根据显示于图8中的图的模拟粉末x射线衍射(PXRD)图。在又一实施方案中，实施例11的N-2形式的特征在于实质上如表4中所列的原子份数坐标。
表4
在室温计算的实施例11形式N-2的原子份数坐标；原子坐标(×104)
在一个实施方案中，实施例11的化合物作为包含形式M-1的结晶物质提供。实施例11的化合物的该结晶形式包含甲醇溶剂化物结晶形式，其在本文中称作实施例11的“形式M-1”或“M-1形式”。实施例11的M-1形式对于各分子的实施例11而言包含一个分子的甲醇。
在一个实施方案中，实施例11的化合物的M-1形式的特征在于约等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝90.0°
γ＝90.0°
空间群：P212121
实施例11的分子/不对称单位：1
密度(经计算)＝1.381g/cm3，
其中形式M-1的晶胞参数在约室温的温度测得。
在另一实施方案中，实施例11的M-1形式的特征在于实质上根据显示于图9中的图的模拟粉末x射线衍射(PXRD)图和/或实质上根据显示于图9中的图的实验PXRD图。
在又一实施方案中，实施例11的M-1形式的特征在于实质上如表5中所列的原子份数坐标。
表5
在室温计算的实施例11形式M-1的原子份数坐标；原子坐标(×104)
在一个实施方案中，实施例28的化合物作为包含形式M2-1的结晶物质提供。实施例28的化合物的该结晶形式包含甲醇溶剂化物结晶形式，其在本文中称作实施例28的“形式M2-1”或“M2-1形式”。实施例28的M2-1形式对于各分子的实施例28而言包含两个分子的甲醇。
在一个实施方案中，实施例28的化合物的M2-1形式的特征在于约等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝94.1°
γ＝90.0°
空间群：P21
实施例28的分子/不对称单位：1
密度(经计算)＝1.301g/cm3，
其中形式M2-1的晶胞参数在约173K的温度测得。
在另一实施方案中，实施例28的M2-1形式的特征在于实质上根据显示于图10中的图的模拟粉末x射线衍射(PXRD)图。
在又一实施方案中，实施例28的M2-1形式的特征在于实质上如表6中所列的原子份数坐标。
表6
在约173K的温度计算的实施例28形式M2-1的原子份数坐标；原子坐标(×104)
在一个实施方案中，实施例33的化合物作为包含形式M2-1的结晶物质提供。实施例33的化合物的该结晶形式包含甲醇溶剂化物结晶形式，其在本文中称作实施例33的“形式M2-1”或“M2-1形式”。实施例33的M2-1形式对于各分子的实施例33而言包含两个分子的甲醇。
在一个实施方案中，实施例33的化合物的M2-1形式的特征在于约等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝90.0°
γ＝90.0°
空间群：P212121
实施例33的分子/不对称单位：1
密度(经计算)＝1.346g/cm3，
其中形式M2-1的晶胞参数在约173K的温度测得。
在另一实施方案中，实施例33的M2-1形式的特征在于实质上根据显示于图11中的图的模拟粉末x射线衍射(PXRD)图和/或实质上根据显示于图11中的图的实验PXRD图。
在又一实施方案中，实施例33的M2-1形式的特征在于实质上如表7中所列的原子份数坐标。
表7
在约173K的温度计算的实施例33形式M2-1的原子份数坐标；原子坐标(×104)
本发明可按其它具体形式实施而不背离其精神或基本属性。本发明涵盖本申请指明的本发明的各方面和/或实施方案的所有组合。应当理解的是，本发明的任意实施方案和所有实施方案可与任意其它实施方案或多个实施方案结合来描述其它的实施方案。还应当理解的是，实施方案的每个单独元素意欲与来自任意实施方案的任意元素或所有其它元素组合来描述额外的实施方案。
定义
本领域技术人员在阅读以下详细阐述后可更易于了解本发明的特性及优点。应了解，出于清楚原因，还可在单独实施方案的情况下在上下文阐述的本发明的某些特征组合，以形成单一实施方案。相反，出于简洁原因，还可将在单一实施方案的情况下阐述的本发明的各种特征组合，以便形成其亚组合。在本文中鉴定为示例性或优选的实施方案意欲示例说明而并非进行限制。
除非本文另有明确说明，否则以单数提及的内容还可包括复数。例如，“一(a及an)”可指一个或一或多个。
如本文所使用，术语“化合物”是指至少一种化合物。例如，式(I)化合物包括式(I)化合物及两种或更多种式(I)化合物。
除非另有说明，否则假定具有未满足化合价的任一杂原子具有足以满足所述化合价的氢原子。
本文所阐述的定义优先于在以引用方式并入本文中的任一专利、专利申请和/或专利申请公开中所阐述的定义。
下文列出用于阐述本发明的各个术语的定义。除非在特定情况下另有限制，否则当在整个本说明书中单独地或作为较大基团的一部分使用所述术语时，这些定义适用于所述术语。
在整个本说明书中，本领域技术人员可选择基团及其取代基以提供稳定部分及化合物。
根据本领域中使用的惯例，在本申请的结构式中用于描绘化学键，所述化学键为部分(moiety)或取代基与核心结构或骨架结构相连的点。
本申请使用的短语“可药用的”涉及化合物、物质、组合物和/或剂型，其在合理的医学判断范围内适用于与人和动物的组织接触，而不会产生过量的毒性、刺激、过敏性应答或其它问题或病症，与合理的益处/风险比例相称。
式(I)化合物可以无定形固体或结晶固体提供。可采用冻干法提供呈无定形固体的式(I)化合物。
应进一步了解，式(I)化合物的溶剂化物(例如，水合物)还在本发明的范围内。术语“溶剂化物”意指式(I)化合物与一或多种溶剂分子(有机或无机)的物理缔合。该物理缔合包括氢键合。在某些情况中，例如在一或多种溶剂分子纳入结晶固体的晶格中时，溶剂化物能够分离。“溶剂化物”涵盖溶液相及可分离的溶剂化物。示例性溶剂化物包括水合物、乙醇化物、甲醇化物、异丙醇化物、乙腈溶剂化物及乙酸乙酯溶剂化物。本领域已知溶剂化方法。
各种形式的前药为本领域所熟知且阐述于以下文献中：
a)Wermuth,C.G.等人，The Practice of Medicinal Chemistry,第31章,Academic Press(1996)；
b)Bundgaard,H.编辑，Design of Prodrugs,Elsevier(1985)；
c)Bundgaard,H.,第5章,“Design and Application of Prodrugs”,A Textbookof Drug Design and Development,第113页至第191页,Krogsgaard-Larsen,P.等人编辑，Harwood Academic Publishers(1991)；及
d)Testa,B.等人，Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism,Wiley-VCH(2003)。
此外，在制备式(I)化合物后可对其进行分离及纯化，以获得含有等于或大于99重量％的量的式(I)化合物(“基本上纯的”)的组合物，然后如本文所阐述对其进行使用或配制。本文还涵盖所述“基本上纯的”式(I)化合物作为本发明的一部分。
“稳定化合物”及“稳定结构”意欲指示化合物稳固至足以由反应混合物分离为达到可用纯度，且可将其配制成有效治疗剂。本发明意欲体现稳定化合物。
“治疗有效量”意欲包括有效充当Btk的抑制剂或有效治疗或预防自身免疫和/或炎性疾病状态(例如多发性硬化及类风湿性关节炎)的单独的本发明化合物的量或所主张化合物的组合的量或本发明化合物与其他活性成分的组合的量。
本申请使用的术语“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”涵盖治疗哺乳动物特别是人的疾病状态，并包括：(a)预防哺乳动物中疾病状态的发生，特别是当所述哺乳动物易患有所述疾病状态但还没有被诊断患有所述疾病时；(b)抑制所述疾病状态，即阻止其发展；和/或(c)减轻疾病状态，即引起所述疾病状态的消退。
本发明化合物意在包括在本发明化合物中出现的所有原子的同位素。同位素包括具有相同原子数但不同质量数的那些原子。一般示例但非限定，氢的同位素包括氘(D)和氚(T)。碳的同位素包括13C和14C。同位素标记的本发明化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术制备或通过与本申请描述的那些方法类似的方法制备，使用经适当同位素标记的试剂代替否则会使用的非标记的试剂。例如，甲基(-CH3)还包括氘化甲基，例如-CD3。
可通过适于待治疗病症的任一方式给予式(I)化合物，此可取决于位点特异性治疗的需要或欲递送式(I)化合物的量。
包含式(I)化合物及一或多种无毒、药用载体和/或稀释剂和/或辅料(本文中统称为“载体”材料)及(若期望)其他活性成分的一类药物组合物还涵盖于本发明内。式(I)化合物可通过任一适当途径给予，优选以适于所述途径的药物组合物形式且以对预期治疗有效的剂量给予。本发明化合物及组合物可(例如)口服、经粘膜或肠胃外(包括血管内、静脉内、腹膜腔内、皮下、肌内及胸骨内)以含常规药用载体、辅料及媒介物的剂量单位制剂给予。例如，药物载体可含有甘露醇或乳糖及微晶纤维素的混合物。该混合物可含有其他组分，例如润滑剂(例如硬脂酸镁)及崩解剂(例如交聚维酮)。可将载体混合物填充至明胶胶囊中或将其压制为片剂。可以(例如)口服剂型或输注给予药物组合物。
对于口服给药，药物组合物可呈(例如)片剂、胶囊、液体胶囊、混悬液或液体形式。药物组合物优选地制成含有具体量活性成分的剂量单位形式。例如，药物组合物可作为包含在约0.1mg至1000mg、优选地约0.25mg至250mg且更优选约0.5mg至100mg范围内的量的活性成分的片剂或胶囊提供。适于人类或其他哺乳动物的日剂量可取决于患者的病症及其他因素在很大范围内变化，但其可使用常规方法来确定。
涵盖于本文中的任一药物组合物可(例如)经由任何可接受且适当的口服制剂口服递送。示例性口服制剂包括(但不限于)例如片剂、糖锭、锭剂、水性或者油状混悬剂，可分散粉末剂或者颗粒剂，乳剂，硬或软胶囊剂、液体胶囊、糖浆剂或者酏剂。欲用于口服给药的药物组合物可根据本领域已知用于制备欲用于口服给药的药物组合物的任一方法制备。为了提供药学上适口的制剂，本发明的药物组合物可含有至少一种试剂，选自增甜剂、调味剂、着色剂、润湿剂、抗氧化剂和防腐剂。
可通过(例如)将至少一种式(I)化合物与至少一种适于制备片剂的无毒的药用赋形剂混合来制备片剂。示例性赋形剂包括(但不限于)例如惰性稀释剂，如碳酸钙或碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉和海藻酸；粘合剂，如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮和阿拉伯胶；以及润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸和滑石。另外，片剂可未经包衣或通过已知技术进行包衣以掩盖不适口药物的差味道，或延迟活性成分在胃肠道中的崩解及吸收，由此将活性成分的效果保持较长时间。示例性水溶性味道掩蔽材料包括(但不限于)羟丙基-甲基纤维素及羟丙基纤维素。示例性延时材料包括(但不限于)乙基纤维素及乙酸丁酸纤维素。
可通过(例如)将至少一种式(I)化合物与至少一种惰性固体稀释剂(例如，碳酸钙、磷酸钙及高岭土)混合制备硬明胶胶囊。
可通过(例如)将至少一种式(I)化合物与至少一种水溶性载体(例如，聚乙二醇)及至少一种油介质(例如，花生油、液体石蜡及橄榄油)混合制备软明胶胶囊。
可通过(例如)将至少一种式(I)化合物与至少一种适于制备水性混悬液的赋形剂混合制备水性混悬液。适于制备水性混悬液的示例性赋形剂包括(但不限于)例如，助悬剂，例如，羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、海藻酸、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶及阿拉伯胶；分散剂或润湿剂，例如，天然磷脂例如卵磷脂；氧化烯与脂肪酸的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯；环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物例如十七亚乙氧基十六醇(heptadecaethylene-oxycetanol)；环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如聚乙烯山梨醇酐单油酸酯。水性混悬液还可含有至少一种防腐剂，例如，对羟基苯甲酸乙酯及对羟基苯甲酸正丙酯；至少一种着色剂；至少一种矫味剂；和/或至少一种甜味剂，包括(但不限于)例如蔗糖、糖精及阿司帕坦。
可通过(例如)将至少一种式(I)化合物悬浮于植物油(例如，花生油、橄榄油、麻油及椰子油)或矿物油(例如，液体石蜡)中制备油性混悬液。油性混悬液还可含有至少一种增稠剂，例如，蜂蜡；硬石蜡；及鲸蜡醇。为提供适口油性混悬液，可将上文已阐述的至少一种甜味剂和/或至少一种矫味剂添加至油性混悬液中。油性混悬液可进一步含有至少一种防腐剂，包括(但不限于)例如抗氧化剂，例如，丁基化羟基茴香醚及α-生育酚。
可通过(例如)将至少一种式(I)化合物与至少一种分散剂和/或润湿剂、至少一种助悬剂和/或至少一种防腐剂混合来制备可分散粉末及颗粒。适当分散剂、润湿剂及助悬剂如上文已阐述。示例性防腐剂包括(但不限于)例如抗氧化剂，例如，抗坏血酸。此外，可分散粉末及颗粒还可含有至少一种赋形剂，包括(但不限于)例如甜味剂；矫味剂；及着色剂。
可将其至少一种式(I)化合物的乳剂制备为(例如)水包油乳剂。可以已知方式由已知成分构造包含式(I)化合物的乳剂的油相。油相可通过但不限于例如以下的油来提供：植物油，例如，橄榄油及花生油；矿物油，例如，液体石蜡；及其混合物。尽管该相可仅包含乳化剂，但其可包含至少一种乳化剂与脂肪或油或与脂肪及油二者的混合物。适当乳化剂包括(但不限于)例如天然磷脂，例如，大豆卵磷脂；衍生自脂肪酸及己糖醇酐的酯或偏酯，例如，山梨醇酐单油酸酯；及偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如，聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯。优选地，包括亲水性乳化剂连同充当稳定剂的亲脂性乳化剂。还优选包括油及脂肪。乳化剂与稳定剂一起或不与稳定剂一起构成所谓的乳化蜡，且蜡与油及脂肪一起构成所谓的乳化软膏基质从而形成乳膏制剂的油性分散相。乳剂还可含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和/或抗氧化剂。适用于本发明制剂中的乳化剂及乳剂稳定剂包括吐温(Tween)60、司盘(Span)80、鲸蜡硬脂醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油酯、月桂基硫酸钠、单独的二硬脂酸甘油酯或带有蜡的二硬脂酸甘油酯，或本领域熟知的其他材料。
还可(例如)经由任一药学上可接受且适当的可注射形式以静脉内、皮下和/或肌内方式递送式(I)化合物。示例性可注射形式包括(但不限于)例如包含可接受的媒介物及溶剂(例如，水、林格溶液及等渗氯化钠溶液)的无菌水溶液；无菌水包油微乳剂；及水性或油性混悬液。
用于肠胃外给药的制剂可呈水性或非水性等渗无菌注射溶液或混悬液形式。这些溶液及混悬液可由无菌粉末或颗粒使用用于针对口服给药的制剂中所提及的载体或稀释剂中的一或多者或通过使用其他适当分散剂或润湿剂及助悬剂来制备。可将所述化合物溶解于水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉子油、花生油、麻油、苯甲醇、氯化钠、黄蓍胶和/或各种缓冲液中。药物领域熟知且广泛已知其他辅料及给药模式。还可通过注射以具有适当载体(包括盐水、右旋糖或水)或具有环糊精(即，)、共溶剂增溶剂(即，丙二醇)或胶束增溶剂(即，吐温80)的组合物给予活性成分。
无菌可注射制剂还可为于无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬液，例如作为于1,3-丁二醇中的溶液。可用的可接受媒介物及溶剂为水、林格溶液及等渗氯化钠溶液。此外，通常采用无菌不挥发性油作为溶剂或助悬介质。就此目的而言，可使用任一温和不挥发性油，包括合成甘油单酯或甘油二酯。此外，在可注射制剂中可使用诸如油酸等脂肪酸。
可通过例如以下的方式制备无菌可注射水包油微乳剂：1)将至少一种式(I)化合物溶解于油相(例如，大豆油及卵磷脂的混合物)中；2)将含有式(I)的油相与水及甘油的混合物合并；及3)处理该组合以形成微乳剂。
可根据本领域已知的方法制备无菌水性或油性混悬液。例如，可利用无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(例如，1,3-丁二醇)制备无菌水溶液或混悬液；且可利用无菌无毒的可接受的溶剂或助悬介质(例如，无菌不挥发性油，例如，合成的甘油单酯或甘油二酯；及脂肪酸(例如，油酸))制备无菌油性混悬液。
可用于本发明药物组合物中的药用载体、辅料及媒介物包括(但不限于)离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、自乳化药物递送系统(SEDDS)(例如d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯、用于药物剂型中的表面活性剂(例如吐温)、聚乙氧基化蓖麻油(例如表面活性剂(BASF))或其他类似聚合物递送基质)、血清蛋白(例如人类血清白蛋白)、缓冲物质(例如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油脂混合物、水、盐或电解质(例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段共聚物、聚乙二醇及羊毛脂。环糊精(例如α环糊精、β环糊精及γ环糊精或化学改质的衍生物(例如羟基烷基环糊精，包括2-羟丙基-环糊精及3-羟丙基-环糊精)或其他增溶性衍生物还可有利地用于增强本文所阐述的各式的化合物的递送。
本发明的药物活性化合物可根据常规制药方法处理以产生给予患者(包括人类及其他哺乳动物)的医学药物。可使药物组合物经受常规药物操作(例如灭菌)和/或其可含有常规辅料(例如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、缓冲剂等)。另外可利用肠溶包衣制备片剂及丸剂。所述组合物还可包含辅料，例如润湿剂、甜味剂、矫味剂及芳香剂。
所给予化合物的量及利用本发明化合物和/或组合物治疗疾病病症的剂量方案取决于各种因素，包括受试者的年龄、体重、性别及医学状况、疾病类型、疾病的严重程度、给药途径及频率及所用具体化合物。因此，剂量方案可在很大范围内变化，但其可使用标准方法常规地确定。约0.001mg/kg体重至100mg/kg体重、优选地介于约0.0025mg/kg体重与约50mg/kg体重之间且最优选地介于约0.005mg/kg体重至10mg/kg体重之间的日剂量可为适当的。日剂量可每天1至4个剂量来给予。其他给药方案包括每周一次给药及每两天循环一次给药。
出于治疗目的，本发明的活性化合物通常与一或多种适于所指示给药途径的辅料组合。若口服给予，则化合物可与乳糖、蔗糖、淀粉粉末、链烷酸的纤维素酯、纤维素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸及硫酸的钠盐及钙盐、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇混合，且然后进行压片或包囊以方便给药。所述胶囊或片剂可含有控制释放制剂，其可以活性化合物于羟丙基甲基纤维素中的分散液提供。
本发明药物组合物包含至少一种式(I)化合物及任选选自任一药用载体、辅料及媒介物的另一物质。本发明的替代组合物包含本文所阐述的式(I)化合物或其前药及药用载体、辅料或媒介物。
用途
本发明化合物调节激酶活性，包括对Btk进行调节。可由本发明化合物调节的其它类型的激酶活性包括但不限于Tec家族的成员，如BMX、Btk、ITK、TXK和Tec及它们的突变体。
因此，式(I)化合物可用于治疗与调节激酶活性及特别地选择性抑制Btk活性相关的病症。所述病症包括B细胞介导的疾病，其中细胞因子水平得以调节作为细胞内信号传导的结果。
如本文所使用，术语“治疗(treating或treatment)”涵盖反应性及预防性措施中的一者或两者，例如，经设计以抑制或延迟疾病或病症的发作，实现完全或部分减少症状或疾病状态，和/或减轻、改善、减弱或治愈疾病或病症和/或其症状。
鉴于式(I)化合物作为Btk选择性抑制剂的活性，式(I)化合物可用于治疗细胞因子相关病症，这些病症包括但不限于炎性疾病，如克罗恩病(Crohn’s)和溃疡性结肠炎、哮喘、移植物抗宿主病、慢性阻塞性肺病；自身免疫性疾病，如格雷夫斯病(Graves’disease)、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、牛皮癣；破坏性骨疾病，如骨重吸收疾病(boneresorption disease)、骨关节炎、骨质疏松症、多发性骨髓瘤相关骨疾病；增殖性疾病，如急性骨髓性白血病(acute myelogenous leukemia)、慢性骨髓性白血病(chronicmyelogenous leukemia)；血管原性疾病，如包括实体瘤在内的血管原性疾病、眼部新血管形成(ocular neovasculization)和婴儿血管瘤(infantile haemangioma)；感染性疾病，如败血病、感染性休克和志贺菌病(Shigellosis)；神经变性疾病，如阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease)、帕金森病(Parkinson’s disease)、由创伤性损伤引起的脑缺血或神经变性疾病；肿瘤疾病和病毒疾病，分别如转移性黑素瘤(metastatic melanoma)、卡波西肉瘤(Kaposi’s sarcoma)、多发性骨髓瘤和HIV感染及CMV视网膜炎、AIDS。
更具体地，可用本发明化合物治疗的具体病症或疾病包括但不限于胰腺炎(急性或慢性)、哮喘、变态反应、成人呼吸窘迫综合征、慢性阻塞性肺病、肾小球肾炎(glomerulonephritis)、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病(scleroderma)、慢性甲状腺炎、格雷夫斯病、自身免疫性胃炎、糖尿病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性中性粒细胞减少症(autoimmune neutropenia)、血小板减少症(thrombocytopenia)、特应性皮炎(atopic dermatitis)、慢性活动性肝炎(chronic active hepatitis)、重症肌无力、多发性硬化、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩病(Crohn’s disease)、牛皮癣、移植物抗宿主病(graft vs.host disease)、内毒素诱发的炎性反应(inflammatory reaction induced byendotoxin)、肺结核(tuberculosis)、动脉粥样硬化(atherosclerosis)、肌肉变性(muscledegeneration)、恶病质(cachexia)、银屑病关节炎(psoriatic arthritis)、莱特尔综合征(Reiter’s syndrome)、痛风(gout)、外伤性关节炎(traumatic arthritis)、风疹性关节炎(rubella arthritis)、急性滑膜炎(acute synovitis)、胰腺β细胞疾病(pancreaticβ-cell disease)；以大量中性粒细胞浸润(neutrophil infiltration)为特征的疾病；类风湿性脊椎炎(rheumatoid spondylitis)、痛风性关节炎(gouty arthritis)和其它关节炎病症、川崎病(Kawasaki disease)、慢性炎性脱髓鞘性多神经病(chronic inflammatorydemyelinating polyneuropathy,CIDP)、皮肌炎(dermatomyositis)、葡萄膜炎(uveitis)、抗因子VIII疾病(anti-factor-VIII-disease)；强直性脊柱炎(ankylosingspondylitis)、重症肌无力(myasthenia gravis)、古德帕斯彻病(Goodpasture’sdisease)、抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome)、ANCA相关血管炎(ANCA-associated vasculitis)、皮肌炎/多肌炎(dermatomyositis/polymyositis)、脑型疟(cerebral malaria)、慢性肺部炎性疾病、矽肺(silicosis)、肺结节病(pulmonarysarcoidosis)、骨重吸收疾病、同种异体移植物排斥(allograft rejection)、由感染引起的发热和肌痛(fever and myalgia due to infection)、继发于感染的恶病质(cachexiasecondary to infection)、骨髓形成(myeloid formation)、瘢痕组织形成(scar tissueformation)、溃疡性结肠炎、发热(pyresis)、流行性感冒(influenza)、骨质疏松症、骨关节炎、急性骨髓性白血病(acute myelogenous leukemia)、慢性骨髓性白血病(chronicmyelogenous leukemia)、转移性黑素瘤(metastatic melanoma)、卡波西肉瘤(Kaposi’ssarcoma)、多发性骨髓瘤、败血病、感染性休克和志贺菌病；阿尔兹海默病、帕金森病、由创伤性损伤引起的脑缺血或神经变性疾病；血管原性疾病，包括实体瘤、眼部新血管形成和婴儿血管瘤；病毒疾病，包括急性肝炎感染(包括甲型肝炎、乙型肝炎和丙型肝炎)、HIV感染和CMV视网膜炎、AIDS、ARC或恶性肿瘤和疱疹；中风、心肌缺血(myocardial ischemia)、心脏病发作中的缺血、器官机能减退(organ hyposia)、血管增生(vascular hyperplasia)、心脏和肾脏再灌注损伤(cardiac and renal reperfusion injury)、血栓形成(thrombosis)、心脏肥大、凝血酶诱发的血小板聚集(thrombin-induced plateletaggregation)、内毒素血症(endotoxemia)和/或中毒性休克综合征(toxic shocksyndrome)、与前列腺素内过氧化酶合酶-2相关的病症(conditions associated withprostaglandin endoperoxidase syndase-2)和寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris)。优选的治疗方法是其中病症选自以下的那些治疗方法：克罗恩病和溃疡性结肠炎、同种异体移植物排斥、类风湿性关节炎、牛皮癣、强直性脊柱炎、银屑病关节炎和寻常型天疱疮。可供选择地，优选的治疗方法是其中病症选自以下的那些治疗方法：缺血再灌注损伤，包括由中风引起的脑缺血再灌注损伤和由心肌梗塞引起的心脏缺血再灌注损伤。另一种优选的治疗方法是其中病症为多发性骨髓瘤的治疗方法。
此外，本发明的Btk抑制剂抑制可诱导促炎蛋白的表达，所述可诱导促炎蛋白如前列腺素内过氧化物合酶-2(PGHS-2)，其也称为环氧合酶-2(COX-2)。因此，其它与Btk相关的病症包括水肿、痛觉缺失(analgesia)、发热和疼痛如神经肌肉疼痛、头痛、由癌症引起的疼痛、牙痛和关节炎疼痛。本发明化合物还可用于治疗兽医学病毒感染，如慢病毒属感染(lentivirus infection)，包括但不限于马传染性贫血症病毒(equine infectiousanemia virus)或逆转录病毒感染(包括猫免疫缺陷病毒(feline immunodeficiencyvirus)、牛免疫缺陷病毒(bovine immunodeficiency virus)和犬免疫缺陷病毒(canineimmunodeficiency virus))。
当术语“Btk相关病症”或“Btk相关疾病或障碍”在本申请中使用时，每种术语旨在包括上文确定的所有病症(如同详尽地进行重复)以及受Btk激酶活性影响的任何其它病症。
“治疗有效量”意欲包括在单独或组合给予时可有效抑制Btk的本发明化合物的量。
一个实施方案提供用于治疗所述Btk激酶相关病症的方法，其包括向有需要的受试者给予至少一种式(I)化合物。可给予治疗有效量用于治疗所述病症。可采用本发明实施方案的方法来治疗Btk激酶相关病症，例如治疗变应性疾病和/或自身免疫和/或炎性疾病，包括(但不限于)SLE、类风湿性关节炎、多发性血管炎(multiple vasculitide)、特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura(ITP))、重症肌无力、变应性鼻炎、多发性硬化(MS)、移植排斥、I型糖尿病、膜性肾炎(membranous nephritis)、炎性肠病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性甲状腺炎、冷凝集素和温凝集素疾病(cold and warmagglutinin disease)、埃文斯综合征(Evan’s syndrome)、溶血性尿毒症综合征(hemolytic uremic syndrome)/血栓性血小板减少性紫癜(thromboticthrombocytopenic purpura)(HUS/TTP)、结节病(sarcoidosis)、斯耶格伦综合征(Sjogren’s syndrome)、外周神经病(例如吉-巴综合征(Guillain-Barre syndrome))、寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris)和哮喘。
治疗Btk激酶相关病症的方法可包括单独或与彼此和/或与可用于治疗所述病症的其他适当治疗剂组合来给予至少一种式(I)化合物。可给予治疗有效量的至少一种式(I)化合物及其他用于治疗所述病症的适当治疗剂。因此，“治疗有效量”还意欲包括可有效治疗Btk激酶相关病症的所主张化合物的组合的量。化合物的组合优选地为协同组合。当化合物在组合给药时的效应(在此情形下，抑制Btk)大于化合物在以单一药物单独给药时的累加效应时，发生如(例如)Chou等人，Adv.Enzyme Regul.,22:27-55(1984)所阐述的协同效应。一般而言，在化合物的亚-优选浓度最明确证明协同效应。协同效应可为以下方面的：与单独的组分相比，细胞毒性降低、抗Btk效应增加或组合的一些其他有益效应增加。
所述其它治疗药物的实例包括皮质激素、咯利普兰、钙感光蛋白(calphostin)、细胞因子抑制性抗炎药(CSAID)、美国专利4,200,750公开的4-取代的咪唑并[1,2-A]喹喔啉；白介素-10、糖皮质激素、水杨酸酯、一氧化二氮(nitric oxide)和其它免疫抑制剂；核转位抑制剂(nuclear translocation inhibitor)，如脱氧精胍菌素(deoxyspergualin,DSG)；非甾类抗炎药(NSAID)，如布洛芬(ibuprofen)、塞来考昔(celecoxib)和罗非考昔(rofecoxib)；甾类，如泼尼松(prednisone)或地塞米松(dexamethasone)；抗病毒剂，如阿巴卡韦(abacavir)；抗增殖剂，如甲氨喋呤(methotrexate)、来氟米特(leflunomide)、FK506(他克莫司(tacrolimus),)；细胞毒性药物(cytotoxic drug)，如硫唑嘌呤(azathiprine)和环磷酰胺；TNF-α抑制剂，如替尼达普(tenidap)、抗TNF抗体或可溶性TNF受体；和雷帕霉素(rapamycin)(西罗莫司(sirolimus)或)；或上述药物的衍生物。
上述其它治疗药物，当与本发明化合物联用时，可例如以Physicians’DeskReference(PDR)中标示的那些量或本领域技术人员所确定的其它量来使用。在本发明的方法中，所述其它治疗药物(或多种其它治疗药物)可在给药本发明化合物之前、同时或之后给药。如上文所述，本发明还提供了能够治疗Btk激酶相关病症(包括IL-1、IL-6、IL-8、IFNγ和TNF-α介导的病症)的药物组合物。
本发明组合物可含有如上文所述的其它治疗药物，并且例如可如下配制：按照例如药物制剂领域公知的技术，使用常规的固态或液态媒介物或稀释剂以及一类适于所期望给药模式的药物添加剂(例如赋形剂、粘合剂、防腐剂、稳定剂、矫味剂等)。
另一实施方案提供式(I)化合物以用于疗法中。在本发明实施方案中，于疗法中的使用可包括给予治疗有效量的式(I)化合物。
本发明还提供式(I)化合物的用途，其用于制备用以治疗或预防变应性疾病和/或自身免疫和/或炎性疾病的药物。在本发明实施方案中，用于制备药物的使用可包括给予治疗有效量的式(I)化合物以用于治疗或预防变应性疾病和/或自身免疫和/或炎性疾病。
本发明还提供式(I)化合物的用途，其用于制备用以治疗癌症的药物。本发明实施方案可包括用于制备药物的用途，其包括给予治疗有效量的式(I)化合物用于治疗或预防变应性疾病和/或自身免疫和/或炎性疾病。
因此，本发明进一步包括包含一或多种式(I)化合物及药用载体的组合物。
“药用载体”是指本领域通常接受的用于将生物活性药物递送至动物特别是哺乳动物的媒介物。药用载体根据本领域普通技术人员知识范围内所熟知的多种因素来配制。这些因素包括但不限于所配制的活性药物的类型和性质；含药组合物所待给药的受试者；给药组合物的预期途径；和所靶向的治疗适应症。药用载体包括水性和非水性液体媒介物以及各种固体和半固体剂型。除活性药物之外，所述载体还可包括多种不同的成分和添加剂，这样的其它成分出于本领域普通技术人员所熟知的各种原因(例如使活性药物、粘合剂等稳定)而包括在制剂中。有关合适的药用载体和选择它们时所涉及的因素的描述参见各种容易得到的来源，如Remington’s Pharmaceutical Sciences,17th Edition(1985)，将其全文引入本申请作为参考。
式(I)化合物可通过适于待治疗病症的任何方式来给药，这可取决于对位点特异性治疗或待递送药物量的需要。局部给药通常优选用于皮肤相关疾病，以及全身治疗优选用于癌症病症或癌前病症(pre-cancerous condition)，然而其它递送模式也包括在本发明中。例如，所述化合物可例如以片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉末剂或液态制剂(包括糖浆剂)的形式来口服递送；例如以溶液剂、混悬剂、凝胶剂或软膏剂的形式来局部给药；舌下给药；口腔给药；例如通过皮下、静脉内、肌内或胸骨内注射或输注技术(例如以无菌可注射水性或非水性溶液剂或混悬剂的形式)来肠胃外给药；例如通过吸入喷雾来经鼻给药；例如以乳膏剂或软膏剂的形式来局部给药；例如以栓剂的形式来经直肠给药；或通过脂质体来给药。可给药含有无毒药用媒介物或稀释剂的剂量单位制剂。所述化合物可按适于立即释放或延长释放的形式来给药。立即释放或延长释放可通过以下方法来实现：使用合适的药物组合物，或特别是在延长释放的情况下，使用诸如皮下植入物或渗透泵那样的装置。
用于局部给药的示例性组合物包括局部载体如Plastibase(与聚乙烯一起胶化的矿物油)。
用于口服给药的示例性组合物包括以下制剂：混悬剂，其可含有例如用于赋予体积(bulk)的微晶纤维素、作为助悬剂的海藻酸或海藻酸钠、作为增稠剂的甲基纤维素以及如本领域已知的增甜剂或矫味剂；以及立即释放片剂，其可含有例如微晶纤维素、磷酸二钙、淀粉、硬脂酸镁和/或乳糖和/或如本领域已知的其它赋形剂、粘合剂、增容剂(extender)、崩解剂、稀释剂和润滑剂。本发明化合物还可通过舌下给药和/或口腔给药例如以模制的、压制的或冷冻干燥的片剂的形式来经口递送。示例性组合物可包括快速溶出用稀释剂，如甘露醇、乳糖、蔗糖和/或环糊精。所述制剂还可包括高分子量赋形剂如纤维素或聚乙二醇(PEG)；辅助粘膜粘附的赋形剂如羟丙基纤维素(HPC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羧甲基纤维素钠(SCMC)和/或马来酸酐共聚物(例如Gantrez)；以及用于控制释放的物质如聚丙烯酸(酯)共聚物(例如Carbopol 934)。还可加入润滑剂、助流剂、矫味剂、着色剂和稳定剂以便于加工和使用。
用于鼻气雾剂或用于吸入给药的示例性组合物包括溶液剂，其可含有例如苄醇或其它合适的防腐剂、提高吸收和/或生物利用度的吸收促进剂和/或如本领域已知的其它增溶剂或分散剂。
用于肠胃外给药的示例性组合物包括注射用溶液剂或混悬剂，其可含有例如合适的无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(诸如甘露醇、1,3-丁二醇、水、林格溶液、等张氯化钠溶液)或其它合适的分散剂或湿润剂及助悬剂(包括合成的甘油一酯或甘油二酯及脂肪酸(包括油酸))。
用于直肠给药的示例性组合物包括栓剂，其可含有例如合适的非刺激性的赋形剂，如可可酯、合成的甘油酯或聚乙二醇，所述栓剂在常温是固态的，但在直肠腔道中液化和/或溶解以释放药物。
本发明化合物的治疗有效量可由本领域技术人员来确定，并且包括用于哺乳动物的示例性剂量即约0.05-1000mg、1-1000mg、1-50mg、5-250mg、250-1000mg活性化合物/kg体重/日，其可按单一剂量的形式来给药或按各个分份剂量(诸如每天1至4次)的形式来给药。应该理解的是，就任何特定受试者而言的具体剂量水平及给药频率可发生变化且将取决于多种因素，这些因素包括所使用的具体化合物的活性、所述化合物的代谢稳定性及作用持续时间、受试者的物种、年龄、体重、一般健康情况、性别及饮食、给药模式及给药时间、排泄速率、药物组合及具体病症的严重程度。接受治疗的优选受试者包括动物，最优选为哺乳动物物种，诸如人类及家畜(诸如狗、猫、马等)。由此，当术语“患者”在本申请中使用时，该术语旨在包括受Btk酶水平介导所影响的所有受试者，最优选为哺乳动物物种。
在下文所述的一个或多个测定中已测试下文“实施例”章节中所说明的式(I)化合物的实施例。
在一个实施方案中，式(I)化合物抑制Btk酶的IC50值为6nM或更小，例如0.001nM至6nM，如通过人类重组Btk酶测定所测量。优选地，式(I)化合物抑制Btk酶的IC50值为2nM及更小，例如0.001nM至2nM。其他优选化合物抑制Btk酶的IC50值为1.0nM及更小，例如0.001nM至1.0nM。
在一个实施方案中，式(I)化合物减少对Jak2激酶的抑制，其特征在于IC50值高于50nM，例如大于250nM，如通过Jak2酪氨酸激酶测定所测量。优选地，式(I)化合物抑制Jak2酶的IC50值大于400nM，例如IC50值大于700nM。
在一个实施方案中，式(I)化合物具有Btk抑制活性超过Jak2抑制活性的激酶选择性比率，其特征在于Jak2IC50抑制值(如通过Jak2酪氨酸激酶测定所测量)对Btk IC50抑制值(如通过人类重组Btk酶测定所测量)的比率为150及更大，例如比率为300及更大。优选地，式(I)化合物的Jak2IC50抑制值对Btk IC50抑制值的比率为400及更大，例如比率为500及更大。
在一个实施方案中，式(I)化合物在全血BCR刺激的CD69表达测定中具有改善的效能，且IC50值为250nM或更小，例如，0.1nM至250nM。更优选地，式(I)化合物在全血BCR刺激的CD69表达测定中具有效能，且IC50值为160nM或更小，例如，0.1nM至160nM；及IC50值为100nM或更小，例如，0.1nM至100nM。
制备方法
可使用方案1中所显示的方法制备式(I)化合物。
方案1
可使经取代的硼酸酯1(其中Z表示经取代的单环或稠合二环杂环(式(I)化合物中的取代基Q))与经取代的咔唑甲酰胺或四氢咔唑甲酰胺2(其中Y为适当基团，例如Br、Cl或三氟甲烷磺酰基氧基)反应，从而得到化合物3。此反应可通过使用适当碱(例如碳酸钾、碳酸铯或磷酸三钾)及适当催化剂(例如四(三苯基膦)钯、1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(II)或1,1’-二(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(II))在适当溶剂(例如二噁烷或四氢呋喃)中任选利用适当共溶剂(例如水)来实施。所述偶联反应通常称为Suzuki-Miyaura偶联反应，且其在化学文献中熟知(例如参见Heravi,M.M.等人，Tetrahedron,68:9145(2012)及其中引用的参考文献)。
由于方案1中通过标记为a及b的单键所连接的环具有不对称性质，且由于通过空间位阻造成的围绕这些键的旋转受限，故本发明化合物显示出称为阻转异构现象的手性。因此，在某些条件下，例如在手性固定相上进行色谱法，可在色谱法图中观察到四种非对映异构的阻转异构体(由围绕两个立体轴的旋转受限引起)作为四个单独的峰。可将式(I)化合物分离为两种至四种非对映异构的阻转异构体的稳定混合物，或分离为单一稳定的阻转异构体。
由于1为外消旋的，通常将化合物3分离为四种非对映异构的阻转异构体的混合物。可选择地，可使用本领域已知的方法(例如在手性固定相上实施制备型色谱法)将外消旋化合物1转化为具有所示的绝对构型的单一阻转异构体1a及1b。然后，如上文所阐述的Suzuki-Miyaura偶联反应可将1a转化为化合物3a，或将1b转化为3b，其具有围绕键b所示的绝对构型而具有围绕键a的两种构型的混合物，只要Suzuki-Miyaura偶联反应的条件不会使得发生围绕键b的异构化即可。因此，化合物3a及3b将作为两种非对映异构的阻转异构体的混合物存在。
如方案2中所显示，可使用本领域已知的方法(例如在手性固定相上实施色谱法)将作为四种非对映异构的阻转异构体的混合物的化合物3分离为四种单一稳定的非对映异构的阻转异构体3c、3d、3e及3f。可选择地，可将化合物3a(两种非对映异构的阻转异构体的混合物)分离为单一稳定的阻转异构体3c及3d，且同样可将化合物3b(两种非对映异构的阻转异构体的混合物)分离为单一稳定的阻转异构体3e及3f。
方案2
在2为经取代的四氢咔唑甲酰胺(其中虚线表示单键)的情形下，2还含有手性中心，且因此其可作为外消旋物存在。在此情形下，由这些化合物2制得的化合物3将存在作为八种非对映异构体的混合物，3a及3b中的各者将作为四种非对映异构体的混合物存在，且3c、3d、3e及3f中的各者将作为两种非对映异构体的混合物存在。还可使用本领域已知的方法(例如在手性固定相上实施色谱法)将所述混合物中的任一者分离为单一稳定的非对映异构体。可选择地，可使用本领域已知的方法(例如在手性固定相上实施色谱法)将化合物2转化为两种经分离的对映异构体。
在方案1中的偶联中间体1或2中的一者为非外消旋的一些情形下，可在方案1中显示的Suzuki-Miyaura偶联反应期间发生手性诱导。在这些情形下，可获得非等摩尔混合物的非对映异构体混合物；也就是说，产物3可为非对映异构体的混合物，其中具有一种绝对构型的键a的一或多种非对映异构体的存在程度大于具有相反绝对构型的键a的一或多种非对映异构体。
方案3中显示合成某些式(I)化合物的替代方法。经适当取代的4-芳基亚氨基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2(4H)-酮4可在如上文所阐述的Suzuki-Miyaura偶联反应的条件下与2反应，从而得到具有结构5的式(I)化合物。在该反应过程中，存在于4中的4-芳基亚氨基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2(4H)-酮部分重排成存在于反应产物5中的3-芳基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮部分。
方案3
可通过各种方法制备用于制备式(I)化合物的方案1的化合物1。方案4中显示一些所述方法。靛红酸酐6可与经取代的苯胺7(其中Y’为适当基团，例如Br、Cl或三氟甲烷磺酰基氧基)反应，从而产生酰胺8。所述反应可在各种条件下实施，例如通过在适当溶剂中加热实施，或通过在辅助试剂(例如三甲基铝)存在下加热实施。可通过(例如)在适当溶剂中利用光气或三光气进行处理将化合物8转化成经取代的喹唑啉二酮9。任选地，可使用化学文献中熟知的方法(例如参见，Ishiyama,T.等人，Tetrahedron,57:9813(2001)，及其中引用的参考文献)将9转化成相应的硼酸酯10(其为方案1的化合物1的实施方案)。所述方法的实施方案为使9与硼酸酯化试剂(例如4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)或5,5,5’,5’-四甲基-2,2’-二(1,3,2-二氧硼杂环己烷))在适当溶剂中在碱(例如乙酸钾)及适当催化剂(例如1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(II))存在下反应。
可选择地，可使用化学文献中熟知的方法任选将化合物9转化成化合物11(其中Ra为烷基)，例如通过在适当碱(例如碳酸铯)存在下利用烷基化剂(例如碘甲烷或三氘代碘甲烷)进行处理。然后，可使用上文所阐述的相同方法将化合物11转化成相应的硼酸酯12(其为方案1的化合物1的实施例)。还可通过与针对9至11的转化所阐述的方法类似的方法任选将化合物10转化成相应的化合物12。
由于围绕将经取代的苯基环连接至喹唑啉二酮部分的单键的位阻旋转，化合物10及12显示出手性。若期望，可通过(例如)在手性固定相上进行色谱法将这些化合物拆分成分开的对映异构的阻转异构体。然后，可将所分离的对映异构的阻转异构体10任选转化成如上文所阐述的稳定的对映异构的阻转异构体12，从而得到方案1的化合物1a或1b的某些实施例。同样，还可将外消旋喹唑啉二酮12拆分成分开的对映异构的阻转异构体。
方案4
方案5中显示方案4的中间体化合物8的替代合成。可使用熟知的酰胺键形成反应将经取代的2-硝基苯甲酸13转化成化合物14，例如通过将8转化成相应的羧酰氯并与经取代的苯胺7发生反应，或通过使用文献中熟知的方法在适当偶联试剂(例如O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)或1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐(EDC)与1-羟基苯并三唑水合物(HOBT)的混合物)存在下使13与7直接反应。然后，可使用文献中已知的多种方法中的一者还原14的硝基，从而得到方案4的化合物8。
方案5
可使用方案6中所显示的方法制备方案3的化合物4。可使N-取代的靛红酸酐15(其中Ra为烷基)与经取代的苯胺7反应，从而产生酰胺16。所述反应可在如上文所阐述的各种条件下实施，例如通过在适当溶剂中加热实施，或通过在辅助试剂(例如三甲基铝)存在下加热实施。可通过(例如)在适当溶剂中利用光气或三光气进行处理将化合物16转化成经取代的芳基亚氨基苯并噁嗪酮17。然后，可使用与上文针对化合物10或化合物11至化合物12的转化所阐述的方法(参见方案4)类似的方法将化合物17转化成相应的硼酸酯4。
方案6
方案7中显示可用于制备在制备式(I)化合物中使用的某些化合物1的一些其他方法。可在各种化学文献中熟知的方法下使经取代的吡啶基-2-乙酸18或经取代的吡啶基-2-乙酸的盐(例如钠盐)(其为市售的或可通过化学文献中熟知的方法制备)与苯胺7反应，从而得到酰胺19。例如，可在偶联试剂(例如O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)或1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐(EDC)与1-羟基苯并三唑水合物(HOBT)的混合物)存在下实施该反应。可通过在适当溶剂(例如甲苯)中与诸如羰基二咪唑等试剂一起加热将酰胺19转化成相应的经取代的1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮20。可使用先前所阐述的方法(参见方案4)将化合物20转化成相应的硼酸酯21(其为方案1的中间体1的实施例)。可选择地，可使用先前所阐述的方法(参见方案4)将化合物19转化成相应的硼酸酯22，随后通过与诸如羰基二咪唑等试剂一起加热将22转化成21。
方案7
在方案7中，还可利用另一氮杂环(例如噻唑)置换所显示结构中的吡啶基环。在此情形下，相应化合物20及21将代替所显示的1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮部分而含有5H-噻唑并[3,2-c]嘧啶-5,7(6H)-二酮部分。
由于围绕结合经取代的苯基环与经取代的1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮部分的单键的位阻旋转，化合物21显示出手性。若期望，可通过(例如)在手性固定相上进行色谱法将这些外消旋化合物拆分成分开的对映异构的阻转异构体，从而得到方案1的中间体1a及1b的某些实施例。
方案8
可使用方案8中显示的方法按照Cao,J.等人，(Synthetic Commun.,39:205(2009))报导的一般操作制备方案1的化合物1(其中Z表示经取代的嘧啶-1,3-二酮部分)。可通过使对甲氧基苄基胺、丙烯酸甲酯与苯基溴化硒反应制备化合物23。可使此物质与适当芳基异氰酸酯24(其可使用化学文献中熟知的方法由方案4中显示的苯胺7制得)反应，从而得到经取代的二氢嘧啶-1,3-二酮25。利用氧化剂(例如过氧化氢)处理此化合物可得到经取代的嘧啶-1,3-二酮26。可使用化学文献中报导的多种方法移除26的对甲氧基苄基，例如通过利用三氟甲磺酸及三氟乙酸的混合物进行处理(如通过Wu,F.等人，J.Org.Chem.,69:9307(2004)所报导)。可使用(例如)通过Jacobsen,M.F.等人(J.Org.Chem.,71:9183(2006))所阐述的条件使所得嘧啶-1,3-二酮27与芳基硼酸(例如4-氟苯硼酸)反应，从而得到28(其中Ar表示4-氟苯基)。然后，可使用与上文所阐述方法类似的方法将此化合物转化成硼酸酯29，该硼酸酯为方案1的化合物1的实施例。
可使用方案9中显示的操作制备用于制备式(I)化合物的显示于方案1中的化合物2。可使用文献中熟知的方法将经取代的2-氨基苯甲酸30(在文献中已知，或使用文献中已知的操作制得)转化成相应的2-肼基苯甲酸31的盐酸盐，例如通过在盐酸水溶液中用亚硝酸钠进行处理转化成相应重氮盐，随后用二氯化锡(II)进行还原。在具有适当催化剂的适当溶剂中(例如具有盐酸的乙醇，具有对甲苯磺酸或三氟乙酸的甲苯，或乙酸(在该情形下，溶剂还可用作催化剂))使31与3-氧代环己烷羧酸乙酯32(其可由3-羟基苯甲酸乙酯制得；例如参见Hirsch,J.等人，J.Org.Chem.,51:2218(1986))反应，可得到相应的四氢咔唑衍生物33。此反应通常称为费歇尔吲哚合成(Fischer indole synthesis)，且其在化学文献中为人熟知(例如，参见Kamata,J.等人，Chem.Pharm.Bull.,52:1071(2004))。可选择地，可在两个连续步骤中实施费歇尔吲哚合成：可使31与32在适当条件(例如在适当溶剂(例如乙醇或甲苯)中，其任选具有适当催化剂(例如对甲苯磺酸))下反应，从而形成中间体腙，可对该中间体实施分离，且然后使其在适当条件(例如，具有盐酸的乙醇，具有氯化锌的乙酸，或具有三氟乙酸的甲苯)下发生进一步反应，从而得到33。
方案9
可使用化学文献中熟知的方法将羧酸33转化成相应甲酰胺34，例如通过用草酰氯或亚硫酰氯处理、随后用氨处理；或通过在偶联试剂(例如碳二亚胺，或N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐与1-羟基苯并三唑或1-羟基-7-氮杂苯并三唑的混合物)存在下利用氨处理33，将33转化成酰氯。可使用化学文献中熟知的方法实施四氢咔唑34至相应的咔唑35的转化，例如通过在适当溶剂中用氧化剂(例如2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌)处理34来实施。
可选择地，可颠倒酰胺形成及氧化步骤的顺序以将33转化成35。因此，可使用上文所阐述操作或类似操作氧化化合物33，从而得到相应化合物36。然后，可再次使用上文所阐述的操作或类似操作将此化合物的羧酸转化成相应的伯酰胺，从而得到相应化合物35。
可使用化学文献中熟知的方法实施35至相应的叔甲醇取代的咔唑甲酰胺37(其为方案1中的化合物2的实施例)的转化，例如通过用诸如甲基锂、甲基溴化镁或甲基氯化镁等试剂处理35。可选择地，可使用类似操作实施34至相应的叔甲醇取代的四氢咔唑甲酰胺38(其为方案1中的化合物2的另一实施例)的转化。
化合物33、34及38含有手性中心，且因此其作为两种对映异构体存在。制备如方案9中所显示的33、34及38得到外消旋产物，所述产物可用于制备如方案1中所显示的式(I)化合物。可选择地，可使用熟知的方法(例如在手性固定相上实施色谱法)将33、34及38拆分成经分离的对映异构体。
还可使用方案10中所显示的操作制备用于制备式(I)化合物的方案1的某些化合物2。可用适当卤化试剂处理化合物39(由如方案9中所显示的适当2-肼基苯甲酸制得(参见美国专利8,084,620，中间体48-1))，从而得到40，其中R1为卤素原子。例如，利用氯化试剂(例如N-氯琥珀酰亚胺)处理39可得到其中R1为Cl的40，且用氟化试剂(例如1-(氯甲基)-4-氟-1,4-重氮化二环[2.2.2]辛烷-二(四氟硼酸酯))处理39可得到其中R1为F的40。然后，利用如针对方案9所阐述的甲基锂或甲基卤化镁处理40可得到其中R1为F或Cl的化合物37(其为方案1中的化合物2的实施例)。
方案10
可通过方案10中还显示的替代操作制备其中R1为CN的化合物37。处理化合物41(其可由化合物39制得(参见美国专利8,084,620，实施例73-2))可用碘化试剂(例如N-碘琥珀酰亚胺)，从而得到其中R1为I的37。可将此化合物转化成其中R1为CN的37(方案1中的化合物2的实施例)，例如通过在催化剂(例如四(三苯基膦)钯)存在下用氰化锌处理。
方案11中显示制备方案1的化合物2的另一实施例。使用方案9中所阐述的操作及类似操作，可使酮42(其可使用文献中所报导的多种方法使丙二酸二乙酯与环己-2-烯酮反应制得)与肼基苯甲酸31反应，从而得到化合物43，然后，可使用上文针对方案9所阐述的方法将43转化成化合物44且随后转化成化合物45。使用文献中已知的方法，例如在适当溶剂(例如二甲基亚砜)中与氯化钠及水一起加热，可将化合物45转化成化合物46。然后，可使用文献中已知的操作通过(例如)用硼氢化锂处理来将化合物46的酯部分还原成甲醇，从而得到化合物47，其为方案1的化合物2的实施例。
方案11
实施例
可使用以下实施例中所显示的操作及相关操作制备本发明化合物及用于制备本发明化合物的中间体。这些实施例中所用的方法及条件以及这些实施例中制得的实际化合物并非意欲限制，而意欲说明可如何制备本发明化合物。这些实施例中所使用的起始物质及试剂在非通过本文阐述的操作制备时通常为市售的，或在化学文献中报导，或可通过使用化学文献中所阐述的操作制备。以下实施例进一步定义本发明。应了解，所述实施例仅以阐释方式给出。根据上述论述及实施例，本领域技术人员可确定本发明的基本特征，且可在不背离其精神及范围下作各种改变及修改以使本发明适用于各种用途及条件。因此，本发明不限于下文所述的阐释性实施例，而由随附权利要求限定。
在所给出的实施例中，短语“干燥并浓缩”通常是指用硫酸钠或硫酸镁干燥于有机溶剂中的溶液，然后过滤并从滤液中除去溶剂(通常在减压和在适于所制备物质的稳定性的温度的条件下)。
通常如下实施柱色谱法：使用快速色谱法技术(Still,W.C.等人，J.Org.Chem.,43:2923(1978))，或用预填充的硅胶柱使用Isco中压色谱装置(Teledyne Corporation)，用所指示溶剂或溶剂混合物洗脱。如下实施制备型高效液相色谱法(HPLC)：使用适于所分离物质量的尺寸的反相柱(Waters SunFire C18,Waters XBridge C18,Axia C18,YMC S5 ODS等)，通常用渐增浓度的甲醇或乙腈于水(还含有0.05％或0.1％三氟乙酸或10mM乙酸铵)中的梯度，以适于柱尺寸及待实施的分离的洗脱速率进行洗脱。使用针对单独的情形阐述的条件实施对映异构体或阻转异构体的手性超临界流体色谱法分离。通过液相色谱-质谱使用电喷雾离子化获得质谱数据。
在Bruker-AXS APEX2 CCD系统上使用Cu Kα辐射收集单晶x射线衍射数据。利用APEX2软件包/程序套件(参见APEX2用户手册,v1.27；Bruker AXS公司,WI53711 USA)进行指标化及处理所测量的强度数据。当指示时，在数据收集期间在OxfordCryosystems冷冻系统冷却器(Cosier,J.等人，J.Appl.Cryst.,19:105(1986))的冷流中冷却晶体。通过直接方法解析结构且基于观察到的反射使用结晶学包SHELXTL(参见APEX2用户手册,v1.27；Bruker AXS公司,WI 53711 USA)进行精修。经由全矩阵最小二乘法来精修衍生的原子参数(坐标及温度因子)。在精修中最小化的函数为Σw(|Fo|-|Fc|)2。R定义为Σ||Fo|-|Fc||/Σ|Fo|，而Rw＝[Σw(|Fo|-|Fc|)2/Σw|Fo|2]1/2，其中w为基于所观察强度中的误差的适当加权函数。在所有精修阶段检验差异图。将氢引入具有等向性温度因子的理想位置中，但氢参数未发生变化。根据Stout等人，X-Ray Structure Determination:APractical Guide,MacMillan(1968)中所阐述的操作获得晶胞参数。
使用Ultra第9.0.5版(CambridgeSoft)确定化学名称。使用以下缩写：
缩写
CDI 羰基二咪唑
DCM 二氯甲烷
DIEA 二异丙基乙胺
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
dppf 1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁
DSC 差示扫描量热
DTT 二硫苏糖醇
EDC 1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐
EDTA 乙二胺四乙酸盐
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
g 克
h 小时
HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
HOBT 1-羟基苯并三唑水合物
HPLC 高效液相色谱
IPA 异丙醇
MeCN 乙腈
MeOH 甲醇
min 分钟
mmol 毫摩尔
NBS N-溴琥珀酰亚胺
NCS N-氯琥珀酰亚胺
NMP N-甲基吡咯烷酮
t-butyl 叔丁基
TEA 三乙胺
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
中间体1
3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体1A：2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-氟苯甲酰胺
方法1：将8-氟-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(2.00g,11.04mmol)及3-溴-2-甲基苯胺(4.11g,22.08mmol)于二噁烷(20mL)中的溶液在密封反应容器中在110℃加热4天。用10％K2CO3水溶液处理冷却的混合物并在室温搅拌30min。用DCM将混合物萃取3次，并用水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩。用乙醚研磨残余物，从而得到灰色固体(2.50g)。浓缩母液并用乙醚再次研磨残余物，从而得到灰色固体(230mg)。合并两种固体，从而得到灰色固体状2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-氟苯甲酰胺(2.73g,78％产率)。质谱m/z323,325(M+H)+。
方法2.用3-溴-2-甲基苯胺(3.08g,16.6mmol)处理8-氟-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(3.00g,16.6mmol)于二甲苯(50mL)中的混悬液并加热至回流。6h后，使混合物冷却至室温过夜。用己烷稀释所得混悬液并通过过滤收集沉淀物，用己烷淋洗并进行风干，从而得到白色固体状2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-氟苯甲酰胺(4.50g,84％产率)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.69(d,J＝7.9Hz,1H),7.65(br.s.,1H),7.50-7.46(m,1H),7.32(d,J＝8.1Hz,1H),7.19-7.11(m,2H),6.73-6.64(m,1H),5.69(br.s.,2H),2.44(s,3H)。
中间体1：
在室温用碳酸二(三氯甲基)酯(三光气)(6.28g,21.2mmol)处理2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-氟苯甲酰胺(5.70g,17.6mmol)于THF(100mL)中的溶液并搅拌15min。用EtOAc稀释混合物，用饱和NaHCO3水溶液小心处理并在室温搅拌直至气体排放停止为止。依次用饱和NaHCO3水溶液、水及盐水洗涤经分离有机相，并干燥并浓缩。用乙醚研磨残余物，从而得到灰白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(6.00g,97％产率)。质谱m/z 349,351(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.59(d,J＝17.6Hz,1H),7.99(d,J＝8.1Hz,1H),7.70(dd,J＝7.8,1.2Hz,1H),7.54-7.43(m,1H),7.28-7.21(m,2H),7.21-7.17(m,1H),2.28(s,3H)。
中间体2
8-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体2A：3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
用Cs2CO3(13.4g,41.2mmol)处理3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体1](4.80g,13.8mmol)于DMF(25mL)中的溶液。在室温搅拌混悬液并用碘甲烷(4.30mL,68.7mmol)进行逐滴处理(但迅速)并在室温快速搅拌1h。用EtOAc及水(200mL)稀释混合物。分离有机相并依次用水及盐水洗涤，然后进行干燥并浓缩，从而得到浅棕色玻璃状泡沫状3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(4.80g,96％产率)。质谱m/z 363,365(M+H)+。
中间体2：
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(4.80g,13.2mmol)、4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(4.36g,17.2mmol)、乙酸钾(3.89g,39.6mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(0.540g,0.661mmol)于二噁烷(65mL)中的混合物加热至回流并保持2h。在冷却至室温后，经过滤混合物并用EtOAc淋洗固体。用EtOAc稀释滤液，用水洗涤，并干燥并浓缩。使残余物在硅胶(80g)上进行柱色谱法纯化(用EtOAc-己烷(20％至50％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状8-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(4.61g,85％产率)。质谱m/z 411(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.14-8.08(m,1H),7.93(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.48(ddd,J＝14.0,8.0,1.5Hz,1H),7.34(t,J＝7.6Hz,1H),7.27-7.20(m,2H),3.88(d,J＝7.9Hz,3H),2.36(s,3H),1.36(s,12H)。
中间体3
4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体3A：5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-羧酸乙酯
将5-溴-8-氨甲酰基-9H-咔唑-2-羧酸乙酯[根据美国专利8,084,620中所阐述的操作合成，中间体48-1](0.100g,0.277mmol)及NCS(由甲苯重结晶；0.037g,0.277mmol)于CCl4(10mL)及DMF(2mL)中的混合物在室温搅拌112h。过滤混合物，并用CCl4洗涤所收集的沉淀物并在真空下干燥过夜。通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用己烷然后用EtOAc-己烷(30％，然后50％)洗脱)，从而得到绒毛状白色固体状5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(0.071g,65％产率)。质谱m/z 395,397,(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.13(s,1H),8.77(d,J＝8.6Hz,1H),8.53(d,J＝1.1Hz,1H),8.36(br.s.,1H),8.29(s,1H),7.89(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.74(br.s.,1H),4.38(q,J＝7.0Hz,2H),1.38(t,J＝7.0Hz,3H)。
中间体3A的替代制备：
向5-溴-8-氨甲酰基-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(90g,249mmol)、CCl4(2900mL)及NMP(600mL)的混合物中添加NCS(36.1g,271mmol)。将反应混合物在45℃搅拌2h。在冷却至室温后，通过真空过滤收集固体。将固体在甲醇(1L)中在60℃搅拌2h，然后冷却至室温。收集固体并干燥，从而得到5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(69.5g,167mmol,67％产率)(95％纯度)。
减压浓缩滤液除去CCl4。然后，向NMP残余物中添加水(2L)。收集所得沉淀物并干燥，从而得到另外13.7g产物(25％产率,75％纯度)。
中间体3：
经30min用于己烷中的1.6M甲基锂(45.8mL,73.2mmol)逐份处理于干冰-丙酮浴中冷却的5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(4.14g,10.5mmol)于THF(200mL)中的溶液。将混合物在-78℃搅拌60min，然后用饱和NH4Cl水溶液进行逐份处理。添加水并用EtOAc将混合物萃取2次。用水将合并的有机相洗涤两次。合并所有水相并用DCM萃取，并用水洗涤此有机相。合并所有有机相，干燥并浓缩。使残余物由EtOAc结晶，从而得到固体。通过在硅胶(330g)色谱法上纯化由母液浓缩的残余物(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱)，从而得到额外固体。合并两批固体，从而得到浅黄色固体状4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(3.13g,78％产率)。质谱m/z363,365,(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),8.56(d,J＝8.6Hz,1H),8.29(br.s.,1H),8.17(s,1H),7.97(d,J＝1.3Hz,1H),7.66(br.s.,1H),7.42(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),1.52(s,6H)。
中间体3的替代制备：
将5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(58.56g,148mmol)于THF(700mL)中的混悬液在丙酮-干冰浴中在氮下冷却至-15℃。用于THF中的3M甲基氯化镁(395mL,1.19mol)以内部温度保持介于-15℃与-10℃之间的速率逐滴处理混合物。5h后，将混合物倾倒至3个容器中，各容器含有约1.5L碎冰及500mL饱和NH4Cl水溶液。用EtOAc萃取所得混合物，并干燥合并的有机相并浓缩。将残余物与来自两个其他批次的物质合并，一个批次始于146mmol 5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-羧酸乙酯且另一批次始于142mmol 5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-羧酸乙酯，并将其在丙酮(250mL)中搅拌1h。通过过滤收集沉淀物，用己烷洗涤并干燥，从而得到固体状4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(134.56g)。浓缩滤液并将残余物在丙酮中再搅拌1h，从而形成沉淀物，通过过滤收集该沉淀物，用己烷洗涤并干燥，从而得到额外固体状4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(7.36g)，总共141.92g(88％产率)。将来自第二次过滤的滤液与来自其他批次的不纯物质合并，并使其在硅胶(2×1.5kg)上进行柱色谱法纯化(用EtOAc-己烷(40％至100％的梯度)洗脱)，从而得到额外产物。
中间体4
1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体4A：2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)苯甲酰胺
方法1.将2-氨基苯甲酸(5.00g,36.5mmol)及亚硫酰氯(8.68g,72.9mmol)于甲苯(50mL)中的溶液回流加热60min。在真空中浓缩混合物，并将残余物悬浮于THF(50mL)中，在冰水浴中冷却并用3-溴-2-甲基苯胺(20.35g,109mmol)处理。将所得混悬液回流加热2h。用10％K2CO3水溶液(50mL)处理冷却的混合物，剧烈搅拌15min，并用EtOAc萃取。干燥有机相并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物，从而得到浅黄色固体状2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)苯甲酰胺(4.70g,42％产率)。质谱m/z 305,307(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.72(d,J＝7.9Hz,1H),7.67(br.s.,1H),7.54(dd,J＝8.3,1.2Hz,1H),7.48(dd,J＝7.9,0.9Hz,1H),7.36-7.31(m,1H),7.15(t,J＝8.0Hz,1H),6.81-6.73(m,2H),5.59(br.s.,2H),2.45(s,3H)。
方法2.将1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(5.00g,30.7mmol)及3-溴-2-甲基苯胺(5.70g,30.7mmol)于二甲苯(50mL)中的混悬液回流加热8h。通过蒸馏除去溶剂并通过柱色谱法在硅胶(120g)上纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至50％的梯度)洗脱)，从而得到灰白色固体状2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)苯甲酰胺(2.30g,24％产率)。
方法3.用3-溴-2-甲基苯胺(13.69g,73.6mmol)处理1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(10.00g,61.3mmol)于DMF(150mL)中的混悬液并加热至回流过夜。用水稀释冷却的混合物并用EtOAc萃取。过滤整个混合物，除去灰色固体并分离滤液的各层。用水洗涤有机相，干燥并浓缩。通过在硅胶(330g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至50％的梯度)洗脱)，从而得到浅棕色固体状2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)苯甲酰胺(1.1g,6％产率)。来自柱的第二洗脱液得到浅棕色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体4B](3.4g,17％产率)。
中间体4B：3-(3-溴-2-甲基苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
用碳酸二(三氯甲基)酯[三光气](2.92g,9.83mmol)处理2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)苯甲酰胺(2.00g,6.55mmol)于THF(50mL)中的溶液并回流加热60min。用饱和NaHCO3水溶液处理冷却的混合物，用EtOAc萃取，并用饱和NaHCO3、然后用水将合并的有机相洗涤两次，干燥并浓缩。用DCM研磨残余物，从而得到白色固体，其通过过滤收集。用DCM研磨来自浓缩滤液的残余物，从而得到额外白色固体，其通过过滤收集。合并两种固体，从而得到白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(2.10g,97％产率)。质谱m/z331,333(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.07(dd,J＝7.92,1.32Hz,1H),7.65-7.75(m,2H),7.21-7.32(m,4H),2.20(s,3H)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.38(br.s.,1H),8.19(dd,J＝7.9,1.1Hz,1H),7.76-7.69(m,1H),7.69-7.60(m,1H),7.35-7.17(m,3H),7.04-6.97(m,1H),2.28(s,3H)。
中间体4C：3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
用碘甲烷(5.22mL,83mmol)逐份处理于冰水浴中冷却的3-(3-溴-2-甲基苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(23.02g,69.5mmol)及Cs2CO3(34.0g,104mmol)于DMF(70mL)中的混悬液。使混合物温热至室温并搅拌30min。过滤混合物并浓缩滤液。将残余物分配于EtOAc与水之间。通过过滤收集所形成的沉淀物。用水洗涤所收集固体并在真空下干燥过夜，从而得到白色固体。分离滤液的有机相，用10％LiCl水溶液洗涤3次，然后用水洗涤两次，干燥并浓缩，从而得到额外固体。合并两种固体，从而得到白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(15.56g,92％产率)。质谱m/z345,347(M+H)+。
中间体4：
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(36.39g,105mmol)、4,4,4,4”,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(40.2g,158mmol)、PdCl2(dppf)DCM加合物(4.30g,5.27mmol)及乙酸钾(31.0g,316mmol)于二噁烷(500mL)及DMSO(50mL)中的混合物回流加热24h。添加额外PdCl2(dppf)DCM加合物(1.47g)并将混合物再回流加热6h。经过滤冷却的混合物，并浓缩滤液。用EtOAc稀释残余物，用水振摇，且经过滤两个相，除去黑色沉淀物。分离滤液的有机相，依次用水及盐水洗涤，干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法(两个330g柱)纯化残余物(用EtOAc-己烷(20％至100％的梯度)洗脱)。用EtOAc研磨所得固体，从而得到固体，其通过过滤收集。浓缩滤液并由EtOAc结晶，从而得到额外固体。浓缩来自此结晶的母液并通过在硅胶(330g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(20％至50％的梯度)洗脱)，从而得到额外固体。合并三批固体，从而得到白色固体状1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(21.2g,51％产率)。质谱m/z 393(M+H)+。1H NMR(400MHz,)δ8.35(d,J＝7.9Hz,1H),7.64(ddd,J＝8.5,7.3,1.5Hz,1H),7.59(dd,J＝7.4,1.4Hz,1H),7.33-7.27(m,1H),7.24-7.17(m,1H),7.12(d,J＝8.1Hz,2H),3.55(s,3H),1.59(s,3H),1.39(s,12H)。
中间体5
8-氯-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体5A：2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-氯苯甲酰胺
将8-氯-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(4.00g,20.3mmol)及3-溴-2-甲基苯胺(5.65g,30.4mmol)于二甲苯(20mL)中的混悬液回流加热2.5h。冷却混合物形成黄色沉淀物。用己烷稀释混合物，并通过过滤收集沉淀物，用己烷洗涤并干燥，从而得到黄色固体状2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-氯苯甲酰胺(6.28g,91％产率)。质谱m/z 339,341(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.68(d,J＝8.1Hz,1H),7.61(br.s.,1H),7.52-7.43(m,3H),7.15(t,J＝8.0Hz,1H),6.70(t,J＝7.8Hz,1H),6.12(br.s.,2H),2.44(s,3H)。
中间体5B：3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氯喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
用碳酸二(三氯甲基)酯(1.02g,3.45mmol)处理2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-氯苯甲酰胺(780mg,2.30mmol)于THF(20mL)中的溶液并将该溶液在室温搅拌21h。用DCM稀释混合物并依次用饱和NaHCO3水溶液、水及盐水洗涤。干燥有机相并浓缩。通过在硅胶(80g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(25％至50％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氯喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(800mg,95％产率)。质谱m/z365,367(M+H)+。
中间体5C：3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氯-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
用Cs2CO3(3.88g,11.9mmol)及碘甲烷(2.48mL,39.7mmol)处理3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氯喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.45g,3.97mmol)于DMF(15mL)中的溶液并在室温搅拌1.5h。用水及EtOAc与己烷的混合物稀释混合物。用水洗涤有机相，干燥并浓缩。通过在硅胶(80g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(5％至40％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氯-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.3g,81％产率)。质谱m/z 379,391(M+H)+。
中间体5：
用4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(0.915g,3.60mmol)、乙酸钾(0.884g,9.01mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(0.123g,0.150mmol)处理3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氯-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.14g,3.00mmol)于二噁烷(20mL)中的溶液。在压力反应小瓶中密封混合物并在110℃加热4h。用EtOAc稀释冷却的混合物，经过滤，并用水洗涤滤液，干燥并浓缩。通过在硅胶(80g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(20％至50％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状8-氯-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.00g,78％产率)。质谱m/z 427(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.23(dd,J＝7.8,1.7Hz,1H),7.93(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.76(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),7.37-7.31(m,1H),7.27-7.20(m,2H),3.94(s,3H),2.36(s,3H),1.36(s,15H)。
中间体6及7
8-氯-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(I-6)，及
8-氯-1-甲基-3-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(I-7)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离外消旋8-氯-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体5]的样品：柱：RegisR,R(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(60:40)，85mL/min；样品制备：17mg/mL，于MeOH-MeCN(1:1)中。由柱洗脱的第一个峰得到S对映异构体，即8-氯-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体6]。由柱洗脱的第二个峰得到R对映异构体，即8-氯-1-甲基-3-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体7]。各对映异构的阻转异构体的质谱及1H NMR与中间体5相同。
中间体8
8-氯-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氯喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体5B](1.00g,2.74mmol)、4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(0.833g,3.28mmol)、乙酸钾(0.805g,8.21mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(0.112g,0.137mmol)于二噁烷(20mL)中的混合物在90℃加热8h。过滤冷却的混合物，浓缩，并将残余物分配于DCM与水之间。干燥有机相并浓缩，并通过在硅胶(120g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-DCM(0至10％的梯度)洗脱)，从而得到8-氯-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(782mg,58％产率)。质谱m/z 413(M+H)+。
中间体9
1,8-二甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体9A：2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-甲基苯甲酰胺
将亚硫酰氯(3.15g,26.5mmol)及2-氨基-3-甲基苯甲酸(2.00g,13.23mmol)于THF(50mL)中的混合物回流加热2h。浓缩冷却的混合物并将残余物与于THF(50mL)中的3-溴-2-甲基苯胺(4.92g,26.5mmol)合并并回流加热5h。使混合物冷却至室温，用10％K2CO3水溶液处理并在室温搅拌30min。用DCM将所得混合物萃取3次，并用水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩。通过在硅胶(330g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至20％的梯度)洗脱)，从而得到黄色固体状2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-甲基苯甲酰胺(1.71g,40％产率)。质谱m/z 319,321(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.70(d,J＝7.9Hz,1H),7.64(br.s.,1H),7.50-7.40(m,2H),7.24(d,J＝7.3Hz,1H),7.14(t,J＝8.0Hz,1H),6.70(t,J＝7.6Hz,1H),5.67(br.s.,2H),2.44(s,3H),2.23(s,3H)。
中间体9B：3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
将2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-甲基苯甲酰胺(1.71g,5.36mmol)及三光气(2.07g,6.96mmol)于THF(20mL)中的溶液回流加热1h。在冰水浴上冷却混合物并用饱和NaHCO3水溶液处理。继续搅拌直至停止气体排放为止。用DCM将所得混合物萃取3次。用水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩。用乙醚研磨残余物，从而得到白色固体，通过过滤收集。第二次研磨浓缩滤液得到额外固体，通过过滤收集。浓缩来自此操作的滤液并通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱)，从而得到额外固体。合并三批固体，从而得到白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.69g,91％产率)。质谱m/z 345,347(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d):δ8.07(d,J＝7.9Hz,1H),7.70(dd,J＝7.9,1.3Hz,1H),7.54(d,J＝7.3Hz,1H),7.27-7.17(m,3H),2.41(s,3H),2.28(s,3H)。
中间体9C：3-(3-溴-2-甲基苯基)-1,8-二甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
用碘甲烷(0.85mL,13.6mmol)处理3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(470mg,1.36mmol)及Cs2CO3(1.33g,4.08mmol)于DMF(8mL)中的混合物并在室温搅拌1.5h。用EtOAc稀释混合物，依次用水及两份10％LiCl水溶液洗涤。用EtOAc萃取合并的水相。依次用10％LiCl水溶液及水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩，从而得到不纯的白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-1,8-二甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(510mg)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 359,361(M+H)+。
中间体9：
使用与针对中间体2的制备所阐述相同的操作，将3-(3-溴-2-甲基苯基)-1,8-二甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(489mg,1.36mmol)转化成白色固体状1,8-二甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(410mg,74％产率)。质谱m/z 407(M+H)+。
中间体10和11
8-氟-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(I-10)，和
8-氟-1-甲基-3-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(I-11)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离外消旋8-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体2]的样品：柱：(R,R)-1(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，200mL/min,100巴,30℃；样品制备：97.3mg/mL，于MeOH:DCM(1:1)中；注入；4mL。由柱洗脱的第一个峰得到(S)异构体，即白色固体状8-氟-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体10]。质谱m/z 411(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.14-8.08(m,1H),7.93(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.48(ddd,J＝14.0,8.0,1.5Hz,1H),7.34(t,J＝7.6Hz,1H),7.27-7.20(m,2H),3.88(d,J＝7.9Hz,3H),2.36(s,3H),1.36(s,12H)。
由柱洗脱的第二个峰得到(R)异构体，即白色固体状8-氟-1-甲基-3-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体11]。质谱m/z 411(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.13-8.08(m,1H),7.93(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.48(ddd,J＝13.9,8.1,1.5Hz,1H),7.37-7.31(m,1H),7.27-7.20(m,2H),3.88(d,J＝7.9Hz,3H),2.36(s,3H),1.36(s,12H)。
中间体10的替代制备：
用碳酸铯(99g,303mmol)及碘甲烷(12.6mL,202mmol)处理8-氟-3-(2-甲基-3-(S)-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体19](40g,101mmol)于四氢呋喃(400mL)中的溶液。将所得浑浊溶液在室温搅拌过夜。添加水(300mL)并用EtOAc(3×150mL)萃取反应混合物。依次用盐水及水洗涤合并的有机相，并干燥并浓缩。通过由EtOAc重结晶纯化残余物，从而得到白色固体状8-氟-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(38g,92％产率)。
中间体12
3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-甲氧基-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体12A：2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-甲氧基苯甲酰胺
在0℃用于甲苯中的2M三甲基铝(3.24mL,6.47mmol)处理3-溴-2-甲基苯胺(482mg,2.59mmol)及8-甲氧基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(500mg,2.59mmol)于甲苯(20mL)中的混合物。将混合物在室温搅拌10分钟，然后在70℃加热过夜。使混合物冷却至室温，用1N HCl水溶液处理并用EtOAc萃取3次。依次用饱和NaHCO3水溶液及水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩。使残余物在硅胶(40g)上进行柱色谱法纯化(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-甲氧基苯甲酰胺(302mg,35％产率)。质谱m/z 335,337(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.72(d,J＝7.3Hz,2H),7.46(dd,J＝8.0,0.8Hz,1H),7.17-7.10(m,2H),6.90(dd,J＝7.9,0.9Hz,1H),6.72-6.66(m,1H),5.88(br.s.,2H),3.92(s,3H),2.43(s,3H)。
中间体12B：3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-甲氧基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
将2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3-甲氧基苯甲酰胺(302mg,0.901mmol)及三光气(321mg,1.081mmol)于THF(20mL)中的溶液在室温搅拌2h。用饱和NaHCO3水溶液小心处理混合物并搅拌直至停止气体排放为止。用DCM将混合物萃取两次，并用水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩，从而得到3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-甲氧基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(339mg)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 361,363(M+H)+。
中间体12C：3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-甲氧基-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-甲氧基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(535mg,1.48mmol)、碘甲烷(0.185mL,2.96mmol)及Cs2CO3(965mg,2.96mmol)于THF(20mL)中的混合物在室温搅拌过夜。过滤混合物并浓缩。将残余物溶解于DCM中，依次用饱和NaHCO3水溶液及水洗涤，干燥并浓缩。通过在硅胶(40g硅胶)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱)，从而得到3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-甲氧基-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(442mg)。质谱m/z 375,377(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.90(dd,J＝7.2,2.3Hz,1H),7.66(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.31-7.22(m,2H),7.22-7.19(m,1H),7.17-7.13(m,1H),3.97(s,3H),3.89(s,3H),2.23(s,3H)。
中间体12
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-甲氧基-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(380mg,1.01mmol)、4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(309mg,1.22mmol)、乙酸钾(298mg,3.04mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(41.4mg,0.051mmol)于二噁烷(20mL)中的混合物在90℃加热过夜。过滤冷却的混合物并浓缩滤液。通过在硅胶(24g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(20％至55％的梯度)洗脱)，从而得到8-甲氧基-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(纯度为75％)，其未经进一步纯化即使用(486mg,85％产率)。质谱m/z 423(M+H)+。
中间体13
3-(3-溴-2-甲基苯基)-6-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体13A：2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-5-氟苯甲酰胺
在冰水浴上冷却3-溴-2-甲基苯胺(1.50g,8.06mmol)及6-氟-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(1.46g,8.06mmol)于甲苯(40mL)中的混合物并用于甲苯中的2M三甲基铝(10.1mL,20.2mmol)进行逐份处理。将混合物在室温搅拌30min，然后在70℃加热过夜。使混合物冷却至0℃，用1M HCl水溶液小心处理，并用EtOAc萃取3次。依次用饱和NaHCO3水溶液及水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩。使残余物在硅胶(120g)上进行柱色谱法纯化(用EtOAc-己烷(5％至40％的梯度)洗脱)，从而得到2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-5-氟苯甲酰胺(0.893g,87％纯度,30％产率)。质谱m/z 323,325(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ7.54(1H,dd,J＝8.03,0.99Hz),7.48(1H,dd,J＝9.68,3.08Hz),7.33(1H,d,J＝7.26Hz),7.16(1H,t,J＝7.92Hz),7.04-7.12(1H,m),6.83(1H,dd,J＝9.02,4.62Hz),2.39(3H,s)。
中间体13B：3-(3-溴-2-甲基苯基)-6-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
将2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-5-氟苯甲酰胺(0.893g,2.76mmol)及三光气(0.984g,3.32mmol)于THF(30mL)中的溶液在室温搅拌2h，用饱和NaHCO3水溶液小心处理混合物并搅拌直至停止气体排放为止。用DCM将混合物萃取两次。用水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩。用DCM研磨残余物，从而得到白色固体，通过过滤进行分离。浓缩滤液并使其在硅胶(40g)上进行柱色谱法纯化(用EtOAc-己烷(0至80％的梯度)洗脱)，从而得到额外固体。合并两种固体，从而得到白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-6-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(845mg,87％产率)。质谱m/z 349,351(M+H)+。
中间体13C：3-(3-溴-2-甲基苯基)-6-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-6-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(742mg,2.13mmol)、碘甲烷(0.159mL,2.55mmol)及Cs2CO3(1.039g,3.19mmol)于THF(20mL)中的混合物在室温搅拌过夜。过滤混合物并浓缩。将残余物溶解于DCM中并依次用饱和NaHCO3水溶液及水洗涤，干燥并浓缩，从而得到3-(3-溴-2-甲基苯基)-6-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(742mg,96％产率)。质谱m/z363,365(M+H)+。
中间体13：
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-6-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(742mg,2.04mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(623mg,2.45mmol)、乙酸钾(602mg,6.13mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(83mg,0.102mmol)于二噁烷(20mL)中的混合物在90℃加热过夜。过滤冷却的混合物并浓缩滤液。通过在硅胶(120g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至40％的梯度)洗脱)，从而得到6-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(866mg)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 411(M+H)+。
中间体14
7-甲氧基-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体14A：2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-4-甲氧基苯甲酰胺
在0℃用于甲苯中的2M三甲基铝(3.24mL,6.48mmol)处理3-溴-2-甲基苯胺(482mg,2.59mmol)、7-甲氧基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(500mg,2.59mmol)于甲苯(20mL)中的混合物。将混合物在室温搅拌10min，然后在70℃加热过夜。用1M HCl水溶液处理冷却的混合物，用EtOAc萃取3次，并依次用饱和NaHCO3水溶液及水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩。通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱)，从而得到2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-4-甲氧基苯甲酰胺与3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-甲氧基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的4:1混合物(592mg)。质谱m/z 335,337(M+H)+。
中间体14B：3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-甲氧基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
将2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-4-甲氧基苯甲酰胺(596mg,1.78mmol)及三光气(633mg,2.13mmol)于THF(30mL)中的溶液在室温搅拌2h。用饱和NaHCO3水溶液处理混合物并搅拌直至停止气体排放为止。用DCM将所得混合物萃取两次，并用水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩。通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-甲氧基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(440mg,68％产率)。质谱m/z 361,363(M+H)+。
中间体14C：3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-甲氧基-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
在室温用碘甲烷(303mg,2.13mmol)及Cs2CO3(869mg,2.67mmol)处理3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-甲氧基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(440mg,1.22mmol)于THF(30mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌过夜，然后过滤并浓缩。将残余物溶解于DCM中并依次用饱和NaHCO3水溶液及水洗涤，干燥并浓缩，从而得到3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-甲氧基-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(502mg)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 375,377(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.21(d,J＝8.8Hz,1H),7.67(dd,J＝7.9,1.3Hz,1H),7.24-7.18(m,1H),7.17-7.13(m,1H),6.88(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),6.72(d,J＝2.2Hz,1H),3.99(s,3H),3.64(s,3H),2.24(s,3H)。
中间体14：
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-甲氧基-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(390mg,1.04mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(317mg,1.25mmol)、乙酸钾(306mg,3.12mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(42.4mg,0.052mmol)于二噁烷(20mL)中的混合物在90℃加热过夜。过滤冷却的混合物并浓缩。通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(10％至55％的梯度)洗脱)，从而得到7-甲氧基-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(504mg,76％纯度,87％产率)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 423(M+H)+。
中间体15
7-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体15A：2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-4-氟苯甲酰胺
将7-氟-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(5.00g,27.6mmol)及3-溴-2-甲基苯胺(5.14g,27.6mmol)于二甲苯(50mL)中的混合物回流加热8h。过滤冷却的混合物。用DCM将所收集固体洗涤3次并浓缩合并的滤液。通过在硅胶(330g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至45％的梯度)洗脱)，从而得到2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-4-氟苯甲酰胺(3.65g,41％产率)。质谱m/z323,325(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.65(1H,d,J＝8.14Hz),7.45-7.57(3H,m),7.14(1H,t,J＝8.03Hz),6.39-6.50(2H,m),5.80(2H,br.s.),2.43(3H,s)。
中间体15B：3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
在室温用三光气(3.69g,12.4mmol)处理2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-4-氟苯甲酰胺(3.65g,11.3mmol)于THF(50mL)中的溶液。将溶液在室温搅拌2h，然后用饱和NaHCO3水溶液缓慢处理并搅拌直至不再观察到气体排放为止。用EtOAc将所得混合物萃取两次。用水、然后用盐水将合并的有机相洗涤两次，干燥并浓缩，从而得到3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(4.20g)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 349,351(M+H)+。
中间体15C：3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(2.70g,7.73mmol)、碘甲烷(0.580mL,9.28mmol)及Cs2CO3(3.78g,11.6mmol)于THF(20mL)中的混合物在室温搅拌3h。过滤混合物并用DCM稀释滤液并用水洗涤。用DCM萃取水相，并干燥合并的有机相并浓缩，从而得到3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(2.85g)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 363,365(M+H)+,385,387(M+Na)+。
中间体15：
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(2.81g,7.74mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(2.36g,9.28mmol)、乙酸钾(1.52g,15.5mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(0.190g,0.232mmol)于二噁烷(20mL)中的混合物在90℃加热8h。添加额外PdCl2(dppf)DCM加合物(0.190g,0.232mmol)及乙酸钾(0.80g)并将混合物在90℃再加热7h。用EtOAc稀释冷却的混合物并依次用饱和NaHCO3水溶液及水洗涤。用EtOAc萃取合并的水相。经过滤合并的有机相并浓缩。通过在硅胶(220g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至40％的梯度)洗脱)，从而得到7-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.76g,56％产率)。质谱m/z 411(M+H)+。
中间体16
6,8-二氟-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体16A：N-(3-溴-2-甲基苯基)-3,5-二氟-2-硝基苯甲酰胺
用草酰氯(0.337mL,3.86mmol)然后用DMF(3滴)处理3,5-二氟-2-硝基苯甲酸(522mg,2.57mmol)于DCM(10mL)中的溶液。将所得溶液在室温搅拌60min。浓缩混合物并由无水DCM将残余物再浓缩两次。将残余物溶解于DCM(10mL)中并用3-溴-2-甲基苯胺(478mg,2.57mmol)逐滴处理，随后逐滴添加TEA(0.537mL,3.86mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。用饱和NaHCO3水溶液处理混合物，从而形成白色沉淀物。分离有机相，并用DCM将水相及白色固体萃取两次，然后过滤。用水洗涤所收集固体并干燥。干燥合并的有机相并浓缩，并用DCM研磨残余物，从而得到额外固体。将两批固体与DCM及MeOH合并并浓缩，从而得到N-(3-溴-2-甲基苯基)-3,5-二氟-2-硝基苯甲酰胺(821mg,86％产率)。质谱m/z 371,373(M+H)+393,395(M+Na)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.65(s,1H),7.98-7.90(m,1H),7.81(d,J＝8.1Hz,1H),7.55(d,J＝7.9Hz,1H),7.40(d,J＝7.7Hz,1H),7.21(t,J＝7.9Hz,1H),2.32(s,3H)。
中间体16B：2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3,5-二氟苯甲酰胺
将N-(3-溴-2-甲基苯基)-3,5-二氟-2-硝基苯甲酰胺(821mg,2.21mmol)、NH4Cl(1.18g,22.1mmol)及锌(1.45g,22.1mmol)于MeOH(10mL)中的混合物在室温搅拌60min。过滤混合物并浓缩滤液。将残余物悬浮于DCM中并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。使有机相(具有不溶性沉淀物)与水相分离并浓缩，从而得到2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3,5-二氟苯甲酰胺(760mg)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 341,343(M+H)+,363,365(M+Na)+。
中间体16C：3-(3-溴-2-甲基苯基)-6,8-二氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
用三光气(722mg,2.43mmol)逐份处理2-氨基-N-(3-溴-2-甲基苯基)-3,5-二氟苯甲酰胺(760mg,2.23mmol)于THF(10mL)中的溶液。将溶液在室温搅拌60min，然后用饱和NaHCO3水溶液逐滴处理并搅拌直至不再观察到气体排放为止。分离有机相，用水洗涤，干燥并浓缩。通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱)，从而得到3-(3-溴-2-甲基苯基)-6,8-二氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(820mg)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 367,369(M+H)+,389,391(M+Na)+。
中间体16：
将3-(3-溴-2-甲基苯基)-6,8-二氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.43g,3.89mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(1.29g,5.06mmol)、乙酸钾(0.956g,9.74mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(0.159g,0.195mmol)于二噁烷(20mL)中的混合物在100℃加热5h。过滤冷却的混合物并浓缩滤液。通过在硅胶(40g+12g填料柱)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱)，从而得到6,8-二氟-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.20g,74％产率)。质谱m/z 415(M+H)+。
中间体17
8-氟-3-(RS)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
用氮气对3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体1](0.349g,1.00mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(0.305g,1.20mmol)、PdCl2(dppf)DCM加合物(0.041g,0.050mmol)及乙酸钾(0.245g,2.50mmol)于二噁烷(20mL)及DMSO(4mL)中的搅拌混合物鼓泡5min，然后在90℃加热过夜。将冷却的混合物分配于EtOAc与水之间。依次用饱和NaHCO3水溶液、水及盐水洗涤有机相，并干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(20:80)洗脱)，从而得到白色固体状8-氟-3-(RS)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(0.326g,82％产率)。质谱m/z 397(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),7.80(d,J＝7.2Hz,1H),7.72(dd,J＝7.4,1.5Hz,1H),7.71-7.56(m,1H),7.45-7.35(m,1H),7.35-7.29(m,1H),7.29-7.16(m,1H),2.22(s,3H),1.33(s,12H)。
中间体18和19
8-氟-3-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(18)，和
8-氟-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(19)
通过如下的超临界流体色谱法分离8-氟-3-(RS)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体17]的样品：柱：OD-H(5×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，300mL/min,100巴,40℃；样品制备：103mg/mL，于DCM-MeOH(44:56)中；注入：5.0mL。由柱洗脱的第一个峰得到R对映异构体，即白色固体状8-氟-3-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体18]。由柱洗脱的第二个峰得到S对映异构体，即白色固体状8-氟-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体19]。各对映异构的阻转异构体的质谱及1H NMR与中间体17相同。
中间体20
8-氟-1-甲基(d3)-3-(RS)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体20A：3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟-1-甲基(d3)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
用碘甲烷-d3(0.80mL,12.9mmol)处理3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体1](3.00g,8.59mmol)及Cs2CO3(5.60g,17.2mmol)于DMF(45mL)中的混合物，并将混合物在室温搅拌1.75h。将混合物倾倒至快速搅拌的水(400mL)中并在室温搅拌，从而形成悬浮固体。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并在真空下干燥，从而得到灰白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟-1-甲基(d3)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(3.05g,97％产率)。质谱m/z366,368(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.93(dt,J＝7.9,0.7Hz,1H),7.82-7.63(m,2H),7.45-7.18(m,3H),2.12(s,3H)。
中间体20：
在超声处理下用氩气对3-(3-溴-2-甲基苯基)-8-氟-1-甲基(d3)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(3.00g,8.19mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(2.70g,10.7mmol)及乙酸钾(2.41g,24.6mmol)于二噁烷(40mL)中的混合物鼓泡约2min，然后用PdCl2(dppf)DCM加合物(0.335g,0.410mmol)处理。将混合物在90℃加热15.75h。用EtOAc稀释冷却的混合物，经过滤，并用EtOAc淋洗固体。浓缩合并的滤液，并通过在硅胶(330g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至40％的梯度)洗脱)，从而得到灰白色固体状8-氟-1-甲基(d3)-3-(RS)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(3.23g,95％产率)。质谱m/z414(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.14-8.07(m,1H),7.93(dd,J＝7.4,1.4Hz,1H),7.48(ddd,J＝13.9,8.1,1.5Hz,1H),7.37-7.31(m,1H),7.27-7.19(m,2H),2.36(s,3H),1.36(s,12H)。
中间体21和22
8-氟-1-甲基(d3)-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(21)，和
8-氟-1-甲基(d3)-3-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(22)
通过如下的超临界流体色谱法分离8-氟-1-甲基(d3)-3-(RS)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体20]的样品：柱：R,R(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，200mL/min,100巴,30℃；样品制备：97.3mg/mL，于MeOH:DCM(1:1)中；注入：4mL。由柱洗脱的第一个峰得到S对映异构体，即白色固体状8-氟-1-甲基(d3)-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体21]。由柱洗脱的第二个峰得到R对映异构体，即白色固体状8-氟-1-甲基(d3)-3-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体22]。各对映异构的阻转异构体的质谱及1H NMR与中间体20相同。
8-氟-1-甲基(d3)-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体21]的替代合成：
在冰水浴上搅拌8-氟-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体19](5.42g,13.7mmol)于THF(100mL)中的溶液并用Cs2CO3(6.24g,19.2mmol)然后用碘甲烷-d3(1.02mL,16.4mmol)处理，并将混合物在室温搅拌16.25h。过滤混合物，用EtOAc淋洗固体，并浓缩合并的滤液。将残余物溶解于EtOAc中并依次用水及盐水洗涤，干燥并浓缩，从而得到白色固体状8-氟-1-甲基(d3)-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(5.538g,98％产率)。质谱m/z 414(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.11(dq,J＝7.8,0.8Hz,1H),7.93(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.48(ddd,J＝13.9,8.1,1.5Hz,1H),7.38-7.30(m,1H),7.27-7.20(m,2H),2.36(s,3H),1.36(s,12H)。
中间体23
3-4-溴-3-氰基-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体23A：4-溴-7-(2-羟基丙-2-基)-3-碘-9H-咔唑-1-甲酰胺
将4-溴-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[根据美国专利8,084,620中所阐述的操作合成，实施例73-2](2.00g,5.76mmol)、N-碘琥珀酰亚胺(1.69g,7.49mmol)及吡啶(1.9mL,23.0mmol)于DMF(20mL)中的混合物在65℃加热2天。用EtOAc稀释冷却的混合物，用10％LiCl水溶液、然后用盐水洗涤两次。用EtOAc萃取水层。干燥合并的有机层并浓缩，并通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(50％至65％的梯度)洗脱)，从而得到黄色固体状4-溴-7-(2-羟基丙-2-基)-3-碘-9H-咔唑-1-甲酰胺(0.609g,23％产率)。质谱m/z473,475(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),8.49(d,J＝8.6Hz,1H),8.38(s,1H),8.26(br.s.,1H),7.94(d,J＝1.1Hz,1H),7.58(br.s.,1H),7.40(dd,J＝8.6,1.4Hz,1H),5.09(s,1H),及1.51(s,6H)。
中间体23：
使4-溴-7-(2-羟基丙-2-基)-3-碘-9H-咔唑-1-甲酰胺(0.609g,1.29mmol)及氰化锌(0.076g,0.644mmol)于DMF(7mL)中的混合物用氮气进行三次抽真空-填充循环。用四(三苯基膦)钯(0.074g,0.064mmol)处理混合物并在95℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物，用10％LiCl水溶液然后用盐水洗涤两次。用EtOAc萃取水层。干燥合并的有机层并浓缩。用DCM研磨且超声处理残余物，并通过过滤收集沉淀物，从而得到淡黄色固体状4-溴-3-氰基-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(0.400g,83％产率)。质谱m/z 372,374(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.12(s,1H),8.55(d,J＝8.6Hz,1H),8.38(s,1H),8.31(br.s.,1H),8.03(s,1H),7.74(br.s.,1H),7.49(dd,J＝8.6,1.1Hz,1H)及1.52(s,6H)。
中间体24
5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(外消旋)
中间体24A：4-溴-2,5-二氟苯甲酸
用于己烷中的2.5M正丁基锂(1.04mL,2.59mmol)逐滴处理于干冰-丙酮浴中冷却的1,4-二溴-2,5-二氟苯(640mg,2.35mmol)于无水乙醚(10mL)中的溶液。将溶液在-78℃搅拌30min，然后用一片干冰处理。5min后移去冷却浴，并将混合物再搅拌30min同时温热至室温。用EtOAc及水稀释混合物。分离有机相并用饱和NaHCO3水溶液洗涤两次。用1M HCl水溶液酸化合并的水相，用DCM萃取两次，并干燥合并的有机相并浓缩，从而得到白色固体状4-溴-2,5-二氟苯甲酸(297mg,53％产率)。
中间体24B：4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐
将4-溴-2,5-二氟苯甲酸(2.50g,10.6mmol)及肼(3.81mL,121mmol)于N-甲基-2-吡咯烷酮(2mL)中的混合物在95℃加热4h。将冷却的混合物倾倒至于NaCl-冰浴中冷却的剧烈搅拌的6M HCl水溶液(400mL)中。通过过滤收集所得沉淀物，用6M HCl水溶液(200mL)洗涤并在真空下干燥，从而得到黄色固体状4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐(1.88g,71％纯度,44％产率)，其未经进一步纯化即使用。
4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐的替代合成：
用亚硝酸钠(3.24g,47.0mmol)于水(15.7mL)中的溶液逐滴处理经NaCl-冰浴冷却的2-氨基-4-溴-5-氟苯甲酸(10.0g,42.7mmol)于37％HCl水溶液(42.7mL)与水(14.3mL)的混合物中的混悬液。当完成添加时，将混合物再搅拌30min。逐滴添加氯化锡(II)二水合物(28.9g,128mmol)于37％HCl水溶液(27.5mL)中的溶液。移去冷却浴并将混合物在室温搅拌45min。过滤浓稠混悬液并用水充分洗涤所收集沉淀物，并减压干燥过夜。在超声处理下用MeOH研磨固体，并通过过滤收集沉淀物，用MeOH洗涤并干燥。浓缩滤液，并用DCM研磨残余物。通过过滤收集所得固体，干燥并与其他固体合并，从而得到白色固体状4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐(5.37g,44％产率)。质谱m/z 249,251(M+H)+。
中间体24C：5-溴-2-(乙氧基羰基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸
将4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐(5.37g,18.8mmol)、3-氧代环己烷羧酸乙酯(3.52g,20.7mmol)及乙酸(3.23mL,56.4mmol)于甲苯(90mL)中的混合物在110℃加热20h。减压除去溶剂，并用甲苯(43mL)及三氟乙酸(11mL)稀释残余物。将混合物在90-94℃搅拌过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物，进行超声处理，并通过过滤收集沉淀物。浓缩滤液并在超声处理下再悬浮于EtOAc中，从而得到另一沉淀物，其还通过过滤收集并用EtOAc洗涤。用MeOH将合并的固体研磨两次，从而得到固体。浓缩合并的滤液并用MeOH研磨残余物，从而得到额外固体。合并固体，从而得到淡黄色固体状5-溴-2-乙氧基羰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸(3.38g)。质谱m/z 384,386(M+H)+。
中间体24D：5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-羧酸乙酯
将5-溴-2-(乙氧基羰基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸(0.513g,1.34mmol)、EDC(0.384g,2.00mmol)及HOBT(0.307g,2.00mmol)于THF(10mL)及DCM(1.65mL)中的混合物在室温搅拌20min。添加氢氧化铵(0.078mL,2.00mmol)，并将混合物在室温搅拌60min。用EtOAc稀释混合物并用饱和NaHCO3水溶液然后用盐水洗涤两次。用EtOAc萃取水层，并干燥合并的有机层并浓缩。在MeOH中在超声处理下研磨残余物，从而得到黄色固体状5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-羧酸乙酯(0.432g,84％产率)。质谱m/z383,385(M+H)+。
中间体24：
在-78℃经30min用于乙醚中的1.6M甲基锂(49mL,78mmol)逐滴处理5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-羧酸乙酯(10.0g,26.1mmol)于THF(200mL)中的溶液。将混合物在-78℃搅拌45min，然后经25min用额外甲基锂溶液(33mL)处理。将混合物在-78℃再搅拌90min，然后用饱和NH4Cl水溶液处理并使其温热至室温。用EtOAc稀释混合物并依次用水及盐水洗涤。用EtOAc萃取水层。干燥合并的有机层并浓缩。将残余物溶解于EtOAc(约100mL)中并经顶部具有硅胶垫的垫过滤，用EtOAc(约1000mL)进一步洗涤。浓缩滤液，得到淡黄色固体状的外消旋5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(9.24g,96％产率)。质谱m/z 369,371(M+H)+。
中间体24的替代合成：
在-78℃经30min向5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-羧酸乙酯(10.0g,26.1mmol)于四氢呋喃(200mL)中的溶液中逐滴添加甲基锂(1.6M，于乙醚中)(3当量；49mL,78mmol)。将反应混合物在-78℃搅拌45分钟。经25min添加另外2当量甲基锂(33mL)，并将反应混合物在-78℃再搅拌1.5h。在-78℃用饱和氯化铵水溶液淬灭反应混合物并使其温热至室温。用乙酸乙酯稀释混合物，用水洗涤，并用盐水洗涤。收集有机层，并依次用乙酸乙酯萃取水层。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并减压浓缩。将残余物溶解于约100mL乙酸乙酯中并在600mL多孔漏斗中使用乙酸乙酯(约1L)经顶部具有硅胶垫的垫进行过滤。减压浓缩，得到淡黄色固体状5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(9.24g,25.03mmol,96％产率)。
中间体25及26
(R)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(I-25)，和
(S)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(I-26)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离外消旋5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体24]的样品：柱：OD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，150mL/min,40℃。由柱洗脱的第一个峰得到(R)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体25]。由柱洗脱的第二个峰得到(S)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体26]。两种对映异构体的质谱及1H NMR光谱相同。质谱m/z 369,371(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),8.07(br.s.,1H),7.55(d,J＝10.3Hz,1H),7.50(br.s.,1H),4.24(s,1H),3.26(dd,J＝15.8,4.4Hz,1H),2.93(dd,J＝17.1,4.6Hz,1H),2.72(t,J＝11.7Hz,1H),2.48-2.40(m,1H),2.12(d,J＝9.2Hz,1H),1.70-1.62(m,1H),及1.32(qd,J＝12.4,5.3Hz,1H)。
所得中间体26的替代SFC分离：
AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(55:45)，150mL/min,40℃。由柱洗脱的第一个峰得到(S)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体26]。由柱洗脱的第二个峰得到(R)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体25]。
中间体27
4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体27A：4-溴-7-乙氧基羰基-3-氟-9H-咔唑-1-羧酸
将5-溴-2-(乙氧基羰基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸(2.87g,7.47mmol)及2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌(3.73g,16.4mmol)于THF(45mL)中的溶液在60℃加热90min。用EtOAc(约50mL)稀释冷却的混合物并搅拌60min。通过过滤收集所得沉淀物，用EtOAc洗涤并干燥。浓缩滤液，并用MeOH在超声处理下研磨残余物，过滤，并用MeOH洗涤沉淀物并干燥。合并两批沉淀物，从而得到淡黄色固体状4-溴-7-乙氧基羰基-3-氟-9H-咔唑-1-羧酸(2.39g,84％产率)。质谱m/z 380,382(M+H)+。
中间体27B：5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-羧酸乙酯
将4-溴-7-(乙氧基羰基)-3-氟-9H-咔唑-1-羧酸(2.39g,6.29mmol)、EDC(1.81g,9.43mmol)及HOBT(1.44g,9.43mmol)于THF(30mL)及DCM(5mL)中的混合物在室温搅拌20min。添加氢氧化铵(0.367mL,9.43mmol)，并将混合物在室温搅拌4h。用EtOAc稀释混合物，用饱和NaHCO3水溶液然后用盐水洗涤两次。用EtOAc萃取水层，并干燥合并的有机层并浓缩。用MeOH在超声处理下研磨残余物，从而得到淡黄色固体状5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(2.26g,95％产率)。质谱m/z 379,381(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),8.70(d,J＝8.3Hz,1H),8.51(d,J＝1.1Hz,1H),8.29(br.s.,1H),8.10(d,J＝10.3Hz,1H),7.87(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.74(br.s.,1H),4.37(q,J＝6.9Hz,2H)，及1.37(t,J＝7.1Hz,3H)。1H NMR(500MHz,MeOH-d4)δ8.77(d,J＝8.2Hz,1H),8.36(d,J＝0.9Hz,1H),7.83(d,J＝8.2Hz,1H),7.46(d,J＝8.2Hz,1H),4.12(q,J＝7.0Hz,2H),1.58-1.36(m,4H),及1.26(t,J＝7.2Hz,3H)。
5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-羧酸乙酯的替代合成：
将5-溴-8-氨甲酰基-9H-咔唑-2-羧酸乙酯[根据美国专利8,084,620中所阐述的操作合成，中间体48-1](0.100g,0.277mmol)及1-(氯甲基)-4-氟-1,4-重氮化二环[2.2.2]辛烷二(四氟硼酸酯)(0.100g,0.554mmol)于THF(2mL)及MeCN(2mL)中的混合物在60℃加热过夜。过滤冷却的混合物并浓缩滤液。使用反相制备型HPLC纯化残余物，从而得到浅棕色固体状5-溴-8-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(0.035g)。
中间体27：
在-78℃经10min用于乙醚中的1.6M甲基锂(2.47mL,3.96mmol)逐滴处理5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(0.500g,1.32mmol)于THF(9.0mL)中的溶液。将混合物在-78℃搅拌30min，然后用额外甲基锂溶液(1.65mL,2.64mmol)处理并将混合物在-78℃搅拌45min以上。用饱和NH4Cl水溶液处理混合物并使其温热至室温。用EtOAc稀释混合物并依次用水及盐水洗涤。用EtOAc萃取水层并干燥合并的有机层并浓缩，从而得到淡黄色固体，其通过反相制备型HPLC纯化。用饱和NaHCO3水溶液中和适当馏分并浓缩。将残余物分配于EtOAc与水之间，并用盐水洗涤有机层。用EtOAc萃取水层，并干燥合并的有机层并浓缩，从而得到淡黄色固体状4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(0.240g,50％产率)。质谱m/z 347,349(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.58(s,1H),8.50(d,J＝8.6Hz,1H),8.22(br.s.,1H),7.96(d,J＝10.3Hz,1H),7.94(d,J＝1.1Hz,1H),7.65(br.s.,1H),7.39(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),5.09(s,1H),及1.51(s,6H)。
4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的替代合成：
在冰水浴中冷却5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(10g,26.4mmol)于THF(300mL)中的溶液并用于THF中的3.0M甲基氯化镁(70.3mL,211mmol)逐滴处理。将溶液在0℃搅拌18h。将混合物倾倒至1000mL于冰水浴中冷却的充分搅拌的饱和NH4Cl水溶液中。用水稀释所得混合物并用EtOAc萃取两次。用水然后用盐水将合并的有机相洗涤两次，并干燥并浓缩。通过在硅胶(330g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-DCM(20％至100％的梯度)洗脱)，从而得到4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(6.36g,65％产率)。
中间体28
4-溴-7-(2-羟基丙-2-基)-3-甲基-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体28A：5-溴-2-碘-4-甲基苯胺
将3-溴-4-甲基苯胺(5.00g,26.9mmol)、N-碘琥珀酰亚胺(4.53g,20.2mmol)及二(吡啶)碘鎓四氟硼酸盐(2.70g,7.26mmol)于DCM(100mL)中的溶液在室温搅拌过夜。用DCM稀释混合物，依次用饱和NaHSO3水溶液及水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为1％、2％及3％)洗脱)，从而得到黄色固体状5-溴-2-碘-4-甲基苯胺(5.27g,63％产率)。质谱m/z 312,314(M+H)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.49(d,J＝0.6Hz,1H),6.94(s,1H),4.17-3.91(br.s,2H),及2.25(s,3H)。
中间体28B：2-氨基-4-溴-5-甲基苯甲腈
使5-溴-2-碘-4-甲基苯胺(5.25g,16.8mmol)及氰化锌(0.988g,8.41mmol)于DMF(80mL)中的混合物用氮气进行三次抽真空-填充循环。用四(三苯基膦)钯(0.972g,0.841mmol)处理混合物并在90℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物并依次用10％LiCl水溶液(两次)及盐水洗涤。用EtOAc萃取水层，并干燥合并的有机层并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为1％、2.5％、5％及50％)洗脱)，从而得到褐色固体。通过用MeOH研磨进一步纯化残余物，从而得到三批固体。通过在硅胶上柱色谱法再次纯化滤液(用EtOAc-己烷(5％，然后10％)洗脱)。将所得固体与其他批次合并，从而得到浅棕色固体状2-氨基-4-溴-5-甲基苯甲腈(2.95g,83％产率)。质谱m/z 211,213(M+H)+。
中间体28C：2-氨基-4-溴-5-甲基苯甲酸
将2-氨基-4-溴-5-甲基苯甲腈(2.95g,14.0mmol)于EtOH(21mL)及2M NaOH水溶液(34.9mL,69.9mmol)的混合物中的混合物回流加热过夜。在冷却至室温后，减压除去乙醇，并用水稀释水性残余物。在用浓HCl水溶液将pH调节至约5后，将混合物搅拌30min并通过过滤收集沉淀物并用水洗涤。将所得湿润固体溶解于EtOAc中，用盐水洗涤，干燥并浓缩，从而得到淡黄色固体状2-氨基-4-溴-5-甲基苯甲酸(2.92g,91％产率)。质谱m/z 212,214(M+H)+。
中间体28D：4-溴-2-肼基-5-甲基苯甲酸盐酸盐
用亚硝酸钠(0.963g,14.0mmol)于水(4.5mL)中的溶液缓慢逐滴处理于NaCl-冰浴中冷却的2-氨基-4-溴-5-甲基苯甲酸(2.92g,12.7mmol)于37％HCl水溶液(12.7mL)与水(4.3mL)的混合物中的混悬液。将所得混合物搅拌45min，然后用氯化锡(II)二水合物(8.59g,38.1mmol)于37％HCl水溶液(8.2mL)中的溶液缓慢逐滴处理。移去冷却浴，并将混合物在室温搅拌60min。过滤混合物，并用水洗涤所收集沉淀物并干燥。在MeOH中研磨并超声处理固体，并浓缩混合物。用DCM研磨且超声处理残余物，并通过过滤收集沉淀物并用DCM洗涤，从而得到白色固体状4-溴-2-肼基-5-甲基苯甲酸盐酸盐(2.17g,61％产率)。质谱m/z245,247(M+H)+。
中间体28E：5-溴-2-(乙氧基羰基)-6-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸
将4-溴-2-肼基-5-甲基苯甲酸盐酸盐(2.17g,7.71mmol)、3-氧代环己烷羧酸乙酯(1.44g,8.48mmol)及乙酸(1.32mL,23.1mmol)于甲苯(40mL)中的混合物在油浴中在117℃加热5h。浓缩混合物并在真空下干燥，并用甲苯(18mL)及TFA(4.5mL)稀释残余物。将混合物于90℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物，进行超声处理，并通过过滤收集沉淀物并用EtOAc洗涤，从而得到黄色固体。浓缩滤液并在超声处理下将残余物悬浮于EtOAc中。通过过滤收集沉淀物并将其与第一批沉淀物合并。用MeOH研磨固体，从而得到淡黄色固体状5-溴-2-(乙氧基羰基)-6-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸(1.60g,55％产率)。质谱m/z380,382(M+H)+。
中间体28F：4-溴-7-(乙氧基羰基)-3-甲基-9H-咔唑-1-羧酸
将5-溴-2-(乙氧基羰基)-6-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸(1.60g,4.21mmol)及2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌(2.10g,9.26mmol)于THF(45mL)中的溶液在60℃加热60min。用EtOAc(约70mL)稀释冷却的混合物，搅拌15min，并通过过滤收集沉淀物，用EtOAc洗涤并干燥。浓缩滤液，并用MeOH研磨残余物，过滤，并用MeOH洗涤所收集沉淀物。合并两批固体，从而得到淡黄色固体状4-溴-7-(乙氧基羰基)-3-甲基-9H-咔唑-1-羧酸(1.40g,88％产率)。质谱m/z 376,378(M+H)+。
中间体28G：5-溴-8-氨甲酰基-6-甲基-9H-咔唑-2-羧酸乙酯
将4-溴-7-(乙氧基羰基)-3-甲基-9H-咔唑-1-羧酸(1.40g,3.72mmol)、EDC(1.070g,5.58mmol)及HOBT(0.855g,5.58mmol)于THF(30mL)与DCM(5mL)的混合物中的混合物在室温搅拌60min。添加氢氧化铵(0.217mL,5.58mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。用EtOAc稀释混合物，并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。无法达到相分离，因此过滤混合物，并依次用水及EtOAc洗涤所收集固体，用MeOH研磨并干燥。分离EtOAc-水滤液并用盐水洗涤有机相，干燥并浓缩。用MeOH研磨残余物，并将所得固体与第一批固体合并，从而得到灰白色固体状5-溴-8-氨甲酰基-6-甲基-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(1.27g,91％产率)。质谱m/z 375,377(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.88(s,1H),8.77(d,J＝8.6Hz,1H),8.48(d,J＝0.9Hz,1H),8.20(br.s.,1H),7.84(dd,J＝8.5,1.4Hz,1H),7.59(br.s.,1H),4.37(q,J＝7.0Hz,2H),2.55(s,3H),及1.37(t,J＝7.0Hz,3H)。
中间体28：
在-78℃经10min用于乙醚中的1.6M甲基锂(2.50mL,4.00mmol)逐滴处理5-溴-8-氨甲酰基-6-甲基-9H-咔唑-2-羧酸乙酯(0.500g,1.33mmol)于THF(12mL)中的溶液。将混合物在-78℃搅拌30min，然后用额外甲基锂溶液(1.67mL,2.67mmol)处理。超过30min后，添加额外甲基锂溶液(1.67mL,2.67mmol)并继续搅拌45min。然后，用饱和NH4Cl水溶液处理混合物并使其温热至室温。用EtOAc稀释混合物并依次用水及盐水洗涤。用EtOAc萃取水层，并干燥合并的有机层并浓缩，从而得到灰白色固体。用MeOH研磨并超声处理固体并通过过滤收集。通过反相制备型HPLC纯化滤液。用饱和NaHCO3水溶液处理适当馏分并浓缩。将残余物分配在EtOAc与水之间。用盐水洗涤有机相，并用EtOAc萃取水层。干燥合并的有机层并浓缩，并将残余物与第一批固体合并，从而得到浅棕色固体状4-溴-7-(2-羟基丙-2-基)-3-甲基-9H-咔唑-1-甲酰胺(0.409g,85％产率)。质谱m/z 343,345(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.42(s,1H),8.56(d,J＝8.6Hz,1H),8.12(br.s.,1H),7.91-7.89(m,2H),7.48(br.s.,1H),7.36(dd,J＝8.3,1.7Hz,1H),5.06(s,1H),2.53(s,3H),及1.51(s,6H)。
中间体29
5-溴-6-氯-2-(RS)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(外消旋混合物)
中间体29A：4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸盐酸盐
将亚硝酸钠(3.03g,43.9mmol)于水(14.8mL)中的溶液以使温度不超过0℃的速率逐滴添加至2-氨基-4-溴-5-氯苯甲酸(10.0g,39.9mmol)于37％HCl水溶液(39.9mL)及水(13.3mL)中的冷却(-10℃,NaCl-冰浴)的混悬液中。将所得混悬液在0℃搅拌15min，然后用氯化锡(II)水合物(22.7g,120mmol)于37％HCl水溶液(17mL)中的溶液处理。将所得混合物温热至室温并搅拌60min。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并风干过夜，从而得到灰白色固体状4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸盐酸盐(12.86g,96％产率)。质谱m/z 365,267(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.05(br.s.,1H),7.95(s,1H),7.55(s,1H)。
中间体29B：5-溴-6-氯-2-(乙氧基羰基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸
将4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸盐酸盐(12.89g,37.6mmol)、3-氧代环己烷羧酸乙酯(7.03g,41.3mmol)及乙酸(6.45mL,113mmol)于甲苯(188mL)中的混悬液在105℃加热过夜。16h后，添加更多乙酸(6mL)及3-氧代环己烷羧酸乙酯(2.00g)，并将混合物在110℃加热4.5h。浓缩混合物，并将残余物与甲苯(100mL)及TFA(20mL)合并。将混悬液在90℃加热过夜。浓缩冷却的混合物，并用EtOAc悬浮残余物。通过过滤收集所得固体，用EtOAc洗涤并风干，从而得到黄色固体状5-溴-6-氯-2-(乙氧基羰基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸(11.0g,73％产率)。质谱m/z 400,402(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.44(br.s.,1H),11.24(s,1H),7.69(s,1H),4.12(qd,J＝7.1,2.3Hz,2H),3.23-2.81(m,5H),2.23-2.09(m,1H),1.91-1.75(m,1H),1.22(t,J＝7.0Hz,3H)。
中间体29C：5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-羧酸乙酯
按照用于制备中间体24D的操作，将5-溴-6-氯-2-(乙氧基羰基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸转化成浅褐色固体状5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-羧酸乙酯(8.54g,78％产率)。质谱m/z 399,401(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.44(br.s.,1H),11.24(s,1H),7.69(s,1H),4.12(qd,J＝7.1,2.3Hz,2H),3.23-2.81(m,5H),2.23-2.09(m,1H),1.91-1.75(m,1H),1.22(t,J＝7.0Hz,3H)。
中间体29：
在干冰-丙酮浴中冷却5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-羧酸乙酯(7.03g,17.6mmol)于THF(200mL)中的溶液并经40min用于THF中的1.6M甲基锂(66.0mL,106mmol)逐份处理。60min后，在-78℃用饱和NH4Cl水溶液缓慢处理混合物并搅拌10min同时温热至室温。用DCM将混合物萃取3次，并依次用水及盐水洗涤合并的有机相，并干燥并浓缩。通过在硅胶(120g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱)，从而得到黄色固体状5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(4.66g)。质谱m/z 385,387(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(s,1H),8.13(br.s.,1H),7.76(s,1H),7.50(br.s.,1H),3.28(d,J＝5.5Hz,1H),2.94(dd,J＝17.1,4.7Hz,1H),2.79-2.66(m,1H),2.49-2.39(m,1H),2.14(d,J＝9.5Hz,1H),1.66(td,J＝11.4,4.1Hz,1H),1.33(qd,J＝12.4,5.2Hz,1H),1.15(s,6H)。
中间体30和31
(R)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(I-30)，和
(S)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(I-31)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离外消旋5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体29]的样品(2.35g)：柱：IA(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(50:50)，124mL/min,100巴,45℃；样品制备：39mg/mL，于MeOH-DMSO(4:1)中；注入：2.33mL。由柱洗脱的第一个峰得到(R)异构体，即黄色固体状(R)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体30](1.15g)。质谱m/z385,387(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.07(s,1H),8.12(br.s.,1H),7.75(s,1H),7.57-7.45(m,1H),4.23(s,1H),3.27(d,J＝4.7Hz,1H),2.93(dd,J＝17.2,4.7Hz,1H),2.78-2.67(m,1H),2.48-2.39(m,1H),2.16-2.08(m,1H),1.69-1.59(m,1H),1.37-1.26(m,1H),1.14(s,6H)。
由柱洗脱的第二个峰得到(S)异构体，即灰白色固体状(S)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体31](0.92g)。质谱m/z385,387(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),8.12(br.s.,1H),7.74(s,1H),7.49(br.s.,1H),4.23(s,1H),3.27(d,J＝5.0Hz,1H),2.93(dd,J＝17.1,4.6Hz,1H),2.72(t,J＝11.8Hz,1H),2.48-2.37(m,1H),2.12(d,J＝9.2Hz,1H),1.69-1.59(m,1H),1.38-1.24(m,1H),1.14(s,6H)。
将化合物溶解于过量1,2-二氯乙烷/EtOAc/乙酸中并在室温缓慢蒸发溶剂从而得到二乙酸溶剂化物，通过由此制得的晶体的单晶x射线分析证实了中间体30的绝对构型。晶胞尺寸： α＝90°，β＝110.607(5)°，γ＝90°； 空间群：P21；中间体30的分子/不对称单位(Z’)：1；密度(经计算，g-cm-3)：1.501。室温的原子份数坐标于表8中给出，且结构的描绘于图1中给出。
表8
中间体30的二乙酸溶剂化物在室温的原子份数坐标
中间体32
5-甲氧基-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮
中间体32A：2-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酸乙酯
在0℃用于己烷中的1.6M正丁基锂(1.69mL,2.70mmol)缓慢处理二异丙基胺(0.385mL,2.70mmol)于THF(2mL)中的搅拌溶液。将混合物搅拌15min，然后在-78℃经5min添加至3-甲氧基-2-甲基吡啶(0.133g,1.08mmol)及碳酸二乙酯(0.262mL,2.16mmol)于THF(5mL)中的搅拌溶液中。在搅拌超过45min后，移去冷却浴并在室温继续搅拌过夜。用饱和NH4Cl水溶液处理混合物并用EtOAc稀释。分离有机相，依次用饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶(12g)上柱色谱法纯化残余物(用50％EtOAc-己烷洗脱)，从而得到油状2-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酸乙酯(0.17g,81％产率)。质谱m/z 196(M+H)+。
中间体32B：2-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酸钠
在室温用3M NaOH水溶液(0.581mL,1.74mmol)处理2-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酸乙酯(0.17g,0.871mmol)于THF(2.5mL)中的搅拌溶液。7h后，浓缩混合物除去THF并在干冰上冷冻水性残余物并冻干，从而得到白色固体状2-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酸钠。推算定量产率且该物质未经进一步纯化即使用。质谱m/z 168(M+H)+。
中间体32C：N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酰胺
在室温搅拌2-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酸钠(0.166g,0.871mmol)、3-溴-2-甲基苯胺(0.118mL,0.958mmol)、DIEA(0.608mL,3.48mmol)及HATU(0.397g,1.05mmol)于DMF(4.0mL)中的混合物。1h后，用EtOAc稀释混合物并用10％LiCl水溶液然后用盐水洗涤两次，干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物，从而得到淡黄色固体状N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酰胺(0.213g,73％产率)。质谱m/z 335,337(M+H)+。
中间体32D：2-(3-甲氧基吡啶-2-基)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺
用氩气对N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酰胺(4.00g,11.9mmol)及4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(3.48g,13.7mmol)于DMSO(7mL)及二噁烷(35mL)中的混合物鼓泡5min，然后用乙酸钾(2.93g,29.8mmol)处理。继续鼓泡2min，然后用PdCl2(dppf)DCM加合物(0.487g,0.597mmol)处理混合物。密封反应容器并在90℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物且依次用水及盐水洗涤。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机层并浓缩。经硅胶填料用60％EtOAc-己烷过滤残余物，并浓缩滤液。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷洗脱)，从而得到浅棕色固体状2-(3-甲氧基吡啶-2-基)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺(5.1g,82％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.65(br.s.,1H),8.20(dd,J＝4.3,1.7Hz,1H),8.14(d,J＝8.1Hz,1H),7.54(d,J＝7.3Hz,1H),7.24-7.17(m,3H),4.01(s,2H),3.88(s,3H),2.45(s,3H),1.35(s,12H)。
中间体32：
将2-(3-甲氧基吡啶-2-基)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺(1.45g,3.78mmol)及CDI(2.45g,15.1mmol)于甲苯(19mL)中的混合物在110℃加热3h。将冷却的混合物分配于EtOAc与水之间。依次用水及盐水洗涤有机层，干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷洗脱)，从而得到黄色固体状5-甲氧基-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮(0.571g,37％产率)。质谱m/z 409(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.96(d,J＝7.0Hz,1H),7.91(dd,J＝7.4,1.2Hz,1H),7.33(t,J＝7.6Hz,1H),7.22(dd,J＝7.8,1.2Hz,1H),6.39-6.30(m,2H),6.24(s,1H),3.93(s,3H),2.34(s,3H),1.34(s,12H)。
中间体33
5-氯-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮(外消旋混合物)
中间体33A：2-(3-氯吡啶-2-基)丙二酸二乙酯
将3-氯-2-氟吡啶(5.00g,38.0mmol)、丙二酸二乙酯(14.6g,91mmol)及Cs2CO3(29.7g,91mmol)于DMSO(42mL)中的混合物在100℃加热7h。在室温搅拌过夜后，用EtOAc稀释混合物，用水然后用盐水洗涤两次。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机相并浓缩，从而得到无色油状粗制2-(3-氯吡啶-2-基)丙二酸二乙酯，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 272(M+H)+。
中间体33B：2-(3-氯吡啶-2-基)乙酸乙酯
将2-(3-氯吡啶-2-基)丙二酸二乙酯(10.32g,38mmol)、氯化钠(5.55g,95mmol)及水(3.42mL,190mmol)于DMSO(40mL)中的混合物在145℃加热8h。使混合物冷却至室温，用EtOAc稀释并用水然后用盐水洗涤两次。干燥有机相并浓缩，从而得到粗制2-(3-氯吡啶-2-基)乙酸乙酯，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 200(M+H)+。
中间体33C：2-(3-氯吡啶-2-基)乙酸钠
在室温用3M NaOH水溶液(25.3mL,76mmol)处理2-(3-氯吡啶-2-基)乙酸乙酯(7.59g,38mmol)于THF(76mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌过夜并浓缩除去THF。在干冰上冷冻水性残余物并冻干，从而得到灰白色固体状2-(3-氯吡啶-2-基)乙酸钠，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 172(M+H)+。
中间体33D：N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(3-氯吡啶-2-基)乙酰胺
在室温搅拌2-(3-氯吡啶-2-基)乙酸钠(7.39g,38mmol)、3-溴-2-甲基苯胺(4.7mL,38.4mmol)、DIEA(13.3mL,76mmol)及HATU(14.6g,38.4mmol)于DMF(127mL)中的混合物。90min后，用EtOAc稀释混合物并用10％LiCl然后用盐水洗涤两次。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机相并浓缩至小体积。用来自早前批次的晶体对溶液进行种晶并使其静置过夜，从而得到沉淀物，其通过过滤收集并用50％EtOAc-己烷洗涤，从而得到白色固体。浓缩滤液并以类似方式重结晶3次，从而得到额外固体。合并固体，从而得到白色固体状N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(3-氯吡啶-2-基)乙酰胺(11.43g,89％产率)。质谱m/z 339,341(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.76(br.s.,1H),8.52(d,J＝3.5Hz,1H),7.92(d,J＝7.9Hz,1H),7.80(dd,J＝8.1,1.1Hz,1H),7.36(d,J＝7.9Hz,1H),7.32-7.23(m,1H),7.06(t,J＝8.0Hz,1H),4.16(s,2H),2.39(s,3H)。
中间体33E：2-(3-氯吡啶-2-基)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺
用氩气对N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(3-氯吡啶-2-基)乙酰胺(4.0g,11.78mmol)及4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(3.29g,12.96mmol)于DMSO(5mL)及二噁烷(25mL)中的混合物鼓泡7min，随后添加乙酸钾(2.89g,29.4mmol)。将氩气继续鼓泡7min，之后添加PdCl2(dppf)DCM加合物(0.481g,0.589mmol)。将混合物在90℃加热7h。用EtOAc稀释冷却的混合物并经过滤。依次用水及盐水洗涤滤液。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机相并浓缩。由EtOAc重结晶残余物，从而得到白色固体。浓缩母液并由EtOAc重结晶残余物。合并两批固体，从而得到白色固体状2-(3-氯吡啶-2-基)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺(3.88g,85％产率)。质谱m/z 387(M+H)+。
中间体33：
在110℃加热2-(3-氯吡啶-2-基)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺(0.192g,0.497mmol)及CDI(0.322g,1.986mmol)于甲苯(2mL)中的混合物。5h后，用EtOAc稀释冷却的混合物并依次用水及盐水洗涤。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机相并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷洗脱)，从而得到亮黄色固体状外消旋5-氯-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮(0.133g,65％产率)。质谱m/z413(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.26(dt,J＝7.6,0.9Hz,1H),7.94(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.36(t,J＝7.6Hz,1H),7.27-7.18(m,2H),6.36(t,J＝7.3Hz,1H),6.31(s,1H),1.57(s,3H),1.36(s,12H)。
中间体34和35
5-氯-2-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮(I-34)，和
5-氯-2-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮(I-35)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离外消旋5-氯-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体33]的样品：柱：R,R(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(55:45)，200mL/min,100巴,35℃；样品制备：96mg/mL，于MeCN-DCM(1:4)中；注入：5mL。由柱洗脱的第一个峰得到5-氯-2-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体34]。由柱洗脱的第二个峰得到5-氯-2-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体35]。各对映异构的阻转异构体的质谱及1H NMR与中间体33相同。
可选择地，通过如下的手性超临界流体色谱法分离外消旋5-氯-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体33]的样品：柱：R,R(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-CH3CN(55:45)，200mL/min,100巴,35℃；样品制备：96mg/mL，于MeCN-DCM(1:4)中；注入：5mL。由柱洗脱的第一个峰得到5-氯-2-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体35]。可通过以下进一步纯化该物质：将其溶解于THF中，用己烷稀释并通过过滤收集沉淀物。
将化合物溶解于过量丙酮中并在室温缓慢蒸发溶剂，通过由此制得的晶体的单晶x射线分析证实了中间体35的绝对构型。晶胞尺寸： α＝90°，β＝113.165(2)°，γ＝90°；空间群：C2；中间体35的分子/不对称单位(Z')：1；密度(经计算，g-cm-3)：1.304。室温的原子份数坐标于表9中给出，且结构的描绘于图2中给出。
表9
中间体35在室温的原子份数坐标
中间体36
6-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-5H-噻唑并[3,2-c]嘧啶-5,7(6H)-二酮
中间体36A：N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)乙酰胺
用HATU(2.36g,6.20mmol)处理3-溴-2-甲基苯胺(0.764mL,6.20mmol)、1,3-噻唑-2-基乙酸(0.74g,5.17mmol)及DIEA(1.63mL,9.30mmol)于DMF(15mL)中的混合物。在搅拌过夜后，用EtOAc稀释混合物，用10％LiCl水溶液随后盐水洗涤两次，并用EtOAc萃取合并的水层。干燥合并的有机层并浓缩，并通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷洗脱)，从而得到白色固体状N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)乙酰胺(0.681g,42％产率)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ9.84-9.65(m,1H),7.91(d,J＝7.9Hz,1H),7.84(d,J＝3.3Hz,1H),7.42-7.35(m,2H),7.07(t,J＝8.0Hz,1H),4.18(s,2H),2.38(s,3H)。
中间体36B：N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-2-(噻唑-2-基)乙酰胺
用氮气对N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)乙酰胺(0.53g,1.70mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(0.476g,1.87mmol)及乙酸钾(0.418g,4.26mmol)于DMSO(1.6mL)及二噁烷(8mL)中的混合物鼓泡5min，随后添加PdCl2(dppf)DCM加合物(0.070g,0.085mmol)。在用氮气再鼓泡5min后，将混合物在90℃加热7h。用EtOAc稀释冷却的混合物并经过滤。依次用水及盐水洗涤滤液，并干燥并浓缩。通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用50％EtOAc-己烷洗脱)，从而得到灰白色固体状N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-2-(噻唑-2-基)乙酰胺(0.45g,74％产率)。质谱m/z 359(M+H)+。
中间体36：
将N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-2-(噻唑-2-基)乙酰胺(0.45g,1.26mmol)及CDI(0.815g,5.02mmol)于甲苯(6.5mL)中的混合物在110℃加热2h。将冷却的混合物分配于EtOAc与水之间。用盐水洗涤有机层，并用EtOAc萃取合并至水层。干燥合并的有机层并浓缩。通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用70％EtOAc-己烷洗脱)，从而得到略微不纯的浅棕色固体状6-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-5H-噻唑并[3,2-c]嘧啶-5,7(6H)-二酮(34％产率)。该材料未经进一步纯化即使用。质谱m/z 385(M+H)+。
中间体37
外消旋5-氟-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮
中间体37A：2-(3-氟吡啶-2-基)丙二酸二乙酯
将2,3-二氟吡啶(2.00g,17.4mmol)、Cs2CO3(13.59g,41.7mmol)及丙二酸二乙酯(6.68g,41.7mmol)于DMSO(19mL)中的混合物在100℃加热4.5h。将混合物倾倒于冰上，用EtOAc稀释，并分离有机相，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶(80g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为10％,20％及30％)洗脱)，从而得到淡色油状2-(3-氟吡啶-2-基)丙二酸二乙酯(2.68g,60％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.42(dt,J＝4.6,1.3Hz,1H),7.43(ddd,J＝9.4,8.3,1.4Hz,1H),7.30(dt,J＝8.5,4.3Hz,1H),5.09(d,J＝1.1Hz,1H),4.30(q,J＝7.0Hz,4H),1.33-1.26(m,6H)。
中间体37B：2-(3-氟吡啶-2-基)乙酸乙酯
将2-(3-氟吡啶-2-基)丙二酸二乙酯(2.68g,10.5mmol)、氯化钠(0.675g,11.6mmol)及水(0.378mL,21.0mmol)于DMSO(15mL)中的混合物在145℃加热4.5h。使混合物冷却，用EtOAc稀释并依次用水及盐水洗涤。干燥有机相并浓缩，从而得到淡色油状2-(3-氟吡啶-2-基)乙酸乙酯(1.90g,99％产率)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 184(M+H)+。
中间体37C：2-(3-氟吡啶-2-基)乙酸钠
用3M NaOH水溶液(6.9mL,20.7mmol)处理2-(3-氟吡啶-2-基)乙酸乙酯(1.90g,10.4mmol)于THF(26mL)中的搅拌溶液并在室温搅拌过夜。浓缩混合物除去THF，并冷冻残余水溶液并冻干，从而得到白色固体状2-(3-氟吡啶-2-基)乙酸钠(推定100％产率)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 156(M+H)+。
中间体37D：N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(3-氟吡啶-2-基)乙酰胺
将2-(3-氟吡啶-2-基)乙酸钠(1.847g,10.37mmol)、3-溴-2-甲基苯胺(1.41mL,11.4mmol)、DIEA(5.4mL,31.1mmol)及HATU(4.73g,12.4mmol)于DMF(30mL)中的混合物在室温搅拌1.25h。用EtOAc稀释混合物并用10％LiCl水溶液然后用盐水洗涤两次。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机相并浓缩。将残余物溶解于热EtOAc中，使其冷却，并通过过滤收集所得白色固体并用60％EtOAc-己烷洗涤。浓缩合并的滤液并使用相同操作使残余物重结晶两次。通过在硅胶上柱色谱法纯化来自浓缩最终滤液的残余物(用EtOAc-己烷洗脱)，从而得到固体，将该固体与重结晶批次合并，从而得到白色固体状N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(3-氟吡啶-2-基)乙酰胺(2.03g,61％产率)。质谱m/z 323,325(M+H)+。
中间体37E：2-(3-氟吡啶-2-基)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺
用氮气对N-(3-溴-2-甲基苯基)-2-(3-氟吡啶-2-基)乙酰胺(4.20g,13.6mmol)及4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(3.80g,14.9mmol)于二噁烷(40mL)中的混合物鼓泡10min。将乙酸钾(3.33g,34.0mmol)添加至混合物中，再继续鼓泡5min，并添加PdCl2(dppf)DCM加合物(0.555g,0.679mmol)。将混合物于100℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物，依次用水及盐水洗涤，干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用DCM-甲基叔丁基醚洗脱)，从而得到白色固体状2-(3-氟吡啶-2-基)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺(3.80g,76％产率)。质谱m/z 371(M+H)+。
中间体37：
将2-(3-氟吡啶-2-基)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺(9.01g,24.3mmol)及CDI(15.78g,97mmol)于甲苯(97mL)中的混合物在120℃加热7h。用EtOAc稀释冷却的混合物并依次用水及盐水洗涤。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机相并浓缩。通过在硅胶(220g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(20％至100％的梯度)洗脱)，从而得到黄色固体状5-氟-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮(6.26g,65％产率)。质谱m/z397(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.11(dd,J＝7.6,0.8Hz,1H),7.94(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.35(t,J＝7.5Hz,1H),7.23(dd,J＝7.8,1.4Hz,1H),6.85-6.76(m,1H),6.35(td,J＝7.4,5.0Hz,1H),6.09(s,1H),2.36(s,3H),1.36(s,12H)。
中间体38和39
5-氟-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮(单一阻转异构体)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离外消旋5-氟-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体37]的样品(7.5g)：柱：OD-H(5×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(76:24)，280mL/min,100巴,40℃；样品制备：62.5mg/mL，于DCM-MeOH(1:1)中；注入：0.83mL。由柱洗脱的第一个峰得到黄色固体状5-氟-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮的一种阻转异构体[中间体38](3.2g,手性纯度为99.3％)。由柱洗脱的第二个峰得到黄色固体状5-氟-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮的另一阻转异构体[中间体39](2.98g,手性纯度为98.6％)。两种对映异构体的质谱及1HNMR与中间体37相同。
中间体40
(Z)-4-((2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)亚氨基)-1-甲基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2(4H)-酮
中间体40A：N-(3-溴-2-氯苯基)-2-(甲基氨基)苯甲酰胺
在0℃用于甲苯中的2M三甲基铝(0.99mL,1.98mmol)缓慢处理3-溴-2-氯苯胺[根据美国专利8,242,260中阐述的操作制得](240mg,1.162mmol)及甲苯(10mL)的混合物。使混合物温热至室温并搅拌15min。缓慢添加1-甲基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(300mg,1.52mmol)于甲苯(4mL)中的部分混悬液。将所得混合物在50℃加热4h，冷却至0℃，并用1M HCl水溶液逐滴处理直至不再观察到气体排放为止。将混合物搅拌2h，同时温热至室温，然后用EtOAc萃取。依次用NaHCO3及盐水洗涤有机相，干燥并浓缩。通过在硅胶(80g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至30％的梯度)洗脱)，从而得到黄色固体状N-(3-溴-2-氯苯基)-2-(甲基氨基)苯甲酰胺(110mg,28％产率)。质谱m/z 339,341(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.00(s,1H),7.78(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),7.67(dd,J＝8.1,1.5Hz,1H),7.57(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.53(d,J＝1.3Hz,1H),7.38(ddd,J＝8.4,7.1,1.4Hz,1H),7.32(t,J＝8.0Hz,1H),6.70(d,J＝8.4Hz,1H),6.68-6.61(m,1H),2.79(d,J＝5.1Hz,3H)。
中间体40B：(Z)-4-((3-溴-2-氯苯基)亚氨基)-1-甲基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2(4H)-酮
将N-(3-溴-2-氯苯基)-2-(甲基氨基)苯甲酰胺(150mg,0.442mmol)于THF(15mL)中的溶液冷却至0℃并用三光气(197mg,0.663mmol)处理。将混合物在室温搅拌1h，然后使其冷却至0℃并用水处理直至停止气体排放为止。浓缩混合物，并将残余物溶解于EtOAc中并依次用饱和NaHCO3水溶液、水及盐水洗涤，干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至50％的梯度)洗脱)，从而得到米色固体状(Z)-4-((3-溴-2-氯苯基)亚氨基)-1-甲基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2(4H)-酮(130mg,81％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.33(dd,J＝7.8,1.4Hz,1H),7.72-7.61(m,1H),7.41(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),7.36-7.28(m,1H),7.16-7.08(m,2H),7.07-7.01(m,1H),3.55(s,3H)。
中间体40：
用氮气对(Z)-4-((3-溴-2-氯苯基)亚氨基)-1-甲基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2(4H)-酮(130mg,0.356mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(117mg,0.462mmol)及乙酸钾(87mg,0.889mmol)于二噁烷(4mL)中的混合物鼓泡10min。用PdCl2(dppf)DCM加合物(14.5mg,0.018mmol)处理混合物，并在90℃加热过夜。将冷却的混合物分配在EtOAc与水之间。干燥有机相并浓缩并通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至50％的梯度)洗脱)，从而得到黄色固体状(Z)-4-((2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)亚氨基)-1-甲基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2(4H)-酮(120mg,82％产率)。质谱m/z 413(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.40-8.30(m,1H),7.67-7.58(m,1H),7.48-7.44(m,1H),7.27(s,4H),7.16-7.07(m,2H),3.55-3.47(m,3H),1.40-1.37(m,12H)。
中间体41
3-(2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-8-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
中间体41A：2-氨基-N-(3-溴-2-氯苯基)-3-氟苯甲酰胺
使3-溴-2-氯苯胺[根据美国专利8,242,260中阐述的操作制得](600mg,2.91mmol)与甲苯(10mL)的混合物冷却至0℃并用于甲苯中的2M三甲基铝(2.47mL,4.94mmol)缓慢处理。使混合物温热至室温并搅拌15min。用8-氟-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(684mg,3.78mmol)处理混合物并在50℃加热16h。使混合物冷却至0℃并用1M HCl水溶液逐滴处理直至气体排放停止为止，并搅拌2h同时使其温热至室温。用EtOAc将混合物萃取三次。依次用饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩。通过在硅胶(24g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至30％的梯度)洗脱)，从而得到淡黄色固体状2-氨基-N-(3-溴-2-氯苯基)-3-氟苯甲酰胺(350mg,35％产率)。质谱m/z 343,345(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.46(dd,J＝8.4,1.3Hz,1H),8.42(br.s.,1H),7.43(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.34(d,J＝8.1Hz,1H),7.22(t,J＝8.3Hz,1H),7.15(ddd,J＝11.0,8.0,1.2Hz,1H),6.69(td,J＝8.0,5.1Hz,1H),5.72(br.s.,2H)。
中间体41B：3-(3-溴-2-氯苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃将三光气(453mg,1.53mmol)一次性添加至氨基-N-(3-溴-2-氯苯基)-3-氟苯甲酰胺(350mg,1.019mmol)于THF(10mL)中的溶液中。将混合物在室温搅拌1h，然后冷却至0℃并用水处理直至不再观察到气体排放为止。浓缩混合物并将残余物溶解于EtOAc中，用饱和NaHCO3水溶液、水及盐水依次洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶(24g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至50％的梯度)洗脱)，从而得到黄色固体状3-(3-溴-2-氯苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(320mg,85％产率)。质谱m/z 369,371(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.54(br.s.,1H),7.97(d,J＝8.1Hz,1H),7.77(dd,J＝6.8,2.6Hz,1H),7.46(ddd,J＝9.8,8.3,1.2Hz,1H),7.36-7.29(m,2H),7.24(td,J＝8.0,4.8Hz,1H)。
中间体41C：3-(3-溴-2-氯苯基)-8-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
将碘甲烷(0.102mL,1.62mmol)缓慢添加至3-(3-溴-2-氯苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(300mg,0.812mmol)、DMF(5mL)与Cs2CO3(529mg,1.62mmol)的混合物中。将混合物在室温搅拌2h，然后用EtOAc稀释，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶(24g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至30％的梯度)洗脱)，从而得到黄色固体状3-(3-溴-2-氯苯基)-8-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(280mg,90％产率)。质谱m/z383,385(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.09(dq,J＝7.8,0.8Hz,1H),7.79-7.71(m,1H),7.49(ddd,J＝13.9,8.1,1.5Hz,1H),7.32-7.29(m,2H),7.29-7.22(m,2H),3.88(s,1.5H),3.86(s,1.5H)。
中间体41：
用氮气对3-(3-溴-2-氯苯基)-8-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(150mg,0.391mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(129mg,0.508mmol)、乙酸钾(96mg,0.978mmol)与二噁烷(8mL)的混合物鼓泡10min并用PdCl2(dppf)DCM加合物(16mg,0.020mmol)处理。将混合物在90℃加热16h，然后冷却，并将其分配于EtOAc与水之间。干燥有机相并浓缩，并通过在硅胶(12g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至50％的梯度)洗脱)，从而得到白色玻璃状固体状3-(2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-8-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(52mg,31％产率)。质谱m/z 431(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.14-8.05(m,1H),7.90-7.82(m,1H),7.51-7.35(m,3H),7.26-7.19(m,1H),3.86(d,J＝8.1Hz,3H),1.36(s,12H)。
中间体42
3-(2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
用氮气对3-(3-溴-2-氯苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体41B](990mg,2.68mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(884mg,3.48mmol)及乙酸钾(657mg,6.70mmol)于二噁烷(8mL)中的混合物鼓泡10min。添加PdCl2(dppf)DCM加合物(109mg,0.134mmol)并将混合物在90℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物，过滤，并浓缩滤液。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用MeOH-DCM(0至5％的梯度)洗脱)，从而得到褐色固体状3-(2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(710mg,64％产率)。质谱m/z 416(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.55-8.38(m,1H),8.06-7.93(m,1H),7.90-7.75(m,1H),7.51-7.38(m,3H),7.26-7.13(m,1H),1.26(br.s.,12H)
中间体43
7-氟-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
使用用于制备中间体8的操作，将3-(3-溴-2-甲基苯基)-7-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体15B]转化成7-氟-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮。质谱m/z 397(M+H)+。
中间体44
1-(4-氟苯基)-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
中间体44A：3-(4-甲氧基苄基氨基)-2-(苯基硒基)丙酸甲酯
用丙烯酸甲酯(2.09mL,23.2mmol)处理苯基溴化硒(5.54g,23.5mmol)及氯化锌(II)(1.27g,9.29mmol)于DCM(116mL)中的混悬液。将混合物在室温搅拌30min，然后用(4-甲氧基苯基)甲胺(6.4mL,48.8mmol)处理，从而形成浓稠混悬液。在搅拌16h后，过滤混合物，用EtOAc洗涤所收集沉淀物，并浓缩合并的滤液。通过在硅胶(120g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至50％的梯度)洗脱)，从而得到浅褐色油状3-(4-甲氧基苄基氨基)-2-(苯基硒基)丙酸甲酯(3.68g,42％产率)。质谱m/z 380(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.53-7.49(m,2H),7.39-7.28(m,3H),7.18(d,J＝8.6Hz,2H),6.88-6.82(m,2H),3.89(dd,J＝8.8,5.9Hz,1H),3.73(s,3H),3.61(s,2H),3.55(s,3H),2.93-2.78(m,2H)。
中间体44B：1-溴-3-异氰酰基-2-甲基苯
用3-溴-2-甲基苯胺(3.00g,16.1mmol)及DIEA(5.6mL,32.2mmol)于甲苯(5.4mL)中的溶液缓慢处理于冰水浴中冷却的三光气(2.25g,7.58mmol)于甲苯(27mL)中的溶液。将所得混悬液在室温搅拌2h。通过过滤去除沉淀物并用EtOAc洗涤。用EtOAc稀释合并的滤液，用盐水洗涤，干燥并浓缩，从而得到褐色油状1-溴-3-异氰酰基-2-甲基苯(3.68g,98％产率)，其未经纯化即使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.49(dd,J＝8.1,0.9Hz,1H),7.31(dd,J＝7.9,0.7Hz,1H),7.15(td,J＝8.0,0.7Hz,1H),2.38(s,3H)。
中间体44C：3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-5-(苯基硒基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
将3-((4-甲氧基苄基)氨基)-2-(苯基硒基)丙酸甲酯(3.68g,9.73mmol)、1-溴-3-异氰酰基-2-甲基苯(2.27g,10.7mmol)及K2CO3(0.672g,4.86mmol)于DMF(49mL)中的混合物在65℃加热5h。将冷却的混合物分配于水与EtOAc之间。并用盐水洗涤有机相，干燥并浓缩，从而得到浅褐色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-5-(苯基硒基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(5.43g)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 557,559,561(M+H)+。
中间体44D：3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-(4-甲氧基苄基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
用30％过氧化氢水溶液(5.0mL,48.6mmol)处理3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-5-(苯基硒基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(5.43g,9.73mmol)于THF(97mL)中的溶液，并将混合物在室温搅拌30min。添加水并用EtOAc萃取混合物。用盐水洗涤有机相，干燥并浓缩。通过在硅胶(220g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(25％至70％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-(4-甲氧基苄基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(2.10g,54％产率)。质谱m/z 401,403(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.95(d,J＝7.9Hz,1H),7.70-7.65(m,1H),7.32-7.28(m,2H),7.25-7.22(m,2H),6.96-6.91(m,2H),5.86(d,J＝7.9Hz,1H),4.89(d,J＝2.4Hz,2H),3.74(s,3H),2.02(s,3H)。
中间体44E：3-(3-溴-2-甲基苯基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
用三氟甲磺酸(0.55mL)处理3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-(4-甲氧基苄基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0.87g,2.17mmol)于TFA(5.5mL)中的溶液并将混合物在室温搅拌过夜。将混合物缓慢倾倒于冰上并搅拌，同时温热至室温。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，从而得到紫色固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0.62g,96％产率)。质谱m/z 281,283(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.36(d,J＝4.4Hz,1H),7.67(dd,J＝6.5,2.8Hz,1H),7.60(dd,J＝7.7,5.9Hz,1H),7.27-7.21(m,2H),5.72(dd,J＝7.7,1.3Hz,1H),2.07(s,3H)。
中间体44F：3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-(4-氟苯基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
用吡啶(0.363mL,4.48mmol)处理乙酸铜(II)(0.543g,2.99mmol)、3-(3-溴-2-甲基苯基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0.42g,1.49mmol)、(4-氟苯基)硼酸(0.418g,2.99mmol)及经活化分子筛(750mg)于无水DCM(25mL)中的搅拌混悬液并在室温搅拌过夜。用DCM稀释混合物，经过滤，并用DCM及THF洗涤固体。用水洗涤合并的滤液，干燥并浓缩。通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(20％至40％的梯度)洗脱)，从而得到黄色玻璃状固体状3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-(4-氟苯基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0.36g,43％产率)。质谱m/z 375,377(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.91(d,J＝7.9Hz,1H),7.68(dd,J＝7.9,1.3Hz,1H),7.60-7.51(m,2H),7.40-7.22(m,4H),5.95(d,J＝7.9Hz,1H),2.21-2.12(m,3H)。
中间体44：
在110℃加热3-(3-溴-2-甲基苯基)-1-(4-氟苯基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(250mg,0.666mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(186mg,0.733mmol)、乙酸钾(131mg,1.33mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(16mg,0.020mmol)于二噁烷(4.4mL)中的混合物。3h后，添加额外PdCl2(dppf)DCM加合物并将混合物在110℃加热超过6h。用EtOAc稀释冷却的混合物，经过滤并用EtOAc洗涤固体。依次用饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤合并的滤液，并干燥并浓缩。通过在硅胶(24g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(25％至100％的梯度)洗脱)，从而得到不纯的黄色玻璃状固体状1-(4-氟苯基)-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(217mg)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 423(M+H)+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.90(d,J＝7.9Hz,1H),7.69(dd,J＝7.0,1.8Hz,1H),7.61-7.52(m,2H),7.40-7.26(m,4H),5.94(d,J＝7.9Hz,1H),2.24(s,3H),1.32(s,12H)。
中间体45
4-溴-3-氟-7-(2-羟基乙基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体45A：2-(3-氧代环己基)丙二酸二乙酯
用1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(4.52mL,30.0mmol)处理环己-2-烯酮(3.05mL,30mmol)及丙二酸二乙酯(4.58mL,30.0mmol)于THF(30mL)中的溶液并在50℃加热16h。将冷却的混合物倾倒至EtOAc中并依次用1M HCl水溶液及盐水洗涤。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机相并浓缩，从而得到油状2-(3-氧代环己基)丙二酸二乙酯(8.0g)，其未经进一步纯化即使用。质谱m/z 257(M+H)+。
中间体45B：5-溴-2-(1,3-二乙氧基-1,3-二氧代丙-2-基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸
将2-(3-氧代环己基)丙二酸二乙酯(15.26g,59.5mmol)及4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐[中间体24B](17.0g,59.5mmol)于乙酸(120mL)中的溶液回流加热2h，然后在室温搅拌过夜。通过过滤收集形成的沉淀物，从而得到白色固体。浓缩滤液并通过在硅胶(80g)上柱色谱法纯化(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱。使所得油状产物由EtOAc、乙醚与己烷的混合物结晶，从而得到额外固体，将该固体与第一批固体合并，从而得到白色固体状5-溴-2-(1,3-二乙氧基-1,3-二氧代丙-2-基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸(10.5g,49％产率)。质谱m/z 470,472(M+H)+。
中间体45C：2-(5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-基)丙二酸二乙酯
将5-溴-2-(1,3-二乙氧基-1,3-二氧代丙-2-基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-羧酸(0.981g,2.09mmol)、EDC(0.600g,3.13mmol)及HOBT(0.383g,2.50mmol)于THF(5mL)中的混合物在室温搅拌60min。用NH4OH(1.74mL,12.5mmol)处理混合物并在室温搅拌过夜。用EtOAc稀释混合物，依次用饱和Na2CO3水溶液及盐水洗涤。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机相并浓缩。通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至100％的梯度)洗脱)，从而得到微黄色固体状2-(5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-基)丙二酸二乙酯(440mg,45％产率)。质谱m/z 469,471(M+H)+。
中间体45D：2-(5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-基)丙二酸二乙酯
将2-(5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-基)丙二酸二乙酯(2.26g,4.82mmol)及2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌(2.30g,10.1mmol)于THF(30mL)中的溶液回流加热3h。用EtOAc稀释冷却的混合物并依次用饱和水性Na2CO3及盐水洗涤。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机相并进行部分浓缩。通过过滤收集形成的白色固体。使滤液通过硅胶垫(用EtOAc洗脱)，并浓缩流出物，从而得到额外固体。合并两批固体，从而得到白色固体状2-(5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-基)丙二酸二乙酯(1.86g,83％产率)。质谱m/z 465,467(M+H)+。
中间体45E：2-(5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-基)乙酸乙酯
将2-(5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-基)丙二酸二乙酯(1.30g,2.80mmol)、氯化钠(0.28g,7.01mmol)及水(0.25mL,14.01mmol)于DMSO(6mL)中的混合物在150℃加热20h。将冷却的混合物倾倒至水中，从而形成沉淀物。通过过滤收集沉淀物并干燥，然后用DCM研磨。通过过滤收集固体并干燥，从而得到灰色固体状2-(5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-基)乙酸乙酯(930mg,84％产率)。质谱m/z 393,395(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),8.54(d,J＝8.4Hz,1H),8.25(br.s.,1H),8.00(d,J＝10.1Hz,1H),7.72(s,1H),7.69(br.s.,1H),7.19(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),4.11(q,J＝7.0Hz,2H),3.82(s,2H),1.21(t,J＝7.2Hz,3H)。
中间体45：
用硼氢化锂(139mg,6.36mmol)处理2-(5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-基)乙酸乙酯(500mg,1.27mmol)于THF(10mL)中的溶液并在室温搅拌过夜。用饱和NH4Cl水溶液处理混合物并搅拌15min。用水稀释混合物并用EtOAc萃取两次。干燥合并的有机相并浓缩，并通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(30％至100％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状4-溴-3-氟-7-(2-羟基乙基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(310mg,69％产率)。质谱m/z351,353(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.58(s,1H),8.50(d,J＝8.4Hz,1H),8.24(br.s.,1H),7.98(d,J＝10.3Hz,1H),7.72-7.63(m,2H),7.15(dd,J＝8.4,1.3Hz,1H),4.68(t,J＝5.3Hz,1H),3.73-3.64(m,2H),2.90(t,J＝7.0Hz,2H)。
实施例1和2
3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(1)，和
3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(2)
制备1A：3-氯-4-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)
将4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](100mg,0.262mmol)、8-氟-1-甲基-3-(RS)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体2](161mg,0.393mmol)、四(三苯基膦)钯(15mg,0.013mmol)及2M K3PO4水溶液(0.26mL,0.524mmol)于THF(2mL)中的混合物在压力反应小瓶中在90℃加热2.5h。浓缩冷却的混合物，并通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用DCM-MeOH-NH4OH(90:9:1至97:2.7:0.3的梯度)洗脱。通过在硅胶(40g)上柱色谱法再次纯化所得不纯的产物(用EtOAc-己烷(50％至100％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状3-氯-4-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(110mg,68％产率)。质谱m/z567(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.46(s,1H),8.17-8.10(m,1H),7.76(s,1H),7.69(d,J＝1.1Hz,1H),7.59-7.53(m,1H),7.48(ddt,J＝13.9,8.1,1.8Hz,1H),7.39(dd,J＝12.4,7.8Hz,2H),7.28-7.19(m,2H),6.97(t,J＝8.5Hz,1H),3.87-3.93(m,3H),1.87(d,J＝1.8Hz,3H),1.65(s,3H),1.65(s,3H)。
实施例1和2：
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氯-4-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的四种阻转异构体的混合物的样品(90mg)：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(55:45)，120mL/min；样品制备：10mg/mL；注入：1mL。由柱洗脱的第二个峰得到白色固体状3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[实施例1]。异构体纯度经测定为97.7％。质谱m/z 567(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.46(s,1H),8.15(d,J＝7.3Hz,1H),7.75(s,1H),7.69(d,J＝1.1Hz,1H),7.59-7.54(m,1H),7.49(ddd,J＝13.9,8.0,1.7Hz,1H),7.43-7.36(m,2H),7.28-7.19(m,2H),6.97(d,J＝8.4Hz,1H),3.89(d,J＝7.9Hz,3H),1.88(s,3H),1.65(s,6H)。
由柱洗脱的第四个峰得到白色固体状3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[实施例2]。异构体纯度经测定为99.5％。质谱m/z 567(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.46(s,1H),8.13(d,J＝7.3Hz,1H),7.75(s,1H),7.69(d,J＝1.3Hz,1H),7.59-7.53(m,1H),7.48(ddd,J＝13.9,8.0,1.7Hz,1H),7.39(dd,J＝11.1,7.8Hz,2H),7.27-7.21(m,2H),6.99(d,J＝8.4Hz,1H),3.91(d,J＝7.9Hz,3H),1.88(s,3H),1.66(s,6H)。
将化合物溶解于过量甲醇中并在室温缓慢蒸发溶剂而得到甲醇溶剂化物(结晶形式M-1)，通过由此制得的晶体的单晶x射线分析证实了实施例2的绝对构型。晶胞尺寸：α＝90.0°，β＝90.0°，γ＝90.0°；空间群：P212121；实施例2的分子/不对称单位：1； 密度(经计算)＝1.391g/cm3。203K的原子份数坐标于表2中给出，且结构的描绘于图3中给出。
实施例3
3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(2-甲基-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一阻转异构体)
制备3A：3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)
将4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](100mg,0.262mmol)、1-甲基-3-(RS)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体4](154mg,0.393mmol)、2M K3PO4水溶液(0.26mL,0.524mmol)及四(三苯基膦)钯(15mg,0.013mmol)于THF(2mL)中的混合物在压力反应小瓶中在90℃加热4h。浓缩冷却的混合物并通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用DCM:MeOH:NH4OH(90:9:1至97:2.7:0.3的梯度)洗脱)。通过在硅胶(40g)上柱色谱法再次纯化所得不纯的产物(用EtOAc-己烷(50％至100％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(105mg,68％产率)。质谱m/z 549(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.46(s,1H),8.33(ddd,J＝11.8,7.9,1.4Hz,1H),7.80-7.74(m,2H),7.69(t,J＝1.7Hz,1H),7.58-7.52(m,1H),7.41(d,J＝7.5Hz,1H),7.38-7.30(m,3H),7.24(ddd,J＝13.9,8.4,1.7Hz,1H),6.98(dd,J＝12.8,8.4Hz,1H),3.67-3.76(m,3H),1.88(d,J＝1.8Hz,3H),1.65(s,3H),1.65(s,3H)。
实施例3：
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的四种阻转异构体的混合物的样品：柱：IB(2×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(65:35)，55mL/min。由柱洗脱的第三个峰得到白色固体状3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(2-甲基-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体。手性纯度经测定为97.7％。质谱m/z 549(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.45(s,1H),8.32(dd,J＝8.0,1.7Hz,1H),7.80-7.73(m,2H),7.69(d,J＝1.1Hz,1H),7.59-7.53(m,1H),7.44-7.31(m,4H),7.26(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.01(d,J＝8.4Hz,1H),3.72(s,3H),1.89(s,3H),1.66(s,6H)
实施例4
3-氯-4-(R)-(3-(1,8-二甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
制备4A：3-氯-4-(3-(1,8-二甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)
将4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](100mg,0.262mmol)、1,8-二甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体9](138mg,0.341mmol)、Cs2CO3(171mg,0.524mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(10.7mg,0.013mmol)于THF(2mL)及水(500μl)中的混合物在60℃加热18h。浓缩冷却的混合物，并通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(30％至100％的梯度)洗脱)，从而得到浅黄色固体状3-氯-4-(RS)-(3-(RS)-(1,8-二甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(97mg,57％产率)。质谱m/z 563(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.45(s,1H),8.21-8.15(m,1H),7.75(d,J＝0.9Hz,1H),7.69(d,J＝1.5Hz,1H),7.59-7.51(m,2H),7.44-7.40(m,1H),7.36(dd,J＝7.7,1.1Hz,1H),7.26-7.19(m,2H),6.98(t,J＝7.9Hz,1H),3.80(d,J＝9.9Hz,3H),2.70(d,J＝5.7Hz,3H),1.88(s,3H),1.64-1.66(m,6H)。
实施例4：
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氯-4-(3-(1,8-二甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的四种阻转异构体的混合物的样品(90mg)：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(55:45)，85mL/min；样品制备：18mg/mL，于MeOH中；注入：2.5mL。由柱洗脱的第四个峰得到白色固体状3-氯-4-(R)-(3-(1,8-二甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体(17mg)。手性纯度经测定大于99％。质谱m/z 563(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.45(s,1H),8.17(dd,J＝7.8,1.2Hz,1H),7.75(s,1H),7.69(d,J＝1.1Hz,1H),7.58-7.51(m,2H),7.42(dd,J＝7.9,1.1Hz,1H),7.36(dd,J＝7.7,1.1Hz,1H),7.27-7.19(m,2H),6.99(d,J＝8.4Hz,1H),3.81(s,3H),2.71(s,3H),1.87(s,3H),1.65(s,6H)。
实施例5和6
3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(R)-(7-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺，和
3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(S)-(7-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
将4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](200mg,0.524mmol)、7-甲氧基-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体14](221mg,0.524mmol)、Cs2CO3(512mg,1.57mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(21.4mg,0.026mmol)于THF(3mL)及水(0.50mL)中的混合物在60℃加热过夜，然后在90℃加热4h。浓缩冷却的混合物，并通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(50％至100％的梯度)洗脱)，从而得到3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(7-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(164mg,92％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离此物质：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(60:40)，85mL/min；样品制备：20.3mg/mL，于MeOH中；注入：0.75mL。
由柱洗脱的第三个峰得到3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(7-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体[实施例5](14mg)。手性纯度经测定大于99％。质谱m/z 579(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.43(s,1H),8.24(d,J＝8.8Hz,1H),7.73(s,1H),7.65(d,J＝1.1Hz,1H),7.55-7.49(m,1H),7.44-7.34(m,1H),7.35-7.31(m,1H),7.19(dd,J＝8.5,1.7Hz,1H),6.94(d,J＝8.4Hz,1H),6.85(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),6.69(d,J＝2.2Hz,1H),3.95(s,3H),3.63(s,3H),1.85(s,3H),1.62(s,6H)。
由柱洗脱的第四个峰得到3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(7-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的另一单一阻转异构体[实施例6](28mg)。手性纯度经测定大于99％。质谱m/z 579(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.41(s,1H),8.21(d,J＝8.8Hz,1H),7.71(s,1H),7.66(d,J＝1.1Hz,1H),7.55-7.49(m,1H),7.41-7.36(m,1H),7.35-7.31(m,1H),7.22(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),6.97(d,J＝8.4Hz,1H),6.84(dd,J＝9.0,2.2Hz,1H),6.70(d,J＝2.2Hz,1H),3.95(s,3H),3.65(s,3H),1.85(s,3H),1.63(s,6H)。
实施例7
3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(8-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
将4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](200mg,0.524mmol)、8-甲氧基-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体12](221mg,0.524mmol)、Cs2CO3(512mg,1.57mmol)、PdCl2(dppf)DCM加合物(21.4mg,0.026mmol)于THF(3mL)及水(0.50mL)中的混合物在压力反应小瓶中在60℃加热过夜，然后在90℃加热4小时。用DCM及MeOH稀释冷却的混合物，并浓缩。通过在硅胶(24g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(20％至55％的梯度)洗脱)，从而得到3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(8-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的四种阻转异构体的混合物(136mg,41％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离此物质：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(55:45)，85mL/min；样品制备：17mg/mL，于MeOH中；注入：1.0mL。由柱洗脱的第四个峰得到3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(8-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体(26mg,20％产率)。手性纯度经测定大于99％。质谱m/z 579(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.42(s,1H),7.90(dd,J＝7.2,2.3Hz,1H),7.71(s,1H),7.66(d,J＝1.1Hz,1H),7.55-7.49(m,1H),7.40-7.36(m,1H),7.35-7.31(m,1H),7.25-7.19(m,3H),6.97(d,J＝8.4Hz,1H),3.94(s,3H),3.91(s,3H),1.85(s,3H),1.63(s,6H)。
实施例8
3-氯-4-(R)-(3-(6-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
将4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](200mg,0.524mmol),6-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体13](215mg,0.524mmol)、Cs2CO3(512mg,1.57mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(21.4mg,0.026mmol)于THF(3mL)及水(1mL)中的混合物在60℃加热过夜，然后在90℃加热4h。浓缩冷却的混合物并通过在硅胶(40g)上柱色谱法将纯化残余物两次(用EtOAc-己烷(50％至100％的梯度)洗脱)，从而得到3-氯-4-(3-(6-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的四种阻转异构体的混合物(129mg,39％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离此物质：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH-MeCN(65:17.5:17.5)，85mL/min；样品制备：15.4mg/mL，于MeOH中；注入：0.5mL。由柱洗脱的第三个峰得到3-氯-4-(R)-(3-(6-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体(33mg)。异构体纯度经测定大于98％。质谱m/z 567(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.44(br.s.,1H),8.29(dd,J＝8.1,6.4Hz,1H),7.73(s,1H),7.66(s,1H),7.56-7.49(m,1H),7.36(dd,J＝15.2,7.3Hz,2H),7.22(d,J＝6.8Hz,1H),7.04-6.92(m,3H),3.65(s,3H),1.84(s,3H),1.63(s,6H)。
实施例9
3-氯-4-(R)-(3-(7-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
将4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](200mg,0.524mmol)、7-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体15](215mg,0.524mmol)、Cs2CO3(512mg,1.57mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(21.4mg,0.026mmol)于THF(3mL)及水(0.50mL)中的混合物在90℃加热4h。浓缩冷却的混合物，并通过在硅胶(220g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至40％的梯度)洗脱)，从而得到3-氯-4-(3-(7-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的四种阻转异构体的混合物(164mg,53％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离该物质：柱：Lux Cel2(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH-MeCN(62:19:19)，85mL/min；样品制备：30mg/mL，于MeOH中；注入：0.5mL。通过如下的手性超临界流体色谱法再次分离由柱洗脱的第三个峰分离的物质：柱：AS(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH-MeCN(68:16:16)，85mL/min；样品制备：11.4mg/mL，于MeOH中；注入：3.5mL。由柱洗脱的第一个峰得到白色固体状3-氯-4-(R)-(3-(7-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体(25mg,15％产率)。异构体纯度经测定大于98％。质谱m/z 567(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.46(s,1H),8.31(dd,J＝8.6,6.2Hz,1H),7.76(s,1H),7.68(d,J＝1.1Hz,1H),7.58-7.52(m,1H),7.38(ddd,J＝14.1,7.8,1.0Hz,2H),7.24(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.06-6.95(m,3H),3.67(s,4H),1.86(s,3H),1.65(s,6H)。
实施例10
3-氯-4-(RS)-(3-(RS)-(6,8-二氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(四种阻转异构体的混合物)
在反应小瓶中用2M K3PO4水溶液(0.039mL,0.079mmol)处理4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](10mg,0.026mmol)、6,8-二氟-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体16](14.1mg,0.034mmol)、1,1'-二(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(12.8mg,0.020mmol)与THF(2mL)的混合物。密封小瓶并使其进行三次用氮气的抽真空-填充循环。将混合物在室温搅拌过夜。分离混合物的各相，用EtOAc将水相萃取两次，并干燥合并的有机相并浓缩。通过在硅胶(40g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(80％至100％的梯度)洗脱。用MeOH研磨所分离物质，从而在过滤后得到固体。浓缩滤液并使其在硅胶(40g)上进行柱色谱法纯化(用DCM-MeOH-NH4OH(90:9:1至97:2.7:0.3的梯度)洗脱)，从而得到额外固体。合并两批固体，从而得到淡黄色固体状3-氯-4-(3-(6,8-二氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(164mg,71％产率)。质谱m/z 571(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,MeOH-d4)δ8.04(d,J＝2.0Hz,1H),7.70-7.68(m,1H),7.65(dd,J＝7.2,3.2Hz,1H),7.57-7.52(m,1H),7.43-7.34(m,3H),7.18-7.07(m,1H),6.90(dd,J＝8.4,3.0Hz,1H),1.84(s,3H),1.62-1.56(m,6H)。
实施例11
3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
用2M K3PO4水溶液(8.25mL,16.5mmol)处理4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](3.08g,8.07mmol)及8-氟-1-甲基(d3)-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体21](4.00g,9.68mmol)于THF(33mL)中的溶液。用氩气对混合物鼓泡约4min，同时在超声浴上振摇，然后用1,1'-二(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(447mg,0.686mmol)处理。密封反应容器并使其进行六次用氩气的抽真空-填充循环。将混合物在50℃搅拌16.5h，然后冷却至室温。用EtOAc稀释混合物并用水洗涤。用EtOAc将水相萃取两次并用盐水洗涤合并的有机相，干燥并浓缩。通过在硅胶(330g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(40％至100％的梯度)洗脱)，从而得到浅黄色-浅棕色固体状3-氯-4-(3-(S)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种非对映异构体的混合物)(3.877g,78％产率)。
通过如下的手性超临界流体色谱法分离通过此方法制得的物质(5.01g)：柱：AS-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，160mL/min,40℃；样品制备：22.75mg/mL，于2:1MeOH-二氯甲烷中；注入：1.4mL。浓缩含有由柱洗脱的第一个峰的经汇集的馏分，并在少量甲醇中超声处理残余物。通过过滤收集沉淀物，用甲醇淋洗并干燥，从而得到白色固体状3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(2.029g)。质谱m/z570(M+H-H2O)+,610(M+Na)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.12-8.03(m,2H),7.74(d,J＝1.1Hz,1H),7.67-7.53(m,2H),7.46(dd,J＝7.9,1.1Hz,1H),7.39-7.29(m,2H),7.17(dd,J＝8.5,1.7Hz,1H),6.96-6.87(m,1H),1.81(s,3H),1.61(d,J＝1.3Hz,6H)。[α]D:+85.1°(c2.38,CHCl3)。DSC熔点起始温度＝255.6℃(加热速率＝10℃/min)。
将化合物溶解于1:1:1的甲醇/乙腈/丙酮中并在室温缓慢蒸发溶剂而得到甲醇溶剂化物(结晶形式M-1)，通过由此制得的晶体的单晶x射线分析证实了实施例11的绝对构型。晶胞尺寸：α＝90.0°，β＝90.0°，γ＝90.0°；空间群：P212121；实施例11的分子/不对称单位：1；密度(经计算)＝1.381g/cm3。室温的原子份数坐标于表5中给出，且结构的描绘于图4中给出。将实施例11溶解于过量丙酮水溶液中并在室温缓慢蒸发溶剂而得到一水合物(结晶形式H-1)，通过由此制得的晶体的单晶x射线分析进一步证实了该绝对构型。晶胞尺寸：α＝90.0°，β＝90.0°，γ＝90.0°；空间群：P212121；实施例11的分子/不对称单位：1； 密度(经计算)＝1.396g/cm3。室温的原子份数坐标于表3中给出。
实施例12
3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
在小瓶中在超声处理下用氩气对4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](76mg,0.20mmol)、8-氟-1-甲基(d3)-3-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体22](75mg,0.18mmol)和Cs2CO3(118mg,0.363mmol)于THF(1.6mL)与水(0.40mL)中的混合物鼓泡1min。用PdCl2(dppf)DCM加合物(7.4mg,0.009mmol)处理混合物并密封小瓶并在45℃加热19h。用EtOAc及水稀释冷却的混合物。分离各层且用EtOAc再次萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，干燥并浓缩。使残余物在硅胶(12g)上进行柱色谱法纯化(用EtOAc-己烷(60％至100％的梯度)洗脱。通过反相HPLC(Luna Axia 5μC1830×100mm)纯化所得不纯的产物(用含有0.1％TFA的MeCN-水(10％至100％的梯度,30mL/min)洗脱。用饱和NaHCO3水溶液处理适当馏分并浓缩成水性混悬液。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并在真空下干燥，从而得到白色固体状3-氯-4-(3-(R)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的两种阻转异构体的混合物(60.9mg,57％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离此物质：柱：AD-H(5×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(60:40)，250mL/min,35℃；样品制备：7.5mg/mL，于MeOH中；注入：2.5mL。通过在硅胶上(4g)柱色谱法进一步纯化由柱洗脱的第二个峰的浓缩所获得的残余物(用EtOAc-己烷(40％至100％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(19.7mg,68％产率)。质谱m/z 570(M+H-H2O)+,610(M+Na)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.11-8.04(m,2H),7.74(d,J＝1.1Hz,1H),7.66-7.53(m,2H),7.46(dd,J＝7.9,1.1Hz,1H),7.38-7.28(m,2H),7.14(dd,J＝8.5,1.7Hz,1H),6.90(d,J＝8.6Hz,1H),1.80(s,3H),1.60(d,J＝0.9Hz,6H)。
实施例13
3-氯-4-(3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)
将4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](0.360g,0.943mmol)、8-氟-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体17](0.392g,0.990mmol)、PdCl2(dppf)DCM加合物(0.039g,0.047mmol)及Cs2CO3(0.615g,1.89mmol)于二噁烷(10mL)及水(2.5mL)中的混合物在100℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物并用水洗涤，干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(0至50％然后至70％(含有1％MeOH)的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状3-氯-4-(3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(0.361g,67％产率)。质谱m/z354(M+H-H2O)+,394(M+Na)+。1H NMR(500MHz,MeOH-d4)δ8.09(d,J＝1.1Hz,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.81-7.69(m,1H),7.64-7.54(m,2H),7.48(dd,J＝7.8,1.1Hz,1H),7.43-7.29(m,1H),7.31-7.24(m,1H),7.18(dd,J＝8.3,1.7Hz,1H),7.16-7.07(m,1H),6.92(dd,J＝8.6,5.3Hz,1H),1.94-1.71(m,3H),1.65-1.50(m,6H)。
实施例14
3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氯-4-(3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的四种阻转异构体的混合物[实施例13]的样品(250mg)：柱：AD-H(5×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(60:40)，220mL/min,35℃,100巴；样品制备：21mg/mL，于MeOH中；注入：3.0mL。由柱洗脱的第三个峰得到白色固体状3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一阻转异构体)(24mg)。手性纯度经测定大于95％。质谱m/z 553(M+H-H2O)+,593(M+Na)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.09(s,1H),7.95(d,J＝7.9Hz,1H),7.74(d,J＝1.1Hz,1H),7.60-7.54(m,2H),7.54-7.43(m,1H),7.37(d,J＝7.5Hz,1H),7.28(d,J＝4.6Hz,1H),7.11(dd,J＝8.6,1.5Hz,1H),6.91(d,J＝8.6Hz,1H),2.00-1.76(m,3H),1.69-1.52(m,6H)。
实施例15和16
3-氰基-4-(S)-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
制备15A：3-氰基-4-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(4种阻转异构体的混合物)
使4-溴-3-氰基-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体23](0.400g,1.08mmol)、8-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体2](0.573g,1.40mmol)、Cs2CO3(0.700g,2.15mmol)及二噁烷(5mL)的混合物进行3次用氮气的抽真空-填充循环。用PdCl2(dppf)DCM加合物(0.053g,0.064mmol)处理混合物并使其再进行2次用氮气的抽真空-填充循环。将混合物在88℃加热2天。用EtOAc稀释冷却的混合物，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为50％、75％、85％及100％)洗脱。通过反相制备型HPLC纯化所得不纯的产物，从而得到白色固体状3-氰基-4-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(0.200g,32％产率)。质谱m/z 576(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.96(s,1H),8.45(s,1H),8.35(br.s.,1H),8.00-7.94(m,1H),7.92(s,1H),7.77-7.68(m,2H),7.60-7.52(m,2H),7.41(dd,J＝6.6,2.2Hz,1H),7.38-7.29(m,1H),7.13(t,J＝10.1Hz,1H),6.85(t,J＝8.1Hz,1H),5.05(d,J＝2.0Hz,1H),3.74(dd,J＝8.1,2.6Hz,3H),1.73(s,3H),及1.48-1.43(m,6H)。
实施例15和16
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氰基-4-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(4种阻转异构体的混合物)的样品：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(65:35)，150mL/min,45℃。由柱洗脱的第二个峰得到3-氰基-4-(S)-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的一种单一阻转异构体[实施例15]。手性纯度经测定大于94％。由柱洗脱的第四个峰得到3-氰基-4-(S)-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的另一单一阻转异构体[实施例16]。手性纯度经测定为99％。各单一阻转异构体的质谱与四种阻转异构体的混合物的质谱相同。
实施例17
3-氟-4-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(四种阻转异构体的混合物)
将4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](0.080g,0.219mmol)、8-氟-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体2](0.094g,0.230mmol)、PdCl2(dppf)DCM加合物(9.0mg,11.0μmol)及Cs2CO3(0.143g,0.438mmol)于二噁烷(8.0mL)及水(2.0mL)中的混合物在100℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物并进行过滤。用水洗涤滤液，干燥并浓缩。通过反相制备型HPLC纯化残余物，随后通过在硅胶上柱色谱法纯化(用EtOAc-己烷(50％至100％的梯度)洗脱)，从而得到灰白色固体状3-氟-4-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(0.018g,15％产率)。质谱m/z 551(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,MeOH-d4)δ7.66(d,J＝10.4Hz,1H),7.51(s,1H),7.47-7.34(m,3H),7.29(t,J＝7.2Hz,2H),7.22-7.11(m,1H),7.09-6.97(m,1H),6.90(t,J＝8.1Hz,1H),3.81-3.63(m,3H),2.06(br.s.,3H),及1.77-1.58(m,6H)。
实施例18
3-氟-4-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(两种阻转异构体的混合物)
使4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](0.100g,0.274mmol)、8-氟-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体10](0.146g,0.356mmol)、2M K3PO4水溶液(0.41mL,0.821mmol)及THF(2.0mL)的混合物进行3次用氮气的抽真空-填充循环。用1,1'-二(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(8.9mg,0.014mmol)处理混合物，并使其再进行2次用氮气的抽真空-填充循环。将混合物在室温搅拌过夜。用EtOAc稀释混合物，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为50％、62％、75％及85％)洗脱)，从而得到灰白色固体状3-氟-4-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)(0.084g,53％产率)。质谱m/z 551(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.39(s,1H),8.21(br.s.,1H),7.99-7.92(m,3H),7.84(s,1H),7.73(ddt,J＝14.4,8.0,1.4Hz,1H),7.59(br.s.,1H),7.54-7.47(m,3H),7.40(dd,J＝7.2,1.7Hz,1H),7.34(tt,J＝7.9,4.0Hz,1H),7.04(ddd,J＝11.5,8.6,1.5Hz,1H),6.88(t,J＝8.0Hz,1H),4.99(d,J＝2.2Hz,1H),3.74(dd,J＝8.2,1.0Hz,3H),1.77(s,3H),及1.49-1.42(m,6H)。
3-氟-4-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)的替代合成：
使4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](0.050g,0.137mmol)、8-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体10](0.073g,0.178mmol)、Cs2CO3(0.089g,0.274mmol)及二噁烷(0.8mL)的混合物进行3次用氮气的抽真空-填充循环。用PdCl2(dppf)DCM加合物(6.7mg,8.21μmol)处理混合物，使且再进行2次用氮气的抽真空-填充循环，并在52℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为50％、62％及75％)洗脱)，从而得到白色固体状3-氟-4-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)(0.034g,42％产率)。
实施例19
3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氟-4-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)[实施例18]的样品：柱：AS-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，120mL/min,40℃,100巴；样品制备：3.6mg/mL，于MeOH中；注入：2.0mL。由柱洗脱的第一个峰得到3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。手性纯度经测定大于99.4％。质谱m/z 551(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.39(s,1H),8.21(br.s.,1H),8.00-7.92(m,2H),7.84(s,1H),7.73(ddd,J＝14.4,8.0,1.4Hz,1H),7.59(br.s.,1H),7.55-7.47(m,2H),7.40(dd,J＝7.2,1.4Hz,1H),7.33(td,J＝8.0,4.0Hz,1H),7.05(dd,J＝8.3,1.4Hz,1H),6.89(d,J＝8.3Hz,1H),4.99(s,1H),3.74(d,J＝8.0Hz,3H),3.17(d,J＝5.3Hz,3H),1.77(s,3H),及1.46(d,J＝4.2Hz,6H)。
实施例20
3-氟-4-(3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(4种阻转异构体的混合物)
使4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](0.104g,0.285mmol)、8-氟-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体17](0.147g,0.370mmol)、Cs2CO3(0.186g,0.570mmol)及二噁烷(1.6mL)的混合物进行3次用氮气的抽真空-填充循环。用PdCl2(dppf)DCM加合物(14mg,0.017mmol)处理混合物，并使其再进行两次用氮气的抽真空-填充循环。将混合物于88℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过反相制备型HPLC纯化残余物。用饱和NaHCO3水溶液处理适当馏分并浓缩成水性残余物，其用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机层并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为50％、65％及75％)洗脱)，从而得到白色固体状3-氟-4-(3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(0.029g,18％产率)。质谱m/z 537(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.81(br.s.,1H),11.39(d,J＝1.4Hz,1H),8.21(br.s.,1H),7.95(dd,J＝10.7,2.1Hz,1H),7.86-7.80(m,2H),7.64(t,J＝9.2Hz,1H),7.59(br.s.,1H),7.53-7.50(m,2H),7.42-7.38(m,1H),7.26-7.20(m,1H),7.07-6.99(m,1H),6.97-6.88(m,1H),4.98(d,J＝9.7Hz,1H),1.81-1.75(m,3H),及1.48-1.41(m,6H)。
实施例21和22
3-氟-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺，和
3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氟-4-(3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(4种阻转异构体的混合物)[实施例20]的样品：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(75:25)，180mL/min,40℃,100巴。由柱洗脱的第三个峰得到3-氟-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[实施例21]。手性纯度经测定为98％。质谱m/z 537(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.83(br.s.,1H),11.38(s,1H),8.21(br.s.,1H),7.95(d,J＝10.8Hz,1H),7.83(d,J＝1.1Hz,1H),7.81(d,J＝8.0Hz,1H),7.65-7.57(m,2H),7.54-7.47(m,2H),7.39(dd,J＝6.7,1.9Hz,1H),7.20(br.s.,1H),7.03-6.99(m,1H),6.99-6.94(m,1H),4.97(s,1H),1.77(s,3H),及1.44(d,J＝5.3Hz,6H)。
由柱洗脱的第四个峰得到3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[实施例22]。手性纯度经测定为95％。质谱m/z 537(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.80(br.s.,1H),11.39(s,1H),8.21(br.s.,1H),7.95(d,J＝10.8Hz,1H),7.85-7.78(m,2H),7.59(br.s.,2H),7.54-7.46(m,2H),7.38(d,J＝6.1Hz,1H),7.19(br.s.,1H),7.05(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),6.90(d,J＝8.3Hz,1H),4.99(s,1H),1.77(s,3H),及1.46(d,J＝4.7Hz,6H)。
制备3-氟-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[实施例21]的替代操作：
使4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](0.118g,0.323mmol)、8-氟-3-(R)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体18](0.166g,0.420mmol)、2M K3PO4水溶液(0.485mL,0.969mmol)及THF(2.0mL)的混合物进行3次用氮气的抽真空-填充循环。用1,1'-二(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(11mg,0.016mmol)处理混合物并使其再进行2次用氮气的抽真空-填充循环。将混合物在室温搅拌过夜，用EtOAc稀释，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为50％、62％、75％及85％)洗脱)，从而得到灰白色固体状3-氟-4-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)(0.117g,65％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离此物质的样品：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，180mL/min,45℃；样品制备：30mg/mL；注入：1.0mL。由柱洗脱的第二个峰得到3-氟-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。手性纯度经测定大于99.9％。质谱m/z 537(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.83(br.s.,1H),11.38(s,1H),8.21(br.s.,1H),7.95(d,J＝10.8Hz,1H),7.83(d,J＝1.1Hz,1H),7.81(d,J＝8.0Hz,1H),7.65-7.57(m,2H),7.54-7.47(m,2H),7.39(dd,J＝6.7,1.9Hz,1H),7.20(br.s.,1H),7.03-6.99(m,1H),6.99-6.94(m,1H),4.97(s,1H),1.77(s,3H),及1.44(d,J＝5.3Hz,6H)。
制备3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[实施例22]的替代操作：
按照与用于替代制备实施例21的操作相同的操作，将4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](0.118g,0.323mmol)及8-氟-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体19](0.166g,0.420mmol)转化成灰白色固体状3-氟-4-(3-(S)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)(0.119g,66％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离此物质的样品：柱：AS-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(75:25)，180mL/min,45℃；样品制备：10mg/mL；注入：1.0mL。由柱洗脱的第二个峰得到3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。手性纯度经测定大于99.9％。
实施例23
3-氯-4-(3-(3-(4-氟苯基)-2,6-二氧代-2,3-二氢嘧啶-1(6H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(四种阻转异构体的混合物)
用氩气对4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](135mg,0.354mmol),1-(4-氟苯基)-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮[中间体44](164mg,0.389mmol)及四(三苯基膦)钯(20mg,0.018mmol)于甲苯(5.3mL)及乙醇(1.8mL)中的混合物鼓泡若干分钟。用2M Na2CO3水溶液(354μl,0.707mmol)处理混合物，用氩气再次鼓泡，并在90℃加热16h。将冷却的混合物分配于EtOAc与水之间。干燥有机相并浓缩。通过在硅胶(24g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(25％至100％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状3-氯-4-(3-(3-(4-氟苯基)-2,6-二氧代-2,3-二氢嘧啶-1(6H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(103mg,49％产率)。质谱m/z 579(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.52(d,J＝4.5Hz,1H),8.29(br.s.,1H),8.13(d,J＝2.5Hz,1H),7.91(dd,J＝7.9,6.4Hz,1H),7.85-7.80(m,1H),7.64-7.54(m,3H),7.53-7.45(m,2H),7.36(dt,J＝11.9,8.7Hz,2H),7.25(ddd,J＝7.3,4.3,1.2Hz,1H),7.03-6.83(m,1H),6.73-6.47(m,1H),5.97(dd,J＝7.9,3.5Hz,1H),5.04-4.92(m,1H),1.75(d,J＝1.5Hz,3H),1.47-1.33(m,6H)。
实施例24
3-氯-4-(R)-(3-(3-(4-氟苯基)-2,6-二氧代-2,3-二氢嘧啶-1(6H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氯-4-(3-(3-(4-氟苯基)-2,6-二氧代-2,3-二氢嘧啶-1(6H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)[实施例23]的样品(103mg)：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(60:40)，85mL/min；样品制备：6.1mg/mL，于1:1MeCN-MeOH中；注入：1.0mL。通过在硅胶上(4g)柱色谱法进一步纯化由柱洗脱的第四个峰(用EtOAc-己烷(60％至80％的梯度)洗脱)，从而得到灰白色固体状3-氯-4-(R)-(3-(3-(4-氟苯基)-2,6-二氧代-2,3-二氢嘧啶-1(6H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体(16mg,13％产率)。质谱m/z 579(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.06(s,1H),7.78(d,J＝7.9Hz,1H),7.73(d,J＝1.1Hz,1H),7.57-7.50(m,3H),7.47-7.43(m,1H),7.32(dd,J＝7.5,1.1Hz,1H),7.27(t,J＝8.7Hz,2H),7.11(dd,J＝8.5,1.7Hz,1H),6.88(d,J＝8.4Hz,1H),6.01(d,J＝7.9Hz,1H),1.84(s,3H),1.58(d,J＝3.1Hz,6H)。
实施例25
6-氯-5-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)
将(S)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体31](100mg,0.259mmol)、8-氟-1-甲基-3-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体2](112mg,0.272mmol)、Cs2CO3(169mg,0.519mmol)及PdCl2(dppf)DCM加合物(16.9mg,0.021mmol)于THF(4.3mL)及水(1.1mL)中的混合物在50℃加热17.5h。用EtOAc稀释冷却的混合物，依次用水及盐水洗涤，干燥并浓缩。通过在硅胶(24g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(50％至80％的梯度)洗脱。通过制备型HPLC进一步纯化不纯的产物，从而得到6-氯-5-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(76mg,50％产率)。质谱m/z 589(M+H)+。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.89(s,1H),8.13(br.s.,1H),7.94(d,J＝7.9Hz,1H),7.76-7.68(m,2H),7.46(br.s.,1H),7.40-7.28(m,3H),7.22-7.16(m,1H),4.21-4.13(m,1H),3.77-3.64(m,3H),2.95-2.82(m,1H),2.40(d,J＝16.3Hz,1H),1.94-1.70(m,3H),1.70-1.61(m,3H),1.58-1.48(m,1H),1.16-1.02(m,7H)。
实施例26
6-氯-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(单一阻转异构体)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离6-氯-5-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)[实施例25]的样品(76mg)：柱：OD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，180mL/min,35℃,100巴；样品制备：8.35mg/mL，于MeOH-DCM(4:1)中；注入：3.0mL。通过在硅胶上(4g)柱色谱法进一步纯化由柱洗脱的第一个峰(用EtOAc-己烷(50％至80％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状6-氯-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(33.6mg,47％产率)。质谱m/z589(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.06-7.99(m,1H),7.69(s,1H),7.60(ddd,J＝14.3,8.1,1.4Hz,1H),7.40(d,J＝7.5Hz,1H),7.34-7.27(m,2H),7.24(dd,J＝7.5,1.1Hz,1H),3.85(d,J＝7.9Hz,3H),2.90(dd,J＝16.5,5.1Hz,1H),2.56(dd,J＝16.4,12.0Hz,1H),2.10-2.02(m,1H),2.00-1.84(m,2H),1.77(s,3H),1.75-1.68(m,1H),1.28(d,J＝3.1Hz,1H),1.22(d,J＝2.2Hz,6H)。
实施例27
6-氟-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(R)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(单一阻转异构体)
制备27A：6-氟-5-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(R)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(2种阻转异构体的混合物)
使(R)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(单一对映异构体)[中间体25](5.00g,13.5mmol)、8-氟-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体10](6.94g,16.9mmol)、2M K3PO4水溶液(20.3mL,40.6mmol)及THF(60mL)的混合物进行三次用氮气的抽真空-填充循环。用1,1'-二(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(441mg,677μmol)处理混合物并使其再进行2次用氮气的抽真空-填充循环。将混合物在室温搅拌过夜。用EtOAc稀释混合物，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为50％、62％、75％及85％)洗脱)，从而得到灰白色固体状6-氟-5-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(R)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)(6.77g,87％产率)。质谱m/z 573(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.79-10.74(m,1H),8.05(br.s.,1H),7.98-7.93(m,1H),7.76-7.69(m,1H),7.57-7.51(m,1H),7.43(br.s.,1H),7.40-7.26(m,4H),4.19-4.13(m,1H),3.74-3.68(m,3H),2.94-2.84(m,1H),2.49-2.35(m,2H),1.92-1.80(m,3H),1.76-1.68(m,3H),1.62-1.52(m,1H),及1.12-1.06(m,6H)。
实施例27：
通过如下的手性超临界流体色谱法分离6-氟-5-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(R)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)的样品：柱：AS-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，120mL/min,35℃,100巴；样品制备：9mg/mL，于MeOH中；注入：1.7mL。由柱洗脱的第一个峰得到6-氟-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(R)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺。手性纯度经测定大于99.5％。质谱m/z 573(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),8.05(br.s.,1H),7.96(d,J＝7.8Hz,1H),7.72(ddd,J＝14.3,8.0,1.2Hz,1H),7.55(d,J＝10.8Hz,1H),7.44(br.s.,1H),7.40-7.36(m,1H),7.35-7.28(m,3H),4.18(s,1H),3.72(d,J＝8.0Hz,3H),2.89(dd,J＝16.9,4.4Hz,1H),2.45-2.37(m,1H),2.02-1.93(m,1H),1.91-1.82(m,2H),1.57(td,J＝11.7,3.6Hz,1H),及1.15-1.11(m,1H)。
实施例28
6-氟-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(单一阻转异构体)
按照用于制备实施例27的操作，将(S)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(单一对映异构体)[中间体26](0.045g,0.122mmol)及8-氟-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体10](0.065g,0.158mmol)转化成黄色固体状6-氟-5-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)(0.035g,49％产率)。通过手性超临界流体色谱法使用用于分离实施例27的条件分离此物质的样品，得到(作为由柱洗脱的第一个峰)6-氟-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺。手性纯度经测定大于99.5％。通过x射线结晶学确定相对构型及绝对构型。质谱m/z 573(M+H)+。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),8.05(br.s.,1H),7.94(dd,J＝7.9,1.2Hz,1H),7.56-7.52(m,1H),7.43(br.s.,1H),7.40-7.36(m,1H),7.35-7.30(m,2H),7.28(dd,J＝7.5,1.4Hz,1H),4.15(s,1H),3.75-3.70(m,3H),2.90(dd,J＝16.8,4.6Hz,1H),2.47-2.39(m,1H),1.93-1.82(m,3H),1.74(s,3H),1.57(td,J＝11.7,4.2Hz,1H),1.16-1.11(m,1H),及1.10(d,J＝1.9Hz,6H)。[α]D:+63.8°(c 2.1,CHCl3)。DSC熔点起始温度＝202.9℃(加热速率＝10℃/min)。
将化合物溶解于过量甲醇中并在室温缓慢蒸发溶剂而得到二甲醇溶剂化物(结晶形式M2-1)，通过由此制得的晶体的单晶x射线分析证实了实施例28的绝对构型。晶胞尺寸：α＝90.0°，β＝94.1°，γ＝90.0°；空间群：P21；实施例28的分子/不对称单位：1； 密度(经计算)＝1.301g/cm3。173K的原子份数坐标于表6中给出，且结构的描绘于图5中给出。
实施例28的替代合成：
使(S)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体11](5.00g,13.54mmol)、8-氟-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体10](6.67g,16.25mmol)、磷酸三钾(2M水溶液)(20.31mL,40.6mmol)及四氢呋喃(25mL)中的混合物进行3次用氮气的抽真空-填充循环。用1,1′-二(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(0.441g,0.677mmol)处理混合物并使混合物再进行2次用氮气的抽真空-填充循环。将混合物在室温搅拌过夜，然后用EtOAc稀释，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为50％、62％、75％及85％)洗脱)，从而得到白色固体状6-氟-5-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3-(S)-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(6.58g,85％产率)。
通过手性超临界流体色谱法分离通过此方法制得的物质(40.03g,69.9mmol)，从而得到(2S,5R)-6-氟-5-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺。通过以下达成进一步纯化：将此物质悬浮于甲醇中，超声处理5min，通过过滤收集固体，用甲醇淋洗所收集固体并在室温减压干燥，从而得到白色固体(22.0g,90％产率)。
实施例29
4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-3-甲基-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
使4-溴-7-(2-羟基丙-2-基)-3-甲基-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体28](0.091g,0.252mmol)、8-氟-1-甲基-3-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体10](0.134g,0.327mmol)、2M K3PO4水溶液(0.378mL,0.756mmol)及THF(2.0mL)的混合物进行三次用氮气的抽真空-填充循环。用1,1'-二(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(8.2mg,0.013mmol)处理混合物并使其进行两次额外的用氮气的抽真空-填充循环。将混合物在室温搅拌过夜，然后用EtOAc稀释，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为50％、62％、75％及85％)洗脱)，从而得到淡黄色固体状4-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-3-甲基-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)(0.087g,59％产率)。质谱m/z 547(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.20(s,1H),8.10(br.s.,1H),7.97(ddd,J＝7.9,7.2,1.0Hz,1H),7.90(s,1H),7.78(s,1H),7.76-7.68(m,1H),7.53-7.48(m,1H),7.44(dd,J＝7.9,1.2Hz,1H),7.40(br.s.,1H),7.36-7.30(m,1H),7.23(dd,J＝7.4,1.2Hz,1H),6.98(ddd,J＝12.0,8.4,1.5Hz,1H),6.68(t,J＝7.9Hz,1H),4.94(d,J＝3.1Hz,1H),3.73(dd,J＝8.2,3.5Hz,3H),2.17(s,3H),1.66(s,3H),及1.48-1.41(m,6H)。
通过如下的手性超临界流体色谱法分离此物质的样品：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(65:35)，150mL/min,40℃；样品制备：15mg/mL，于MeOH中；注入：1.5mL。由柱洗脱的第二个峰得到4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-3-甲基-9H-咔唑-1-甲酰胺。手性纯度经测定大于99％。质谱m/z 547(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.19(s,1H),8.10(br.s.,1H),7.97(dd,J＝7.9,1.0Hz,1H),7.90(s,1H),7.78(d,J＝1.1Hz,1H),7.72(ddd,J＝14.3,8.0,1.5Hz,1H),7.53-7.48(m,1H),7.44(dd,J＝7.8,1.1Hz,1H),7.40(br.s.,1H),7.33(td,J＝8.0,4.2Hz,1H),7.23(dd,J＝7.5,1.1Hz,1H),6.99(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),6.69(d,J＝8.6Hz,1H),4.94(s,1H),2.20-2.14(m,3H),1.66(s,3H),及1.45(d,J＝3.6Hz,6H)。
实施例30和31
4-(R)-(3-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一阻转异构体)
制备30A：4-(3-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)
使4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](0.098g,0.268mmol)、5-氯-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体33](0.144g,0.349mmol)、Cs2CO3(0.175g,0.537mmol)及二噁烷(1.6mL)的混合物进行三次用氮气的抽真空-填充循环。用PdCl2(dppf)DCM加合物(0.013g,0.016mmol)处理混合物并使其再进行2次用氮气的抽真空-填充循环。将混合物于52℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物，依次用水及盐水洗涤，并干燥并浓缩。通过反相制备型HPLC纯化残余物。用饱和NaHCO3水溶液处理适当馏分并浓缩。将残余物分配在EtOAc与水之间，并用盐水洗涤有机层。用EtOAc萃取水层，并干燥合并的有机层并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法将残余物纯化两次(用EtOAc-己烷(依次为50％、65％及75％)洗脱)，从而得到黄色固体状4-(3-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(0.013g,8％产率)。质谱m/z 571,573(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.39(d,J＝5.3Hz,1H),8.30-8.24(m,1H),8.21(br.s.,1H),7.95(dd,J＝10.5,1.7Hz,1H),7.84(s,1H),7.60(d,J＝7.2Hz,2H),7.55-7.47(m,2H),7.42-7.39(m,1H),7.04-6.99(m,1H),6.93(d,J＝8.6Hz,0.6H),6.84(d,J＝8.6Hz,0.4H),6.57(td,J＝7.3,3.5Hz,1H),6.00(d,J＝8.6Hz,1H),4.98(s,1H),1.78(d,J＝1.9Hz,3H),及1.45(d,J＝3.9Hz,6H)。
实施例30和31
通过如下的手性超临界流体色谱法分离4-(3-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(4种阻转异构体的混合物)的样品：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(55:45)，120mL/min,45℃,100巴；样品制备：5.6mg/mL，于MeOH中；注入：1.7mL。由柱洗脱的第二个峰得到4-(R)-(3-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的一种单一阻转异构体[实施例30]。手性纯度经测定大于97.5％。质谱m/z 571(M+H)+。由柱洗脱的第四个峰得到4-(R)-(3-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的另一单一阻转异构体[实施例31]。手性纯度经测定大于99.5％。质谱m/z 553(M+H-H2O)+。
实施例32和33
3-氯-4-(R)-(3-(R)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(32)，和
3-氯-4-(R)-(3-(S)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(33)
(单一阻转异构体)
用氩气对4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](1.11g,2.91mmol)、5-氯-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体33](1.00g,2.42mmol)及Cs2CO3(1.58g,4.85mmol)于THF(8mL)及水(2mL)中的混合物鼓泡3min。用PdCl2(dppf)DCM加合物(0.099g,0.121mmol)处理混合物并在60℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物并依次用水及盐水洗涤。用含有少量MeOH的DCM萃取合并的水层。干燥合并的有机层并浓缩直至形成浅棕色沉淀物为止，通过过滤去除该沉淀物。浓缩滤液并通过在硅胶(120g)上柱色谱法纯化(用EtOAc-DCM(依次为70％、80％及100％)洗脱)，从而得到黄色固体状3-氯-4-(3-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(993mg,69％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离该物质：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(50:50)，150mL/min,45℃,100巴；样品制备：5.6mg/mL，于MeOH-DCM(1:1)中；注入：3mL。由柱洗脱的第二个峰得到3-氯-4-(R)-(3-(R)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[实施例32]。质谱m/z 587(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.50(s,1H),8.27(s,2H),8.14(s,1H),7.84(d,J＝1.1Hz,1H),7.59(d,J＝6.8Hz,1H),7.56-7.46(m,2H),7.29(dd,J＝7.4,1.2Hz,1H),7.01(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),6.64(d,J＝8.6Hz,1H),6.55(t,J＝7.3Hz,1H),5.98(s,1H),5.75(s,1H),4.98(s,1H),1.71(s,3H),1.46-1.42(m,6H)。
由柱洗脱的第四个峰得到3-氯-4-(R)-(3-(S)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[实施例33]。质谱m/z 569(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.49(s,1H),8.34-8.24(m,2H),8.14(s,1H),7.84(d,J＝1.1Hz,1H),7.60(d,J＝6.6Hz,1H),7.56-7.46(m,2H),7.28(dd,J＝7.4,1.4Hz,1H),6.99(dd,J＝8.5,1.7Hz,1H),6.72(d,J＝8.4Hz,1H),6.57(t,J＝7.3Hz,1H),5.99(s,1H),5.75(s,1H),4.98(s,1H),1.71(s,3H),1.45-1.42(m,6H)。[α]D:+332.34°(c 2.0,CHCl3)。
实施例33的替代制备：
用氮气对4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](50.5g,132mmol)、5-氯-2-(S)-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体35](60.1g,146mmol)及Cs2CO3(86g,265mmol)于THF(342mL)及水(85mL)中的混合物鼓泡5min，然后用PdCl2(dppf)DCM加合物(11.9g,14.57mmol)处理。继续用氮气再鼓泡5min，然后将混合物在62℃在氮气下加热20h。使混合物冷却至室温，在搅拌下添加MeOH(300mL)，15min后添加水(2L)，从而得到锈褐色胶状物。去除上清液，用水将胶状残余物洗涤两次，然后在搅拌下于EtOAc(2L)中悬浮1h。过滤混合物，将滤液浓缩成约1-1.5L并用庚烷(3L)处理。将混合物搅拌2天，通过过滤收集沉淀物，用庚烷洗涤并在真空下干燥，从而得到黄色固体(104g)。将固体溶解于THF中，吸收于上，在真空下干燥，置于硅胶填料上并用庚烷/EtOAc(10:90)洗脱，从而得到橙黄色油状物(74.87g)。使该物质在硅胶(3kg)上进行柱色谱法纯化(用EtOAc-己烷(40％至90％的梯度)洗脱)，从而得到黄色泡沫状3-氯-4-(3-(S)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)(44g,51％产率)。为去除残余钯，将残余物溶解于EtOAc(约300mL)中，并用10％的N-乙酰基-L-半胱氨酸水溶液(500mL)搅拌过夜。用10％的N-乙酰基-L-半胱氨酸溶液(500mL)将有机层再次处理6h，然后依次用5％NH4OH(两次)及盐水洗涤，干燥并浓缩成黄色泡沫状物(43g)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离该物质：柱：AS-H(2×50cm,10μm)；流动相：CO2-MeOH(55:45)，140mL/min,40℃,100巴；样品制备：56mg/mL，于MeOH-DCM(1:1)中；注入：3.33mL。由柱洗脱的第一个峰得到黄色固体状3-氯-4-(R)-(3-(S)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[实施例33](18.3g,24％产率)。
将化合物溶解于过量甲醇中并在室温缓慢蒸发溶剂而得到二甲醇溶剂化物(结晶形式M2-1)，通过由此制得的晶体的单晶x射线分析证实了实施例33的绝对构型。晶胞尺寸：α＝90.0°，β＝90.0°，γ＝90.0°；空间群：P212121；实施例33的分子/不对称单位：1；密度(经计算)＝1.346g/cm3。173K的原子份数坐标于表7中给出，且结构的描绘于图6中给出。
实施例34
3-氯-4-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(四种阻转异构体的混合物)
用氮气对4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](0.076g,0.200mmol)、5-氟-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体37](0.072g,0.182mmol)及Cs2CO3(0.118g,0.363mmol)于THF(3mL)及水(0.75mL)中的混合物鼓泡2min，然后用PdCl2(dppf)DCM加合物(7.4mg,9.09μmol)处理。用氮气继续鼓泡30sec并密封反应容器。将混合物在室温搅拌过夜，然后用EtOAc稀释并依次用水及盐水洗涤。用DCM萃取合并的水层。干燥合并的有机层并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷洗脱)，从而得到黄色固体状3-氯-4-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(0.049g,43％产率)。质谱m/z 571(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.52-11.48(m,1H),8.27(br.s.,1H),8.15-8.09(m,2H),7.84(s,1H),7.59(br.s.,1H),7.56-7.46(m,2H),7.30-7.26(m,1H),7.03-6.97(m,1H),6.72(d,J＝8.4Hz,1H),6.60-6.51(m,2H),5.85(s,1H),4.98(s,1H),1.71(s,3H),1.46-1.42(m,6H)。
实施例35和36
3-氯-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氯-4-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)[实施例34]的样品(690mg)：柱：IB(2x 25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(63:37)，50mL/min,45℃,100巴。由柱洗脱的第一个峰得到3-氯-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的一种单一阻转异构体[实施例35]。质谱m/z 571(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.50(s,1H),8.27(br.s.,1H),8.14(s,1H),8.11(d,J＝7.5Hz,1H),7.84(d,J＝1.1Hz,1H),7.59(br.s.,1H),7.56-7.51(m,1H),7.49-7.46(m,1H),7.29(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.23(dd,J＝10.3,7.5Hz,1H),7.01(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),6.65(d,J＝8.6Hz,1H),6.54(td,J＝7.4,5.2Hz,1H),5.85(s,1H),4.98(s,1H),1.71(s,3H),1.48-1.41(m,6H)。
由柱洗脱的第三个峰得到3-氯-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的另一单一阻转异构体[实施例36]。质谱m/z 553(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.49(s,1H),8.27(br.s.,1H),8.14(s,1H),8.10(d,J＝7.7Hz,1H),7.83(s,1H),7.59(br.s.,1H),7.56-7.45(m,2H),7.30-7.20(m,2H),6.99(d,J＝8.6Hz,1H),6.72(d,J＝8.6Hz,1H),6.56(td,J＝7.5,5.3Hz,1H),5.85(s,1H),4.98(s,1H),1.71(s,3H),1.45-1.42(m,6H)。
实施例37
3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(5-甲氧基-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(四种阻转异构体的混合物)
用氮气对4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](0.051g,0.135mmol)、5-甲氧基-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体32](0.050g,0.122mmol)及Cs2CO3(0.080g,0.245mmol)于THF(2mL)及水(0.5mL)中的混合物鼓泡2min，然后用PdCl2(dppf)DCM加合物(5.0mg,6.12μmol)处理。用氮气继续鼓泡30sec并密封反应容器。将混合物于60℃加热过夜。用DCM及MeOH稀释冷却的混合物，干燥并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷洗脱)，从而得到黄色固体状3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(5-甲氧基-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(32.8mg,44％产率)。质谱m/z 583(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.51-11.47(m,1H),8.27(br.s.,1H),8.14(d,J＝1.5Hz,1H),7.93(d,J＝7.5Hz,1H),7.83(s,1H),7.59(br.s.,1H),7.55-7.45(m,3H),7.30-7.25(m,1H),7.03-6.97(m,1H),6.71(d,J＝8.1Hz,1H),6.56(q,J＝7.6Hz,1H),5.90(s,1H),4.98(s,1H),3.91(s,3H),1.69(s,3H),1.45-1.42(m,6H)。
实施例38和39
3-氯-4-(R)-(3-(5,7-二氧代-5H-噻唑并[3,2-c]嘧啶-6(7H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一阻转异构体)
用氩气对4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](0.139g,0.364mmol)、6-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-5H-噻唑并[3,2-c]嘧啶-5,7(6H)-二酮[中间体36](0.127g,0.331mmol)及Cs2CO3(0.215g,0.661mmol)于THF(3.0mL)及水(0.75mL)中的混合物鼓泡3min，然后用PdCl2(dppf)DCM加合物(0.013g,0.017mmol)处理。用氩气对混合物鼓泡30秒以上并密封反应容器。将混合物在50℃搅拌5h。用EtOAc稀释冷却的混合物并依次用水及盐水洗涤。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机层并浓缩。通过在硅胶(80g)上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(90％，然后100％)洗脱)，从而得到浅棕色固体状3-氯-4-(3-(5,7-二氧代-5H-噻唑并[3,2-c]嘧啶-6(7H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(62.7mg,32％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离此物质：柱：AD-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(60:40)，85mL/min；样品制备：9mg/mL，于MeOH-DMSO中；注入：2mL。由柱洗脱的第三个峰得到3-氯-4-(R)-(3-(5,7-二氧代-5H-噻唑并[3,2-c]嘧啶-6(7H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的一种单一阻转异构体[实施例38]。质谱m/z 559(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.50(s,1H),8.27(br.s.,1H),8.14(s,1H),7.83(d,J＝0.9Hz,1H),7.69(dd,J＝4.6,0.7Hz,1H),7.59(br.s.,1H),7.54-7.49(m,1H),7.47-7.43(m,1H),7.26(dd,J＝7.4,1.2Hz,1H),7.03(d,J＝4.6Hz,1H),6.99(dd,J＝8.6,1.5Hz,1H),6.62(d,J＝8.4Hz,1H),6.28(s,1H),4.98(s,1H),1.70(s,3H),1.45-1.42(m,6H)。
由柱洗脱的第四个峰得到3-氯-4-(R)-(3-(5,7-二氧代-5H-噻唑并[3,2-c]嘧啶-6(7H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的另一单一阻转异构体[实施例39]。质谱m/z 541(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.49(s,1H),8.27(br.s.,1H),8.13(s,1H),7.83(d,J＝0.9Hz,1H),7.73-7.65(m,2H),7.59(br.s.,1H),7.54-7.43(m,2H),7.26(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.05(d,J＝4.6Hz,1H),6.98(dd,J＝8.5,1.7Hz,1H),6.71(d,J＝8.6Hz,1H),6.28(s,1H),1.70(s,3H),1.43(d,J＝2.9Hz,6H)。
实施例40和41
3-氟-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(单一阻转异构体)
制备40A：3-氟-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)
用氮气对4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](0.200g,0.548mmol)、5-氟-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮[中间体37](0.260g,0.657mmol)及Cs2CO3(0.357g,1.10mmol)于二噁烷(4mL)及水(1mL)中的混合物鼓泡2min，然后用PdCl2(dppf)DCM加合物(0.022g,0.027mmol)处理。用氮气继续鼓泡30sec并密封反应容器。将混合物于60℃加热过夜。用EtOAc稀释冷却的混合物并依次用水及盐水洗涤。用EtOAc萃取合并的水层，并干燥合并的有机层并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷洗脱)，从而得到黄色固体状3-氟-4-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(0.194g,63％产率)。
实施例40和41：
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氟-4-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)的样品：柱：OD-H(5×25cm,5μm)；流动相：CO2-IPA(55:45)，120mL/min,50℃,100巴；样品制备：6.8mg/mL，于MeOH-CHCl3(1:1)中；注入：1mL。由柱洗脱的第一个峰得到3-氟-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的一种单一阻转异构体[实施例40]。质谱m/z 555(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.40(s,1H),8.21(br.s.,1H),8.12(d,J＝7.5Hz,1H),7.95(d,J＝10.8Hz,1H),7.84(d,J＝1.1Hz,1H),7.60(br.s.,1H),7.56-7.46(m,2H),7.41(dd,J＝7.4,1.4Hz,1H),7.23(dd,J＝10.2,7.4Hz,1H),7.02(dd,J＝8.6,1.5Hz,1H),6.88-6.82(m,1H),6.56(td,J＝7.4,5.2Hz,1H),5.86(s,1H),4.98(s,1H),1.77(s,3H),1.47-1.42(m,6H)。
由柱洗脱的第三个峰得到3-氟-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的另一单一阻转异构体[实施例41]。质谱m/z 537(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.41(s,1H),8.29-8.17(m,1H),8.13(d,J＝7.3Hz,1H),7.96(d,J＝10.8Hz,1H),7.85(d,J＝1.1Hz,1H),7.65-7.57(m,1H),7.57-7.47(m,2H),7.43(d,J＝1.5Hz,1H),7.28-7.21(m,1H),7.02(d,J＝1.5Hz,1H),6.90-6.83(m,1H),6.64-6.53(m,1H),5.87(s,1H),4.99(s,1H),1.78(s,3H),1.48-1.44(m,6H)。
3-氟-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一阻转异构体)[实施例41]的替代制备：
使4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](6.00g,16.4mmol)、5-氟-2-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-1,3(2H)-二酮(单一对映异构体)[中间体38](7.81g,19.7mmol)、2M K3PO4水溶液(24.6mL,49.3mmol)及THF(70mL)的混合物进行三次用氮气的抽真空-填充循环。用1,1'-二(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(0.535g,0.821mmol)处理混合物，并使其再进行两次用氮气的抽真空-填充循环。将混合物在室温搅拌过夜。用EtOAc稀释混合物，依次用水及盐水洗涤，并干燥。过滤水层并将所收集固体添加至有机层中。浓缩有机层，并通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用EtOAc-己烷(依次为50％、62％、75％、85％及100％)洗脱)，从而得到黄色固体状3-氟-4-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(两种阻转异构体的混合物)(8.55g,94％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离此物质的样品(与其他批次的相同物质合并)：柱：IC(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(50:50)，165mL/min,45℃,100巴；样品制备：55mg/mL，于MeOH-THF-DMSO(2:1:1)中；注入：3mL。由柱洗脱的第一个峰得到3-氟-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体[实施例41]。
实施例42
3-氯-4-(2-氯-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)
用氮气对4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](36mg,0.094mmol)、(Z)-4-((2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)亚氨基)-1-甲基-1H-苯并[d][1,3]噁嗪-2(4H)-酮[中间体40](42.8mg,0.104mmol)、EtOH(1mL)、甲苯(1mL)及2M Na2CO3水溶液(0.16mL,0.311mmol)的混合物鼓泡5min。用四(三苯基膦)钯(8.7mg,7.55μmol)处理混合物，并密封反应容器并在90℃加热16h。将冷却的混合物分配于EtOAc与水之间，并干燥有机相并浓缩。通过在硅胶上(4g)柱色谱法纯化残余物(用含有1％TEA的MeOH-DCM(0至5％的梯度)洗脱。使用制备型HPLC(AxiaC1830×100mm)进一步纯化所得物质(用含有0.1％TFA的MeCN-水(20％至100％的梯度,30mL/min)洗脱)。用饱和NaHCO3水溶液处理适当馏分并浓缩。将残余物分配于EtOAc与水之间，并用盐水洗涤有机相，干燥并浓缩，从而得到白色固体状3-氯-4-(2-氯-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(2.5mg,4％产率)。质谱m/z 569(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.38-8.23(m,1H),7.73(d,J＝1.5Hz,2H),7.70-7.66(m,1H),7.64(s,1H),7.60-7.55(m,1H),7.51-7.45(m,1H),7.37-7.28(m,2H),7.26-7.20(m,1H),7.10-6.78(m,1H),3.70(s,2H),3.67(s,1H),1.65(s,4H),1.64(s,2H)。
实施例43
3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一阻转异构体)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氯-4-(2-氯-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)[实施例42]的样品(110mg)：柱：Lux Cel-4(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(60:40)，85mL/min；样品制备：6.7mg/mL，于MeOH-丙酮(9:1)中；注入：3.0mL。由柱洗脱的第四个峰得到黄色固体状3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体(20mg,18％产率)。质谱m/z569(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.44(s,1H),8.41-8.17(m,1H),7.78-7.72(m,2H),7.68(s,1H),7.65-7.60(m,1H),7.59-7.54(m,1H),7.46(d,J＝7.5Hz,1H),7.34-7.28(m,2H),7.25(s,1H),7.01(d,J＝8.6Hz,1H),3.70(s,3H),1.64(s,6H)。
实施例44
3-氯-4-(2-氯-3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(四种阻转异构体的混合物)
用氮气对4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](30mg,0.079mmol)、3-(2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-8-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体41](40.6mg,0.094mmol)、EtOH(1mL)、甲苯(1mL)及2M Na2CO3水溶液(0.13mL,0.26mmol)的混合物鼓泡5min。用四(三苯基膦)钯(7.3mg,6.29μmol)处理混合物，并密封反应容器并在90℃加热16h。将冷却的混合物分配于EtOAc与水之间，并干燥有机相并浓缩。通过在硅胶(12g)上柱色谱法纯化残余物(用含有1％TEA的MeOH-DCM(0至5％的梯度)洗脱。使用制备型HPLC(Axia C1830×100mm)进一步纯化所得物质(用含有0.1％TFA的MeCN-水(20％至100％的梯度,10min,30mL/min)洗脱)。用饱和NaHCO3水溶液处理适当馏分并浓缩。将残余物分配于EtOAc与水之间，并用盐水洗涤有机相，干燥并浓缩，从而得到白色固体状3-氯-4-(2-氯-3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(6mg,11％产率)。质谱m/z 587(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.46(s,1H),7.74(s,1H),7.68(s,1H),7.66-7.61(m,1H),7.59-7.54(m,1H),7.51-7.46(m,2H),7.27-7.17(m,2H),7.06-6.88(m,1H),3.88(dd,J＝11.6,8.0Hz,3H),1.64(s,6H)。19F NMR(400MHz,氯仿-d)δ-121.34。
实施例45
3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一阻转异构体)
通过如下的手性超临界流体色谱法分离3-氯-4-(2-氯-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)[实施例44]的样品(100mg)：柱：Lux Cel-4(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH(60:40)，85mL/min,50℃,100巴；样品制备：6.7mg/mL，于MeOH-丙酮(1:1)中；注入：3.0mL。由柱洗脱的第四个峰得到黄色固体状3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体(9.3mg)。质谱m/z 569(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.45(s,1H),8.11(d,J＝7.3Hz,1H),7.73(s,1H),7.72(d,J＝9.0Hz,1H),7.68(d,J＝1.1Hz,1H),7.67-7.61(m,1H),7.56(dd,J＝7.9,1.8Hz,1H),7.54-7.52(m,1H),7.51-7.42(m,2H),7.26-7.19(m,2H),7.00(d,J＝8.6Hz,1H),3.90(d,J＝8.1Hz,3H),1.64(s,6H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-121.33。
实施例46
4-(2-氯-3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
(四种阻转异构体的混合物)
用氮气对4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](40mg,0.110mmol)、3-(2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-8-氟-1-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体41](47mg,0.110mmol)、Cs2CO3(107mg,0.329mmol)、二噁烷(8mL)及水(2mL)的混合物鼓泡10min。用PdCl2(dppf)DCM加合物(7.2mg,8.76μmol)处理混合物，并在60℃加热过夜。将冷却的混合物分配在EtOAc与水之间。干燥有机相并浓缩。通过在硅胶上柱色谱法纯化残余物(用MeOH-DCM(0至5％的梯度)洗脱)，从而得到白色固体状4-(2-氯-3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(20mg,31％产率)。质谱m/z 569(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.46(s,1H),7.74(s,1H),7.68(s,1H),7.66-7.61(m,1H),7.59-7.54(m,1H),7.51-7.46(m,2H),7.27-7.17(m,2H),7.06-6.88(m,1H),3.88(dd,J＝11.6,8.0Hz,3H),1.64(s,6H)。19F NMR(400MHz,氯仿-d)δ-121.34,-127.34。
实施例47
3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一阻转异构体)
用氮气对4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体3](103mg,0.269mmol)、3-(2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯基)-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮[中间体42](140mg,0.336mmol)、THF(5mL)、2M K3PO4水溶液(0.504mL,1.01mmol)的混合物鼓泡15min。用1,1'-二(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(17.5mg,0.027mmol)处理混合物并在室温搅拌过夜。浓缩混合物，并将残余物在EtOAc与水之间分配。干燥有机相并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物。用饱和NaHCO3水溶液处理适当馏分并浓缩。用EtOAc萃取水性残余物。依次用水及盐水洗涤有机相，并干燥并浓缩，从而得到3-氯-4-(2-氯-3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(四种阻转异构体的混合物)(30mg,15％产率)。通过如下的手性超临界流体色谱法分离此物质：柱：OJ-H(3×25cm,5μm)；流动相：CO2-MeOH-MeCN(65:17.5:17.5)，85mL/min；样品制备：6.8mg/mL，于MeOH-CHCl3(1:1)中；注入：3.0mL。由柱洗脱的第一个峰得到3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺的单一阻转异构体。质谱m/z 573(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.63-11.48(m,1H),8.39-8.25(m,1H),8.17-8.12(m,1H),7.99-7.92(m,1H),7.88-7.85(m,1H),7.85-7.81(m,1H),7.81-7.76(m,1H),7.76-7.70(m,1H),7.70-7.62(m,2H),7.57-7.46(m,1H),7.32-7.20(m,1H),7.13-6.99(m,1H),6.77-6.63(m,1H),5.10-4.98(m,1H),1.47-1.45(m,6H)。19F NMR(400MHz,氯仿-d)δ-129.63。
表10中的化合物通过类似于上文所阐述的操作使用所阐述的中间体制备，或通过类似于所阐述的方法制备。
表10
比较实施例75
7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
比较实施例75于美国专利8,084,620中作为实施例76-15公开且其根据其中所阐述的操作来制备。
比较实施例76
7-(2-羟基丙-2-基)-3-甲基-4-(2-甲基-3-(4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-1-甲酰胺
比较实施例76于WO 2011/159857中作为实施例38公开且其根据其中所阐述的操作来制备。
生物学测定
本发明化合物的药理学性质可通过多种生物学测定来证实。已用本发明化合物实施以下示例性生物学测定。
人重组Btk酶测定
向V形底384孔板中加入测试化合物、人重组体Btk(1nM,InvitrogenCorporation)、荧光素化肽(fluoresceinated peptide)(1.5μM)、ATP(20μM)和测定缓冲液(20mM HEPES(pH 7.4)、10mM MgCl2、0.015％Brij35和4mM DTT于1.6％DMSO中的溶液)，其中最终体积为30μL。在室温孵育60分钟后，通过向每个样品中加入45μl 35mM EDTA来终止反应。在Caliper3000(Caliper,Hopkinton,MA)上通过对荧光底物和磷酸化产物进行电泳分离来对反应混合物进行分析。通过与作为100％抑制的无酶对照反应和作为0％抑制的无抑制剂对照进行比较来计算抑制数据。生成剂量响应曲线以确定抑制50％激酶活性所需的浓度(IC50)。将化合物以10mM溶于DMSO中，然后以11个浓度进行评价。
Ramos FLIPR测定
将密度为2×106个细胞/ml的Ramos RA1 B细胞(ATCC CRL-1596)于不含酚红(phenol red)的RPMI(Invitrogen 11835-030)和含有0.1％BSA(Sigma A8577)的50mMHEPES(Invitrogen 15630-130)中的溶液加到一半体积的钙负荷缓冲液(calcium loadingbuffer)(用于丙磺舒敏感性测定的BD批次试剂盒(BD bulk kit for probenecidsensitive assay),批号640177)中，然后在室温避光孵育1小时。使负荷有染料的细胞沉淀(pellete)(Beckmann GS-CKR,1200rpm,室温,5分钟)，然后在室温重新悬浮于不含酚红的RPMI及50mM HEPES和10％FBS中至密度为1×106个细胞/ml。将150μl等份液(150,000个细胞/孔)铺于96孔经聚D-赖氨酸涂覆的测定板(BD 354640)中并短暂离心(Beckmann GS-CKR,800rpm,5分钟,没有制动)。接下来，将50μl化合物于0.4％DMSO/不含酚红的RPMI+50mMHEPES+10％FBS中的稀释液加到孔中，然后将板在室温避光孵育1小时。如上所述将测定板短暂离心，然后测量钙水平。
使用FLIPR1(Molecular装置)，通过加入山羊抗人IgM(Invitrogen AHI0601)至5μg/ml来刺激细胞。历时180秒测量细胞内钙浓度的变化，并且相对于在仅存在刺激的情况下观测到的峰钙水平来确定抑制百分比。
Jak2酪氨酸激酶测定
已观察到具有抵抗Jak2酪氨酸激酶活性的化合物在临床试验中在人类患者中引起血小板减少症、贫血及嗜中性白血球减少症(例如参见，Pardanani,A.,Leukemia,26:1449-1451(2012))。经EPO及TPO发生Jak2信号传导，该EPO及TPO分别控制红细胞及血小板的增殖。因此，抑制Jak2酪氨酸激酶可在临床学中潜在地导致副作用。期望具有优于Jak2酪氨酸激酶的改善选择性的Btk抑制剂以便最小化与Jak2酪氨酸激酶的抑制相关的脱靶副作用。
所述测定在V形底384孔板中实施。最终测定体积为30μL，其通过将15μl酶及底物(荧光素化肽及ATP)及测试化合物添加于测定缓冲剂(100mM HEPES pH 7.4,10mM MgCl2,25mMβ-甘油磷酸酯,0.015％Brij 35表面活性剂及4mM DTT)制得。通过Jak2酪氨酸激酶与底物及测试化合物的组合起始反应。将反应混合物在室温培育60分钟，且通过将45μL 35mMEDTA添加至各样品中进行终止。在Caliper3000上通过电泳分离荧光底物及磷酸化产物来分析反应混合物。通过与无酶对照反应(100％抑制)及仅媒介物反应(0％抑制)进行比较计算抑制数据。测定中试剂的最终浓度为ATP,30μM；Jak2荧光肽,1.5μM；Jak2,1nM；及DMSO,1.6％。生成剂量响应曲线以确定抑制50％的激酶活性所需的浓度(IC50)。以10mM将化合物溶解于DMSO中，并在11个浓度进行评估，其各自以一式两份进行。通过非线性回归分析推导IC50值。
对B细胞中的BCR刺激的CD69表达的全血测定
全血测定中Btk抑制剂化合物在抑制人类B细胞上的CD69表达中的功效可用于预测临床学中的有效剂量并最小化潜在副作用。预计全血CD69表达测定中具有较高活性的Btk抑制剂化合物所需要的剂量低于具有较低活性的化合物，且预计其会引起较少的不期望的副作用。(Uetrecht,Chem.Res.Toxicol.,12:387-395(1999)；Nakayama,DrugMetabolism and Disposition,37(9):1970-1977(2009)；Sakatis,Chem.Res.Toxicol.(2012))。
为测量BCR刺激的B细胞，用各种浓度的测试化合物处理ACD-A人类全血并在37℃以及振摇下用30μg/mL AffiniPure F(ab')2片段山羊抗人类IgM(Jackson 109-006-1299–内毒素经清除)及10ng/mL人类IL-4(PeproTech200-04)刺激18h。用人类γ球蛋白(Jackson009-000-002)封阻细胞，并用FITC共轭的小鼠抗人类CD20(BD Pharmingen 555622)及PE共轭的小鼠抗人类CD69单克隆抗体(BD Pharmingen 555531)染色，溶解并固定，然后进行洗涤。在对CD20阳性B细胞群实施门控后，通过平均荧光强度(MFI)对CD69表达的量进行定量，如通过FACS分析所测量。
在B细胞上的BCR刺激的CD69表达的全血测定中，CD69IC50值降低表明Btk抑制剂化合物的功效增加。
表11
已将如通过实施例1至74所示例的本发明化合物与分别公开于美国专利8,084,620及WO 2011/159857中的比较实施例75及76进行比较，且已发现所述本发明化合物是有优势的。本发明化合物的令人惊讶的优势在于具有Btk抑制活性以及Btk抑制活性优于Jak2抑制活性的改善的激酶选择性的组合。如表11中所显示，在所报告测试中，实施例1至74显示的令人惊讶的优势在于Btk抑制活性的功效以及Btk抑制活性优于Jak2抑制活性的改善的激酶选择性的组合，如通过Jak2/Btk IC50值的比率所表征。Jak2/Btk IC50值的比值中的更大的值表明Btk激酶优于Jak2激酶的选择性增加。实施例1至74的Btk IC50值小于5nM且Jak2/Btk IC50值的比率为150及更大。相比之下，比较实施例75及76具有的Btk IC50值分别为2.6nM和6.9nM且具有的Jak2/Btk IC50值的比率分别为92和29。
此外，与比较实施例75相比，如通过实施例1至74所示例的本发明化合物在全血BCR刺激的CD69表达测定中还可具有改善的效能。如表11中所显示，在所报告测试中，实施例1至74显示的令人惊讶的优势在于Btk抑制活性的功效、Btk抑制活性优于Jak2抑制活性的改善的激酶选择性以及在全血BCR刺激的CD69表达测定中改善的效能的组合。实施例1至74的Btk IC50值小于5nM，Jak2/Btk IC50值的比率为150及更大，且CD69IC50值为260nM及更小。相比之下，比较实施例75的Btk IC50值为2.6nM，Jak2/Btk IC50值的比率为92，且CD69IC50值为650nM。

Claims (15)

1.式(I)化合物，
其中：
两个虚线表示两个单键或两个双键；
Q为
R1为F、Cl、-CN或-CH3；
R2为Cl或-CH3；
R3为-C(CH3)2OH或-CH2CH2OH；
Ra为H或-CH3；
各Rb独立地为F、Cl、-CH3和/或-OCH3；且
n为0、1或2。
2.权利要求1的化合物，其具有式(IA)的结构：
3.权利要求1-2中任一项的化合物，其中：
Q为：
4.权利要求1-2中任一项的化合物，其具有式(IIA-1)的结构：
其中R3为-C(CH3)2OH。
5.权利要求1的化合物，其具有式(IB)的结构：
6.权利要求1和5中任一项的化合物，其中：
Q为：
7.权利要求1和5中任一项的化合物，其具有式(IIB-1)的结构：
其中R3为-C(CH3)2OH。
8.权利要求1和5中任一项的化合物，其具有式(IIIB-2)的结构：
其中R3为-C(CH3)2OH。
9.权利要求1的化合物，其中该化合物选自：
3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(2-甲基-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(1,8-二甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(R)-(7-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(S)-(7-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(8-甲氧基-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(6-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(7-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(6,8-二氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氰基-4-(S)-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氟-4-(R)-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氟-4-(R)-(3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氟-4-(R)-(3-(R)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氟-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(3-(4-氟苯基)-2,6-二氧代-2,3-二氢嘧啶-1(6H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；6-氯-5-(R)-(3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺；6-氯-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺；6-氟-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(R)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺；6-氟-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺；4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-3-甲基-9H-咔唑-1-甲酰胺；4-(R)-(3-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(R)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(S)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(R)-(3-(5-甲氧基-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(3-(5,7-二氧代-5H-噻唑并[3,2-c]嘧啶-6(7H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氟-4-(R)-(3-(5-氟-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(R)-(1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(R)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；4-(R)-(2-氯-3-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；3-氯-4-(R)-(2-氯-3-(8-氟-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺；
10.权利要求1的化合物，其中该化合物为：
3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(2)的晶体形式M-1，其特征在于等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝90.0°
γ＝90.0°
空间群：P212121
分子/不对称单位：1
经计算的密度＝1.391g/cm3，
其中形式M-1的晶胞参数在203K的温度测得；
3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(11)的晶体形式H-1，其特征在于等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝90.0°
γ＝90.0°
空间群：P212121
分子/不对称单位：1
经计算的密度＝1.396g/cm3，
其中形式H-1的晶胞参数在室温的温度测得；
3-氯-4-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基(d3)-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(11)的晶体形式M-1，其特征在于等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝90.0°
γ＝90.0°
空间群：P212121
分子/不对称单位：1
经计算的密度＝1.381g/cm3，
其中形式M-1的晶胞参数在室温的温度测得；
6-氟-5-(R)-(3-(S)-(8-氟-1-甲基-2,4-二氧代-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-甲基苯基)-2-(S)-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(28)的晶体形式M2-1，其特征在于等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝94.1°
γ＝90.0°
空间群：P21
分子/不对称单位：1
经计算的密度＝1.301g/cm3，
其中形式M2-1的晶胞参数在173K的温度测得；或
3-氯-4-(R)-(3-(S)-(5-氯-1,3-二氧代-1H-吡啶并[1,2-c]嘧啶-2(3H)-基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(33)的晶体形式M2-1，其特征在于等于以下的晶胞参数：
晶胞尺寸：
α＝90.0°
β＝90.0°
γ＝90.0°
空间群：P212121
分子/不对称单位：1
经计算的密度＝1.346g/cm3，
其中形式M2-1的晶胞参数在173K的温度测得。
11.权利要求1的化合物，其具有以下结构：
12.权利要求1和5中任一项的化合物，其具有以下结构：
13.药物组合物，其包含权利要求1至12中任一项的化合物和药用载体。
14.权利要求1至12中任一项的化合物在制备用于治疗自身免疫疾病或慢性炎性疾病的药物中的用途。
15.权利要求1至12中任一项的化合物，用于治疗自身免疫疾病或慢性炎性疾病的疗法中。
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Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102345381B1 (ko) 2013-06-25 2021-12-29 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 키나제 억제제로서 유용한 카르바졸 카르복스아미드 화합물
SI3461821T1 (sl) 2014-10-24 2020-09-30 Bristol-Myers Squibb Company Spojine indol karboksamida, uporabne kot kinazni inhibitorji
EA032361B1 (ru) * 2014-10-24 2019-05-31 Бристол-Майерс Сквибб Компани Трициклические соединения
KR102519536B1 (ko) 2014-10-24 2023-04-06 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 트리시클릭 회전장애이성질체 화합물
MX2018015793A (es) 2016-07-01 2019-03-21 Brio Device Llc Estilete de intubación con alimentación de video.
CN108101905A (zh) * 2016-11-24 2018-06-01 中国科学院上海药物研究所 嘧啶并[5,4-b]吲嗪或嘧啶并[5,4-b]吡呤化合物、其制备方法及用途
US11590167B2 (en) 2016-12-03 2023-02-28 Juno Therapeutic, Inc. Methods and compositions for use of therapeutic T cells in combination with kinase inhibitors
CN110312713B (zh) * 2016-12-20 2022-08-12 百时美施贵宝公司 用于制备四氢咔唑甲酰胺化合物的方法
WO2019208805A1 (ja) 2018-04-27 2019-10-31 小野薬品工業株式会社 Ｂｔｋ阻害活性を有する化合物を有効成分として含む自己免疫疾患の予防および／または治療剤
CA3224945A1 (en) 2018-07-31 2020-02-06 Loxo Oncology, Inc. Spray-dried dispersions, formulations, and polymorphs of (s)-5-amino-3-(4-((5-fluoro-2-methoxybenzamido)methyl)phenyl)-1-(1,1,1-trifluoropropan-2-yl)-1h-pyrazole-4-carboxamide
WO2022140246A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 Hangzhou Jijing Pharmaceutical Technology Limited Methods and compounds for targeted autophagy
WO2022212893A1 (en) 2021-04-02 2022-10-06 Biogen Ma Inc. Combination treatment methods of multiple sclerosis
AU2023220628A1 (en) * 2022-02-15 2024-05-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Processes for the preparation of 1,2,3,5,6,7-hexahydro-s-indacene derivatives

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101268048A (zh) * 2005-09-16 2008-09-17 瑟瑞耐克斯有限公司 咔唑衍生物
WO2011159857A1 (en) * 2010-06-16 2011-12-22 Bristol-Myers Squibb Company Carboline carboxamide compounds useful as kinase inhibitors
TN2011000274A1 (en) * 2008-12-19 2012-12-17 Bristol Myers Squibb Co Carbazole carboxamide compounds useful as kinase inhibitors

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4200750A (en) 1977-01-07 1980-04-29 Westwood Pharmaceuticals Inc. 4-Substituted imidazo [1,2-a]quinoxalines
CA2140722A1 (en) 1994-01-24 1995-07-25 Joseph A. Jakubowski Beta-carboline thromboxane synthase inhibitors
US7405295B2 (en) 2003-06-04 2008-07-29 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and method of inhibition of Bruton's tyrosine kinase by such compounds
US7393848B2 (en) 2003-06-30 2008-07-01 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain heterocyclic substituted imidazo[1,2-A]pyrazin-8-ylamines and methods of inhibition of Bruton's tyrosine kinase by such compounds
US20050288295A1 (en) 2003-11-11 2005-12-29 Currie Kevin S Certain imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines, method of making, and method of use thereof
US7713973B2 (en) 2004-10-15 2010-05-11 Takeda Pharmaceutical Company Limited Kinase inhibitors
SG159549A1 (en) 2004-11-10 2010-03-30 Cgi Pharmaceuticals Inc Imidazo[1,2-a] pyrazin-8-ylamines useful as modulators of kinase activity
KR101317119B1 (ko) 2004-12-17 2013-10-11 그렌마크 파머수티칼스 에스. 아. 염증성 및 알레르기성 장애의 치료에 유용한 신규한헤테로사이클릭 화합물
BRPI0608252A2 (pt) 2005-03-10 2010-04-06 Cgi Pharmaceuticals Inc entidades quìmicas, composições farmacêuticas compreendendo as mesmas, métodos utilizando as referidas entidades quìmicas e uso das referidas entidades quìmicas
US20070078136A1 (en) 2005-09-22 2007-04-05 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic compounds useful as kinase modulators
US7723336B2 (en) 2005-09-22 2010-05-25 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic compounds useful as kinase modulators
AU2006316322B2 (en) 2005-11-22 2011-08-25 Merck Canada Inc. Tricyclic compounds useful as inhibitors of kinases
WO2008033858A2 (en) 2006-09-11 2008-03-20 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Kinase inhibitors, and methods of using and identifying kinase inhibitors
SG174810A1 (en) 2006-09-11 2011-10-28 Matrix Lab Ltd Dibenzofuran derivatives as inhibitors of pde-4 and pde-10
US20090062251A1 (en) 2007-08-17 2009-03-05 Astrazeneca Ab Novel Compounds 002
WO2009075830A1 (en) 2007-12-13 2009-06-18 Merck & Co., Inc. Inhibitors of janus kinases
US8318132B2 (en) 2008-02-14 2012-11-27 Siemens Medical Solutions Usa, Inc. Imaging agents for detecting neurological dysfunction
GB0809360D0 (en) 2008-05-22 2008-07-02 Isis Innovation Calcium modulation
EP2151441A1 (en) 2008-08-06 2010-02-10 Julius-Maximilians-Universität Würzburg Beta-carbolin-derivates as substrates for an enzyme
CN101475571B (zh) 2009-01-21 2011-06-22 中国药科大学 β-咔啉类细胞周期蛋白依赖性激酶2抑制剂及其用途
US8242260B2 (en) 2009-08-28 2012-08-14 Novartis Ag Compounds and compositions as protein kinase inhibitors
CN102822171B (zh) 2010-03-26 2015-09-02 默克专利有限公司 作为自分泌运动因子抑制剂的苯并萘啶胺类
EP2455378A1 (en) 2010-11-03 2012-05-23 Philip Morris Products S.A. Carbazole and carboline derivatives, and preparation and therapeutic applications thereof
WO2012066442A1 (en) 2010-11-15 2012-05-24 Pfizer Limited Inhibitors of hiv replication
CA2834077A1 (en) 2011-05-17 2012-11-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2013054185A1 (en) 2011-10-13 2013-04-18 Pfizer, Inc. Pyrimidine and pyridine derivatives useful in therapy

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101268048A (zh) * 2005-09-16 2008-09-17 瑟瑞耐克斯有限公司 咔唑衍生物
TN2011000274A1 (en) * 2008-12-19 2012-12-17 Bristol Myers Squibb Co Carbazole carboxamide compounds useful as kinase inhibitors
WO2011159857A1 (en) * 2010-06-16 2011-12-22 Bristol-Myers Squibb Company Carboline carboxamide compounds useful as kinase inhibitors

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Publication number Publication date
CN105358546A (zh) 2016-02-24
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