CN107074804A - 咔唑衍生物 - Google Patents

咔唑衍生物 Download PDF

Info

Publication number
CN107074804A
CN107074804A CN201580057722.3A CN201580057722A CN107074804A CN 107074804 A CN107074804 A CN 107074804A CN 201580057722 A CN201580057722 A CN 201580057722A CN 107074804 A CN107074804 A CN 107074804A
Authority
CN
China
Prior art keywords
formamides
fluoro
carbazole
bases
carbazoles
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201580057722.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107074804B (zh
Inventor
S·阿玛德
D·G·巴特
Q·刘
J·E·玛考
J·A·蒂诺
S·H·沃特森
S·K·奈尔
T·K·玛莎尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bristol Myers Squibb Co
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=54427879&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN107074804(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of CN107074804A publication Critical patent/CN107074804A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107074804B publication Critical patent/CN107074804B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/56—Ring systems containing three or more rings
    • C07D209/80—[b, c]- or [b, d]-condensed
    • C07D209/82—Carbazoles; Hydrogenated carbazoles
    • C07D209/88—Carbazoles; Hydrogenated carbazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the ring system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Abstract

本发明公开了式(I)化合物或其盐，其中Q、R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R4、R5a、R5b、R6a、R6c、R7a、R7b、R7c和R7d定义于本文中。还公开了使用此类化合物作为Bruton酪氨酸激酶(BtK)的抑制剂的方法和包含此类化合物的药物组合物。这些化合物适用于在诸如自身免疫疾病和血管疾病的多种治疗领域中治疗、预防或减缓疾病或病症的进展。

Description

咔唑衍生物
相关申请的交叉引用
本申请要求2014年10月24日提交的美国申请序列号62/068,234的权益，将其全部内容并入本文。
技术领域
本发明大体上涉及可用作激酶抑制剂的三环化合物，包括调节Bruton酪氨酸激酶(Bruton's tyrosine kinase，Btk)及其他Tec家族激酶，诸如Itk。本文提供三环化合物、包含此类化合物的组合物及其使用方法。本发明进一步涉及含有至少一种本发明化合物的药物组合物，其可用于治疗哺乳动物中与激酶调节相关的病况；以及抑制激酶活性的方法，所述激酶包括Btk及其他Tec家族激酶，诸如Itk。
背景技术
蛋白激酶为最大家族的人类酶，其涵盖远超过500种蛋白质。Btk为酪氨酸激酶的Tec家族的一员，且其为早期B细胞发育以及成熟B细胞活化、信号传导和存活的调节剂。
经由B细胞受体(BCR)的B细胞信号传导导致广泛范围的生物输出，此转而取决于B细胞的发育阶段。必须精确调节BCR信号的幅度和持续时间。异常BCR介导的信号传导可能造成不受调节的B细胞活化和/或形成导致多种自身免疫和/或炎性疾病的病原性自身抗体。人类中的Btk突变导致X联结γ球蛋白缺乏症(XLA)。该疾病与B细胞的成熟受损、免疫球蛋白产量下降、T细胞独立性免疫应答受损和对BCR刺激的持续钙信号的显著减弱相关。
在Btk缺陷型小鼠模型中已确定Btk在过敏性病症和/或自身免疫疾病和/或炎性疾病方面的作用的证据。举例而言，在系统性红斑狼疮(SLE)的标准小鼠临床前模型中，已显示，Btk缺乏症使得疾病进展得到显著改善。此外，Btk缺陷型小鼠还对罹患胶原蛋白诱导的关节炎具有抗性且更不易罹患葡萄球菌(Staphylococcus)诱导的关节炎。
大量证据支持B细胞和体液免疫系统在自身免疫和/或炎性疾病的发病机制方面的作用。开发基于蛋白的治疗剂诸如以消耗B细胞代表治疗多种自身免疫和/或炎性疾病的重要方法。因为Btk在B细胞活化方面的作用，Btk抑制剂可用作B细胞介导的病原性活性(诸如自体抗体产生)的抑制剂。
Btk还在肥大细胞和单核细胞中表达且已显示对于这些细胞的功能是重要的。举例而言，小鼠的Btk缺乏症与IgE介导的肥大细胞活化受损(TNF-α及其他炎性细胞因子释放显著减弱)相关，且人的Btk缺乏症与经活化单核细胞的TNF-α产生大大减少相关。
因此，Btk活性抑制可用于治疗过敏性病症和/或自身免疫和/或炎性疾病，包括但不限于：SLE、类风湿性关节炎、多发性血管炎、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、重症肌无力、过敏性鼻炎、多发性硬化症(MS)、移植排斥反应、I型糖尿病、膜性肾炎、炎性肠病、自身免疫溶血性贫血、自身免疫甲状腺炎、冷和热凝集素病、伊文氏综合征(Evans syndrome)、溶血性尿毒症综合征/血栓性血小板减少性紫癜症(HUS/TTP)、类肉瘤病、舍格伦综合征(syndrome)、外周神经病(例如格林-巴利综合征(Guillain-Barre syndrome))、寻常天疱疮和哮喘。
另外，已报道Btk在控制某些B细胞癌症中的B细胞存活中起作用。举例而言，已显示，Btk对于BCR-Abl阳性B细胞急性成淋巴细胞白血病细胞的存活是重要的。因此，抑制Btk活性可用于治疗B细胞淋巴瘤和白血病。
通过与酶反应形成共价键来抑制酶的化合物可提供优于未形成此类共价键的化合物的优势。(参见例如Liu,Q.等人,Chem.Biol.,20:146(2013)；Barf,T.等人,J.Med.Chem.,55:6243(2012)；Kalgutkar,A.等人,Expert Opin.Drug Discov.,7:561(2012)；和Garuti,L.等人,Curr.Med.Chem.,18:2981(2011)；及其中所引用的参考文献)。未形成共价键的化合物可自酶解离，从由其结合引起的抑制释放酶。此类可逆抑制可能需要相对高且连续浓度的抑制性化合物来驱使结合平衡朝向足够的抑制剂酶占有，从而实现可用的酶抑制。较高浓度化合物可能需要向需要此类抑制的哺乳动物施用较高剂量的化合物，且在较高浓度，抑制剂可因抑制其他非靶标酶而具有不期望的作用。此类脱靶抑制可包括毒性。另外，可能需要更频繁地给予，因为抑制性化合物在自靶标酶解离之后可通过代谢和/或消除而自体内移除，降低实现靶标酶的抑制可用的浓度。
相比之下，与其靶标酶形成共价键的抑制剂不可逆地抑制该酶。不可逆抑制将导致抑制剂的缓慢或可忽略的解离，因为此类解离将需要断裂共价键。如果此类共价抑制剂对于其靶标酶的亲和性相对于对于其他脱靶酶的亲和性足够大，则明显较低浓度的抑制剂可产生相对于可逆抑制所需的浓度可用的抑制。较低浓度可减少不期望脱靶抑制和潜在毒性的可能性。此外，因为共价抑制剂可基本上不可逆地结合至靶标酶，当通过代谢和/或消除自体内移除未结合的抑制剂时，游离(未结合)浓度的抑制剂可变得极低，即使当维持可用的酶抑制时。这可减少不期望作用的可能性。另外，因为酶可被不可逆地抑制，可能需要较不频繁的给予以实现可用的抑制。
某些反应性官能团可连接至对靶标酶具有良好亲和性的化合物，其将允许与靶标酶中的官能团形成共价键。举例而言，诸如连接至吸电子基团(诸如酮、酰胺、砜、磺酰胺)或吸电子杂环(诸如吡啶基环)的乙烯系或乙炔系基团的亲电基团可与靶标酶中存在的亲核基团(诸如半胱氨酸残基的硫醇或硫醇盐/酯基团)反应，以形成共价键。此类反应在正常生理条件下可为基本上不可逆的。为了实现此类反应，抑制剂化合物必须结合至靶标酶且以正确空间取向呈现所连接的亲电基团以允许与进攻亲核试剂的有利相互作用。如果取向不正确，则可能不容易形成共价键，且可能不会实现期望的不可逆抑制。在此情况下，化合物将表现得类似于可逆抑制剂且可能不会实现不可逆抑制的效益。此外，如果结合抑制剂上亲电试剂的取向不适于与靶标酶的亲核基团的反应，则抑制剂将能够自靶标酶解离，产生较高浓度的抑制剂及反应性亲电基团可与其他非靶亲核试剂反应且造成诸如毒性的不期望作用的更大可能性。
美国专利第8,084,620号和第8,685,969号公开了可用作激酶抑制剂的三环甲酰胺化合物，包括调节Btk及其他Tec家族激酶。
鉴于许多病况预期受益于涉及蛋白激酶调节的治疗，立即显而易见，能够调节蛋白激酶诸如Btk的新颖化合物及使用这些化合物的方法将提供对广大患者有益的实质性治疗。
仍需要可用作Btk抑制剂的化合物。此外，仍需要可用作可以较低剂量施用或在较低浓度有效的Btk抑制剂的化合物。另外，仍需要具有作为Btk抑制剂的改善效能和RamosFLIPR测定中的改善效能的组合的化合物。
申请人已发现作为Btk抑制剂具有活性的有效化合物。这些化合物可用作对于其成药性重要的具有期望的稳定性、生物利用度、治疗指数和毒性值的药剂。
发明内容
本发明提供三环化合物，包括其前药，其可用作Btk抑制剂且可用于治疗增殖性疾病、过敏性疾病、自身免疫疾病和炎性疾病。
本发明还提供药物组合物，其包含至少一种式(IIa)化合物和药学上可接受的载体。
本发明还提供一种抑制Btk活性的方法，其包括向有此需要的哺乳动物施用式(IIa)化合物。
本发明还提供一种用于治疗过敏性病症和/或自身免疫和/或炎性疾病的方法，其包括向有此需要的哺乳动物施用至少一种式(IIa)化合物。
本发明还提供一种用于治疗增殖性疾病，诸如癌症的方法，其包括向有此需要的哺乳动物施用至少一种式(IIa)化合物。
本发明还提供一种治疗与Btk活性相关的疾病或病症的方法，上述方法包括向有此需要的哺乳动物施用至少一种式(IIa)化合物。
本发明还提供用于制备式(I)化合物的方法和中间体。
本发明还提供式(IIa)化合物，其用于疗法中。
本发明还提供式(IIa)化合物在制备用于治疗或预防Btk相关病况诸如增殖性疾病、过敏性疾病、自身免疫疾病和炎性疾病的药物中的用途。
本发明还提供式(IIa)化合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
式(IIa)化合物和包含式(IIa)化合物的组合物可用于治疗、预防或治愈各种Btk相关病况。包含这些化合物的药物组合物可用于治疗、预防或减缓多种治疗领域中的疾病或病症的进展，诸如增殖性疾病、过敏性疾病、自身免疫疾病和炎性疾病。
本发明的这些及其他特征将随本发明的继续而得以充分阐述。
附图简述
通过参考下文所述的随附图式来说明本发明。
图1显示中间体13乙酰乙酸(diacetic acid)溶剂化物的绝对立体化学。
具体实施方式
本发明的第一方面提供式(I)化合物或其盐，
其中：
两条虚线表示两个单键或两个双键；且R1b和R2b仅在上述两条虚线为两个单键时才存在；
Q为：
(i)
(ii)
(iii) 或
(iv)
R1a为：
(i)H、-CN、-CF3、-CH3、-CR8aR8bOH、-CR8aR8bCR8aR8bOH、-CH(OH)CH2OH、-NHR9、-C(O)NR10aR10b、-C(O)(吗啉基)、-C(O)(哌嗪基)或-C(O)(甲基哌嗪基)；或
(ii)
R1b，如果存在，为H或-CH3，条件是如果R1a为H，则R1b也为H；
R2a为H、F或Cl，条件是如果R1a不为H，则R2a为H；
R2b，如果存在，与R2a相同；
R3为H、F或Cl；
R4为H、F、Cl或-CH3；
R5a为H、F、Cl、-OCH3或-OCF3；
R5b为H、F、Cl、-OCH3或-OCF3；
R6a为H、-CH3或环丙基；
R6c为H、-CH3或环丙基；
R7a为-C(O)CH＝CH(R11)、-C(O)C≡CR12或-S(O)2CH＝CH2；
R7b为-C(O)CH＝CH2；
R7c为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR12；
R7d为-CN、-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR13；
R7e为-CH＝CH2或-C≡CR13；
R7f为经R7c取代的吡咯烷基、-CH＝CHC(O)(吗啉基)或-CH＝CHC(O)(吡咯烷基)；
R8a为H或-CH3；
R8b为H或-CH3；
R9为C1-4烷基；
R10a和R10b独立地为H或-CH3；
R11为H或-CH3；
R12为H、C1-4烷基或环丙基；且
R13为H、C1-4烷基或环丙基；
条件是：
(a)如果Q为且R7d为-CN或-C(O)CH＝CH2，则R3为H；且
(b)如果虚线表示两个单键，则：
(i)Q不为
(ii)R11，如果存在，为H；且
(iii)式(I)化合物不为：
本发明的第二方面提供式(I)化合物或其盐，
其中：
两条虚线表示两个单键或两个双键；且R1b和R2b仅在所述两条虚线为两个单键时才存在；
Q为：
R1a为：
(i)H、-CN、-CF3、-CH3、-CR8aR8bOH、-CH(OH)CH2OH、-NHR9或-C(O)NR10aR10b；或
(ii)
R1b，如果存在，为H或-CH3，条件是如果R1a为H，则R1b也为H；
R2a为H或F，条件是如果R1a不为H，则R2a为H；
R2b，如果存在，与R2a相同；
R3为H、F或Cl；
R4为H、F、Cl或-CH3；
R5a为H、F、Cl、-OCH3或-OCF3；
R5b为H、F、Cl、-OCH3或-OCF3；
R6a为H、-CH3或环丙基；
R6c为H、-CH3或环丙基；
R7a为-C(O)CH＝CH(R11)、-C(O)C≡CR12或-S(O)2CH＝CH2；
R7b为-C(O)CH＝CH2；
R7c为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR12；
R7d为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR13；
R8a为H或-CH3；
R8b为H或-CH3；
R9为C1-4烷基；
R10a和R10b独立地为H或-CH3；
R11为H或-CH3；
R12为H、C1-4烷基或环丙基；且
R13为H、C1-4烷基或环丙基；
条件是如果虚线表示两个单键，则：
(i)Q不为
(ii)R11，如果存在，为H；且
(iii)式(I)化合物不为
一个实施方案提供式(I)化合物或其盐，其中两条虚线表示两个双键。该实施方案的化合物具有式(Ia)结构：
其中Q、R1a、R2a和R3定义于第一方面中。该实施方案中还包括这样的化合物，其中Q、R1a、R2a和R3定义于第二方面中。
一个实施方案提供式(I)化合物或其盐，其中两条虚线表示两个单键。该实施方案的化合物具有式(Ib)结构：
其中Q、R1a、R1b、R2a、R2b和R3定义于第一方面中。该实施方案中还包括这样的化合物，其中Q、R1a、R2a和R3定义于第二方面中。由式(Ib)表示的四氢咔唑化合物(其中R1a不为H)亦在R1a所连接的碳原子处具有手性中心且因此可在该手性中心处以S-异构体和R-异构体的形式存在。这些异构体为可分离且稳定的。一个实施方案提供此类式(Ib)化合物，其具有R1a所连接的碳手性中心作为S-异构体。一个实施方案提供此类式(Ib)化合物，其具有R1a所连接的碳手性中心作为R-异构体。
一个实施方案提供式(I)化合物或其盐，其中R1a为H、-CN、-CF3、-CH3、-CR8aR8bOH、-CR8aR8bCR8aR8bOH、-CH(OH)CH2OH、-NHR9、-C(O)NR10aR10b、-C(O)(吗啉基)、-C(O)(哌嗪基)或-C(O)(甲基哌嗪基)；且Q、R1b、R2a、R2b、R3、R8a、R8b、R9、R10a和R10b定义于第一方面中。该实施方案的化合物在本文中称为式(IIa)化合物。该实施方案中包括化合物，其中R1a为H、-CN、-CH3、-CF3、-CR8aR8bOH、-CH(OH)CH2OH、-NHR9或-C(O)NR10aR10b。
一个实施方案提供式(I)化合物或其盐，其中R1a为：
且Q、R1b、R2a、R2b和R3定义于第一方面或第二方面中。该实施方案的化合物在本文中称为式(IIb)化合物。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中R6a为H或-CH3；R6c为H或-CH3；R7a为-C(O)CH＝CH(R11)或-S(O)2CH＝CH2；R13为H；且Q、R1a、R1b、R2a、R2b、R3和R11定义于第一方面或第二方面中。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为且R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R4、R5a、R6a、R6c、R7a、R7c、R7e和R7f定义于第一方面或第二方面中。实施方案中包括化合物，其中R1a为H、-CH3、-CF3、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-CH(OH)CH2OH、-C(O)NH2、-C(O)N(CH3)2或-NHCH(CH3)2；R1b为H或-CH3；R2a为H；R3为H、F或Cl；R4为H或-CH3；R5a为H或-CH3；R6a为H或-CH3；R6c为H或-CH3；R7a为-C(O)CH＝CH(R11)或-S(O)2CH＝CH2；R7c为-C(O)CH＝CH2；R7e为-C＝CH2；R7f为经R7c取代的吡咯烷基、-CH＝CHC(O)(吗啉基)或-CH＝CHC(O)(吡咯烷基)；且R11为H或-CH3。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为且R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R4、R5a、R6a、R7a和R7f定义于第一方面或第二方面中。实施方案中包括化合物，其中R1a为H、-CH3、-CF3、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-CH(OH)CH2OH、-C(O)NH2、-C(O)N(CH3)2或-NHCH(CH3)2；R1b为H或-CH3；R2a为H；R3为H、F或Cl；R4为H或-CH3；R5a为H或-CH3；R6a为H或-CH3；R7a为-C(O)CH＝CH(R11)或-S(O)2CH＝CH2；R7c为-C(O)CH＝CH2；R7f为经R7c取代的吡咯烷基、-CH＝CHC(O)(吗啉基)或-CH＝CHC(O)(吡咯烷基)；且R11为H或-CH3。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为 且R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R5b、R7b、R7c和R7d定义于第一方面或第二方面中。实施方案中包括化合物，其中R1a为H、-CF3、-CH2CH2OH、-C(CH3)2OH或-C(O)(吗啉基)；R1b为H；R2a为H；R3为H或F；R7b为-C(O)CH＝CH2；R7c为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR12；R7d为-CN、-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR13；R12为-CH3；且R13为-CH3。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为
且R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R5b、R7b、R7c和R7d定义于第一方面或第二方面中。实施方案中包括化合物，其中R1a为H、-CF3、-CH3、-CR8aR8bOH、-CR8aR8bCR8aR8bOH、-C(O)NR10aR10b或-C(O)(甲基哌嗪基)；R1b为H；R2a为H、F或Cl；R2b为H、F或Cl；R3为H、F或Cl；R6c为H；R7b为-C(O)CH＝CH2；R7c为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CCH3；R7d为-CN、-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR13；且R13为-CH3或环丙基。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为
且R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R4、R7d和R7e定义于第一方面或第二方面中。实施方案中包括化合物，其中R1a为H、-CF3、-CR8aR8bOH、-C(O)NR10aR10b或-C(O)(甲基哌嗪基)；R1b为H；R2a为H；R3为H、F或Cl；R4为H或-CH3；R7d为-CN、-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CH；且R7e为-CH＝CH2或-C≡CCH3。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为且R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R4、R5a、R6a和R7a定义于第一方面或第二方面中。实施方案中包括化合物，其中R1a为H、-CN、-CF3、-CH3、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-CH(OH)CH2OH、-NHCH(CH3)2、-C(O)NH2或-C(O)N(CH3)2；R2a为H；R2b为H；R5a为H、F、-OCH3或-OCF3；R6a为H或-CH3；且R7a为-C(O)CH＝CH2、-C(O)CH＝CHCH3或-S(O)2CH＝CH2。
一个实施方案提供式(Ia)化合物或其盐，其中Q为且R1a、R2a、R3、R4、R5a、R6a和R7a定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括化合物，其中R1a为-CN、-C(CH3)2OH或-CH(OH)CH2OH；R2a为H；R4为H或-CH3；R5a为H；R6a为H或-CH3；且R7a为-C(O)CH＝CH2、-C(O)CH＝CHCH3或-S(O)2CH＝CH2。
一个实施方案提供式(Ib)化合物或其盐，其中Q为且R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R4、R5a、R6a和R7a定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括化合物，其中R1a为H、-CF3、-CH3、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-C(O)NH2或-C(O)N(CH3)2；R2a为H；R2b为H；R3为H、F或Cl；R5a为F、-OCH3或-OCF3；R6a为H或-CH3；且R7a为-C(O)CH＝CH2或-S(O)2CH＝CH2。
一个实施方案提供式(Ib)化合物或其盐，其中Q为R1a为H、-CN、-CF3、-CR8aR8bOH或-NHR9；R2a为H；R3为H、F或Cl；R3为H、F或Cl；R4为H、F、Cl或-CH3；R5a为H、F、Cl或-OCH3；R6a为H、-CH3或环丙基；R7a为-C(O)CH＝CH2或-S(O)2CH＝CH2；R8a为H或-CH3；R8b为H或-CH3；且R9为C2-3烷基。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为R1a为：
且R1b、R2a、R2b、R3、R4、R5a、R6a和R7a定义于第一方面或第二方面中。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为且R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R5b和R7b定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括化合物，其中R1a为H、-CF3或-C(CH3)2OH；R3为F；且R5b为H。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为R1a为H、-CF3或-C(CH3)2OH；且R1b、R2a、R2b、R3、R5b和R7b定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中还包括化合物，其中R3为H或F；且R5b为H。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为且R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R5b和R7b定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括化合物，其中R5b为H。该实施方案中还包括式(Ia)化合物，其中R3为H或F；且R5b为H。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为且R1a、R1b、R2a、R2b、R3和R7b定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括式(Ia)化合物，其中R3为H或F。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为且R1a、R1b、R2a、R2b、R3、R6c和R7c定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括化合物，其中R6c为H；且R7c为-C(O)CH＝CH2、-C(O)C≡CCH3或-C(O)C≡C(环丙基)。该实施方案中还包括式(Ib)化合物，其中R3为F；R6c为H；且R7c为-C(O)CH＝CH2、-C(O)C≡CCH3或-C(O)C≡C(环丙基)。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)或式(Ib)的化合物或其盐，其中Q为且R1a、R1b、R2a、R2b、R3和R7d定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括化合物，其中R1a为H或-CF3；且R7d为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CH。该实施方案中还包括式(Ib)化合物，其中R1a为H或-CF3；R1b为H；R2a为H；R2b为H；且R7d为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CH。
一个实施方案提供式(I)、式(Ia)的化合物或其盐，其中Q为且R1a、R2a和R3定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括化合物，其中R3为H或F。还包括化合物，其中R1a为H且R2a为H。
一个实施方案提供式(Ia)化合物或其盐，其中Q为 R1a为H、-CN、-CF3、-CR8aR8bOH或-NHR9；R2a为H；R3为H、F或Cl；R5b为H、F、Cl或-OCH3；R7b为-C(O)CH＝CH2；R8a为H或-CH3；R8b为H或-CH3；且R9为C2-3烷基。
一个实施方案提供式(Ia)化合物或其盐，其中Q为R1a为H、-CN、-CF3、-CR8aR8bOH或-NHR9；R2a为H；R3为H、F或Cl；R7b为-C(O)CH＝CH2；R8a为H或-CH3；R8b为H或-CH3；且R9为C2-3烷基。
一个实施方案提供式(Ia)化合物或其盐，其中Q为R1a为H、-CN、-CF3、-CR8aR8bOH或-NHR9；R2a为H；R3为H、F或Cl；R6c为H、-CH3或环丙基；R7c为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR12；R8a为H或-CH3；R8b为H或-CH3；R9为C2-3烷基；且R12为H、C1-4烷基或环丙基。
一个实施方案提供式(Ia)化合物或其盐，其中Q为 R1a为H、-CN、-CF3、-CR8aR8bOH或-NHR9；R2a为H；R3为H、F或Cl；R8a为H或-CH3；R8b为H或-CH3；且R9为C2-3烷基。
一个实施方案提供式(Ib)化合物或其盐，其中：
Q为：
R1a为：
(i)H、-CH3、-CF3、-CR8aR8bOH或-C(O)NR10aR10b；或
(ii)
R1b为H；R2a为H或F，条件是如果R1a不为H，则R2a为H；R2b为H或F，条件是如果R2a和R2b相同；R3为H、F或Cl；R4为H、F、Cl或-CH3；R5a为H、F、Cl或-OCH3；R5b为H、F、Cl或-OCH3；R6a为H、-CH3或环丙基；R6c为H、-CH3或环丙基；R7a为-C(O)CH＝CH2或-S(O)2CH＝CH2；R7c为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR12；R7d为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR13；R8a为H或-CH3；R8b为H或-CH3；R10a和R10b各为-CH3；R12为H、C1-4烷基或环丙基；且R13为H、C1-4烷基或环丙基；条件是式(Ib)化合物不为
一个实施方案提供式(Ib)化合物或其盐，其中：Q为
R1a为：
(i)H、-CH3、-CF3、-CR8aR8bOH或-C(O)NR10aR10b；或
(ii)
R1b为H；R2a为H或F，条件是如果R1a不为H，则R2a为H；R2b为H或F，条件是如果R2a和R2b相同；R3为H、F或Cl；R4为H、-CH3、F或Cl；R5a为H、F、Cl或-OCH3；R6a为H、-CH3或环丙基；R7a为-C(O)CH＝CH2或-S(O)2CH＝CH2；R8a为H或-CH3；R8b为H或-CH3；且R10a和R10b各为-CH3。
一个实施方案提供式(Ib)化合物或其盐，其中Q为R1a为H、-CH3、-CF3、-CR8aR8bOH或-C(O)NR10aR10b；R1b为H；R2a为H或F，条件是如果R1a不为H，则R2a为H；R2b为H或F，条件是如果R2a和R2b相同；R3为H、F或Cl；R6c为H、-CH3或环丙基；R7c为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR12；R8a为H或-CH3；R8b为H或-CH3；R10a和R10b为-CH3；且R12为H、C1-4烷基或环丙基；条件是式(Ib)化合物不为
一个实施方案提供式(Ib)化合物或其盐，其中：Q为R1a为H、-CH3、-CF3、-CR8aR8bOH或-C(O)NR10aR10b；R1b为H；R2a为H或F，条件是如果R1a不为H，则R2a为H；R2b为H或F，条件是如果R2a和R2b相同；R3为H、F或Cl；R7d为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR13；R8a为H或-CH3；R8b为H或-CH3；R10a和R10b各为-CH3；且R13为H、C1-4烷基或环丙基。
一个实施方案包括式(I)化合物或其盐，其中Q为 R3为H；且R1a、R1b、R2a、R2b、R5和R7a定义于第一方面或第二方面中。
一个实施方案提供式(I)化合物或其盐，其中R3为H；且R1a、R1b、R2a、R2b、R4、R5a、R5b、R6a、R7a、R7c、R7d、R7f和Q定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括化合物，其中Q为
一个实施方案提供式(I)化合物或其盐，其中R3为F或Cl；且R1a、R1b、R2a、R2b和Q定义于第一方面或第二方面中。
一个实施方案提供式(I)化合物或其盐，其中R3为F；且R1a、R1b、R2a、R2b和Q定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括化合物，其中R1a为H、-CF3、-CH2CH2OH、-C(CH3)2OH或-C(O)N(CH3)2。
一个实施方案提供式(I)化合物或其盐，其中R3为Cl；且R1a、R1b、R2a、R2b、R4、R5a、R6a、R7a、R7c、R7d和Q定义于第一方面或第二方面中。该实施方案中包括化合物，其中Q为
阻转异构体为由围绕单键轴的旋转受阻产生的立体异构体，其中旋转势垒足够高以允许分离单独旋转异构体。(LaPlante等人,J.Med.Chem.,54:7005(2011))。式(I)化合物(其中R3不为氢且Q为经取代的苯基，R4不为氢、经取代的1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基、经取代的3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-基、2,3,4,5-四氢[b][1,4]氧氮杂-9-基或经取代的二氢异吲哚-4-基)在三环四氢咔唑/咔唑与基团Q之间的键处具有产生立体异构(stereogenic)的轴。归因于通过该键连接的环上的取代基的非对称性质且归因于由位阻造成的围绕该键的有限旋转，此类式(I)化合物可形成旋转异构体。如果旋转能垒足够高，则围绕该键的受阻旋转以足够慢以允许单独的阻转异构体分离为不同化合物的速率出现。因此，这些式(I)化合物可形成两种旋转异构体，其在诸如手性固定相色谱的某些情形下可分离成单独阻转异构体。此类式(I)化合物可以两种阻转异构体的混合物形式或以单一阻转异构体形式提供。发现此类式(I)化合物在环境和生理温度在溶液中为可分离且稳定的。可通过单晶x射线晶体学确定阻转异构体的绝对空间构型。这些式(I)化合物可以单独阻转异构体形式或以包含任意比例的式(I)的两种阻转异构体的混合物形式提供。
一个实施方案提供式(I)化合物或其盐，其中仅提供一种阻转异构体，或其中仅提供一种与少量另一阻转异构体混合的阻转异构体。在未指定绝对构型的情况下，所提供的阻转异构体可通过在手性固定相色谱期间在特定条件下相对于另一阻转异构体的洗脱顺序来界定。
一个实施方案提供式(I)化合物或其盐，其中所述化合物为(RS)-5-(3-丙烯酰氨基苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(1)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(2)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2,2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(3)；4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(4)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(5)；(RS)-4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(6)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2-(羟基甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(7)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2-(羟基甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(8)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺，非对映异构体的混合物(9)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(10)；(RS)-(E)-4-(3-(丁-2-烯酰氨基)-2-甲基苯基)-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(11)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(12)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(13)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺(14)；4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-7-氰基-9H-咔唑-1-甲酰胺(15)；(RS)-4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-7-(1,2-二羟乙基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(16)；4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-7-(异丙氨基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(17)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-N2,N2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺(18)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(19)；(RS)-2-(羟基甲基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(20)；(RS)-N2,N2-二甲基-5-(2-甲基-3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺(21)；(2R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(22)；(2R)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(23)；(2R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一对映异构体(24)；(2R)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一对映异构体(25)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(26)；7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(27)；7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(28)；(RS)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(29)；(RS)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(30)；3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(31)；7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(32)；7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(33)；3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(34)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(35)；(R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(36)；7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(37)；3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(38)；(R)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(39)；(S)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(40)；(R)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(41)；(RS)-5-(2-氟-3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(42)；(R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(43)；(2R)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(44)；(RS)-5-(2-氟-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(45)；(RS)-5-(2-氯-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(46)；(2R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(47)；5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(48)；5-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(49)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-4-甲氧基苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(50)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-4-(三氟甲氧基)苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(51)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-4-氟苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(52)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(53)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(54)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一外消旋非对映异构体(single racemic diastereomer)(55和56)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-N2,N2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺，单一外消旋非对映异构体(57和58)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一外消旋非对映异构体(59和60)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一外消旋非对映异构体(61和62)；(S)-5-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(63)；(E)-4-(3-(丁-2-烯酰氨基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(64)；5-(((S)-1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(65)；(S)-5-(3-丙烯酰氨基哌啶-1-基)-3,3,6-三氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(66)；(S)-4-(3-丙烯酰氨基哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(69)；5-(((S)-1-丙炔酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(RS)-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(72)；(S)-5-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3,3,6-三氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(73)；(S)-3-氟-4-(3-(N-甲基丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(74)；(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(75)；(S)-4-(3-(3-环丙基丙酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(76)；5-(((S)-1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一非对映异构体(77和78)；3-氟-4-((6-乙烯基吡啶-3-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(87)；(RS)-4-(2-丙烯酰基异吲哚啉-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(89)；4-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(90)；4-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(91)；4-(1-丙烯酰基吲哚啉-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(92)；4-(1-丙烯酰基吲哚啉-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(95)；4-(1-丙烯酰基-1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(96)；(RS)-4-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(97)；4-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺，单一对映异构体(98和99)；3-氟-4-((2-乙烯基吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(100)；4-(1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(112)；4-(1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(113和114)；顺式-4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(115)；顺式-4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(116和117)；(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(118)；顺式-4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(119)；顺式-4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(120和121)；3-氟-4-((2-乙烯基嘧啶-5-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(122)；顺式-4-(1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(123)；顺式-4-(1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(124和125)；4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺(126)；4-((4aS,7aS)-1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺和4-((4aR,7aR)-1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺(127和128)；3-氟-4-((2-(丙-1-炔-1-基)吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(129)；5-((S)-3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(130、131和132)；4-(2-丙烯酰基异吲哚啉-5-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(133)；4-(1-丙烯酰基-2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(134)；5-(1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(135)；(R)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(136)；4-(1-(丁-2-炔酰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(137)；4-(1-丙烯酰基-1,4,5,6-啶四氢吡啶-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(138)；4-(7-(丁-2-炔酰基)-2,7-二氮螺[4.4]壬-2-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(139)；4-(7-丙烯酰基-2,7-二氮螺[4.4]壬-2-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(140)；4-(1-丙烯酰基八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(141)；4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(142)；4-(6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(143)；4-(6-(丁-2-炔酰基)-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(144)；4-(7-丙烯酰基八氢-2,7-二氮杂萘-2(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(145)；4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺(146)；4-(1-(丁-2-炔酰基)吲哚啉-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(147)；4-(2-(丁-2-炔酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(148)；4-(2-(丁-2-炔酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(149)；4-(2-(丁-2-炔酰基)异吲哚啉-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(150)；4-(1-(丁-2-炔酰基)吲哚啉-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(151)；3-氟-4-((6-乙烯基吡嗪-2-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(152)；3-氯-4-((6-乙烯基吡嗪-2-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(153)；4-((6-乙炔基吡啶-3-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(154)；3-氯-4-((6-乙烯基吡啶-3-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(155)；4-((2-乙炔基吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(156)；3-氟-4-((2-乙烯基噻唑-5-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(157)；3-氟-4-((6-(丙-1-炔-1-基)吡啶-3-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(158)；3-氟-4-((5-乙烯基吡嗪-2-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(159)；4-(1-丙烯酰基-1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(160)；4-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(161和162)；(S)-4-(3-丙烯酰氨基哌啶-1-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(163)；(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(164)；(R)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(165)；(S)-4-(3-(3-环丙基丙酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(166)；(S)-4-(3-氰氨基哌啶-1-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(167)；4-(2-丙烯酰基异吲哚啉-4-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(168)；4-(1-丙烯酰基吲哚啉-4-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(169)；4-(1-丙烯酰基吲哚啉-6-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(170)；4-(1-丙烯酰基-1-氮杂螺[4.4]壬-7-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(171)；(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-7-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(172)；(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-N7,N7-二甲基-9H-咔唑-1,7-二甲酰胺(173)；3-氟-N7,N7-二甲基-4-(2-乙烯基吡啶-4-基)-9H-咔唑-1,7-二甲酰胺(174)；(S)-4-((1-氰基吡咯烷-3-基)氨基)-3-氟-N7,N7-二甲基-9H-咔唑-1,7-二甲酰胺(175)；(S)-4-((1-氰基吡咯烷-3-基)氨基)-3-氟-7-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(176)；4-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-7-(吗啉-4-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(177)；4-(2-(丁-2-炔酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-7-(吗啉-4-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(178)；4-(2-氰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-7-(吗啉-4-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(179)；4-(1-丙烯酰基吲哚啉-6-基)-3-氟-7-(2-羟乙基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(180)；4-(1-氰基吲哚啉-6-基)-3-氟-7-(2-羟乙基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(181)；4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-6-氯-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(182)；4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-6-氯-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(183)；5-(1-丙烯酰基-1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(184)；(R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-((6-乙烯基吡啶-3-基)甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(185)；5-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(186和187)；6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-((6-(丙-1-炔-1-基)吡啶-3-基)甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(188)；3-氟-4-(2-乙烯基吡啶-4-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(189)；4-(7-(丁-2-炔酰基)八氢-2,7-二氮杂萘-2(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(190)；4-(1-丙烯酰基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(191)；4-(1-(丁-2-炔酰基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(192)；3-氟-4-(5-(N-甲基丙烯酰氨基)吡啶-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(193)；4-((1S,4S)-2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(194)；3-氟-4-((2-甲基-6-乙烯基吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(195)；3-氟-4-((2-甲基-6-乙烯基嘧啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(196)；3-氟-4-((4-甲基-6-乙烯基嘧啶-2-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(197)；3-氟-4-((3-氟-2-乙烯基吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(198)；4-(3-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)苯基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(199)；4-(3-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)苯基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(200)；(E)-3-氟-4-(3-(3-吗啉基-3-氧代丙-1-烯-1-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(201)；(E)-3-氟-4-(3-(3-氧代-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-烯-1-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(202)；或5-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(203和204)。
本发明可以不偏离其精神或基本特征的其他特定形式来实施。本发明涵盖本文中所提及的本发明的方面和/或实施方案的所有组合。应理解，本发明的任何及所有实施方案可与任何其他实施方案结合以描述额外实施方案。还应理解，实施方案的各个单独元素意欲与来自任何实施方案的任何及所有其他元素组合以描述额外实施方案。
定义
本领域普通技术人员在阅读以下详细描述后可更容易地理解本发明的特征和优势。应了解，在单独实施方案的情形下，为了清楚起见，上文和下文所描述的本发明的某些特征也可组合形成单一实施方案。相反地，为简洁起见，描述于单一实施方案的上下文中的本发明的各种特征也可组合形成其亚组合。本文中鉴别为例示性或优选的实施方案意欲为说明性的且不非限制性的。
除非本文中另有具体陈述，否则以单数形式提及也可包括复数形式。举例而言，“一(a/an)”可指一个或一或多个。
如本文所使用，短语“化合物”是指至少一种化合物。举例而言，式(I)化合物包括式(I)化合物及两种或更多种式(I)化合物。
除非另外指明，否则具有不饱和价数的任何杂原子假定具有足以使价数饱和的氢原子。
本文所阐述的定义优先于以引用的方式并入本文中的任何专利、专利申请和/或专利申请公开中所阐述的定义。
下文列举用于描述本发明的各种术语的定义。这些定义适用于术语，因为其单独地或作为较大群组的一部分而用于整个说明书中(除非在特定情况下以其他方式加以限制)。
在整个说明书中，本领域技术人员可选择基团及其取代基以提供稳定的部分和化合物。
根据本领域中所使用的惯例，用于本文的结构式中以描绘部分或取代基与核心或骨架结构的连接点的键。
如本文所使用，术语“烷基”是指含有例如1至12个碳原子、1至6个碳原子和1至4个碳原子的支链和直链饱和脂族烃基。烷基的实例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(例如正丙基和异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基)和戊基(例如正戊基、异戊基、新戊基)、正己基、2-甲基戊基、2-乙基丁基、3-甲基戊基和4-甲基戊基。当数字以下标形式出现在符号“C”后时，下标更具体地定义特定基团可含有的碳原子的数目。举例而言，“C1-4烷基”表示具有一至六个碳原子的直链和支链烷基。
术语“羟烷基”包括经一或多个羟基取代的支链和直链饱和烷基。举例而言，“羟烷基”包括-CH2OH、-CH2CH2OH和C1-4羟烷基。
短语“药学上可接受的”在本文中用于指在合理医学判断范围内，适用于与人和动物的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理益处/风险比相匹配的那些化合物、物质、组合物和/或剂型。
式(I)化合物可以无定形固体或结晶固体形式提供。可采用冻干提供呈无定形固体的式(I)化合物。
某些式(I)化合物可以游离形式存在(在无电离的情况下)或可形成也在本发明范围内的盐。除非另外指明，否则提及本发明化合物应理解为包括提及游离形式及其盐。术语“盐”表示用无机酸和/或有机酸形成的酸盐。药学上可接受的(即，无毒、生理学上可接受的)盐优选，诸如阴离子不会明显造成盐的毒性或生物活性的盐。然而，其他盐可适用于例如分离或纯化步骤中，其可在制备期间得以采用，且因此涵盖在本发明的范围内。式(I)化合物的盐可例如在介质，诸如盐沉淀的介质中或在水性介质中通过使式(I)化合物与一定量(诸如当量)的酸反应，继而冻干形成。
例示性酸加成盐包括乙酸盐(诸如与乙酸或三卤乙酸(例如三氟乙酸)形成的那些盐)、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、富马酸盐、葡糖庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐(与盐酸形成)、氢溴酸盐(与溴化氢形成)、氢碘酸盐、2-羟基乙烷磺酸盐、乳酸盐、马来盐(与马来酸形成)、甲磺酸盐(与甲磺酸形成)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、丁二酸盐、硫酸盐(诸如与硫酸形成的那些盐)、磺酸盐(诸如本文中提及的那些盐)、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐(toluenesulfonate)(诸如甲苯磺酸盐(tosylate))、十一烷酸盐等。
应进一步理解，式(I)化合物的溶剂化物(例如水合物)亦在本发明的范围内。术语“溶剂化物”意指式(I)化合物与一或多个溶剂分子(无论有机或无机)的物理缔合。该物理缔合包括氢键。在某些情况下，溶剂化物将能够分离，例如一或多个溶剂分子掺入结晶固体的晶格中时。“溶剂化物”涵盖溶液相与可分离溶剂化物。例示性溶剂化物包括水合物、乙醇合物、甲醇合物、异丙醇化物、乙腈溶剂化物和乙酸乙酯溶剂化物。溶剂化方法为本领域中已知的。
前药的各种形式为本领域中公知的且描述于以下中：
a)Wermuth,C.G.等人,The Practice of Medicinal Chemistry,第31章,Academic Press(1996)；
b)Bundgaard,H.编,Design of Prodrugs,Elsevier(1985)；
c)Bundgaard,H.,第5章,"Design and Application of Prodrugs",A Textbookof Drug Design and Development,第113-191页,Krogsgaard-Larsen,P.等人编,HarwoodAcademic Publishers(1991)；和
d)Testa,B.等人,Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism,Wiley-VCH(2003)。
另外，式(I)化合物在其制备后可经分离和纯化以获得含有以重量计量等于或大于式(I)化合物的99％的组合物(“基本上纯的”)，其随后如本文所描述使用或调配。本文中还涵盖此类“基本上纯的”式(I)化合物作为本发明的一部分。
“稳定化合物”和“稳定结构”意指足够稳固能经受自反应混合物分离至可用纯度且调配成有效治疗剂的化合物。本发明意欲体现稳定化合物。
“治疗有效量”意欲包括能有效地用作Btk抑制剂或能有效地治疗或预防自身免疫性和/或炎性和/或增殖性疾病状态，诸如多发性硬化症和类风湿性关节炎的单独本发明化合物的量或要求保护的化合物的组合的量或与其他活性成分组合的本发明化合物的量。
如本文所使用，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”涵盖治疗哺乳动物，尤其人的疾病状态，且其包括：(a)预防哺乳动物发生疾病状态，尤其当此类哺乳动物倾向于疾病状态但尚未诊断为具有该疾病状态时；(b)抑制疾病状态，即遏制其发展；和/或(c)缓解疾病状态，即引起疾病状态消退。
本发明化合物意欲包括本发明化合物中出现的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子数但具有不同质量数的那些原子。作为一般实例但非限制性地，氢的同位素包括氘(D)和氚(T)。碳同位素包括13C和14C。经同位素标记的本发明化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于本文所描述的方法、使用适当经同位素标记的试剂代替以其他方式采用的未经标记的试剂来制备。举例而言，甲基(-CH3)还包括氘化甲基，诸如-CD3。
根据式(IIa)的化合物可通过适用于待治疗病况的任何手段施用，其可取决于位点特异性治疗需要或待递送式(IIa)化合物的量。
本发明内还涵盖包含式(IIa)化合物和一或多种无毒的药学上可接受的载体和/或稀释剂和/或佐剂(在本文中统称为“载体”材料)及(如果需要)其他活性成分的一类药物组合物。式(IIa)化合物可通过任何合适的途径施用，优选呈适于此类途径的药物组合物形式且呈对于预期治疗有效的剂量。本发明的化合物和组合物可以含有常规的药学上可接受的载体、佐剂和媒介物的剂量单位制剂形式例如经口、经黏膜或肠胃外(包括血管内、静脉内、腹膜内、皮下、肌内和胸骨内)施用。举例而言，药用载体可含有甘露糖醇或乳糖与微晶纤维素的混合物。混合物可含有额外组分，诸如润滑剂，例如硬脂酸镁；和崩解剂，诸如交联聚维酮(crospovidone)。载体混合物可填充至明胶胶囊中或压缩为片剂。药物组合物可例如以口服剂型或输注形式施用。
对于经口施用，药物组合物可呈例如片剂、胶囊、液体胶囊、混悬液或液体形式。药物组合物优选以含有特定量活性成分的剂量单位形式制得。举例而言，药物组合物可以包含约0.1至1000mg，优选约0.25至250mg，且更优选约0.5至100mg范围内的一定量的活性成分的片剂或胶囊形式提供。用于人或其他哺乳动物的合适日剂量可取决于患者的病况及其他因素而广泛变化，但可使用常规方法确定。
本文中涵盖的任何药物组合物均可例如经由任何可接受且合适的口服制剂经口递送。例示性口服制剂包括但不限于例如片剂、糖锭、锭剂、水性和油性混悬液、可分散粉剂或颗粒剂、乳剂、硬和软胶囊、液体胶囊、糖浆剂和酏剂。意欲经口施用的药物组合物可根据本领域中已知的任何方法制备以便制造意欲经口施用的药物组合物。为了提供药学上适口的制剂，本发明的药物组合物可含有至少一种选自增甜剂、矫味剂、着色剂、缓和剂、抗氧化剂和防腐剂的试剂。
片剂可例如通过将至少一种式(IIa)化合物与至少一种适用于制造片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂混合来制备。例示性赋形剂包括但不限于例如惰性稀释剂，诸如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙和磷酸钠；成粒剂和崩解剂，诸如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉和海藻酸；粘合剂，诸如淀粉、明胶、聚乙烯-吡咯烷酮和阿拉伯胶；和润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸和滑石。另外，片剂可为未经涂布的或通过已知技术经涂布以掩蔽口味较差药物的不佳味道，或延缓活性成分在胃肠道中的崩解和吸收，从而使活性成分的作用维持较长时间段。例示性水可溶性味觉掩蔽材料包括但不限于羟丙基-甲基纤维素和羟丙基-纤维素。例示性延时材料包括但不限于乙基纤维素和乙酸丁酸纤维素。
硬明胶胶囊可例如通过将至少一种式(IIa)化合物与至少一种惰性固体稀释剂，诸如碳酸钙、磷酸钙和高岭土混合来制备。
软明胶胶囊可例如通过将至少一种式(IIa)化合物与至少一种水可溶性载体(诸如聚乙二醇)和至少一种油介质(诸如花生油、液体石蜡和橄榄油)混合来制备。
水性混悬液可例如通过将至少一种式(IIa)化合物与适用于制造水性混悬液的至少一种赋形剂混合来制备。适用于制造水性混悬液的例示性赋形剂包括但不限于例如混悬剂，诸如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基-纤维素、海藻酸钠、海藻酸、聚乙烯-吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶；分散剂或湿润剂，诸如天然存在的磷脂，例如卵磷脂；环氧烷与脂肪酸的缩合产物，诸如聚氧乙烯硬脂酸酯；环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，诸如十七亚乙基-氧基十六醇；环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，诸如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯；和环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的缩合产物，诸如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水性混悬液还可含有至少一种防腐剂，诸如对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸正丙酯；至少一种着色剂；至少一种矫味剂；和/或至少一种增甜剂，包括但不限于例如蔗糖、糖精和阿斯巴甜。
油性混悬液可例如通过使至少一种式(IIa)化合物混悬于植物油(诸如花生油、橄榄油、芝麻油和椰子油)或矿物油(诸如液体石蜡)中来制备。油性混悬液还可含有至少一种增稠剂，诸如蜂蜡、硬石蜡和鲸蜡醇。为了提供适口的油性混悬液，可将至少一种上文已描述的增甜剂和/或至少一种矫味剂添加至油性混悬液中。油性混悬液可进一步含有至少一种防腐剂，包括但不限于例如抗氧化剂，诸如丁基化羟基茴香醚和α-生育酚。
可分散粉剂和颗粒剂可例如通过将至少一种式(IIa)化合物与至少一种分散剂和/或湿润剂、至少一种混悬剂和/或至少一种防腐剂混合来制备。合适的分散剂、湿润剂和混悬剂如上文已描述。例示性防腐剂包括但不限于例如抗氧化剂，例如抗坏血酸。另外，可分散粉剂和颗粒剂还可含有至少一种赋形剂，包括但不限于例如增甜剂、矫味剂和着色剂。
其至少一种式(IIa)化合物的乳剂可例如制备为水包油乳剂。包含式(IIa)化合物的乳剂的油相可以已知方式由已知成分构成。油相可由例如以下各者(但不限于)提供：植物油，诸如橄榄油和花生油；矿物油，诸如液体石蜡及其混合物。虽然该相可仅包含乳化剂，但其还可包含至少一种乳化剂与脂肪或油或与脂肪和油两者的混合物。合适的乳化剂包括但不限于例如天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂；衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的酯或偏酯，诸如脱水山梨糖醇单油酸酯；和偏酯与环氧乙烷的缩合产物，诸如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。优选地，亲水性乳化剂与充当稳定剂的亲脂性乳化剂一起包括在内。还优选包括油和脂肪两者。乳化剂与稳定剂一起或不与稳定剂一起构成所谓的乳化蜡，且蜡与油和脂肪一起构成所谓的乳化软膏基质(base)，其形成乳膏制剂的油性分散相。乳剂还可含有增甜剂、矫味剂、防腐剂和/或抗氧化剂。合适用于本发明制剂中的乳化剂和乳液稳定剂包括例如Tween 60、Span 80、鲸蜡硬脂醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油酯、月桂基硫酸钠、单独或含蜡的二硬脂酸甘油酯或本领域中公知的其他物质。
式(IIa)化合物还可例如经由任何药学上可接受且合适的可注射形式静脉内、皮下和/或肌内递送。例示性可注射形式包括但不限于例如包含可接受的媒介物和溶剂的无菌水溶液，所述媒介物和溶剂，诸如水、林格氏溶液(Ringer's solution)和等张氯化钠溶液；无菌水包油微乳液；和水性或油性混悬液。
用于肠胃外施用的制剂可呈水性或非水性等张无菌注射溶液或混悬液形式。这些溶液和混悬液可自无菌粉剂或颗粒剂，使用针对用于经口施用的制剂所提及的载体或稀释剂中的一或多者或通过使用其他合适的分散剂或湿润剂和混悬剂来制备。化合物可溶解于水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苄醇、氯化钠、黄蓍胶和/或各种缓冲液中。其他佐剂和施用模式在药物领域中优选且广泛已知。活性成分还可通过以与合适的载体(包括生理盐水、右旋糖或水)或与环糊精(即)、共溶剂增溶(亦即丙二醇)或胶束增溶(即Tween 80)的组合物形式注射来施用。
无菌可注射制剂还可为无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬液，例如作为于1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的媒介物和溶剂中，可采用的有水、林格氏溶液和等张氯化钠溶液。另外，无菌不挥发性油常规用作溶剂或混悬介质。出于此目的，可采用任何温和的不挥发性油，包括合成的单甘油酯或二甘油酯。另外，脂肪酸诸如油酸可用于制备注射剂。
无菌可注射水包油微乳剂可例如通过以下制备：1)使至少一种式(I)化合物溶解于油相，诸如大豆油与卵磷脂的混合物中；2)将含有油相的式(I)与水和甘油混合物组合；和3)处理组合以形成微乳剂。
无菌水性或油性混悬液可根据本领域中已知的方法制备。举例而言，无菌水性溶液或混悬液可用无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂，诸如1,3-丁二醇制备；且无菌油性混悬液可用无菌无毒可接受的溶剂或混悬介质，诸如无菌不挥发性油(例如合成的单甘油酯或二甘油酯)和脂肪酸(诸如油酸)制备。
可用于本发明的药物组合物中的药学上可接受的载体、佐剂和媒介物包括但不限于离子交换剂；氧化铝；硬脂酸铝；卵磷脂；自乳化药物递送系统(SEDDS)，诸如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯；用于药物剂型的表面活性剂，诸如Tween、聚乙氧基化蓖麻油(诸如表面活性剂(BASF))或其他类似的聚合递送基质；血清蛋白，诸如人血清白蛋白；缓冲物质，诸如磷酸盐；甘氨酸；山梨酸；山梨酸钾；饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物；水；盐或电解液，诸如硫酸鱼精蛋白；磷酸氢二钠；磷酸氢钾；氯化钠；锌盐；胶态二氧化硅；三硅酸镁；聚乙烯吡咯烷酮；基于纤维素的物质；聚乙二醇；羧甲基纤维素钠；聚丙烯酸酯；蜡；聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物；聚乙二醇和羊毛脂。环糊精(诸如α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精)或经化学改质修饰的衍生物(诸如羟烷基环糊精，包括2-羟丙基-环糊精和3-羟丙基-环糊精)或其他溶解的衍生物也可有利地用于增强本文所描述的式的化合物的递送。
本发明的药学活性化合物可根据药学常规方法加工以产生用于向包括人及其他哺乳动物的患者施用的药剂。药物组合物可经历常规药学操作，诸如灭菌；和/或可含有常规佐剂，诸如防腐剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、缓冲液等。另外，可用肠溶衣制备片剂和丸剂。此类组合物还可包含佐剂，诸如湿润剂、增甜剂、矫味剂和芳香剂。
所施用的化合物的量和用本发明的化合物和/或组合物治疗疾病病况的给药方案取决于多种因素，所述因素包括受试者的年龄、体重、性别、医学病况；疾病类型；疾病严重程度；施用途径和频率；和所采用的具体化合物。因此，给药方案可广泛变化，但可常规地使用标准方法确定。约0.001至100mg/kg体重，优选约0.0025至约50mg/kg体重且最优选约0.005至10mg/kg体重的日剂量可为适当的。日剂量可以每天一至四次剂量施用。其他给药时间表包括每周一次剂量和每两天周期一次剂量。
出于治疗目的，本发明的活性化合物通常与一或多种适于指示施用途径的佐剂组合。如果经口施用，则化合物可与乳糖、蔗糖、淀粉粉末、烷酸的纤维素酯、纤维素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸和硫酸的钠盐和钙盐、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇混合且随后经制片或包囊以方便施用。此类胶囊或片剂可含有如活性化合物于羟丙基甲基纤维素中的分散液中可提供的控制释放制剂。
本发明的药物组合物包含至少一种式(IIa)化合物且任选包含选自药学上可接受的载体、佐剂和媒介物的其他试剂。本发明的替代组合物包含本文所描述的式(IIa)化合物或其前药和药学上可接受的载体、佐剂或媒介物。
效用
本发明化合物调节激酶活性，包括调节Btk。可通过本发明化合物调节的其他类型的激酶活性包括但不限于激酶的Tec家族，诸如BMX、Btk、ITK、TXK和Tec及其突变体。
因此，式(IIa)化合物在治疗与激酶活性调节，尤其是Btk活性选择性抑制相关的病况方面具有效用。此类病况包括B细胞介导的疾病，其中随细胞内信号传导结果调节细胞因子水平。
如本文所使用，术语“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”涵盖反应性和预防性措施中的任一者或两者，例如经设计以抑制或延缓疾病或病症发作、实现症状或疾病状态的完全或部分减少和/或缓解、改善、减轻或治愈疾病或病症和/或其症状的措施。
鉴于其作为Btk的选择性抑制剂的活性，式(IIa)化合物分别可用于治疗细胞因子相关病况，其包括但不限于炎性疾病，诸如克罗恩病和溃疡性结肠炎、哮喘、移植物抗宿主病、慢性阻塞性肺病；自身免疫疾病，诸如格雷夫斯病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、牛皮癣；破坏性骨骼病症，诸如骨骼再吸收疾病、骨关节炎、骨质疏松、多发性骨髓瘤相关骨骼病症；增殖性病症，诸如急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病；血管生成病症，诸如包括实体肿瘤、眼血管再生和婴儿血管瘤的血管生成病症；传染病，诸如败血症、败血性休克和志贺杆菌病；神经变性疾病，诸如阿尔兹海默病、帕金森病、由创伤性损伤引起的脑缺血或神经变性疾病；致癌性和病毒性疾病，诸如转移性黑素瘤、卡波西肉瘤、多发性骨髓瘤和HIV感染及CMV视网膜炎、AIDS。
更特定而言，可用本发明化合物治疗的特定病况或疾病包括但不限于胰腺炎(急性或慢性)、哮喘、过敏症、成人呼吸窘迫综合征、慢性阻塞性肺病、肾小球肾炎、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、舍格伦综合征、慢性甲状腺炎、格雷夫斯病、自身免疫胃炎、糖尿病、自身免疫溶血性贫血、自身免疫中性粒细胞减少症、血小板减少症、特应性皮炎、慢性活性肝炎、重症肌无力、多发性硬化症、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、牛皮癣、移植物抗宿主病、内毒素诱发的炎性反应、肺结核、动脉粥样硬化、肌肉变性、恶病质、牛皮癣性关节炎、莱特尔综合征、痛风、创伤性关节炎、风疹关节炎、急性关节膜炎、胰腺β细胞病；特征在于大量中性粒细胞浸润的疾病；类风湿性脊椎炎、痛风性关节炎及其他关节炎病况、川崎病、慢性炎性脱髓鞘多发性神经病(CIDP)、皮肌炎、葡萄膜炎、抗因子VIII疾病、强直性脊柱炎、重症肌无力、古德帕斯彻病、抗磷脂综合征、ANCA相关性脉管炎、皮肌炎/多发性肌炎、脑型疟疾、慢性肺部炎性疾病、硅肺病、肺部类肉瘤病、骨骼再吸收疾病、同种异体移植排斥反应、归因于感染的发热和肌痛、继发于感染的恶病质、骨髓形成、瘢痕组织形成、溃疡性结肠炎、发热、流感、骨质疏松、骨关节炎、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、转移性黑素瘤、卡波西肉瘤、多发性骨髓瘤、败血症、败血性休克和志贺杆菌病；阿尔兹海默病、帕金森病、由创伤性损伤引起的脑缺血或神经变性疾病；血管生成病症，包括实体肿瘤、眼血管再生和婴儿血管瘤；病毒性疾病，包括急性肝炎感染(包括甲型肝炎、乙型肝炎和丙型肝炎)、HIV感染和CMV视网膜炎、AIDS、ARC或恶性肿瘤及疱疹；中风、心肌缺血、中风中的缺血、心脏病发作、器官低氧症、血管增生、心脏和肾脏再灌注损伤、血栓症、心脏肥大、凝血酶诱发的血小板凝集、内毒素血症和/或中毒性休克综合征、与前列腺素内过氧化物酶合成酶-2相关的病况和寻常型天疱疮。
优选的治疗方法为其中病况选自克罗恩病和溃疡性结肠炎、同种异体移植排斥反应、类风湿性关节炎、牛皮癣、强直性脊柱炎、牛皮癣性关节炎、寻常型天疱疮和多发性硬化症的那些。可替换地，优选的治疗方法为其中病况选自缺血再灌注损伤的那些，包括由中风产生的脑缺血再灌注损伤和由心肌梗塞产生的心脏缺血再灌注损伤。另一优选的治疗方法为其中病况为多发性骨髓瘤的治疗方法。
另外，本发明的Btk抑制剂抑制诱导性促炎性蛋白质，诸如前列腺素过氧化物合成酶-2(PGHS-2)(也称为环加氧酶-2(COX-2))的表达。因此，额外Btk相关病况包括水肿、痛觉缺失、发热和疼痛，诸如神经肌肉疼痛、头痛、由癌症引起的疼痛、牙痛和关节炎疼痛。本发明化合物还可用于治疗兽病毒感染，诸如慢病毒感染，包括但不限于马传染性贫血病毒；或逆转录病毒感染，包括猫免疫缺陷病毒、牛免疫缺陷病毒和犬免疫缺陷病毒。
当本文使用术语“Btk相关病况”或“Btk相关疾病或病症”时，各意欲涵盖所有以上鉴定的病况，如同详细重复一样，以及受Btk激酶活性影响的任何其他病况。
“治疗有效量”意欲包括当以单独或组合形式施用以抑制Btk时有效的本发明化合物的量。
一个实施方案提供用于治疗此类Btk激酶相关病况的方法，其包括向有此需要的受试者施用至少一种式(IIa)化合物。可施用治疗此类病况的治疗有效量。可采用本实施方案的方法以治疗Btk激酶相关病况，诸如治疗过敏性病症和/或自身免疫和/或炎性疾病，包括但不限于SLE、类风湿性关节炎、多发性血管炎、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、重症肌无力、过敏性鼻炎、多发性硬化症(MS)、移植排斥反应、I型糖尿病、膜性肾炎、炎性肠病、自身免疫溶血性贫血、自身免疫甲状腺炎、冷和热凝集素病、伊文氏综合征、溶血性尿毒症综合征/血栓性血小板减少性紫癜症(HUS/TTP)、类肉瘤病、舍格伦综合征、外周神经病(例如格林-巴利综合征)、寻常型天疱疮和哮喘。
治疗Btk激酶相关病况的方法可包括单独或彼此组合施用至少一种式(IIa)化合物和/或可用于治疗此类病况的其他合适的治疗剂。可施用治疗有效量的至少一种式(IIa)化合物和治疗此类病况的其他合适的治疗剂。因此，“治疗有效量”还意欲包括能有效地治疗Btk激酶相关病况的要求保护的化合物的组合的量。化合物组合优选为协同组合。如例如Chou等人,Adv.Enzyme Regul.,22:27-55(1984)所描述的协同作用在化合物效应(在此情况下，Btk的抑制)在组合施用时大于化合物作为单一药剂单独施用时的累加效应时出现。一般而言，协同效应在化合物的次优浓度下最清楚地表明。协同作用可表现在与单独组分相比，组合的较低细胞毒性、增加的抗Btk作用或一些其他有益作用。
此类其他治疗剂的例示包括皮质类固醇、咯利普兰(rolipram)、钙磷酸蛋白、细胞因子抑制抗炎药(CSAID)、如美国专利第4,200,750号中所公开的4-取代的咪唑并[1,2-A]喹喔啉、白介素-10、糖皮质激素、水杨酸盐、一氧化氮及其他免疫抑制剂；核转位抑制剂，诸如脱氧精胍菌素(DSG)；非类固醇抗炎药(NSAID)，诸如布洛芬(ibuprofen)、塞来昔布(celecoxib)和罗非昔布(rofecoxib)；类固醇，诸如泼尼松(prednisone)或地塞米松(dexamethasone)；抗病毒剂，诸如阿巴卡韦(abacavir)；抗增殖剂，诸如甲氨喋呤、来氟米特(leflunomide)、FK506(他克莫司(tacrolimus)、)；细胞毒性药物，诸如硫唑嘌呤(azathiprine)和环磷酰胺；TNF-α抑制剂，诸如替尼达普(tenidap)、抗TNF抗体或可溶性TNF受体和雷帕霉素(rapamycin)(西罗莫司(sirolimus)或)或其衍生物。
当与本发明化合物组合使用时，上述其他治疗剂可例如以Physicians'DeskReference(PDR)中所指示或如本领域普通技术人员以其他方式确定的那些量使用。在本发明的方法中，此类其他治疗剂可在本发明化合物施用之前、同时或之后施用。本发明还提供能够治疗Btk激酶相关病况，包括如上文所描述的IL-1、IL-6、IL-8、IFNγ和TNF-α介导的病况的药物组合物。
本发明组合物可含有如上文所描述的其他治疗剂且可例如根据诸如药物制剂领域中公知的那些技术，通过采用常规固体或液体媒介物或稀释剂以及对于期望施用模式适当的类型的药用添加剂(例如赋形剂、粘合剂、防腐剂、稳定剂、矫味剂等)来调配。
另一实施方案提供用于疗法中的式(IIa)化合物。在本实施方案中，疗法中的用途可包括施用治疗有效量的式(IIa)化合物。
本发明还提供式(IIa)化合物在制备用于治疗或预防过敏性病症和/或自身免疫和/或炎性疾病的药物中的用途。在本实施方案中，用于制备药物的用途可包括施用治疗有效量的式(IIa)化合物以用于治疗或预防过敏性病症和/或自身免疫和/或炎性疾病。
本发明还提供式(IIa)化合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。本实施方案可包括用于制备药物的用途，其包括施用治疗有效量的式(IIa)化合物以用于治疗或预防过敏性病症和/或自身免疫和/或炎性疾病。
本发明进一步包括包含一或多种式(IIa)化合物和药学上可接受的载体的组合物。
“药学上可接受的载体”是指用于将生物活性剂递送至动物，尤其哺乳动物的本领域中普遍接受的介质。药学上可接受的载体根据本领域普通技术人员范围内的多个因素调配。这些因素包括但不限于所调配的活性剂的类型和性质；待施用含该活性剂的组合物的受试者；组合物的预期施用途径；和所靶向的治疗适应症。药学上可接受的载体包括水性和非水性液体介质，以及多种固体和半固体剂型。此类载体可包括多种不同成分和除活性剂以外的添加剂，此类其他成分出于本领域普通技术人员公知的多种原因(例如稳定活性剂、粘合剂等)包括于制剂中。合适的药学上可接受的载体和涉及其选择的因素的描述见于多种容易获得的来源中，诸如Remington's Pharmaceutical Sciences,第17版(1985)，其以全文引用的方式并入本文中。
式(IIa)化合物可通过适用于待治疗的病况的任何手段施用，其可取决于位点特异性治疗需要或待递送药物的量。对于皮肤相关疾病而言，通常优选局部施用，且对于癌或癌前病况而言，优选全身治疗，但还涵盖其他递送模式。举例而言，化合物可经口递送，诸如呈片剂、胶囊、颗粒剂、粉剂或液体制剂(包括糖浆剂)形式；局部递送，诸如呈溶液、混悬液、凝胶或软膏形式；舌下、含服、肠胃外递送，诸如通过皮下、静脉内、肌内或胸骨内注射或输注技术(例如呈无菌可注射水性或非水性溶液或混悬液形式)；经鼻递送，诸如通过吸入喷雾；局部递送，诸如呈乳膏或软膏形式；经直肠递送，诸如呈栓剂形式；或经脂质体递送。可施用含有无毒的药学上可接受的媒介物或稀释剂的剂量单位制剂。化合物可以适用于立即释放或延长释放的形式施用。立即释放或延长释放可用合适的药物组合物实现，或尤其在延长释放的情况下用诸如皮下植入物或渗透泵的装置实现。
用于局部施用的例示性组合物包括局部载体，诸如Plastibase(用聚乙烯胶化的矿物油)。
用于经口施用的例示性组合物包括混悬液，其可含有例如微晶纤维素用于赋予大体积，作为混悬剂的海藻酸或海藻酸钠、作为粘度增强剂的甲基纤维素及增甜剂或矫味剂(诸如本领域中已知的那些)；和立即释放片剂，其可含有例如微晶纤维素、磷酸二钙、淀粉、硬脂酸镁和/或乳糖和/或其他赋形剂、粘合剂、增量剂、崩解剂、稀释剂和润滑剂(诸如本领域中已知的那些)。本发明化合物还可通过舌下和/或含服施用，例如用模制、压缩或冻干片剂经口递送。例示性组合物可包括快速溶解稀释剂，诸如甘露糖醇、乳糖、蔗糖和/或环糊精。此类制剂中还可包括高分子量赋形剂，诸如纤维素或聚乙二醇(PEG)；用以辅助粘膜粘附的赋形剂，诸如羟丙基纤维素(HPC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羧甲基纤维素钠(SCMC)和/或马来酸酐共聚物(例如Gantrez)；和用以控制释放的试剂，诸如聚丙烯酸共聚物(例如Carbopol 934)。还可添加润滑剂、助流剂、矫味剂、着色剂和稳定剂以便易于制造和使用。
用于经鼻气雾剂或吸入施用的例示性组合物包括溶液，其可含有例如苄醇或其他合适的防腐剂、用以增强吸收和/或生物利用度的吸收促进剂和/或其他溶解剂或分散剂，诸如本领域中已知的那些。
用于肠胃外施用的例示性组合物包括可注射溶液或混悬液，其可含有例如合适的无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂，诸如甘露糖醇、1,3-丁二醇、水、林格氏溶液、等张氯化钠溶液或其他合适的分散剂或润湿剂和混悬剂(包括合成的单甘油酯或二甘油酯)及脂肪酸(包括油酸)。
用于经直肠施用的例示性组合物包括栓剂，其可含有例如合适的无刺激性赋形剂，诸如可可脂、合成的甘油酯或聚乙二醇，其在常温为固体但在直肠腔内液化和/或溶解以释放药物。
本发明化合物的治疗有效量可由本领域普通技术人员确定且包括每天约0.05至1000mg/kg、1至1000mg/kg、1至50mg/kg、5至250mg/kg、250至1000mg/kg体重活性化合物的哺乳动物的例示性剂量，其可以单一剂量或单独分次剂量(诸如每天1至4次)形式施用。应理解，任何具体受试者的特定剂量水平和剂量频率可改变且其将取决于多种因素，所述因素包括所采用的特定化合物的活性；所述化合物的代谢稳定性和作用时长；受试者的物种、年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；施用模式和时间；排泄速率；药物组合；和具体病况的严重程度。治疗的优选受试者包括动物，最优选为哺乳动物物种，诸如人和家养动物，诸如犬、猫、马等。因此，当本文使用术语“患者”时，该术语意欲包括所有受试者，最优选为受Btk酶水平介导影响的哺乳动物物种。
在下文所描述的一或多种测定中测试如以下“实施例”部分中详述的式(I)化合物的实例。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物以2nM或小于2nM，例如0.001至2nM的IC50值抑制Btk酶，如人重组Btk酶测定所测量。该实施方案中包括以1nM及更小，例如0.001至1nM的IC50值抑制Btk酶的式(IIa)化合物。该实施方案的其他化合物以0.5nM及更小，例如0.001至0.5nM的IC50值抑制Btk酶。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物在抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量方面具有可用的效能，其IC50值为450nM或更小，例如0.1至450nM。该实施方案中包括在以150nM或更小，例如0.1至150nM的IC50值且以60nM或更小，例如0.1至60nM的IC50值抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量方面具有效能的式(IIa)化合物。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物以2nM或更小，例如0.001至2nM的IC50值抑制Btk酶，如人重组Btk酶测定所测量，且以450nM或更小，例如0.1至450nM的IC50值抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物以2nM或更小，例如0.001至2nM的IC50值抑制Btk酶，如人重组Btk酶测定所测量，且以150nM或更小，例如0.1至150nM的IC50值抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物以2nM或更小，例如0.001至2nM的IC50值抑制Btk酶，如人重组Btk酶测定所测量，且以60nM或更小，例如0.1至60nM的IC50值抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物以1nM及更小，例如0.001至1nM的IC50值抑制Btk酶，如人重组Btk酶测定所测量，且以450nM或更小，例如0.1至450nM的IC50值抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物以1nM及更小，例如0.001至1nM的IC50值抑制Btk酶，如人重组Btk酶测定所测量，且以150nM或更小，例如0.1至150nM的IC50值抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物以1nM或更小，例如0.001至1nM的IC50值抑制Btk酶，如人重组Btk酶测定所测量，且以60nM或更小，例如0.1至60nM的IC50值抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物以0.5nM及更小，例如0.001至0.5nM的IC50值抑制Btk酶，如人重组Btk酶测定所测量，且以450nM或更小，例如0.1至450nM的IC50值抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物以0.5nM及更小，例如0.001至0.5nM的IC50值抑制Btk酶，如人重组Btk酶测定所测量，且以150nM或更小，例如0.1至150nM的IC50值抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量。
在一个实施方案中，式(IIa)化合物以0.5nM或更小，例如0.001至0.5nM的IC50值抑制Btk酶，如人重组Btk酶测定所测量，且以60nM或更小，例如0.1至60nM的IC50值抑制抗人IgM刺激的Ramos RA1 B细胞中的细胞内钙通量。
式(IIb)化合物具有作为测定，诸如本文所公开的人全血Btk不活化测定中的探针分子的效用。
制备方法
本发明化合物可以有机合成领域技术人员已知的多种方法制备。本发明化合物可使用下文所描述的方法以及有机合成化学领域中已知的合成方法或如本领域技术人员所了解的其变化形式合成。优选方法包括但不限于下文所描述的方法。反应在适于所采用的试剂和材料且适于实现转化的溶剂或溶剂混合物中进行。有机合成领域技术人员应理解，分子上存在的官能团应与所提出的转化相符。有时这将需要作出判断以修改合成步骤顺序或选择一种特定流程方案而非另一种，从而获得期望的本发明化合物。
有机合成领域技术人员将认识到，中间化合物或式(I)化合物中所存在的一些官能基可能对用于制备它们或使其转化成其他中间体或式(I)化合物的反应条件中的一些是不稳定或不适合的。在这些情况下，该等官能团可通过转化成对将采用的反应条件稳定或更适合的替代官能团而受到保护。这些受保护的官能团可随后在合成后期转化回初始官能团。实例为以甲酸酯保护甲酸、以叔丁氧基羰基(Boc)衍生物或苄氧羰基(Cbz)衍生物保护伯胺或仲胺或以2-三甲基硅烷基乙氧基甲基(SEM)衍生物保护咔唑或四氢咔唑氮。保护基的用途是文献中公知的；描述经训练的从业者的许多替代方案的权威性记述为Wuts,P.等人,Greene's Protective Groups in Organic Synthesis,第四版,Wiley-Interscience(2006)。
表示某些式(I)化合物的化合物3可使用方案1中所示的方法制备。
方案1
可使经取代的咔唑甲酰胺或四氢咔唑甲酰胺1(其中Y为适当的基团，诸如Br、Cl或三氟甲烷磺酰基氧基)与硼酸或硼酸酯2(其中R为例如H、烷基或一起形成任选取代的1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(dioxaboralane)或1,3,2-二氧杂硼杂环己烷(dioxaborinane))(其中Ar表示式(I)的基团Q中的一个，其中与咔唑或四氢咔唑部分的连接点位于Q的苯环上)反应，得到化合物3。该反应可通过使用合适的碱诸如碳酸钾、碳酸铯或磷酸三钾和合适的催化剂诸如四(三苯基膦)钯、1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)或1,1′-双(二叔丁基膦基)二茂铁氯化钯(II)，于任选具有一或多种合适的共溶剂诸如水或乙醇的合适的溶剂诸如1,4-二噁烷、N,N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃中进行。此类偶联反应通常称为铃木-宫浦(Suzuki-Miyaura)偶联反应且在化学文献中已知(参见例如Heravi,M.等人,Tetrahedron,68:9145(2012)及其中所引用的参考文献)。
可选择地，可使用化学文献(参见例如Ishiyama,T.等人,Tetrahedron,57:9813(2001)及其中所引用的参考文献)中已知的方法将经取代的咔唑甲酰胺或四氢咔唑甲酰胺1转化成对应的硼酸或硼酸酯化合物4(其中R为例如H、烷基或一起形成任选取代的1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷或1,3,2-二氧杂硼杂环己烷)。此类方法的实例为1与试剂诸如4,4,4′,4′,5,5,5′,5′-八甲基-2,2′-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)，在碱诸如乙酸钾和合适的催化剂诸如1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)存在下，于合适的溶剂中反应。可选择地，化合物1(其中Y为Br)与有机金属试剂诸如丁基锂或氯化异丙基镁反应，继而用硼酸酯诸如硼酸三甲酯或硼酸三异丙酯处理，随后继而水解所得硼酸酯可提供硼酸4(R＝H)。使用如上文所描述的铃木-宫浦偶联反应，化合物4与合适的化合物5(其中Ar表示式(I)的基团Q中的一个，其中与咔唑或四氢咔唑部分的连接点位于Q的苯环上，且Y为适当的基团，诸如Br、Cl或三氟甲烷磺酰基氧基)反应也可提供化合物3。
可使用针对由化合物1制备化合物4所描述的相同方法，由化合物5制备化合物2。
在化合物3为四氢咔唑甲酰胺(其中虚线表示单键)且R1a和R1b彼此不同的情况下，手性中心将存在于R1a和R1b的连接点处，且此类化合物将以两种对映异构体的形式存在。因此，化合物3可分离为外消旋混合物，或如果化合物3由化合物1或化合物4(其为单一对映异构体或非外消旋对映异构体混合物)制备，则化合物3可分离为单一对映异构体或非外消旋对映异构体混合物。如果化合物3含有手性中心且不为单一对映异构体，则可使用本领域中已知的方法，诸如手性固定相制备型色谱将其分离成两种单一对映异构体。
方案2
在化合物3的某些情况下，R3不为氢；且Ar为其中R4不为H的苯环。在这些情况下，位阻可能造成围绕键标记的a的有限旋转，且化合物3a展现手性(称为旋转对映异构现象)且可以两种对映异构体3b和3c的形式存在，如方案2中所示。在某些条件下，诸如手性固定相色谱，对映异构阻转异构体在色谱图中可观测为两个单独峰。此类化合物可分离为对映异构体的混合物，或可使用本领域中已知的方法，诸如固定相制备型色谱分离对映异构体。在适当的储存和处理条件下，分离的对映异构体可为可分离且稳定的。
在某些情况下，化合物3为四氢咔唑甲酰胺(其中虚线表示单键)且R1a和R1b彼此不同；R3不为氢；且Ar为其中R4不为H的苯环。在此情况下，存在两个手性中心：如上文所描述的R1a的连接点和键标记的a。因此，四种非对映异构体为可能的(3e、3f、3g和3h)，如方案3中所示。化合物3d可因此以所有四种非对映异构体的混合物或单一非对映异构体或两种或大于两种非对映异构体的混合物的形式存在。非对映异构体对(3e和3h或3f和3g)的外消旋混合物为可能的。如上文所描述，可使用文献中已知的方法，诸如手性固定相色谱分离非对映异构体。
方案3
在某些情况下，化合物3可由手性四氢咔唑甲酰胺1或4的单一对映异构体(其中R3不为氢)制备。如果Ar为其中R4不为H的苯环，则两种非对映异构体的混合物可由得到化合物3的铃木-宫浦反应产生。实例为示于方案3中的3i和3j，其中R1、R3和R4均不为氢。由适当的化合物1或4的一种对映异构体形成的化合物3i将为非对映异构体3e和3f的混合物，而由适当的化合物1或4的另一对映异构体形成的化合物3j将为非对映异构体3g和3h的混合物。如上文所描述，可使用文献中已知的方法，诸如色谱或选择性结晶来分离这些非对映异构体。
在1或4为手性四氢咔唑甲酰胺的一些情况下，手性诱导可在铃木-宫浦偶联反应期间进行，得到化合物3，其中R3不为H且Ar为其中R4不为H的苯环。在这些情况下，可获得非对映异构体的混合物，其不为等摩尔混合物；即，化合物3可为非对映异构体的混合物，其中相比于具有相反绝对构型的键a的一或多种非对映异构体，在更大程度上存在具有一种绝对构型的键a的非对映异构体中的一或多者。
可使用方案4中所说明的方法制备由7表示的某些式(I)化合物。
方案4
这些方法涉及使带有伯胺或仲胺的化合物6(即，其中XH表示式(I)的基团Q，其中如果需要R7a、R7b、R7c或R7d经H置换)与适当的试剂Q′-Z(其中如果需要Q′表示R7a、R7b、R7c或R7d或此类基团的前体，且Z表示诸如Cl或OH的离去基)反应，得到化合物7，其中XQ′表示由此类反应产生的式(I)的基团Q中的一者。胺的此类反应为文献中已知的。此类反应的一个实例为化合物6的胺与羧酰氯或羧酸酐的酰化，其通常于合适的溶剂诸如四氢呋喃、乙酸乙酯、乙腈或二氯甲烷中，通常在碱诸如三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶或无机碱诸如氢氧化钠或碳酸钾的水溶液存在下进行。可选择地，可使用溶剂诸如吡啶，在此情况下溶剂还可充当碱。
方案4中所示的反应的另一实例为化合物6的胺与羧酸的酰化，其使用文献中已知的多种酰胺偶联试剂中的任一者，例如(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻鎓六氟磷酸盐(也称为BOP或卡斯特罗试剂)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲脲鎓六氟磷酸(也称为HATU)或诸如N,N′-二环己基碳二亚胺或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(也称为EDC)与试剂诸如1-羟基苯并三唑(也称为HOBT)或1-羟基-7-氮杂苯并三唑(也称为HOAT)的组合。此类反应通常于合适的溶剂诸如乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷-2-酮中，在合适的碱诸如三乙胺或二异丙基乙胺存在下进行。
可用于制备化合物7(其中Q′为SO2CH＝CH2)的方案4中所示的反应的另一实例为于合适的溶剂诸如二氯甲烷或四氢呋喃中，在碱诸如三乙胺或二异丙基乙胺存在下用2-氯乙烷磺酰氯处理化合物6的胺。在此情况下，可形成中间体2-氯乙磺酰胺，其在碱存在下可经历HCl消除得到期望的乙烯磺酰胺。
可如方案5中所示制备方案4得某些化合物6(其中XH表示合适的经取代的3-氨基苯基、合适的1,2,3,4-四氢异喹啉基、合适的吲哚啉基、合适的异吲哚啉基或合适的1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)。
方案5
使用如上文所描述的铃木-宫浦偶联(方案1)，化合物1与硼酸或硼酸酯8(其中XP类似于方案4中的XH；P可为H或合适的胺保护基，诸如叔丁氧基羰基(Boc)或苄氧羰基(Cbz)，其作为胺的保护基在文献中为已知的)的反应可在必要时移除保护基P之后提供对应的化合物6。如果化合物8中的P表示H，则可直接获得化合物6。
类似于方案1中所说明的方法，制备方案4的化合物6(其中XH表示合适的2-取代-3-氨基苯基、合适的1,2,3,4-四氢异喹啉基、合适的吲哚啉基、合适的异吲哚啉基或合适的1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)的替代方法也示于方案5中。使用如上文所描述的铃木-宫浦偶联，方案1的硼酸或硼酸酯4(其中R为例如H、烷基或一起形成任选取代的1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷或1,3,2-二氧杂硼杂环己烷)与化合物9(其中Y为合适的离去基，诸如Br、Cl或三氟磺酰氧基)的反应也可提供化合物6。如上文所描述，P可为H或P可为合适的保护基，在此情况下脱保护可提供化合物6。
此外，可使用针对由化合物1制备化合物4(方案1)所描述的相同方法，由化合物9制备化合物8。
可如方案6中所示制备表示方案4的某些化合物6的化合物13。
方案6
使用文献中已知的方法，化合物1与脱水剂诸如磷酰氯的反应可提供腈10。用合适的经单保护的二胺诸如氨基吡咯烷或氨基哌啶(由HN-X′-NP 11表示，其中P可表示合适的保护基诸如Cbz或Boc)处理化合物10可提供对应的化合物12。化合物10转化成化合物12可使用合适的钯催化剂诸如三(二亚苄基丙酮)二钯、配体诸如2,2′-双(二苯基膦基)-1,1′-联二萘(也称为BINAP)或4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(也称为Xantphos)和碱诸如碳酸铯或叔丁醇钠，于合适的溶剂诸如1,4-二噁烷、甲苯、N,N-二甲基乙酰胺或N-甲基吡咯烷-2-酮中实现。通常称为布赫瓦尔德(Buchwald)偶联的该反应是文献中公知的(参见例如Surry,D.等人,Angew.Chem.,47:6338(2008)及其中所引用的参考文献)。可通过在合适的条件下进行处理，例如通过与硫酸水溶液一起加热来使化合物12的腈部分水解成对应的酰胺，得到化合物13，其为方案4的化合物6的实例。保护基P(如果存在于化合物12中)可使用化学文献中已知的方法在该反应期间移除，或者可在腈水解步骤之前或之后移除。
将注意到，化合物12和13含有自11的3-氨基吡咯烷或3-氨基哌啶产生的手性中心。因此，如果化合物1为非手性的，则化合物12和13可以外消旋混合物、单一对映异构体或对映异构体的非外消旋混合物的形式存在。在化合物1为手性四氢咔唑甲酰胺的情况下，化合物12和13可以非对映异构体的混合物或单一非对映异构体的形式存在。如果化合物1为非手性的且11为单一对映异构体，则可形成化合物12的单一对映异构体。如果化合物1为非手性的且11为对映异构体的外消旋或非外消旋混合物，则将产生化合物12的两种对映异构体，其可例如通过手性固定相色谱分离。如果化合物1为手性的且单一对映异构体且11为单一对映异构体，则可形成化合物12的单一非对映异构体，但如果11为对映异构体的外消旋或非外消旋混合物，则将形成化合物12的两种非对映异构体的混合物。如果化合物1为对映异构体的手性且外消旋或非外消旋混合物且11为单一对映异构体，则将形成化合物12的两种非对映异构体的混合物，但如果11为对映异构体的外消旋或非外消旋混合物，则将形成化合物12的四种非对映异构体的混合物。可例如通过手性或非手性固定相色谱分离非对映异构体的混合物。
可通过方案7中所示的方法制备化合物14，其为式(I)化合物的实例。可在催化剂诸如四(三苯基膦)钯存在下使化合物15(其可通过将合适的保护基诸如三甲基硅烷基乙氧基甲基安装于化合物10上来制备；参见方案6)与合适的有机锌化合物诸如16反应，得到化合物17。此类钯催化的有机锌化合物的偶联通常称为根岸(Negishi)偶联，其为化学文献中公知的(参见例如Negishi,E.等人于De Meijere,A.等人编,Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions,第二版,第815页,Wiley-VCH(2004)中)。化合物17的保护基的移除和在催化剂诸如四(三苯基膦)钯存在下与适当的有机锡烷诸如三正丁基(乙烯基)锡烷的反应可提供化合物18。此类钯催化的有机锡化合物的偶联通常称为施蒂勒(Stille)偶联，其为化学文献中公知的(参见例如Stille,J.,Angew.Chem.,Int.Ed.Engl.,25:508(1986))。使用方案6或相关方法中所描述的方法，通过水解将化合物18的腈转化成甲酰胺可提供化合物14。
方案7
可使用方案8中所示的程序制备用于制备式(I)化合物的化合物1(参见方案1)。
方案8
使用文献中已知的方法，例如通过用含亚硝酸钠的盐酸水溶液处理，继而用氯化亚锡(II)还原来转化成对应的重氮盐，可将经取代的2-氨基苯甲酸19(文献中已知，或使用文献中已知的程序制备)转化成呈盐酸盐形式的对应的2-肼基苯甲酸20。于具有适当的催化剂(例如含盐酸的乙醇、含对甲苯磺酸或三氟乙酸的甲苯或乙酸)的合适的溶剂中(在此情况下溶剂也可充当催化剂)，20与合适的环己酮21的反应可提供对应的经取代的四氢咔唑22。该反应通常称为费歇尔(Fischer)吲哚合成且为化学文献中已知的(例如参见Kamata,J.等人,Chem.Pharm.Bull.,52:1071(2004))。可选择地，费歇尔吲哚合成可以两个连续步骤进行：在合适的条件下，20可与21反应(诸如在任选具有合适的催化剂(诸如对甲苯磺酸)的适当溶剂诸如乙醇或甲苯中)以形成中间体腙，其可分离且随后在合适的条件(例如，含盐酸的乙醇、含氯化锌的乙酸或含三氟乙酸的甲苯)下进一步反应得到化合物22。
使用化学文献中已知的方法，例如通过用草酰氯或亚硫酰氯处理，继而用氨处理，将化合物22转化成对应的酰氯；或通过在偶联剂诸如碳二亚胺或EDC与HOAT的混合物存在下用氨或氯化铵处理化合物22，可将化合物22的羧酸转化成化合物23的对应的羧酰胺(其为方案1中所示的化合物1的实例)。在R1b和R2b均为H的化合物23的情况下，可使用化学文献中已知的方法，于合适的溶剂中，例如通过用氧化剂诸如DDQ处理化合物23来进行化合物23至对应的咔唑25(其为方案1中所示的化合物1的另一实例)的转化。
可选择地，酰胺形成和氧化步骤的顺序可颠倒以将化合物22(其中R1b和R2b均为H)转化成化合物25。因此，可使用上文所描述的程序或类似程序使化合物22(其中R1b和R2b均为H)氧化，得到对应的化合物24。可随后再次使用上文所描述的程序或类似程序将化合物24的羧酸转化成伯酰胺，得到对应的化合物25。
化合物22和23(其中R1a和R1b彼此不同)含有手性中心且因此以两种对映异构体的形式存在。如方案8中所示制备化合物22和23可提供外消旋产物，其可用于制备式(I)化合物，如方案1和6中所示。可选择地，使用公知方法诸如手性固定相色谱，化合物22和23可拆分成分离的对映异构体。
有机合成领域技术人员将认识到，一些取代基R1a可能与用于制备如方案1、4、5、6、7和8中所示的式(I)化合物或中间化合物的反应条件不相容。在这些情况下，在某些合成步骤期间，不同取代基可替代R1a且使用化学文献中已知的方法在合成的适当阶段转化成R1a。可选择地，在一些情况下，在某些合成步骤期间，合适的保护基可用于保护R1a且在合成的适当阶段移除。此类情况对于本领域技术人员将为显而易见的。此类合成转化的一些实例示于方案9中。
方案1中所示的带有某些取代基R1a和R1b的化合物1可由前体化合物26制备。可使用方案8中所示的方法，但3-氧代环己烷甲酸乙酯取代方案8中的化合物21，制备化合物26。(化合物26的一些实例描述于文献中，例如美国专利第8,084,620号中的中间体47-2及48-1和实施例73-1)。化合物26的羧酸酯至R1a和R1b的一些转化示于方案9中；这些以及其他中的一些还在美国专利第8,084,620号的实施例中说明。方案9中的化合物27、29和31为方案1中所示的化合物1的实例。
方案9
通过用含合适的还原剂诸如氢化锂铝的合适的溶剂诸如四氢呋喃处理，可使化合物26的酯部分还原成化合物27(Ra和Rb均为H)的对应的伯原醇(primary carbinol)。可选择地，通过用含合适的试剂诸如甲基氯化镁或甲基锂的合适的溶剂诸如四氢呋喃处理，可将化合物26的酯部分转化成化合物27(Ra和Rb均为甲基)的对应的叔原醇(tertiarycarbinol)。
例如通过用含水性氢氧化锂或氢氧化钠的合适的共溶剂诸如甲醇、乙醇或四氢呋喃处理，可使化合物26的酯部分水解成化合物28的对应的甲酸。例如通过转化成N,O-二甲基羟肟酸盐(通常称为魏因勒布(Weinreb)酰胺)，继而用试剂诸如甲基氯化镁或甲基锂处理，且随后用合适的还原剂诸如硼氢化钠还原由此形成的酮，可将化合物28的羧酸部分转化成化合物27(Ra和Rb中的一者为H且另一者为甲基)的仲原醇(secondary carbinol)部分。可选择地，使用多种方法中的任一者，诸如转化成酰氯，继而用氨或伯胺或仲胺处理，或通过在合适的偶联试剂诸如HATU、BOP或EDC与HOBT或HOAT的组合存在下用氨或氯化铵或伯胺或仲胺处理，可将化合物28的羧酸部分转化成化合物29的酰胺。
在化合物26的虚线表示单键的情况下，通过用含碱诸如双(三甲基硅烷基)氨基锂或二异丙基氨基锂的合适的溶剂诸如四氢呋喃处理化合物26，且用烷化剂诸如碘甲烷处理所得阴离子，可使带有酯部分的碳原子烷基化，得到其中R′为甲基的化合物30。可随后通过用于制备如上文所描述的化合物27的相同方法，将化合物30的酯部分转化成化合物31(其中Ra和Rb均为H、均为甲基或一者为H且另一者为甲基)的原醇部分。
用于制备式(I)化合物的方案1的某些化合物1还可使用方案10中所示的程序制备。
方案10
由如方案8(参见例如美国专利第8,084,620号，中间体48-1)中所示的适当的2-肼基苯甲酸制备的化合物32可用适当的卤化试剂处理，得到化合物33，其中R3为卤素原子。举例而言，用氯化试剂诸如N-氯代琥珀酰亚胺处理化合物32可得到化合物33，其中R3为Cl，且用氟化试剂诸如1-(氯甲基)-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-双(四氟硼酸)盐处理化合物32可得到化合物33，其中R3为F。可使用文献中已知的方法(其中一些描述于方案9的论述中)实现化合物33至对应的化合物34(其为方案1的化合物1的实例)的转化。
如方案11中所示，可将化合物35转化成化合物36，其为方案1的化合物5的实例。类似地，可将化合物37转化成化合物38，其为方案1的化合物2的实例。
方案11
在方案11中，Y表示合适的基团，诸如Br、Cl或三氟甲烷磺酰基氧基；(RO)2B表示硼酸或硼酸酯；且XH表示式(I)的基团Q，其经由连至Q的苯环的键连接至式(I)的咔唑或四氢咔唑部分，但其中R7a、R7b、R7c或R7d，如果需要，经H置换；且Q′表示R7a、R7b、R7c或R7d。可使用针对方案4中化合物6至化合物7的相似转化所描述的相同方法实现化合物35至化合物36的转化和化合物37至化合物38的转化。此外，可使用针对方案1中化合物1至化合物4的转化所描述的方法实现化合物35至化合物37的转化和化合物36至化合物38的转化。
在一些情况下，当将中间化合物转化成另一中间化合物或式(I)化合物需要一个以上合成反应时，可改变个别步骤的顺序。有机合成领域技术人员将认识到此类情况。一个实例方案展示于11中。化合物35至化合物38的转化可通过(1)将化合物35的胺转化成化合物36的经取代的胺，继而(2)将化合物36的基团Y转化成化合物38的硼酸或硼酸酯来进行。可选择地，化合物35至化合物38的相同转化可通过(1)将化合物35的基团Y转化成化合物37的硼酸或硼酸酯，继而(2)将化合物37的胺转化成化合物38的经取代的胺来进行。另一实例展示于方案8中。化合物22至化合物25的转化可通过(1)将化合物22的甲酸转化成化合物23的甲酰胺，继而(2)使化合物23氧化成咔唑25来进行。可选择地，化合物22至化合物25的相同转化可通过(1)使化合物22氧化成咔唑24，继而(2)将化合物24的甲酸转化成化合物25的甲酰胺来进行。
实施例
本发明化合物和用于制备本发明化合物的中间体可使用以下实施例中所示的程序及相关程序制备。用于这些实施例中的方法和条件及这些实施例中制备的实际化合物并不意欲为限制性的，但意欲表明可如何制备本发明化合物。当未通过本文所描述的程序制备时，用于这些实施例中的起始物质和试剂通常为市售的或在化学文献中报道或可通过使用化学文献中所描述的程序制备。本发明在以下实施例中进一步定义。应理解实施例仅为了说明而提供。依据以上论述和实施例，本领域技术人员可判明本发明的基本特征，且在不背离其精神和范围的情况下，可进行各种变化和修改以使本发明适于各种用途和条件。因此，本发明不受本文所阐述的说明性实施例限制，而是由其随附的权利要求书限定。
在给定实施例中，短语“干燥和浓缩”通常是指使用无水硫酸钠或硫酸镁自有机溶剂中的溶液中移除大部分残余水，继而过滤且自滤液(通常在减压下且在适合于待制备物质的稳定性的温度下)移除溶剂。柱色谱通常使用快速色谱技术(Still,W.等人,J.Org.Chem.,43:2923(1978))或利用预装填硅胶套筒，使用Isco中压色谱设备(TeledyneCorporation)，用所指示的溶剂或溶剂混合物洗脱来进行。使用大小适于待分离物质的量、通常用不断提高浓度的甲醇或乙腈/水梯度(其还含有0.05％或0.1％三氟乙酸或10mM乙酸铵)洗脱、在适合于柱大小和待实现的分离的洗脱速率下的反相柱(Waters SunFire C18、Waters XBridge C18、Axia C18、YMC S5 ODS等)来进行制备型高压液相色谱(HPLC)。超临界流体色谱(SFC)为使用含有超临界或亚临界流体CO2的流动相和极性有机改性剂(modifier)(诸如醇)的正相HPLC形式，其用于分离手性化合物。(White,C.等人,J.Chromatography A,1074:175(2005))。使用针对个别情况所描述的条件进行对映异构体或非对映异构体的手性SFC分离。通过使用电喷雾电离的液相色谱-质谱分析获得质谱数据。
在Bruker-AXS APEX2 CCD系统上，使用Cu Kα辐射收集单晶x射线衍射数据。用APEX2软体包/程序套件(参见APEX2User Manual,v1.27；Bruker AXS,Inc.,WI53711 USA)进行所测量到的强度数据的索引和处理。当指示时，在数据收集期间，将晶体冷却于Oxford Cryosystems冷沉淀流(cryostream)冷却器(Cosier,J.等人,J.Appl.Cryst.,19:105(1986))的冷流中。通过直接方法解析结构并使用晶体学软件包SHELXTL(参见APEX2用户手册,v1.27；Bruker AXS,Inc.,WI 53711 USA)基于所观测到的反射进行精修。经由全矩阵最小二乘法精修所导出的原子参数(坐标和温度因数)。精修时最小化的函数为Σw(|Fo|-|Fc|)2。R定义为Σ||Fo|-|Fc||/Σ|Fo|，而Rw＝[Σw(|Fo|-|Fc|)2/Σw|Fo|2]1/2，其中w为基于所观测到的强度误差的适当的加权函数。在所有精修阶段检测差异图(differencemap)。将氢引入具有各向同性温度因数的理想化位置中，但不改变氢参数。根据Stout等人,X-Ray Structure Determination:A Practical Guide,MacMillan(1968)中所描述的程序获得单位晶胞参数。
使用ChemBioDraw Ultra版本12.0(CambridgeSoft)确定化学名称。
缩写
Ac 乙酰基
ACN 乙腈
AcOH 乙酸
aq. 水性
anhyd. 无水
Boc 叔丁氧基羰基
BOP (苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻鎓六氟磷酸盐
Cbz 苄氧羰基
Conc. 浓度
DCM 二氯甲烷
DDQ 2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌
DIEA 二异丙基乙胺
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲亚砜
dppf 1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁
EDC 1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐
eq.或Eq.或equiv. 当量
EtOAc 乙酸乙酯
h或hr 小时
HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲脲鎓六氟磷酸盐
HOAT 1-羟基-7-氮杂苯并三唑
HOBT 1-羟基苯并三唑
LC 液相色谱
LCMS或LC/MS 液体色谱质谱
Me 甲基
MeOH 甲醇
MHz 兆赫
min. 分钟
M+ (M+H)+
M+1 (M+H)+
MS 质谱分析
m/z 质荷比
N 当量浓度
NMP N-甲基吡咯烷酮
NMR 核磁共振
ppm 百万分之一
Ret Time或Rt 保留时间
sat.或sat'd. 饱和的
sec 秒
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
中间体1
5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
中间体1A：5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸
用环己酮(2.32mL，22.4mmol)处理4-溴-2-肼基苯甲酸盐酸盐[根据美国专利第8,084,620号，中间体46-1，步骤1制备](5.00g，18.69mmol)于乙酸(80mL)中的混悬液，且在100℃-105℃加热混合物3.5小时。使混合物冷却至室温且浓缩。用EtOAc研磨残余物，且通过过滤收集沉淀物，用EtOAc冲洗且风干。固体于水中用超声处理，且再次通过过滤收集沉淀物，用水洗涤且干燥，得到呈暗黄色粉末的5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(3.05g，56％产率)。质谱m/z 294,296(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.94(1H,br.s.),10.80(1H,s),7.34(1H,d,J＝8.1Hz),7.04(1H,d,J＝8.1Hz),2.84(2H,br.s.),2.60(2H,br.s.),1.63(4H,br.s.)。
中间体1：
用HOAT(0.833g，6.12mmol)和EDC(1.173g，6.12mmol)处理5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(1.50g，5.10mmol)于THF(40mL)中的混合物，且在室温搅拌混悬液。2.25小时后，用无水氨鼓泡混合物约2分钟，形成稠厚浆液。搅拌混合物30分钟，随后用氨再次鼓泡约1分钟。再搅拌2小时后，用水和EtOAc稀释混合物。分离各层且再次用EtOAc萃取水相。经合并的有机层用0.1M NaOH水溶液洗涤两次，随后依次用1M HCl水溶液及饱和盐水洗涤，干燥且浓缩，得到呈淡棕色固体的5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(1.105g，67％产率，纯度约90％)，其不经进一步纯化即使用。质谱m/z 293,295(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(1H,s),8.02(1H,br.s.),7.44(1H,d,J＝7.9Hz),7.38(1H,br.s.),7.14(1H,d,J＝8.1Hz),2.99(2H,br.s.),2.75(2H,br.s.),1.78(4H,br.s.)。
中间体2
(RS)-5-溴-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
遵循用于制备中间体1的程序，将(RS)-3-甲基环己酮转化成(RS)-5-溴-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺。质谱m/z 307,309(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.93(s,1H),8.02(br.s.,1H),7.44(d,J＝8.1Hz,1H),7.42-7.31(m,1H),7.14(d,J＝8.1Hz,1H),3.22-3.10(m,1H),2.97-2.79(m,2H),2.32(dd,J＝16.7,9.5Hz,1H),1.98-1.81(m,2H),1.50-1.33(m,1H),1.07(d,J＝6.6Hz,3H)。
中间体3
5-溴-2,2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
遵循用于制备中间体1的程序，将3,3-二甲基环己酮转化成5-溴-2,2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺。质谱m/z 321,323(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.92(s,1H),8.02(br.s.,1H),7.44(d,J＝8.1Hz,1H),7.38(br.s.,1H),7.15(d,J＝8.1Hz,1H),2.98(t,J＝6.2Hz,2H),2.55(s,2H),1.57(t,J＝6.4Hz,2H),1.00(s,6H)。
中间体4
(RS)-5-溴-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
遵循用于制备中间体1的程序，将(RS)-3-三氟甲基环己酮转化成(RS)-5-溴-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺。质谱m/z 361,363(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.19(s,1H),8.05(br.s.,1H),7.49(d,J＝7.9Hz,1H),7.41(br.s.,1H),7.18(d,J＝7.9Hz,1H),3.39-3.24(m,1H),3.13(dd,J＝16.0,4.3Hz,1H),3.00-2.65(m,3H),2.19(d,J＝12.8Hz,1H),1.74-1.58(m,1H)。
中间体5
(RS)-5-溴-6-氟-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
中间体5A：4-溴-2,5-二氟苯甲酸
用2.5M正丁基锂/己烷(1.04mL，2.59mmol)逐滴处理于干冰-丙酮浴中冷却的1,4-二溴-2,5-二氟苯(640mg，2.35mmol)于无水乙醚(10mL)中的溶液。在-78℃搅拌溶液30分钟，随后用一块干冰处理。5分钟后移除冷却浴，且搅拌混合物另外30分钟，同时温热至室温。用EtOAc和水稀释混合物。分离有机相且用饱和NaHCO3水溶液洗涤两次。经合并的水相用1M HCl水溶液酸化，用DCM萃取两次，且干燥经合并的有机相且浓缩得到呈白色固体的4-溴-2,5-二氟苯甲酸(297mg，53％产率)。
中间体5B：4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐
在95℃加热4-溴-2,5-二氟苯甲酸(2.50g，10.6mmol)和肼(3.81mL，121mmol)于N-甲基-2-吡咯烷酮(2mL)中的混合物4小时。将经冷却的混合物倒入于NaCl-冰浴中冷却的经剧烈搅拌的6M HCl水溶液(400mL)中。通过过滤收集所得沉淀物，用6M HCl水溶液(200mL)洗涤且在真空下干燥，得到呈黄色固体的4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐(1.88g，71％纯度，44％产率)，其不经进一步纯化即使用。
中间体5B的替代合成：
用亚硝酸钠(3.24g，47.0mmol)于水(15.7mL)中的溶液逐滴处理在NaCl-冰浴上搅拌的2-氨基-4-溴-5-氟苯甲酸(10.0g，42.7mmol)于37％HCl水溶液(42.7mL)与水(14.3mL)的混合物中的混悬液。当添加完成时，搅拌混合物另外30分钟。逐滴添加氯化亚锡(II)二水合物(28.9g，128mmol)于37％HCl水溶液(27.5mL)中的溶液。移除冷却浴且在室温搅拌混合物45分钟。过滤稠厚混悬液且用水充分洗涤所收集的沉淀物，且在减压下干燥过夜。用MeOH研磨固体，伴随超声处理，且通过过滤收集沉淀物，用MeOH洗涤且干燥。浓缩滤液且用DCM研磨残余物。通过过滤收集所得固体且干燥，且组合两种固体，得到呈白色固体的4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐(5.37g，44％产率)。质谱m/z249,251(M+H)+。
中间体5C：5-溴-6-氟-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸
在78℃搅拌4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐(5.00g，17.5mmol)和(RS)-3-三氟甲基环己酮(4.07g，24.5mmol)于乙酸(8.0mL)中的混合物18小时。使混合物冷却至室温且浓缩。使残余物混悬于EtOAc中且通过过滤收集沉淀物且干燥。浓缩滤液且使残余物混悬于DCM中。通过过滤收集沉淀物且干燥，且组合两种沉淀物，得到呈淡橙色固体的5-溴-6-氟-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(4.10g，55％产率)。质谱m/z380,382(M+H)+。
中间体5：
用三乙胺(3.67mL，26.3mmol)处理5-溴-6-氟-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(2.00g，5.26mmol)、NH4Cl(2.81g，52.6mmol)和HATU(2.20g，5.79mmol)于DMF(25mL)中的溶液，且在室温搅拌混合物90分钟。添加冰水(30mL)且搅拌混合物30分钟。通过过滤收集沉淀物且用水(60mL)洗涤。使所收集的固体混悬于甲苯(30mL)中两次且在真空下浓缩，随后干燥。对残余物进行用10％MeOH/EtOAc-己烷(0％-100％梯度)洗脱的硅胶柱色谱，得到呈淡黄色固体的5-溴-6-氟-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(1.55g，74％产率)。质谱m/z 379,381(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ7.46(d,J＝9.9Hz,1H),3.46(dd,J＝16.1,4.4Hz,1H),3.11(dd,J＝16.4,5.3Hz,1H),3.06-2.93(m,1H),2.92-2.80(m,1H),2.79-2.59(m,1H),2.37-2.23(m,1H),1.86-1.65(m,1H)。
中间体6
5-溴-3,3,6-三氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
遵循用于将中间体5B转化成中间体5的程序，将4,4-二氟环己酮转化成5-溴-3,3,6-三氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺。质谱m/z 347,349(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.34(s,1H),8.12(br.s.,1H),7.64(d,J＝10.1Hz,1H),7.57(br.s.,1H),3.54(t,J＝14.4Hz,2H),2.97(t,J＝6.6Hz,2H),2.31(tt,J＝13.9,6.7Hz,2H)。
中间体7
4-溴-7-氰基-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体7A：(RS)-5-溴-2-氰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸
在110℃加热(RS)-3-氧代环己烷甲腈(0.200g，1.62mmol)和4-溴-2-肼基苯甲酸盐酸盐[根据美国专利第8,084,620号，中间体46-1，步骤1制备](0.434g，1.62mmol)于乙酸(4.3mL)中的混合物3小时。使混合物冷却至室温，用乙醚(8mL)稀释且搅拌5分钟。通过过滤收集沉淀物，用乙醚洗涤且干燥，得到呈固体的(RS)-5-溴-2-氰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(403mg，78％产率)。质谱m/z 319,321(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.15(br.s.,1H),11.16(s,1H),7.55(d,J＝7.9Hz,1H),7.25(d,J＝8.1Hz,1H),3.47-3.36(m,1H),3.24-2.99(m,4H),2.09(q,J＝5.9Hz,2H)。
中间体7B：4-溴-7-氰基-9H-咔唑-1-甲酸
用DDQ(541mg，2.39mmol)处理(RS)-5-溴-2-氰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(346mg，1.08mmol)于THF(7mL)中的溶液，且在60℃加热混合物2小时。使混合物冷却至室温，与来自5-溴-2-氰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(50.0mg，0.157mmol)和DDQ(78.0mg，0.345mmol)的相同反应的混合物组合，且用乙醚(20mL)稀释经组合的混合物且搅拌。通过过滤收集所得沉淀物，用乙醚洗涤且干燥，得到4-溴-7-氰基-9H-咔唑-1-甲酸(346mg，89％产率)。质谱m/z 315,317(M+H)+。
中间体7：
用28％氨水(0.21mL)和DIEA(0.30mL，1.72mmol)处理4-溴-7-氰基-9H-咔唑-1-甲酸(340mg，1.08mmol)、EDC(248mg，1.30mmol)和HOBT(198mg，1.30mmol)于THF(10mL)中的混合物，且在室温搅拌混合物过夜。添加水且用EtOAc萃取混合物两次。通过过滤收集不可溶物质，用EtOAc洗涤且干燥，得到呈白色固体的4-溴-7-氰基-9H-咔唑-1-甲酰胺(196mg，58％产率)。质谱m/z 314,316(M+H)+。
中间体8
4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺
遵循用于制备中间体7的程序，将环己酮和4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐[中间体5B]转化成4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺。质谱m/z 307,309(M+H)+,290,292(M+H-NH3)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.73(dd,J＝8.1,0.9Hz,1H),7.83(d,J＝9.9Hz,1H),7.69-7.63(m,1H),7.54(ddd,J＝8.2,7.1,1.2Hz,1H),7.29(ddd,J＝8.1,7.1,1.0Hz,1H)。
中间体9
4-溴-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
遵循用于将中间体7A转化成中间体7的程序，将5-溴-6-氟-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸[中间体5C]转化成4-溴-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。质谱m/z 416,418(M+H+CH3CN)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.83(d,J＝8.6Hz,1H),8.00(d,J＝0.7Hz,1H),7.89(d,J＝9.8Hz,1H),7.52(dd,J＝8.4,1.1Hz,1H)。
中间体10
4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体10A：5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-甲酸乙酯
在室温搅拌5-溴-8-氨甲酰基-9H-咔唑-2-甲酸乙酯[根据美国专利第8,084,620号，中间体48-1中所描述的程序合成](0.100g，0.277mmol)和N-氯代琥珀酰亚胺(由甲苯再结晶；0.037g，0.277mmol)于CCl4(10mL)和DMF(2mL)中的混合物112小时。过滤混合物且用CCl4洗涤所收集的沉淀物且在真空下干燥过夜。通过用己烷，随后用EtOAc-己烷(30％，随后50％)洗脱的硅胶(40g)柱色谱纯化残余物，得到呈蓬松白色固体的5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-甲酸乙酯(0.071g，65％产率)。质谱m/z 395,397(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.13(s,1H),8.77(d,J＝8.6Hz,1H),8.53(d,J＝1.1Hz,1H),8.36(br.s.,1H),8.29(s,1H),7.89(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.74(br.s.,1H),4.38(q,J＝7.0Hz,2H),1.38(t,J＝7.0Hz,3H)。
中间体10A的替代制备：
向5-溴-8-氨甲酰基-9H-咔唑-2-甲酸乙酯(90g，249mmol)、CCl4(2900mL)和NMP(600mL)的混合物中添加N-氯代琥珀酰亚胺(36.1g，271mmol)。在45℃搅拌反应混合物2小时。在冷却至室温之后，通过真空过滤收集固体。在60℃于MeOH(1L)中搅拌固体2小时且使混悬液冷却至室温。通过过滤收集固体且干燥，得到5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-甲酸乙酯(69.5g，167mmol，67％产率，95％纯度)。在减压下浓缩滤液以移除CCl4。用水(2L)稀释残余NMP溶液。通过过滤收集所得沉淀物且干燥，得到额外5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-甲酸乙酯(13.7g，25％产率，75％纯度)。
中间体10：
于干冰-丙酮浴中冷却5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-甲酸乙酯(4.14g，10.5mmol)于THF(200mL)中的溶液，且历经30分钟用1.6M甲基锂/己烷(45.8mL，73.2mmol)逐份处理。在-78℃搅拌混合物60分钟，随后用NH4Cl饱和水溶液逐份处理。添加水且用EtOAc萃取混合物两次。将经合并的有机相用水洗涤两次。合并所有水相且用DCM萃取，且用水洗涤该有机相。合并所有有机相，干燥且浓缩。残余物由EtOAc结晶得到固体。通过用EtOAc-己烷(0％-100％梯度)洗脱的硅胶(330g)柱色谱纯化来自母液浓缩的残余物，得到额外固体。组合两种固体，得到呈淡黄色固体的4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(3.13g，78％产率)。质谱m/z 363,365,(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),8.56(d,J＝8.6Hz,1H),8.29(br.s.,1H),8.17(s,1H),7.97(d,J＝1.3Hz,1H),7.66(br.s.,1H),7.42(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),1.52(s,6H)。
中间体10的替代制备：
在氮气下于丙酮-干冰浴中使5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-甲酸乙酯(58.56g，148mmol)于THF(700mL)中的混悬液冷却至-15℃。以使得内部温度保持在-15℃与-10℃之间的速率，用3M甲基氯化镁/THF(395mL，1.19mol)逐滴处理混合物。5小时后，将混合物倒入3个容器中，每个容器各含有约1.5L碎冰和500mL NH4Cl饱和水溶液。用EtOAc萃取所得混合物且干燥并浓缩经合并的有机相。将残余物与来自2个额外批次的物质组合，一种以146mmol 5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-甲酸乙酯为起始物质，且另一种以142mmol 5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-9H-咔唑-2-甲酸乙酯为起始物质，且于丙酮(250mL)中搅拌1小时。通过过滤收集沉淀物，用己烷洗涤且干燥，得到呈固体的4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(134.56g)。浓缩滤液且于丙酮中再次搅拌残余物1小时，形成沉淀物，其通过过滤收集，用己烷洗涤且干燥，得到呈固体的额外4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(7.36g)，总共141.92g(88％产率)。将来自第二次过滤的滤液与来自其他批次的不纯物质组合，且进行用EtOAc-己烷(40％-100％梯度)洗脱的硅胶柱色谱，得到额外4-溴-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。
中间体11
(RS)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
中间体11A：4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸盐酸盐
将亚硝酸钠(3.03g，43.9mmol)于水(14.8mL)中的溶液逐滴添加至在-10℃在NaCl-冰浴上以使温度不超过0℃的速率搅拌的2-氨基-4-溴-5-氯苯甲酸(10.0g，39.9mmol)于37％HCl水溶液(39.9mL)和水(13.3mL)中的混悬液中。在0℃搅拌所得混悬液15分钟，随后用水合氯化亚锡(II)(22.7g，120mmol)于37％HCl水溶液(17mL)中的溶液处理。使所得混合物温热至室温且搅拌60分钟。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤且风干过夜，得到呈灰白色固体的4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸盐酸盐(12.86g，96％产率)。质谱m/z 365,267(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.05(br.s.,1H),7.95(s,1H),7.55(s,1H)。
中间体11B：(RS)-5-溴-6-氯-2-(乙氧基羰基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸
在105℃加热4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸盐酸盐(12.89g，37.6mmol)、(RS)-3-氧代环己烷甲酸乙酯(7.03g，41.3mmol)和乙酸(6.45mL，113mmol)于甲苯(188mL)中的混悬液过夜。16小时后，添加更多的乙酸(6mL)和3-(RS)-氧代环己烷甲酸乙酯(2.00g)，且在110℃加热混合物4.5小时。浓缩混合物且将残余物与甲苯(100mL)和TFA(20mL)组合。在90℃加热混悬液过夜。浓缩经冷却的混合物且使残余物混悬于EtOAc中。通过过滤收集所得固体，用EtOAc洗涤且风干，得到呈黄色固体的(RS)-5-溴-6-氯-2-(乙氧基羰基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(11.0g，73％产率)。质谱m/z 400,402(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.44(br.s.,1H),11.24(s,1H),7.69(s,1H),4.12(qd,J＝7.1,2.3Hz,2H),3.23-2.81(m,5H),2.23-2.09(m,1H),1.91-1.75(m,1H),1.22(t,J＝7.0Hz,3H)。
中间体11C：(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯
遵循用于制备中间体7的程序，将(RS)-5-溴-6-氯-2-(乙氧基羰基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸转化成呈淡棕色固体的(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(8.54g，78％产率)。质谱m/z 399,401(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.44(br.s.,1H),11.24(s,1H),7.69(s,1H),4.12(qd,J＝7.1,2.3Hz,2H),3.23-2.81(m,5H),2.23-2.09(m,1H),1.91-1.75(m,1H),1.22(t,J＝7.0Hz,3H)。该物质混杂(10％-15％)有(RS)-5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺。质谱m/z 370,372,374(M+H)+。不纯物质用于后续反应中。
中间体11：
于干冰-丙酮浴中冷却不纯(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(7.03g，17.6mmol)于THF(200mL)中的溶液，且历经40分钟用1.6M甲基锂/THF(66.0mL，106mmol)逐份处理。60分钟后，在-78℃用NH4Cl饱和水溶液缓慢处理混合物且搅拌10分钟，同时温热至室温。用DCM萃取混合物3次，且依次用水和盐水洗涤经合并的有机相且干燥并浓缩。通过用EtOAc-己烷(0％-100％梯度)洗脱的硅胶(120g)柱色谱纯化残余物，得到呈黄色固体的(RS)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(4.66g)。质谱m/z 385,387(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(s,1H),8.13(br.s.,1H),7.76(s,1H),7.50(br.s.,1H),3.28(d,J＝5.5Hz,1H),2.94(dd,J＝17.1,4.7Hz,1H),2.79-2.66(m,1H),2.49-2.39(m,1H),2.14(d,J＝9.5Hz,1H),1.66(td,J＝11.4,4.1Hz,1H),1.33(qd,J＝12.4,5.2Hz,1H),1.15(s,6H)。
中间体12
(RS)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
中间体12A：(RS)-5-溴-2-(乙氧基羰基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸
在110℃加热4-溴-5-氟-2-肼基苯甲酸盐酸盐[中间体5B](5.37g，18.8mmol)、(RS)-3-氧代环己烷甲酸乙酯(3.52g，20.7mmol)和乙酸(3.23mL，56.4mmol)于甲苯(90mL)中的混合物20小时。在减压下移除溶剂且用甲苯(43mL)和TFA(11mL)稀释残余物。在90℃-94℃搅拌混合物过夜。经冷却的混合物用EtOAc稀释，用超声处理且通过过滤收集沉淀物。浓缩滤液且用超声处理使残余物混悬于EtOAc中，产生另一沉淀物，其也通过过滤收集且用EtOAc洗涤。经组合的固体用MeOH研磨两次，得到固体。浓缩经合并的滤液且用MeOH研磨残余物，得到额外固体。组合固体，得到呈淡黄色固体的(RS)-5-溴-2-乙氧基羰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(3.38g)。质谱m/z 384,386(M+H)+。
中间体12B：(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯
在室温搅拌(RS)-5-溴-2-(乙氧基羰基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(0.513g，1.34mmol)、EDC(0.384g，2.00mmol)和HOBT(0.307g，2.00mmol)于THF(10mL)和DCM(1.7mL)中的混合物20分钟。添加NH4OH水溶液(28％，0.078mL，2.00mmol)，且在室温搅拌混合物60分钟。混合物用EtOAc稀释且用饱和NaHCO3水溶液洗涤两次，随后用盐水洗涤。用EtOAc萃取水层且干燥并浓缩经合并的有机层。于MeOH中用超声处理研磨残余物，得到呈黄色固体的(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(0.432g，84％产率)。质谱m/z 383,385(M+H)+。
中间体12：
历经30分钟用1.6M甲基锂/乙醚(49mL，78mmol)逐滴处理在-78℃的(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(10.0g，26.1mmol)于THF(200mL)中的溶液。在-78℃搅拌混合物45分钟，随后历经25分钟用额外甲基锂溶液(33mL)处理。在-78℃搅拌混合物额外90分钟，随后用NH4Cl饱和水溶液处理且温热至室温。混合物用EtOAc稀释且依次用水和盐水洗涤。用EtOAc萃取水层。干燥且浓缩经合并的有机层。使残余物溶解于EtOAc(约100mL)中且经由用硅胶垫封顶的硅藻土垫过滤。进一步用EtOAc(约1000mL)洗涤硅藻土和硅胶。浓缩经合并的滤液，得到呈淡黄色固体的(RS)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(9.24g，96％产率)。质谱m/z 369,371(M+H)+。
中间体13和14
(R)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(I-13)和
(S)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(I-14)
通过手性超临界流体色谱(柱：Chiralpak IA(3×25cm，5μm)；流动相：CO2-MeOH(50:50)，124mL/min，100巴，45℃；样品配制物：39mg/mL于MeOH-DMSO(4:1)中；注入：2.33mL)分离(RS)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体11](2.35g)的样品。自柱洗脱的第一峰提供呈黄色固体的(R)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体13](1.15g)。质谱m/z 385,387(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.07(s,1H),8.12(br.s.,1H),7.75(s,1H),7.57-7.45(m,1H),4.23(s,1H),3.27(d,J＝4.7Hz,1H),2.93(dd,J＝17.2,4.7Hz,1H),2.78-2.67(m,1H),2.48-2.39(m,1H),2.16-2.08(m,1H),1.69-1.59(m,1H),1.37-1.26(m,1H),1.14(s,6H)。自柱洗脱的第二峰提供呈灰白色固体的(S)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体14](0.92g)。质谱m/z 385,387(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),8.12(br.s.,1H),7.74(s,1H),7.49(br.s.,1H),4.23(s,1H),3.27(d,J＝5.0Hz,1H),2.93(dd,J＝17.1,4.6Hz,1H),2.72(t,J＝11.8Hz,1H),2.48-2.37(m,1H),2.12(d,J＝9.2Hz,1H),1.69-1.59(m,1H),1.38-1.24(m,1H),1.14(s,6H)。
通过使化合物溶解于过量1,2-二氯乙烷-EtOAc-乙酸中且在室温缓慢蒸发溶剂以得到二乙酸溶剂化物制备的晶体的单晶x射线分析来确证中间体13的绝对构型。单位晶胞尺寸： α＝90°、β＝110.607(5)°、γ＝90°； 空间群：P21；中间体30的分子/不对称单元(Z′)：1；密度(计算)1.501g/cm-3。在室温的部分原子坐标给出于表1中且结构的描绘给出于图1中。
表1
在室温中间体13的二乙酸溶剂化物的部分原子坐标
中间体15和16
(S)-5-溴-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(I-15)和
(R)-5-溴-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(I-16)
通过手性超临界流体色谱(柱：OD-H(3×25cm，5μm)；流动相：CO2-MeOH(65:35)，150mL/min，100巴，40℃；样品配制物：66.5mg/mL于MeOH中；注入：1.2mL)分离(RS)-5-溴-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[根据美国专利第8,084,620号，实施例73-1中所描述的程序合成](4.03g)的样品。自柱洗脱的第一峰提供呈淡黄色固体的(S)-5-溴-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体15](1.79g)。自柱洗脱的第二峰提供呈淡黄色固体的(R)-5-溴-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体16](1.82g)。
中间体17和18
(R)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(I-17)和
(S)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(I-18)
通过手性超临界流体色谱(柱：Chiralpak OD-H(3×25cm，5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，150mL/min，40℃)分离(RS)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体12]的样品。自柱洗脱的第一峰提供(R)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体17]。自柱洗脱的第二峰提供(S)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体18]。两种对映异构体的质谱和1H NMR光谱相同。质谱m/z 369,371(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),8.07(br.s.,1H),7.55(d,J＝10.3Hz,1H),7.50(br.s.,1H),4.24(s,1H),3.26(dd,J＝15.8,4.4Hz,1H),2.93(dd,J＝17.1,4.6Hz,1H),2.72(t,J＝11.7Hz,1H),2.48-2.40(m,1H),2.12(d,J＝9.2Hz,1H),1.70-1.62(m,1H)和1.32(qd,J＝12.4,5.3Hz,1H)。
替代的超临界流体色谱分离：
通过手性超临界流体色谱(柱：Chiralpak AD-H(3×25cm，5μm)；流动相：CO2-MeOH(55:45)，150mL/min，40℃)分离(RS)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体12]的样品。自柱洗脱的第一峰提供(S)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体18]。自柱洗脱的第二峰提供(R)-5-溴-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体17]。
中间体19
4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体19A：4-溴-7-乙氧基羰基-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸
在60℃加热(RS)-5-溴-2-(乙氧基羰基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸[中间体12A](2.87g，7.47mmol)和DDQ(3.73g，16.4mmol)于THF(45mL)中的溶液90分钟。经冷却的混合物用EtOAc(约50mL)稀释且搅拌60分钟。通过过滤收集所得沉淀物，用EtOAc洗涤且干燥。浓缩滤液且于MeOH中用超声处理研磨残余物，过滤且用MeOH洗涤沉淀物且干燥。组合两种沉淀物，得到呈淡黄色固体的4-溴-7-乙氧基羰基-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸(2.39g，84％产率)。质谱m/z 380,382(M+H)+。
中间体19B：5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-甲酸乙酯
在室温搅拌4-溴-7-(乙氧基羰基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸(2.39g，6.29mmol)、EDC(1.81g，9.43mmol)和HOBT(1.44g，9.43mmol)于THF(30mL)和DCM(5mL)中的混合物20分钟。添加NH4OH水溶液(28％，0.367mL，9.43mmol)且在室温搅拌混合物4小时。混合物用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液洗涤两次，随后用盐水洗涤。用EtOAc萃取水层且干燥并浓缩经合并的有机层。于MeOH中用超声处理研磨残余物，得到呈淡黄色固体的5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-甲酸乙酯(2.26g，95％产率)。质谱m/z379,381(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),8.70(d,J＝8.3Hz,1H),8.51(d,J＝1.1Hz,1H),8.29(br.s.,1H),8.10(d,J＝10.3Hz,1H),7.87(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.74(br.s.,1H),4.37(q,J＝6.9Hz,2H)和1.37(t,J＝7.1Hz,3H)。1H NMR(500MHz,MeOH-d4)δ8.77(d,J＝8.2Hz,1H),8.36(d,J＝0.9Hz,1H),7.83(d,J＝8.2Hz,1H),7.46(d,J＝8.2Hz,1H),4.12(q,J＝7.0Hz,2H),1.58-1.36(m,4H)和1.26(t,J＝7.2Hz,3H)。
中间体19B的替代合成：
在60℃加热5-溴-8-氨甲酰基-9H-咔唑-2-甲酸乙酯[根据美国专利第8,084,620号，中间体48-1中所描述的程序合成](0.100g，0.277mmol)和1-(氯甲基)-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸)盐(0.100g，0.554mmol)于THF(2mL)和乙腈(2mL)中的混合物过夜。过滤经冷却的混合物且浓缩滤液。使用制备型反相HPLC纯化残余物，得到呈褐色固体的5-溴-8-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-2-甲酸乙酯(0.035g)。
中间体19：
历经10分钟用1.6M甲基锂/乙醚(2.47mL，3.96mmol)逐滴处理在-78的5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-甲酸乙酯(0.500g，1.32mmol)于THF(9.0mL)中的溶液。在-78℃搅拌混合物30分钟，随后用额外甲基锂溶液(1.65mL，2.64mmol)处理，且在-78℃搅拌混合物另外45分钟。混合物用NH4Cl饱和水溶液处理且温热至室温。混合物用EtOAc稀释且依次用水和盐水洗涤。用EtOAc萃取水层，且干燥并浓缩经合并的有机层，得到淡黄色固体，其通过制备型反相HPLC纯化。用饱和NaHCO3水溶液中和适当的级分且浓缩。将残余物分配于EtOAc与水之间且用盐水洗涤有机层。用EtOAc萃取水层且干燥并浓缩经合并的有机层，得到呈淡黄色固体的4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(0.240g，50％产率)。质谱m/z 347,349(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.58(s,1H),8.50(d,J＝8.6Hz,1H),8.22(br.s.,1H),7.96(d,J＝10.3Hz,1H),7.94(d,J＝1.1Hz,1H),7.65(br.s.,1H),7.39(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),5.09(s,1H)和1.51(s,6H)。
中间体19的替代合成：
于冰-水浴中冷却5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-9H-咔唑-2-甲酸乙酯(10.0g，26.4mmol)于THF(300mL)中的溶液，且用3.0M甲基氯化镁/THF(70.3mL，211mmol)逐滴处理。在0℃搅拌溶液18小时，随后倒入1000mL于冰-水浴中冷却的经充分搅拌的NH4Cl饱和水溶液中。所得混合物用水稀释且用EtOAc萃取两次。用水洗涤经合并的有机相两次，随后用盐水洗涤，且干燥并浓缩。通过用EtOAc-DCM(20％-100％梯度)洗脱的硅胶(330g)柱色谱纯化残余物，得到4-溴-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(6.36g，65％产率)。
中间体20
(RS)-5-溴-6-氯-2-(羟基甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
于NaCl/冰浴中冷却不纯的(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯[中间体11C](0.600g，1.50mmol)于THF(18.8mL)中的溶液，且用1M氢化锂铝/THF(4.05mL，4.05mmol)处理。在室温搅拌所得稠厚混悬液1小时，随后用NH4Cl饱和水溶液处理。用EtOAc萃取混合物且用盐水洗涤有机相，干燥且浓缩。使残余物混悬于EtOAc中且通过过滤收集沉淀物且干燥，且进行用EtOAc-己烷(80％-100％梯度)洗脱的硅胶(40g)柱色谱，得到呈固体的(RS)-5-溴-6-氯-2-(羟基甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(378mg，66％产率)。质谱m/z 357,359(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.11(s,1H),8.13(br.s.,1H),7.75(s,1H),7.50(br.s.,1H),4.58(t,J＝5.2Hz,1H),3.42(t,J＝5.9Hz,2H),3.19(d,J＝15.4Hz,1H),2.93-2.77(m,2H),2.39(dd,J＝16.9,9.9Hz,1H),2.02-1.93(m,1H),1.86(br.s.,1H),1.47-1.37(m,1H)。
中间体21
(RS)-5-溴-6-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
中间体21A：(RS)-5-溴-6-氯-2-(乙氧基羰基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸
在115℃加热4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸盐酸盐[中间体11A](3.28g，10.86mmol)和(RS)-1-甲基-3-氧代环己烷甲酸乙酯[其可使用PCT公开第WO2009/153720号，制备43或PCT公开第WO 2013/106535号，实施例254的程序制备](2.00g，10.86mmol)于乙酸(24mL)中的混悬液。所得稠厚混悬液用额外乙酸(12mL)稀释，加热另外6小时，冷却至室温且浓缩。用乙醚研磨残余物且通过过滤收集沉淀物且在真空下干燥，得到呈黄色固体的(RS)-5-溴-6-氯-2-(乙氧基羰基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(3.01g，67％产率)。质谱m/z414,416,418(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.22(s,1H),7.69(s,1H),4.07(qd,J＝7.1,3.5Hz,2H),3.22-2.92(m,3H),2.68(s,1H),2.18-2.07(m,1H),1.87-1.76(m,1H),1.28(s,3H),1.15(t,J＝7.0Hz,3H)。
中间体21B：(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯
用EDC(1.531g，7.98mmol)和HOBT(1.223g，7.98mmol)处理(RS)-5-溴-6-氯-2-(乙氧基羰基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(3.01g，7.26mmol)于DMF(10mL)中的溶液，且在室温搅拌1.5小时。用0.5M NH3/1,4-二噁烷(29.0mL，14.5mmol)处理混合物且搅拌35分钟。用水稀释混合物，且通过过滤收集所得沉淀物，用水洗涤且干燥。于MeOH中研磨固体，通过过滤收集且干燥，得到呈黄色固体的(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(1.91g，64％产率)。质谱m/z 413,415,417(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.21(s,1H),8.14(br.s.,1H),7.77(s,1H),7.52(br.s.,1H),4.14-3.99(m,2H),3.27(d,J＝17.4Hz,1H),3.13-2.92(m,2H),2.65(d,J＝17.2Hz,1H),2.20-2.05(m,1H),1.79(dt,J＝13.6,6.7Hz,1H),1.27(s,3H),1.14(t,J＝7.0Hz,3H)。
中间体21：
在冰-水浴上搅拌(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(587mg，1.42mmol)于THF(5mL)中的混悬液，且用氢化锂铝(188mg，4.97mmol)逐份处理。在0℃搅拌混合物1小时。混合物用NH4Cl饱和水溶液处理且用DCM萃取3次。经合并的有机相用水洗涤，干燥且浓缩。对残余物进行用EtOAc-己烷(梯度20％-100％)洗脱的硅胶(40g)柱色谱，得到呈黄色固体的(RS)-5-溴-6-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(380mg，61％产率)。质谱m/z 371,373,375(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.09(s,1H),8.13(br.s.,1H),7.75(s,1H),7.51(br.s.,1H),4.67-4.60(m,1H),3.30-3.20(m,2H),3.13-3.00(m,1H),2.97-2.85(m,1H),2.66(d,J＝17.4Hz,1H),2.44(d,J＝17.4Hz,1H),1.72-1.61(m,1H),1.58-1.47(m,1H),0.97-0.88(m,3H)。
中间体22和23
(RS)-5-溴-6-氯-N2,N2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺(I-22)和
(RS)-5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺(I-23)
中间体22A：(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸
在室温搅拌不纯的(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯[混杂有(RS)-5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺，中间体11C](1.00g，2.50mmol)和单水合氢氧化锂(0.250g，6.26mmol)于THF-EtOH-水混合物(3:1:1，29.4mL)中的混悬液。15小时后，浓缩混合物。使残余物混悬于水中且用1M HCl水溶液酸化(pH 1-2)。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤且风干，得到呈固体的(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸(1.19g，78％产率)。质谱m/z 371,373,375(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.34(br.s.,1H),11.27-11.13(m,1H),8.14(br.s.,1H),7.77(d,J＝1.8Hz,1H),7.52(br.s.,1H),3.23-3.11(m,1H),3.06-2.65(m,4H),2.20-2.01(m,1H),1.87-1.63(m,1H)。该物质混杂(约30％)有存在于起始物质中的(RS)-5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺。质谱m/z 370,372,374(M+H)+。不纯物质用于后续反应中。
中间体22和23：
在室温搅拌不纯的(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸[混杂有(RS)-5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺](1.19g，3.20mmol)、EDC(0.921g，4.80mmol)、HOBT(0.736g，4.80mmol)和二甲胺(4.80mL，9.61mmol)于THF(47.4mL)和DCM(23.7mL)中的混合物。17小时后，将混合物分配于EtOAc与饱和NaHCO3水溶液之间。有机相用饱和盐水洗涤，干燥且浓缩。对残余物进行用MeOH-EtOAc(4:96)洗脱的硅胶(80g)柱色谱，得到呈固体的(RS)-5-溴-6-氯-N2,N2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺[中间体22](0.585g，44％产率)。质谱m/z 398,400,402(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.18(s,1H),8.13(br.s.,1H),7.76(s,1H),7.51(br.s.,1H),3.26-3.18(m,1H),3.10-2.82(m,10H),2.06-1.96(m,1H),1.70-1.56(m,1H)。还分离出存在于起始物质中的呈固体的(RS)-5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺[中间体23](0.300g)。质谱m/z370,372,374(M+H)+。
中间体24
(RS)-5-溴-N2,N2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺
遵循用于制备中间体22的程序，以99％产率将(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸[根据美国专利第8,084,620号，中间体49-3制备]转化成(RS)-5-溴-N2,N2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺。质谱m/z 364,366(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.03(s,1H),8.02(br.s.,1H),7.45(d,J＝8.1Hz,1H),7.38(br.s.,1H),7.15(d,J＝8.1Hz,1H),3.21(dd,J＝16.2,3.4Hz,1H),3.10-3.00(m,4H),2.98-2.81(m,6H),2.05-1.98(m,1H),1.71-1.57(m,1H)。
中间体25
(RS)-5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺
在室温搅拌(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸[根据美国专利第8,084,620号，中间体49-3制备](0.3g，0.890mmol)、HOBT(0.164g，1.07mmol)、DIEA(0.622mL，3.56mmol)、EDC(0.205g，1.07mmol)和NH4Cl(0.095g，1.78mmol)于DMF(5mL)中的混合物过夜。浓缩混合物且用水和EtOAc稀释残余物。过滤混合物以收集沉淀物，其用水和EtOAc洗涤且风干，得到固体。分离滤液各层且干燥并浓缩有机相。将残余物与固体组合，得到呈灰白色固体的(RS)-5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺，其不经进一步纯化即使用。质谱m/z 336,338(M+H)+。
中间体26
(RS)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
在干冰-丙酮浴上搅拌(RS)-5-溴-8-氨甲酰基-6-氯-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯[中间体21B](635mg，1.54mmol)于THF(10mL)中的混悬液，且用1.6M甲基锂/乙醚(6.71mL，10.7mmol)逐滴处理。在-78℃搅拌混合物30分钟。用NH4Cl饱和水溶液处理混合物，用DCM萃取3次，且经合并的有机相用水洗涤，干燥且浓缩。对残余物进行用EtOAc-己烷(20％-100％梯度)洗脱的硅胶(40g)柱色谱，得到不纯物质，其再次进行用甲醇氨-DCM(3％-10％梯度)洗脱的硅胶柱色谱，得到呈黄色固体的(RS)-5-溴-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(650mg，大于定量产率，含有残余溶剂)，其不经进一步纯化即使用。质谱m/z 399,401,403(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.04(s,1H),8.13(br.s.,1H),7.75(s,1H),7.50(br.s.,1H),4.20(s,1H),3.28-3.19(m,1H),2.84(d,J＝17.6Hz,1H),2.78-2.65(m,1H),1.76-1.61(m,2H),1.17(d,J＝5.3Hz,6H),0.84(s,3H)。
中间体27
7-(2-羟基丙-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
用氮气鼓泡4-溴-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[根据美国专利第8,084,620号，实施例73-2中所描述的程序合成](3.00g，8.64mmol)、4,4,4′,4,5,5,5′,5′-八甲基-2,2′-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(2.19g，8.64mmol)和乙酸钾(2.12g，21.6mmol)于1,4-二噁烷(30mL)中的混合物5分钟。添加PdCl2(dppf)DCM加合物(0.353g，0.432mmol)，且用氮气鼓泡混合物另外5分钟。密封反应容器且在90℃加热过夜。经冷却的混合物用DCM稀释，用水洗涤两次，干燥且浓缩。通过用EtOAc-己烷洗脱的硅胶柱色谱(40g+12g，堆叠柱)纯化残余物，得到呈淡黄色固体的7-(2-羟基丙-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(2.79g，82％产率)。质谱m/z 377(M+H-H2O)+。
中间体28
(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
遵循用于制备中间体27的程序，以79％产率将(RS)-5-溴-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[根据美国专利第8,084,620号，实施例73-1中所描述的程序合成]转化成(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺。质谱m/z 399(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.65(s,1H),8.00(br.s.,1H),7.50(d,J＝7.5Hz,1H),7.33(br.s.,1H),7.26(d,J＝7.5Hz,1H),4.20(s,1H),3.09-3.00(m,1H),2.92(dd,J＝16.8,4.5Hz,1H),2.65-2.55(m,1H),2.47-2.43(m,1H),2.15-2.06(m,1H),1.74-1.64(m,1H),1.37-1.26(m,13H),1.15(m,6H)。
中间体29
5-(3-(S)-氨基哌啶-1-基)-2-(RS)-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(非对映异构体的混合物)
中间体29A：(RS)-5-溴-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲腈
用磷酰氯(0.789mL，8.46mmol)处理(RS)-5-溴-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体2](325mg，1.06mmol)于THF(7.5mL)中的溶液，且在室温搅拌混合物。42小时后，浓缩混合物且于EtOAc中搅拌残余物。通过过滤移除沉淀物且依次用水、饱和NaHCO3水溶液及饱和盐水洗涤滤液，干燥且浓缩。将残余物分配于EtOAc与饱和NaHCO3水溶液之间，且干燥并浓缩有机相。对残余物进行用EtOAc-己烷(5％-50％梯度)洗脱的硅胶(40g)柱色谱，得到呈灰白色固体的(RS)-5-溴-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲腈(202mg，66％产率)。质谱m/z 289,291(M+H)+和599,601,603(2M+Na)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.89(s,1H),7.37(d,J＝8.1Hz,1H),7.26(d,J＝8.1Hz,1H),3.15(d,J＝15.6Hz,1H),2.94-2.76(m,2H),2.33(dd,J＝16.6,9.8Hz,1H),1.98-1.84(m,2H),1.43(dtd,J＝13.1,10.9,5.6Hz,1H),1.09(d,J＝6.6Hz,3H)。
中间体29B：(1-(8-氰基-2-(RS)-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)哌啶-3-(S)-基)氨基甲酸苄酯
用氮气鼓泡(RS)-5-溴-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲腈(0.19g，0.657mmol)、(S)-哌啶-3-基氨基甲酸苄酯(0.162g，0.690mmol)、2,2′-双(二苯基膦基)-1,1′-联二萘(0.020g，0.033mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0.030g，0.033mmol)和Cs2CO3(0.300g，0.920mmol)于1,4-二噁烷(7.30mL)中的混合物，随后于密封容器中在100℃在氮气下加热。16小时后，使混合物冷却至室温，用THF稀释且经由硅藻土过滤。用THF洗涤固体且浓缩经合并的滤液。对残余物进行用EtOAc-己烷(10％-20％梯度)洗脱的硅胶(12g)柱色谱，得到呈淡黄色固体的(1-(8-氰基-2-(RS)-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)哌啶-3-(S)-基)氨基甲酸苄酯，非对映异构体的混合物(0.179g，62％产率)。质谱m/z 443(M+H)+。
中间体29：
在60℃加热(1-(8-氰基-2-(RS)-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)哌啶-3-(S)-基)氨基甲酸苄酯(0.179g，0.337mmol)于80％H2SO4水溶液(1.12mL)中的混悬液。3小时后，使所得溶液冷却至室温且倒在碎冰上。用KOH水溶液和Na2CO3固体将混合物的pH调节至9-10，且用3:1氯仿-异丙醇萃取。干燥且浓缩有机相，得到呈淡棕色固体的5-(3-(S)-氨基哌啶-1-基)-2-(RS)-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，两种非对映异构体的混合物(0.173g，99％产率)，其不经进一步纯化即使用。质谱m/z 327(M+H)+。
中间体30
(S)-4-(3-氨基哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺盐酸盐
中间体30A：(S)-(1-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸苄酯
遵循用于制备中间体29B的程序，将4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体8]转化成(S)-(1-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸苄酯。质谱m/z 443(M+H)+。
中间体30：
在室温搅拌(S)-(1-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸苄酯(100mg，0.226mmol)、三甲基氯硅烷(2.0mL，15.7mmol)和水(1.0mL，55.5mmol)的混合物3天。添加额外三甲基氯硅烷(1.0mL)且持续搅拌另外一天。分离混合物的水层且浓缩，得到呈黄绿色固体的(S)-4-(3-氨基哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺盐酸盐(78mg，95％产率)。质谱m/z 327(M+H)+。
中间体31
(S)-3-氟-4-(3-(甲基氨基)哌啶-1-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
遵循用于制备中间体30的程序，但(S)-甲基(哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯替代(S)-哌啶-3-基氨基甲酸苄酯，将4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体8]转化成(S)-3-氟-4-(3-(甲基氨基)哌啶-1-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺盐酸盐。将此物质分配于饱和NaHCO3水溶液与EtOAc之间，且干燥并浓缩有机相，得到呈黄色固体的(S)-3-氟-4-(3-(甲基氨基)哌啶-1-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。质谱m/z 341(M+H)+。
中间体32
(S)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-3,3,6-三氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
遵循用于制备中间体29的程序，将5-溴-3,3,6-三氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体6]转化成(S)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-3,3,6-三氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺。质谱m/z 367(M+H)+。
中间体33
(S)-5-(吡咯烷-3-基氨基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
中间体33A：5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲腈
用磷酰氯(1.01mL，10.9mmol)处理5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体1](355mg，1.21mmol)和THF(9mL)的混合物，且在45℃加热混合物。4小时后，浓缩混合物且用水处理残余物。通过过滤收集所得沉淀物，依次用水、饱和NaHCO3水溶液和水洗涤，且在真空下干燥。使残余固体混悬于甲苯中且在真空下浓缩两次，随后进一步在真空下干燥，得到呈棕色固体的5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲腈(322mg，87％产率)。质谱m/z 275,277(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.92(s,1H),7.37(d,J＝8.1Hz,1H),7.26(d,J＝8.1Hz,1H),2.98(br.s.,2H),2.73(br.s.,2H),1.80(br.s.,4H)。
中间体33B：(S)-3-((8-氰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
遵循用于制备中间体29B的程序，但(S)-3-氨基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯替代(S)-哌啶-3-基氨基甲酸苄酯，以77％产率将5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲腈转化成(S)-3-((8-氰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。质谱m/z 381(M+H)+,325(M+H-C4H8)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.19(s,1H),7.25(d,J＝8.1Hz,1H),6.25(d,J＝8.4Hz,1H),5.19(br.s.,1H),4.17(br.s.,1H),3.72-3.52(m,1H),3.48-3.33(m,2H),3.23(d,J＝10.8Hz,1H),2.91(br.s.,2H),2.65(br.s.,2H),2.20(br.s.,1H),2.03-1.89(m,1H),1.77(br.s.,4H),1.40(2s,9H)。
中间体33C：(S)-5-(吡咯烷-3-基氨基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲腈TFA盐
使(S)-3-((8-氰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(317mg，0.833mmol)于DCM(5mL)中的溶液冷却至0℃且用TFA(4mL)处理。在0℃搅拌混合物1小时，随后浓缩且在真空下干燥，得到呈TFA盐的(S)-5-(吡咯烷-3-基氨基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲腈(325mg)，其不经进一步纯化即使用。质谱m/z 281(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ7.27(d,J＝8.2Hz,1H),6.27(d,J＝8.3Hz,1H),4.53-4.32(m,1H),3.66-3.36(m,4H),3.02(br.s.,2H),2.75(br.s.,2H),2.51(td,J＝14.2,8.1Hz,1H),2.30-2.10(m,1H),1.91(br.s.,4H)。
中间体33：
在60℃加热(S)-5-(吡咯烷-3-基氨基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲腈TFA盐(325mg，0.824mmol)与80％H2SO4水溶液(2.5mL，37.5mmol)的混合物3小时。在0℃将经冷却的混合物添加至NaOH水溶液中(最终pH约9)，且用EtOAc萃取混合物四次。干燥且浓缩经合并的有机层，得到呈黄色固体的(S)-5-(吡咯烷-3-基氨基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(250mg，92％产率)。质谱m/z 299(M+H)+。
中间体34
5-(吡咯烷-3-(S)-基氨基)-2-(RS)-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(非对映异构体的混合物)
中间体34A：3-(S)-((8-氰基-2-(RS)-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(非对映异构体的混合物)
遵循用于制备中间体33A和33B的程序，将(RS)-5-溴-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体4]转化成3-(S)-((8-氰基-2-(RS)-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，非对映异构体的混合物。质谱m/z 449(M+H)+,393(M+H-C4H8)+。
中间体34：
遵循用于将中间体33B转化成中间体33的程序，将呈非对映异构体的混合物形式的3-(S)-((8-氰基-2-(RS)-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯转化成5-(吡咯烷-3-(S)-基氨基)-2-(RS)-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺。质谱m/z 367(M+H)+。
中间体44
N-(5-溴-2-甲氧基苯基)丙烯酰胺
依次用DIEA(0.562mL，3.22mmol)和丙烯酰氯(0.211mL，2.60mmol)处理5-溴-2-甲氧基苯胺(500mg，2.48mmol)于DCM(12mL)中的溶液，且在室温搅拌所得溶液。16.25小时后，在真空下浓缩溶液，得到淡棕色糊浆。对物质进行用EtOAc-己烷(20％-100％梯度)洗脱的硅胶(40g)柱色谱，得到呈白色固体的N-(5-溴-2-甲氧基苯基)丙烯酰胺(570mg，90％产率)。质谱m/z 256,258(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.70(d,J＝2.0Hz,1H),7.86(br.s.,1H),7.18(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.77(d,J＝8.6Hz,1H),6.52-6.37(m,1H),6.36-6.21(m,1H),5.80(dd,J＝10.1,1.3Hz,1H),3.91(s,3H)。
中间体45
N-(3-溴-2-甲基苯基)丙烯酰胺
用丙烯酰氯(0.218mL，2.69mmol)处理3-溴-2-甲基苯胺(500mg，2.69mmol)和DIEA(0.563mL，3.22mmol)于DCM(13.4mL)中的溶液，且在室温搅拌所得混合物。2小时后，混合物用EtOAc稀释且依次用1M HCl水溶液、饱和NaHCO3水溶液及饱和盐水洗涤。干燥且浓缩有机相，得到呈固体的N-(3-溴-2-甲基苯基)丙烯酰胺(580mg，90％产率，85％纯度)，其不经进一步纯化即使用。质谱m/z 240,242(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.77(s,1H),7.48(d,J＝7.9Hz,1H),7.42(d,J＝7.9Hz,1H),7.15(t,J＝8.0Hz,1H),6.51(dd,J＝17.1,10.2Hz,1H),6.26(dd,J＝17.2,2.0Hz,1H),5.82-5.74(m,1H),2.27(s,3H)。
中间体46
N-(5-溴-2-(三氟甲氧基)苯基)丙烯酰胺
遵循用于制备中间体44的程序，以75％产率将5-溴-2-三氟甲氧基苯胺转化成呈白色固体的N-(5-溴-2-(三氟甲氧基)苯基)丙烯酰胺。质谱m/z 310,312(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.79(d,J＝2.4Hz,1H),7.50(br.s.,1H),7.33-7.24(m,1H),7.21-7.10(m,1H),6.54-6.43(m,1H),6.37-6.22(m,1H),5.89(dd,J＝10.1,1.1Hz,1H)。
中间体47
N-(5-溴-2-氟苯基)丙烯酰胺
遵循用于制备中间体44的程序，以93％产率将5-溴-2-氟苯胺转化成呈褐色固体的N-(5-溴-2-氟苯基)丙烯酰胺。质谱m/z 244,246(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.69(dd,J＝7.0,2.2Hz,1H),7.43(br.s.,1H),7.21(ddd,J＝8.6,4.6,2.4Hz,1H),7.01(dd,J＝10.8,8.8Hz,1H),6.56-6.43(m,1H),6.36-6.21(m,1H),5.87(dd,J＝10.3,1.1Hz,1H)。
中间体48
N-(3-溴苯基)乙烯磺酰胺
在冰-水浴上搅拌3-溴苯胺(1.00mL，9.18mmol)于DCM(77mL)中的溶液，且用DIEA(2.41mL，13.8mmol)处理，随后用2-氯乙烷磺酰氯(1.15mL，11.0mmol)逐滴处理。在室温搅拌混合物2小时，随后用更多2-氯乙烷磺酰氯(0.48mL)处理，且在室温搅拌另外18小时。依次用1M HCl水溶液及饱和盐水洗涤混合物，干燥且浓缩。对残余物进行用EtOAc-己烷(10％-30％梯度)洗脱的硅胶(40g)柱色谱。再次对粗产物进行用DCM洗脱的硅胶(24g)柱色谱，得到呈淡黄色糊浆的N-(3-溴苯基)乙烯磺酰胺(400mg，17％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.29(m,2H),7.20(t,J＝7.9Hz,1H),7.13-7.09(m,1H),6.57(dd,J＝16.4,9.8Hz,1H),6.37-6.31(m,2H),6.02(d,J＝9.9Hz,1H)。
中间体49
N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺
中间体49A：3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺
用氮气鼓泡3-溴苯胺(1.00g，5.81mmol)、4,4,4′,4′,5,5,5′,5′-八甲基-2,2′-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(1.55g，6.10mmol)和乙酸钾(1.14g，11.6mmol)于1,4-二噁烷(14.5mL)中的混合物10分钟。混合物用PdCl2(dppf)DCM加合物(0.114g，0.140mmol)处理且用氮气鼓泡另外5分钟。将混合物加热至回流持续2.75小时，随后冷却至室温且经由硅藻土过滤。用EtOAc和THF洗涤固体。浓缩经合并的滤液且对残余物进行用EtOAc-己烷(10％-25％梯度)洗脱的硅胶(40g)柱色谱，得到呈灰白色固体的3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(1.27g，定量产率)。质谱m/z 220(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.24-7.13(m,3H),6.82-6.77(m,1H),3.64(br.s.,2H),1.35(s,12H)。
中间体49：
于冰浴中冷却3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(0.300g，1.37mmol)和DIEA(0.311mL，1.78mmol)于DCM(9.1mL)中的溶液，且用丙烯酰氯(0.117mL，1.44mmol)处理。在室温搅拌混合物40分钟，随后浓缩且对残余物进行用EtOAc-己烷(15％-40％梯度)洗脱的硅胶(24g)柱色谱，得到呈白色固体的N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺(0.292g，78％产率)。质谱m/z 270(M+H)+。
中间体50
N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺
遵循用于制备中间体49的程序，以80％产率将2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺[根据美国专利第8,084,620号，中间体50-1制备]转化成N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺。质谱m/z288(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01(br.s.,1H),7.64(d,J＝5.9Hz,1H),7.23(t,J＝7.7Hz,1H),7.07(br.s.,1H),6.48-6.40(m,1H),6.32(br.s.,1H),5.78(d,J＝9.5Hz,1H),2.49(s,3H),1.36(s,12H)。
中间体51
(E)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丁-2-烯酰胺
遵循用于制备中间体49的程序，但(E)-丁-2-烯酰氯替代丙烯酰氯，以85％产率将2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺[根据美国专利第8,084,620号，中间体50-1制备]转化成(E)-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丁-2-烯酰胺。质谱m/z 302(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.28(s,1H),7.46(d,J＝7.5Hz,2H),7.15(t,J＝7.7Hz,1H),6.83-6.66(m,1H),6.21(d,J＝14.7Hz,1H),2.34(s,3H),1.86(dd,J＝6.9,1.2Hz,3H),1.30(s,12H)。
中间体52
N-甲基-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺
中间体52A：N,2-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺
用氮气鼓泡3-溴-N,2-二甲基苯胺(1.90g，9.50mmol)、4,4,4′,4′,5,5,5′,5′-八甲基-2,2′-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(2.53g，9.97mmol)和乙酸钾(1.86g，19.0mmol)于1,4-二噁烷(23.7mL)中的混合物10分钟。用PdCl2(dppf)DCM加合物(0.194g，0.237mmol)处理混合物且用氮气鼓泡混合物另外5分钟，随后在回流加热。2.75小时后，使混合物冷却至室温，经由硅藻土过滤且用EtOAc洗涤固体。浓缩经合并的滤液且对残余物进行用EtOAc-己烷(5％-15％梯度)洗脱的硅胶(40g)柱色谱，得到呈灰白色蜡质固体的N,2-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(2.26g，96％产率)。质谱m/z 249(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.21-7.12(m,2H),6.72(dd,J＝6.5,2.8Hz,1H),3.63(br.s.,1H),2.90(s,3H),2.36(s,3H),1.35(s,12H)。
中间体52：
用丙烯酰氯(0.245mL，3.02mmol)处理于冰浴中冷却的N,2-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(0.71g，2.87mmol)和DIEA(0.652mL，3.73mmol)于DCM(14.4mL)中的溶液，且在室温搅拌混合物。2小时后，浓缩混合物且对残余物进行用EtOAc-己烷(15％-35％梯度)洗脱的硅胶(24g)柱色谱，得到呈白色固体的N-甲基-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺(0.845g，98％产率)。质谱m/z 302(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77(dd,J＝7.3,1.3Hz,1H),7.25-7.16(m,2H),6.37(dd,J＝16.8,2.1Hz,1H),5.90(dd,J＝16.9,10.3Hz,1H),5.47(dd,J＝10.3,2.2Hz,1H),3.25(s,3H),2.38(s,3H),1.37(s,12H)。
中间体53
N-甲基-N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺
中间体53A：N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺
遵循用于制备中间体52A的程序，以定量产率将3-溴-N-甲基苯胺转化成N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺。质谱m/z 234(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.25-7.15(m,2H),7.07(d,J＝2.4Hz,1H),6.73(ddd,J＝7.7,2.6,1.3Hz,1H),4.02-3.43(b,1H),2.87(s,3H),1.35(s,12H)。
中间体53：
遵循用于将中间体52A转化成中间体52的程序，以88％产率将N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺转化成N-甲基-N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺。质谱m/z288(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77(d,J＝7.3Hz,1H),7.62(d,J＝1.5Hz,1H),7.42(t,J＝7.7Hz,1H),7.26-7.23(m,1H),6.37(dd,J＝16.7,2.0Hz,1H),6.06(dd,J＝16.7,10.6Hz,1H),5.51(dd,J＝10.3,2.0Hz,1H),3.36(s,3H),1.36(s,12H)。
中间体54
N-(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-N-甲基丙烯酰胺
中间体54A：2N-(3-溴-2-氟苯基)甲酰胺
在90℃加热3-溴-2-氟苯胺(1.00g，5.26mmol)于甲酸(1.99mL，52.6mmol)中的溶液16小时。使混合物冷却至室温且分配于EtOAc与水之间。依次用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤有机相，干燥且浓缩，得到呈米色固体的N-(3-溴-2-氟苯基)甲酰胺(1.02g，89％产率)。质谱m/z 218,220(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.50(s,1H),8.40-8.17(m,1H),7.53-7.41(m,1H),7.31(ddd,J＝8.0,6.6,1.4Hz,1H),7.05(td,J＝8.2,1.4Hz,1H)。
中间体54B：3-溴-2-氟-N-甲基苯胺
将N-(3-溴-2-氟苯基)甲酰胺(1.00g，4.59mmol)于THF(15mL)中的溶液冷却至0℃，用硼烷-甲硫醚络合物(6.88mL，13.8mmol)逐滴处理且在70℃加热2小时。使混合物冷却至室温且用MeOH处理。在室温搅拌混合物30分钟，随后用1M HCl水溶液缓慢处理。将混合物加热至70℃持续1小时，随后冷却至室温，用1M NaOH水溶液处理且用EtOAc萃取。有机萃取物用盐水洗涤，干燥且浓缩。对残余物进行用EtOAc-己烷洗脱的硅胶柱色谱，得到呈无色油状物的3-溴-2-氟-N-甲基苯胺(0.800g，85％产率)。质谱m/z 204,206(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.92-6.86(m,1H),6.84-6.78(m,1H),6.63-6.56(m,1H),4.03(br.s.,1H),2.88(d,J＝4.6Hz,3H)。
中间体54C：2-氟-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺
遵循用于制备中间体52A的程序，以71％产率将3-溴-2-氟-N-甲基苯胺转化成2-氟-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺。质谱m/z 252(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.02(d,J＝7.3Hz,2H),6.85-6.73(m,1H),4.07-3.85(m,1H),2.86(s,3H),1.38-1.32(m,12H)。
中间体54：
遵循用于将中间体52A转化成中间体52的程序，以56％产率将2-氟-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺转化成N-(2-氟-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-N-甲基丙烯酰胺。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.74(s,1H),7.33-7.27(m,1H),7.22-7.06(m,1H),6.37(d,J＝16.7Hz,1H),6.16-5.87(m,1H),5.52(d,J＝10.1Hz,1H),3.30(s,3H),1.38(s,12H)。
中间体55
N-甲基-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙烯磺酰胺
用DIEA(0.530mL，3.03mmol)处理冷却至0℃的N,2-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺[中间体52A](0.500g，2.02mmol)于DCM(10.1mL)中的溶液，随后逐滴添加2-氯乙烷磺酰氯(0.254mL，2.43mmol)。在室温搅拌混合物3小时，随后浓缩。对残余物进行用EtOAc-己烷(10％-20％梯度)洗脱的硅胶(24g)柱色谱，得到呈白色蜡质固体的N-甲基-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙烯磺酰胺(0.432g，63％产率)。质谱m/z 338(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.75(dd,J＝7.3,1.3Hz,1H),7.27-7.23(m,1H),7.21-7.15(m,1H),6.62(dd,J＝16.5,9.9Hz,1H),6.23(d,J＝16.7Hz,1H),6.02(d,J＝9.9Hz,1H),3.15(s,3H),2.61(s,3H),1.35(s,12H)。
中间体56
N-甲基-N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙烯磺酰胺
遵循用于制备中间体55的程序，以61％产率将N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺[中间体53A]转化成N-甲基-N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙烯磺酰胺。质谱m/z 324(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.62-7.54(m,2H),7.51-7.37(m,2H),6.86(dd,J＝16.4,10.0Hz,1H),6.14(d,J＝10.1Hz,1H),6.02(d,J＝16.5Hz,1H),3.18(s,3H),1.30(s,12H)。
中间体57
N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙烯磺酰胺
遵循用于制备中间体55的程序，以49％产率将2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺[根据美国专利第8,084,620号，中间体46-1，步骤1的程序制备]转化成N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙烯磺酰胺。质谱m/z 324(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(s,1H),7.52-7.47(m,1H),7.27(d,J＝6.6Hz,1H),7.19-7.13(m,1H),6.83(dd,J＝16.5,9.9Hz,1H),5.99-5.89(m,2H),2.44(s,3H),1.30(s,12H)。
中间体58
N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙烯磺酰胺
遵循用于制备中间体55的程序，以40％产率将3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺[中间体49A]转化成N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙烯磺酰胺。质谱m/z 310(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.63(d,J＝7.0Hz,1H),7.47(d,J＝2.2Hz,1H),7.44-7.40(m,1H),7.40-7.34(m,1H),6.57(dd,J＝16.5,9.9Hz,1H),6.34-6.26(m,2H),5.97(d,J＝9.9Hz,1H),1.36(s,12H)。
中间体59
N-(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-N-甲基乙烯磺酰胺
遵循用于制备中间体55的程序，将2-氟-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺[中间体54C]转化成N-(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-N-甲基乙烯磺酰胺。
中间体60
N-(2-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-N-甲基乙烯磺酰胺
中间体60A：N-(3-溴-2-氯苯基)甲酰胺
遵循用于制备中间体54A的程序，以97％产率将3-溴-2-氯苯胺转化成N-(3-溴-2-氯苯基)甲酰胺。质谱m/z 234,236,238(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.53(s,1H),8.44(d,J＝8.4Hz,1H),7.76(br.s.,1H),7.44(d,J＝8.1Hz,1H),7.19(t,J＝8.1Hz,1H)。
中间体60B：3-溴-2-氯-N-甲基苯胺
遵循用于制备中间体54B的程序，以97％产率将N-(3-溴-2-氯苯基)甲酰胺转化成3-溴-2-氯-N-甲基苯胺。质谱m/z 220,222,224(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.09-7.01(m,1H),7.00-6.94(m,1H),6.60(dd,J＝8.1,1.3Hz,1H),4.54(br.s.,1H),2.93(d,J＝5.1Hz,3H)。
中间体60C：2-氯-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺
遵循用于制备中间体52A的程序，以72％产率将3-溴-2-氯-N-甲基苯胺转化成2-氯-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺。质谱m/z 268,270(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.21-7.15(m,1H),7.02(dd,J＝7.3,1.5Hz,1H),6.73(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),4.50(br.s.,1H),2.91(d,J＝5.1Hz,3H),1.39(s,12H)。
中间体60：
遵循用于将中间体55A转化成中间体55的程序，以54％产率将2-氯-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺转化成N-(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-N-甲基乙烯磺酰胺。质谱m/z 358,360(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.78-7.62(m,1H),7.60-7.45(m,1H),7.28(s,1H),6.74-6.55(m,1H),6.23(d,J＝16.5Hz,1H),5.97(d,J＝9.9Hz,1H),3.21(s,3H),1.38(s,12H)。
中间体61
(RS)-3-氟-4-(异吲哚啉-4-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
中间体61A：4-溴异吲哚啉-2-甲酸叔丁酯
用三乙胺(2.50mL，17.9mmol)和一缩二碳酸二叔丁酯(2.08mL，8.95mmol)处理4-溴异吲哚啉盐酸盐(1.40g，5.97mmol)于DMF(30mL)中的溶液，且在室温搅拌混合物18小时。混合物用EtOAc(65mL)稀释且用饱和NaHCO3水溶液洗涤三次。干燥且浓缩有机相。对残余物进行用EtOAc-己烷(0％-30％梯度)洗脱的硅胶柱色谱，得到呈白色固体的4-溴异吲哚啉-2-甲酸叔丁酯(1.70g，91％产率)。
中间体61B：4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-2-甲酸叔丁酯
用氮气鼓泡4-溴异吲哚啉-2-甲酸叔丁酯(1.70g，5.70mmol)、4,4,4′,4′,5,5,5′,5′-八甲基-2,2′-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(1.74g，6.84mmol)、乙酸钾(1.68g，17.1mmol)和PdCl2(dppf)DCM加合物(0.466g，0.570mmol)于1,4-二噁烷(25mL)中的混合物，且在80℃搅拌过夜。使混合物冷却至室温，用EtOAc稀释，用水洗涤，干燥且浓缩。对残余物进行用EtOAc-己烷(0％-30％梯度)洗脱的硅胶柱色谱，得到呈白色固体的4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-2-甲酸叔丁酯(1.50g，76％产率)。
中间体61C：4-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)异吲哚啉-2-甲酸叔丁酯
用氮气鼓泡4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体8](40mg，0.130mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-2-甲酸叔丁酯(47.2mg，0.137mmol)、K2HPO4(68.1mg，0.391mmol)和1,1′-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(4.24mg，6.51μmol)于THF(1.00mL)和水(0.250mL)中的混合物，且在60℃搅拌3小时。混合物用EtOAc稀释，用水洗涤，干燥且浓缩。对残余物进行用EtOAc-己烷(0％-100％梯度)洗脱的硅胶柱色谱，得到呈淡黄色油状物的4-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)异吲哚啉-2-甲酸叔丁酯(41mg，71％产率)。
中间体61：
在室温搅拌4-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)异吲哚啉-2-甲酸叔丁酯(41mg，0.092mmol)和TFA(0.500mL，6.49mmol)于DCM(1mL)中的溶液15分钟。浓缩混合物，得到呈黄色固体的3-氟-4-(异吲哚啉-4-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐(38.9mg，92％产率)。质谱m/z346(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ7.86(d,J＝10.5Hz,1H),7.71-7.66(m,2H),7.64-7.60(m,1H),7.60-7.56(m,1H),7.39(ddd,J＝8.3,6.7,1.7Hz,1H),6.98-6.90(m,2H),4.82-4.79(m,2H),4.43(d,J＝14.7Hz,1H),4.23(d,J＝14.7Hz,1H)。
中间体62
3-氟-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
遵循用于制备中间体61的程序，将7-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯转化成3-氟-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。质谱m/z 360(M+H)+。1HNMR(400MHz,MeOH-d4)δ7.82(d,J＝10.6Hz,1H),7.61(d,J＝8.2Hz,1H),7.57-7.50(m,2H),7.46(s,1H),7.38(ddd,J＝8.2,7.1,1.2Hz,1H),7.18-7.12(m,1H),6.89(ddd,J＝8.1,7.1,1.0Hz,1H),4.50(s,2H),3.76-3.57(m,2H),3.48-3.20(m,2H)[隐藏在残余MeOH峰下]。
中间体63
3-氟-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
遵循用于制备中间体61的程序，将6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐转化成3-氟-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。质谱m/z 360(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ7.80(d,J＝10.6Hz,1H),7.59(d,J＝8.2Hz,1H),7.48(s,3H),7.36(ddd,J＝8.3,7.2,1.1Hz,1H),7.12(d,J＝8.1Hz,1H),6.86(td,J＝7.6,1.0Hz,1H),4.54(ABq,J＝17.1Hz,2H),3.72-3.55(m,2H),3.28-3.21(m,2H)。
中间体64
3-氟-4-(吲哚啉-4-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
遵循用于制备中间体61的程序，将4-溴吲哚啉转化成3-氟-4-(吲哚啉-4-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。质谱m/z 346(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ7.88(d,J＝10.6Hz,1H),7.78-7.61(m,4H),7.40(ddd,J＝8.3,5.3,3.0Hz,1H),6.95-6.90(m,2H),3.93-3.76(m,2H),3.20-3.07(m,1H),3.04-2.91(m,1H)。
中间体67
3-氟-4-(吲哚啉-6-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
遵循用于制备中间体61的程序，将6-溴吲哚啉[根据PCT公开第WO2010/093949号，实施例82，步骤1的程序制备]转化成3-氟-4-(吲哚啉-6-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。质谱m/z 346(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ7.85(d,J＝10.6Hz,1H),7.77(d,J＝7.5Hz,1H),7.71-7.65(m,2H),7.63(d,J＝8.1Hz,1H),7.40(t,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.9Hz,1H),6.93(t,J＝7.2Hz,1H),4.06-3.95(m,2H),3.59-3.51(m,2H)。
中间体68
3-氟-4-(1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
中间体68A：3-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯
将4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体8](120mg，0.391mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(169mg，0.547mmol)、2M K3PO4水溶液(0.391mL，0.781mmol)和1,1′-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(20mg，0.031mmol)于THF(1.5mL)中的混合物用氮气净化，且在60℃搅拌4小时。使混合物冷却至室温，用EtOAc稀释，用水洗涤，干燥且浓缩。对残余物进行用EtOAc-己烷(0％-50％梯度)洗脱的硅胶柱色谱，得到呈淡黄色固体的3-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(73mg，46％产率)。质谱m/z 354(M+H-C4H8)+。
中间体68：
遵循用于将中间体33B转化成中间体33C的程序，将3-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯转化成3-氟-4-(1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。质谱m/z 310(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.19-8.09(m,1H),7.76(d,J＝11.0Hz,1H),7.62(d,J＝8.2Hz,1H),7.45(ddd,J＝8.2,7.2,1.1Hz,1H),7.19(ddd,J＝8.0,7.1,1.0Hz,1H),6.31(dt,J＝3.9,2.0Hz,1H),4.14-4.01(m,2H),3.64-3.53(m,2H),2.76(br.s.,2H)。
中间体69
(RS)-3-氟-4-(哌啶-3-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
在室温在氢气氛围下(50psi)搅拌3-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯[中间体68A](88mg，0.215mmol)和5％Pd/炭(46mg，0.021mmol)于MeOH(6mL)中的混合物过夜。过滤且浓缩混合物，使残余物溶解于DCM(1mL)中，用TFA(0.5mL，6.49mmol)处理，且在室温搅拌30分钟。浓缩混合物且对残余物进行制备型反相HPLC(Luna Axia C18柱，5m，30×100mm，用含有0.1％TFA的甲醇-水洗脱，20％-100％梯度，40mL/min)，得到呈白色固体的(RS)-3-氟-4-(哌啶-3-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐(44mg，49％产率)。质谱m/z 312(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.30-8.24(m,1H),7.78-7.72(m,1H),7.70-7.65(m,1H),7.54-7.46(m,1H),7.35-7.23(m,1H),4.41-4.30(m,1H),3.80-3.71(m,1H),3.70-3.63(m,1H),3.62-3.51(m,1H),3.24-3.12(m,1H),2.30-2.04(m,4H)。
中间体70
3-氟-4-(异吲哚啉-5-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺，TFA盐
遵循用于制备中间体35的程序，将5-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)异吲哚啉-2-甲酸叔丁酯转化成3-氟-4-(异吲哚啉-5-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。质谱m/z 346(M+H)+。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.81(d,J＝10.6Hz,1H),7.67(d,J＝8.1Hz,1H),7.63-7.57(m,3H),7.36(ddd,J＝8.2,7.1,1.1Hz,1H),7.08(d,J＝8.1Hz,1H),6.86(td,J＝7.6,0.9Hz,1H),4.81(s,4H)。
中间体71
4-(2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺，TFA盐
中间体71A：3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯
在-60℃将1M LHMDS/甲苯(30.9mL，30.9mmol)添加至3-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5.2g，28.1mmol)于THF(75mL)中的经搅拌溶液中，搅拌15分钟，随后添加N,N-双(三氟甲基磺酰基)苯胺(11.03g，30.9mmol)于THF(25mL)中的溶液。使混合物达至室温且搅拌15分钟。反应混合物用二氯甲烷稀释且用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。将有机相干燥(MgSO4)且浓缩以得到粗产物。对粗产物进行ISCO快速色谱(硅胶/己烷-DCM 100:0至0:100梯度)，得到3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(3.1g，34.8％产率)。1HNMR(400MHz，氯仿-d)δ5.96-5.60(m,1H),4.44-4.05(m,4H),1.48(s,9H)。
中间体71B：3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯
用氮气净化PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.399g，0.489mmol)、4,4,4′,4′,5,5,5′,5′-八甲基-2,2′-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(2.48g，9.77mmol)、3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(3.1g，9.77mmol)和乙酸钾(1.92g，19.5mmol)于二噁烷(50mL)中的混合物，且在80℃加热3小时。反应混合物用EtOAc稀释，用饱和碳酸氢钠洗涤，干燥(MgSO2)且浓缩。对粗产物进行ISCO快速色谱(硅胶/己烷-EtOAc 100:0至0:100梯度)，得到呈黄色油状物的3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(1.3g，45.1％产率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ6.54-6.36(m,1H),4.36-4.02(m,4H),1.47(s,9H),1.32-1.17(m,12H)。
中间体71：
遵循用于制备中间体68的程序，将3-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯转化成4-(2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。质谱m/z 295(M+H)+。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.13-8.07(m,1H),7.78(d,J＝11.1Hz,1H),7.65(d,J＝8.2Hz,1H),7.47(ddd,J＝8.3,7.2,1.1Hz,1H),7.19(ddd,J＝8.1,7.1,1.0Hz,1H),6.35(t,J＝2.1Hz,1H),4.56-4.46(m,4H)。
中间体72和73
(RS)-3-氟-4-(吡咯烷-3-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐和
(RS)-6-氟-5-(吡咯烷-3-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺TFA盐
在室温在氢气氛围下(50psi)搅拌3-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(54mg，0.14mmol)和20％Pd(OH)2(47.9mg，0.068mmol)于MeOH(10mL)和DMF(0.5mL)中的混合物过夜。过滤且浓缩混合物。使残余物溶解于DCM(1mL)中，用TFA(0.5mL，6.49mmol)处理且在室温搅拌30分钟。浓缩混合物且对残余物进行制备型反相HPLC(YMC ODS 5μ30×250mm柱，用含有0.1％TFA的甲醇-水洗脱，10％-100％梯度，40mL/min)，得到(RS)-3-氟-4-(吡咯烷-3-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐[中间体72](32mg，61％产率)。质谱m/z 298(M+H)+。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.29(d,J＝8.2Hz,1H),7.79(d,J＝13.3Hz,1H),7.67(d,J＝8.2Hz,1H),7.49(td,J＝7.7,1.0Hz,1H),7.26(ddd,J＝8.1,7.2,1.1Hz,1H),4.90-4.86(m,1H),3.91-3.73(m,2H),3.72-3.53(m,2H),2.79-2.63(m,1H),2.58-2.42(m,1H)。和(RS)-6-氟-5-(吡咯烷-3-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺TFA盐[中间体73](15mg，28.7％产率)。质谱m/z 302(M+H)+。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.41(d,J＝13.4Hz,1H),4.40(t,J＝9.0Hz,1H),3.77-3.57(m,3H),3.55-3.43(m,1H),2.97(br.s.,2H),2.82(t,J＝4.6Hz,2H),2.60-2.34(m,2H),2.03-1.86(m,4H)。
中间体74
(R)-4-(3-氨基哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体74A：(R)-(1-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯
遵循用于制备中间体29B的程序，将4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲腈转化成(R)-(1-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯。质谱m/z 409(M+H)+。
中间体74：
遵循用于制备中间体30的程序，将(R)-(1-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯转化成(R)-4-(3-氨基哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺。质谱m/z327(M+H)+。
中间体75
(RS)-顺式-3-氟-4-(八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
中间体75A：(RS)-顺式-6-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯
遵循用于制备中间体29B的程序，将4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲腈转化成(RS)-顺式-6-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)八氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯。质谱m/z435(M+H)+。
中间体75：
将H2O2水溶液(35％，0.13mL，1.49mmol)逐滴添加至(RS)-顺式-6-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)八氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(65mg，0.15mmol)和30％KOH水溶液(0.140mL，0.75mmol)于DMSO(1.5mL)中的溶液中，且搅拌15分钟。混合物用EtOAc萃取，用水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩。于TFA(1mL，12.98mmol)和DCM(1mL)中搅拌残余物30分钟且浓缩。使用制备型HPLC(Luna Axia C18 5μ；30×100mm柱，用含有0.1％TFA的甲醇-水洗脱，30％-100％梯度，40mL/min)纯化粗物质，得到呈淡棕色固体的(RS)-顺式-3-氟-4-(八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐(46.3，66.4％产率)。质谱m/z 353(M+H)+。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.20(d,J＝7.9Hz,1H),7.77(d,J＝14.1Hz,1H),7.60(d,J＝8.2Hz,1H),7.45(ddd,J＝8.2,7.2,1.2Hz,1H),7.25(td,J＝7.5,1.0Hz,1H),4.16-4.06(m,1H),3.99-3.89(m,1H),3.83-3.71(m,2H),3.55(t,J＝8.9Hz,1H),3.49-3.38(m,1H),3.23-3.12(m,1H),2.97(d,J＝4.9Hz,1H),2.13-1.96(m,3H),1.92-1.81(m,1H)。
中间体76
(RS)-顺式-3-氟-4-(六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
中间体76A：(RS)-顺式-5-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯
用氮气净化4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲腈(100mg，0.34mmol)、六氢吡咯并[3,4-B]吡咯-1-甲酸叔丁酯(81mg，0.380mmol)、碳酸铯(282mg，0.87mmol)、BINAP(10.77mg，0.017mmol)和Pd2(dba)3(15.84mg，0.017mmol)于二噁烷(2mL)中的混合物，且在105℃搅拌24小时。使混合物冷却至室温，过滤且浓缩。使用ISCO快速色谱(硅胶/己烷/乙酸乙酯100:0至50:50梯度)纯化粗物质，得到呈淡黄色固体的5-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(65mg，44.7％产率)。质谱m/z 421(M+H)+。
中间体76：(RS)-顺式-3-氟-4-(六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺，TFA盐
将H2O2水溶液(35％0.135mL，1.546mmol)逐滴添加至(RS)-顺式-5-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(65mg，0.155mmol)和30％KOH水溶液(0.145mL，0.773mmol)于DMSO(1.5mL)中的溶液中，且在室温搅拌15分钟。混合物用水稀释，用EtOAc萃取，用水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩。于TFA(1mL，12.98mmol)和DCM(1mL)中搅拌粗物质30分钟且浓缩，得到呈棕色固体的粗产物(RS)-顺式-3-氟-4-(六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺，TFA(62mg，89％产率)。质谱m/z 339(M+H)+。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.14(d,J＝7.9Hz,1H),7.71(d,J＝14.4Hz,1H),7.59(d,J＝8.2Hz,1H),7.47-7.41(m,1H),7.27-7.21(m,1H),4.60-4.49(m,1H),4.12(dd,J＝10.6,7.5Hz,1H),3.76-3.67(m,1H),3.64-3.34(m,5H),2.41-2.28(m,1H),2.25-2.14(m,1H)。
中间体77
3-氟-4-(1,4,5,6-四氢吡啶-3-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
遵循用于制备中间体68的程序，将5-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯转化成3-氟-4-(1,4,5,6-四氢吡啶-3-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。质谱m/z 310(M+H)+。
中间体78
3-氟-4-(2,7-二氮螺[4.4]壬-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
遵循用于制备中间体75的程序，将7-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)-2,7-二氮螺[4.4]壬烷-2-甲酸叔丁酯转化成3-氟-4-(2,7-二氮螺[4.4]壬-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。质谱m/z 353(M+H)+。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.11(d,J＝7.8Hz,1H),7.73(d,J＝14.2Hz,1H),7.59(d,J＝8.1Hz,1H),7.43(t,J＝7.4Hz,1H),7.23(t,J＝7.5Hz,1H),3.67-3.39(m,8H),2.37-2.16(m,4H)。
中间体79
(RS)-3-氟-4-(八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。
遵循用于制备中间体75的程序，将(RS)-5-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)八氢-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯转化成(RS)-3-氟-4-(八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐。质谱m/z 353(M+H)+。
中间体80
5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸
以使得反应温度保持在0℃以下的速率向在-10℃的2-氨基-4溴-5-氯苯甲酸(1.0g，3.99mmol)于浓HCl(20mL)中的混悬液中逐滴添加亚硝酸钠(0.289g，4.19mmol)于水(2.0mL)中的溶液。在0℃搅拌混合物15分钟。以使反应温度保持在-5℃以下的速率将氯化亚锡(II)(1.590g，8.38mmol)于浓HCl(5.0mL)中的溶液添加至混合物中。在室温搅拌反应混合物60分钟。过滤沉淀物，用水洗涤且风干。得到呈白色固体的4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸，HCl(752mg，1.868mmol，46.8％产率)。
在110℃搅拌4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸，HCl(1.0g，3.31mmol)和环己酮(0.650g，6.62mmol)于HOAc(20mL)中的混合物18小时。过滤沉淀物且用HOAc和DCM洗涤。粗产物得到呈淡绿色固体的5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(893g，2582mmol，7.80E+04％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.12(s,1H),7.67(s,1H),3.01(br.s.,2H),2.76(br.s.,2H),1.78(br.s.,4H)。LCMS：1.21分钟，M+H 329。
中间体81
5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
在室温搅拌5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(100mg，0.304mmol，I-80)、氯化铵(81mg，1.522mmol)、BOP(148mg，0.335mmol)和TEA(0.297mL，2.130mmol)于DMF(5.0mL)中的混合物2小时。混合物用EtOAc(15mL)稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液(2×15mL)和1.0M HCl水溶液(15mL)洗涤。乙酸乙酯层经硫酸钠干燥且浓缩，得到呈淡灰色固体的5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(106mg，0.291mmol，96％产率)。LCMS：1.18分钟，M+H 328。
中间体82
4-溴-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸乙酯
向5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(2.27g，6.91mmol，I-80)于THF(80mL)中的溶液中添加DDQ(3.14g，13.82mmol)，在60℃搅拌混合物18小时。浓缩混合物，得到4-溴-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸。在回流下搅拌4-溴-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸和硫酸(0.736mL，13.82mmol)于EtOH(100mL)中的混合物18小时。浓缩混合物。对粗产物进行ISCO快速色谱(硅胶/己烷-EtOAc100:0至50:50梯度)。得到呈淡棕色固体的4-溴-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸乙酯(760mg，2.048mmol，29.6％产率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ10.12(br.s.,1H),8.82(dd,J＝8.1,0.9Hz,1H),8.23-8.08(m,1H),7.65-7.48(m,2H),7.37(ddd,J＝8.1,6.6,1.6Hz,1H),4.52(q,J＝7.1Hz,2H),1.55-1.47(m,3H)。
中间体83
4-溴-3,6-二氯-9H-咔唑-1-甲酸乙酯
遵循用于制备中间体82的程序制备。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.87(s,1H),8.59(d,J＝2.1Hz,1H),7.97-7.90(m,1H),7.84(d,J＝8.8Hz,1H),7.61(dd,J＝8.8,2.1Hz,1H),4.48(q,J＝7.1Hz,2H),1.46-1.38(m,3H)。
中间体84
4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸乙酯
遵循用于制备中间体82的程序制备。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ10.04(br.s.,1H),8.76(d,J＝7.9Hz,1H),7.85(d,J＝9.3Hz,1H),7.64-7.48(m,2H),7.35(ddd,J＝8.1,6.5,1.7Hz,1H),4.51(q,J＝7.1Hz,2H),1.50(t,J＝7.2Hz,3H)。
中间体85
(S)-4-(3-氨基哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体85A：(S)-(1-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯
用氮气脱气4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲腈(2.8g，9.69mmol)、(S)-哌啶-3-基氨基甲酸叔丁酯(2.328g，11.62mmol)、碳酸铯(7.89g，24.21mmol)、BINAP(0.302g，0.484mmol)和Pd2(dba)3(0.443g，0.484mmol)于1,4-二噁烷(80mL)中的混合物，且在105℃搅拌19小时。LC/MS指示90％转化率。添加额外的Pd2(dba)3(0.443g，0.484mmol)和BINAP(0.030g，0.048mmol)。在110℃搅拌反应混合物9小时。使混合物冷却至室温且经由硅藻土过滤且浓缩。使粗物质溶解于DCM中且搅拌过夜。通过真空过滤收集固体且用DCM洗涤，得到呈灰白色固体的(S)-(1-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(3.24g，82％产率)。质谱m/z 409(M+H)+。
中间体85B：(S)-(1-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯
历经30分钟将H2O2水溶液(30％，5.95ml，58.3mmol)逐滴添加至(S)-(1-(1-氰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(2.38g，5.83mmol)和30％KOH水溶液(5.45ml，29.1mmol)于DMSO中的溶液中，且在室温搅拌1.5小时。转化率为95％。添加所添加的额外的30％H2O2水溶液(1mL)且搅拌反应混合物30分钟。用水稀释混合物且搅拌30分钟。通过真空过滤收集固体且用水洗涤。随后，用DCM研磨产物，得到呈淡黄色固体的粗产物(S)-(1-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(2.56g，103％产率)。质谱m/z 427(M+H)+。
中间体85：
在室温搅拌(S)-(1-(1-氨甲酰基-3-氟-9H-咔唑-4-基)哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(3.09g，7.25mmol)和TFA(8mL，104mmol)于DCM(8mL)中的溶液30分钟。浓缩混合物，使用饱和NaHCO3中和，用EtOAc萃取(3次)，用水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩，得到呈淡黄色泡沫状物的粗产物(S)-4-(3-氨基哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(2.43g，103％产率)。质谱m/z 327(M+H)+。
实施例1
(RS)-5-(3-丙烯酰氨基苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
用氮气鼓泡(RS)-5-溴-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[根据美国专利第8,084,620号，实施例73-1制备](35mg，0.100mmol)、N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺[中间体49](28.6mg，0.105mmol)和四(三苯基膦)钯(5.76mg，4.98μmol)于甲苯(1.87mL)和乙醇(623μL)中的混合物2-5分钟。用2M Na2CO3水溶液(126μL，0.252mmol)处理混合物，再次用氮气鼓泡且密封于玻璃管中。在90℃加热混合物16小时。浓缩混合物且对残余物进行制备型反相HPLC(Waters XBridge C18柱，5μm，19×150mm，用乙腈-10mM乙酸铵水溶液洗脱，5％-95％梯度，20mL/min)。在高真空下浓缩适当的流出物级分得到(RS)-5-(3-丙烯酰氨基苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(28.4mg，68％产率)。质谱m/z 418(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),10.22(s,1H),8.02(br.s.,1H),7.75-7.68(m,2H),7.60(d,J＝7.4Hz,1H),7.39(t,J＝7.7Hz,1H),7.33(br.s.,1H),7.10(d,J＝7.4Hz,1H),6.82(d,J＝7.9Hz,1H),6.45(dd,J＝17.1,10.2Hz,1H),6.26(dd,J＝16.8,1.5Hz,1H),5.79-5.72(m,1H),4.21(s,1H),2.93(dd,J＝16.8,5.0Hz,1H),2.47-2.41(m,1H),2.28(t,J＝12.4Hz,1H),2.00(d,J＝12.9Hz,1H),1.89(d,J＝8.9Hz,1H),1.72-1.61(m,1H),1.10(d,J＝2.0Hz,7H)。
实施例2
(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
用氮气鼓泡(RS)-5-溴-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[根据美国专利第8,084,620号，实施例73-1制备](35mg，0.100mmol)、N-甲基-N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙烯磺酰胺[中间体55](33.6mg，0.100mmol)和Cs2CO3(81mg，0.249mmol)于4:1THF-水(3.32mL)中的混合物，随后用PdCl2(dppf)DCM加合物(4.1mg，5.0μmol)处理。混合物进一步用氮气鼓泡，密封于氮气下的管中且在50℃加热。16小时后，冷却且浓缩混合物。对残余物进行制备型反相HPLC(WatersXBridge C18柱，5μm，19×250mm，用乙腈-10mM乙酸铵水溶液洗脱，5％-95％梯度，20mL/min)。在高真空下浓缩适当的流出物级分得到(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(24.6mg，51％产率)。质谱m/z 482(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.75(d,J＝19.8Hz,1H),8.02(br.s.,1H),7.59(d,J＝7.4Hz,1H),7.39-7.24(m,3H),7.21-7.12(m,1H),7.10-7.00(m,1H),6.79-6.67(m,1H),6.24-5.99(m,2H),4.20-4.13(m,1H),3.19-3.05(m,3H),2.95-2.82(m,1H),2.47-2.31(m,1H),2.11-1.47(m,7H),1.22-0.97(m,7H)。
实施例3
5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2,2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
用氩气鼓泡5-溴-2,2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体3](35mg，0.109mmol)、N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺[中间体50](37.5mg，0.131mmol)和2.0M K3PO4水溶液(0.20mL，0.400mmol)于THF(0.80mL)中的混合物1分钟，伴随超声处理。用PdCl2(dppf)DCM加合物(6.67mg，8.17μmol)处理混合物。反应容器密封且进行5次利用氩气的抽空-填充循环。在50℃搅拌混合物16.75小时，冷却至室温，用MeOH稀释且浓缩。通过制备型反相HPLC(Axia C18柱，5μm，30×100mm，用含有0.1％TFA的乙腈-水洗脱，10％-100％梯度，30mL/min)纯化残余物。合并适当的级分，用饱和NaHCO3水溶液(3-4mL)处理且浓缩成水性混悬液。将其用EtOAc萃取两次且干燥并浓缩经合并的有机相，得到呈淡棕色固体的5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2,2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(16.7mg，36％产率)。质谱m/z 402(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.73(s,1H),9.58(s,1H),8.00(br.s.,1H),7.61(d,J＝7.5Hz,1H),7.52(d,J＝7.9Hz,1H),7.30(br.s.,1H),7.24(t,J＝7.7Hz,1H),7.04(d,J＝7.5Hz,1H),6.72(d,J＝7.7Hz,1H),6.56(dd,J＝17.2,10.1Hz,1H),6.26(dd,J＝17.2,2.0Hz,1H),5.75(dd,J＝10.2,1.9Hz,1H),2.53(br.s.,3H),1.98-1.72(m,4H),1.30(t,J＝2.0Hz,2H),0.94(d,J＝4.2Hz,6H)。
实施例4
4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
用氩气鼓泡7-(2-羟基丙-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27](35mg，0.089mmol)、N-(3-溴-2-甲基苯基)丙烯酰胺[中间体45](30.1mg，0.107mmol)和2M Na2CO3水溶液(89μl，0.178mmol)于甲苯(1.33mL)和乙醇(0.44mL)中的混合物5-10分钟。用四(三苯基膦)钯(5.1mg，4.44μmol)处理混合物，且容器密封且在90℃加热16小时。使混合物冷却至室温，用MeOH和DMSO稀释且过滤。浓缩滤液且通过制备型反相HPLC(Waters XBridge C18柱，5μm，19×250mm，用乙腈-10mM乙酸铵水溶液洗脱，5％-95％梯度，20mL/min)纯化。在高真空下浓缩适当的流出物级分得到4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(5.9mg，16％产率)。质谱m/z410(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,MeOH-d4)δ7.87(d,J＝7.4Hz,1H),7.68(d,J＝1.0Hz,1H),7.64(d,J＝7.9Hz,1H),7.37(t,J＝7.9Hz,1H),7.22(d,J＝7.4Hz,1H),7.06(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.02(d,J＝7.4Hz,1H),6.94(d,J＝8.4Hz,1H),6.57-6.47(m,1H),6.45-6.37(m,1H),5.83-5.74(m,1H),1.97(s,3H),1.58(s,6H)。
实施例5
(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
用氮气鼓泡(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体28](40mg，0.100mmol)、N-(3-溴苯基)乙烯磺酰胺[中间体48](29mg，0.110mmol)和Cs2CO3(82mg，0.251mmol)于4:1THF-水(3.35mL)中的混合物，随后用PdCl2(dppf)DCM加合物(4.10mg，5.02μmol)处理。进一步用氮气鼓泡混合物，反应容器密封在氮气氛围下且在50℃加热混合物19小时。使混合物冷却至室温且浓缩。通过制备型反相HPLC(Waters XBridge C18柱，5μm，19×250mm，用乙腈-10mM乙酸铵水溶液洗脱，5％-95％梯度，20mL/min)纯化残余物。在高真空下浓缩适当的流出物级分得到(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(22.8mg，50％产率)。质谱m/z 454(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),10.09(s,1H),8.01(br.s.,1H),7.59(d,J＝7.4Hz,1H),7.39-7.29(m,2H),7.19(dd,J＝8.2,1.2Hz,1H),7.16-7.13(m,1H),7.11(d,J＝7.4Hz,1H),6.85-6.76(m,2H),6.13-6.00(m,2H),4.22(s,1H),2.92(dd,J＝17.1,4.7Hz,1H),2.44(d,J＝15.9Hz,1H),2.30-2.20(m,1H),1.98-1.84(m,2H),1.65(td,J＝11.9,4.0Hz,1H),1.11(s,7H)。
通过实施例1至5中所描述的程序或类似程序，使用所指示的起始物质制备的额外实施例示于表2中。
表2
(a)美国专利第8,084,620号的实施例73-2；(b)美国专利第8,084,620号的实施例30-3；(c)美国专利第8,084,620号的实施例73-1；(d)美国专利第8,084,620号的实施例1-3；(e)美国专利第8,084,620号的实施例68-1；(f)美国专利第8,084,620号的实施例61-5。
*实施例4的替代制备
实施例55和56
5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(两种非对映异构外消旋体)
用氩气鼓泡(RS)-5-溴-6-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体21](35mg，0.094mmol)、N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺[中间体50](29.7mg，0.104mmol)和四(三苯基膦)钯(5.44mg，4.71μmol)于甲苯(1.77mL)和乙醇(0.59mL)中的混合物约2-5分钟。用2M Na2CO3水溶液(0.12mL，0.24mmol)处理混合物，再次用氩气鼓泡且在氩气氛围下密封反应容器且在90℃加热。16小时后，使混合物冷却至室温且通过制备型反相HPLC(Waters XBridge C18柱，5μm，19×250mm，用乙腈-10mM乙酸铵水溶液洗脱，5％-95％，20mL/min梯度)纯化，得到两种产物，其为5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺的非对映异构外消旋体。
实施例55(7.8mg，18％产率)：质谱m/z 452,454(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.90(s,1H),9.61(s,1H),8.13(br.s.,1H),7.73(s,1H),7.57(d,J＝7.9Hz,1H),7.46(br.s.,1H),7.26(t,J＝7.7Hz,1H),6.97(d,J＝6.9Hz,1H),6.55(dd,J＝16.8,10.4Hz,1H),6.26(dd,J＝17.3,2.0Hz,1H),5.75(dd,J＝10.2,1.7Hz,1H),4.55(t,J＝5.2Hz,1H),3.20-3.09(m,2H),2.61(d,J＝17.3Hz,1H),2.39(d,J＝16.8Hz,1H),1.81(s,3H),1.76-1.62(m,2H),1.40-1.31(m,1H),1.22-1.13(m,1H),0.82(s,3H)。
实施例56(8.9mg，21％产率)：质谱m/z 452,454(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.90(s,1H),9.61(s,1H),8.13(br.s.,1H),7.72(s,1H),7.56(d,J＝7.9Hz,1H),7.45(br.s.,1H),7.26(t,J＝7.9Hz,1H),6.96(d,J＝7.4Hz,1H),6.54(dd,J＝17.1,10.2Hz,1H),6.25(dd,J＝16.8,2.0Hz,1H),5.75(dd,J＝10.2,1.7Hz,1H),4.56(t,J＝5.4Hz,1H),3.20-3.07(m,2H),2.64(d,J＝17.3Hz,1H),2.37(d,J＝16.8Hz,1H),1.82(s,3H),1.69(d,J＝5.0Hz,2H),1.33(dt,J＝13.9,6.9Hz,1H),1.24-1.14(m,1H),0.80(s,3H)。
尚未指定实施例55和56的C2和阻转异构键处的相对构型。
通过针对实施例55和56所描述的程序或类似程序，使用所指示的起始物质制备的额外实施例示于表3中。尚未指定外消旋非对映异构体对的C2和阻转异构键处的相对构型。
表3
实施例63
(S)-5-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
用DIEA(0.190mL，1.09mmol)处理(S)-5-(吡咯烷-3-基氨基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[中间体33](120mg，0.362mmol)于THF(9mL)和DCM(2mL)中的溶液。使溶液冷却至0℃且历经3分钟用丙烯酰氯(0.024mL，0.290mmol)于THF(1mL)中的溶液逐滴处理。在0℃搅拌混合物1.5小时，随后浓缩。通过用EtOAc-己烷，随后用MeOH-DCM洗脱的硅胶(24g)柱色谱纯化残余物，得到呈白色固体的(S)-5-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(35mg，27％产率)。质谱m/z 353(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.47(s,1H),7.58(br.s.,1H),7.46(dd,J＝8.1,1.3Hz,1H),6.88(br.s.,1H),6.69-6.51(m,1H),6.23-6.09(m,2H),5.67(ddd,J＝13.4,10.6,2.4Hz,1H),5.01(dd,J＝8.6,6.8Hz,1H),4.34-4.12(m,1H),3.82-3.39(m,4H),2.92(br.s.,2H),2.69(d,J＝3.7Hz,2H),2.39-2.17(m,1H),2.15-1.89(m,1H),1.76(br.s.,4H)。
通过针对实施例63所描述的程序或类似程序，使用所指示的起始物质和适当的羧酰氯制备的额外实施例示于表4中。
表4
(a)美国专利第8,084,620号中的实施例76-36。
实施例72
5-(((S)-1-丙炔酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(RS)-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(非对映异构体的混合物)
用5-((S)-吡咯烷-3-基氨基)-2-(RS)-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物[中间体34](55mg，0.150mmol)和DIEA(0.131mL，0.751mmol)于DMF(1mL)中的溶液处理丙炔酸(16.8mg，0.240mmol)和HATU(108mg，0.285mmol)于DMF(3mL)中的溶液。在室温搅拌混合物2小时，随后用1M HCl水溶液(1mL)处理，用10％LiCl水溶液稀释且用EtOAc萃取两次。干燥且浓缩经合并的有机层。通过制备型反相HPLC(WatersXBridge C18柱，5μm，19×200mm，用含有0.1％TFA的乙腈-水洗脱，15％-55％梯度，20mL/min)纯化残余物，得到5-(((S)-1-丙炔酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(RS)-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(4.0mg，5.9％产率)。质谱m/z 419(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.72(br.s.,1H),7.94(s,1H),7.48(d,J＝8.1Hz,1H),7.30-6.97(m,2H),6.18(dd,J＝18.7,8.2Hz,1H),4.52-4.39(m,1H),4.23(d,J＝19.9Hz,1H),3.82-3.68(m,1H),3.57(br.s.,1H),3.47-3.29(m,1H),3.15(d,J＝10.1Hz,1H),3.05(d,J＝12.5Hz,1H),2.96(br.s.,1H),2.73(s,1H),2.70-2.65(m,2H),2.28(d,J＝6.1Hz,1H),2.12(br.s.,1H),2.03(br.s.,1H),1.64(d,J＝6.4Hz,1H)。
通过针对实施例72所描述的程序或类似程序，使用所指示的起始物质和适当的羧酸制备的额外实施例示于表5中。
表5
实施例77和78
5-(((S)-1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(单一非对映异构体)
通过手性超临界流体色谱(柱：Chiralcel OD-H(3×25cm，5μm)；流动相：CO2-MeOH(60:40)，85mL/min；样品配制物：4mg/mL于MeOH-乙腈中；注入：3mL)分离5-(((S)-1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(两种非对映异构体的混合物)[实施例65](40mg)的样品。自柱洗脱的第一峰提供5-(((S)-1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺的一种非对映异构体[实施例77](11.5mg)。质谱m/z 421(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.72(s,1H),7.49(dd,J＝8.3,1.3Hz,1H),6.67-6.51(m,1H),6.24-6.12(m,2H),5.69(ddd,J＝12.8,10.3,2.4Hz,1H),5.07(m,1H),4.1-4.3(m,1H),3.79-3.62(m,2H),3.62-3.39(m,2H),3.17-2.92(m,3H),2.69(d,J＝14.2Hz,2H),2.33-2.11(m.,3H)。
自柱洗脱的第二峰提供5-(((S)-1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺的另一非对映异构体[实施例78](13.0mg)。质谱m/z 421(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.72(s,1H),7.49(dd,J＝8.3,1.3Hz,1H),6.67-6.51(m,1H),6.24-6.12(m,2H),5.69(ddd,J＝12.8,10.3,2.4Hz,1H),5.07(m,1H),4.1-4.3(m,1H),3.79-3.62(m,2H),3.62-3.39(m,2H),3.17-3.01(m,3H),2.69(d,J＝14.2Hz,2H),2.33-2.11(m.,3H)。
尚未指定实施例77和78的四氢咔唑环2-位置处的绝对立体化学。
实施例87
3-氟-4-((6-乙烯基吡啶-3-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体87A：4-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐
在65℃搅拌4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体8](100mg，0.326mmol)和四(三苯基膦)钯(75mg，0.065mmol)于THF(1mL)中的溶液5分钟，随后用((6-氯吡啶-3-基)甲基)氯化锌(II)(0.5M于THF中；1.95mL，0.977mmol)逐滴处理。持续加热过夜。使混合物冷却至室温，且用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液洗涤，干燥且浓缩。对残余物进行用含有0.1％TFA的MeOH-水(10％-90％梯度)洗脱的制备型HPLC(柱：Axia C18，5μ；30×100mm)，得到呈黄色固体的4-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐(33mg，22％产率)。质谱m/z 354,356(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.32(d,J＝2.3Hz,1H),8.04(d,J＝8.1Hz,1H),7.81(d,J＝10.9Hz,1H),7.72-7.59(m,2H),7.46(td,J＝7.7,1.0Hz,1H),7.33(d,J＝8.3Hz,1H),7.17(ddd,J＝8.1,7.2,1.0Hz,1H),4.76-4.73(m,2H)。
实施例87：
用氮气鼓泡4-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺TFA盐(33mg，0.071mmol)、三正丁基(乙烯基)锡烷(67.1mg，0.212mmol)、LiCl(9.0mg，0.212mmol)和四(三苯基膦)钯(4.1mg，3.53μmol)于DMF(1mL)中的混合物，随后在90℃搅拌过夜。经冷却的混合物用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液洗涤3次，干燥且浓缩。对残余物进行用MeOH-DCM(0％-5％梯度)洗脱的硅胶柱色谱，得到呈白色固体的3-氟-4-((6-乙烯基吡啶-3-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(14.3mg，57％产率)。质谱m/z 346(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.42(d,J＝2.0Hz,1H),8.04(d,J＝8.1Hz,1H),7.80(d,J＝11.0Hz,1H),7.65-7.57(m,2H),7.46-7.39(m,2H),7.14(ddd,J＝8.1,7.2,1.0Hz,1H),6.75(dd,J＝17.6,11.0Hz,1H),6.07(dd,J＝17.7,1.0Hz,1H),5.44(dd,J＝11.0,1.0Hz,1H),4.56(s,2H)。
实施例88
N1-(4-(((5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-(RS)-基)甲基)(甲基)氨基)丁基)-N5-(15-氧代-19-((3aS,4S,6aR)-2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)-4,7,10-三氧杂-14-氮杂十九烷基)戊二酰胺TFA盐，非对映异构体的混合物
中间体88A：甲烷磺酸(RS)-(5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-基)甲基酯
用三乙胺(0.270mL，1.93mmol)，随后甲磺酰氯(0.072mL，0.928mmol)处理在冰-水浴上搅拌的(RS)-5-溴-2-(羟基甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺[根据美国专利第8,084,620号，实施例73-2的程序制备](250mg，0.774mmol)于THF(10mL)中的混悬液。在室温搅拌混合物90分钟。添加额外三乙胺(0.270mL，1.93mmol)和甲磺酰氯(0.072mL，0.928mmol)且持续搅拌另外90分钟。混合物用EtOAc稀释且依次用水、饱和NaHCO3水溶液及饱和盐水洗涤，干燥且浓缩，得到呈橙棕色胶状物的粗产物甲烷磺酸(RS)-(5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-基)甲基酯(332mg)，其不经进一步纯化即使用。质谱m/z401,403(M+H)+。
中间体88B：(RS)-(4-(((5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-基)甲基)(甲基)氨基)丁基)氨基甲酸叔丁酯
用DIEA(0.810mL，4.64mmol)处理粗产物甲烷磺酸(RS)-(5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-基)甲基酯(310mg，0.773mmol)和(4-(甲基氨基)丁基)氨基甲酸叔丁酯，甲烷磺酸盐[根据美国专利第7,989,465号实施例45，步骤1-3的程序制备](461mg，1.55mmol)于乙腈(10mL)中的溶液，且在油浴上在70℃加热70小时。随后在回流加热混合物95小时。使混合物冷却至室温且浓缩，且对残余物进行用EtOAc-己烷(25％-100％梯度)洗脱，随后进一步用MeOH-DCM(0％-20％梯度)洗脱，随后进一步用含有5％三乙胺的MeOH-DCM(20％)洗脱的硅胶(40g)柱色谱。浓缩含有产物的流出物，且通过制备型反相HPLC(柱：Axia C18 30×100mm，用含有0.1％TFA的乙腈-水洗脱，10％-100％梯度)纯化残余物。经合并适当的流出物级分，用饱和NaHCO3水溶液处理且浓缩成水性残余物。将其用EtOAc萃取两次且干燥并浓缩经合并的有机相，得到呈褐色玻璃状固体的(RS)-(4-(((5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-基)甲基)(甲基)氨基)丁基)氨基甲酸叔丁酯(102mg，25％产率)。质谱m/z 507,509(M+H)+,451,453(M+H-C4H8)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.04(br.s.,1H),7.21(d,J＝7.9Hz,1H),7.15-7.08(m,1H),5.91(br.s.,2H),4.90(br.s.,1H),3.37-3.22(m,1H),3.16(d,J＝5.7Hz,2H),3.08-2.81(m,2H),2.54-2.30(m,5H),2.24(s,3H),2.17-2.01(m,2H),1.58-1.40(m+s,14H)。
中间体88C：(RS)-2-(((4-氨基丁基)(甲基)氨基)甲基)-5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺二盐酸盐
用4M HCl/1,4-二噁烷(1mL，4.00mmol)处理(RS)-(4-(((5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-基)甲基)(甲基)氨基)丁基)氨基甲酸叔丁酯(77mg，0.152mmol)于1,4-二噁烷(2mL)中的溶液，形成棕色胶。用超声处理混合物且在室温搅拌100分钟。所得黄色混悬液用乙醚稀释，用超声处理且在室温搅拌1.5小时。通过过滤收集沉淀物，用乙醚冲洗且干燥，得到呈淡黄褐色吸湿固体的(RS)-2-(((4-氨基丁基)(甲基)氨基)甲基)-5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺二盐酸盐(76.6mg，定量产率)。质谱m/z 407,409(M+H)+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.07-10.94(m,1H),10.25(br.s.,1H),8.06(br.s.,4H),7.49(dd,J＝8.1,1.5Hz,1H),7.41(br.s.,1H),7.17(d,J＝8.1Hz,1H),3.27-2.72(m,13H),2.43-2.07(m,2H),1.89-1.74(m,2H),1.69-1.49(m,3H)。
中间体88D：N1-(4-(((5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-(RS)-基)甲基)(甲基)氨基)丁基)-N5-(15-氧代-19-((3aS,4S,6aR)-2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)-4,7,10-三氧杂-14-氮杂十九烷基)戊二酰胺TFA盐，非对映异构体的混合物
用DIEA(0.093mL，0.533mmol)和EDC(35.1mg，0.183mmol)处理(RS)-2-(((4-氨基丁基)(甲基)氨基)甲基)-5-溴-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺二盐酸盐(73.2mg，0.152mmol)、5,21-二氧代-25-((3aS,4S,6aR)-2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)-10,13,16-三氧杂-6,20-二氮杂二十五烷-1-酸，二异丙基甲基胺盐(103mg，0.152mmol)和HOAT(24.9mg，0.183mmol)于DMF(1mL)中的溶液，且在室温搅拌溶液16小时。浓缩混合物，且通过制备型反相HPLC(柱：Axia C18 30×100mm，用含有0.1％TFA的乙腈-水洗脱，10％-100％梯度，30mL/min)纯化残余物。合并适当的级分且浓缩，且自乙腈-水中冻干残余物，得到呈褐色无定形固体的N1-(4-(((5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-(RS)-基)甲基)(甲基)氨基)丁基)-N5-(15-氧代-19-((3aS,4S,6aR)-2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)-4,7,10-三氧杂-14-氮杂十九烷基)戊二酰胺TFA盐，非对映异构体的混合物(121mg，75％产率)。质谱m/z 949,951(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)复杂但具有正确数量的NH质子[δ11.05(2s,1H),9.08(br.s.,1H),8.05(br.s.,1H),7.83(d,J＝2.9Hz,1H),7.74(d,J＝4.6Hz,2H),7.40(br.s.,1H),6.41(br.s.,2H],芳族质子[δ7.48(d,J＝7.9Hz,1H),7.17(d,J＝7.9Hz,1H)]和CH2O质子[δ3.54-3.49(m,4H),3.49-3.44(m,4H),3.39(td,J＝6.4,2.2Hz,4H)]。
实施例88：
用氩气鼓泡N1-(4-(((5-溴-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-(RS)-基)甲基)(甲基)氨基)丁基)-N5-(15-氧代-19-((3aS,4S,6aR)-2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)-4,7,10-三氧杂-14-氮杂十九烷基)戊二酰胺TFA盐，非对映异构体的混合物(116.5mg，0.109mmol)、N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙烯酰胺[中间体50](47.2mg，0.164mmol)和2.0M K3PO4水溶液(0.274mL，0.547mmol)于THF(1mL)中的混合物约1分钟，伴随超声处理。用1,1′-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(4.47mg，5.47μmol)处理混合物且密封反应容器且在50℃加热15.75小时。浓缩经冷却的混合物，且通过制备型反相HPLC(柱：Axia C18 30×100mm，用含有0.1％TFA的乙腈-水洗脱，10％-100％梯度，30mL/min)纯化残余物。合并适当的流出物级分且浓缩，且自乙腈-水中冻干残余物，得到呈淡黄色无定形固体的N1-(4-(((5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-8-氨甲酰基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-(RS)-基)甲基)(甲基)氨基)丁基)-N5-(15-氧代-19-((3aS,4S,6aR)-2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)-4,7,10-三氧杂-14-氮杂十九烷基)戊二酰胺TFA盐，非对映异构体的混合物(79.9mg，59％产率)。质谱m/z 1031(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)复杂但与预期的产物一致。芳族、乙烯基合NH质子：δ10.92-10.79(m,1H),9.59(d,J＝10.6Hz,1H),9.08-8.89(m,1H),8.03(br.s.,1H),7.81(t,J＝5.4Hz,1H),7.73(br.s.,2H),7.64(dd,J＝7.6,1.9Hz,1H),7.51(t,J＝6.6Hz,1H),7.33(br.s.,1H),7.24(td,J＝7.7,3.7Hz,1H),7.02(dd,J＝10.5,7.6Hz,1H),6.75(dd,J＝7.6,2.3Hz,1H),6.56(dd,J＝16.9,10.3Hz,1H),6.46-6.31(m,2H),6.26(dd,J＝17.1,2.1Hz,1H),5.76(dd,J＝10.2,1.9Hz,1H)。以及CH2O质子：δ3.56-3.43(m,8H),3.39(td,J＝6.3,3.0Hz,4H)。其他质子计数约49，理论上为50。
通过上文所描述的程序，使用所指示的起始物质和程序制备的额外实施例示于表6中。
表6
(a)遵循用于制备实施例63的程序或类似程序制备。
(b)通过外消旋化合物的超临界流体色谱制备。未指定绝对构型。
实施例100
3-氟-4-((2-乙烯基吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体100A：4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺
用三甲基氯硅烷(2.7μL，0.021mmol)和1,2-二溴乙烷(3.9mg，0.021mmol)处理锌(55mg，0.834mmol)于THF(2mL)中的混悬液，且在65℃搅拌混合物30分钟。使混合物冷却至0℃，用2-氯-4-(氯甲基)吡啶(101mg，0.625mmol)于THF(0.5mL)中的溶液处理，且搅拌15分钟。混合物用4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体8](64mg，0.208mmol)和双(三-叔丁基膦)钯(21.3mg，0.042mmol)于THF(1mL)中的溶液处理且温热至室温，随后在65℃搅拌过夜。添加额外的2-氯-4-(氯甲基)吡啶(101mg，0.625mmol)和双(三-叔丁基膦)钯(21.3mg，0.042mmol)，且在70℃持续搅拌过夜。使混合物冷却至室温且经由硅藻土过滤。用EtOAc稀释滤液，依次用饱和NaHCO3水溶液和水洗涤，干燥并浓缩。对残余物进行用EtOAc-己烷(0％-100％梯度)洗脱的硅胶柱色谱，得到呈黄色固体的4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(27mg，37％产率)。质谱m/z 354,356(M+H)+。
实施例100：
遵循用于将中间体87A转化成实施例87的程序，在通过制备型反相色谱(Luna Axia C18柱，5μm，用含有0.1％TFA的乙腈-水洗脱，10％-90％梯度)纯化且通过分配于EtOAc与饱和NaHCO3水溶液之间而转化成游离碱之后，以31％产率将4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺转化成呈白色固体的3-氟-4-((2-乙烯基吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。质谱m/z 346(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.30(d,J＝5.3Hz,1H),7.95(d,J＝8.1Hz,1H),7.80(d,J＝10.8Hz,1H),7.62(d,J＝8.2Hz,1H),7.47-7.38(m,2H),7.17-7.06(m,2H),6.72(dd,J＝17.6,11.0Hz,1H),6.02(dd,J＝17.6,1.1Hz,1H),5.43(dd,J＝11.0,1.0Hz,1H),4.75(s,2H)。
比较实施例101
7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-丙酰氨基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
比较中间体101A：N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙酰胺
遵循用于制备中间体49的程序，但丙酸酐替代丙烯酰氯，以88％产率将2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺[根据美国专利第8,084,620号，中间体50-1制备]转化成N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙酰胺。质谱m/z 290(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(s,1H),7.52-7.34(m,2H),7.14(t,J＝7.6Hz,1H),2.37-2.30(m,5H),1.30(s,12H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。
比较实施例101：
遵循用于制备实施例1的程序，以94％产率将4-溴-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[根据美国专利第8,084,620号，实施例73-2中所描述的程序合成]和N-(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙酰胺转化成7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-丙酰氨基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。质谱m/z 412(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.41(s,1H),9.40(s,1H),8.16(br.s.,1H),7.95(d,J＝7.9Hz,1H),7.85(d,J＝1.0Hz,1H),7.54(d,J＝7.9Hz,1H),7.47(br.s.,1H),7.33(t,J＝7.7Hz,1H),7.08(d,J＝7.4Hz,1H),6.99(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),6.93(d,J＝7.4Hz,1H),6.73(d,J＝8.4Hz,1H),4.98(s,1H),2.37(q,J＝7.4Hz,2H),1.86(s,3H),1.44(s,6H),1.11(t,J＝7.7Hz,3H)。
比较实施例102
7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(3-乙基脲基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
比较中间体102A：1-(3-溴-2-甲基苯基)-3-乙基脲
在冰-水浴上搅拌三光气(2.249g，7.58mmol)于甲苯(26.9mL)中的溶液，且用3-溴-2-甲基苯胺(3g，16.12mmol)和DIEA(5.63mL，32.2mmol)于甲苯(5.37mL)中的溶液缓慢处理。在室温搅拌所得混悬液2小时，过滤且用EtOAc洗涤沉淀物。用盐水迅速洗涤经合并的滤液，干燥且浓缩，得到呈棕色固体/油混合物的1-溴-3-异氰酸酯基-2-甲基苯(3.36g)。用乙醇处理该粗物质的一部分，得到呈灰白色固体的1-(3-溴-2-甲基苯基)-3-乙基脲。质谱m/z 357,259(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(s,1H),7.75(d,J＝7.5Hz,1H),7.24(dd,J＝7.9,0.9Hz,1H),7.04(t,J＝8.0Hz,1H),6.50(t,J＝5.4Hz,1H),3.11(qd,J＝7.2,5.6Hz,2H),1.07(t,J＝7.3Hz,3H)。
比较实施例102：
遵循用于制备实施例4的程序，以33％产率将7-(2-羟基丙-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[中间体27]和1-(3-溴-2-甲基苯基)-3-乙基脲转化成7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(3-乙基脲基)-2-甲基苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。质谱m/z 427(M+H-H2O)+。1H NMR(500MHz,MeOH-d4)δ7.86(d,J＝7.9Hz,1H),7.79(d,J＝7.9Hz,1H),7.68(d,J＝1.0Hz,1H),7.31(t,J＝7.7Hz,1H),7.08(d,J＝7.4Hz,1H),7.05(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.00(d,J＝7.9Hz,1H),6.91(d,J＝8.4Hz,1H),3.28(q,J＝6.9Hz,2H),1.94(s,3H),1.58(s,6H),1.18(t,J＝7.2Hz,3H)。
比较实施例103
4-(3-(2-氰基乙酰氨基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
比较中间体103A：2-氰基-N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺
在室温搅拌2-氰基乙酸(0.115g，1.35mmol)、EDC(0.370g，1.93mmol)、HOBT(0.296g，1.93mmol)和DIEA(0.562mL，3.22mmol)于THF(10.7mL)和DCM(10.7mL)中的溶液30分钟。用2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺[根据美国专利第8,084,620号，中间体50-1制备](0.300g，1.29mmol)处理混合物，且在室温搅拌混合物16小时。添加额外的氰基乙酸(0.115g)，且在另外6小时之后，添加额外的EDC(0.370g)和HOBT(0.296g)。在室温搅拌2天后，将混合物分配于EtOAc与饱和NaHCO3水溶液之间。干燥且浓缩有机相，且对残余物进行用EtOAc-己烷(30％-50％梯度)洗脱的硅胶(24g)柱色谱，得到呈白色固体的2-氰基-N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺(344mg，89％产率)。质谱m/z301(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.68(s,1H),7.52-7.47(m,1H),7.43-7.38(m,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),3.91(s,2H),2.34(s,3H),1.30(s,12H)。
比较实施例103：
遵循用于制备实施例1的程序，以19％产率将4-溴-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[根据美国专利第8,084,620号，实施例73-2中所描述的程序合成]和2-氰基-N-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙酰胺转化成4-(3-(2-氰基乙酰氨基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。质谱m/z 441(M+H)+。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.42(s,1H),9.86(s,1H),8.16(br.s.,1H),7.96(d,J＝7.4Hz,1H),7.86(d,J＝1.0Hz,1H),7.74(d,J＝7.9Hz,1H),7.47(br.s.,1H),7.34(t,J＝7.7Hz,1H),7.08(d,J＝7.4Hz,1H),7.00(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),6.94(d,J＝7.9Hz,1H),6.72(d,J＝8.4Hz,1H),4.98(s,1H),3.31(s,2H),1.89(s,3H),1.43(s,6H)。
比较实施例104
4-(3-氨基-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
根据美国专利第8,084,620号，实施例76-36中所描述的程序制备比较实施例104。
比较实施例105
4-(3-苯甲酰氨基-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
遵循用于制备实施例63的程序，但苯甲酰氯替代丙烯酰氯，以68％产率将4-(3-氨基-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺[比较实施例104]转化成4-(3-苯甲酰氨基-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。质谱m/z 460(M+H-H2O)+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.01(m,1H),7.96-7.90(m,1H),7.78(s,1H),7.64-7.49(m,5H),7.43(td,J＝7.7,3.5Hz,1H),7.32-7.26(m,1H),7.13-6.98(m,3H),2.07-2.00(m,3H),1.59(s,6H)。
比较实施例106
5-(2-甲基-3-(1-氧代异吲哚啉-2-基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
根据美国专利第8,084,620号，实施例3-99中所描述的程序制备比较实施例106。
比较实施例107
4-(3-乙酰氨基-2-甲基苯基)-7-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
根据美国专利第8,084,620号，实施例5-2中所描述的程序制备比较实施例107。
比较实施例108
4-(3-(环丙烷甲酰氨基)-2-甲基苯基)-7-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
根据美国专利第8,084,620号，实施例5-49中所描述的程序制备比较实施例108。
比较实施例109
(R)-4-(3-乙酰氨基哌啶-1-基)-7-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
根据美国专利第8,084,620号，实施例18-1中所描述的程序制备比较实施例109。
比较实施例110
(RS)-2-(羟基甲基)-5-(2-甲基-3-(1-氧代异吲哚啉-2-基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
根据美国专利第8,084,620号，实施例31-1中所描述的程序制备比较实施例110。
比较实施例111
7-丙烯酰氨基-4-(2-氟苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
根据美国专利第8,084,620号，实施例57-10中所描述的程序制备比较实施例111。
实施例112
4-(1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(外消旋)
将丙烯酰氯(4.94μl，0.061mmol)添加至3-氟-4-(吡咯烷-3-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺，TFA(中间体72)(25mg，0.061mmol)和DIPEA(0.053mL，0.304mmol)于THF(1mL)中的溶液中，且在室温搅拌30分钟。浓缩混合物且使用制备型HPLC(Luna AxiaC18 5μ；30×100mm柱；在220nM检测；流速＝40mL/min；历经10分钟20％B至100％B的连续梯度+在100％B保持5分钟，其中A＝10:90:0.1MeOH-H2O-TFA，且B＝90:10:0.1MeOH-H2O-TFA)纯化粗物质，得到呈白色固体的4-(1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(11.1mg，50.9％产率)。质谱m/z 352(M+H)+。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.22(d,J＝7.9Hz,1H),7.74(dd,J＝13.1,1.7Hz,1H),7.65(d,J＝8.1Hz,1H),7.52-7.43(m,1H),7.23(tt,J＝7.6,1.5Hz,1H),6.80-6.59(m,1H),6.34(ddd,J＝16.8,6.1,2.1Hz,1H),5.86-5.71(m,1H),4.79-4.63(m,1H),4.25-3.70(m,4H),2.71-2.47(m,2H)。
实施例113和114
4-(1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一对映异构体)
通过手性超临界流体色谱(柱：OJ-H(3×25cm，5μm)；流动相：CO2-MeOH(55-45)，130mL/min，100巴，35℃；样品配制物：10mg/mL于25mL MeOH-DCM-ACN-THF-DMF中；注入：4.5mL)分离(RS)-4-(1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(实施例112)(20mg)的样品。自柱洗脱的第一峰提供一种对映异构体(实施例113)(2.1mg)。质谱m/z 352(M+H)+。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.22(d,J＝7.9Hz,1H),7.74(dd,J＝13.0,1.7Hz,1H),7.65(d,J＝7.5Hz,1H),7.52-7.41(m,1H),7.30-7.19(m,1H),6.81-6.59(m,1H),6.34(ddd,J＝16.8,6.1,2.1Hz,1H),5.87-5.70(m,1H),4.79-4.58(m,1H),4.18(d,J＝8.4Hz,1H),4.12-3.85(m,2H),3.74(d,J＝12.3Hz,1H),2.80-2.45(m,2H)。自柱洗脱的第二峰提供一种对映异构体(实施例114)(2.6mg)。质谱m/z 352(M+H)+。未指定实施例113和114的绝对构型。
实施例115
顺式-4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(外消旋)
在室温搅拌3-氟-4-(六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(2H)-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺，TFA(19mg，0.041mmol)[中间体75]、丁-2-炔酸(3.42mg，0.041mmol)、DIPEA(7.11μl，0.041mmol)和HATU(15.49mg，0.041mmol)于DMF(1mL)中的溶液30分钟。混合物用EtOAc稀释，用水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩。使用制备型HPLC(YMC ODS C18 5μ；30×100mm柱；在220nM检测；流速＝30mL/min；历经40分钟10％B至100％B的连续梯度+在100％B保持5分钟，其中A＝05:95:0.1ACN-H2O-TFA，且B＝95:05:0.1ACN-H2O-TFA)纯化粗物质，得到呈白色固体的(RS)-顺式-4-(1-(丁-2-炔酰基)六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(2H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(12.3mg，70.7％产率)。质谱m/z 419(M+H)+。
实施例116和117
顺式-4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一对映异构体)
通过手性超临界流体色谱(柱：OD-H(5×25cm，5μm)；流动相：CO2-MeOH(65:35)，300mL/min；100巴，35℃；样品配制物：85mg于18mL MeOH-DCM(1:1)中；注入：4.72mg/mL)分离(RS)-顺式-4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(实施例115)(85mg)的样品。自柱洗脱的第一峰提供呈白色固体的顺式-4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺的一种对映异构体(实施例116)(31.5mg)。自柱洗脱的第二峰提供呈灰白色固体的4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺的另一对映异构体(实施例117)(31mg)。质谱m/z 419(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.39(d,J＝4.4Hz,1H),8.47(br.s.,1H),8.18-8.11(m,J＝10.5Hz,1H),8.09(br.s.,1H),7.91(dd,J＝14.2,6.7Hz,1H),7.75(dd,J＝8.1,2.8Hz,1H),7.49(br.s.,1H),7.44-7.38(m,1H),7.22(t,J＝7.6Hz,1H),5.21(dq,J＝16.9,8.5Hz,1H),4.35-4.24(m,1H),3.74-2.77(m,3H),2.70-2.29(m,J＝15.0Hz,1H),2.08(d,J＝19.0Hz,3H),1.96-1.93(m,1H),1.87(br.s.,3H),1.61-1.34(m,1H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)由于是旋转异构体的混合物所以复杂。两种对映异构体的质谱和NMR谱相同。尚未指定实施例116和117的绝对立体化学。
实施例118
(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺
将DIPEA(2.62mL，15.01mmol)添加至(S)-4-(3-氨基哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(中间体85)(0.98g，3.00mmol)、丁-2-炔酸(0.265g，3.15mmol)和HATU(1.199g，3.15mmol)于DMF(15mL)中的溶液中，且在室温搅拌45分钟。混合物用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3、水(3次)洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩。使用ISCO快速色谱(硅胶/己烷/乙酸乙酯100:0至0:100梯度)纯化粗产物，得到(0.520g，51％产率)。质谱m/z 393(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.38(s,1H),8.56(d,J＝7.8Hz,1H),8.31(d,J＝8.1Hz,1H),8.07(br.s.,1H),7.85(d,J＝14.4Hz,1H),7.73(d,J＝8.1Hz,1H),7.48(br.s.,1H),7.43-7.34(m,1H),7.24-7.15(m,1H),4.03(br.s.,1H),3.26-3.16(m,2H),2.99(br.s.,2H),2.03-1.79(m,6H),1.43(br.s.,1H)。
实施例119
顺式-4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一对映异构体)
将丙烯酰氯(3.48μl，0.043mmol)添加至3-氟-4-(六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(2H)-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺，TFA(20mg，0.043mmol)(中间体75)和DIPEA(7.49μl，0.043mmol)于THF(1mL)中的溶液中，且在室温搅拌30分钟。浓缩混合物且使用制备型HPLC(YMC ODS C18 5μ；30×100mm柱；在220nM检测；流速＝30mL/min；历经40分钟10％B至100％B的连续梯度+在100％B保持5分钟，其中A＝05:95:0.1ACN-H2O-TFA，且B＝95:05:0.1ACN-H2O-TFA)纯化粗物质，得到呈白色固体的(RS)-顺式-4-(1-丙烯酰基六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(2H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(10.9mg，61.3％产率)。质谱m/z 407(M+H)+。
实施例120和121
顺式-4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一对映异构体)
通过手性超临界流体色谱(柱：AS-H(3×25cm，5μm)；流动相：CO2-MeOH(70:30)，180mL/min；100巴，35℃；样品配制物：76mg于8mL MeOH中；注入：9.5mg/mL)分离(RS)-顺式-4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(实施例119)(76mg)的样品。自柱洗脱的第一峰提供呈白色固体的顺式-4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺的一种对映异构体(实施例120)(26.3mg)。自柱洗脱的第二峰提供呈灰白色固体的顺式-4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺的另一对映异构体(实施例121)(26.5mg)。质谱m/z 407(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.38(s,1H),8.12(d,J＝7.9Hz,1H),8.07(br.s.,1H),7.89(d,J＝14.4Hz,1H),7.73(d,J＝8.1Hz,1H),7.46(br.s.,1H),7.43-7.37(m,1H),7.21(t,J＝7.3Hz,1H),6.89(d,J＝12.2Hz,1H),6.10(dd,J＝16.7,2.4Hz,1H),5.70(br.s.,1H),5.33-4.86(m,1H),4.50-3.92(m,1H),3.81-2.71(m,5H),2.46-2.35(m,1H),1.97-1.74(m,3H),1.43(br.s.,1H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)由于是旋转异构体的混合物所以复杂。两种对映异构体的质谱和NMR谱相同。尚未指定实施例120和121的绝对立体化学。
实施例122
3-氟-4-((2-乙烯基嘧啶-5-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体122A：3-氟-4-乙烯基-9H-咔唑-1-甲酰胺
用氮气净化4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(100mg，0.326mmol)、2,4,6-三乙烯基环硼氧烷(cyclotriboroxane)吡啶络合物(94mg，0.39mmol)、2M磷酸三钾(0.41mL，0.81mmol)、1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(10.61mg，0.016mmol)于THF(3mL)中的混合物，且在60℃搅拌过夜。使混合物冷却至室温且浓缩。使用ISCO快速色谱(硅胶/己烷/乙酸乙酯100:0至0:100梯度)纯化粗产物，得到呈黄色固体的3-氟-4-乙烯基-9H-咔唑-1-甲酰胺(70mg，85％产率)。质谱m/z 255(M+H)+。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.23(d,J＝8.1Hz,1H),7.73(d,J＝12.1Hz,1H),7.61(d,J＝8.2Hz,1H),7.49-7.37(m,2H),7.19(td,J＝7.6,1.0Hz,1H),6.08(dt,J＝17.9,1.7Hz,1H),5.90(dt,J＝11.7,1.7Hz,1H)。
中间体122B：3-氟-4-甲酰基-9H-咔唑-1-甲酰胺
将2％四氧化锇于水中的溶液(0.35mL，0.03mmol)添加至3-氟-4-乙烯基-9H-咔唑-1-甲酰胺(70mg，0.26mmol；中间体8)和2,6-二甲基吡啶(0.06mL，0.55mmol)于二噁烷(0.8mL)中的溶液中。随后，将高碘酸钠(236mg，1.10mmol)于水(0.3mL)中的溶液添加至反应混合物中且搅拌5小时。混合物用EtOAc稀释，用水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩。使用ISCO快速色谱(硅胶/己烷/乙酸乙酯100:0至0:100梯度)纯化粗产物，得到呈黄色固体的3-氟-4-甲酰基-9H-咔唑-1-甲酰胺(60mg，85％产率)。质谱m/z 257(M+H)+。
中间体122C：4-((2-氯嘧啶-5-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺
在80℃搅拌3-氟-4-甲酰基-9H-咔唑-1-甲酰胺(10mg，0.04mmol)和4-甲苯磺酰肼(7.99mg，0.04mmol)于二噁烷(1mL)中的溶液90分钟。LCMS指示甲苯磺酰腙形成。添加2-氯吡啶-4-硼酸(9.21mg，0.06mmol)和碳酸钾(8.09mg，0.06mmol)，且在110℃搅拌2小时(参考：Nature Chem.,Vol 1(2009年9月),doi:10.1038/NCHEM.328)。使混合物冷却至室温，用EtOAc稀释，用水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩。使用制备型HPLC(LunaAxia C18 5μm；30×100mm柱，用含有0.1％TFA的甲醇-水洗脱，20％-100％梯度，40mL/min)纯化粗物质，得到呈淡黄色固体的4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(2.3mg，16.66％产率)。质谱m/z 355(M+H)+。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ10.44(br.s.,1H),8.32(d,J＝5.3Hz,1H),7.89(d,J＝7.5Hz,1H),7.61-7.57(m,1H),7.55-7.49(m,1H),7.45(d,J＝10.0Hz,1H),7.25-7.22(m,2H),7.21-7.16(m,1H),6.51(br.s.,1H),4.71(s,2H)。
实施例122：
在90℃搅拌4-((2-氯嘧啶-5-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(10mg，0.028mmol)、与吡啶络合的2,4,6-三乙烯基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(1:1)(10.18mg，0.042mmol)、2M碳酸钾(0.042mL，0.085mmol)和Pd(Ph3P)4(3.26mg，2.82μmol)于1,4-二噁烷(1mL)中的溶液18小时。浓缩混合物且经由制备型LC/MS(XBridge C18，19×200mm，5-μm粒子柱，用含有10-mM乙酸铵的95乙腈-水洗脱，20％-60％梯度，20mL/min)纯化粗物质，得到3-氟-4-((2-乙烯基嘧啶-5-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。质谱m/z 347(M+H)+。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ10.44(br.s.,1H),8.32(d,J＝5.3Hz,1H),7.89(d,J＝7.5Hz,1H),7.61-7.57(m,1H),7.55-7.49(m,1H),7.45(d,J＝10.0Hz,1H),7.25-7.22(m,2H),7.21-7.16(m,1H),6.51(br.s.,1H),4.71(s,2H)。
实施例123
顺式-4-(1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺
将丙烯酰氯(4.49μl，0.055mmol)添加至3-氟-4-(六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺，TFA(中间体76)(25mg，0.055mmol)和DIPEA(9.65μl，0.055mmol)于THF(0.5mL)中的溶液中，且搅拌30分钟。浓缩混合物且使用制备型HPLC(YMCODS C18 5μ；30×100mm柱；在220nM检测；流速＝30mL/min；历经40分钟10％B至100％B的连续梯度+在100％B保持2分钟，其中A＝05:95:0.1ACN-H2O-TFA，且B＝95:05:0.1ACN-H2O-TFA)纯化粗物质，得到呈淡棕色固体的(RS)-顺式-4-(1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(8.9mg，39.8％产率)。质谱m/z 393(M+H)+。
实施例124和125
顺式-4-(1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一对映异构体)
通过手性超临界流体色谱(柱：AS-H(3×25cm，5μm)；流动相：CO2-MeOH(75:25)，140mL/min；100巴，40℃；样品配制物：108mg于MeOH中；注入：1.35mg/mL)分离(RS)-顺式-4-(1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(实施例123)(108mg)的样品。自柱洗脱的第一峰提供呈白色固体的顺式-4-(1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺的一种对映异构体(实施例124)(42mg)。自柱洗脱的第二峰提供呈灰白色固体的顺式-4-(1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺的另一对映异构体(实施例125)(35mg)。质谱m/z 393(M+H)+。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.07-7.98(m,1H),7.73-7.66(m,1H),7.60-7.53(m,1H),7.44-7.34(m,1H),7.22-7.05(m,1H),6.88-6.56(m,1H),6.38-6.25(m,1H),5.90-5.66(m,1H),4.73-4.65(m,1H),4.10-3.74(m,4H),3.64(d,J＝4.5Hz,1H),3.53-3.47(m,1H),3.41-3.18(m,1H),2.41-2.03(m,2H)。1H NMR(400MHz,MEOH-d4)由于是旋转异构体的混合物所以复杂。两种对映异构体的质谱和NMR谱相同。尚未指定实施例124和125的绝对立体化学。
实施例126
4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺(外消旋)
中间体126A：5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸
以使得反应温度保持在0℃以下的速率向在-10℃的2-氨基-4溴-5-氯苯甲酸(1.0g，3.99mmol)于浓HCl(20mL)中的混悬液中逐滴添加亚硝酸钠(0.289g，4.19mmol)于水(2.0mL)中的溶液。在0℃搅拌混合物15分钟。以使反应温度保持在-5℃以下的速率将氯化亚锡(II)(1.590g，8.38mmol)于浓HCl(5.0mL)中的溶液添加至混合物中。在室温搅拌反应混合物60分钟。过滤沉淀物，用水洗涤且风干，得到呈白色固体的4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸，HCl(752mg，1.868mmol，46.8％产率)。
在110℃搅拌4-溴-5-氯-2-肼基苯甲酸，HCl(1.0g，3.31mmol)和环己酮(0.650g，6.62mmol)于HOAc(20mL)中的混合物18小时。过滤沉淀物且用HOAc和DCM洗涤。粗物质产生呈淡绿色固体的5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(893g，2582mmol，7.80E+04％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.12(s,1H),7.67(s,1H),3.01(br.s.,2H),2.76(br.s.,2H),1.78(br.s.,4H)。LCMS：1.21分钟，M+H 329。
中间体126B：4-溴-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸乙酯
向5-溴-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酸(中间体126A)(2.27g，6.91mmol)于THF(80mL)中的溶液中添加DDQ(3.14g，13.82mmol)。在60℃搅拌混合物18小时。浓缩混合物，得到4-溴-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸。在回流下搅拌4-溴-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸和硫酸(0.736mL，13.82mmol)于EtOH(100mL)中的混合物18小时。浓缩混合物。对粗产物进行ISCO快速色谱(硅胶/己烷-EtOAc 100:0至50:50梯度)，得到呈淡棕色固体的4-溴-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸乙酯(760mg，2.048mmol，29.6％产率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ10.12(br.s.,1H),8.82(dd,J＝8.1,0.9Hz,1H),8.23-8.08(m,1H),7.65-7.48(m,2H),7.37(ddd,J＝8.1,6.6,1.6Hz,1H),4.52(q,J＝7.1Hz,2H),1.55-1.47(m,3H)。
中间体126C：4-(1-(叔丁氧基羰基)六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(2H)-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸乙酯
在105℃在氮气下搅拌4-溴-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸乙酯(200mg，0.567mmol，I-80)、八氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(141mg，0.624mmol)、碳酸铯(425mg，1.305mmol)、BINAP(17.66mg，0.028mmol)和Pd2(dba)3(26.0mg，0.028mmol)于脱气1,4-二噁烷(3mL)中的混合物2天。混合物用EtOAc(15mL)稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液(2×15mL)和1.0M HCl水溶液(15mL)洗涤。乙酸乙酯层经硫酸钠干燥且浓缩。对粗产物进行ISCO快速色谱(硅胶/己烷-EtOAc 100:0至50:50梯度)，得到呈淡棕色胶状物的4-(1-(叔丁氧基羰基)六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(2H)-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸乙酯(198mg，0.358mmol，63.1％产率)。LCMS：1.36分钟，M+H 498。
中间体126D：6-(1-氨甲酰基-3-氯-9H-咔唑-4-基)八氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯
在60℃搅拌4-(1-(叔丁氧基羰基)六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(2H)-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸乙酯(198mg，0.398mmol)和2.0M氢氧化钠(1.988mL，3.98mmol)于MeOH(15mL)中的混合物3小时。将混合物倒入1.0N HCl水溶液(60mL)中且用EtOAc(30mL)萃取。乙酸乙酯层经硫酸钠干燥且浓缩，得到4-(1-(叔丁氧基羰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸。LCMS：1.17分钟，M+H 470。
在室温搅拌4-(1-(叔丁氧基羰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酸、氯化铵(213mg，3.98mmol)、BOP(176mg，0.398mmol)和TEA(0.277mL，1.988mmol)于DMF(5.0mL)中的混合物2小时。混合物用EtOAc(15mL)稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液(2×15mL)和1.0M HCl水溶液(15mL)洗涤。乙酸乙酯层经硫酸钠干燥且浓缩。对粗产物进行ISCO快速色谱(硅胶/己烷-EtOAc 100:0至0:100梯度)，得到呈白色固体的6-(1-氨甲酰基-3-氯-9H-咔唑-4-基)八氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(125mg，0.240mmol，60.3％产率)。LCMS：1.13分钟，M+H 469。
中间体126E：3-氯-4-(八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
向6-(1-氨甲酰基-3-氯-9H-咔唑-4-基)八氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(75mg，0.160mmol)于DCM(1.0mL)中的溶液中添加TFA(1.0mL)。在室温搅拌混合物30分钟。浓缩混合物，得到3-氯-4-(八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺。
实施例126：
向含3-氯-4-(八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺、丁-2-炔酸(13.45mg，0.160mmol)和BOP(70.7mg，0.160mmol)的DMF(3.0mL)中添加TEA(0.111mL，0.800mmol)。在室温搅拌混合物60分钟。混合物用EtOAc(15mL)稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液(2×15mL)和1.0M HCl水溶液(15mL)洗涤。乙酸乙酯层经硫酸钠干燥且浓缩。对粗产物进行ISCO快速色谱(硅胶/己烷-EtOAc 100:0至0:100梯度)，得到呈白色固体的实施例126(65mg，0.142mmol，89％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.51(d,J＝3.7Hz,1H),8.33-8.14(m,2H),8.11-8.03(m,1H),7.75(d,J＝8.1Hz,1H),7.62-7.49(m,1H),7.44(s,1H),7.25(t,J＝7.5Hz,1H),5.49-5.29(m,1H),4.40-4.21(m,1H),3.67-3.39(m,2H),3.34-3.08(m,2H),2.95-2.64(m,1H),2.45-2.33(m,1H),2.15-1.78(m,6H),1.62-1.31(m,1H)。LCMS：0.94分钟，M+H 435。
实施例127和128
4-((4aS,7aS)-1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺和4-((4aR,7aR)-1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺(单一异构体)
通过手性超临界流体色谱(OJ(3×25cm，5μm)；流动相：含有0.1％NH4OH的CO2-MeOH(67/33)，160mL/min；100巴，40℃；样品配制物：85mg于6mL含有0.1％NH4OH的MeOH中)来分离4-(1-(丁-2-炔酰基)六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(2H)-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺(65mg)。自柱洗脱的第一峰提供呈白色粉末的4-(1-(丁-2-炔酰基)六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(2H)-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺的一种对映异构体(18mg)。自柱洗脱的第二峰提供呈白色粉末的4-(1-(丁-2-炔酰基)六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(2H)-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺的第二对映异构体(17mg)。
实施例129
3-氟-4-((2-(丙-1-炔-1-基)吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺
中间体129A：4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸乙酯
根据中间体126B中的一般程序，使用制备中间体8中的酸中间体(4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸)制备中间体129A。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ10.04(br.s.,1H),8.76(d,J＝7.9Hz,1H),7.85(d,J＝9.3Hz,1H),7.64-7.48(m,2H),7.35(ddd,J＝8.1,6.5,1.7Hz,1H),4.51(q,J＝7.1Hz,2H),1.50(t,J＝7.2Hz,3H)。
中间体129B：3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-9H-咔唑-1-甲酸乙酯
在85℃搅拌4-溴-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸乙酯(700mg，2.082mmol)、双(频哪醇合)二硼(555mg，2.186mmol)、乙酸钾(613mg，6.25mmol)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(85mg，0.104mmol)于二噁烷(10mL)中的混合物18小时。混合物用EtOAc(15mL)稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液(2×15mL)和1.0M HCl水溶液(15mL)洗涤。乙酸乙酯层经硫酸钠干燥且浓缩。对粗产物进行ISCO快速色谱(硅胶/己烷-EtOAc 100:0至0:100梯度)，得到呈灰白色固体的3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-9H-咔唑-1-甲酸乙酯(522mg，1.226mmol，58.9％产率)。LCMS：1.18分钟，M+H 384。
中间体129C：4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸乙酯
向3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-9H-咔唑-1-甲酸乙酯(100mg，0.261mmol)、1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(8.50mg，0.013mmol)和2.0M磷酸三钾(0.391mL，0.783mmol)于THF(1.0mL)中的溶液中添加2-氯-4-(氯甲基)吡啶(42.3mg，0.261mmol)，于密封小瓶中在室温在氮气下搅拌混合物18小时。混合物用EtOAc(15mL)稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)洗涤。乙酸乙酯层经硫酸钠干燥且浓缩。对粗产物进行ISCO快速色谱(硅胶/己烷-EtOAc 100:0至60:40梯度)，得到呈白色固体的4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸乙酯(75mg，0.186mmol，71.3％产率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ10.12(br.s.,1H),8.25(dd,J＝5.1,0.5Hz,1H),7.97-7.82(m,2H),7.62-7.45(m,2H),7.26-7.17(m,2H),7.11(dd,J＝5.1,1.0Hz,1H),4.68(s,2H),4.53(q,J＝7.1Hz,2H),1.56-1.45(m,3H)。LCMS：1.14分钟，M+H 383。
中间体129D：4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺
在60℃搅拌4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸乙酯(75mg，0.196mmol)和氢氧化锂(0.392mL，0.392mmol)于THF(2.0mL)中的混合物18小时。将1.0NHCl水溶液(0.4mL)添加至混合物中，且浓缩混合物，得到4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸。LCMS 5：0.94分钟，M+H355。
在室温搅拌4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酸、氯化铵(52.4mg，0.980mmol)、BOP(87mg，0.196mmol)和TEA(0.137mL，0.980mmol)于DMF(2.0mL)中的混合物30分钟。混合物用EtOAc(15mL)稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液(2×15mL)和1.0M HCl水溶液(15mL)洗涤。乙酸乙酯层经硫酸钠干燥且浓缩。对粗产物进行ISCO快速色谱(硅胶/己烷-EtOAc 100:0至0:100梯度)，得到呈灰白色固体的4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(67mg，0.170mmol，87％产率)。LCMS：0.88分钟，M+H 354。
实施例129：
于密封小瓶中在90℃在氮气下搅拌4-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(20mg，0.057mmol)、三丁基(1-丙炔基)锡(55.8mg，0.170mmol)、氯化锂(7.19mg，0.170mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(3.27mg，2.83μmol)于DMF(1.0mL)中的混合物18小时。混合物用EtOAc(15mL)稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液(2×15mL)洗涤。乙酸乙酯层经硫酸钠干燥且浓缩。通过制备型HPLC(柱：XBridge C18，19×200mm，5-μm粒子；流动相A：含有10-mM乙酸铵的5:95乙腈:水；流动相B：含有10-mM乙酸铵的95:5乙腈:水；梯度：历经25分钟25-55％B，随后在55％B保持2分钟；流速：20mL/min)纯化粗产物，得到3-氟-4-((2-(丙-1-炔-1-基)吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(14.1mg，0.037mmol，66.3％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.55(s,1H),8.36(d,J＝5.0Hz,1H),8.25(br.s.,1H),8.00-7.88(m,2H),7.77(d,J＝8.1Hz,1H),7.62(br.s.,1H),7.40(t,J＝7.6Hz,1H),7.24-7.04(m,3H),4.65(br.s.,2H),1.97(s,3H)。LCMS：0.71分钟，M+H 358。
实施例130
5-((S)-3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(外消旋)
中间体130A：5-溴-8-氰基-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯
经由注射器向在室温的5-溴-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(1.00g，2.61mmol)于四氢呋喃(6mL)中的均匀溶液中逐滴添加磷酰氯(0.485mL，5.22mmol)。在室温搅拌反应混合物5天。在减压下浓缩不均匀反应混合物。用乙酸乙酯稀释残余物且通过真空过滤收集所得固体，用乙酸乙酯洗涤且干燥，得到呈黄色固体的5-溴-8-氰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(0.699g，1.91mmol，73％产率)。产物的UPLC保留时间＝1.40分钟-柱：Kinetex C182.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝365.2和367.1。
中间体130B：5-((S)-3-((叔丁氧基羰基)氨基)哌啶-1-基)-8-氰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯
用真空和氮气使5-溴-8-氰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(0.699g，1.91mmol)、(S)-哌啶-3-基氨基甲酸叔丁酯(0.460g，2.30mmol)和(S)-哌啶-3-基氨基甲酸叔丁酯(0.460g，2.30mmol)于二噁烷(10mL)中的混合物脱气(3次)。添加BINAP(0.060g，0.096mmol)，继而添加Pd2(dba)3(0.088g，0.096mmol)，且使混合物脱气(3次)。将反应混合物浸没于103℃的油浴中且搅拌约24小时。在冷却至室温之后，反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤且用盐水洗涤。收集有机层且依次用乙酸乙酯萃取水层(2次)。经合并的有机层经无水硫酸钠干燥且在减压下浓缩。通过ISCO快速色谱(40g柱；0％-100％乙酸乙酯/己烷)纯化残余物，得到呈淡黄色固体的5-((S)-3-((叔丁氧基羰基)氨基)哌啶-1-基)-8-氰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(0.718g，1.48mmol，77％产率)。产物的UPLC保留时间＝1.48分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝485.5。
中间体130C：5-((S)-3-氨基哌啶-1-基)-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸
将5-((S)-3-(((苄氧基)羰基)氨基)哌啶-1-基)-8-氰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸乙酯(0.699g，1.348mmol)与90％硫酸水溶液(9.98ml，168mmol)的混合物浸没于60℃的油浴中且搅拌60分钟。向冷却至0℃的经搅拌的反应混合物中逐滴添加氢氧化钠水溶液(10M)(33.7ml，337mmol)。添加额外几滴的氢氧化钠溶液直至pH为约9为止。随后用盐酸使pH降低至约5，且在减压下过滤混悬液。用水洗涤固体且充分干燥，得到呈淡棕色固体的5-((S)-3-氨基哌啶-1-基)-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸(0.400g，1.07mmol，79％产率)。产物的UPLC保留时间＝0.723分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝375.2。
中间体130D：5-((S)-3-氨基哌啶-1-基)-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸甲酯
向在室温的5-((S)-3-氨基哌啶-1-基)-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸(0.380g，1.02mmol)于甲醇(2.5mL)与二氯甲烷(2.5mL)的混合物中的溶液中逐滴添加三甲基硅烷基重氮甲烷(2M于乙醚中；0.558mL，1.12mmol)，同时通过HPLC进行监测，直至反应几乎完成为止。在减压下移除溶剂，且反应混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，用盐水洗涤且经无水硫酸钠干燥。收集在处理期间形成的沉淀物且发现其为酸性起始物质。有机层经无水硫酸钠干燥且浓缩，得到呈淡黄色固体的5-((S)-3-氨基哌啶-1-基)-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸甲酯(0.269g，0.693mmol，68％产率)。产物的UPLC保留时间＝0.753分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝389.2。
中间体130E：5-((S)-3-氨基哌啶-1-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
历经30分钟向在-78℃的5-((S)-3-氨基哌啶-1-基)-8-氨甲酰基-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2-甲酸甲酯(0.269g，0.693mmol)于四氢呋喃(5mL)中的溶液中逐滴添加甲基锂(1.6M于乙醚中)(3当量；1.3mL，78mmol)。在-78℃搅拌反应混合物45分钟。历经25分钟添加额外3当量的甲基锂(1.3mL)，且在-78℃搅拌反应混合物额外1.5小时。在-78℃用饱和氯化铵水溶液淬灭反应混合物，温热至室温。混合物用乙酸乙酯稀释且用水洗涤，产生固体。通过真空过滤收集固体，用水洗涤且充分干燥。滤液用乙酸乙酯萃取，用水洗涤且用盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥且在减压下浓缩。组合两种回收到的产物，得到呈淡黄色固体的5-((S)-3-氨基哌啶-1-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(0.105g，0.270mmol，39.0％产率)。产物的UPLC保留时间＝0.745分钟-柱：SpeedROD 4.6×50mm(4分钟)；溶剂A＝10％MeOH、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeOH、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝389.2。
实施例130：
在室温搅拌5-((S)-3-氨基哌啶-1-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(0.079g，0.203mmol)、丁-2-炔酸(0.021g，0.244mmol)、HATU(0.108g，0.285mmol)和许尼希碱(Hunig's Base)(0.124mL，0.712mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)中的混合物40分钟。混合物用乙酸乙酯稀释，用10％氯化锂水溶液洗涤(2次)且用盐水洗涤。收集有机层且依次用乙酸乙酯萃取水层(2次)。经合并的有机层经无水硫酸钠干燥且浓缩。通过ISCO快速色谱(4g柱；0％-5％甲醇/二氯甲烷)纯化得到呈淡黄色固体的产物。用甲醇研磨化合物，伴随超声处理且干燥，得到呈灰白色固体的5-((S)-3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(0.0072g，0.015mmol，7.2％产率)。产物的UPLC保留时间＝0.965分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝455.4。
实施例131和132
5-((S)-3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(单一异构体)
通过反相制备型HPLC纯化来自实施例130的滤液，得到两种纯手性异构体：
呈白色固体的实施例131(非对映异构体1)。产物的UPLC保留时间＝0.967分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝455.3。1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.61(s,1H),8.51(br.s.,1H),7.90(br.s.,1H),7.42-7.36(m,1H),7.32(br.s.,1H),4.25-4.21(m,1H),3.86-3.77(m,1H),3.25-3.11(m,2H),3.06(d,J＝11.3Hz,1H),2.88(dd,J＝16.9,4.5Hz,3H),2.68-2.58(m,1H),2.46-2.39(m,1H),2.09(d,J＝7.9Hz,1H),1.94(s,3H),1.85(br.s.,1H),1.78-1.60(m,3H),1.36-1.26(m,2H)和1.13(d,J＝3.8Hz,6H)。
呈白色固体的实施例132(非对映异构体2)。产物的UPLC保留时间＝0.973分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝455.3。1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.60(s,1H),8.46(br.s.,1H),7.91(br.s.,1H),7.42-7.37(m,1H),7.32(br.s.,1H),4.23(s,1H),3.95-3.86(m,1H),3.19-3.11(m,2H),3.02(br.s.,2H),2.87(dd,J＝16.8,4.7Hz,1H),2.71(d,J＝10.7Hz,2H),2.46-2.38(m,1H),2.13-2.05(m,2H),1.93(s,3H),1.86(br.s.,1H),1.73(br.s.,1H),1.70-1.58(m,2H),1.34-1.25(m,1H)和1.13(s,6H)。
表7
通过上文所描述的程序或与本领域中已知的那些程序类似的程序，使用适当的起始物质制备的额外实施例示于表8中。
表8
实施例203
5-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
中间体203A：5-(8-氨甲酰基-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯
用真空和氮气使5-溴-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(纯手性对映异构体1，参见美国8,084,620，实施例73-1，0.177g，0.504mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.217g，0.605mmol)、磷酸三钾(2M于水中)(0.76mL，1.512mmol)和四氢呋喃(3mL)的混合物脱气(3次)。添加1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(0.016g，0.025mmol)且使反应混合物脱气(2次)。在室温搅拌反应混合物过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，用盐水洗涤且经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，继而通过ISCO快速色谱(12g柱；0％-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到呈淡黄色固体的5-(8-氨甲酰基-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.208g，0.409mmol，81％产率)。产物的UPLC保留时间＝1.22分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝504.4。
中间体203B：2-(2-羟基丙-2-基)-5-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
在室温搅拌5-(8-氨甲酰基-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.208g，0.413mmol)与三氟乙酸(3mL)的混合物45分钟。在减压下浓缩反应混合物，且残余物用乙酸乙酯稀释，且用1.5M磷酸氢二钾水溶液洗涤(2次)。收集有机层且依次用乙酸乙酯萃取水层(2次)。经合并的有机层经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩得到呈淡黄色固体的2-(2-羟基丙-2-基)-5-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(0.163g，0.404mmol，98％产率)。产物的UPLC保留时间＝0.777分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝404.3。
实施例203：
向在室温的2-(2-羟基丙-2-基)-5-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(0.163g，0.404mmol)和许尼希碱(0.282mL，1.62mmol)于四氢呋喃(3.0mL)中的混合物中添加丙烯酰氯(0.033mL，0.404mmol)。搅拌反应混合物20分钟。反应混合物用二氯甲烷稀释，用水洗涤且经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，继而通过ISCO快速色谱(12g柱；梯度：0％-5％甲醇/二氯甲烷)纯化，得到呈白色固体的5-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(0.055g，0.118mmol，29％产率)。产物的UPLC保留时间＝0.958分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝458.3。1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.75(s,1H),8.01(br.s.,1H),7.59(dd,J＝7.5,4.7Hz,1H),7.32(br.s.,1H),7.29-7.22(m,2H),7.08(dd,J＝5.5,2.7Hz,1H),6.93(dd,J＝16.6,10.5Hz,0.4H),6.79(dd,J＝16.6,10.4Hz,0.6H),6.75-6.68(m,1H),6.13(dd,J＝16.6,2.1Hz,1H),5.75-5.64(m,1H),4.92-4.81(m,1H),4.81-4.67(m,1H),4.15(s,1H),3.79-3.68(m,1H),3.67-3.52(m,1H),2.88(d,J＝16.5Hz,1H),2.47-2.23(m,3H),1.93-1.69(m,3H),1.61-1.50(m,1H)和1.07(s,6H)。
实施例204
5-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
中间体204A：5-(8-氨甲酰基-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯
用真空和氮气使5-溴-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(纯手性对映异构体2，参见U.S.8,084,620，实施例73-1)(0.185g，0.527mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.227g，0.632mmol)、磷酸三钾(2M于水中)(0.79mL，1.58mmol)和四氢呋喃(3mL)的混合物脱气(3次)。添加1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(0.017g，0.026mmol)且使反应混合物脱气(2次)。在室温搅拌反应混合物过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，用盐水洗涤且经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，继而通过ISCO快速色谱(12g柱；0％-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到呈淡黄色固体的-5-(8-氨甲酰基-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.250g，0.491mmol，93％产率)。产物的UPLC保留时间＝1.22分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝504.4。
中间体204B：2-(2-羟基丙-2-基)-5-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺
在室温搅拌5-(8-氨甲酰基-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-5-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.250g，0.496mmol)与三氟乙酸(3mL)的混合物45分钟。在减压下浓缩反应混合物，且残余物用乙酸乙酯稀释，且用1.5M磷酸氢二钾水溶液洗涤(2次)。收集有机层且依次用乙酸乙酯萃取水层(2次)。经合并的有机层经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩得到呈灰白色固体的2-(2-羟基丙-2-基)-5-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(0.180g，0.446mmol，90％产率)。产物的UPLC保留时间＝0.777分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝404.3。
实施例204：
向在室温的2-(2-羟基丙-2-基)-5-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(0.180g，0.446mmol)和许尼希碱(0.312mL，1.784mmol)于四氢呋喃(3.0mL)中的混合物中添加丙烯酰氯(0.036mL，0.446mmol)。搅拌反应混合物20分钟。HPLC和LCMS指示反应完成。反应混合物用二氯甲烷稀释，用水洗涤且经无水硫酸钠干燥。在减压下浓缩，继而通过ISCO快速色谱(12g柱；梯度：0％-5％甲醇/二氯甲烷)纯化，得到呈白色固体的5-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(0.078g，0.167mmol，37.5％产率)。产物的UPLC保留时间＝0.962分钟-柱：Kinetex C18 2.1×50mm(1.5分钟梯度)；溶剂A＝10％MeCN、90％H2O、0.1％TFA；溶剂B＝90％MeCN、10％H2O、0.1％TFA。LC/MS M+1＝458.4。1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.75(s,1H),8.01(br.s.,1H),7.59(dd,J＝7.5,4.7Hz,1H),7.32(br.s.,1H),7.29-7.22(m,2H),7.08(dd,J＝5.5,2.7Hz,1H),6.93(dd,J＝16.6,10.5Hz,0.4H),6.79(dd,J＝16.6,10.4Hz,0.6H),6.75-6.68(m,1H),6.13(dd,J＝16.6,2.1Hz,1H),5.75-5.64(m,1H),4.92-4.81(m,1H),4.81-4.67(m,1H),4.15(s,1H),3.79-3.68(m,1H),3.67-3.52(m,1H),2.88(d,J＝16.5Hz,1H),2.47-2.23(m,3H),1.93-1.69(m,3H),1.61-1.50(m,1H)和1.07(s,6H)。
生物测定
本发明化合物的药理学特性可通过多种生物测定确证。已对本发明化合物进行下文所例示的生物测定。
人重组Btk酶分析
向V底384孔板中添加测试化合物、人重组Btk(1nM，Invitrogen Corporation)、荧光化肽(1.5μM)、ATP(20μM)和测定缓冲液(20mM HEPES pH 7.4，10mM MgCl2，0.015％Brij35表面活性剂和4mM DTT于1.6％DMSO中)，其最终体积为30μL。在室温培育60分钟后，通过将45μL 35mM EDTA添加至各样品中来终止反应。在Caliper3000(Caliper,Hopkinton,MA)上通过电泳分离荧光底物和磷酸化产物来对反应混合物进行分析。通过与100％抑制的无酶对照反应和0％抑制的无抑制剂对照进行比较来计算抑制数据。产生剂量响应曲线以确定抑制50％激酶活性所需的浓度(IC50)。以10mM将化合物溶解于DMSO中且在11种浓度下进行评价。
Ramos FLIPR测定
将于含有0.1％BSA(Sigma A8577)的RPMI minus酚红(Invitrogen 11835-030)和50mM HEPES(Invitrogen 15630-130)中密度为2×106个细胞/mL的Ramos RA1 B细胞(ATCCCRL-1596)添加至一半体积的钙装载缓冲液(用于丙磺舒(probenecid)敏感性测定的BD整体试剂盒，640177号)中，且在室温在暗处培育1小时。使装载染料的细胞成球粒(BeckmannGS-CKR，1200rpm，室温，5分钟)且在室温再混悬于具有50mM HEPES和10％FBS的RPMI minus酚红中，达至1×106个细胞/mL的密度。将150μL等分试样(150,000个细胞/孔)接种至96孔聚-D-赖氨酸涂布的测定板(BD 35 4640)中，且短暂离心(Beckmann GS-CKR 800rpm，5分钟，无制动)。随后，将于0.4％DMSO/RPMI minus酚红+50mM HEPES+10％FBS中的50μL化合物稀释液添加至孔中且在室温在暗处培育该板1小时。如上所述短暂离心测定板，之后测量钙水平。使用FLIPR1(分子装置)，通过添加山羊抗-人IgM(Invitrogen AHI0601)至2.5μg/mL来刺激细胞。测量到细胞内钙浓度变化持续180秒，且相对于在仅存在刺激下可见的峰钙水平确定抑制百分比。Ramos测定测量化合物移动通过细胞膜进入细胞内部的能力。较低IC50值指示较大的移动进入细胞内部的能力。
表9展示获自人重组Btk酶测定中实施例1-66、69、72-100和112-202的评价的BtkIC50值及获自Ramos FLIPR测定中实施例1-12、14-65、69、72、74-90、92-96、98-100、112-126、128-129、131-140、144、155-156、159-170、172、174-177、179-183和186-187的评价的Ramos IC50值。
表9
表10展示来自人重组Btk酶测定中比较实施例101至111的评价的Btk IC50值及获自Ramos FLIPR测定的比较实施例101至105和110的评估的Ramos IC50值。
表10
将如表9中测试实施例所例示的式(IIa)化合物与比较实施例101至111进行比较，且发现其尤其有利。如表9和10中所示，于所报道的测试中，本发明的实施例1-12、14-65、69、72、74-78、87、89-90、92、95-96和98-100展示改善的Btk抑制活性和进入细胞内部的改善穿透的组合的惊人优势，分别如Btk IC50值和Ramos IC50值所表征。实施例1-12、14-65、69、72、74-78、87、89-90、92、95-96和98-100具有所报道的Btk测定中小于2nM的Btk IC50值及Ramos FLIPR测定中小于450nM的Ramos IC50值的组合。相比之下，发现比较实施例101至102和104至111具有大于4.0nM的Btk IC50值。发现比较实施例103具有1.4的Btk IC50值和570nM的Ramos IC50值的组合。
人全血Btk不活化测定
在各种浓度将含有作为抗凝剂的ACD-A的人全血(0.2mL)与测试化合物一起培育60分钟。通过添加含有40nM实施例88的化合物的裂解缓冲液(0.2mL，Cell Signaling，目录号9803)来制备裂解物。在室温振荡1小时后，将裂解物转移至96孔涂布链霉亲和素的板(Pierce，目录号15120)中，培育另外1小时且用含有0.05％Tween 20的PBS洗涤3次。添加小鼠抗-Btk抗体(BD Biosciences，目录号611116)，继而培育另外1小时。再次洗涤板，随后添加辣根过氧化酶(HRP)联结的山羊抗-小鼠IgG(Invitrogen，目录号G21040)。培育板另外1小时且如上文所描述进行洗涤。将3,3′,5,5′-四甲基联苯胺添加至板中且15分钟后通过添加H2SO4终止反应。测量吸光度，且相对于不具有测试化合物的对照孔，计算如通过可用以与实施例88的化合物络合且捕获于涂布链霉亲和素的板上的Btk量所测量的不活化百分比。
获自人全血不活化测定中实施例5的评价的结果示于表11中。
表11
人重组Btk解离透析测定
在浓度为Btk抑制的IC50的25倍或200nM(无论哪个更大)，将测试化合物与人重组Btk(100nM)一起培育1.5小时。于测定缓冲液(20mM HEPES(pH 7.5)、10mM MgCl2、2mM二硫苏糖醇、50μg/mL牛血清蛋白和0.015％Brij 35)中进行培育。随后透析反应混合物两次持续6小时，每次相对于1L测定缓冲液。随后将经透析的反应混合物(0.5μL)稀释成具有ATP(2mM)和底物肽(5μM Src-tide，AnaSpec)的溶液(100μL)以使得最终Btk浓度为1nM(连同仍结合的任何抑制剂)。于基质聚丙烯384孔板中进行测定。在Caliper上通过底物和磷酸化产物的电泳分离(压力-1.2psi，下游电压-500V，上游电压-2300V)监测反应进展曲线。在线性相位上测量反应速度，且在2小时时通过比较磷酸化肽产物部分与不含有实施例抑制剂的经DMSO处理的Btk对照反应来评估Btk活性的恢复百分比。不具有Btk的对照反应还用于测量背景信号。可逆的抑制剂将展示Btk活性的几乎完整的恢复，而不可逆抑制剂将展示Btk活性的较少恢复或无恢复。
表12
获自人重组Btk解离透析测定中比较实施例101-110及实施例18和37的评价的结果示于表12中。这些结果展示实施例18及37以小于5％的Btk抑制恢复结合至酶，指示这些化合物与人重组Btk形成共价键且与人重组Btk的结合为不可逆的。相比之下，发现比较实施例101至110具有显著的(≥75％)Btk抑制活性的恢复，指示与人重组Btk的结合为可逆的。

Claims (12)

1.一种式(I)化合物或其盐，
其中：
两条虚线表示两个单键或两个双键；且R1b和R2b仅在所述两条虚线为两个单键时才存在；
Q为：
(i)
(ii)
(iii) 或
(iv)
R1a为：
(i)H、-CN、-CF3、-CH3、-CR8aR8bOH、-CR8aR8bCR8aR8bOH、-CH(OH)CH2OH、-NHR9、-C(O)NR10aR10b、-C(O)(吗啉基)、-C(O)(哌嗪基)或-C(O)(甲基哌嗪基)；或
(ii)
R1b，如果存在，为H或-CH3，条件是如果R1a为H，则R1b也为H；
R2a为H、F或Cl，条件是如果R1a不为H，则R2a为H；
R2b，如果存在，与R2a相同；
R3为H、F或Cl；
R4为H、F、Cl或-CH3；
R5a为H、F、Cl、-OCH3或-OCF3；
R5b为H、F、Cl、-OCH3或-OCF3；
R6a为H、-CH3或环丙基；
R6c为H、-CH3或环丙基；
R7a为-C(O)CH＝CH(R11)、-C(O)C≡CR12或-S(O)2CH＝CH2；
R7b为-C(O)CH＝CH2；
R7c为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR12；
R7d为-CN、-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR13；
R7e为-CH＝CH2或-C≡CR13；
R7f为经R7c取代的吡咯烷基、-CH＝CHC(O)(吗啉基)或-CH＝CHC(O)(吡咯烷基)；
R8a为H或-CH3；
R8b为H或-CH3；
R9为C1-4烷基；
R10a和R10b独立地为H或-CH3；
R11为H或-CH3；
R12为H、C1-4烷基或环丙基；且
R13为H、C1-4烷基或环丙基；
条件是：
(a)如果Q为且R7d为-CN或-C(O)CH＝CH2，则R3为H；且
(b)如果虚线表示两个单键，则：
(i)Q不为
(ii)R11，如果存在，为H；且
(iii)式(I)化合物不为：
2.权利要求1的化合物或其盐，其中：
Q为：
R1a为：
(i)H、-CN、-CF3、-CH3、-CR8aR8bOH、-CH(OH)CH2OH、-NHR9或-C(O)NR10aR10b；或
(ii)
R1b，如果存在，为H或-CH3，条件是如果R1a为H，则R1b也为H；
R2a为H或F，条件是如果R1a不为H，则R2a为H；
R2b，如果存在，与R2a相同；
R3为H、F或Cl；
R4为H、F、Cl或-CH3；
R5a为H、F、Cl、-OCH3或-OCF3；
R5b为H、F、Cl、-OCH3或-OCF3；
R6a为H、-CH3或环丙基；
R6c为H、-CH3或环丙基；
R7a为-C(O)CH＝CH(R11)、-C(O)C≡CR12或-S(O)2CH＝CH2；
R7b为-C(O)CH＝CH2；
R7c为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR12；
R7d为-C(O)CH＝CH2或-C(O)C≡CR13；
R8a为H或-CH3；
R8b为H或-CH3；
R9为C1-4烷基；
R10a和R10b独立地为H或-CH3；
R11为H或-CH3；
R12为H、C1-4烷基或环丙基；且
R13为H、C1-4烷基或环丙基；
条件是如果虚线表示两个单键，则：
(i)Q不为
(ii)R11，如果存在，为H；且
(iii)式(I)化合物不为：
3.权利要求1的化合物或其盐，其中：
R1a为H、-CN、-CF3、-CH3、-CR8aR8bOH、-CH(OH)CH2OH、-NHR9或-C(O)NR10aR10b。
4.权利要求1的化合物或其盐，其中：
R6a为H或-CH3；
R6c为H或-CH3；
R7a为-C(O)CH＝CH(R11)或-S(O)2CH＝CH2；且
R13为H。
5.权利要求1的化合物或其盐，其具有式(Ia)结构：
6.权利要求1的化合物或其盐，其具有式(Ib)结构：
7.权利要求1的化合物或其盐，其中：
Q为
8.权利要求1的化合物或其盐，其中：
Q为
9.权利要求1的化合物或其盐，其中所述化合物为：(RS)-5-(3-丙烯酰氨基苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(1)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(2)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2,2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(3)；4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(4)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(5)；(RS)-4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(6)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2-(羟基甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(7)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2-(羟基甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(8)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺，非对映异构体的混合物(9)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(10)；(RS)-(E)-4-(3-(丁-2-烯酰氨基)-2-甲基苯基)-3-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(11)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(12)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(13)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺(14)；4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-7-氰基-9H-咔唑-1-甲酰胺(15)；(RS)-4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-7-(1,2-二羟乙基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(16)；4-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-7-(异丙氨基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(17)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-N2,N2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺(18)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(19)；(RS)-2-(羟基甲基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(20)；(RS)-N2,N2-二甲基-5-(2-甲基-3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺(21)；(2R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(22)；(2R)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(23)；(2R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一对映异构体(24)；(2R)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一对映异构体(25)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(26)；7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(27)；7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(28)；(RS)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(29)；(RS)-3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(30)；3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(31)；7-(2-羟基丙-2-基)-4-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(32)；7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(33)；3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(34)；(RS)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(35)；(R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(36)；7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(37)；3-氟-7-(2-羟基丙-2-基)-4-(3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(38)；(R)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(39)；(S)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(40)；(R)-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(41)；(RS)-5-(2-氟-3-(N-甲基丙烯酰氨基)苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(42)；(R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(43)；(2R)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(44)；(RS)-5-(2-氟-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(45)；(RS)-5-(2-氯-3-(N-甲基乙烯基磺酰氨基)苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(46)；(2R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(47)；5-(3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(48)；5-(2-甲基-3-(乙烯基磺酰氨基)苯基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(49)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-4-甲氧基苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(50)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-4-(三氟甲氧基)苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(51)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-4-氟苯基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(52)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(53)；(RS)-5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(54)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一外消旋非对映异构体(55和56)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-N2,N2-二甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-2,8-二甲酰胺，单一外消旋非对映异构体(57和58)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一外消旋非对映异构体(59和60)；5-(3-丙烯酰氨基-2-甲基苯基)-6-氯-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一外消旋非对映异构体(61和62)；(S)-5-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(63)；(E)-4-(3-(丁-2-烯酰氨基)-2-甲基苯基)-7-(2-羟基丙-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(64)；5-(((S)-1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(65)；(S)-5-(3-丙烯酰氨基哌啶-1-基)-3,3,6-三氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(66)；(S)-4-(3-丙烯酰氨基哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(69)；5-(((S)-1-丙炔酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(RS)-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，非对映异构体的混合物(72)；(S)-5-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3,3,6-三氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(73)；(S)-3-氟-4-(3-(N-甲基丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(74)；(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(75)；(S)-4-(3-(3-环丙基丙酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(76)；5-(((S)-1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氨基)-2-(三氟甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺，单一非对映异构体(77和78)；3-氟-4-((6-乙烯基吡啶-3-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(87)；(RS)-4-(2-丙烯酰基异吲哚啉-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(89)；4-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(90)；4-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(91)；4-(1-丙烯酰基吲哚啉-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(92)；4-(1-丙烯酰基吲哚啉-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(95)；4-(1-丙烯酰基-1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(96)；(RS)-4-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(97)；4-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺，单一对映异构体(98和99)；3-氟-4-((2-乙烯基吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(100)；4-(1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(112)；4-(1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(113和114)；顺式-4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(115)；顺式-4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(116和117)；(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(118)；顺式-4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(119)；顺式-4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(120和121)；3-氟-4-((2-乙烯基嘧啶-5-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(122)；顺式-4-(1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(123)；顺式-4-(1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(124和125)；4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺(126)；4-((4aS,7aS)-1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺和4-((4aR,7aR)-1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺(127和128)；3-氟-4-((2-(丙-1-炔-1-基)吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(129)；5-((S)-3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(130、131和132)；4-(2-丙烯酰基异吲哚啉-5-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(133)；4-(1-丙烯酰基-2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(134)；5-(1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)-6-氟-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(135)；(R)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(136)；4-(1-(丁-2-炔酰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(137)；4-(1-丙烯酰基-1,4,5,6-四氢吡啶-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(138)；4-(7-(丁-2-炔酰基)-2,7-二氮螺[4.4]壬-2-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(139)；4-(7-丙烯酰基-2,7-二氮螺[4.4]壬-2-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(140)；4-(1-丙烯酰基八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(141)；4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(142)；4-(6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(143)；4-(6-(丁-2-炔酰基)-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(144)；4-(7-丙烯酰基八氢-2,7-二氮杂萘-2(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(145)；4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-3-氯-9H-咔唑-1-甲酰胺(146)；4-(1-(丁-2-炔酰基)吲哚啉-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(147)；4-(2-(丁-2-炔酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(148)；4-(2-(丁-2-炔酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(149)；4-(2-(丁-2-炔酰基)异吲哚啉-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(150)；4-(1-(丁-2-炔酰基)吲哚啉-6-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(151)；3-氟-4-((6-乙烯基吡嗪-2-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(152)；3-氯-4-((6-乙烯基吡嗪-2-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(153)；4-((6-乙炔基吡啶-3-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(154)；3-氯-4-((6-乙烯基吡啶-3-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(155)；4-((2-乙炔基吡啶-4-基)甲基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(156)；3-氟-4-((2-乙烯基噻唑-5-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(157)；3-氟-4-((6-(丙-1-炔-1-基)吡啶-3-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(158)；3-氟-4-((5-乙烯基吡嗪-2-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(159)；4-(1-丙烯酰基-1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(160)；4-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(161和162)；(S)-4-(3-丙烯酰氨基哌啶-1-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(163)；(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(164)；(R)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(165)；(S)-4-(3-(3-环丙基丙酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(166)；(S)-4-(3-氰氨基哌啶-1-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(167)；4-(2-丙烯酰基异吲哚啉-4-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(168)；4-(1-丙烯酰基吲哚啉-4-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(169)；4-(1-丙烯酰基吲哚啉-6-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(170)；4-(1-丙烯酰基-1-氮杂螺[4.4]壬-7-基)-3-氟-7-(三氟甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(171)；(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-7-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(172)；(S)-4-(3-(丁-2-炔酰氨基)哌啶-1-基)-3-氟-N7,N7-二甲基-9H-咔唑-1,7-二甲酰胺(173)；3-氟-N7,N7-二甲基-4-(2-乙烯基吡啶-4-基)-9H-咔唑-1,7-二甲酰胺(174)；(S)-4-((1-氰基吡咯烷-3-基)氨基)-3-氟-N7,N7-二甲基-9H-咔唑-1,7-二甲酰胺(175)；(S)-4-((1-氰基吡咯烷-3-基)氨基)-3-氟-7-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(176)；4-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-7-(吗啉-4-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(177)；4-(2-(丁-2-炔酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-7-(吗啉-4-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(178)；4-(2-氰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-7-(吗啉-4-羰基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(179)；4-(1-丙烯酰基吲哚啉-6-基)-3-氟-7-(2-羟乙基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(180)；4-(1-氰基吲哚啉-6-基)-3-氟-7-(2-羟乙基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(181)；4-(1-丙烯酰基八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-6-氯-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(182)；4-(1-(丁-2-炔酰基)八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基)-6-氯-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(183)；5-(1-丙烯酰基-1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(184)；(R)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-((6-乙烯基吡啶-3-基)甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(185)；5-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(186和187)；6-氟-2-(2-羟基丙-2-基)-5-((6-(丙-1-炔-1-基)吡啶-3-基)甲基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(188)；3-氟-4-(2-乙烯基吡啶-4-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(189)；4-(7-(丁-2-炔酰基)八氢-2,7-二氮杂萘-2(1H)-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(190)；4-(1-丙烯酰基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(191)；4-(1-(丁-2-炔酰基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(192)；3-氟-4-(5-(N-甲基丙烯酰氨基)吡啶-2-基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(193)；4-((1S,4S)-2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(194)；3-氟-4-((2-甲基-6-乙烯基吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(195)；3-氟-4-((2-甲基-6-乙烯基嘧啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(196)；3-氟-4-((4-甲基-6-乙烯基嘧啶-2-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(197)；3-氟-4-((3-氟-2-乙烯基吡啶-4-基)甲基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(198)；4-(3-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)苯基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(199)；4-(3-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)苯基)-3-氟-9H-咔唑-1-甲酰胺(200)；(E)-3-氟-4-(3-(3-吗啉基-3-氧代丙-1-烯-1-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(201)；(E)-3-氟-4-(3-(3-氧代-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-烯-1-基)苯基)-9H-咔唑-1-甲酰胺(202)；或5-(2-丙烯酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-8-甲酰胺(203和204)。
10.一种药物组合物，其包含权利要求2-8中任一项的化合物和药学上可接受的载体。
11.权利要求2-8中任一项的化合物在制备用于治疗自身免疫疾病或慢性炎性疾病的药物中的用途。
12.权利要求2-8中任一项的化合物，其用于治疗自身免疫疾病或慢性炎性疾病的疗法中。
CN201580057722.3A 2014-10-24 2015-10-23 咔唑衍生物 Active CN107074804B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462068234P 2014-10-24 2014-10-24
US62/068,234 2014-10-24
PCT/US2015/057077 WO2016065236A1 (en) 2014-10-24 2015-10-23 Carbazole derivatives

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107074804A true CN107074804A (zh) 2017-08-18
CN107074804B CN107074804B (zh) 2020-02-18

Family

ID=54427879

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201580057722.3A Active CN107074804B (zh) 2014-10-24 2015-10-23 咔唑衍生物

Country Status (33)

Country Link
US (3) US10266491B2 (zh)
EP (1) EP3209651B9 (zh)
JP (1) JP6599983B2 (zh)
KR (1) KR102514914B1 (zh)
CN (1) CN107074804B (zh)
AR (1) AR102427A1 (zh)
AU (1) AU2015335703B2 (zh)
BR (1) BR112017007545A2 (zh)
CA (1) CA2965523A1 (zh)
CL (1) CL2017001001A1 (zh)
CO (1) CO2017004517A2 (zh)
CY (1) CY1122549T1 (zh)
DK (1) DK3209651T3 (zh)
EA (1) EA032361B1 (zh)
ES (1) ES2761903T3 (zh)
HR (1) HRP20192197T2 (zh)
HU (1) HUE048321T2 (zh)
IL (1) IL251798B (zh)
LT (1) LT3209651T (zh)
MA (1) MA40302B1 (zh)
ME (1) ME03754B (zh)
MX (1) MX2017005255A (zh)
MY (1) MY190568A (zh)
PE (1) PE20171239A1 (zh)
PH (1) PH12017500724A1 (zh)
PL (1) PL3209651T3 (zh)
PT (1) PT3209651T (zh)
RS (1) RS59707B1 (zh)
SG (2) SG11201703187PA (zh)
SI (1) SI3209651T1 (zh)
TN (1) TN2017000158A1 (zh)
TW (1) TWI676618B (zh)
WO (1) WO2016065236A1 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109053542A (zh) * 2018-07-25 2018-12-21 南通大学 一种6-溴-5-羟基异吲哚啉-1-酮的化学合成方法
CN110862396A (zh) * 2019-11-29 2020-03-06 浙江工业大学 一种吡咯并[3,4-c]咔唑-1,3(2H，6H)-二酮类化合物的合成方法
CN115867346A (zh) * 2020-06-02 2023-03-28 Gb005股份有限公司 激酶抑制剂

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3848353A1 (en) 2014-10-24 2021-07-14 Takeda Pharmaceutical Company Limited Medicaments for the treatment of ophthalmic diseases
KR102519536B1 (ko) * 2014-10-24 2023-04-06 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 트리시클릭 회전장애이성질체 화합물
EP3481831B1 (en) * 2016-07-07 2023-09-06 Daewoong Pharmaceutical Co., Ltd. 4-aminopyrazolo[3,4-d]pyrimidinylazabicyclo derivatives and pharmaceutical composition comprising the same
GB201616627D0 (en) 2016-09-30 2016-11-16 Mission Therapeutics Limited Novel compounds
US10807951B2 (en) 2017-10-13 2020-10-20 The Regents Of The University Of California mTORC1 modulators
CN115232061B (zh) * 2021-09-18 2024-01-30 山西紫罗蓝新材料科技有限公司 一种3-硝基-9-乙基咔唑粗产物的提取工艺
WO2024010784A1 (en) * 2022-07-06 2024-01-11 Vividion Therapeutics, Inc. Pharmaceutical compositions comprising wrn helicase inhibitors
WO2024073587A1 (en) * 2022-09-29 2024-04-04 Vividion Therapeutics, Inc. N-acryloylmorpholine derivatives as keap1 modulators and uses thereof

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100160303A1 (en) * 2008-12-19 2010-06-24 Bristol-Myers Squibb Company Carbazole carboxamide compounds useful as kinase inhibitors
WO2011159857A1 (en) * 2010-06-16 2011-12-22 Bristol-Myers Squibb Company Carboline carboxamide compounds useful as kinase inhibitors

Family Cites Families (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4200750A (en) 1977-01-07 1980-04-29 Westwood Pharmaceuticals Inc. 4-Substituted imidazo [1,2-a]quinoxalines
CA2140722A1 (en) 1994-01-24 1995-07-25 Joseph A. Jakubowski Beta-carboline thromboxane synthase inhibitors
US7405295B2 (en) 2003-06-04 2008-07-29 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and method of inhibition of Bruton's tyrosine kinase by such compounds
US7393848B2 (en) 2003-06-30 2008-07-01 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain heterocyclic substituted imidazo[1,2-A]pyrazin-8-ylamines and methods of inhibition of Bruton's tyrosine kinase by such compounds
US20050288295A1 (en) 2003-11-11 2005-12-29 Currie Kevin S Certain imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines, method of making, and method of use thereof
US7713973B2 (en) 2004-10-15 2010-05-11 Takeda Pharmaceutical Company Limited Kinase inhibitors
SG159549A1 (en) 2004-11-10 2010-03-30 Cgi Pharmaceuticals Inc Imidazo[1,2-a] pyrazin-8-ylamines useful as modulators of kinase activity
KR101317119B1 (ko) 2004-12-17 2013-10-11 그렌마크 파머수티칼스 에스. 아. 염증성 및 알레르기성 장애의 치료에 유용한 신규한헤테로사이클릭 화합물
US7723336B2 (en) 2005-09-22 2010-05-25 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic compounds useful as kinase modulators
AU2006316322B2 (en) * 2005-11-22 2011-08-25 Merck Canada Inc. Tricyclic compounds useful as inhibitors of kinases
WO2008033858A2 (en) 2006-09-11 2008-03-20 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Kinase inhibitors, and methods of using and identifying kinase inhibitors
SG174810A1 (en) 2006-09-11 2011-10-28 Matrix Lab Ltd Dibenzofuran derivatives as inhibitors of pde-4 and pde-10
US20090062251A1 (en) 2007-08-17 2009-03-05 Astrazeneca Ab Novel Compounds 002
US7989465B2 (en) 2007-10-19 2011-08-02 Avila Therapeutics, Inc. 4,6-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
WO2009075830A1 (en) 2007-12-13 2009-06-18 Merck & Co., Inc. Inhibitors of janus kinases
US8318132B2 (en) 2008-02-14 2012-11-27 Siemens Medical Solutions Usa, Inc. Imaging agents for detecting neurological dysfunction
GB0809360D0 (en) 2008-05-22 2008-07-02 Isis Innovation Calcium modulation
TW201010997A (en) 2008-06-18 2010-03-16 Pfizer Ltd Nicotinamide derivatives
KR101892989B1 (ko) 2008-06-27 2018-08-30 셀젠 카르 엘엘씨 헤테로아릴 화합물 및 이의 용도
EP2151441A1 (en) 2008-08-06 2010-02-10 Julius-Maximilians-Universität Würzburg Beta-carbolin-derivates as substrates for an enzyme
CN101475571B (zh) 2009-01-21 2011-06-22 中国药科大学 β-咔啉类细胞周期蛋白依赖性激酶2抑制剂及其用途
WO2010093949A2 (en) 2009-02-13 2010-08-19 Nextivity, Inc. Remote control for booster
EP2455378A1 (en) 2010-11-03 2012-05-23 Philip Morris Products S.A. Carbazole and carboline derivatives, and preparation and therapeutic applications thereof
WO2012066442A1 (en) 2010-11-15 2012-05-24 Pfizer Limited Inhibitors of hiv replication
CA2834077A1 (en) 2011-05-17 2012-11-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
AU2013207972B2 (en) 2012-01-10 2017-06-15 Nimbus Iris, Inc. IRAK inhibitors and uses thereof
US20150284394A1 (en) 2012-10-26 2015-10-08 Hoffmann-La Roche Inc. Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
UY35625A (es) * 2013-06-25 2014-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporación Del Estado De Delaware Compuestos de tetrahidrocarbazol y carbazol carboxamida sustituidos como inhibidores de quinasa
KR102345381B1 (ko) * 2013-06-25 2021-12-29 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 키나제 억제제로서 유용한 카르바졸 카르복스아미드 화합물
KR102519536B1 (ko) * 2014-10-24 2023-04-06 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 트리시클릭 회전장애이성질체 화합물
SI3461821T1 (sl) 2014-10-24 2020-09-30 Bristol-Myers Squibb Company Spojine indol karboksamida, uporabne kot kinazni inhibitorji

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100160303A1 (en) * 2008-12-19 2010-06-24 Bristol-Myers Squibb Company Carbazole carboxamide compounds useful as kinase inhibitors
WO2011159857A1 (en) * 2010-06-16 2011-12-22 Bristol-Myers Squibb Company Carboline carboxamide compounds useful as kinase inhibitors

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109053542A (zh) * 2018-07-25 2018-12-21 南通大学 一种6-溴-5-羟基异吲哚啉-1-酮的化学合成方法
CN110862396A (zh) * 2019-11-29 2020-03-06 浙江工业大学 一种吡咯并[3,4-c]咔唑-1,3(2H，6H)-二酮类化合物的合成方法
CN115867346A (zh) * 2020-06-02 2023-03-28 Gb005股份有限公司 激酶抑制剂

Also Published As

Publication number Publication date
EP3209651A1 (en) 2017-08-30
MA40302B1 (fr) 2018-10-31
JP2017535536A (ja) 2017-11-30
US10676434B2 (en) 2020-06-09
CL2017001001A1 (es) 2017-11-24
EA201790745A1 (ru) 2017-08-31
MA40302A1 (fr) 2018-05-31
TW201629014A (zh) 2016-08-16
IL251798B (en) 2020-08-31
CN107074804B (zh) 2020-02-18
US10266491B2 (en) 2019-04-23
HUE048321T2 (hu) 2020-07-28
SI3209651T1 (sl) 2019-12-31
IL251798A0 (en) 2017-06-29
EP3209651B1 (en) 2019-10-23
PT3209651T (pt) 2019-12-30
CO2017004517A2 (es) 2017-08-31
US20170362176A1 (en) 2017-12-21
JP6599983B2 (ja) 2019-10-30
HRP20192197T8 (hr) 2020-04-03
HRP20192197T2 (hr) 2020-11-13
US20190225583A1 (en) 2019-07-25
EA032361B1 (ru) 2019-05-31
HRP20192197T1 (hr) 2020-03-06
SG11201703187PA (en) 2017-05-30
ES2761903T3 (es) 2020-05-21
EP3209651B9 (en) 2020-05-20
CY1122549T1 (el) 2021-01-27
CA2965523A1 (en) 2016-04-28
AU2015335703A1 (en) 2017-06-08
US20200255377A1 (en) 2020-08-13
PE20171239A1 (es) 2017-08-24
KR102514914B1 (ko) 2023-03-27
MY190568A (en) 2022-04-27
KR20170075756A (ko) 2017-07-03
AR102427A1 (es) 2017-03-01
WO2016065236A1 (en) 2016-04-28
BR112017007545A2 (pt) 2017-12-19
PH12017500724A1 (en) 2017-10-09
TN2017000158A1 (en) 2018-10-19
PL3209651T3 (pl) 2020-03-31
DK3209651T3 (da) 2020-02-03
RS59707B1 (sr) 2020-01-31
LT3209651T (lt) 2020-01-10
SG10201903619YA (en) 2019-05-30
MX2017005255A (es) 2017-08-18
US11053197B2 (en) 2021-07-06
TWI676618B (zh) 2019-11-11
ME03754B (me) 2021-04-20
AU2015335703B2 (en) 2020-05-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107074804A (zh) 咔唑衍生物
CN110511209A (zh) 可用作激酶抑制剂的吲哚甲酰胺化合物
CN104470925B (zh) 作为激酶抑制剂的咪唑并三嗪甲腈
CN106029663B (zh) 作为抗癌剂的新颖三环化合物
CN105814048B (zh) 作为tnf活性调节剂的稠合三环苯并咪唑衍生物
CN104023728B (zh) 大环lrrk2激酶抑制剂
CN106061967B (zh) 经杂芳基取代的烟酰胺化合物
CN107857755B (zh) 作为trka激酶抑制剂的n-吡咯烷基、n′-吡唑基-脲、硫脲、胍和氰基胍化合物
CN104507943B (zh) 作为fgfr抑制剂的取代的三环化合物
CN110267953A (zh) 四氢咪唑并[4,5-c]吡啶衍生物作为pd-l1内在化诱导剂
CN108368090A (zh) 作为免疫调节剂的化合物
CN104781254A (zh) 可作为激酶调节剂的经杂芳基取代的吡啶基化合物
CN105358546B (zh) 用作激酶抑制剂的经取代的四氢咔唑及咔唑甲酰胺化合物
CN108431007A (zh) 用于治疗癌症的作为btk抑制剂的吡唑并嘧啶衍生物
CN104781252A (zh) 用作IL-12、IL-23和/或IFNα应答调节剂的被烷基-酰胺取代的吡啶化合物
CN110062758A (zh) 作为rho-激酶抑制剂的二环二氢嘧啶-甲酰胺衍生物
CN109153643A (zh) 取代的吲哚mcl-1抑制剂
CN110156786A (zh) 嘧啶并环化合物及其制备方法和应用
JP6885968B2 (ja) ブロモドメイン阻害薬としてのピリジンジカルボキサミド誘導体
CN106986863A (zh) Dna‑pk抑制剂
CN104271566A (zh) 取代的联吡啶胺及其用途
CN107987062A (zh) 丙肝病毒抑制剂及其制药用途
CN108137547A (zh) 可用作TNFα调节剂的杂环化合物
CN108026080A (zh) 吡唑基取代的杂芳基化合物及其作为药物的用途
CN101981031A (zh) 具有促肾上腺皮质激素释放因子拮抗活性的三环化合物和含有它们的药物组合物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant