CN105358165A - 戊糖素生成抑制剂 - Google Patents
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Abstract
一种戊糖素生成抑制剂,作为具有抑制戊糖素生成的作用的成分,以具有更强的作用、安全性高的乳酸菌发酵物作为有效成分。
Description
技术领域
本发明涉及以乳酸菌发酵物作为有效成分的戊糖素生成抑制剂。
背景技术
戊糖素是具有赖氨酸残基和精氨酸残基通过五碳糖交联的结构的高级糖基化终产物(AdvancedGlycationEndproducts:AGEs)。
该戊糖素蓄积于人硬膜、皮肤胶原。另外,戊糖素对于风湿、重症的特应性皮炎的患者也能够以高值被检测出来,也揭示了与这些疾病的关联。
因此,通过抑制戊糖素的生成,能够进行与戊糖素相关的疾病的预防、治疗。
然而,到目前为止,尽管作为具有抑制戊糖素生成的作用的成分已知有依达拉奉(专利文献1)等,但不能充分地满足效果、安全性等。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开2004-300153号公报
发明内容
发明要解决的问题
因此,本发明的课题在于,作为具有抑制戊糖素生成的作用的成分,提供具有更强的作用、安全性高的物质。
用于解决问题的方案
本发明人等为了解决上述问题,进行了深入研究,结果发现,乳酸菌发酵物意外地具有抑制戊糖素生成的作用。另外,本发明人等发现,在乳酸菌发酵物中,用乳酸菌使含有乳成分、芦荟的培养基发酵而得到的乳酸菌发酵物作为有效成分的情况下,抑制戊糖素生成的作用高,至此完成了本发明。
即,本发明为以乳酸菌发酵物作为有效成分的戊糖素生成抑制剂。
另外,本发明是以乳酸菌发酵物作为有效成分的戊糖素生成抑制剂,所述乳酸菌发酵物是用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而得到的。
进而,本发明是以乳酸菌发酵物作为有效成分的戊糖素生成抑制剂,所述乳酸菌发酵物是用乳酸菌使含有芦荟的培养基发酵而得到的。
另外,本发明是人的戊糖素生成的抑制方法,其特征在于,对人给予上述以乳酸菌发酵物作为有效成分的戊糖素生成抑制剂。
发明的效果
本发明的戊糖素生成抑制剂即便低浓度作用也强并且由于来自天然物而安全性高,能够进行戊糖素相关疾病的预防、治疗。
具体实施方式
本发明的戊糖素生成抑制剂(以下,称为“本发明抑制剂”)是以乳酸菌发酵物作为有效成分。本说明书中,乳酸菌发酵物是指将能够用乳酸菌发酵的原料用乳酸菌发酵而得到的物质。另外,乳酸菌发酵物任选含有乳酸菌或不含有乳酸菌,也包括从乳酸菌的培养物中通过过滤等而去除了乳酸菌的上清等。
另外,本说明书中,戊糖素生成抑制是指减少生成的戊糖素的量;戊糖素生成抑制率是指根据论文(D.R.SellandV.M.Monnier,J.Biol.Chem264,21597-21602,(1989))所述的方法,在以等量混合了核糖、赖氨酸盐酸盐、精氨酸盐酸盐的底物溶液中,在待检物质的存在下或非存在下,对生成的戊糖素的量进行测定、比较而算出的值。更具体而言,在以等量混合了核糖、赖氨酸盐酸盐、精氨酸盐酸盐的底物溶液中混合待检物质,在60℃下反应24小时之后,测定照射330nm的激发光产生的390nm的荧光强度,由实施例所述的数学式1的式子算出的值。
对于乳酸菌发酵物的原料,只要是能够用乳酸菌发酵的物质则没有特别的限定,可列举出例如:含有芦荟、豆乳等来自植物的原料的培养基;含有牛奶、人奶、山羊奶等动物奶、奶油、脱脂奶粉等来自动物的原料的培养基;MRS(Man,RogosaandSharpe)培养基;M-17培养基等乳酸菌用培养基等。这些原料中,特别优选使用含有牛奶、人奶、山羊奶等动物奶、奶油、脱脂奶粉等乳成分的培养基;或者含有芦荟的培养基。另外,对于这些原料,也可以进行:过滤、离心分离处理;利用溶剂的溶解、稀释处理;利用混合器等的粉碎处理;利用淀粉酶、纤维素酶、果胶酶、蛋白酶等的酶处理;利用溶剂的提取处理。
另外,对于发酵中使用的乳酸菌也没有特别的限定,可列举出例如:干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)、卷曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)、植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、噬淀粉乳杆菌(Lactobacillusamylovorus)、短乳杆菌(Lactobacillusbrevis)、布氏乳杆菌(Lactobacillusbuchneri)、发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)、马里乳杆菌(Lactobacillusmali)、类布氏乳杆菌(Lactobacillusparabuchneri)、拟干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)、戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、小牛乳酸杆菌(Lactobacillusvitulinus)、玉米乳杆菌(Lactobacilluszeae)等乳杆菌属;乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)等乳球菌(Lactococcus)属;肠系膜明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)、肉明串珠菌(Leuconostoccarnosum)、柠檬明串珠菌(Leuconostoccitreum)、肠膜明串珠菌(Leuconostocgelidum)、乳明串珠菌(Leuconostoclactis)等明串珠菌(Leuconostoc)属;戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus)等片球菌(Pediococcus)属;粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)、屎肠球菌(Enterococcusfaecium)等肠球菌(Enterococcus)属;融合魏斯氏菌(Weissellaconfusa)、类肠膜魏斯氏菌(Weissellaparamesenteroides)、绿色魏斯氏菌(Weissellaviridescens)等魏斯氏菌(Weissella)属;嗜热链球菌等链球菌属等的乳酸菌。这些乳酸菌可以使用一种或两种以上。
对于用乳酸菌对含有上述的原料的培养基进行发酵的条件,没有特别的限定,例如,对于前述培养基接种乳酸菌0.01~10质量%,优选接种0.1~5质量%,将其在20~45℃、优选25~42℃下培养1~96小时,优选培养3~96小时。
进一步,在上述发酵时,也可以向培养基中添加例如:酵母提取物、小球藻提取物、维生素类、蛋白分解物、氨基酸类、矿物类、盐类、表面活性剂、脂肪酸、金属类等。
对于如上述得到的乳酸菌发酵物,可以直接用作本发明抑制剂,进一步,也可以使用进行了公知的过滤、透析、沉淀、离心分离等精制、分离处理,进一步进行了利用溶剂等的提取处理、加热处理的物质。另外,也可以实施冷冻干燥、浓缩干固。
这样得到的乳酸菌发酵物的戊糖素生成抑制活性高、乳酸菌发酵物的浓度以干燥固体成分计为0.05质量%时,戊糖素生成抑制率为25%以上,优选为26~60%。
作为本发明中使用的乳酸菌发酵物优选的方式,可列举出:用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质;或者用乳酸菌使含有芦荟的培养基发酵而成的物质。需要说明的是,此处所述的芦荟不仅包含芦荟自身还包含来自芦荟的成分。用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质中,优选为由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清;特别优选由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清的低分子级分、由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清的高分子级分。另外,用乳酸菌使含有芦荟的培养基发酵的物质特别优选由用乳酸菌使含有芦荟的培养基发酵而成的物质得到的上清。
以下,对于作为本发明中使用的乳酸菌发酵物优选的方式的、用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质、以及用乳酸菌使含有芦荟的培养基发酵而成的物质进行说明。
作为用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质(以下,有时称为“乳酸菌发酵物(乳成分)”)所使用的乳酸菌,优选例如,嗜热链球菌等链球菌属;干酪乳杆菌、植物乳杆菌等乳杆菌属等的乳酸菌。这些乳酸菌中,优选链球菌属的乳酸菌,更优选嗜热链球菌。另外,其中优选嗜热链球菌YIT2084株(FERMBP-10879、保藏日:2006年8月18日)、嗜热链球菌YIT2085株(FERMBP-10880、保藏日:2006年8月18日)、嗜热链球菌YIT2021株(FERMBP-7537、保藏日:平成8年(1996年)11月1日)、嗜热链球菌YIT2059株(FERMBP-10878、保藏日:2006年8月18日)、嗜热链球菌YIT2001株(FERMBP-7538、保藏日:平成13年(2001年)1月31日)等,特别优选嗜热链球菌YIT2084株(FERMBP-10879、保藏日:2006年8月18日)。需要说明的是,这些乳酸菌可以使用一种或两种以上。另外,上述保藏号的乳酸菌株被保藏于独立行政法人产业技术综合研究所专利生物保藏中心(日本国茨城县筑波市东1丁目1番地1中央第6(邮政编码305-8566)),于平成25年4月1日,由独立行政法人制品评价技术基盘机构专利生物保藏中心(日本国千叶县木更津市上总镰足2丁目5番地8120号室(邮政编码292-0818))接管。
用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵时,按照公知的培养条件进行即可,例如,可以将用水调节成乳成分为1~20质量%的物质作为培养基,向其中接种乳酸菌0.01质量%~10质量%,优选为0.1质量%~5质量%,在20℃~45℃、优选37℃~42℃下培养1小时~48小时,优选培养4小时~30小时。需要说明的是,作为此时的其他的培养条件,可列举出:静置、搅拌、振荡、通气等,也可以从它们中适宜选择适合于培养的方法而进行。
另外,以向乳酸菌的培养中补充营养源为目的,也可以另外向含有乳成分的培养基中配合通常使用的成分。作为这样的成分,可列举出:酵母提取物;小球藻提取物;维生素A、维生素B类、维生素C、维生素E等维生素类;包含各种肽类的蛋白分解物;氨基酸类;钙、镁等的盐类;聚山梨醇80等表面活性剂;油酸等脂肪酸;钙、镁、锰等金属类。
也可以对这样得到的乳酸菌发酵物(乳成分)实施公知的过滤、透析、沉淀、离心分离等精制、分离处理;进一步实施利用溶剂等的提取处理、加热处理、冷冻干燥、浓缩干固。
对于本发明抑制剂,乳酸菌发酵物(乳成分)中,优选为由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清;特别优选由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清的低分子级分、或者由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清的高分子级分。
由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清(以下,有时称为“乳酸菌发酵物(乳成分)上清”)可以通过从如上述得到的乳酸菌发酵物(乳成分)中按照离心分离、过滤等常规方法去除固体物质来制造。
另外,由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清的低分子级分(以下,有时称为“乳酸菌发酵物(乳成分)上清的低分子级分”)是指上述乳酸菌发酵物(乳成分)上清的分子量20000Da以下的级分。分子量20000Da以下的级分可以通过对乳酸菌发酵物(乳成分)上清进行超滤、凝胶过滤、透析等处理而采集。
这样得到的乳酸菌发酵物(乳成分)上清的低分子级分的浓度以干燥固体成分计为0.05质量%时,戊糖素生成抑制率为25%以上,优选为26~40%。
另外,由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清的高分子级分(以下,有时称为“乳酸菌发酵物(乳成分)上清的高分子级分”)是指上述乳酸菌发酵物(乳成分)上清的分子量3500Da以上的级分。分子量3500Da以上的级分可以通过对乳酸菌发酵物(乳成分)上清进行超滤、凝胶过滤、透析等处理而采集。需要说明的是,在该情况下去除固体物质时,优选将乳酸菌发酵物所包含的酪蛋白等蛋白质预先用三氯乙酸、乙醇等沉淀。通过事先这样做,乳酸菌发酵物上清的高分子级分中较多地包含多糖类。需要说明的是,想要使用较多地包含多糖类的高分子级分时,用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵时,特别优选在pH6~8的条件下、37~40℃下进行培养。培养基的pH的调节中可以使用氢氧化钠等。
这样得到的乳酸菌发酵物(乳成分)上清的高分子级分的浓度以干燥固体成分计为0.05质量%时,戊糖素生成抑制率为25%以上,优选为35~60%。
另一方面,用乳酸菌使含有芦荟的培养基发酵而成的物质(以下,有时称为“乳酸菌发酵物(芦荟)”)如上所述,例如,可以通过用含有芦荟的培养基培养乳酸菌而得到。
培养基所含有的芦荟是非洲原产的百合科植物的总称,具有木立芦荟、库拉索芦荟等300种以上的品种。已知,该芦荟除了大量含有黏蛋白、芦荟甘露聚糖等多糖类之外,还含有芦荟素、芦荟宁、芦荟辛(aloecin)、芦荟米嗪(alomicin)、芦荟乌尔辛(aloeulcin)等成分。本发明中使用的芦荟只要是芦荟类则没有特别的限定,从入手的容易性、成本的观点等出发,特别优选使用木立芦荟或库拉索芦荟。对于上述芦荟的使用部位,没有特别的限定,除了叶、叶肉、芽、根之外,由于没有纤维成分,也可以使用使后续的制造工序变得简便的前述部位的汁液、滴滤液、由其得到的各种成分等。
然而,乳酸菌不能将上述芦荟中的纤维成分、蛋白成分等同化,所以优选按照常规方法,在发酵处理前对芦荟进行纤维素酶处理、蛋白酶处理等分解处理等。通过进行纤维素酶处理,同化性提高,发酵进行,乳酸菌发酵物中没能同化的纤维素等不残留而后续的制造工序变得简便。另外,通过进行蛋白酶处理,在乳酸菌发酵物中蛋白成分等不残留,因而不产生浑浊,需要在发酵后进行澄清化工序。进一步,通过组合使用淀粉酶处理,乳酸菌的同化性进一步提高。酶分解处理中,优选从纤维素酶、果胶酶等纤维质分解酶(纤维素酶类);酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶等蛋白酶;肽酶、甘露聚糖酶等蛋白分解酶等(蛋白酶类);α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶等淀粉分解酶(淀粉酶类)中适宜选择一种或两种以上使用。另外,为了不有损乳酸菌发酵物的嗜好性以及为了充分地同化芦荟,优选不向芦荟中添加糖类。
作为上述发酵中使用的乳酸菌,优选为乳杆菌属的乳酸菌,更优选为植物乳杆菌。需要说明的是,这些乳酸菌可以使用一种或两种以上。
为了用乳酸菌使含有芦荟的培养基发酵,按照公知的培养条件进行即可,例如,向将白利度(Brix)调节为3.0以上、pH调节为4.2以下的芦荟的提取物中接种乳酸菌0.01质量%~10质量%、优选为0.1质量%~5质量%,对其在20℃~40℃、优选为25℃~40℃下进行6小时~96小时、优选为24小时~96小时的培养。需要说明的是,作为此时的其他的培养条件,可列举出:静置、搅拌、振荡、通气等,也可以从它们中适宜选择适合于培养的方法而进行。
需要说明的是,以向乳酸菌的培养中补充营养源为目的,也可以向含有芦荟的培养基中另外配合糖类以外的通常使用的成分。作为这样的成分,可列举出:酵母提取物;小球藻提取物;维生素A、维生素B类、维生素C、维生素E等维生素类;包含各种肽类的蛋白分解物;氨基酸类;钙、镁等的盐类;聚山梨醇80等表面活性剂;油酸等脂肪酸;钙、镁、锰等金属类。
也可以对这样得到的乳酸菌发酵物(芦荟)实施公知的过滤、透析、沉淀、离心分离等精制、分离处理;进一步实施利用溶剂等的提取处理、加热处理、冷冻干燥、浓缩干固。
对于本发明抑制剂,乳酸菌发酵物(芦荟)中特别优选由用乳酸菌使含有芦荟成分的培养基发酵而成的物质得到的上清。
从用乳酸菌使含有芦荟成分的培养基发酵的物质中得到的上清(以下,有时称为“乳酸菌发酵物(芦荟)上清”)可以通过从如上述得到的乳酸菌发酵物(芦荟)中按照离心分离、过滤等常规方法去除固体物质来制造。
这样得到的从用乳酸菌使含有芦荟成分的培养基发酵的物质中得到的上清的浓度以干燥固体成分计为0.05质量%时,戊糖素生成抑制率为25%以上,优选为28~50%。
以上说明的本发明抑制剂可以配合于化妆品、药品、准药物等皮肤外用剂组合物中,也可以制成例如:化妆水、乳液、各种霜、面膜、美容液等基础化妆品;香波、护发素、焗油膏、生发油、整发液、头膏、润发奶(hairmilk)等头发用产品;入浴剂等浴用化妆品;粉底、口红、睫毛膏、眼影等彩妆化妆品;防晒等特殊化妆品等。对于作为本发明的戊糖素生成抑制剂的乳酸菌培养上清的配合量,没有特别的限定,可以根据皮肤外用剂组合物的形态等适宜设定,优选以干燥固体成分换算计为0.003质量%~1质量%,优选为0.015质量%~0.6质量%,特别优选为0.03质量%~0.3质量%。
上述皮肤外用剂组合物可以在不有损本发明的效果的范围配合化妆品、药品、准药物等领域中使用的公知成分。作为这些公知成分,可列举出例如:水、醇类、油成分、表面活性剂、防腐剂、香料、色素、保湿剂、增稠剂、抗氧化剂、螯合剂、pH调节剂、发泡剂、紫外线吸收·散射剂、粉体、维生素类、氨基酸类、抗菌剂、植物提取物、海藻提取物、各种试剂等。
本发明抑制剂可以直接将上述乳酸菌发酵物制剂化而调制,或者与公知的药品载体组合进行制剂化而调制。
进一步,本发明抑制剂由于以有饮食经验的乳酸菌发酵物作为有效成分,所以可以配合于各种饮食品中。例如,可以向乳酸菌发酵物中添加适当的助剂之后,使用惯用的手段成型为适合于食用的形态例如颗粒状、粒状、片剂、胶囊、糊剂等供于食用,或者向各种食品例如:火腿、香肠等肉食加工食品;鱼糕、筒状鱼卷等水产加工食品;面包、点心等中添加而使用,或者可以向水、果汁、牛奶、清凉饮料等饮料中添加而使用。
以上说明的本发明抑制剂通过对人给予,能够抑制人的戊糖素生成,因此能够进行与戊糖素相关的疾患的预防、治疗。对于本发明抑制剂对人的给予方法,没有特别的限定,例如,对于人的戊糖素生成的部位,通过适合于该部位的给予路径,给予能够进行上述预防、治疗的量。作为戊糖素生成的部位,可列举出例如皮肤、硬膜等。另外,对于适合于前述部位的给予路径,可列举出例如:对上述部位的涂布、经口给予、注射等。
实施例
以下,列举实施例等对本发明详细地进行说明,但本发明不限定于这些实施例。
实施例1
乳酸菌发酵物(乳成分)上清的低分子级分的戊糖素生成抑制活性:
将嗜热链球菌YIT2084株(FERMBP-10879)的-80℃保存菌株向2mL试管中的包含10g/L乳糖的M-17培养基(Difco公司制)中接种1接种环,在40℃下静置一晩进行培养。接着,以在2mL的10质量%脱脂奶粉水溶液(Difco公司制)中成为1质量%的方式接种该培养物之后,在40℃下静置一晩进行培养,作为预培养。在主培养培养基(3质量%脱脂奶粉水溶液)100mL中接种1质量%预培养物,在40℃下静置24小时进行培养。对培养后的菌液在4℃、以8000×g进行15分钟离心分离,去除沉淀物。对于得到的沉淀物去除液(上清)使用分级分子量20000Da的离心分离方式超滤过滤器(CentricutMiniV-20:KURABOINDUSTRIESLTD.制造),在4℃,以3000×g进行1小时超滤,得到低分子级分10mL。该低分子级分中包含干燥固体成分2%(20000μg/mL)。另外,该乳酸菌发酵物(乳成分)上清的低分子级分的平均分子量为300Da左右。
需要说明的是,平均分子量是将上述低分子级分溶解于50mM氯化钠溶液之后,在下述条件下进行HPLC而测定的值。
[HPLC条件]
装置:Waters-600E
检测器:ISIRI-980
柱:ShodexSUGARKS-804
柱温:80℃
流动相:50mMNaCl
流速:1mL/分钟
注入量:10μL
由戊糖素的生成量计算出上述得到的低分子级分的戊糖素生成抑制率(%)。首先,作为底物溶液,准备将50mM核糖、50mM赖氨酸盐酸盐、50mM精氨酸盐酸盐和100mM磷酸钠缓冲液(pH7.4)分别等量混合而成的溶液。接着,将该底物溶液与对上述得到的低分子级分用100mM磷酸钠缓冲液(pH7.4)进行了稀释的待检试样溶液混合以使底物溶液:待检试样溶液成为5:1,在60℃的恒温槽中进行24小时反应。作为对照,代替低分子级分使用水同样地进行反应。需要说明的是,作为空白使用不包含核糖、赖氨酸、精氨酸的缓冲液。加热结束之后,对各待检体照射330nm的激发光,测定生成的390nm的荧光强度,以荧光量计算出戊糖素的生成量。由该荧光强度通过以下的式子计算戊糖素生成抑制率。将这些结果示于表1中。
[数学式1]
戊糖素生成抑制率(%)=((Ec-Eb)-(Es-Eb))/(Ec-Eb)×100
Es:试样的荧光强度
Ec:对照的荧光强度
Eb:空白的荧光强度
[表1]
由以上的结果可知,对于乳酸菌发酵物(乳成分)上清的低分子级分,在0.05质量%这样低的浓度下为高的戊糖素生成抑制率。另外,也可以确认,戊糖素生成抑制率浓度依赖地提高。
实施例2
乳酸菌发酵物(乳成分)上清的高分子级分的戊糖素生成抑制活性:
将嗜热链球菌YIT2084株(FERMBP-10879)的-80℃保存菌株向2mL试管中的包含10g/L乳糖的M-17培养基(Difco公司制)中接种1接种环,在40℃下静置一晩进行培养。接着,以在2mL的10质量%脱脂奶粉水溶液(Difco公司制)中成为1质量%的方式接种该培养物之后,在40℃下静置一晩进行培养,作为预培养。在发酵罐中准备的主培养培养基(包含1%的大豆肽的10质量%脱脂奶粉水溶液)1L中以0.1质量%接种该预培养物,在40℃下边使用8N的氢氧化钠溶液将培养基保持在pH7边在转速100rpm的条件下培养24小时。接着,在冰中进行冷却之后,以终浓度成为10%w/v的方式加入三氯乙酸(TCA),在4℃下静置2小时。对其以18300×g进行30分钟离心,向上清液中加入等量的99质量%冷乙醇,进而在4℃下静置一晩。对其用透析管(Spectra/PorMembrane(MW3500):SpectrumMedicalLtd.制造)进行透析,按照常规方法对得到的高分子级分进行冷冻干燥。需要说明的是,该乳酸菌发酵物(乳成分)上清的高分子级分的平均分子量为90万Da左右。平均分子量的测定方法与乳酸菌发酵物(乳成分)上清的低分子级分是同样的。
对于上述得到的乳酸菌发酵物(乳成分)上清的高分子级分,与实施例1同样地计算出戊糖素生成抑制率(%)。将其结果示于表2。
[表2]
由以上的结果可知,对于乳酸菌发酵物(乳成分)上清的高分子级分,在0.05质量%这样低的浓度下也为高的戊糖素生成抑制率。另外,也可以确认,戊糖素生成抑制率浓度依赖地提高。
实施例3
乳酸菌发酵物(芦荟)上清的戊糖素生成抑制活性:
将库拉索芦荟(学名:AloebarbadensisMiller)的冷冻叶解冻之后进行破碎,加入2倍量的水和柠檬酸0.05质量%,在40℃下使纤维素酶(纤维素酶“Onozuka”3S:YakultPharmaceuticalIndustryCo.,Ltd.制造)作用3小时。之后,暂时加热至90℃之后冷却至室温,并进行过滤,进行减压浓缩至成为Brix3.5为止,得到库拉索芦荟提取液。对于得到的库拉索芦荟提取液(pH3.7)在100℃下进行100分钟加热灭菌。向其中接种植物乳杆菌的标准株(ATCC14917)的预培养菌液1%之后,在30℃下静置72小时进行培养。培养之后,通过过滤,采集滤液,得到乳酸菌发酵物(芦荟)上清。该乳酸菌发酵物(芦荟)上清中包含干燥固体成分2.9%(29000μg/mL)。
对于上述得到的乳酸菌发酵物(芦荟)上清,与实施例1同样地,计算出戊糖素生成抑制率(%)。另外,对于没有用植物乳杆菌进行发酵的库拉索芦荟提取液,也同样地计算出戊糖素生成抑制率(%)。将它们的结果示于表3和4中。
[表3]
[表4]
库拉索芦荟提取液的浓度(换算成干燥固体成分) | 戊糖素生成抑制率 |
0.05质量% | 20.3% |
0.0725质量% | 22.0% |
由以上的结果可知,乳酸菌发酵物(芦荟)上清与没有用乳酸菌发酵的库拉索芦荟提取液相比较,以0.05质量%这样低的浓度具有1.4倍以上高的戊糖素生成抑制率。另外,也可以确认,戊糖素生成抑制率浓度依赖地提高。
实施例4
化妆水的调制:
调制以下表5所述的组成的化妆水。需要说明的是,化妆水是向成分7中加入成分1~6并充分地进行搅拌而调制的。
[表5]
成分 | 原料 | 用量(质量%) |
1 | 乙醇 | 5.0 |
2 | 1,3-丁二醇 | 2.0 |
3 | 聚氧乙烯氢化蓖麻油 | 0.05 |
4 | 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.1 |
5 | 香料 | 0.1 |
6 | 乳酸菌发酵物* | 10.0 |
7 | 蒸馏水 | 以整体计变为100的量 |
*直接使用实施例1中得到的乳酸菌发酵物(乳成分)上清的低分子级分。
实施例5
乳液的调制:
调制以下表6所述的组成的乳液。需要说明的是,乳液是如下调制的:向成分11中加入成分7、8和10进行加温,在80℃下加入成分1~6进行乳化,之后加入成分9进行搅拌,冷却至室温。
[表6]
成分 | 原料 | 用量(质量%) |
1 | 硬脂酸 | 2.0 |
2 | 液体石蜡 | 5.0 |
3 | 角鲨烷 | 2.0 |
4 | 失水山梨醇单硬脂酸酯 | 0.05 |
5 | 聚氧乙烯(20)失水山梨醇单硬脂酸酯 | 2.0 |
6 | 对羟基苯甲酸丁酯 | 0.05 |
7 | 甘油 | 2.0 |
8 | 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.1 |
9 | 香料 | 0.15 |
10 | 乳酸菌发酵物* | 0.1 |
11 | 蒸馏水 | 以整体计变为100的量 |
*直接使用实施例2中得到的乳酸菌发酵物(乳成分)上清的高分子级分。
实施例6
霜的调制:
调制以下表7所述的组成的霜。需要说明的是,霜是如下调制的:向成分13中加入成分9、10、12进行加温,在80℃下加入成分1~8进行乳化,之后加入成分11进行搅拌,冷却至室温。
[表7]
成分 | 原料 | 用量(质量%) |
1 | 液体石蜡 | 23.0 |
2 | 凡士林 | 7.0 |
3 | 鲸蜡醇 | 1.0 |
4 | 硬脂酸 | 2.0 |
5 | 蜜蜡 | 2.0 |
6 | 失水山梨醇单硬脂酸酯 | 3.5 |
7 | 聚氧乙烯(20)失水山梨醇单硬脂酸酯 | 2.5 |
8 | 对羟基苯甲酸丁酯 | 0.05 |
9 | 1,3-丁二醇 | 1.0 |
10 | 对羟基苯甲酸甲酯 | 0.1 |
11 | 香料 | 0.15 |
12 | 乳酸菌发酵物* | 5.0 |
13 | 蒸馏水 | 以整体计变为100的量 |
*直接使用实施例3中得到的乳酸菌发酵物(芦荟)上清。
产业上的可利用性
本发明的戊糖素生成抑制剂能够用于与戊糖素相关的疾病的预防、治疗。
Claims (10)
1.一种戊糖素生成抑制剂,其以乳酸菌发酵物作为有效成分。
2.根据权利要求1所述的戊糖素生成抑制剂,其中,乳酸菌发酵物的浓度以干燥固体成分计为0.05质量%时,戊糖素生成抑制率为25%以上。
3.根据权利要求1或2所述的戊糖素生成抑制剂,其中,作为乳酸菌发酵物,使用用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质。
4.根据权利要求1或2所述的戊糖素生成抑制剂,其中,作为乳酸菌发酵物,使用由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清。
5.根据权利要求1或2所述的戊糖素生成抑制剂,其中,作为乳酸菌发酵物,使用由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清的低分子级分。
6.根据权利要求1或2所述的戊糖素生成抑制剂,其中,作为乳酸菌发酵物,使用由用乳酸菌使含有乳成分的培养基发酵而成的物质得到的上清的高分子级分。
7.根据权利要求3~6中的任一项所述的戊糖素生成抑制剂,其中,乳酸菌为嗜热链球菌。
8.根据权利要求3~6中的任一项所述的戊糖素生成抑制剂,其中,乳酸菌为嗜热链球菌YIT2084株(FERMBP-10879)。
9.根据权利要求1或2所述的戊糖素生成抑制剂,其中,作为乳酸菌发酵物,使用用乳酸菌使含有芦荟的培养基发酵而成的物质。
10.根据权利要求9所述的戊糖素生成抑制剂,其中,乳酸菌为植物乳杆菌。
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