CN105267291B - 一种用于治疗或保护肝损伤的复方组合物 - Google Patents

Abstract

一种复方组合物，组分中包括墨旱莲、金银花、灵芝和甘草，各组分的优选重量比为16‑70：10‑40：1‑6：1‑6。该组合物具有补益、疏散、安神等多重功效，对于肝损伤具有良好的治疗或保护作用，具有功效广泛，效果确切、安全稳定等优点。

Description

一种用于治疗或保护肝损伤的复方组合物

技术领域

本发明涉及一种组合物，更具体来说，涉及一种对肝损伤有治疗或保护作用的复方组合物。

背景技术

肝脏是承担人体重要生理功能的实质性器官，当肝细胞、肝组织或整个肝脏器官的形态与功能发生病理改变时，称为肝损伤。

中药中的多种药物对肝损伤均能起到治疗或保健的作用，常用的包括活血、理气、清热、补虚、平肝等多种功效的药物，具体的研究较多。例如：

在药理研究方面：

何学斌等（灵芝多糖保护肝脏的实验研究.中国中西医结合杂志,2004,S1:102-104.）观察灵芝多糖保护肝脏的药理作用，发现灵芝多糖对小鼠急性实验性肝损伤（四氯化碳）有明显的保肝降酶作用。

徐汝明等（墨旱莲活性成分对刀豆蛋白A诱导的小鼠肝损伤的作用[J].上海交通大学学报(医学版),2010,01:50-54.）通过研究发现：墨旱莲提取物具有抗ConA诱导的小鼠肝损伤作用，活性成分蟛蜞菊内酯具有较强的抗炎和抗凋亡作用。

王东升（金银花提取物对肝损伤小鼠的保护作用研究[J]. 医药导报,2011,08:1010-1012.）发现金银花提取物能降低肝损伤模型小鼠肝组织中丙二醛含量、一氧化氮含量，提高还原型谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶含量，表明金银花具有显著的抗肝损伤作用。

制剂方面：

传统方剂二至丸，由女贞子、墨旱莲两味中药组成，具有补益肝肾，滋阴止血的功效。可用于肝肾阴虚，眩晕耳鸣，咽干鼻燥，腰膝酸痛，月经量多等症的治疗。

南洋佰岁牌佰顺胶囊，由山药、灵芝、墨旱莲、人参、川芎、茯苓等药物组成的，具有增强免疫力的作用。

由泽泻、白术、茯苓、陈皮、半夏、女贞子、墨旱莲、菊花、牛膝、甘草等药物组成的眩晕宁冲剂，具有健脾利湿，益肝补肾的功效。用于痰湿中阻、肝肾不足引起的头昏、头晕。

由灵芝、白术、女贞子、合欢皮、首乌藤、仙鹤草、墨旱莲、甘草等药物组成的安神糖浆，具有养血安神的功效。用于贫血体虚，头昏，失眠，腰酸，四肢疲乏。

灵源万应茶（木香、广藿香、紫苏、枳壳、前胡、荆芥、川木通、金银花、赤芍、车前子、茵陈、白芷、山楂、甘草、白芍、防风、墨旱莲、桑白皮、半夏、青蒿，等）具有疏风解表，调胃健脾，祛痰利湿的功效。用于感昌发热、中暑、痢疾、 腹痛吐泻。

肝肾安糖浆，由何首乌、黑芝麻、墨旱莲、桑椹、金樱子、菟丝子、豨签草、桑叶、牛膝、女贞子、杜仲、地黄、金银花、黑豆等药物组成，具有补肝肾，强筋骨，乌须发，抗衰老等功效。用于头晕目花，耳鸣，腰酸 肢麻，头发早白。

可以看到，现有技术中虽然有很多单方药物保肝的理论研究，也有相关的复方应用，但也存在制剂中药物繁多、组方复杂，具体效果仍不够确切等缺陷。

因此，有必要开发一种对肝损伤具有治疗或保健作用的新的复方组合物。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种对肝损伤具有治疗或辅助保护作用的新的复方组合物。本发明的另一目的是提供该复方组合物在制备治疗肝损伤的药物或辅助保护肝损伤的保健食品中的应用。本发明的又一目的是提供一种含有该复方组合物的的制剂。

发明人在祖国传统药物中经过筛选，得到了一种对肝损伤具有保健或治疗作用的组合物。本发明的一种技术方案如下：

一种可以治疗或辅助保护肝损伤的组合物，其特征在于，所述组合物中含有墨旱莲组分、金银花组分、灵芝组分和甘草组分。

一种优选的技术方案为：所述复方组合物由墨旱莲组分、金银花组分、灵芝组分和甘草组分组成。

现有技术中治疗肝病的药物很多，墨旱莲、金银花、灵芝和甘草也是常用的中药，也有单用治疗或辅助治疗肝病方面的报道，但现有技术中并未对这四种药物所组成的复方进行研究。本发明阐释了墨旱莲、金银花、灵芝和甘草的共同配伍，在治疗或辅助保护肝损伤方面，产生了意料不到的协同作用。

本发明的组合物中：墨旱莲组分具有滋补肝肾，凉血止血的功效；金银花组分具有清热解毒，疏散风热的功效；灵芝组分具有补气安神，止咳平喘的功效。发明人将墨旱莲组分、金银花组分和灵芝组分作为方中主药，再以甘草组分为辅助，产生了补益、疏散、安神等多重复合作用。

通过对各组分的用量进行研究发现，组分的特定用量比例可以使组合物具有更好的效果，因此，本发明的另一种优选的方案是：

上述组合物中，墨旱莲组分、金银花组分、灵芝组分和甘草组分的重量比为16-70：10-40：1-6：1-6，更优选的比例是20-60：12-36：1-5：1-4。

上述组合物中，所述的墨旱莲组分可以是中药墨旱莲的原药材、饮片、提取物、有效部位或单体化学成分，一种优选的方式为墨旱莲的提取物，一种更优选的方式为墨旱莲的乙醇提取物。

上述组合物中，所述的金银花组分可以是中药金银花的原药材、饮片、提取物、有效部位或单体化学成分，一种优选的方式为金银花的提取物。

上述组合物中，所述灵芝组分可以是中药灵芝的原药材、饮片、提取物、有效部位或单体化学成分，一种优选的方式为灵芝多糖或灵芝提取物。

上述组合物中，所述甘草组分可以是中药甘草的原药材、饮片、提取物、有效部位或单体化学成分，一种优选的方式为甘草酸或其盐（例如钾盐或铵盐）。

本发明的一种更优选的组合物，其组分为：墨旱莲提取物；金银花提取物；灵芝多糖或灵芝提取物；以及，甘草酸或盐。

“原药材”在本发明中，对于墨旱莲组分是指菊科植物鳢肠(Eclipta prostrataL.)的干燥地上部分；对于金银花组分是指忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb.)的干燥花蕾或带初开的花；对于灵芝组分是指多孔菌科真菌赤芝（Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.)Karst.）或紫芝（Ganoderma sinense Zhao,Xu et Zhang）的干燥子实体，对于甘草组分是指豆科植物甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch.）、胀果甘草（glycyrrhiza inflata bat.）或光果甘草（glycyrrhiza glabra l.）的干燥根和根茎。

“饮片”在本发明中是指：根据需要，将原药材经过炮制处理后形成的产品。

“提取物”在本发明中是指：以原药材为原料，使用适当的溶剂，经过物理化学提取分离过程，定向获取和浓集得到的原药材中的某几种或多种有效成分所形成的混合物。

“有效部位”在本发明中是指：原植物、饮片或提取物中含有的某一类化合物所形成的混合物。例如黄酮类、多糖类、皂苷类，等等。

“单体化学成分”在本发明中是指：原植物、饮片或提取物中含有的某一种单一化合物。

本发明中使用的墨旱莲、金银花、灵芝或甘草的原药材、饮片、提取物、有效部位或单体化合物可以通过从市场购买的方式获得，也可以自己种植或制备。

对于提取物，本领域技术人员可以购买市场上现有的成品；也可以按照现有技术中所公开的各种提取方法来制备得到，尽管不同提取方法得到的提取物可能在化学成分的种类或含量上存在一些差异，但这些差异对于本发明技术方案的实施和技术效果的达到不会产生本质的影响。

例如，在本发明的一个优选实施例中采用市售的墨旱莲提取物，本发明的另一个优选实施例中采用自制的墨旱莲提取物（制备方法为：取墨旱莲药材，用70% w/v的乙醇提取，浓缩，干燥，得到墨旱莲提取物）。在发明的一个优选实施例中采用市售金银花提取物，本发明的另一个优选实施例中采用自制的金银花提取物，等等。

对于有效部位，本领域技术人员可以采用不同纯度或规格的有效部位。例如采用市售10%-50%的灵芝多糖。

上述的组合物，可以用于制备治疗肝损伤的药物。

上述的组合物，还可以用于制备辅助保护肝损伤的保健食品。

其中，肝损伤可以是暴力性肝损伤、化学性肝损伤或病理性肝损伤，优选化学性肝损伤。化学性肝损伤是指由化学性肝脏毒性物质（例如酒精、化学毒物以及某些药物）所造成的肝损伤。

本发明还提供了一种可治疗或辅助保护肝损伤的制剂，所述制剂中包括本发明中的上述组合物，还可以包括制剂上所适用的辅料。其中的制剂可以是保健食品制剂或药物制剂，具体的剂型可以是常见的固体剂型或液体剂型，如片剂、胶囊剂或口服液，等。

“制剂”在本发明中是指：按照一定的剂型要求所制成的，符合相关法规的规定和标准的要求，可以直接提供给使用对象使用的产品。其中，相关法规包括但不限于《药品管理法》、《药品注册管理办法》、《药品生产质量管理规范》、《食品安全法》、《保健食品注册管理办法》，等；相关标准包括但不限于《中国药典》、《保健食品检验与评价技术规范》，等。

本发明的组合物或制剂，可以通过制药或保健食品领域的常规制备方法得到，例如：制备胶囊剂：组分配料，混合，胶囊填充。制备口服液：组分配料，溶解，灌装，灭菌。

本发明的有益效果有：

一、功效广泛。从传统医药理论出发，将墨旱莲、灵芝、金银花等几个组分进行组合和科学研究，本发明的组合物同时具有补益、疏散、安神等多重复合功效。

二、效果确切。组合物中的组分具有协同增效的作用，对肝损伤具有良好的保护作用。

本发明的组合物/制剂，在经口给予小鼠30天后，与肝损伤模型对照组比较，受试物组肝组织中丙二醛的含量降低、肝组织中甘油三酯的含量降低、肝组织中脂肪变性平均分降低，说明本发明的组合物/制剂对肝损伤能起到良好的治疗或保护作用；与联合用药相比，本发明的组合物/制剂对肝组织中丙二醛、甘油三酯、脂肪变性的影响大于联合用药，说明中各组分具有协同增效的作用。

三、安全无毒，稳定性好，可直接作用于人体。

稳定性方面：本发明的组合物/制剂在某疾病预防控制中心于温度38±1℃，相对湿度75%的条件下保存，连续考察三个月之后，在产品的性状，以及总黄酮和绿原酸等成分含量方面基本无变化，其他检测项目均符合国家关于药品和保健食品的相关规定。说明本发明的组合物/制剂稳定性很好。

安全性方面：本发明的组合物/制剂在某大学检测中心进行了经口急性毒性试验、遗传毒性试验，结果表明：受试物的小鼠经口最大耐受剂量大于15.0g/kg.bw，属无毒级。遗传毒性试验中，Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验结果均为阴性，表明受试物无致突变活性。30天喂养试验中，各剂量组动物体重、体重增加、进食量及食物利用率与阴性对照组相比均无显著性差异；血液学指标、血生化指标、脏器绝对重量及脏/体比值与阴性对照组相比无显著差异；病理组织学检查，受试物对受检脏器无明显损害。说明本发明的组合物/制剂安全性良好。

具体实施方式

下面用实施例和对比例对本发明的优选技术方案进行详细的说明，用试验例对本发明的技术效果进行详细的说明。

但是，本领域技术人员应当知道：本发明的实施并不需要限定于以下实施例和对比例中的特殊细节（如组分的具体用量、具体制备方法、溶剂浓度，等）；本发明的技术效果也并非限定于以下试验例中依据具体的组别和试验方法所得到的具体结果。

实施例1

取市售墨旱莲提取物1.6kg，市售金银花提取物4.0kg，市售10%灵芝多糖0.5kg，市售甘草酸三钾0.6kg，分别过60目筛，混合均匀。再加入辅料二氧化硅72g，混合均匀，按每粒0.22g填充入空胶囊中，得到胶囊剂。

实施例2

取市售墨旱莲饮片（墨旱莲段）80kg，用4倍（w/v）量的水分别提取4次，浓缩提取液，干燥，过60目筛，得到7kg墨旱莲提取物；取市售灵芝原药材40kg，用3倍（w/v）量水分别提取3次，浓缩提取液，干燥，过60目筛，得到400g灵芝提取物；

取市售甘草酸一钾100g、市售金银花提取物1kg，与墨旱莲提取物、灵芝提取物混合均匀，过60目筛。按每粒0.22g填充入空胶囊中，得到胶囊剂。

实施例3

取市售墨旱莲原药材40kg，用5倍（w/v）量70%（体积）乙醇分别提取3次，浓缩提取液，干燥，得到3.6kg墨旱莲提取物；取市售金银花原药材60kg，用3倍（w/v）量水分别提取3次，浓缩提取液，干燥，得到2kg金银花提取物；取市售30%灵芝多糖260g、市售甘草酸三钾250g，与墨旱莲提取物、金银花提取物一起混合均匀，过60目筛，按每粒0.22g填充入空胶囊中，得到胶囊剂。

实施例4

取市售墨旱莲提取物6kg，市售金银花提取物1.2kg，市售50%灵芝多糖100g，分别过60目筛，混合均匀，再加入甘草酸一钾300g和硬脂酸镁100g，混合均匀，按每粒0.22g填充入空胶囊中，得到胶囊剂。

实施例5

取市售墨旱莲提取物2kg，市售金银花提取物3.6kg，市售20%灵芝多糖0.6kg，市售甘草酸单铵0.4kg，分别过60目筛，混合均匀。再加入适量调味剂蔗糖，用966 L水溶解，冷藏，滤过，按每瓶50ml封装，灭菌，得到口服液。

对比例1 其他组分比例的复方制剂

组分为：墨旱莲提取物10kg，金银花提取物0.5kg，灵芝多糖1kg，甘草酸三钾20g，辅料二氧化硅72g，操作方法同实施例1，制备得到胶囊剂。

对比例2 其他组分比例的复方制剂

组分为：墨旱莲提取物0.5kg，金银花提取物5kg，灵芝多糖50g，甘草酸三钾0.8kg，辅料二氧化硅72g，操作方法同实施例1，制备得到胶囊剂。

试验例

健康KM小鼠，雄性，体重18-22g，随机分为11组（空白对照组、模型对照组、实施例1组、实施例2组、实施例3组、实施例4组、实施例5组、对比例1组、对比例2组、联合用药1组、联合用药2组），每组12只动物。

空白对照组和模型对照组给予蒸馏水，其余各组分别经口灌胃受试样品，受试样品和剂量如下：

实施例1组：给予实施例1中的制剂内容物，剂量0.07g/kg.bw。

实施例2组：给予实施例2中的制剂内容物，剂量0.44g/kg.bw。

实施例3组：给予实施例3中的制剂内容物，剂量0.44g/kg.bw。

实施例4组：给予实施例4中的制剂内容物，剂量0.30g/kg.bw。

实施例5组：给予实施例5中的制剂内容物，剂量50ml/kg.bw。

对比例1组：给予对比例1中的制剂内容物，剂量0.07g/kg.bw。

对比例2组：给予对比例2中的制剂内容物，剂量0.07g/kg.bw。

联合用药1组：分别给予实施例3中的墨旱莲提取物0.259g/kg.bw、金银花提取物0.144g/kg.bw、灵芝提取物0.019g/kg.bw、甘草酸三钾0.018g/kg.bw。

联合用药2组：分别给予实施例4中的墨旱莲提取物0.233g/kg.bw、金银花提取物0.047g/kg.bw、灵芝多糖 0.004g/kg.bw、甘草酸一钾0.012g/kg.bw。

每日给予一次，持续给予30天（动物每周称重两次，按体重调整给药量）后，除空白对照组以外，各组动物均一次性灌胃给予50%的乙醇，灌胃量12ml/kg bw。空白对照组给予蒸馏水。禁食16小时后处死动物，腹腔注射60mg/kg 的戊巴比妥钠溶液麻醉自腹主动脉采血，并取肝组织，进行各项指标的检测和病理组织学检查。

各项指标的检测，包括：给药前及末次给药后体重检测、肝组织中丙二醛、还原型谷胱甘肽、甘油三酯的含量检测。检测方法采用《保健食品检验与评价技术规范（2003版）》的方法。检测后得到各组数据。数据进行方差分析，结果见表1-表4。

病理组织学检查：从小鼠肝脏左叶中部做横切取材，冰冻切片，苏丹Ⅲ染色。从肝脏的一端视野开始记录细胞的病理变化，用40倍物镜连续观察组织切片10个视野。主要观察脂滴在肝脏的分布、范围和面积。对各组动物进行评分（评分标准：肝细胞内脂滴散在，稀少：0分；含脂滴的肝细胞不超过1/4：1分；含脂滴的肝细胞不超过1/2：2分；含脂滴的肝细胞不超过3/4：3分；肝组织几乎被脂滴代替：4分）。将得到的数据进行方差分析，结果见表5。

表1 受试物对小鼠体重的影响（x±SD）

由表1可见，小鼠的初始体重在各组间较为均衡，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，小鼠的体重在各剂量组与模型对照组间比较，差异均无显著性。表明本发明的制剂对小鼠体重无不良影响。

表2 受试物对肝组织中丙二醛含量的影响（x±SD）

组别	动物数（只）	丙二醛含量(nmol/mg组织)
			空白对照组	12	0.914±0.242
模型对照组	12	1.664±0.256<sup>#</sup>
			实施例1组	12	1.286±0.333<sup>*</sup>
实施例2组	12	1.314±0.203<sup>*</sup>
			实施例3组	12	1.161±0.227<sup>*△</sup>
实施例4组	12	1.142±0.544<sup>*□</sup>
			实施例5组	12	1.255±0.233<sup>*</sup>
对比例1组	12	1.386±0.312<sup>*</sup>
			对比例2组	12	1.392±0.276<sup>*</sup>
联合用药1组	12	1.414±0.394<sup>*</sup>
			联合用药2组	12	1.482±0.304<sup>*</sup>

注：#：模型对照组与空白对照组比较有显著差异，*：各给药组与模型对照组比较有显著差异，△：实施例3组与联合用药1组相比有显著差异，□：实施例4组与联合用药2组相比有显著差异。

由表2可见，本发明的制剂能显著减少肝损伤模型小鼠肝组织中丙二醛的含量，表明对肝脏损伤具有明显的治疗或保护作用。

另外，实施例组与联合用药组相比具有更好的效果，表明制剂中组分的协同增效作用；实施例组与对比例组相比具有更好的效果，表明组分的比例对效果有一定影响。

表3 受试物对肝组织中还原型谷胱甘肽含量的影响（x±SD）

组别	动物数（只）	还原型谷胱甘肽含量(mg/gprot)
			空白对照组	12	3.55±1.05
模型对照组	12	2.61±0.63<sup>#</sup>
			实施例1组	12	3.16±1.30
实施例2组	12	3.12±1.37
			实施例3组	12	3.27±1.01
实施例4组	12	3.24±1.28
			实施例5组	12	3.31±1.82
对比例1组	12	2.96±1.41
			对比例2组	12	2.82±1.27
联合用药1组	12	3.02±1.15
			联合用药2组	12	2.95±1.37

注：#：模型对照组与空白对照组比较有显著差异

由表3可见，本发明的制剂能增加肝损伤模型小鼠肝组织中还原型谷胱甘肽的含量，表明对肝脏损伤具有治疗或保护作用。

另外，实施例组与联合用药组相比具有更好的效果，表明制剂中组分的协同增效作用；实施例组与对比例组相比具有更好的效果，表明组分的比例对效果有一定影响。

表4 受试物对肝组织中甘油三酯含量的影响（x±SD）

注：#：模型对照组与空白对照组比较有显著差异，*：各给药组与模型对照组比较有显著差异，△：实施例3组与联合用药1组相比有显著差异，□：实施例4组与联合用药2组相比有显著差异。

由表4可见，本发明的制剂能显著减少肝损伤模型小鼠肝组织中甘油三酯的含量，表明对肝脏损伤具有明显的治疗或保护作用。

另外，实施例组与联合用药组相比具有更好的效果，表明制剂中组分的协同增效作用；实施例组与对比例组相比具有更好的效果，表明组分的比例对效果有一定影响。

表5 受试物对肝组织病理学的影响（x±SD）

注：#：模型对照组与空白对照组比较有显著差异，*：各给药组与模型对照组比较有显著差异，△：实施例3组与联合用药1组相比有显著差异，□：实施例4组与联合用药2组相比有显著差异。

由表5可见，本发明的制剂能显著减轻肝损伤模型小鼠肝组织的脂肪变性程度，表明对肝脏损伤具有明显的治疗或保护作用。

另外，实施例组与联合用药组相比具有更好的效果，表明制剂中组分的协同增效作用；实施例组与对比例组相比具有更好的效果，表明组分的比例对效果有一定影响。

Claims (6)

1.一种可以治疗或辅助保护肝损伤的组合物，其特征在于，所述组合物由墨旱莲组分、金银花组分、灵芝组分和甘草组分组成，组合物中墨旱莲组分、金银花组分、灵芝组分和甘草组分的重量比为20-60：12-36：1-5：1-4，所述墨旱莲组分为墨旱莲提取物，所述金银花组分为金银花提取物，所述灵芝组分为灵芝多糖，所述甘草组分为甘草酸或其盐。

2.权利要求1所述的组合物，其特征在于，组合物中墨旱莲组分、金银花组分、灵芝组分和甘草组分的重量比为36：20：2.6：2.5，或，60：12：1：3。

3.权利要求1-2中任一所述组合物在制备治疗肝损伤的药物中的应用。

4.权利要求1-2中任一所述组合物在制备辅助保护肝损伤的保健食品中的应用。

5.一种可以治疗或辅助保护肝损伤的制剂，其特征在于，所述制剂中包括权利要求1-2中任一所述的组合物。

6.权利要求5所述的制剂，其特征在于，所述制剂为保健食品制剂或药物制剂。