CN105231168A - 一种枸杞酵素及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种枸杞酵素及其制备方法，首次利用传统的药食两用的枸杞作为原料制备酵素，制备条件模拟酵素的自然生成条件，原理科学，设备简单，适于大规模生产，发酵所得酵素产品不仅具有丰富的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、超氧化物歧化酶、代谢产物和大量的益生菌细胞，而且具备枸杞自身的滋补保健功效，不仅填补现有技术的空白，而且具有更大的营养价值和保健功效，长期食用可达到排毒养颜、软化血管、改善微循环、提高机体抗氧化能力、延缓衰老、缓解视疲劳等的医疗价值和保健作用。
Description
技术领域
本发明涉及生物发酵领域，具体涉及一种枸杞酵素及其制备方法。
背景技术
枸杞(LyciumchinenseMill.)始载于两千多年前的《神农本草经》，并被列为上品，明朝李时珍在《本草纲目》中记载枸杞具有“久服，坚筋……补精气诸不足，明目安神，令人长寿”等功效，临床上应用有枸杞子、天精草、地骨皮，此三者分别是枸杞的果实、叶子和根皮。枸杞属约80种，隶属于茄科(Solanaceae)，主要分布于南、北美洲，以美国的亚利桑那州和阿根廷形成两个分布中心，但以南美洲为最多，欧亚大陆有10种；我国有7种，3个变种，多分布在东北南部、华北、西北至华南、西南等地；朝鲜、日本也有栽培。
枸杞主要含枸杞多糖、甜菜碱、类胡萝卜素及类胡萝卜素酯、VC、莨菪亭、多种氨基酸及微量元素K、Na、Ca、Mg、Cu、Fe、Mn、Zn、P等成分。现代药理学研究一般认为枸杞中的生物活性成分可归纳为3个主要方面：①枸杞色素中丰富的类胡萝卜素；②甜菜碱，在生物体内起甲基供应体的作用，能促进脂质代谢，具有抗脂肪肝的作用；③枸杞多糖，是一种非特异性的免疫增强剂，能提高机体免疫功能，增强抗病能力，从而达到抗衰老、抗癌、抗放射线、抗肝炎以及抗爱滋病等作用。
枸杞性味甘平，归肝、肾经，具有滋肝补肾、益精明目的功效，主治虚劳精亏、腰膝酸痛、眩晕耳鸣、内热消渴、血虚萎黄、目昏不明。现代医学证明，枸杞主要具有以下生物活性：(1)延缓衰老作用，枸杞子增加白细胞和嗜中性粒细胞数目，增强巨噬细胞的吞噬功能，提高脾淋巴细胞核酸和蛋白质的生物合成，促进白细胞介素2的产生，促进骨髓造血干细胞增殖，抑制过氧化脂质的生成，提高谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化物歧化酶的活性，并具有拟胆碱样作用，降低血清胆固醇，抑制动脉硬化等；(2)抗肿瘤作用，日本学者1979年报道，枸杞叶及果对体外培养的癌细胞有抑制作用，我国也发现宁夏枸杞叶、果、果柄对两种人癌细胞可产生不同程度的生长抑制效应；(3)增加免疫作用，枸杞多糖可以激活T淋巴细胞和B淋巴细胞，以增强细胞免疫为主，同时也能增强体液免疫功能；(4)保肝作用，枸杞中的甜菜碱盐能使大鼠血清和肝内的磷脂明显增加，对长期限给予四氯化碳所致的大鼠磷脂下降及胆固醇升高具有明显的保护作用；(5)降血糖作用，枸杞多糖对正常及糖尿病模型动物均有降血糖作用，其降血糖作用主要是通过促进胰岛β细胞释放胰岛素所产生；(6)降血脂作用，枸杞多糖对高脂血症兔的血脂有明显影响，能显著降低血清胆固醇及三酰甘油含量，降脂有效率达100％。
酵素是日本和台湾地区的说法，通常称作“酶”，其是催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体，也有专家认为酵素是由多种氨基酸、维生素及矿物质构成的活性物质，被称为“活性的物质”和“掌握所有生命活动的物质”。众所周知，一切养生手段均为气血服务，而气血来自被吸收的营养，营养素又必须在酵素的作用下分解到15μm左右的小分子，才能穿过肠壁上皮细胞，被毛细血管吸收，在口腔有淀粉酵素，胃里有胃蛋白酶，肝脏则分泌脂肪酵素，而脾脏则分泌各种综合酵素，这些酵素通过对营养素的分解促进其吸收，从而达到全面调理的综合作用。由此可知，酵素的作用至关重要。
目前，对于枸杞酵素的研究和生产尚属于空白，未见有关枸杞酵素的研究报道。
发明内容
本发明的目的即在于提供一种营养丰富的枸杞酵素及其制备方法。
本发明解决该技术问题的技术方案是：
一种枸杞酵素的制备方法，通过两次酶解、发酵后加入护色剂、干燥、粉碎获得。
具体的：
(1)分离取汁：将枸杞破碎打浆，分离种子和皮渣，得果汁；
(2)一次酶解：采用果胶酶进行一次酶解；
(3)二次酶解：采用蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶进行二次酶解；
(4)酵母发酵：将所述酶解后的枸杞果汁分离取汁，加入酵母菌发酵，分离上清液；
(5)醋酸菌发酵：在所述上清液中加入醋酸菌静置发酵，得发酵液；
(6)调配：在所述发酵液中加入护色剂，均质制得枸杞酵素液；
(7)急冷固化：将所述枸杞酵素液在进行速冻；
(8)干燥：将速冻好的枸杞酵素进行真空冷冻干燥；
(9)粉碎：将干燥好的枸杞酵素粉碎，即得枸杞酵素粉。
优选的，所述一次酶解的加热温度50～60℃，果胶酶的加入量10～15g/T，酶解时间2～3h；所述二次酶解的加热温度40～50℃，蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的加入量15～20g/T，酶解时间1～2h；所述酵母发酵的温度为30～35℃，pH为4～6，酵母菌接种量为2～5％，发酵1～2天；所述醋酸菌发酵的温度为30～35℃，醋酸菌的接种量为2～5％，发酵10～24h；所述护色剂添加量为0.1～0.5％；所述急冷固化的温度为-40℃左右。
进一步优选的，所述一次酶解的加热温度58℃，果胶酶的加入量12g/T，酶解时间2h；所述二次酶解的加热温度48℃，蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的加入量15g/T，酶解时间2h；所述酵母发酵的温度为32℃，pH为6，酵母菌接种量为3％，发酵2天；所述醋酸菌发酵的温度为32℃，醋酸菌的接种量为3％，发酵12h；所述护色剂添加量为0.2％；所述急冷固化的温度为-40℃。
所述果胶酶是聚半乳糖醛酸酶、果胶裂解酶和果胶酯酶中的任意一种或组合。
所述酵母菌是酒精酵母和生香酵母中的任意一种。
所述护色剂可以是抗坏血酸、异抗坏血酸、柠檬酸中的任意一种或组合。
本发明的有益效果：
(1)本发明首次利用传统的药食两用的枸杞作为原料制备酵素，发酵所得酵素产品不仅具有丰富的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、超氧化物歧化酶、代谢产物和大量的益生菌细胞，而且具备枸杞自身的滋补保健功效，不仅填补现有技术的空白，而且具有更大的营养价值和保健功效，长期食用可达到排毒养颜、软化血管、改善微循环、提高机体抗氧化能力、延缓衰老、缓解视疲劳等的医疗价值和保健作用。
(2)本发明的枸杞酵素的制备方法，制备条件模拟酵素的自然生成条件，原理科学，设备简单，适于大规模生产，所得酵素的主要成分还有微量元素、矿物质、维生素、氨基酸、蛋白质、碳水化合物等，具有减轻肠道负荷，激活健康循环体系，调节微生态平衡，增强人体细胞活力，净化血液，促进新陈代谢，增强新陈代谢功能，可广泛用于保健品或化妆品领域。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例或份数按重量计。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
实施例1：
挑选优质枸杞，清洗，沥干；将枸杞破碎打浆，分离种子和皮渣，得果汁；一次酶解：采用聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶进行一次酶解，加热温度50℃，聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶的加入量15g/T，酶解时间2h；采用蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶进行二次酶解，加热温度40℃，蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的加入量15g/T，酶解时间2h；将所述酶解后的枸杞果汁分离取汁，加入酒精酵母菌发酵，温度为30℃，pH为6，酒精酵母菌接种量为2％，发酵2天，分离上清液；在所述上清液中加入醋酸菌静置发酵，温度为30℃，醋酸菌的接种量为2％，发酵10h，得发酵液；在所述发酵液中加入0.1％异抗坏血酸，均质制得枸杞酵素液；将所述枸杞酵素液在进行-40℃速冻；将速冻好的枸杞酵素进行真空冷冻干燥；将干燥好的枸杞酵素粉碎，即得枸杞酵素粉。
实施例2：
挑选优质枸杞，清洗，沥干；将枸杞破碎打浆，分离种子和皮渣，得果汁；采用果胶裂解酶和果胶酯酶进行一次酶解，加热温度60℃，果胶裂解酶和果胶酯酶的加入量10g/T，酶解时间2h；采用蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶进行二次酶解；加热温度40℃，蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的加入量15g/T，酶解时间2h；将所述酶解后的枸杞果汁分离取汁，加入生香酵母菌发酵，发酵的温度为30℃，pH为4，生香酵母菌接种量为5％，发酵2天；分离上清液；在所述上清液中加入醋酸菌静置发酵，温度为30℃，醋酸菌的接种量为5％，发酵20h；得发酵液；在所述发酵液中加入0.5％抗坏血酸，均质制得枸杞酵素液；将所述枸杞酵素液在-40℃进行速冻；将速冻好的枸杞酵素进行真空冷冻干燥；将干燥好的枸杞酵素粉碎，即得枸杞酵素粉。
实施例3：
挑选优质枸杞，清洗，沥干；将枸杞破碎打浆，分离种子和皮渣，得果汁；采用果胶酯酶进行一次酶解，加热温度58℃，果胶酯酶的加入量12g/T，酶解时间2h；采用蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶进行二次酶解，加热温度48℃，蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的加入量15g/T，酶解时间2h；将所述酶解后的枸杞果汁分离取汁，加入生香酵母菌发酵，温度为32℃，pH为6，生香酵母菌接种量为3％，发酵2天，分离上清液；在所述上清液中加入醋酸菌静置发酵，温度为32℃，醋酸菌的接种量为3％，发酵12h，得发酵液；在所述发酵液中加入0.2％柠檬酸，均质制得枸杞酵素液；将所述枸杞酵素液在-40℃进行速冻；将速冻好的枸杞酵素进行真空冷冻干燥；将干燥好的枸杞酵素粉碎，即得枸杞酵素粉。
实施例4：枸杞酵素活性成分含量
将实施例1～3的枸杞酵素分别按照GB/T18672～2002中枸杞多糖测定方法和DB13/T385～1998食品总黄酮测定方法和GB/T5009.171～2003保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定方法分别测量多糖和总黄酮含量以及SOD活性，取步骤(2)所得枸杞果汁作为对比例。结果如表1所示：
表1枸杞酵素活性成分含量
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对比例 | |
| 多糖(％) | 18.4 | 17.3 | 19.8 | 10.3 |
| 总黄酮(g/L) | 7.23 | 8.32 | 9.40 | 4.09 |
| SOD活性(CFU/mL) | 153.65 | 155.32 | 159.94 | 113.46 |
结果显示，本发明的枸杞酵素包含丰富的多糖和总黄酮活性成分，具有优异的SOD活性，较枸杞果汁具有显著提高，取得了显著的技术效果，是一种非常优异的保健产品。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。
Claims (8)
1.一种枸杞酵素的制备方法，其特征在于，通过两次酶解、发酵后加入护色剂、干燥、粉碎获得。
2.根据权利要求1所述的枸杞酵素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）分离取汁：将枸杞破碎打浆，分离种子和皮渣，得果汁；
（2）一次酶解：采用果胶酶进行一次酶解；
（3）二次酶解：采用蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶进行二次酶解；
（4）酵母发酵：将所述酶解后的枸杞果汁分离取汁，加入酵母菌发酵，分离上清液；
（5）醋酸菌发酵：在所述上清液中加入醋酸菌静置发酵，得发酵液；
（6）调配：在所述发酵液中加入护色剂，均质制得枸杞酵素液；
（7）急冷固化：将所述枸杞酵素液在进行速冻；
（8）干燥：将速冻好的枸杞酵素进行真空冷冻干燥；
（9）粉碎：将干燥好的枸杞酵素粉碎，即得枸杞酵素粉。
3.根据权利要求2所述的枸杞酵素的制备方法，其特征在于：
所述一次酶解的加热温度50~60℃，果胶酶的加入量10~15g/T，酶解时间2~3h；所述二次酶解的加热温度40~50℃，蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的加入量15~20g/T，酶解时间1~2h；所述酵母发酵的温度为30~35℃，pH为4~6，酵母菌接种量为2~5％，发酵1~2天；所述醋酸菌发酵的温度为30~35℃，醋酸菌的接种量为2~5%，发酵10~24h；所述护色剂添加量为0.1~0.5％；所述急冷固化的温度为~40℃左右。
4.根据权利要求3所述的枸杞酵素的制备方法，其特征在于：
所述一次酶解的加热温度58℃，果胶酶的加入量12g/T，酶解时间2h；所述二次酶解的加热温度48℃，蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的加入量15g/T，酶解时间2h；所述酵母发酵的温度为32℃，pH为6，酵母菌接种量为3％，发酵2天；所述醋酸菌发酵的温度为32℃，醋酸菌的接种量为3%，发酵12h；所述护色剂添加量为0.2％；所述急冷固化的温度为~40℃。
5.根据权利要求3所述的枸杞酵素的制备方法，其特征在于：所述果胶酶是聚半乳糖醛酸酶、果胶裂解酶和果胶酯酶中的任意一种或组合。
6.根据权利要求3所述的枸杞酵素的制备方法，其特征在于：所述酵母菌是酒精酵母和生香酵母中的任意一种。
7.根据权利要求3所述的枸杞酵素的制备方法，其特征在于：所述护色剂可以是抗坏血酸、异抗坏血酸、柠檬酸中的任意一种或组合。
8.根据权利要求1~7任一项所述的制备方法获得的枸杞酵素。
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