CN104645320A - 一种创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂及其制备方法和应用，按重量分数比，其原料组成为：贻贝粘蛋白0.15～0.2％，蛋白保护剂0.1～5％，增黏剂0.1～5％，稳定剂0.1～5％，防腐剂，0.1～5％，湿润剂1～10％，pH调节剂0.1～5％，药用溶解水64.8～98.35％。本发明采用卡波姆作为基质材料，具有延展性好、易于涂抹和附着于皮肤，对皮肤及粘膜无刺激性并能吸收组织渗透液，有利于分泌物的排出；无油腻性，释药迅速，与皮肤组织耦合效果好等特性。
Description
技术领域
本发明属于药物制备技术领域，特别涉及一种创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂及其制备方法和应用。
背景技术
组织、器官的丧失或功能障碍是人类健康所面临的主要危害之一，也是人类疾病和死亡的最主要原因。据统计，我国每年因烧伤、机械损伤或慢性皮肤溃疡而需要医治的患者高达数千万。医用修复材料是人类健康的重要保证，其应用不仅挽救了数以千万计危重病人的生命，而且为提高患者生命质量和健康水平、降低医疗成本发挥了重要作用。国际市场医用修复材料产业高速发展，正在成长为世界经济的一个支柱性产业，而我国医用修复材料仍以传统产品为主，存在粘连创面、阻菌性差、保湿性差等缺陷，严重缺乏自主创新。特别是近年来，由于疾病、自然灾害、交通工伤的频繁发生、人口老龄化，以及人类对自身健康的关注度随经济发展提高，导致临床上对医用修复材料的需求急剧增加。
贻贝粘蛋白(Mussel adhesive protein，MAP)，也叫紫贻贝足丝蛋白，是海洋贝类紫贻贝足丝中分泌的一种蛋白质，贻贝依靠它粘附于各类物体的表面，形成抗水的结合，耐受风浪的冲击。其具有三个被国际认知的功能：促进细胞黏附、爬行和生长；广谱粘合；形成抗海水的保护膜。可用于手术切口粘接、胎膜修复、载药支架、微电子设备涂层等。
目前贻贝粘蛋白创面修复材料均为喷剂剂型，但在临床应用中喷剂不能满足各临床科室的要求，如妇科等，因此需要在保持贻贝粘蛋白促愈合及止痒活性基础上开发更多的剂型。凝胶剂是目前广泛使用的一种剂型，它能较长时间与作用部位发生紧密接触，有较好的生物粘附性，并可提高活性成分从接触部位的吸收，避开首过效应，提高活性成分的生物利用度。
发明内容
本发明的目的是提供一种创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，不影响贻贝粘蛋白所携带正电荷、具有抗氧化活性。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，按重量分数比，其原料组成为：
优选的，所述的贻贝粘蛋白为干粉态贻贝粘蛋白，其纯度为85～95％。
优选的，所述的蛋白保护剂为人血白蛋白。
优选的，所述的增黏剂为卡波姆910、934、940、941中的一种或几种。
优选的，所述的稳定剂为十二烷基硫酸钠(SDS)、吐温(Tween)中的一种或几种。
优选的，所述的防腐剂为尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、苯酚中的一种或几种。
优选的，所述的湿润剂为甘油或丙二醇中的一种或几种。
优选的，所述的pH调节剂为乙酸、乙酸-乙酯中的一种。
本发明的另一个目的是提供一种上述创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂的制备方法，其技术方案为：
一种创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂的制备方法，包括以下步骤：
a.基质溶胀及灭菌：将符合药典标准的增黏剂、稳定剂、防腐剂、湿润剂按照比例混合，搅拌均匀，加入药用溶解水充分溶胀，用pH调节剂调节pH值至3.8～5.8，使其形成透明凝胶，在0.1～0.15MPa压力，120～126℃条件下，灭菌15～30min，冷却备用；
b.蛋白除菌过滤：在贻贝粘蛋白原料药溶液中加入人血白蛋白，用药用溶解水将二者稀释，充分混匀，在无菌条件下用0.22μm滤膜过滤除菌；
c.凝胶剂制备：在无菌条件下，将步骤a和b的两种物质充分混合，分装，于4℃保存。
本发明的再一个目的是提供上述创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂在创面修复方面的应用。上述创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂可直接涂抹于创面部位，使用方便，增加患者的依从性和临床应用。
本发明的有益效果是：
1.本发明采用卡波姆作为基质材料，具有延展性好、易于涂抹和附着于皮肤，对皮肤及粘膜无刺激性并能吸收组织渗透液，有利于分泌物的排出；无油腻性，释药迅速，与皮肤组织耦合效果好等特性。
2.本发明配方合理，可达到稳定负载贻贝粘蛋白于凝胶剂中，并保持其生物活性，促进创面有效愈合。采用的组分均对皮肤无毒副作用、无刺激性，便于清洁。
3.本发明产品可直接涂抹于创面部位，使用方便，增加患者的依从性和临床应用。
具体实施方式
一种创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，按重量分数比，其原料组成为：
所述的贻贝粘蛋白为干粉态贻贝粘蛋白，其纯度为85～95％。
所述的蛋白保护剂为人血白蛋白。
所述的增黏剂为卡波姆910、934、940、941中的一种或几种。
所述的稳定剂为十二烷基硫酸钠(SDS)、吐温(Tween)中的一种或几种。
所述的防腐剂为尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、苯酚中的一种或几种。
所述的湿润剂为甘油或丙二醇中的一种或几种。
所述的pH调节剂为乙酸、乙酸-乙酯中的一种。
一种创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂的制备方法，包括以下步骤：
a.基质溶胀及灭菌：将符合药典标准的增黏剂、稳定剂、防腐剂、湿润剂按照比例混合，搅拌均匀，加入药用溶解水充分溶胀，用pH调节剂调节pH值至3.8～5.8，使其形成透明凝胶，在0.1～0.15MPa压力，120～126℃条件下，灭菌15～30min，冷却备用；
b.蛋白除菌过滤：在贻贝粘蛋白原料药溶液中加入人血白蛋白，用药用溶解水将二者稀释，充分混匀，在无菌条件下用0.22μm滤膜过滤除菌；
c.凝胶剂制备：在无菌条件下，将步骤a和b的两种物质充分混合，分装，于4℃保存。
上述创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂可用于创面修复方面，其可直接涂抹于创面部位，使用方便，增加患者的依从性和临床应用。
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
取卡波姆9400.1g，十二烷基硫酸钠1g，尼泊金甲酯1g，甘油10g，加入药用溶解水至80g，混合均匀，用乙酸-乙酯调节pH至3.8，然后在0.1MPa、120℃条件下，高压灭菌15min，冷却到室温，制成基质部分。在基质中加入人血白蛋白1g，贻贝粘蛋白0.15g，并加入药用溶解水至100g，缓慢搅拌均匀，制成贻贝粘蛋白凝胶剂。
实施例2
取卡波姆9101g，吐温0.1g，尼泊金乙酯2g，丙二醇8g，加入药用溶解水至80g，混合均匀，用乙酸调节pH至3.8～5.8，然后在0.15MPa、120℃条件下，高压灭菌20min，冷却到室温，制成基质部分。在基质中加入人血白蛋白5g，贻贝粘蛋白0.16g，并加入药用溶解水至100g，缓慢搅拌均匀，制成贻贝粘蛋白凝胶剂。
实施例3
取卡波姆9345g，吐温3g，苯酚0.1g，甘油和丙二醇的混合物5g，加入药用溶解水至80g，混合均匀，用乙酸-乙酯调节pH至4.8，然后在0.15MPa、126℃条件下，高压灭菌25min，冷却到室温，制成基质部分。在基质中加入人血白蛋白2g，贻贝粘蛋白0.17g，并加入药用溶解水至100g，缓慢搅拌均匀，制成贻贝粘蛋白凝胶剂。
实施例4
取卡波姆9413g，十二烷基硫酸钠和吐温的混合物5g，尼泊金甲酯和尼泊金乙酯的混合物1g，甘油1g，加入药用溶解水至80g，混合均匀，用乙酸调节pH至4.0，然后在0.1MPa、126℃条件下，高压灭菌30min，冷却到室温，制成基质部分。在基质中加入人血白蛋白3g，贻贝粘蛋白0.18g，并加入药用溶解水至100g，缓慢搅拌均匀，制成贻贝粘蛋白凝胶剂。
实施例5
取卡波姆910、934、940的混合物2g，十二烷基硫酸钠1g，尼泊金甲酯5g，丙二醇8g，加入药用溶解水至80g，混合均匀，用乙酸调节pH至4.5，然后在0.15MPa、120℃条件下，高压灭菌20min，冷却到室温，制成基质部分。在基质中加入人血白蛋白0.1g，贻贝粘蛋白0.2g，并加入药用溶解水至100g，缓慢搅拌均匀，制成贻贝粘蛋白凝胶剂。
本发明涉及到检定实验和相关实验包括：
1.稳定性实验
通过测定不同温度下，凝胶剂的稳定性实验结果表明，在4℃、25℃保存12个月，凝胶剂无霉变现象，其外观、pH值、失水、均匀性等理化指标均未发生明显变化；凝胶剂的生物学活性在25℃室温条件下稳定性差，放置3个月后活性有较明显的降低，而在4℃凝胶剂生物学活性无明显变化。
表1贻贝粘蛋白凝胶剂在25℃稳定性试验结果
| 时间(月) | 生物学活性(IU/g) | 理化指标 |
| 0 | 2.50×104 | —— |
| 1 | 2.25×104 | 无变化 |
| 2 | 2.12×104 | 无变化 |
| 3 | 1.95×104 | 无变化 |
| 4 | 1.35×104 | 无变化 |
| 5 | 1.02×104 | 无变化 |
| 6 | 0.58×104 | 无变化 |
表2贻贝粘蛋白凝胶剂在4℃稳定性试验结果
| 时间(月) | 生物学活性(IU/g) | 理化指标 |
| 0 | 2.50×104 | —— |
| 2 | 2.45×104 | 无变化 |
| 4 | 2.37×104 | 无变化 |
| 6 | 2.32×104 | 无变化 |
| 8 | 2.25×104 | 无变化 |
| 10 | 2.22×104 | 无变化 |
| 12 | 2.16×104 | 无变化 |
2.微生物限度实验
按照《中华人民共和国药典》二部附录XIJ检验绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌，结果符合要求。
3.皮肤刺激实验
在豚鼠皮肤刺激实验中，分别单次、多次以本发明所述凝胶剂涂抹于脱毛区后观察，皮肤无发红、发疹、水泡等现象，结果表明本发明所述凝胶剂无刺激反应。
4.皮肤过敏实验
在豚鼠皮肤刺激实验中，将本发明所述凝胶剂涂抹于脱毛区，间隔1周连续三次，最后一次致敏后14天，将凝胶剂涂抹于激发区，观察到无发红、发疹、水泡等现象，结果表明本发明所述凝胶剂无过敏反应。
Claims (10)
1.一种创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，其特征在于：按重量分数比，其原料组成为：
2.如权利要求1所述的创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，其特征在于：所述的贻贝粘蛋白为干粉态贻贝粘蛋白，其纯度为85～95％。
3.如权利要求1所述的创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，其特征在于：所述的蛋白保护剂为人血白蛋白。
4.如权利要求1所述的创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，其特征在于：所述的增黏剂为卡波姆910、934、940、941中的一种或几种。
5.如权利要求1所述的创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，其特征在于：所述的稳定剂为十二烷基硫酸钠、吐温中的一种或几种。
6.如权利要求1所述的创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，其特征在于：所述的防腐剂为尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、苯酚中的一种或几种。
7.如权利要求1所述的创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，其特征在于：所述的湿润剂为甘油或丙二醇中的一种或几种。
8.如权利要求1所述的创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂，其特征在于：所述的pH调节剂为乙酸、乙酸-乙酯中的一种。
9.一种创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
a.基质溶胀及灭菌：将符合药典标准的增黏剂、稳定剂、防腐剂、湿润剂按照比例混合，搅拌均匀，加入药用溶解水充分溶胀，用pH调节剂调节pH值至3.8～5.8，使其形成透明凝胶，在0.1～0.15MPa压力，120～126℃条件下，灭菌15～30min，冷却备用；
b.蛋白除菌过滤：在贻贝粘蛋白原料药溶液中加入人血白蛋白，用药用溶解水将二者稀释，充分混匀，在无菌条件下用0.22μm滤膜过滤除菌；
c.凝胶剂制备：在无菌条件下，将步骤a和b的两种物质充分混合，分装，于4℃保存。
10.如权利要求1-8任一所述的创面修复用贻贝粘蛋白凝胶剂在创面修复方面的应用。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C53 | Correction of patent of invention or patent application | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Yao Zhengjun Inventor after: Xu Dan Inventor after: Zhou Jintang Inventor after: Lan Tianning Inventor after: Liu Peijiang Inventor before: Yao Zhengjun Inventor before: Xu Dan Inventor before: Zhou Jintang Inventor before: Liu Peijiang |
|
| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: YAO ZHENGJUN XU DAN ZHOU JINTANG LIU PEIJIANG TO: YAO ZHENGJUN XU DAN ZHOU JINTANG LAN TIANNING LIU PEIJIANG |
|
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20150527 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |