CN103405747B - 丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂的制备、产品及用途 - Google Patents

Abstract

本发明的目的是公开一种丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂的制备、产品及用途。即以丙氨酰谷氨酰胺为主药成分的口腔溃疡局部用凝胶制剂，该制剂的特点是能够迅速减轻患部疼痛、疗效确切并能长时间粘附于溃疡表面保护创面、缓慢释放药物、刺激性小、生物相容性良好且具有兼顾口腔溃疡治疗、免疫调节、预防复发为一体，患者使用方便易于携带保存、价格便宜。

Description

丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂的制备、产品及用途

技术领域

    本发明涉及药物制剂领域，具体是一种含丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）的治疗复发性口腔溃疡的生物粘附性制剂。

背景技术

复发性口腔溃疡以局限性口腔黏膜溃疡、疼痛、反复发作、缠绵难愈为特征，是最常见的口腔粘膜病，普通人群的发病率约为20%左右。由于该病所致的剧烈疼痛常常给患者带来极大痛苦和不便，且此起彼伏、终年不断，严重影响患者生活质量，故针对该病的预防和治疗研究具有重要的临床价值。

临床治疗该病的常用药物多种多样，涵盖了抗生素类、激素类、止痛剂类、腐蚀性类、消化系统类、生物制品类、维生素类药物，以及各种中药，还有大量民间偏方、秘方等等。虽然这些药物有一定的疗效，但均存在很多不足：广谱抗生素和化学合成抗菌药长期使用的同时，也破坏了口腔的微生物平衡；激素类药物的使用时间应尽量控制在1周之内，时间过长可能会引起下丘脑-垂体-肾上腺轴的抑制，且会进一步降低局部免疫力引起复发；腐蚀性药物局部刺激性较强，还可能会抑制患者的呕吐反射，在进食时要防止食物和水误入呼吸道。因此使用极为不便；生物制品如碱性成纤维细胞生长因子制剂虽然在促进溃疡愈合及缓解疼痛方面疗效确切，是目前口腔医学界公认的首选药物。但其价格昂贵，需低温冷藏，不便于患者自行携带、使用和保存；以上药物对口腔溃疡复发性和频发性的效果几乎无效，在一定程度上限制了其临床应用。

发明内容

本发明的目的是针对现有制剂的不足，开发一种以丙氨酰谷氨酰胺为主药成分的口腔溃疡局部用凝胶制剂，该制剂的特点是能够迅速减轻患部疼痛、疗效确切并能长时间粘附于溃疡表面保护创面、缓慢释放药物、刺激性小、生物相容性良好且具有兼顾口腔溃疡治疗、免疫调节、预防复发为一体，患者使用方便易于携带保存、价格便宜。

为实现本发明的目的所采用的技术方案如下：

一种丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂的制备方法，组成及配比为：丙氨酰谷氨酰胺5~10份，呱仑酸钠0.02~0.05份，茶多酚5~10份，尿囊素5~10份，薄荷脑1~2份，高分子凝胶材料1~25份，生物粘附剂0.1~5份；

其制备包括以下步骤：

1）将生物粘附剂分散于注射用水中，再加入高分子凝胶材料；或将高分子凝胶材料加入注射用水中，再加入生物粘附剂；无论以何种顺序加入，均得到混合物；

2）将丙氨酰谷氨酰胺、呱仑酸钠、茶多酚、尿囊素和薄荷脑加入到步骤2）获得的混合物中，待溶解完全，即获得产品。

作为优选，所述组成及配比中还包括：高分子成膜材料1~15份；步骤1）开始之间，先向所述注射用水中加入高分子成膜材料。

即组成及配比为：丙氨酰谷氨酰胺5~10份，呱仑酸钠0.02~0.05份，茶多酚5~10份，尿囊素5~10份，薄荷脑1~2份，高分子凝胶材料1~25份，生物粘附剂0.1~5份，高分子成膜材料1~15份；

其制备包括以下步骤：

1）高分子成膜材料溶于注射用水中，使其充分溶解或溶胀；即获得混合物体系

2）高分子凝胶材料溶于步骤1）所获得的体系中，使其充分溶解或溶胀；即获得凝胶体系；

3）然后将生物粘附剂分散于步骤2）所获得的凝胶体系中，静置，使其分散均匀；值得说明的是，步骤2和3的顺序可换；即获得新的溶液体系；

4）将丙氨酰谷氨酰胺、呱仑酸钠、茶多酚、尿囊素和薄荷脑加入到步骤3）所获得的体系中，待溶解完全，即获得产品。作为优选，高分子凝胶材料是泊洛沙姆407、壳聚糖、或聚乙二醇及其酯的嵌段共聚物。

作为优选，生物粘附剂是羟丙甲基纤维素、卡波姆或透明质酸钠。

作为优选，：高分子成膜材料是聚乙烯类、聚丙烯类、纤维素类或天然高分子材料。

采用上述所述的丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂的制备方法所获得的丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂产品，即丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂。。

上述丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂用于制备治疗复发性口腔溃疡的药品。该药品中，丙氨酰谷氨酰胺为主药，呱仑酸钠、茶多酚、尿囊素、薄荷脑为复方成分。即本发明公开的丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂产品可以作为治疗复发性口腔溃疡药物。必要时，这些药物中除了丙氨酰谷氨酰胺外，还具有一种或多种药学上可以接受的辅料、载体等。以本发明所公开的丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂产品用于治疗复发性口腔溃疡时，主要通过口腔局部涂抹或粘贴，可以按本领域的常规方法制成凝胶剂、糊剂、膏剂、膜剂、涂膜剂等剂型。

值得说明的是，丙氨酰谷氨酰胺具有增加葡萄糖胺、氨基已糖、粘蛋白的生物合成和促进溃疡组织再生等生物活性，还可改善机体代谢、氮平衡，增加淋巴细胞总数、有效调节免疫应答、改善机体代谢状况、提高机体抗氧化能力的作用；呱仑酸钠具有抗炎、促进肉芽形成和上皮细胞新生的作用；茶多酚具有杀菌、抑菌、消炎的作用；尿囊素具有促进细胞生长、加快伤口愈合、防止溃疡愈合后瘢痕组织生成等作用，是皮肤创伤的良好愈合剂和抗溃疡药。薄荷脑具有芳香止痛、清凉和局部麻醉的作用。这些成分的组合对于溃疡的愈合及复发起到协同作用，具有显著的治疗效果。

本发明另一方面利用了高分子凝胶材料可形成生物粘附性好、组织亲和力强、刺激性小、生物相容性良好的凝胶，生物粘附性材料能使制剂长时间粘附于溃疡表面保护创面、缓慢释放药物，高分子成膜材料可形成薄膜的特点。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明创造作进一步说明，但不应该理解为本发明创造上述主题范围仅限于下述实施例。在不脱离本发明创造上述技术思想的情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段，做出各种替换和变更，均应包括在本发明创造的保护范围内。

实施例1

组成：

将羟丙甲基纤维素分散于适量的80℃注射用水中（优选：1%，w/w，羟丙甲基纤维素/水），待完全溶解，放置于4℃冰箱中冷却。所述羟丙甲基纤维素是一种生物粘附剂。本实施例中，羟丙甲基纤维素可以替换成一定重量的卡波姆或透明质酸钠。

称取泊洛沙姆407（2.5g）溶于上述体系中，再放置于4℃冰箱中冷藏，待其充分溶解。最后按上述配比，依次加入：丙氨酰谷氨酰胺、呱仑酸钠、茶多酚、尿囊素和薄荷脑，待溶解完全，即获得产品。本实施例中，所述泊洛沙姆407也可以替换成一定重量的壳聚糖，或聚乙二醇及其酯。

本实例中制备出的丙氨酰谷氨酰胺制剂除具有较好的生物粘附性外，还具有温度敏感的特点，即在低温状态下为自由流动的液体，而体温时转变为半固体凝胶，患者在使用时更为方便。

实施例2

组成：

称取壳聚糖0.15g溶于注射用水中，室温下放置，待其充分溶胀后，将透明质酸钠分散于上述壳聚糖水溶液体系中，静置，使其分散均匀，按上述配比，依次加入：丙氨酰谷氨酰胺、呱仑酸钠、茶多酚、尿囊素和薄荷脑，待溶解完全，即获得产品。

本实例制备的丙氨酰谷氨酰胺制剂除具有很好的生物粘附性外，还具有与溃疡表面良好的生物相容性，这是由于壳聚糖作用于口腔溃疡表面时，由于其氨基葡聚糖分子带有正电荷与带有负电荷的溃疡表面可长久且紧密地粘附，同时使其中的药物成分能缓慢地释放，在局部长时间地维持稳定的药物浓度，发挥治疗作用。另外，壳聚糖具有更高的蛋白吸附能力和有选择性的高度抑制口腔链球菌生长的作用，同时并不影响其他有益细菌的生长。壳聚糖本身可在体内降解为氨基葡聚糖，而氨基葡聚糖是人体软骨素、透明质酸的主要组成部分，对人体无毒，无致癌、致畸、致突变作用，同时其降解物易吸收，无抗原性，不致敏，无溶血，无排异现象。

实施例3

称取泊洛沙姆407（2.5g）溶于冷注射用水中，放置于4℃冰箱中冷藏，待其充分溶解后，将卡波姆分散于上述泊洛沙姆407水溶液体系中，静置，使其分散均匀，按上述配比，依次加入：丙氨酰谷氨酰胺、呱仑酸钠、茶多酚、尿囊素和薄荷脑，待溶解完全，即获得产品。

本实例中制备出的丙氨酰谷氨酰胺制剂强度较好，这是由于卡波姆除了可以增强制剂粘附性外，还可显著提高制剂的机械强度。

实施例4：

称取聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇嵌段共聚物（PLGA-PEG-PLGA）约2.0g溶于注射用水中，在磁力搅拌条件下使其充分溶解，然后将透明质酸钠分散于上述聚合物水溶液体系中，静置，使其分散均匀，按上述配比，依次加入：丙氨酰谷氨酰胺、呱仑酸钠、茶多酚、尿囊素和薄荷脑，待溶解完全，即获得产品。

本实例中制备出的丙氨酰谷氨酰胺制剂具有良好的生物可降解性和较长的维持时间。PLGA-PEG-PLGA是聚乙二醇及其酯的嵌段共聚物的一种，该聚合物为化学合成制得，能在体内逐渐降解为小分子物质，且降解时间比其他凝胶材料长，降解时间的长短与聚合物分子组成有关。

实施例5：

称取聚乙烯醇（所述聚乙烯醇可以替换成等量的聚乙烯、聚丙烯、纤维素）0.95g溶于注射用水中，室温下放置，待其充分溶胀后，加入羟丙甲基纤维素0.25g并加热至80℃待完全溶解后，冷却至室温；称取壳聚糖0.03g溶于上述溶液中，室温下放置待其充分溶胀后，使其混合均匀，静置；最后按上述配比，依次加入：丙氨酰谷氨酰胺、呱仑酸钠、茶多酚、尿囊素和薄荷脑，待溶解完全后，涂膜，干燥后，脱膜，切割、即获得产品。

本实例中制备出的丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性凝胶膜具有良好的黏附性及创面保护性，且具有较长的治疗作用。聚乙烯醇、羟丙甲基纤维素是常用的成膜材料，具有很好的粘性和成膜性，无毒，无刺激性，性质稳定，与其他药物不起作用，不影响药效，成膜性能好且使有效成分具有缓释作用。

实施例6：

下面就本发明丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂的药效学动物试验做进一步说明。

（1）动物模型

采用创伤性口腔溃疡动物模型，动物模型建立方法：用一个内径0.6cm，长3cm的玻璃管垂直固定于家兔口腔粘膜表面，向管内注入体积分数为30％的冰醋酸0.2ml，30秒后用棉签蘸出冰醋酸，次日形成溃疡，溃疡直径一般大约0.2~0.3cm。

（2）溃疡愈合情况对比

溃疡形成后，分别在溃疡面使用丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性凝胶产品（通过实施例1～5获得）为活性成分的药物、bFGF（生长因子）、和空白对照组（即不采取任何治疗措施），肉眼观察溃疡愈合情况，每六小时使用并记录一次，以观察不到粘膜溃疡和充血作为愈合标准。

表1丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性凝胶、bFGF和空白对照组溃疡愈合情况表

注：经K-W秩和检验，自制凝胶组溃疡愈合速度最快，P＜0.05

使用30%冰醋酸烧灼法建立溃疡模型的优点是不需麻醉、用量准确、容易控制、诱发的溃疡重复性好。经过54h，动物口腔粘膜上的溃疡均愈合，丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性凝胶组溃疡愈合最快（P＜0.05），且于18h内，所有溃疡均愈合。

Claims (1)

1. 一种丙氨酰谷氨酰胺生物粘附性制剂的制备方法， 其特征在于 ： 组成及配比为 ： 丙氨酰谷氨酰胺5~10份， 呱仑酸钠0.02~0.05份， 茶多酚5~10份， 尿囊素5~10份， 薄荷脑1~2份， 高分子凝胶材料 1~25 份， 生物粘附剂0.1~5 份 ；其制备包括以下步骤 ：

1）将生物粘附剂分散于注射用水中， 再加入高分子凝胶材料， 放置于4℃冰箱中冷却；

或将高分子凝胶材料加入注射用水中， 再加入生物粘附剂 ， 放置于4℃冰箱中冷却；

2） 将丙氨酰谷氨酰胺、 呱仑酸钠、 茶多酚、 尿囊素和薄荷脑加入到步骤2） 获得的混合物中， 待溶解完全， 即获得产品。