CN117398511A - 激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料及其制备方法，属于医用敷料技术领域。本发明公开了激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料包括以下重量份原料：贻贝粘蛋白0.15‑1份、卡波姆0.1‑0.5份、丙二醇5‑20份、甘油5‑20份、纯化水59‑90份。在贻贝粘蛋白中加入缓冲剂和表面活性剂对贻贝黏蛋白进行预处理，表面活性剂与贻贝粘蛋白形成胶束结构，同时降低贻贝粘蛋白与液体分子之间的界面张力，使贻贝粘蛋白更好的分散在溶液中。缓冲剂在贻贝粘蛋白溶液中起到稳定作用。本发明通过调整各个组分的用量，并结合制备工艺流程，可制出激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料。
Description
技术领域
本发明属于医用敷料技术领域，涉及一种激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料及其制备方法。
背景技术
现代医用敷料通常是由合成类或天然类高分子制成，这类敷料按照材料可以分为薄膜、泡沫、海藻酸盐、水凝胶和水胶体敷料。薄膜敷料是非吸水性的，不适用于伤口渗出液较多的伤口。泡沫敷料具有高度的吸水性能，不适用于干燥的表皮以及渗透液较少的伤口。水凝胶敷料对生物机体无刺激性，对生物组织无反应性，对代谢产物有可渗透性。水凝胶适用于干燥的慢性伤口和坏死的伤口，压力性溃疡和烧伤。
贻贝粘蛋白是由海洋贻贝分泌且具有特殊黏性的一种多酚蛋白，具有高强度、高韧性和防水性等特征。贻贝粘蛋白有60％以上的羟基氨基酸，其中10％为DOPA基团使其具有很强的抗炎抗氧化活性。此外，烧伤后的伤口表面神经末梢迅速增殖，炎性细胞释放出大量的化学介质会出现不同程度的瘙痒，贻贝粘蛋白中的多巴基团产生多巴神经递质，递质作用于纹状体内的两种类型多巴胺受体，封闭皮质神经末梢使神经末梢失活，最终达到缓解瘙痒的目的。贻贝粘蛋白还能与血小板和干细胞等共存，起到一定的止血作用。但是贻贝粘蛋白高浓度且在较低pH值的情况下，会引起细胞团聚使得细胞毒性增强。另外，贻贝粘蛋白溶液不稳定，加入的部分缓冲剂会产生絮状沉淀。
发明内容
本发明涉及一种激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料及其制备方法，属于医用敷料技术领域。本发明公开了激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料包括以下重量份原料：贻贝粘蛋白0.15-1份、卡波姆0.1-0.5份、丙二醇5-20份、甘油5-20份、纯化水59-90份。在贻贝粘蛋白中加入缓冲剂和表面活性剂对贻贝黏蛋白进行预处理，表面活性剂与贻贝粘蛋白形成胶束结构，同时降低贻贝粘蛋白与液体分子之间的界面张力，使贻贝粘蛋白更好的分散在溶液中。缓冲剂在贻贝粘蛋白溶液中起到稳定作用。本发明通过调整各个组分的用量，并结合制备工艺流程，可制出激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料。
本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
一种贻贝粘蛋白修护敷料，所述贻贝粘蛋白修护敷料包括以下重量份原料：贻贝粘蛋白0.15-1份、卡波姆0.1-0.5份、丙二醇5-20份、甘油5-20份、纯化水59-90份。
进一步地，所述贻贝粘蛋白的制备方法包括以下步骤：
将贻贝肉加入水打成浆液，加入酶进行水解后并加热灭菌灭酶，用硅藻土脱色除臭，抽滤得到滤液，然后加入盐酸调节pH值，离心分离后真空冷冻干燥得到贻贝粘蛋白。
进一步地，所述贻贝肉、水、酶和硅藻土的质量比为2:6:0.1:1，所述加入的酶由质量比为1:1:1的木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和中性蛋白酶组成。
进一步地，所述水解的时间和温度分别为3-4h、40-50℃，所述加热是指加热至85-95℃。
进一步地，所述pH值为7-7.5，所述离心分离的转速和时间分别为1000-1200r/min、12-18min。
进一步地，所述贻贝粘蛋白修护敷料的制备方法包括以下步骤：
(1)将贻贝粘蛋白、缓冲剂和表面活性剂混合搅拌，然后进行超声处理，得到贻贝粘蛋白混合液；
(2)在搅拌设备中放入卡波姆、甘油和丙二醇，加入纯化水升温搅拌至全部溶解并进行保温，然后再搅拌降温，加入贻贝粘蛋白混合液混合搅拌，便得到贻贝粘蛋白修护敷料。
进一步地，所述步骤(1)中贻贝粘蛋白和表面活性剂的质量比为2:1，所述的表面活性剂由质量比为1:1的吐温20和吐温80组成，所述贻贝粘蛋白混合液的pH值为5-7，所述的缓冲剂为硼酸，所述超声的时间为20-30min。
进一步地，所述步骤(2)中升温是指升温至80-90℃，所述搅拌的时间为10-12min。
进一步地，所述步骤(2)中保温的时间为18-22min，所述降温是指降温至35-45℃，所述混合搅拌的时间为8-12min。
采用上述激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料及其制备方法，所述贻贝粘蛋白修护敷料的使用方法如下：
将创面进行清洁消毒，用贻贝粘蛋白修护敷料涂在表面，每日2-3次，每次涂2-3遍。
本发明的有益效果：
贻贝粘蛋白中加入缓冲剂和表面活性剂对贻贝黏蛋白进行预处理，表面活性剂与贻贝粘蛋白形成胶束结构，同时降低贻贝粘蛋白与液体分子之间的界面张力，使贻贝粘蛋白更好的分散在溶液中。加入硼酸缓冲剂在贻贝粘蛋白溶液中起到稳定作用且不会产生絮状沉淀。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明为实现预定发明目的所采取的技术手段及功效，以下结合实施例，对依据本发明的具体实施方式、结构、特征及其功效，详细说明如后。
实施例1
一种激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料，所述贻贝粘蛋白修护敷料包括以下重量份原料：贻贝粘蛋白0.15份、卡波姆0.1份、丙二醇5份、甘油5份、纯化水59份。
所述贻贝粘蛋白的制备方法包括以下步骤：
将贻贝肉加入水打成浆液，加入酶进行水解后并加热灭菌灭酶，用硅藻土脱色除臭，抽滤得到滤液，然后加入盐酸调节pH值，离心分离后真空冷冻干燥得到贻贝粘蛋白。
所述贻贝肉、水、酶和硅藻土的质量比为2:6:0.1:1，所述加入的酶由质量比为1:1:1的木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和中性蛋白酶组成。
所述水解的时间和温度分别为3.5h、45℃，所述加热是指加热至90℃。
所述pH值为7，所述离心分离的转速和时间分别为1000r/min、15min。
所述贻贝粘蛋白修护敷料的制备方法包括以下步骤：
(1)将0.15重量份的贻贝粘蛋白、缓冲剂和表面活性剂混合搅拌，然后进行超声处理，得到贻贝粘蛋白混合液；
(2)在搅拌设备中放入0.1重量份卡波姆、5重量份甘油和5重量份丙二醇，加入59重量份纯化水升温搅拌至全部溶解并进行保温，然后再搅拌降温，加入贻贝粘蛋白混合液混合搅拌，便得到贻贝粘蛋白修护敷料。
所述步骤(1)中贻贝粘蛋白和表面活性剂的质量比为2:1，所述的表面活性剂由质量比为1:1的吐温20和吐温80组成，所述贻贝粘蛋白混合液的pH值为5，所述的缓冲剂为硼酸，所述超声的时间为20min。
所述步骤(2)中升温是指升温至80℃，所述搅拌的时间为10min。
所述步骤(2)中保温的时间为18min，所述降温是指降温至35℃，所述混合搅拌的时间为8min。
采用上述激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料及其制备方法，所述贻贝粘蛋白修护敷料的使用方法如下：
将创面进行清洁消毒，用贻贝粘蛋白修护敷料涂在表面，每日2次，每次涂2遍。
实施例2
一种激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料，所述贻贝粘蛋白修护敷料包括以下重量份原料：贻贝粘蛋白0.5份、卡波姆0.3份、丙二醇13份、甘油13份、纯化水75份。
所述贻贝粘蛋白的制备方法包括以下步骤：
将贻贝肉加入水打成浆液，加入酶进行水解后并加热灭菌灭酶，用硅藻土脱色除臭，抽滤得到滤液，然后加入盐酸调节pH值，离心分离后真空冷冻干燥得到贻贝粘蛋白。
所述贻贝肉、水、酶和硅藻土的质量比为2:6:0.1:1，所述加入的酶由质量比为1:1:1的木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和中性蛋白酶组成。
所述水解的时间和温度分别为3.5h、45℃，所述加热是指加热至90℃。
所述pH值为7，所述离心分离的转速和时间分别为1000r/min、12min。
所述贻贝粘蛋白修护敷料的制备方法包括以下步骤：
(1)将0.5重量份的贻贝粘蛋白、缓冲剂和表面活性剂混合搅拌，然后进行超声处理，得到贻贝粘蛋白混合液；
(2)在搅拌设备中放入0.3重量份卡波姆、13重量份甘油和13重量份丙二醇，加入75重量份纯化水升温搅拌至全部溶解并进行保温，然后再搅拌降温，加入贻贝粘蛋白混合液混合搅拌，便得到贻贝粘蛋白修护敷料。
所述步骤(1)中贻贝粘蛋白和表面活性剂的质量比为2:1，所述的表面活性剂由质量比为1:1的吐温20和吐温80组成，所述贻贝粘蛋白混合液的pH值为6，所述的缓冲剂为硼酸，所述超声的时间为25min。
所述步骤(2)中升温是指升温至85℃，所述搅拌的时间为11min。
所述步骤(2)中保温的时间为20min，所述降温是指降温至40℃，所述混合搅拌的时间为10min。
采用上述激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料及其制备方法，所述贻贝粘蛋白修护敷料的使用方法如下：
将创面进行清洁消毒，用贻贝粘蛋白修护敷料涂在表面，每日2次，每次涂2遍。
实施例3
一种激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料，所述贻贝粘蛋白修护敷料包括以下重量份原料：贻贝粘蛋白1份、卡波姆0.5份、丙二醇20份、甘油20份、纯化水90份。
所述贻贝粘蛋白的制备方法包括以下步骤：
将贻贝肉加入水打成浆液，加入酶进行水解后并加热灭菌灭酶，用硅藻土脱色除臭，抽滤得到滤液，然后加入盐酸调节pH值，离心分离后真空冷冻干燥得到贻贝粘蛋白。
所述贻贝肉、水、酶和硅藻土的质量比为2:6:0.1:1，所述加入的酶由质量比为1:1:1的木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和中性蛋白酶组成。
所述水解的时间和温度分别为3.5h、45℃，所述加热是指加热至90℃。
所述pH值为7，所述离心分离的转速和时间分别为1000r/min、12min。
所述贻贝粘蛋白修护敷料的制备方法包括以下步骤：
(1)将贻贝粘蛋白、缓冲剂和表面活性剂混合搅拌，然后进行超声处理，得到贻贝粘蛋白混合液；
(2)在搅拌设备中放入卡波姆、甘油和丙二醇，加入纯化水升温搅拌至全部溶解并进行保温，然后再搅拌降温，加入贻贝粘蛋白混合液混合搅拌，便得到贻贝粘蛋白修护敷料。
所述步骤(1)中贻贝粘蛋白和表面活性剂的质量比为2:1，所述的表面活性剂由质量比为1:1的吐温20和吐温80组成，所述贻贝粘蛋白混合液的pH值为7，所述的缓冲剂为硼酸，所述超声的时间为30min。
所述步骤(2)中升温是指升温至90℃，所述搅拌的时间为12min。
所述步骤(2)中保温的时间为22min，所述降温是指降温至45℃，所述混合搅拌的时间为12min。
采用上述激光、光子术后修复的贻贝粘蛋白修护敷料及其制备方法，所述贻贝粘蛋白修护敷料的使用方法如下：
将创面进行清洁消毒，用贻贝粘蛋白修护敷料涂在表面，每日2次，每次涂2遍。
对比例1
在实施例2的基础上，去掉贻贝粘蛋白修护敷料制备过程中的硼酸，用等质量的碳酸缓冲剂替代，其他条件与实施例2一致。
对比例2
在实施例2的基础上，去掉贻贝粘蛋白修护敷料制备过程中表面活性剂中的吐温20，用等质量的吐温80替代，其他条件与实施例2一致。
对比例3
在实施例2的基础上，去掉贻贝粘蛋白修护敷料制备过程中表面活性剂中的吐温80，用等质量的吐温20替代，其他条件与实施例2一致。
1.浑浊测试与体外细胞毒性检测
浑浊观察法：将实施例1-3和对比例1所制备的贻贝粘蛋白修护敷料作为试样，观察试样的浑浊状况。
体外细胞毒性检测：将实施例1-3作为试样，体外细胞毒性检测按照GB/T16886.5及ISO10993.5中体外细胞毒性进行测试。
浑浊测试与体外细胞毒性检测的结果如表1所示。
表1浑浊测试与体外细胞毒性的检测结果
从表1中可以看出，实施例1-3都为澄清液，而对比例1有絮状沉淀。实施例1-3的细胞毒性检测结果都为阴性。硼酸能够提供适宜的pH范围，使其保持稳定。其他缓冲液产生沉淀由于离子沉淀、pH值影响、缓冲剂相互作用产生絮状沉淀。
2.伤口愈合性能和抗菌性测定
伤口愈合性能测试：实施例1-3和对比例2-3所制备的贻贝粘蛋白修护敷料作为试样，分别将试样涂在大鼠背部的创面处，每个试样涂在三只大鼠上身并作为一组。从第3、5、10天后计算每组大鼠伤口平均闭合率。
抗菌性测试：实施例1-3和对比例2-3所制备的贻贝粘蛋白修护敷料作为试样，采用圆盘扩散对贻贝粘蛋白修护敷料的抗菌性进行测试。分别取100μL(浓度为107-108CFU/mL)的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作为模型细菌。并测24h后抑圈直径。
伤口愈合性能和抗菌性测定结果见表2。
表2伤口愈合性能和抗菌性测定结果
从表2中的看出，实施例1-3的平均闭合率大于对比例2-3，实施例1-3的抑圈直径前后差值大于对比例2-3。表面活性剂与贻贝粘蛋白形成胶束结构，同时降低贻贝粘蛋白与液体分子之间的界面张力，使贻贝粘蛋白更好的分散在溶液中从而提高了贻贝粘蛋白修护敷料的伤口愈合性能和抗菌性。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限定本发明，任何本领域技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的技术内容做出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简介修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。
Claims (10)
1.一种贻贝粘蛋白修护敷料，其特征在于，所述贻贝粘蛋白修护敷料包括以下重量份原料：贻贝粘蛋白0.15-1份、卡波姆0.1-0.5份、丙二醇5-20份、甘油5-20份、纯化水59-90份。
2.根据权利要求1所述的一种贻贝粘蛋白修护敷料，其特征在于，所述贻贝粘蛋白的制备方法包括以下步骤：
将贻贝肉加入水打成浆液，加入酶进行水解后并加热灭菌灭酶，用硅藻土脱色除臭，抽滤得到滤液，然后加入盐酸调节pH值，离心分离后真空冷冻干燥得到贻贝粘蛋白。
3.根据权利要求2所述的一种贻贝粘蛋白修护敷料，其特征在于，所述贻贝肉、水、酶和硅藻土的质量比为2:6:0.1:1，所述加入的酶由质量比为1:1:1的木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和中性蛋白酶组成。
4.根据权利要求2所述的一种贻贝粘蛋白修护敷料，其特征在于，所述水解的时间和温度分别为3-4h、40-50℃，所述加热是指加热至85-95℃。
5.根据权利要求2所述的一种贻贝粘蛋白修护敷料，其特征在于，所述pH值为7-7.5，所述离心分离的转速和时间分别为1000-1200r/min、12-18min。
6.根据权利要求1所述的一种贻贝粘蛋白修护敷料，其特征在于，所述贻贝粘蛋白修护敷料的制备方法包括以下步骤：
(1)将贻贝粘蛋白、缓冲剂和表面活性剂混合搅拌，然后进行超声处理，得到贻贝粘蛋白混合液；
(2)在搅拌设备中放入卡波姆、甘油和丙二醇，加入纯化水升温搅拌至全部溶解并进行保温，然后再搅拌降温，加入贻贝粘蛋白混合液混合搅拌，便得到贻贝粘蛋白修护敷料。
7.根据权利要求6所述的一种贻贝粘蛋白修护敷料，其特征在于，所述步骤(1)中贻贝粘蛋白和表面活性剂的质量比为2:1，所述的表面活性剂由质量比为1:1的吐温20和吐温80组成，所述贻贝粘蛋白混合液的pH值为5-7，所述的缓冲剂为硼酸，所述超声的时间为20-30min。
8.根据权利要求6所述的一种贻贝粘蛋白修护敷料，其特征在于，所述步骤(2)中升温是指升温至80-90℃，所述搅拌的时间为10-12min。
9.根据权利要求6所述的一种贻贝粘蛋白修护敷料，其特征在于，所述步骤(2)中保温的时间为18-22min，所述降温是指降温至35-45℃，所述混合搅拌的时间为8-12min。
10.一种如权利要求1-9任一项所述的贻贝粘蛋白修护敷料的使用方法，其特征在于，所述贻贝粘蛋白修护敷料的使用方法如下：
将创面进行清洁消毒，用贻贝粘蛋白修护敷料涂在表面，每日2-3次，每次涂2-3遍。
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