CN104543375A - 一种畜禽用复合发酵中草药制剂及其制备方法和应用 - Google Patents

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CN104543375A CN201510052977.2A CN201510052977A CN104543375A CN 104543375 A CN104543375 A CN 104543375A CN 201510052977 A CN201510052977 A CN 201510052977A CN 104543375 A CN104543375 A CN 104543375A
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肖建国
江县良
李海金
熊雪梅
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Mai Kete Bio Tech Ltd Guangdong
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Mai Kete Bio Tech Ltd Guangdong
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Abstract

本发明公开了一种畜禽用复合发酵中草药制剂,每1000重量份的畜禽用复合发酵中草药制剂通过中草药组合物在有发酵菌株、葡萄糖和水存在的条件下经过发酵工艺得到,其中所述的中草药组合物由以下重量组分组成:板蓝根220~240份;黄芪240~220份;淫羊藿110~130份;麦芽150~120份;山楂50~80份;莱菔子80~55份;厚朴85~65份;甘草60~80份。发明旨在提供一种提高饲料转化率、增强畜禽体质、提高免疫力和抗病力,而且使用方便,使用成低,无抗、无药物残留、无耐药性的畜禽用复合发酵中草药制剂,发明的另外一个目的在于提供该畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法以及具体应用。

Description

一种畜禽用复合发酵中草药制剂及其制备方法和应用
技术领域
[0001] 本发明涉及动物饲料添加剂领域,特别是一种畜禽用复合发酵中草药制剂,及其 制备方法和应用。
背景技术
[0002] 我国是人口大国,有近15亿人口,亦是禽畜养殖和消耗大国,据统计局发布农 业生产数据,2013年全年猪牛羊禽肉产量8373万吨,其中猪肉产量5493万吨,牛猪存栏 47411万头,生猪出栏71557万头,全年禽蛋产量2876万吨,牛奶产量3531万吨。
[0003] 随着抗生素的滥用及畜产品药物残留问题的日益严重,食品安全问题日益受到政 府和人们的关注重视。中草药以其"安全、绿色、无残留"的优势成为大家研宄的焦点,中草 药应用于畜禽养殖业的资料最早见于周朝《周礼天官》,有着几千年的应用历史,近代中草 药应用于畜禽养殖业的研宄突飞猛进,新中国成立后,中兽医得到了空前的发展,相继颁发 了《中华人民共和国兽药典》、《中华人民共和国兽药规范》、《兽药质量标准》、《兽药地方标 准上升国家标准》、《兽药国家标准汇编》等一批中兽药标准典籍;并由由最初简单的煎剂、 散剂发展到现在较为先进的中药注射液、口服液、颗粒剂、酊剂、灌洗剂、超微粉散剂等剂 型。但由于野生药材资源逐年减少,药材价格逐年暴涨,加上药材深加工成本高,养殖利润 偏低等客观原因,所以,效果明显、使用方便、价格相对较高的注射液、口服液、颗粒剂等中 草药提取物制剂往往被养殖户拒之门外。
[0004] 中草药饲料添加剂属于天然药物,大量研宄表明,中草药饲料添加剂具有促进动 物生长发育、提高饲料利用率、改善畜禽产品质量、增强动物免疫功能、防病治病等作用,其 研宄和应用已受到国内外研宄工作者的广泛关注。农业部更因此而于2012年6月1日颁 布了第1773号公告,该公告把当归、白术、党参、甘草等115种常用中草药列入《饲料原料目 录》,允许以上中草药作为饲料添加剂和添加剂预混合饲料的功能性载体使用。但由于传统 中草药饲料添加剂的应用和研宄存在用药成分复杂、含量低、适口性差、效果不稳定、加工 处理简单、用量大且难以掌握、吸收差、生物利用率低、毒副作用等问题,阻碍了中草药饲料 添加剂的规模化推广应用。
发明内容
[0005] 本发明的目的在于提供一种提高饲料转化率、增强畜禽体质、提高免疫力和抗病 力,而且使用方便,使用成本低,无抗、无药物残留、无耐药性的畜禽用复合发酵中草药制 剂,本发明的另外一个目的在于提供该畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法以及具体应 用。
[0006] 本发明的具体的技术方案为:一种畜禽用复合发酵中草药制剂,每1000重量份的 畜禽用复合发酵中草药制剂通过中草药组合物在有发酵菌株、葡萄糖和水存在的条件下经 过多次发酵得到,其中所述的中草药组合物由以下重量组分组成:
[0007] 板蓝根220〜240份;
[0008] 黄芪 240 〜220 份;
[0009] 淫羊藿110〜130份;
[0010] 麦芽 150 〜120 份;
[0011] 山楂50〜80份;
[0012] 莱菔子80〜55份;
[0013] 厚朴85〜65份;
[0014] 甘草60〜80份。
[0015] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂中,所述的中草药组合物粉碎成为粉末后进 行发酵工艺。
[0016] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂中,所述的发酵菌株为纳豆芽孢杆菌、枯草 芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌。
[0017] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂中,所述的葡萄糖的重量为5〜10重量份。
[0018] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂中,所述的水的重量为中草药组合物重量的 35%〜40%。
[0019] 本发明还提供上述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法,包括以下步骤:
[0020] 步骤1 :按比例称取中药组合物,粉粹后加入发酵罐;
[0021] 步骤2 :加入葡萄糖并添加一定量的水,搅拌均匀;
[0022] 步骤3 :加入纳豆芽孢杆菌菌悬液,搅拌均匀发酵;
[0023] 步骤4 :步骤3结束后加入枯草芽孢杆菌菌悬液,搅拌均匀发酵;
[0024] 步骤5 :步骤4结束后加入嗜酸乳杆菌菌悬液,搅拌均匀发酵;
[0025] 步骤6 :干燥得到畜禽用复合发酵中草药制剂。
[0026] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法中,所述的步骤1中,中药组合 物粉碎至35〜45目。
[0027] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法中,所述的步骤2中,水为煮沸 的饮用水,所述的水为中药组合物重量的35%〜40%,在步骤2中加入煮沸的饮用水后搅 拌至温度为40 ±2 °C。
[0028] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法中,所述的步骤2中葡萄糖为 5〜10重量份。
[0029] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法中,所述的步骤3中,发酵时 间为30〜40小时,发酵温度为39±1°C,发酵罐中起始纳豆芽孢杆菌活菌数量为90〜 110CFU/g 〇
[0030] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法中,所述的步骤4中,发酵时 间为10〜15小时,发酵温度为34±1°C,发酵罐中起始枯草芽孢杆菌活菌数量为90〜 110CFU/g 〇
[0031] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法中,所述的步骤5中,发酵时间 为60〜80小时,发酵温度为37 ± 1°C,发酵罐中起始嗜酸乳杆菌活菌数量为90〜110CFU/ g°
[0032] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法中,所述的步骤3和步骤4中, 在发酵过程中采用间歇搅拌的方式不断混合发酵罐中的物料,并保持通风以提供足够的氧 气;在步骤5中,采用密闭静置的方式进行厌氧发酵。
[0033] 在上述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法中,所述的步骤6具体包括:将 发酵结束后的物料倒出,摊薄,降温至室温;然后再加热抽真空除去物料中的水分,其中真 空度为〇.〇95MPa,加热温度为45〜50°C,干燥后得到的产品的含水量彡8 %重量百分比; 最后通过筛网筛分后得到产品畜禽用复合发酵中草药制剂。
[0034] 本发明还提供上述的畜禽用复合发酵中草药制剂在禽畜养殖中的应用,每份畜禽 饲料中添加0. 1 %〜0. 3%重量份的畜禽用复合发酵中草药制剂。
[0035] 本发明的有益效果如下:
[0036] 本发明是根据微生物发酵中草药原理,在中兽药经典名方《扶正解毒散》的基础方 上,增加麦芽、莱菔子、山楂、厚朴、甘草等健脾消食中药成分,利用纳豆芽孢杆菌、嗜酸乳杆 菌、枯草芽孢杆菌等菌种,通过粉碎、嗜氧发酵、微需氧发酵、厌氧发酵和真空低温干燥工艺 处理,制成具有扶正祛邪,清热解毒,健脾开胃,消食促长效果的复合微生物发酵中草药粉 剂,既可直接通过拌料喂饲,亦可作为复合维生素预混合饲料的功能性载体,与复合维生素 产生相互协同的营养保健作用。定期使用本发明产品可以明显的提高饲料转化率、增强畜 禽体质、提高免疫力和抗病力,而且使用方便,适口性好,使用成本低,无抗、无药物残留、无 耐药性,符合我国当前提倡的绿色无抗健康养殖的产业政策,本发明的大力推广应用具有 很好的经济效益和社会效益。微生物发酵中草药饲料添加剂是利用微生物的降解作用,将 中草药中的有效成分、活性物质最大限度地释放出来,并对中草药活性成分进行修饰产生 新的活性物质。微生物在生长代谢过程中,可以产生各种各样的防病助生长的次生代谢产 物,可将动物难以消化吸收的大分子物质转化成易于吸收的小分子物质,大大提高中草药 的生物利用率,减少了使用剂量,节约了用药成本和药材资源。还可产生各种不同的酶,从 而促进动物生长发育,缩短饲养周期,提高饲料报酬率,增强药效和降低饲养成本等,将会 更加有力地推动畜牧水产业的健康发展。微生物发酵中草药是现代生物技术和中草药研宄 的完美结合,必将为中草药新药研宄开发开辟新的道路,拓展广阔的发展空间,并在中草药 新药研宄开发中占有越来越重要的地位。
[0037] 纳豆芽孢杆菌是嗜氧菌,适宜生长温度38-42Ό,能分泌多种蛋白酶(特别是碱性 蛋白酶)、具有溶纤活性的酵素纳豆激酶、糖化酶、脂肪酶、淀粉酶及维生素 K,降解植物性 饲料种某些复杂的碳水化合物,从而提高饲料的转化率。
[0038] 枯草芽孢杆菌是需氧菌,可利用蛋白质、多种糖类及淀粉,最适生长温度为 30-34°C,能分泌α-淀粉酶、蛋白酶等多种消化酶,枯草菌素、烟酸、B族维生素等,能迅速消 耗游离氧,促进厌氧有益菌生长,有效调节胃肠道的微生态平衡。
[0039] 嗜酸乳杆菌是厌氧菌,能利用葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖、蛋白质,最适生长温度 36-38°C,其代谢产物有机酸和抗菌物质一乳杆菌素、嗜酸乳素、酸菌素,可抑制病原菌和腐 败菌的生长。
[0040] 中药组合物中,黄芪、板蓝根、淫羊藿能扶正祛邪,清热解毒,同时,增加麦芽、莱菔 子、山楂、厚朴、甘草等健脾开胃,理气消食中药成分,通过纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜 酸乳杆菌的嗜氧发酵、微需氧发酵、厌氧发酵及真空低温干燥工艺处理,得到的畜禽用复合 发酵中草药制剂富含纳豆激酶、碱性蛋白酶、纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶等多种 消化酶,以及纳豆菌素、枯草菌素、乳杆菌素、嗜酸乳素、酸菌素等抗菌肽类物质,维生素 K、 烟酸、B族维生素等维生素类,并含有大量有益芽孢活菌及乳酸、醋酸等有机酸,具有扶正祛 邪,清热解毒,提高机体免疫功能,健脾开胃,消食促长的显著效果。
[0041] 本发明的畜禽用复合发酵中草药制剂吸收率比未发酵前高3倍以上,因此本发明 按未发酵前方剂三分之一的剂量使用即可达到甚至超过未发酵前方剂使用的效果,节约了 用药成本和大量中药材资源;不仅可以用于鸡法氏囊病、鱼类感染性疾病的辅助性防治,还 可以用于其他畜类、禽类及水产养殖动物的免疫机能低下症、生长发育迟缓、病毒性感染、 细菌性感染等的辅助性防治。既可直接通过拌料喂饲,亦可作为复合维生素预混合饲料的 功能性载体,与复合维生素产生营养保健相互协同的作用。
[0042] 本发明按0. 1〜0. 3%的比例添加于畜禽和水产养殖动物的饲料中拌料喂饲,即 可达到很好的扶正祛邪,清热解毒,提高机体免疫功能,健脾开胃,消食促长,提高饲料转化 率,减少各种疾病的发生,减少抗生素的使用,提高养殖经济效益的目的,使用成本低,无药 物残留,无耐药性,具有很好的经济效益和社会效益,符合我国倡导的健康养殖政策,具有 很好的推广应用前景。
具体实施方式
[0043] 下面结合具体实施方式,对本发明的技术方案作进一步的详细说明,但不构成对 本发明的任何限制。
[0044] 实施例1
[0045] 1、中药细粉的制备:
[0046] 称取无霉变、虫蛀的干燥中药材饮片,板蓝根115kg、黄芪115kg、淫羊藿60kg、麦 芽67kg、山楂30kg、莱菔子35kg、厚朴40kg、甘草35kg,粉碎成40目,得497kg中药细粉 (含水量约10% )。
[0047] 2、菌悬液的制备:
[0048] 纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌分别活化,两次继代培养,各制成 4.51^,约128100?11/^的菌悬液。纳_&芽抱杆菌(1^(3;[11118 1^1:1:0)几-冊1'-05,由江苏省微 生物研宄所选育、分离纯化和保藏,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GMTl. 135,广东省 菌种保藏中心保藏,嗜酸乳杆菌GIML 208,广东省菌种保藏中心保藏,下同。
[0049] 3、称取3kg葡萄糖,备用。
[0050] 4、发酵中药的制备:
[0051] 步骤I. 1 :称取处方量中药细粉497kg倒入带搅拌衆的发酵罐,加入3kg葡萄糖, 搅拌均匀,边搅拌边添加煮沸饮用水200kg,停止搅拌密闭至中药细粉温度降至40±2°C左 右,边搅拌边加入两次继代后的纳豆芽孢杆菌菌悬液4. 5kg,使起始中药细粉纳豆芽孢杆菌 活菌数量约为l〇〇CFU/g,搅拌均匀,保持38-40°C,期间每隔2小时搅拌5分钟,并保持通风 以提供充足氧气,持续发酵36h。
[0052] 步骤1. 2 :发酵36h后,搅拌降温至33±2°C,边搅拌边加入两次继代后的枯草芽孢 杆菌菌悬液4. 5kg,使起始中药细粉中枯草芽孢菌活菌数量约为100CFU/g,搅拌均匀,保持 33-35Ό,期间每隔3小时搅拌5分钟,并保持通风以提供充足氧气,再持续发酵12h。
[0053] 步骤1. 3 :持续发酵48h后,边搅拌边加入两次继代后的嗜酸乳杆菌菌悬液4. 5kg, 使起始中药细粉中嗜酸乳杆菌活菌数量约为l〇〇CFU/g,搅拌均匀,保持36-38°C,再密闭静 止发酵72h。
[0054] 步骤I. 4 :把经纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌连续发酵120h后的中药 细粉713kg倒出到不锈钢托盆中摊平,约2-3cm厚,放凉至室温;
[0055] 步骤1. 5 :把放凉后的发酵中药细粉放入真空干燥箱中,开动抽真空和加热,真空 度控制在0. 095MPa,加热温度控制在45-50°C,干燥至发酵中药细粉含水量< 8%,检测纳 豆芽孢杆菌活菌数彡1.25\101(^?(:/8,枯草芽孢杆菌活菌数彡1.20\10 1(^?(:/8,嗜酸乳杆 菌活菌数彡I. OOX l〇1(lCFC/g,过40目不锈钢筛网,得约495kg干燥发酵中药细粉。
[0056] 5.检验:
[0057] 把4项所得灰黄色粉末状发酵中药细粉按质量标准要求进行卫生指标、水份、鉴 另IJ、活菌数检测等检测,合格后得到样品1。
[0058] 4.包装:用厚度0. 12mm纯铝包装袋称取Ikg的发酵中药细粉,封口,装箱(包装 规格IkgX 15包/箱),检查入库。
[0059] 质量标准:
[0060] 1.卫生指标:应符合GB 13078要求,其中总砷(以As计)< 10mg/kg ;铅(以Pb 计)彡 30mg/kg,氟(以 F 计)彡 1000mg/kg ;
[0061] 2.水份彡 10% (GB/T 6435);
[0062] 3.粒度:全部通过孔径为I. 19mm分析筛,孔径为0. 59mm分析筛筛上物不得大于 10%〇 (GB/T5917. 1);
[0063] 4.鉴别:
[0064] (1)取本品,置显微镜下观察:纤维成束或散离,壁厚,表面有纵裂纹,两端断裂成 帚状或较平截。非腺毛3〜10细胞,长200〜1000 μ m,项端细胞长,有的含棕色或黄棕色 物。(黄芪、淫羊藿)
[0065] (2)取该品粉末2. 5g,加稀乙醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加 稀乙醇Iml使溶解,作为供试品溶液。另取精氨酸对照品,加稀乙醇制成每Iml含0. 5mg的 溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国兽药典2010年版二部附录VI B)试验,吸取上 述两种溶液各1〜2 μ 1,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上(自 然干燥),以正丁醇-冰醋酸-水(19 :5 :5)为展开剂,展开,取出,热风吹干,喷以茚三酮试 液,在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜 色的斑点。(板蓝根)
[0066] 5.活菌数测定:纳豆芽孢杆菌活菌数多I. 25X101(lCFC/g,枯草芽孢杆菌活菌数 彡1.20父101(^?(:/^,嗜酸乳杆菌活菌数彡1.00\10 1(^?(:/^。
[0067] 实施例2
[0068] 1、中药细粉的制备:
[0069] 称取无霉变、虫蛀的干燥中药材饮片,板蓝根110kg、黄芪120kg、淫羊藿65kg、麦 芽62kg、山楂26kg、莱菔子39kg、厚朴35kg、甘草40kg,粉碎成36目,得497kg中药细粉 (含水量约10% )。
[0070] 2、菌悬液的制备:
[0071] 纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌分别活化,两次继代培养,各制成 4. 5kg,约 12810CFU/g 的菌悬液。
[0072] 3、称取2.6kg葡萄糖,备用。
[0073] 4、发酵中药的制备:
[0074] 步骤I. 1 :称取处方量中药细粉497kg倒入带搅拌衆的发酵罐,加入2. 6kg葡 萄糖,搅拌均匀,边搅拌边添加煮沸饮用水189kg,停止搅拌密闭至中药细粉温度降至 40 ±2°C左右,边搅拌边加入两次继代后的纳豆芽孢杆菌菌悬液4. 5kg,使起始中药细粉纳 豆芽孢杆菌活菌数量约为l〇〇CFU/g,搅拌均匀,保持38-40°C,期间每隔2小时搅拌5分钟, 并保持通风以提供充足氧气,持续发酵38h。
[0075] 步骤1. 2 :发酵38h后,搅拌降温至33±2°C,边搅拌边加入两次继代后的枯草芽孢 杆菌菌悬液4. 5kg,使起始中药细粉中枯草芽孢菌活菌数量约为100CFU/g,搅拌均匀,保持 33-35Ό,期间每隔3小时搅拌5分钟,并保持通风以提供充足氧气,再持续发酵10h。
[0076] 步骤1. 3 :持续发酵48h后,边搅拌边加入两次继代后的嗜酸乳杆菌菌悬液4. 5kg, 使起始中药细粉中嗜酸乳杆菌活菌数量约为l〇〇CFU/g,搅拌均匀,保持36-38°C,再密闭静 止发酵78h。
[0077] 步骤1. 4 :把经纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌连续发酵126h后的中药 细粉702kg倒出到不锈钢托盆中摊平,约2-3cm厚,放凉至室温;
[0078] 步骤1. 5 :把放凉后的发酵中药细粉放入真空干燥箱中,开动抽真空和加热,真空 度控制在0. 095MPa,加热温度控制在45-50°C,干燥至发酵中药细粉含水量< 8%,检测纳 豆芽孢杆菌活菌数彡1.25\101(^?(:/8,枯草芽孢杆菌活菌数彡1.20\10 1(^?(:/8,嗜酸乳杆 菌活菌数彡I. 00X l〇1(lCFC/g,过40目不锈钢筛网,得约495kg干燥发酵中药细粉。
[0079] 5.检验:
[0080] 把4项所得灰黄色粉末状发酵中药细粉按质量标准要求进行卫生指标、水份、鉴 另IJ、活
[0081] 菌数检测等检测,合格后得到产品。
[0082] 4.包装:用厚度0. 12mm纯铝包装袋称取Ikg的发酵中药细粉,封口,装箱(包装 规格IkgX 15包/箱),检查入库。
[0083] 质量标准:
[0084] 1.卫生指标:应符合GB 13078要求,其中总砷(以As计)彡10mg/kg ;铅(以Pb 计)彡 30mg/kg,氟(以 F 计)彡 1000mg/kg ;
[0085] 2.水份彡 10% (GB/T 6435);
[0086] 3.粒度:全部通过孔径为I. 19mm分析筛,孔径为0. 59mm分析筛筛上物不得大于 10%〇 (GB/T5917. 1);
[0087] 4.鉴别:
[0088] (1)取本品,置显微镜下观察:纤维成束或散离,壁厚,表面有纵裂纹,两端断裂成 帚状或较平截。非腺毛3〜10细胞,长200〜1000 μ m,项端细胞长,有的含棕色或黄棕色 物。(黄芪、淫羊藿)
[0089] (2)取该品粉末2. 5g,加稀乙醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加 稀乙醇Iml使溶解,作为供试品溶液。另取精氨酸对照品,加稀乙醇制成每Iml含0. 5mg的 溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国兽药典2010年版二部附录VI B)试验,吸取上 述两种溶液各1〜2 μ 1,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上(自 然干燥),以正丁醇-冰醋酸-水(19 :5 :5)为展开剂,展开,取出,热风吹干,喷以茚三酮试 液,在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜 色的斑点。(板蓝根)
[0090] 5.活菌数测定:纳豆芽孢杆菌活菌数多1. 25 X 101(lCFC/g,枯草芽孢杆菌活菌数 彡1.20父101(^?(:/^,嗜酸乳杆菌活菌数彡1.00\10 1(^?(:/^。
[0091] 实施例3
[0092] 1、中药细粉的制备:
[0093] 中药饮片组分为板蓝根120kg、黄芪110kg、淫羊藿57kg、麦芽70kg、山楂40kg、莱 菔子28kg、厚朴41kg、甘草31kg,粉碎成43目,得497kg中药细粉(含水量约10% )。
[0094] 2、菌悬液的制备:
[0095] 纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌分别活化,两次继代培养,各制成 4. 5kg,约 12810CFU/g 的菌悬液。
[0096] 3、称取4kg葡萄糖,备用。
[0097] 4、发酵中药的制备:
[0098] 步骤I. 1 :称取处方量中药细粉497kg倒入带搅拌浆的发酵罐,加入4kg葡萄糖, 搅拌均匀,边搅拌边添加煮沸饮用水175kg,停止搅拌密闭至中药细粉温度降至40 ± 2°C左 右,边搅拌边加入两次继代后的纳豆芽孢杆菌菌悬液4. 5kg,使起始中药细粉纳豆芽孢杆菌 活菌数量约为l〇〇CFU/g,搅拌均匀,保持38-40°C,期间每隔2小时搅拌5分钟,并保持通风 以提供充足氧气,持续发酵33h。
[0099] 步骤1. 2 :发酵33h后,搅拌降温至33±2°C,边搅拌边加入两次继代后的枯草芽孢 杆菌菌悬液4. 5kg,使起始中药细粉中枯草芽孢菌活菌数量约为100CFU/g,搅拌均匀,保持 33-35Ό,期间每隔3小时搅拌5分钟,并保持通风以提供充足氧气,再持续发酵15h。
[0100] 步骤1. 3 :持续发酵48h后,边搅拌边加入两次继代后的嗜酸乳杆菌菌悬液4. 5kg, 使起始中药细粉中嗜酸乳杆菌活菌数量约为l〇〇CFU/g,搅拌均匀,保持36-38°C,再密闭静 止发酵65h。
[0101] 步骤1. 4 :把经纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌连续发酵113h后的中药 细粉689kg倒出到不锈钢托盆中摊平,约2-3cm厚,放凉至室温;
[0102] 步骤1. 5 :把放凉后的发酵中药细粉放入真空干燥箱中,开动抽真空和加热,真空 度控制在0. 095MPa,加热温度控制在45-50°C,干燥至发酵中药细粉含水量< 8%,检测纳 豆芽孢杆菌活菌数彡1.25\101(^?(:/8,枯草芽孢杆菌活菌数彡1.20\10 1(^?(:/8,嗜酸乳杆 菌活菌数彡I. 00X l〇1(lCFC/g,过40目不锈钢筛网,得约495kg干燥发酵中药细粉。
[0103] 5.检验:
[0104] 把4项所得灰黄色粉末状发酵中药细粉按质量标准要求进行卫生指标、水份、鉴 另Ij、活菌数检测等检测,合格后得到产品。
[0105] 4.包装:用厚度0. 12mm纯铝包装袋称取Ikg的发酵中药细粉,封口,装箱(包装 规格IkgX 15包/箱),检查入库。
[0106] 质量标准:
[0107] 1.卫生指标:应符合GB 13078要求,其中总砷(以As计)彡10mg/kg ;铅(以Pb 计)彡 30mg/kg,氟(以 F 计)彡 1000mg/kg ;
[0108] 2.水份彡 10% (GB/T 6435);
[0109] 3.粒度:全部通过孔径为I. 19mm分析筛,孔径为0.59mm分析筛筛上物不得大于 10%〇 (GB/T5917. 1);
[0110] 4.鉴别:
[0111] (1)取本品,置显微镜下观察:纤维成束或散离,壁厚,表面有纵裂纹,两端断裂成 帚状或较平截。非腺毛3〜10细胞,长200〜1000 μ m,项端细胞长,有的含棕色或黄棕色 物。(黄芪、淫羊藿)
[0112] (2)取该品粉末2. 5g,加稀乙醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加 稀乙醇Iml使溶解,作为供试品溶液。另取精氨酸对照品,加稀乙醇制成每Iml含0. 5mg的 溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国兽药典2010年版二部附录VI B)试验,吸取上 述两种溶液各1〜2 μ 1,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上(自 然干燥),以正丁醇-冰醋酸-水(19 :5 :5)为展开剂,展开,取出,热风吹干,喷以茚三酮试 液,在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜 色的斑点。(板蓝根)
[0113] 5.活菌数测定:纳豆芽孢杆菌活菌数多1.25X101(lCFC/g,枯草芽孢杆菌活菌数 彡1.20父10 1(^?(:/^,嗜酸乳杆菌活菌数彡1.00\101(^?(:/^。
[0114] 对比样1的制备
[0115] 1、中药细粉的制备:
[0116] 称取无霉变、虫蛀的干燥中药材饮片,板蓝根115kg、黄芪115kg、淫羊藿60kg、麦 芽67kg、山楂30kg、莱菔子35kg、厚朴40kg、甘草35kg,粉碎成40目,加入3kg葡萄糖,混 合均匀,得500kg中药细粉(含水量约10% )。
[0117] 2.检验:把1项所得灰黄色粉末状复合中药细粉按质量标准要求进行卫生指标、 水份、鉴别等检测,合格后得到对比样1。
[0118] 3.包装:用厚度0. 12_纯铝包装袋称取Ikg的复合中药细粉,封口,装箱(包装 规格IkgX 15包/箱),检查入库。
[0119] 质量标准:
[0120] 1.卫生指标:应符合GB 13078要求,其中总砷(以As计)彡10mg/kg ;铅(以Pb 计)彡 30mg/kg,氟(以 F 计)彡 1000mg/kg ;
[0121] 2.水份彡 10% (GB/T 6435);
[0122] 3.粒度:全部通过孔径为I. 19mm分析筛,孔径为0. 59mm分析筛筛上物不得大于 10%〇 (GB/T5917. 1);
[0123] 4.鉴别:
[0124] (1)取本品,置显微镜下观察:纤维成束或散离,壁厚,表面有纵裂纹,两端断裂成 帚状或较平截。非腺毛3〜10细胞,长200〜1000 μ m,项端细胞长,有的含棕色或黄棕色 物。(黄芪、淫羊藿)
[0125] (2)取该品粉末2. 5g,加稀乙醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加 稀乙醇Iml使溶解,作为供试品溶液。另取精氨酸对照品,加稀乙醇制成每Iml含0. 5mg的 溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国兽药典2010年版二部附录VI B)试验,吸取上 述两种溶液各1〜2 μ 1,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上(自 然干燥),以正丁醇-冰醋酸-水(19 :5 :5)为展开剂,展开,取出,热风吹干,喷以茚三酮试 液,在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜 色的斑点。(板蓝根)
[0126] 动物饲养实施例1
[0127] 样品1、对比样1对肉鸡生产性能的影响。
[0128] 1、材料与方法
[0129] I. 1材料:取上述样品1和对比样1作为本实施例1的试验材料。
[0130] 1. 2供试动物与分组:
[0131] 1日龄的温氏快大黄羽肉鸡统一饲养一周后,随机抽取450只,分成3组,每组3个 重复,每个重复50只,分实验I组、实验II组、空白对照组,并称取初始体重,7日龄初始平 均体重:实验I组102. 3g/只,实验II组103. 2g/只,空白对照组102. 5g/只。实验组和空白 对照组均采用笼养,自由采食饮水,基础日粮颗粒饲料三组相同,具体配方为7-21日龄:玉 米55. 3 %,豆柏38 %,磷酸氢钙1. 2 %,石粉1 %,脂肪油1 %,鱼粉1. 5 %,预混料2 %;22-56 日龄:玉米55. 3 %,豆柏36 %,磷酸氢钙1. 8 %,石粉1 %,脂肪油1. 4 %,鱼粉2. 5 %,预混料
[0132] 1. 3方法:实验I组通过饲料拌料添加0. 2%样品1,以连用3天隔3天再连用3天 的使用原则,循环连续使用;实验II组通过饲料拌料添加〇. 6%对比样1,以连用3天隔3天 再连用3天的使用原则,循环连续使用;空白对照组只添加基础日粮颗粒饲料及日常饮用 水。采用常规饲养管理,记录肉鸡每日采食量、死亡数量,定期进行免疫和清扫鸡舍,试验饲 养周期为49天。
[0133] 2.生长性能测定:
[0134] 分别于14、21、28、35、42、49、56日龄以组为单位对健康鸡空腹3h后称重,空腹期 间自由饮水,准确称量和记录日供料量、剩余料量、损失料量及死亡数量,计算各阶段平均 日增重、平均日采食量、料肉比、成活率和腹泻发生率。
[0135] 2.1结果与数据
[0136] 表一:
[0137]
Figure CN104543375AD00121
[0138]
Figure CN104543375AD00131
[0139] 试验结果表明:
[0140] 由表一看出:样品1由于富含蛋白酶、纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶等消 化酶,因此饲喂本发明样品1组对饲料的吸收转化率最高,每个测定日龄的料肉比均最低, 而平均日增重、平均体重、平均采食量、成活率则是最高;样品1由于含有大量纳豆芽孢杆 菌、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌等有益活菌及乳酸、醋酸等有机酸,有效调节胃肠道的微生 态平衡,抑制病原菌和腐败菌的生长,因此饲喂本发明样品1组腹泻发生率最低,与实验II 组和空白对照组差异最为显著。虽然效果并不一定体现在平均采食量或平均日增重上,但 是一定体现了添加本发明样品1饲料转化率是最高的。虽然样品1和对比样1效果最为接 近,但对比样1的添加量比样品1大3倍,使用成本多二分之一。因此可以推断,本发明的 畜禽用复合发酵中草药制剂不仅可以显著降低料肉比,提高日增重,降低使用成本,还能显 著提高肉鸡免疫功能、抗病能力及成活率,尤其对腹泻发生率的抑制尤为显著。
[0141] 3.免疫功能的测定
[0142] 主要测定免疫器官指数:免疫器官指数(mg/g)=免疫器官重量/活体重。
[0143] 分别于14日龄、28日龄和42日龄从每个组健康鸡中随机抽取5只鸡,空腹12h后 分别称重,空腹期间自由饮水,准确称重后心脏打入空气法处死鸡只,解剖,摘取免疫器官 脾脏、胸腺和法氏囊,剔除脂肪后称鲜重,计算脾脏、胸腺和法氏囊免疫指数。
[0144] 3. 1结果与数据
[0145] 表二:
[0146]
Figure CN104543375AD00141
[0147] 试验结果表明:
[0148] 由表二不难看出各个实验组的脾脏指数、胸腺指数和法氏囊指数均高于空白对照 组,其中饲喂本发明样品1组为每个测定日龄的最高值,并且与其他试验组的差异也很显 著。因此,本发明一种畜禽用复合发酵中草药制剂具有很明显的促进畜禽免疫器官发育,调 节主动免疫功能,增强机体的免疫力,提高畜禽抗病能力的效果,而且使用成本低。
[0149] 动物饲养实施例2
[0150] 样品1和对比样1对仔猪生产性能比较试验。
[0151] 1、材料与方法
[0152] I. 1材料:取上述样品1和对比样1作为本实施例2的试验材料。
[0153] 1. 2供试动物与分组
[0154] 试验对象是来源一致,同胎次,产仔时间相近,产仔数相同,性别比例相近,断 奶窝重、体重相近的杜大长三元断奶仔猪,按配对试验原则将其分成实验I组、实验II 组和空白对照组共3组,每组3个重复,每个重复20头,共180头。实验I组初始头均 重(10. 34±1. 13)kg,实验II组初始头均重(10. 27±1. 22)kg,空白对照组初始头均重 (10. 22±1. 24) kg,实验组和空白对照组均采用栏养,自由采食饮水,每天均投喂四次颗粒 料,期间定期清扫猪舍,并按防疫程序注射疫苗。颗粒料的具体配方为玉米54%、细米糠 5. 94%、优质鱼粉5%、豆柏31%、磷酸氢钙1.2%、石粉0.7%、盐0. 16%、预混料2.0%。
[0155] 1. 3方法:实验I组通过饲料拌料添加0. 2%样品1,以连用3天隔3天再连用3天 的使用原则,循环连续使用;实验II组通过饲料拌料添加〇. 6%对比样1,以连用3天隔3天 再连用3天的使用原则,循环连续使用;空白对照组不额外添加任何饲料添加剂。让仔猪自 由采食,饲喂周期为50天。50天内记录对照组和实验组的平均体重、死亡率、日增重及腹泻 发生次数。
[0156] 2、结果与数据
[0157] 表三:
[0158]
Figure CN104543375AD00142
Figure CN104543375AD00151
[0159] 试验结果表明:
[0160] 由表三看出各个实验组的腹泻发生率和死亡率均明显低于空白对照组,50天后 平均体重、日增重也明显高于空白对照组;其中饲喂本发明样品1组效果最为明显,并且与 其他实验组的差异也很显著,尤其腹泻发生率、死亡率与其他实验组的差异更为显著;实验 I组与实验II组日增重、死亡率较为接近,但对比样1的添加量比样品1大3倍,使用成本 多二分之一,而且饲喂本发明样品1组猪只体形体重均较均匀,皮红毛亮,活泼好动,对冷 热应激耐受力强,排便少,臭味轻。因此,本发明一种畜禽用复合发酵中草药制剂具有很明 显的提高饲料转化率,促进仔猪免疫器官发育,增强机体的免疫力,不仅显著提高仔猪的生 长性能,还能显著减少仔猪肠道疾病的发生率和提高抗病能力,而且使用成本低,性价比最 尚。
[0161] 以上所述的仅为本发明的较佳实施例,凡在本发明的精神和原则范围内所作的任 何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (15)

1. 一种畜禽用复合发酵中草药制剂,其特征在于,每1000重量份的畜禽用复合发酵中 草药制剂通过中草药组合物在有发酵菌株、葡萄糖和水存在的条件下经过多次发酵得到, 其中所述的中草药组合物由以下重量组分组成: 板蓝根220〜240份; 黄芪240〜220份; 淫羊藿110〜130份; 麦芽150〜120份; 山楂50〜80份; 莱菔子80〜55份; 厚朴85〜65份; 甘草60〜80份。
2. 根据权利要求1所述的畜禽用复合发酵中草药制剂,其特征在于,所述的中草药组 合物粉碎成为粉末后进行发酵工艺。
3. 根据权利要求1所述的畜禽用复合发酵中草药制剂,其特征在于,所述的发酵菌株 为纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌。
4. 根据权利要求1所述的畜禽用复合发酵中草药制剂,其特征在于,所述的葡萄糖的 重量为5〜10重量份。
5. 根据权利要求1所述的畜禽用复合发酵中草药制剂,其特征在于,所述的水的重量 为中草药组合物重量的35 %〜40%。
6. -种如权利要求1所述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法,其特征在于,包 括以下步骤: 步骤1 :按比例称取中药组合物,粉粹后加入发酵罐; 步骤2 :加入葡萄糖并添加一定量的水,搅拌均匀; 步骤3 :加入纳豆芽孢杆菌菌悬液,搅拌均匀发酵; 步骤4 :步骤3结束后加入枯草芽孢杆菌菌悬液,搅拌均匀发酵; 步骤5 :步骤4结束后加入嗜酸乳杆菌菌悬液,搅拌均匀发酵; 步骤6 :干燥得到畜禽用复合发酵中草药制剂。
7. 根据权利要求6所述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法,其特征在于,所述 的步骤1中,中药组合物粉碎至35〜45目。
8. 根据权利要求6所述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法,其特征在于,所述 的步骤2中,水为煮沸的饮用水,所述的水为中药组合物重量的35%〜40%,在步骤2中加 入煮沸的饮用水后搅拌至温度为40 ±2 °C。
9. 根据权利要求8所述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法,其特征在于,所述 的步骤2中葡萄糖为5〜10重量份。
10. 根据权利要求6所述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法,其特征在于,所述 的步骤3中,发酵时间为30〜40小时,发酵温度为39±I°C,发酵罐中起始纳豆芽孢杆菌活 菌数量为l〇〇CFU/g。
11. 根据权利要求10所述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法,其特征在于,所 述的步骤4中,发酵时间为10〜15小时,发酵温度为34土 1°C,发酵罐中起始枯草芽孢杆菌 活菌数量为l〇〇CFU/g。
12. 根据权利要求11所述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法,其特征在于,所 述的步骤5中,发酵时间为60〜80小时,发酵温度为37±I°C,发酵罐中起始嗜酸乳杆菌活 菌数量为l〇〇CFU/g。
13. 根据权利要求12所述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法,其特征在于,所 述的步骤3和步骤4中,在发酵过程中采用间歇搅拌的方式不断混合发酵罐中的物料,并保 持通风以提供足够的氧气;在步骤5中,采用密闭静置的方式进行厌氧发酵。
14. 根据权利要求6所述的畜禽用复合发酵中草药制剂的制备方法,其特征在于,所述 的步骤6具体包括:将发酵结束后的物料倒出,摊薄,降温至室温;然后再加热抽真空除去 物料中的水分,其中真空度为〇. 〇95MPa,加热温度为45〜50°C,干燥后得到的产品的含水 量< 8%重量百分比;最后通过筛网筛分后得到产品畜禽用复合发酵中草药制剂。
15. -种如权利要求6所述的畜禽用复合发酵中草药制剂在禽畜养殖中的应用,其特 征在于,每份畜禽饲料中添加0. 1%〜0. 3%重量份的畜禽用复合发酵中草药制剂。
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