CN104489837A

CN104489837A - 一种火麻蛋白肽饮料及其制备方法

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Publication number: CN104489837A
Application number: CN201410848685.5A
Authority: CN
Inventors: 游向荣; 张雅媛; 卫萍; 孙健; 李明娟; 李志春; 杨媚
Original assignee: Institute of Agro Products Processing Science and Technology of Guangxi Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Institute of Agro Products Processing Science and Technology of Guangxi Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2014-12-31
Filing date: 2014-12-31
Publication date: 2015-04-08
Anticipated expiration: 2034-12-31
Also published as: CN104489837B

Abstract

本发明提供一种火麻蛋白肽饮料及其制备方法。该饮料包括以下重量份的原料：火麻仁蛋白肽水解液20~40份，木糖醇2~3 份，香蕉果肉水溶纤维素 1~3份，龙眼果肉多糖0.5~1份，葡萄籽提取物0.1~0.3份，山黄皮提取物0.1~0.3份，黄原胶0.1~0.2份，瓜尔豆胶0.1~0.2份，羧甲基纤维素钠0.01~0.02份，维生素C 0.03~0.06份，柠檬酸0.1~0.2份，柠檬酸钠0.3~0.5份，去离子水100~120份。本发明的有益效果是：有利于人体健康，易于吸收，具有抗氧化、降血压、降血脂、增强免疫力、促进矿物质吸收、调节胃肠微环境和抗疲劳等功能。

Description

一种火麻蛋白肽饮料及其制备方法

技术领域

本发明属于食品加工领域，涉及一种火麻蛋白肽饮料及其制备方法。

背景技术

火麻(学名：Cannabis sativa)又名汉麻、线麻、赤麻子等，为桑科大麻属一年生草本植物。火麻资源广泛分布在亚欧的温带和热带地区。在中国，火麻有六千多年的种植历史，是一种重要的经济作物。《诗经》和《吕氏春秋》中都有记载火麻的文字，大麻一直以来作为重要的食物、纤维和医药在古国使用了数千年。其茎中的纤维可做为耐用的纺织品和特种纸质。成熟的火麻仁种子可作为优质的油脂、纤维和蛋白原。

目前，国内对火麻仁的研究和利用主要集中在火麻仁油的提取和利用上，通常都是将火麻仁榨油，渣滓用作动物饲料，造成大量的资源浪费。火麻仁中蛋白质的含量较高，还含有多种氨基酸，对火麻仁进行深加工，充分利用其营养成分，有利于火麻产业的发展。饮料作为一种人们喜爱的饮品，通常糖分高，蛋白含量低，添加剂多，多饮不利于身体健康，而开发出一种具有保健价值的火麻饮料，有利于人体健康，还能有效促进火麻业的健康发展，提高农业经济效益。

发明内容

本发明克服了上述不足，提供了一种具有保健作用的火麻蛋白肽饮料及其制备方法。

一种火麻蛋白肽饮料，包括以下重量份的原料：火麻仁蛋白肽水解液20～40份，木糖醇2～3份，香蕉果肉水溶纤维素1～3份，龙眼果肉多糖0.5～1份，葡萄籽提取物0.1～0.3份，山黄皮提取物0.1～0.3份，黄原胶0.1～0.2份，瓜尔豆胶0.1～0.2份，羧甲基纤维素钠0.01～0.02份，维生素C 0.03～0.06份，柠檬酸0.1～0.2份，柠檬酸钠0.3～0.5份，去离子水100～120份。

上述饮料中的主要成分的保健原理如下：

火麻蛋白：火麻蛋白具有增强免疫、促进矿物质吸收、抗菌、抗氧化、调节激素、降血脂、降血压、降胆固醇和抗疲劳等功能。经混合酶定向酶解后的火麻蛋白产生大量游离氨基酸和短肽，其中这些蛋白肽中特殊氨基酸序列的分子经研究具有高抗氧化性和血管紧张素转换酶(angiotensin-I-converting enzyme,ACE)抑制活性。蛋白短肽分子量小，易于被人体吸收利用。

龙眼多糖：含有丰富的抗氧化活性物质，能有效清除DPPH自由基、羟自由基等自由基活性，还具有一定抗自由基作用和提高细胞免疫的作用，并具有良好而稳定的抗糖基化活性，能有效抑制糖基化。

葡萄籽提取物：从葡萄籽中提取白藜芦醇的一种人体内不能合成的高效天然抗氧化剂物质。它是目前自然界中发现的抗氧化、清除自由基能力最强的物质，它能有效清除人体内多余的自由基，具有超强的延缓衰老和增强免疫力的作用。抗氧化、抗过敏、抗疲劳增强体质、改善亚健康状态延缓衰老、改善烦躁易怒、头昏乏力、记忆力减退等症状。

山黄皮提取物：山黄皮中富含氨基酸、维生素C、酚类和黄酮类物质，其中黄酮类物质具有强抗氧化性，能有效清除人体内多余的自由基，具有超强的延缓衰老和增强免疫力的作用。

以上组分经复配后，具有协同效应，能很好地增加饮料中抑制ACE和抗氧化的作用，且该配方中由不被人体利用的木糖醇代替蔗糖作为甜味剂，糖尿病人同样适用。

制备上述火麻蛋白肽饮料的方法，包括以下几个步骤：

1)火麻仁蛋白肽水解液的制备

a、火麻仁分离蛋白的制备：称取脱脂火麻仁粕，低温干燥，粉碎，过筛去除杂质，加水至料液比为1：10～20，匀浆，匀浆后的物料过400目筛，超声波辅助提取，第一次恒温碱提蛋白，等电点沉淀，离心除去上清液；再加水至固定料液比为1：10～20，均质，均质后的物料过600目筛，超声波辅助提取，第二次恒温碱提蛋白，等电点沉淀，离心除去上清液，中和，低温干燥得到火麻仁分离蛋白；

b、火麻仁蛋白肽水解液的制备：将火麻仁分离蛋白加入去离子水，调节pH值，加入混合蛋白酶，恒温酶解，沸水浴灭酶，离心取上清液，检测定量。

2)香蕉果肉水溶纤维素的制备

将未成熟的香蕉清洗、去皮，切片，浸泡，灭酶，护色，加入纤维素酶，在pH值为3.5～4，温度为45～55℃条件下水解1～2小时；

3)龙眼果肉多糖的制备

熟的龙眼果实，清洗，去皮，去核，加入去离子水，料液比为1:12～20，调整pH至4～5.5，55～65℃恒温水浴下进行超声波辅助提取，离心取上清液，冷冻干燥；

4)葡萄籽及山黄皮提取物的制备

葡萄籽清洗、山黄皮清洗去核，烘干，中药粉碎机粉碎，过200目筛，超微粉碎机粉碎，过600目筛，加入去离子水至料液比1:12～20，调整pH至3.5～4.5，50～60℃恒温水浴下进行超声波辅助提取，离心取上清液，冷冻干燥；

5)饮料制备

a’、将黄原胶、瓜尔豆胶和羧甲基纤维素钠用软化水溶解，用高速分散机混合；

b’、将步骤2)～4)所制得香蕉果肉水溶纤维素、龙眼果肉多糖、葡萄籽提取物、山黄皮提取物与木糖醇、维生素C、柠檬酸、柠檬酸钠用软化水溶解；

c’、量取定量的火麻仁蛋白肽水解液，与步骤a’、b’所得混合液混合，加入软化水至配方浓度，搅拌，均质、灌装、灭菌、冷却。

优选的，所述步骤a中，匀浆使用胶体磨匀浆，匀浆温度为25℃，胶体磨间隙为0.1～1mm，匀浆时间为5～10min；所述均质温度为55～65℃，均质压力为25～30MPa，均质次数为2～3次。

优选的，所述步骤a中，碱提的条件是pH为8～9.5，水浴温度为45～55℃，料液比1:10～20g/mL，提取时间为40～80min。

优选的，所述步骤a中，第一次离心转速为5000～6000r/min，离心时间为10～20min；第二次离心转速为7000～8000r/min，离心时间为5～10min。

优选的，所述步骤b中，所述混合蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述混合质量比为：1～2:1～3:1～3。

优选的，所述步骤b中，酶解条件为加酶的质量浓度为3～7％，底物质量浓度为6～16％，温度为45～55℃，pH为8～9.5，酶解时间为2～4h。

优选的，所述步骤b中，检测定量要求每mL酶解液中火麻仁蛋白肽不少于0.8mg。

优选的，所述步骤5)中，均质温度为80℃，压力为220kg/cm²。

优选的，所述超声波辅助提取的作用功率为120～200W，占空比为20:20s/s,时间为40～90min。

本发明的有益效果是：

有利于人体健康，易于吸收，具有抗氧化、降血压、降血脂、增强免疫力、促进矿物质吸收、调节胃肠微环境和抗疲劳等功能，为广大消费者提供了一种新型健康食品。

附图说明

图1为一次性灌胃火麻蛋白肽饮料对SHR大鼠血压的实验影响图。

具体实施方式

下面对本发明的较优的实施例作进一步的详细说明：

实施例1

饮料组份：火麻仁蛋白肽水解液40份，木糖醇3份，香蕉果肉水溶纤维素1份，龙眼果肉多糖0.5份，葡萄籽提取物0.3份，山黄皮提取物0.3份，黄原胶0.1份，瓜尔豆胶0.1份，羧甲基纤维素钠0.01份，维生素C 0.03份，柠檬酸0.2份，柠檬酸钠0.5份，去离子水100份。

制备方法：

a、火麻仁分离蛋白的制备：称取脱脂火麻仁粕，低温干燥，粉碎，过筛去除杂质，加水至料液比为1：12，使用胶体磨匀浆，匀浆温度为25℃，胶体磨间隙为0.1mm，匀浆时间为5min，匀浆后的物料过400目筛，超声波辅助提取，作用功率为120W，占空比为20:20s/s,时间为40min，第一次恒温碱提蛋白，碱提条件为pH为8.5，水浴温度为45℃，料液比1:12g/mL，提取时间为400min，等电点沉淀，离心除去上清液；再加水至固定料液比为1：12，使用均质机均质3次，均质温度为65℃、均质压力为25MPa，均质后的物料过600目筛，超声波辅助提取，第二次恒温碱提蛋白，等电点沉淀，离心除去上清液，中和，低温干燥得到火麻仁分离蛋白；

b、火麻仁蛋白肽水解液的制备：将火麻仁分离蛋白加入去离子水，调节pH值，加入蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶组成的混合蛋白酶，混合质量比为：1:1:1，加酶的质量浓度为7％，底物质量浓度为12％，pH为9，温度50℃恒温酶解4h，沸水浴灭酶，离心取上清液，检测定量要求每毫升酶解液中火麻仁蛋白肽不少于0.8mg。

2)香蕉果肉水溶纤维素的制备

将未成熟的香蕉清洗、去皮，切片，浸泡，灭酶，护色，加入纤维素酶，在pH值为4，温度为50℃条件下水解2小时；

3)龙眼果肉多糖的制备

熟的龙眼果实，清洗，去皮，去核，加入去离子水，料液比为1:20，调整pH至4.5，60℃恒温水浴下进行超声波辅助提取，作用功率为120W，占空比为20:20s/s,时间为40min，离心取上清液，冷冻干燥。

4)葡萄籽及山黄皮提取物的制备

葡萄籽清洗、山黄皮清洗去核，烘干，中药粉碎机粉碎，过200目筛，超微粉碎机粉碎，过600目筛，加入去离子水至料液比1:20，调整pH至3.5，50℃恒温水浴下进行超声波辅助提取40min，离心取上清液，冷冻干燥。

5)饮料制备

c’、量取定量的火麻仁蛋白肽水解液，与步骤a’、b’所得混合液混合，加入软化水至配方浓度，搅拌，在80℃，220kg/cm²压力下均质，灌装、灭菌、冷却。

实施例2

饮料组份：火麻仁蛋白肽25份，木糖醇2份，香蕉果肉水溶纤维素1份，龙眼果肉多糖1份，葡萄籽提取物0.1份，山黄皮提取物0.1份，黄原胶0.2份，瓜尔豆胶0.1份，羧甲基纤维素钠0.02份，维生素C 0.06份，柠檬酸0.1份，柠檬酸钠0.3份，全脂奶粉10份，香草提取物0.03份，去离子水110份。

制备方法：

1)火麻仁蛋白肽水解液的制备

a、火麻仁分离蛋白的制备：称取脱脂火麻仁粕，低温干燥，粉碎，过筛去除杂质，加水至料液比为1：10，使用胶体磨匀浆，匀浆温度为25℃，胶体磨间隙为0.1mm，匀浆时间为10min，匀浆后的物料过400目筛，超声波辅助提取，作用功率为120W，占空比为20:20s/s,时间为80min，第一次恒温碱提蛋白，碱提条件为pH为8，水浴温度为45℃，料液比1:10g/mL，提取时间为40min，等电点沉淀，离心除去上清液；再加水至固定料液比为1：10，使用均质机均质2次，均质温度为55℃、均质压力为25MPa，均质后的物料过600目筛，超声波辅助提取，第二次恒温碱提蛋白，等电点沉淀，离心除去上清液，中和，低温干燥得到火麻仁分离蛋白；

b、火麻仁蛋白肽水解液的制备：将火麻仁分离蛋白加入去离子水，调节pH值为8，加入蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶组成的混合蛋白酶，混合质量比为：1:1:1，加酶的质量浓度为3％，底物质量浓度为10％，温度45℃恒温酶解2h，沸水浴灭酶，离心取上清液，检测定量要求每毫升酶解液中火麻仁蛋白肽不少于0.8mg。

2)香蕉果肉水溶纤维素的制备

将未成熟的香蕉清洗、去皮，切片，浸泡，灭酶，护色，加入纤维素酶，在pH值为3.5，温度为45℃条件下水解2小时；

3)龙眼果肉多糖的制备

熟的龙眼果实，清洗，去皮，去核，加入去离子水，料液比为1:20，调整pH至5.5，60℃恒温水浴下进行超声波辅助提取，作用功率为200W，占空比为20:20s/s,时间为80min，离心取上清液，冷冻干燥。

4)葡萄籽及山黄皮提取物的制备

葡萄籽清洗、山黄皮清洗去核，烘干，中药粉碎机粉碎，过200目筛，超微粉碎机粉碎，过600目筛，加入去离子水至料液比1:20，调整pH至4.5，50℃恒温水浴下进行超声波辅助提取，离心取上清液，冷冻干燥。

5)饮料制备

实施例3

饮料组份：火麻仁蛋白肽30份，木糖醇2～3份，香蕉果肉水溶纤维素3份，龙眼果肉多糖1份，葡萄籽提取物0.1份，山黄皮提取物0.2份，黄原胶0.1份，瓜尔豆胶0.1份，羧甲基纤维素钠0.02份，维生素C 0.03份，柠檬酸0.1份，柠檬酸钠0.3份，大豆分离蛋白5份，浓缩桑葚汁20份，去离子水120份。

制备方法同实施例1。

实施例4

一、测定本发明体外ACE抑制能力

分别用实施例1、2、3所制得的饮料进行如下实验。

取20μl饮料样品和50μl HHL溶液，于37℃保温6min，加入30μl ACE，37℃下反应30min后，加入100μl 1mol/L的HCl溶液终止反应，至室温，过0.22μm的滤膜，取5μl反应产物进样，通过HPLC洗脱图谱定量马尿酸生成量，以马尿酸的生成量来判断样品对ACE活性的抑制作用，同时做空白对照。

色谱条件为：色谱柱：C18分析用色谱柱(4.6mm×150mm，5mm)；流速：1.0ml/min；检测波长：228nm；进样量：5ml；柱温：30℃；流动相：12％乙腈(含0.5％乙酸)。不同配方饮料样品的ACE抑制率结果如表1所示：

表1 不同配方饮料样品的ACE抑制率结果

二、测定本发明体外抗氧化功能

分别用实施例1、2、3所制得的饮料进行如下实验。

①DPPH自由基

分别取2mL实例1、2、3中的样液于具塞试管中，加入2×10-4mol/L的DPPH溶液2mL，摇匀，30min后，在515nm处测定其吸光度值Ai；同时测定2mLDPPH溶液与2mL70％乙醇混合后的吸光度值A_c和2mL待测液与2mL70％乙醇混合后的吸光度值A_j，均以70％乙醇作参比。根据如下公式计算清除率。

清除率(％)＝[1-(A_i-A_j)/A_c]×100

式中A_c：DPPH与溶剂混合液的吸光值；A_i：DPPH与样液反应后的吸光值；A_j：样液与溶剂混合液的吸光值。以抗坏血酸(Vc)作阳性对照。

实施例1～3所制得饮料的功能活性检测结果如表2所示

表2 清除DPPH自由基结果

组别	实施例1	实施例2	实施例3
				清除率(％)	77.11±0.1	68.28±0.72	72.13±0.34

②OH˙清除率

在具塞试管中依次加入9mmol/L FeSO₄溶液2mL、9mmol/L水杨酸-乙醇溶液2mL、分别将实例1、2、3中的样液2mL和8.8mmol/L H₂O₂2mL，摇匀，于37℃水浴中反应30min，在510nm下测定吸光度值A_X。并按相同方法，测定不加样液的溶液的吸光度A₀，不加H₂O₂溶液的吸光度A_X0，均以蒸馏水为参比。清除率计算公式：

清除率(％)＝[A₀-(A_X-A_X0)]/A₀×100

式中：A₀：空白对照液的吸光度；A_X：加入样液后的吸光度；A_X0：不加H₂O₂样液的吸光度。以抗坏血酸(Vc)作阳性对照。

实施例1～3所制得饮料的功能活性检测结果如表3所示

表3 对OH·的清除效果

组别	实施例1	实施例2	实施例3
				清除率(％)	63.20±0.2	57.20±0.2	60.10±0.4

③体内降血压功能实验

采用原发性高血压模型大鼠(Spontaneously Hypertensive Rats，SHR)为实验动物，25只，雄性，8～10周龄，体重200g左右，收缩压>180mmHg，将SHR大鼠随机分为五组，每笼5只喂养，自由采食引水，环境温度(25±1)℃，相对湿度(55±5)％，SHR大鼠适应环境7d后，开始实验。

一次性灌胃给予SHR大鼠火麻水解蛋白肽，大鼠适应环境后，将五组SHR大鼠分别对应定为空白对照组、阳性对照组、实例1组、实例2组和实例3组。实例1、2、3组的剂量均为100mL/kg·bw，经灌胃给予SHR大鼠，空白对照组灌胃给予相应剂量的蒸馏水，阳性对照组灌胃给予5mg/kg·bw卡托普利。测定灌胃后0、2、4、6、8h时SHR大鼠的血压。大鼠血压测定方法采用尾动脉脉搏间接测定法测定清醒大鼠的血压和心率。

一次性灌胃火麻蛋白肽饮料对SHR大鼠血压的影响从图1可以看出，与空白对照组相比，阳性对照组与火麻蛋白肽饮料不同实例组的SHR大鼠的血压在灌胃后均有明显下降，在灌胃后2h血压下降值达到最大，然后缓慢回升。由图1可见，各组与空白组相比，血压下降幅度基本相同，但在回升过程中，阳性对照组的回升幅度要小于火麻蛋白肽饮料灌胃组。实验结果表明，火麻蛋白肽饮料实例组与空白对照组相比，血压水平下降显著(P<0.05)。

以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。

Claims

1.一种火麻蛋白肽饮料，其特征在于，包括以下重量份的原料：

火麻仁蛋白肽水解液20~40份，木糖醇2~3 份，香蕉果肉水溶纤维素 1~3份，龙眼果肉多糖0.5~1份，葡萄籽提取物0.1~0.3份，山黄皮提取物0.1~0.3份，黄原胶0.1~0.2份，瓜尔豆胶0.1~0.2份，羧甲基纤维素钠0.01~0.02份，维生素C 0.03~0.06份，柠檬酸0.1~0.2份，柠檬酸钠0.3~0.5份，去离子水100~120份。

2.一种制备如权利要求1所述的火麻肽饮料的方法，其特征在于，包括以下几个步骤：

1）火麻仁蛋白肽水解液的制备

a、火麻仁分离蛋白的制备：称取脱脂火麻仁粕，低温干燥，粉碎，过筛去除杂质，加水至料液比为1：10~20，匀浆，匀浆后的物料过400目筛，超声波辅助提取，第一次恒温碱提蛋白，等电点沉淀，离心除去上清液；再加水至固定料液比为1：10~20，均质，均质后的物料过600目筛，超声波辅助提取，第二次恒温碱提蛋白，等电点沉淀，离心除去上清液，中和，低温干燥得到火麻仁分离蛋白；

b、火麻仁蛋白肽水解液的制备：将火麻仁分离蛋白加入去离子水，调节 pH 值，加入混合蛋白酶，恒温酶解，沸水浴灭酶，离心取上清液，检测定量；

2）香蕉果肉水溶纤维素的制备

将未成熟的香蕉清洗、去皮，切片，浸泡，灭酶，护色，加入纤维素酶，在pH值为3.5~4 ，温度为45~55℃条件下水解1~2小时；

3）龙眼果肉多糖的制备

熟的龙眼果实，清洗，去皮，去核，加入去离子水，料液比为1:12~20，调整pH至4~5.5，55~65℃恒温水浴下进行超声波辅助提取，离心取上清液，冷冻干燥；

4）葡萄籽及山黄皮提取物的制备

葡萄籽清洗、山黄皮清洗去核，烘干，中药粉碎机粉碎，过200目筛，超微粉碎机粉碎，过600目筛，加入去离子水至料液比1:12~20，调整pH至3.5~4.5，50~60℃恒温水浴下进行超声波辅助提取，离心取上清液，冷冻干燥；

5）饮料制备

a’ 、将黄原胶、瓜尔豆胶和羧甲基纤维素钠用软化水溶解，用高速分散机混合；

b’ 、将步骤2）~4）所制得香蕉果肉水溶纤维素、龙眼果肉多糖、葡萄籽提取物、山黄皮提取物与木糖醇、维生素C、柠檬酸、柠檬酸钠用软化水溶解；

c’ 、量取步骤1）所得火麻仁蛋白肽水解液，与步骤a’、b’所得混合液混合，加入软化水至配方浓度，搅拌，均质、灌装、灭菌、冷却。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a中，匀浆使用胶体磨匀浆，匀浆温度为25℃，胶体磨间隙为0.1~1mm，匀浆时间为5~10min；所述均质温度为55~65℃，均质压力为25~30MPa，均质次数为2~3次。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a中，碱提的条件是 pH为8~9.5，水浴温度为45~55℃，料液比 1: 10~20 g/mL，提取时间为 40~80 min。

5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a中，第一次离心转速为5000~6000 r/ min，离心时间为 10~20 min；第二次离心转速为7000~8000r/min，离心时间为5~10 min。

6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤b中，所述混合蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述混合质量比为：1~2:1~3:1~3。

7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤b中，酶解条件为加酶的质量浓度为3~7%，底物质量浓度为6~16%，温度为45~55℃，pH为8~9.5，酶解时间为2~4h。

8.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤b中，检测定量要求每mL酶解液中火麻仁蛋白肽不少于0.8mg。

9.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤5）中，均质温度为80℃，压力为220kg/cm²。

10.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述超声波辅助提取的作用功率为120~200W，占空比为 20:20s/s, 时间为 40~90min。