CN104345110A - 一种中药组合物制剂中七种成分的含量测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中药组合物制剂中七种成分含量的测定方法,属于中药领域,具体制备步骤为:供试品溶液的制备、对照品溶液的制备、UPLC检测、标准曲线的制定及结果计算。本发明的测定方法周期短、灵敏度高。
Description
技术领域
本发明属于中药分析领域,具体涉及中药成分的含量测定方法。
背景技术
该中药组合物由制何首乌、菊花、酸枣仁等多味中药组成,具有治疗抑郁失眠的功效,含有绿原酸、二苯乙烯苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸等主要成分。目前其主要成分的检测方法有胶束电动毛细管色谱法、高效液相色谱法、液质联用等方法,都不太理想,不能有效的控制质量。
为了能够有效的控制产品质量,保证公众的用药安全,必须对生产工艺的中间环节进行质量控制,但是该中药组合物中的成分比较多,目前的方法检验周期长,重复性、灵敏度等无法满足连续生产的需要。
发明内容
本发明的目的是提供一种周期短、灵敏度高的检测一种中药组合物中多种成分含量的方法。
为解决上述技术问题,本发明所采用的技术方案是:
一种中药组合物制剂中七种成分含量的测定方法,该中药组合物制剂由下列重量份的原料药制成: 何首乌150-270、酸枣仁145-275、桑椹160-255、灵芝80-135、百合75-160、知母50-110、丹参120-200、菊花45-120、茯苓75-145、合欢花165-288,该含量测定方法由以下步骤组成:
A、供试品溶液的制备:称取该中药组合物制剂1-2g,加甲醇50ml,称定重量,超声提取10-30min,放冷、称重,用甲醇补足重量,过滤,摇匀,即得;
B、对照样品溶液的制备:分别称取绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品,加甲醇,摇匀,即得各对照品溶液;
C、UPLC检测:色谱柱为C18,柱温40℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱:0-2min,10%乙腈,90%的0.1%磷酸;2-2.5min,10-12%乙腈,90-88%的0.1%磷酸;2.5-20min,12%乙腈,88%的0.1%磷酸;20-21min,12-95%乙腈,88-5%的0.1%磷酸;检测波长340nm,流速为0.2-0.4ml/min;
D、标准曲线的制定及计算结果:分别将绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品溶液0.5-5.0mL注入步骤c中超高效色谱仪中分析,以色谱峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,得到各对照样品溶液的标准曲线;然后将供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析,将各成分峰面积带入标准曲线中,得到绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量。
作为优选方式,所述步骤A中用0.2μm滤膜过滤;所述步骤C中色谱柱为ACQUITY BEH C18 ,规格为1.7μm,2.1×100mm,流速为0.4 ml/min。
优选的测定方法:
A、供试品溶液的制备:称取该中药组合物制剂1-2g,加甲醇50ml,称定重量,超声提取10-30min,放冷、称重,用甲醇补足重量,过滤,摇匀,即得;
B、对照样品溶液的制备:分别称取绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品,加甲醇,摇匀,即得各对照品溶液,绿原酸浓度为0.032 mg.mL-1、芒果苷浓度为0.051mg.mL-1、二苯乙烯苷0.492mg.mL-1、斯皮诺素0.041mg.mL-1、木犀草苷0.021mg.mL-1、槲皮苷0.213mg.mL-1、3,5-二咖啡酰奎宁酸0.047mg.mL-1;
C、UPLC检测:色谱柱为C18,柱温40℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱:0-2min,10%乙腈,90%的0.1%磷酸;2-2.5min,10-12%乙腈,90-88%的0.1%磷酸;2.5-20min,12%乙腈,88%的0.1%磷酸;20-21min,12-95%乙腈,88-5%的0.1%磷酸;检测波长340nm,流速为0.2-0.4ml/min;
D、标准曲线的制定及计算结果:分别将绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品溶液0.5-5.0mL注入步骤c中超高效色谱仪中分析,以色谱峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,得到各对照样品溶液的标准曲线;然后将供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析,将各成分峰面积带入标准曲线中,得到绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量。
优选的,其原料药的重量份比例为:
何首乌158 酸枣仁270 桑椹165 灵芝135 百合80
知母110 丹参125 菊花118 茯苓80 合欢花280。
或
何首乌265 酸枣仁147 桑椹250 灵芝81 百合158
知母55 丹参188 菊花50 茯苓145 合欢花170。
或
何首乌225 酸枣仁163 桑椹220 灵芝83 百合113
知母50 丹参190 菊花45 茯苓113 合欢花178。
或
何首乌165 酸枣仁228 桑椹173 灵芝110 百合75
知母75 丹参150 菊花78 茯苓78 合欢花218。
或
何首乌200 酸枣仁200 桑椹200 灵芝100 百合100
知母66.7 丹参166.7 菊花66.7 茯苓100 合欢花200。
为实现上述技术方案,将该中药组合物制成胶囊剂、片剂或丸剂。
所述片剂的制备方法包括以下步骤:
a) 按比例称取选净的何首乌、知母及选净粗碎的酸枣仁,加6-12倍量30%-70%乙醇,加热回流提取1-3次,每次1-3小时,提取液过滤,合并,减压回收乙醇,浓缩至在60℃测定相对密度为1.10-1.15,得醇提浸膏,备用;
b) 按比例称取选净的桑椹、茯苓、灵芝、丹参、合欢花、菊花,加10-15倍量水提取1-3次,每次提取1-3小时,提取液滤过,合并,浓缩至在60℃测定相对密度约为1.10-1.15,得水提浸膏,备用;
c) 按比例称取选净的百合,粉碎成100目粉,备用;
d) 将步骤a)所得醇提浸膏和步骤b)的水提浸膏及步骤c)所得百合细粉干燥制粒,整粒后,加入适当辅料,混匀,压片,包衣,即得。
为了验证本发明的方法的可行性和精确度,作了如下的试验:
仪器精密度试验
分别精密吸取对照品溶液1μL,连续进样6次,测定峰面积,结果绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸面积的RSD分别为1.22%、1.16%、1.04%、0.76%、1.62%、1.14%和1.22%,表明仪器精密度良好。
稳定性试验
吸取实施例1中的供试品溶液,分别于0、2、4、8、12、24h,进行测定,绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸峰面积的RSD分别为1.24%、1.57%、1.39%、1.05%、0.86%、0.94%和1.61%,表明供试品溶液在24h内基本稳定。
重复性试验
按照实施例1中供试品溶液的制备方法制备6份,测定,结果样品中绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的RSD分别为1.02%,1.15%,0.92%,1.05%,1.02%,0.89%和1.15%,表明方法的重复性良好。
回收率试验
精密称取己知含量的样品0.5g,平行6份,分别加入一定量的对照品溶液,测定含量并计算回收率,结果绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的平均回收率为:96.3%,98.2%,100.5%,99.3%,97.7%,97.0%,96.4%,RSD分别为2.06%,0.54%,1.44%,2.04%,0.18%,1.42%,0.95%,表明方法准确可靠。
取5批次该中药组合物片剂,计算结果如下
由于采用了上述技术方案,本发明取得的技术进步是:
本发明采用UPLC同时测定该中药组合物中多种成分的含量,重复性好、精密度高、分析速度快,可以在比较短的周期内检测出各成分的含量,可以更方便的控制药物的质量。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明做进一步详细说明:
仪器与试药
ACQUITY UPLC H CLASS(美国Waters公司,包括四元高压梯度泵、真空脱气机、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、Empower3色谱工作站);KQ5200B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);分析天平(AG135,METTLER TOLEDO)
乙腈、甲醇(色谱级,美国Fisher Scientific公司),磷酸(色谱级,天津市科密欧化学试剂有限公司),水(重蒸馏水),其他试剂均为分析纯。该中药组合物样品(石家庄以岭药业股份有限公司,批号100901、100902、100903、111001、120602)。对照品:绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸(批号分别为:110753-200413、111607-200402、110844-201109、111869-201102、111720-201106、111782-201102),均购于中国药品生物制品检定所。
实施例1:
原料药配方为:
何首乌200克 酸枣仁200克 桑椹200克 灵芝100克 百合100克
知母66. 7克 丹参166.7克 菊花66.7克 茯苓100克 合欢花200克
中药组合物片剂的制备方法为:
a) 按比例称取选净的何首乌、知母及选净粗碎的酸枣仁,加60%乙醇,加热回流提取2次,第一次加10倍量,提取2小时,第二次加8倍量,提取1小时,提取液过滤,合并,减压回收乙醇,浓缩至在60℃测定相对密度为1.10,得醇提浸膏,备用;
b) 按比例称取选净的桑椹、茯苓、灵芝、丹参、合欢花、菊花,加11倍量水提取2次,每次1.5小时,提取液过滤,合并,浓缩至在60℃测定相对密度约为1.10,得水提浸膏,备用;
c) 按比例称取选净的百合,粉碎成100目粉,备用;
d) 将步骤c)所得百合细粉加入喷雾干燥制粒机原料容器内,将步骤a)所得醇提浸膏和步骤b)的水提浸膏喷入,喷雾制粒,整粒后,加入0.5%硬脂酸镁,混匀,压片,包衣,即得。
该中药组合物制剂中多种成分含量的测定方法,由以下步骤组成:
A、供试品溶液的制备:取该中药组合物片芯,研细,称取1g,加甲醇50ml,称定重量,超声提取30min,放冷、称重,用甲醇补足重量,用0.2μm滤膜过滤,摇匀,即得;
B、对照样品溶液的制备:分别称取绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品,加甲醇,摇匀,即得各对照品溶液,绿原酸浓度为0.032 mg.mL-1、芒果苷浓度为0.051mg.mL-1、二苯乙烯苷0.492mg.mL-1、斯皮诺素0.041mg.mL-1、木犀草苷0.021mg.mL-1、槲皮苷0.213mg.mL-1、3,5-二咖啡酰奎宁酸0.047mg.mL-1;
C、UPLC检测:色谱柱为C18,ACQUITY BEH C18 ,规格为1.7μm,2.1×100mm,柱温40℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱:0-2min,10%乙腈,90%的0.1%磷酸;2-2.5min,10-12%乙腈,90-88%的0.1%磷酸;2.5-20min,12%乙腈,88%的0.1%磷酸;20-21min,12-95%乙腈,88-5%的0.1%磷酸;检测波长340nm,流速为0.4ml/min;
D、标准曲线的制定及计算结果:分别将绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品溶液0.5mL注入步骤c中超高效色谱仪中分析,然后分别吸取1.0ml的各对照品溶液、2.0 ml的各对照品溶液、3.0 ml的各对照品溶液、4.0 ml的各对照品溶液、5.0 ml的各对照品溶液,注入超高效色谱仪中进行色谱分析以色谱峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,得到各对照样品溶液的标准曲线;然后将供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析,将各成分峰面积带入标准曲线中,得到绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量,分别为0.61 2mg、1.445 mg、6.386 mg、0.624 mg、0.378 mg、0.592 mg、0.929 mg。
表1
对照品 | 标准曲线 | 线性关系(r2) | 浓度范围 (ng) |
绿原酸 | y=7920.4x+61.9 | 0.9998 | 3.2~32 |
芒果苷 | y =2853.6x-949.7 | 0.9997 | 5.1~51 |
二苯乙烯苷 | y =1208.2x-26.2 | 0.9996 | 49.2~492 |
斯皮诺素 | y =8912.6x-15.7 | 0.9999 | 4.1~41 |
木犀草苷 | y =1177.5x+57.9 | 0.9997 | 2.1~21 |
槲皮苷 | y =1545.2x-10.8 | 0.9998 | 21.3~213 |
3,5-二咖啡酰奎宁酸 | y =7192.5x-18.8 | 0.9996 | 4.7~47 |
实施例2:
原料药配方为:
何首乌150克 酸枣仁275克 桑椹160克 灵芝80克 百合160克
知母110克 丹参120克 菊花120克 茯苓75克 合欢花288克。
中药组合物胶囊剂的制备方法为:
a) 按比例称取选净的何首乌、知母及选净粗碎的酸枣仁,加6倍量30%乙醇,加热回流提取3次,每次3小时,提取液过滤,合并,减压回收乙醇,浓缩至在60℃测定相对密度为1.15,得醇提浸膏,备用;
b) 按比例称取选净的桑椹、茯苓、灵芝、丹参、合欢花、菊花,加10倍量水提取3次,每次提取3小时,提取液滤过,合并,浓缩至在60℃测定相对密度约为1.15,得水提浸膏,备用;
c) 按比例称取选净的百合,粉碎成100目粉,备用;
d) 将步骤a)所得醇提浸膏和步骤b)的水提浸膏及步骤c)所得百合细粉干燥制粒,整粒后,加入适当辅料,混匀,填充胶囊,即得。
中药组合物制剂中多种成分含量的测定方法,由以下步骤组成:
A、供试品溶液的制备:取该中药组合物胶囊剂,倒出内容物,研细,称取1.5g,加甲醇50ml,称定重量,超声提取10min,放冷、称重,用甲醇补足重量,用0.2μm滤膜过滤,摇匀,即得;
B、对照样品溶液的制备:分别称取绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品,加甲醇,摇匀,即得各对照品溶液,绿原酸浓度为0.032 mg.mL-1、芒果苷浓度为0.051mg.mL-1、二苯乙烯苷0.492mg.mL-1、斯皮诺素0.041mg.mL-1、木犀草苷0.021mg.mL-1、槲皮苷0.213mg.mL-1、3,5-二咖啡酰奎宁酸0.047mg.mL-1;
C、UPLC检测:色谱柱为C18,ACQUITY BEH C18 ,规格为1.7μm,2.1×100mm,柱温40℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱:0-2min,10%乙腈,90%的0.1%磷酸;2-2.5min,10-12%乙腈,90-88%的0.1%磷酸;2.5-20min,12%乙腈,88%的0.1%磷酸;20-21min,12-95%乙腈,88-5%的0.1%磷酸;检测波长340nm,流速为0.2ml/min;
D、标准曲线的制定及计算结果:分别将绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品溶液0.5mL注入步骤c中超高效色谱仪中分析,然后分别吸取1.0ml的各对照品溶液、2.0 ml的各对照品溶液、3.0 ml的各对照品溶液、4.0 ml的各对照品溶液、5.0 ml的各对照品溶液,注入超高效色谱仪中进行色谱分析以色谱峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,得到各对照样品溶液的标准曲线;然后将供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析,将各成分峰面积带入标准曲线中,得到绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量,分别为0.552mg、1.245 mg、6.256 mg、0.594 mg、0.458 mg、0.612 mg、0.889 mg。
仪器精密度试验
分别精密吸取对照品溶液1μL,连续进样6次,测定峰面积,结果绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸面积的RSD分别为1.22%、1.16%、1.04%、0.76%、1.62%、1.14%和1.22%,表明仪器精密度良好。
稳定性试验
吸取本实施例中的供试品溶液,0、2、4、8、12、24h,进行测定,绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸峰面积的RSD分别为1.24%、1.57%、1.39%、1.05%、0.86%、0.94%和1.61%,表明供试品溶液在24h内基本稳定。
重复性试验
按照本实施例中供试品溶液的制备方法制备6份,测定,结果样品中绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的RSD分别为1.02%,1.15%,0.92%,1.05%,1.02%,0.89%和1.15%,表明方法的重复性良好。
回收率试验
精密称取本实施例的样品0.5g,平行6份,分别加入一定量的对照品溶液,测定含量并计算回收率,结果绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的平均回收率为:96.3%,98.2%,100.5%,99.3%,97.7%,97.0%,96.4%,RSD分别为2.06%,0.54%,1.44%,2.04%,0.18%,1.42%,0.95%,表明方法准确可靠。
实施例3:
原料药配方为:
何首乌270克 酸枣仁145克 桑椹255克 灵芝135克 百合75克
知母50克 丹参120克 菊花45克 茯苓145克 合欢花165克。
中药组合物丸剂的制备方法为:
a) 按比例称取选净的何首乌、知母及选净粗碎的酸枣仁,加12倍量70%乙醇,加热回流提取2次,每次2小时,提取液过滤,合并,减压回收乙醇,浓缩至在60℃测定相对密度为1.12,得醇提浸膏,备用;
b) 按比例称取选净的桑椹、茯苓、灵芝、丹参、合欢花、菊花,加15倍量水提取2次,每次提取2小时,提取液滤过,合并,浓缩至在60℃测定相对密度约为1.12,得水提浸膏,备用;
c) 按比例称取选净的百合,粉碎成100目粉,备用;
d) 将步骤a)所得醇提浸膏和步骤b)的水提浸膏及步骤c)所得百合细粉按照常规方法制成丸剂,即得。
该中药组合物制剂中多种成分含量的测定方法,由以下步骤组成:
A、供试品溶液的制备:称取该中药组合物丸剂,研细,称取2g,加甲醇50ml,称定重量,超声提取20min,放冷、称重,用甲醇补足重量,用0.2μm滤膜过滤,摇匀,即得;
B、对照样品溶液的制备:分别称取绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品,加甲醇,摇匀,即得各对照品溶液,绿原酸浓度为0.032 mg.mL-1、芒果苷浓度为0.051mg.mL-1、二苯乙烯苷0.492mg.mL-1、斯皮诺素0.041mg.mL-1、木犀草苷0.021mg.mL-1、槲皮苷0.213mg.mL-1、3,5-二咖啡酰奎宁酸0.047mg.mL-1;
C、UPLC检测:色谱柱为C18,ACQUITY BEH C18 ,规格为1.7μm,2.1×100mm,柱温40℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱:0-2min,10%乙腈,90%的0.1%磷酸;2-2.5min,10-12%乙腈,90-88%的0.1%磷酸;2.5-20min,12%乙腈,88%的0.1%磷酸;20-21min,12-95%乙腈,88-5%的0.1%磷酸;检测波长340nm,流速为0.3ml/min;
D、标准曲线的制定及计算结果:分别将绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品溶液0.5mL注入步骤c中超高效色谱仪中分析,然后分别吸取1.0ml的各对照品溶液、2.0 ml的各对照品溶液、3.0 ml的各对照品溶液、4.0 ml的各对照品溶液、5.0 ml的各对照品溶液,注入超高效色谱仪中进行色谱分析以色谱峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,得到各对照样品溶液的标准曲线;然后将供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析,将各成分峰面积带入标准曲线中,得到绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量,分别为0.572mg、1.345 mg、6.556 mg、0.624 mg、0.388 mg、0.572 mg、0.929 mg。
仪器精密度试验
分别精密吸取对照品溶液1μL,连续进样6次,测定峰面积,结果绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸面积的RSD分别为1.22%、1.16%、1.04%、0.76%、1.62%、1.14%和1.22%,表明仪器精密度良好。
稳定性试验
吸取本实施例中的供试品溶液,0、2、4、8、12、24h,进行测定,绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸峰面积的RSD分别为1.24%、1.57%、1.39%、1.05%、0.86%、0.94%和1.61%,表明供试品溶液在24h内基本稳定。
重复性试验
按照本实施例中供试品溶液的制备方法制备6份,测定,结果样品中绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的RSD分别为1.02%,1.15%,0.92%,1.05%,1.02%,0.89%和1.15%,表明方法的重复性良好。
回收率试验
精密本实施例的样品0.5g,平行6份,分别加入一定量的对照品溶液,测定含量并计算回收率,结果绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的平均回收率为:96.3%,98.2%,100.5%,99.3%,97.7%,97.0%,96.4%,RSD分别为2.06%,0.54%,1.44%,2.04%,0.18%,1.42%,0.95%,表明方法准确可靠。
Claims (6)
1.一种中药组合物制剂中七种成分的含量测定方法,该中药组合物制剂由下列重量份的原料药制成: 何首乌150-270、酸枣仁145-275、桑椹160-255、 灵芝80-135、百合75-160、 知母50-110、丹参120-200、菊花45-120、茯苓75-145、 合欢花165-288,其特征在于该含量测定方法由以下步骤组成:
A、供试品溶液的制备:称取该中药组合物制剂1-2g,加甲醇50ml,称定重量,超声提取10-30min,放冷、称重,用甲醇补足重量,过滤,摇匀,即得;
B、对照样品溶液的制备:分别称取绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品,加甲醇,摇匀,即得各对照品溶液;
C、UPLC检测:色谱柱为C18,柱温40℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱:0-2min,10%乙腈,90%的0.1%磷酸;2-2.5min,10-12%乙腈,90-88%的0.1%磷酸;2.5-20min,12%乙腈,88%的0.1%磷酸;20-21min,12-95%乙腈,88-5%的0.1%磷酸;检测波长340nm,流速为0.2-0.4ml/min;
D、标准曲线的制定及计算结果:分别将绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品溶液0.5-5.0mL注入步骤c中超高效色谱仪中分析,以色谱峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,得到各对照样品溶液的标准曲线;然后将供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析,将各成分峰面积带入标准曲线中,得到绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量。
2.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于:所述步骤A中用0.2μm滤膜过滤;所述步骤C中色谱柱为ACQUITY BEH C18 ,规格为1.7μm,2.1×100mm,流速为0.4 ml/min。
3.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于:
A、供试品溶液的制备:称取该中药组合物制剂1-2g,加甲醇50ml,称定重量,超声提取10-30min,放冷、称重,用甲醇补足重量,过滤,摇匀,即得;
B、对照样品溶液的制备:分别称取绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品,加甲醇,摇匀,即得各对照品溶液,绿原酸浓度为0.032 mg.mL-1、芒果苷浓度为0.051mg.mL-1、二苯乙烯苷0.492mg.mL-1、斯皮诺素0.041mg.mL-1、木犀草苷0.021mg.mL-1、槲皮苷0.213mg.mL-1、3,5-二咖啡酰奎宁酸0.047mg.mL-1;
C、UPLC检测:色谱柱为C18,柱温40℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱:0-2min,10%乙腈,90%的0.1%磷酸;2-2.5min,10-12%乙腈,90-88%的0.1%磷酸;2.5-20min,12%乙腈,88%的0.1%磷酸;20-21min,12-95%乙腈,88-5%的0.1%磷酸;检测波长340nm,流速为0.2-0.4ml/min;
标准曲线的制定及计算结果:分别将绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品溶液0.5-5.0mL注入步骤c中超高效色谱仪中分析,以色谱峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,得到各对照样品溶液的标准曲线;然后将供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析,将各成分峰面积带入标准曲线中,得到绿原酸、芒果苷、二苯乙烯苷、斯皮诺素、木犀草苷、槲皮苷、3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量。
4.根据权利要求1-3任一项所述的测定方法,其特征在于该中药组合物原料药的重量份比例为:
何首乌200 酸枣仁200 桑椹200 灵芝100 百合100
知母66.7 丹参166.7 菊花66.7 茯苓100 合欢花200。
5.根据权利要求1-3任一项所述的测定方法,其特征在于所述药物剂型为胶囊剂、片剂或丸剂。
6.权利要求5所述的测定方法,其特征在于所述片剂的制备方法包括以下步骤:
a) 按比例称取选净的何首乌、知母及选净粗碎的酸枣仁,加6-12倍量30%-70%乙醇,加热回流提取1-3次,每次1-3小时,提取液过滤,合并,减压回收乙醇,浓缩至在60℃测定相对密度为1.10-1.15,得醇提浸膏,备用;
b) 按比例称取选净的桑椹、茯苓、灵芝、丹参、合欢花、菊花,加10-15倍量水提取1-3次,每次提取1-3小时,提取液滤过,合并,浓缩至在60℃测定相对密度约为1.10-1.15,得水提浸膏,备用;
c) 按比例称取选净的百合,粉碎成100目粉,备用;
d) 将步骤a)所得醇提浸膏和步骤b)的水提浸膏及步骤c)所得百合细粉干燥制粒,整粒后,加入适当辅料,混匀,压片,包衣,即得。
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Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105866284A (zh) * | 2016-04-26 | 2016-08-17 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 一种同时检测清热镇咳糖浆中三种成分的方法 |
CN105954400A (zh) * | 2016-04-26 | 2016-09-21 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 液质谱串联法测定清热镇咳糖浆中多种成分的方法 |
CN107149623A (zh) * | 2016-03-03 | 2017-09-12 | 石家庄以岭药业股份有限公司 | 一种中药组合物的含量测定方法 |
CN109212082A (zh) * | 2018-10-10 | 2019-01-15 | 桂林三金药业股份有限公司 | 一种复方罗汉果清肺制剂的含量检测方法 |
CN109239224A (zh) * | 2018-10-17 | 2019-01-18 | 山西大学 | 酸枣仁水提物中9种入血成分的同时定量测定方法 |
CN109324126A (zh) * | 2018-09-21 | 2019-02-12 | 山西中医药大学 | 一种利用uplc-ms/ms同时测定酸枣仁中9种化学成分的方法 |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109828059B (zh) * | 2019-04-02 | 2021-08-31 | 成都中医药大学 | 桂枝芍药知母汤的检测方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0299107A1 (de) * | 1986-02-06 | 1989-01-18 | ERGO Forschungsgesellschaft mbH | Verfahren zur Abtrennung und Gewinnung von Dicaffeoyl-chinasäuren |
CN1493319A (zh) * | 2002-10-28 | 2004-05-05 | 河北以岭医药研究院有限公司 | 一种治疗神经衰弱的药物组合物 |
JP2004161706A (ja) * | 2002-11-14 | 2004-06-10 | Api Co Ltd | 健康食品、医薬品、化粧品並びに健康食品、医薬品又は化粧品用素材及びそれらの製造方法 |
CN101919962A (zh) * | 2009-06-10 | 2010-12-22 | 河北以岭医药研究院有限公司 | 一种治疗失眠的药物及其制备方法 |
CN102038856A (zh) * | 2009-10-13 | 2011-05-04 | 北京以岭药业有限公司 | 一种中药组合物中四种成分的含量测定方法 |
-
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- 2013-08-08 CN CN201310342955.0A patent/CN104345110B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0299107A1 (de) * | 1986-02-06 | 1989-01-18 | ERGO Forschungsgesellschaft mbH | Verfahren zur Abtrennung und Gewinnung von Dicaffeoyl-chinasäuren |
CN1493319A (zh) * | 2002-10-28 | 2004-05-05 | 河北以岭医药研究院有限公司 | 一种治疗神经衰弱的药物组合物 |
JP2004161706A (ja) * | 2002-11-14 | 2004-06-10 | Api Co Ltd | 健康食品、医薬品、化粧品並びに健康食品、医薬品又は化粧品用素材及びそれらの製造方法 |
CN101919962A (zh) * | 2009-06-10 | 2010-12-22 | 河北以岭医药研究院有限公司 | 一种治疗失眠的药物及其制备方法 |
CN102038856A (zh) * | 2009-10-13 | 2011-05-04 | 北京以岭药业有限公司 | 一种中药组合物中四种成分的含量测定方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
冯育林 等: "HPLC法测定杏香兔耳风中绿原酸、3, 5-二咖啡酰奎宁酸和木犀草素", 《中草药》 * |
王英锋 等: "HPLC法测定杏香兔耳风中绿原酸和 3, 5-o-二咖啡酰基奎宁酸的含量", 《药物分析杂志》 * |
田笑菲 等: "RP-HPLC双波长切换法同时测定复方酸枣仁颗粒中芒果苷和斯皮诺素", 《中国实验方剂学杂志》 * |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107149623A (zh) * | 2016-03-03 | 2017-09-12 | 石家庄以岭药业股份有限公司 | 一种中药组合物的含量测定方法 |
CN105866284A (zh) * | 2016-04-26 | 2016-08-17 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 一种同时检测清热镇咳糖浆中三种成分的方法 |
CN105954400A (zh) * | 2016-04-26 | 2016-09-21 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 液质谱串联法测定清热镇咳糖浆中多种成分的方法 |
CN109324126A (zh) * | 2018-09-21 | 2019-02-12 | 山西中医药大学 | 一种利用uplc-ms/ms同时测定酸枣仁中9种化学成分的方法 |
CN109212082A (zh) * | 2018-10-10 | 2019-01-15 | 桂林三金药业股份有限公司 | 一种复方罗汉果清肺制剂的含量检测方法 |
CN109212082B (zh) * | 2018-10-10 | 2021-03-02 | 桂林三金药业股份有限公司 | 一种复方罗汉果清肺制剂的含量检测方法 |
CN109239224A (zh) * | 2018-10-17 | 2019-01-18 | 山西大学 | 酸枣仁水提物中9种入血成分的同时定量测定方法 |
CN109239224B (zh) * | 2018-10-17 | 2021-07-02 | 山西大学 | 酸枣仁水提物中9种入血成分的同时定量测定方法 |
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