一种糖敏灵制剂中8种化学成分的检测方法
技术领域
本发明属于现代中药应用领域,特别涉及一种对糖敏灵制剂中8种化学成分同时进行含量测定的方法。
背景技术
糖敏灵丸是在临床验证的有效方开郁清胃颗粒基础上加减变化与剂型改革而成。糖敏灵丸由黄连、大黄、黄芩、白芍、柴胡、枳实、山楂、乌梅、半夏、天花粉共十味常用中药组成,具有开郁清胃、滋阴降火、通腑泻浊之功效。临床观察证实其对Ⅱ型糖尿病的血糖有明显的改善作用,尤其是对体型偏胖的早中期Ⅱ型糖尿病患者效果更加显著。同时,药理实验揭示糖敏灵能显著增强高热量饲料诱导的胰岛素抵抗模型糖尿病大鼠和自发性Ⅱ型糖尿病大鼠的胰岛素敏感性。
为使糖敏灵药物生产标准化,达到疗效确切,质量稳定的目的,需要准确检测糖敏灵制剂的化学成分。糖敏灵丸所含的药物成分中,可以确定的药物活性物质包括:肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚。这些物质均属于已知物质。为更加全面控制糖敏灵制剂的质量,建立满足中药现代化的质量控制标准,需要一种可以同时检测糖敏灵制剂中多种化学成分的分析方法。
发明内容
为使糖敏灵药物生产标准化,达到疗效确切,质量稳定的目的。本发明提供了一种检测本发明制剂中8种药物活性物质的方法,该方法采用HPLC法对其中的药物活性物质同时进行含量测定。该方法精密度、灵敏度、稳定性均好,确保产品质量的“安全、均一、稳定、有效、可控”。
本发明提供了一种糖敏灵制剂中化学成分的测定方法,技术解决方案如下:
检测样品用甲醇提取,然后用高效液相色谱进行检测,色谱条件为采用C18色谱柱,流动相A相为甲醇,B相为乙腈,C相为甲酸或乙酸或磷酸水溶液,检测器为二极管阵 列检测器。
根据本发明实施方式之一,检测样品采用甲醇超声提取。
根据本发明的实施方式之一,流动相A相为甲醇,B相为乙腈,C相为0.01%-0.1%磷酸水溶液。
优选地,采用梯度洗脱,采用梯度洗脱,洗脱梯度为:
0~10min,12%A相→20%A相,25%B相→35%B相,63%C相→45%C相;
10~35min,20%A相→15%A相,35%B相→65%B相,45%C相→20%C相;
35~40min,15%A相→15%A相,65%B相→75%B相,20%C相→10%C相;
40~50min,15%A相→15%A相,75%B相→75%B相,10%C相→10%C相。
分别考察了甲醇-0.05%磷酸水、乙腈-0.05%磷酸水和乙腈-甲醇-0.05%磷酸水三种流动相系统。在甲醇-0.05%磷酸水系统中,蒽醌类成分可以实现分离,但色谱峰较宽,峰高和峰面积值都较小,由于制剂中此类成分含量较少,因此难以定量分析;在乙腈-0.05%磷酸水系统中,各指标成分色谱峰峰形锐,响应强度明显增加,但同时干扰成分也多于甲醇-0.05%磷酸水系统,部分指标成分无法到达理想的分离效果。综合上述两种溶剂系统的特点,选择乙腈-甲醇-0.05%磷酸水为流动相系统,通过优化流动相比例,获得分离度好、响应强度高的色谱条件。
实验表明,流动相初始比例对各成分色谱行为影响较大,当初始时甲醇比例大于50%,乙腈比例小于10%时,色谱行为与甲醇-0.05%磷酸水系统相似,通过降低甲醇比例、增加乙腈比例进行改善,当初始时甲醇比例小于25%,乙腈比例大于25%时,各成分分离度好,峰形锐且峰强度较大,基线平稳,进一步考察确定最佳流动相洗脱梯度。
根据本发明的另一实施方式,色谱流动相流速为0.8-1.2mL/min。
根据本发明的再一实施方式,色谱柱温为25-35℃。
根据本发明的再一实施方式,检测器波长为210-300nm。
优选地,检测器波长为0~25min,288nm;25~33min,224nm;33~38min,254nm;38~50min,224nm。
实验表明,肉桂酸、柚皮素和橙皮素的最大吸收波长是288nm,芦荟大黄素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的最大吸收波长是224nm,柴胡皂苷b1的最大吸收波长是254nm。为提高各成分的检测灵敏度和准确度,分别在25min,33min,38min时,将检测波长由288nm转换至224nm,254nm,224nm,各成分均以最大吸收波长作为检测波长。尽量选择色谱峰较少的保留时间进行波长转换,以避免基线波动。
根据本发明,检测到的糖敏灵制剂中的化学成分为:肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚。它们的含量分别为0.1145-0.1727mg·g-1、0.1090-0.3207mg·g-1、0.1099-0.2528mg·g-1、1.714×10-2-5.108×10-2mg·g-1、0.1855-0.5537mg·g-1、3.026×10-2-6.120×10-2mg·g-1、3.882×10-2-5.092×10-2mg·g-1、1.506×10-2-1.935×10-2mg·g-1。
本发明利用HPLC测定了糖敏灵中8种化学成分的含量,具有很好的线性、重复性、重现性和回收率,有助于更加全面控制糖敏灵的质量。
本发明所述糖敏灵制剂包括:片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉针剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、滴剂、贴剂、滴丸。因为药物活性成分相同,所以本发明提供的方法可以用于多种不同制剂的检测。
本发明所述糖敏灵丸由下列重量份的原料制成:
天花粉10~30份,柴胡10~30份,枳实3~15份,大黄1~6份,半夏1~12份,黄芩3~15份,黄连1~12份,白芍3~15份,乌梅5~20份,山楂3~15份。
制备方法如下:所述的黄芩加水提取两次,每次1小时,提取液加浓盐酸调pH值至1.5~2.0,80℃保温1小时,抽滤,滤饼干燥,得黄芩提取物;所述的黄连加75%乙醇提取2次每次2小时,提取液减压回收乙醇,加入浓盐酸调pH值至1.0~2.0,抽滤,滤饼干燥,得黄连提取物;其余8味药用水回流提取2次,每次1小时,提取液减压浓缩至1:1,加入95%乙醇至含醇量70%,滤过,滤液减压浓缩至稠膏加入黄连提取物与黄芩提取物,即得糖敏灵制剂的药物活性成分。药物活性成分与微晶纤维素按适当比例混合,按照常规方法制备成浓缩丸。
本发明附加的方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。
附图说明
图1对照品色谱图。1-肉桂酸、2-柚皮素、3-橙皮素、4-芦荟大黄素、5-柴胡皂苷b1、6-大黄素、7-大黄酚、8-大黄素甲醚。
图2糖敏灵丸色谱图。1-肉桂酸、2-柚皮素、3-橙皮素、4-芦荟大黄素、5-柴胡皂苷b1、6-大黄素、7-大黄酚、8-大黄素甲醚。
图3大黄阴性对照色谱图。2-柚皮素、3-橙皮素、5-柴胡皂苷b1。
图4枳实阴性对照色谱图。1-肉桂酸、4-芦荟大黄素、5-柴胡皂苷b1、6-大黄素、7-大黄酚、8-大黄素甲醚。
图5柴胡阴性对照色谱图。1-肉桂酸、2-柚皮素、3-橙皮素、4-芦荟大黄素、6-大黄素、7-大黄酚、8-大黄素甲醚。
具体实施方式:
以下通过实施例进一步说明本发明,但不作为对本发明的限制。
试验例方法学考察与样品测定
对照品溶液和供试品溶液的制备
(1)对照品溶液的制备
取肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1(SS b1)、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚对照品各适量,精密称定,分别制成浓度为7.161mg·mL-1,5.502mg·mL-1,5.252mg·mL-1,0.760mg·mL-1,2.081mg·mL-1,0.772mg·mL-1,0.956mg·mL-1,0.624mg·mL-1的对照品溶液。
分别精密量取上述对照品溶液0.5,0.6,0.6,1.0,3.0,1.0,1.2,1.0mL置于同一10mL量瓶中,甲醇稀释至刻度,制成浓度为肉桂酸358.0μg·mL-1,柚皮素330.1μg·mL-1,橙皮素315.1μg·mL-1,芦荟大黄素76.00μg·mL-1,柴胡皂苷b1624.3μg·mL-1,大黄素77.20μg·mL-1,大黄酚114.7μg·mL-1,大黄素甲醚62.40μg·mL-1的混合对照品储备液。
(2)供试品溶液的制备取糖敏灵丸2.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,称重,超声(180W,35±5%kHz)处理30min,放冷至室温,甲醇补足减失的重量,摇匀,离心(3000r·min-1)10min,取上清液经0.45μm微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试溶液。
(3)阴性对照溶液的制备按糖敏灵丸处方与制备工艺,分别制备不含大黄、柴胡和枳实的阴性对照缺味制剂,按“供试品溶液的制备”项下方法操作,制备阴性对照溶液。
色谱条件
色谱柱:Phenomenex Synergi C18(250mm×4.6mm,4μm);
流动相:甲醇(A)-乙腈(B)-0.05%磷酸水溶液(C),按如下梯度进行梯度洗脱:
0~10min,12%A相→20%A相,25%B相→35%B相,63%C相→45%C相;
10~35min,20%A相→15%A相,35%B相→65%B相,45%C相→20%C相;
35~40min,15%A相→15%A相,65%B相→75%B相,20%C相→10%C相;
40~50min,15%A相→15%A相,75%B相→75%B相,10%C相→10%C相。
流速:1.0mL·min-1;
检测波长:0~25min,288nm;25~33min,224nm;33~38min,254nm;38~50min,224nm;
柱温:30℃;
进样量:10μL。
在上述色谱条件下,分别取对照品、样品及阴性对照溶液进样分析,结果表明,各成分之间分离效果良好,阴性无干扰。
系统适用性试验
取供试溶液10μL进样,记录色谱图,肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚色谱峰的保留时间分别为13.7,14.6,16.2,27.1,34.0,39.6,45.5,48.8min。供试、对照与阴性对照色谱图见图1-图5。
标准曲线的绘制
精密量取混合对照储备液0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL,分别置于10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,得标准系列溶液。分别精密吸取各混合对照品溶液10μL,注入高效液相色谱仪,记录色谱图。以对照品峰面积为纵坐标(y),以对照品溶液的浓度(μg·mL-1)为横坐标(x),绘制标准工作曲线,回归方程和浓度范围如表1所示,各待测成分在浓度范围内呈良好线性关系。
表1标准曲线与检测限(n=6).
精密度试验
(1)仪器精密度试验精密吸取同一供试溶液10μL,重复进样6次,记录色谱图,测量峰面积,其相对标准偏差(RSD)分别为0.4,0.5,0.5,0.4,0.5,0.6,0.5,0.5%。
(2)方法重复性试验取同一批号样品约2.0g,精密称定,按“供试品溶液的制”项下方法平行制备6份供试品溶液,分别吸取10μL进样分析,记录色谱峰面积,计算重复性RSD分别为1.2,2.2,1.6,3.1,1.8,3.8,2.5,3.9%。
回收率试验
取已知含量的糖敏灵丸样品6份,每份1.0g,精密称定,分置50mL量瓶中,分别精密加入混合对照品溶液(浓度分别为肉桂酸89.5μg·mL-1,柚皮素82.5μg·mL-1,橙皮素78.78μg·mL-1,芦荟大黄素19.00μg·mL-1,柴胡皂苷b1 156.1μg·mL-1,大黄素19.30μg·mL-1,大黄酚28.68μg·mL-1,大黄素甲醚15.60μg·mL-1)5mL,按“供试品溶液的制备”方法制备供试品溶液,在上述色谱条件下进行分析,测得各成分含量。计算回收率,结果见表2-表9。
表2肉桂酸回收率测定结果(n=6)
表3柚皮素回收率测定结果(n=6)
表4橙皮素回收率测定结果(n=6)
表5芦荟大黄素回收率测定结果(n=6)
表6柴胡皂苷b1回收率测定结果(n=6)
表7大黄素回收率测定结果(n=6)
表8大黄酚回收率测定结果(n=6)
表9大黄素甲醚回收率测定结果(n=6)
稳定性试验
取同一供试品溶液,分别于室温放置0,2,4,8和12h后进样分析,记录色谱图,测得峰面积RSD分别0.9,1.8,3.3,3.6,3.5,2.7,1.8,3.4%结果表明供试品溶液室温下12h内稳定。
方法应用
按所拟订的含量测定方法,测定了5批糖敏灵样品中肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量,结果见表10。
表10样品测得结果(mg·g-1)(n=3)
结果与讨论
(1)色谱柱的选择
分别考察了Zorbax SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),Synergi C18色谱柱(250mm×4.6mm,4μm)和Hypersil Gold C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)的分离效果,所得色谱图,结果表明Synergi C18色谱柱由于粒径较小,可以使各指标成分达到有效分离,因此优选Synergi C18色谱柱进行测定。
(2)流动相的选择
分别考察了甲醇-0.05%磷酸水、乙腈-0.05%磷酸水和乙腈-甲醇-0.05%磷酸水三种流动相系统。在甲醇-0.05%磷酸水系统中,蒽醌类成分可以实现分离,但色谱峰较宽,峰高和峰面积值都较小,由于制剂中此类成分含量较少,因此难以定量分析;在乙腈-0.05%磷酸水系统中,各指标成分色谱峰峰形锐,响应强度明显增加,但同时干扰成分也多于甲醇-0.05%磷酸水系统,部分指标成分无法到达理想的分离效果。综合上述两种溶剂系统的特点,选择乙腈-甲醇-0.05%磷酸水为流动相系统,通过优化流动相比例,获得分离度好、响应强度高的色谱条件。结果表明,流动相初始比例对各成分色谱行为影响较大,当初始时甲醇比例大于50%,乙腈比例小于10%时,色谱行为与甲醇-0.05%磷酸水系统相似,通过降低甲醇比例、增加乙腈比例进行改善,当初始时甲醇比例小于25%,乙腈比例大于25%时,各成分分离度好,峰形锐且峰强度较大,基线平稳,进一步考察确定最佳流动相洗脱梯度。
(3)检测波长的选择
取各指标成分对照品溶液,在二极管阵列检测器下检测,得三维色谱图,其中肉桂酸、柚皮素和橙皮素的最大吸收波长是288nm,芦荟大黄素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的最大吸收波长是224nm,柴胡皂苷b1的最大吸收波长是254nm。为提高各成分的检测灵敏度和准确度,分别在25min,33min,38min时,将检测波长由288nm转换至224nm,254nm,224nm,各成分均以最大吸收波长作为检测波长。尽量选择色谱峰较少的保留时间进行波长转换,以避免基线波动。
实施例1:
(1)对照品溶液的制备
取肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1(SS b1)、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚对照品各适量,精密称定,分别制成浓度为7.161mg·mL-1,5.502mg·mL-1, 5.252mg·mL-1,0.760mg·mL-1,2.081mg·mL-1,0.772mg·mL-1,0.956mg·mL-1,0.624mg·mL-1的对照品溶液。
分别精密量取上述对照品溶液0.5,0.6,0.6,1.0,3.0,1.0,1.2,1.0mL置于同一10mL量瓶中,甲醇稀释至刻度,制成浓度为肉桂酸358.0μg·mL-1,柚皮素330.1μg·mL-1,橙皮素315.1μg·mL-1,芦荟大黄素76.00μg·mL-1,柴胡皂苷b1 624.3μg·mL-1,大黄素77.20μg·mL-1,大黄酚114.7μg·mL-1,大黄素甲醚62.40μg·mL-1的混合对照品储备液。
(2)供试品溶液的制备取糖敏灵丸2.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,称重,超声(180W,35±5%kHz)处理30min,放冷至室温,甲醇补足减失的重量,摇匀,离心(3000r·min-1)10min,取上清液经0.45μm微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试溶液。
色谱条件
色谱柱:Phenomenex Synergi C18(250mm×4.6mm,4μm);
流动相:甲醇(A)–乙腈(B)–0.05%磷酸水溶液(C),按如下梯度进行梯度洗脱:
0~10min,12%A相→20%A相,25%B相→35%B相,63%C相→45%C相;
10~35min,20%A相→15%A相,35%B相→65%B相,45%C相→20%C相;
35~40min,15%A相→15%A相,65%B相→75%B相,20%C相→10%C相;
40~50min,15%A相→15%A相,75%B相→75%B相,10%C相→10%C相。
流速:1.0mL·min-1;
检测波长:0~25min,288nm;25~33min,224nm;33~38min,254nm;38~50min,224nm;
柱温:30℃;
进样量:10μL。
取供试溶液10μL进样,记录色谱图,肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚色谱峰的含量,8种成分含量分别为0.1527mg·g-1、0.1208mg·g-1、0.1528mg·g-1、2.508×10-2mg·g-1、0.4737mg·g-1、3.520×10-2mg·g-1、5.092×10-2mg·g-1、1.835×10-2mg·g-1。
实施例2:
(1)对照品溶液的制备同实施例1。
(2)供试品溶液的制备取糖敏灵丸2.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,称重,超声(功率350W,频率50kHz)处理30min,放冷至室温,甲醇补足减失的重量,摇匀,离心(3000r·min-1)10min,取上清液经0.45μm微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试溶液。
色谱条件
色谱柱:Zorbax SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);
流动相:甲醇(A)–乙腈(B)–0.01%乙酸水溶液(C),按如下梯度进行梯度洗脱:
0~10min,12%A相→20%A相,25%B相→35%B相,63%C相→45%C相;
10~35min,20%A相→15%A相,35%B相→65%B相,45%C相→20%C相;
35~40min,15%A相→15%A相,65%B相→75%B相,20%C相→10%C相;
40~50min,15%A相→15%A相,75%B相→75%B相,10%C相→10%C相。
流速:0.8mL·min-1;
检测波长:0~25min,288nm;25~50min,254nm;
柱温:25℃;
进样量:10μL。
取供试溶液10μL进样,记录色谱图,肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚色谱峰的含量,8种成分含量分别为0.1217mg·g-1、0.1108mg·g-1、0.1228mg·g-1、1.101×10-2mg·g-1、0.1937mg·g-1、3.120×10-2mg·g-1、3.992×10-2mg·g-1、1.535×10-2mg·g-1。
实施例3:
(1)对照品溶液的制备同实施例1。
(2)供试品溶液的制备取糖敏灵丸2.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,称重,超声(功率240W,频率50kHz)处理40min,放冷至室温,甲醇补足减失的重量,摇匀,离心(5000r·min-1)10min,取上清液经0.45μm微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试溶液。
色谱条件
色谱柱:Hypersil Gold C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);
流动相:甲醇(A)-乙腈(B)-0.1%甲酸水溶液(C),按如下梯度进行梯度洗脱:
0~10min,12%A相→20%A相,25%B相→35%B相,63%C相→45%C相;
10~35min,20%A相→15%A相,35%B相→65%B相,45%C相→20%C相;
35~40min,15%A相→15%A相,65%B相→75%B相,20%C相→10%C相;
40~50min,15%A相→15%A相,75%B相→75%B相,10%C相→10%C相。
流速:1.0mL·min-1;
检测波长:0~33min,220nm;33~38min,254nm;38~50min,220nm;
柱温:35℃;
进样量:10μL。
取供试溶液10μL进样,记录色谱图,肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚色谱峰的含量,8种成分含量分别为0.1114mg·g-1、0.1028mg·g-1、0.1104mg·g-1、1.051×10-2mg·g-1、0.1533mg·g-1、3.140×10-2mg·g-1、3.522×10-2mg·g-1、1.415×10-2mg·g-1。
实施例4:
(1)对照品溶液的制备同实施例1。
(2)供试品溶液的制备取糖敏灵丸8.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇100mL,称重,加热回流处理1h,放冷至室温,甲醇补足减失的重量,摇匀,离心(4000r·min-1)10min,取上清液经0.45μm微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试溶液。
色谱条件
色谱柱:Phenomenex Synergi C18(250mm×4.6mm,4μm);
流动相:甲醇(A)–乙腈(B)–0.1%磷酸水溶液(C),按如下梯度进行梯度洗脱:
0~10min,12%A相→20%A相,25%B相→35%B相,63%C相→45%C相;
10~35min,20%A相→15%A相,35%B相→65%B相,45%C相→20%C相;
35~40min,15%A相→15%A相,65%B相→75%B相,20%C相→10%C相;
40~50min,15%A相→15%A相,75%B相→75%B相,10%C相→10%C相。
流速:1.0mL·min-1;
检测波长:0~25min,288nm;25~33min,224nm;33~38min,254nm;38~50min,224nm;
柱温:30℃;
进样量:10μL。
取供试溶液10μL进样,记录色谱图,肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚色谱峰的含量,8种成分含量分别为0.1422mg·g-1、 0.1103mg·g-1、0.1235mg·g-1、2.458×10-2mg·g-1、0.4127mg·g-1、3.421×10-2mg·g-1、4.052×10-2mg·g-1、1.565×10-2mg·g-1。
实施例5:
(1)对照品溶液的制备同实施例1。
(2)供试品溶液的制备取糖敏灵丸2.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,称重,超声(180W,35±5%kHz)处理30min,放冷至室温,甲醇补足减失的重量,摇匀,离心(4000r·min-1)10min,取上清液经0.45μm微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试溶液。
色谱条件
色谱柱:Phenomenex Synergi C18(250mm×4.6mm,4μm);
流动相:甲醇(A)–乙腈(B)–0.01%磷酸水溶液(C),按如下梯度进行梯度洗脱:
0~10min,12%A相→20%A相,25%B相→35%B相,63%C相→45%C相;
10~35min,20%A相→15%A相,35%B相→65%B相,45%C相→20%C相;
35~40min,15%A相→15%A相,65%B相→75%B相,20%C相→10%C相;
40~50min,15%A相→15%A相,75%B相→75%B相,10%C相→10%C相。
流速:1.0mL·min-1;
检测波长:0~33min,220nm;33~38min,254nm;38~50min,220nm;
柱温:30℃;
进样量:10μL。
取供试溶液10μL进样,记录色谱图,肉桂酸、柚皮素、橙皮素、芦荟大黄素、柴胡皂苷b1、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚色谱峰的含量,8种成分含量分别为0.1287mg·g-1、0.1258mg·g-1、0.1566mg·g-1、2.576×10-2mg·g-1、0.4723mg·g-1、3.556×10-2mg·g-1、5.452×10-2mg·g-1、1.635×10-2mg·g-1。