CN104169420B - 包含miRNA的调节色素形成的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供包含SEQ？NO.1的miRNA或者SEQ？NO.2的反义引物核酸分子的，用于美白或者防止白发的组合物，其中反义引物核酸分子具有与SEQ？NO.1的互补序列，且能与所述miRNA杂交。并且，本发明还提供调节色素形成以及色素形成基因表达物质的筛选方法，该方法是从试验物质中筛选的调节色素形成，还能调节色素形成基因表达的方法，所述方法包括：将SEQ？NO.1的miRNA或者SEQ？NO.2反义引物的核酸分子转染至细胞的步骤；用试验物质处理所述细胞的步骤；以及确认所述试验物质是否抑制或促进色素形成基因表达的步骤；确认细胞颜色是否变化的步骤。本发明的组合物以及筛选方法可为美白效果或者防止白发效果而使用。

Description

包含miRNA的调节色素形成的组合物
技术领域
本发明涉及微RNA（microRNA：以下将称为miRNA）hsa-miR-125b（以下将称为miR-125b）的鉴定，其可调节色素形成以及色素形成基因的表达。本发明还涉及包含miR-125b或者其模仿体（mimic）的美白用化妆品组合物或者药物组合物以及包含miR-125b抑制剂（inhibitor）的防止白发的化妆品组合物或者药物组合物。
背景技术
miRNA是存在于细胞内的20-25个核酸长度的内源性小RNA（endogenoussmallRNA）的一种，其来源于不合成蛋白质的DNA，从发卡结构的转录体（hairpin-shapedtranscript）生成。miRNA结合于目标mRNA的3’-UTR的互补序列，诱导该序列mRNA的翻译抑制或者不稳定化，最终起到抑制其目标mRNA的蛋白质合成的抑制剂（repressor）的作用。据报道，一个miRNA可将多个mRNA作为目标，而mRNA也可被多个miRNA调节。
目前，随着miRNA在多种生物过程中起到的重要作用被人们所认识，其在生物科学领域收到了非常大的关注，所述作用包括调节发育期、细胞凋亡期、脂肪代谢以及造血细胞分化。然而与癌症等疾病发生过程中的miRNA的功能研究取得相当大的进展相比，在皮肤科学领域中对于miRNA的作用研究则是非常少的状态。近期，虽然有报道称miR-203将角质形成细胞中的p63mRNA作为目标，抑制其分化能力；以及miR-125b抑制皮肤干细胞的分化，但是几乎没有对其他皮肤相关特异性miRNA以及其功能的报道。然而，可预测miR-203和miR125b之外，还有很多特定miRNA在皮肤中起到重要的生物学作用。并且，由于miRNA可在生物学标记物以及材料等多个领域被应用，因此可判断关于皮肤中miRNA的研究也可以多种形式应用于化妆品以及医药工业等。
皮肤大体可分为表皮层和真皮层，其中表皮层中存在的色素形成细胞可合成色素使皮肤呈固有的颜色。调节皮肤色素的生物因子可大体分为在色素形成细胞中合成黑色素体（melanosome）的因子和运输黑色素体的因子。最普遍所知的合成黑色素体的因子包括酪氨酸酶（tyrosinase，TYR）等，运输黑色素体的因子包括Rab27a等。近期有报道称PAX3、MITF等转录因子也参与色素调节过程。因此，所述色素调节因子可成为皮肤美白、黑发生成或者防止白发的重要靶标。
发明内容
本发明要解决的技术问题
本发明发明人选择了皮肤色素形成基因表达较多的WM266-4黑色素瘤细胞，进行了寻找与色素形成相关miRNA的研究，其结果表明hsa-miR-125b抑制酪氨酸酶mRNA的表达，并调节色素形成。
因此，本发明的目的在于，提供一种包含miR-125b或者其模仿体的具有美白效果的组合物。
并且，本发明的目的在于，提供一种包含miR-125b抑制剂的具有防止白发效果的组合物。
技术方案
为实现上述目的，本发明提供一种包含SEQNO.1的miRNA作为有效成分的调节色素形成以及色素形成基因表达的组合物。
并且，提供包含SEQNO.2的反义引物核酸分子作为有效成分的调节色素形成以及色素形成基因表达的组合物，所述反义引物核酸分子具有与SEQNO.1互补的碱基序列，且能与所述miRNA杂交。
并且，本发明提供调节色素形成以及色素形成基因表达物质的筛选方法，该方法是从试验物质中筛选能调节色素形成基因表达以及色素形成的物质的方法，所述方法包括：（a）将SEQNO.1的miRNA或者SEQNO.2反义引物的核酸分子转染至细胞的步骤；（b）用试验物质处理所述细胞的步骤；以及（c）确认所述试验物质是否抑制或促进色素形成基因表达的步骤；（d）确认细胞颜色是否变化的步骤。
有益效果
包含本发明中的SEQNO.1的miRNA或者SEQNO.2反义引物的核酸分子的组合物，可调节色素形成基因酪氨酸酶mRNA的表达，从而调节色素形成，因此可提供具有美白效果或者防止白发效果的组合物。
附图说明
图1是将与hsa-miR-125b具有相同序列的寡核苷酸（oligonucleotide）转染至细胞内，诱导hsa-miR-125b过表达的现象后，进行实时聚合酶链式反应确认酪氨酸酶mRNA表达量的结果（TYR：酪氨酸酶）。
图2是将与hsa-miR-125b具有相同序列的寡核苷酸（oligonucleotide）转染至细胞内，诱导hsa-miR-125b过表达的现象后，进行蛋白免疫印迹确认酪氨酸酶蛋白质表达量的结果（TYR：酪氨酸酶）。
图3是将与hsa-miR-125b具有互补序列的寡核苷酸（oligonucleotide）转染至细胞内，与存在于细胞内的miR-125b结合，并抑制其功能后，进行实时聚合酶链式反应确认酪氨酸酶mRNA表达量的结果（TYR：酪氨酸酶）。
图4是将WM266-4细胞株用已知能增加色素形成相关基因的表达的毛喉素（forskolin）进行处理，诱导增加色素形成相关基因的表达后，进行能测定miR-125b表达量的miRNA实时聚合酶链式反应，从而确认根据毛喉素处理浓度的增加miR125b表达量的结果。
图5是将与hsa-miR-125b具有相同序列的寡核苷酸转染至人来源色素形成细胞的细胞内，诱导hsa-miR-125b的过表达的现象后，通过细胞离心制备细胞团块后观察其颜色，从而确认细胞色素形成变化的结果。
最佳实施方式
以下，将详述本发明。
本发明提供能调节色素形成以及色素形成基因表达的SEQNO.1的miRNA。
本发明的所述色素形成基因是酪氨酸酶mRNA。
5'-ucccugagacccuaacuuguga-3'(SEQNO.1)
本发明中使用的miRNA是由所述SEQNO.1的碱基序列所示，且包含cccugag的22个连续碱基序列的寡核苷酸分子。并且，miRNA包括SEQNO.1的碱基序列，并具有调节色素形成以及色素形成基因表达功能的序列。
所述miRNA可抑制色素形成，并抑制与色素形成相关基因的表达。
本发明的一实施例中，可利用SEQNO.1的miRNA制备具有与hsa-miR-125b相同序列的寡核苷酸分子（oligonucleotide），作为hsa-miR-125b的模仿体。并且，hsa-miR-125b的模仿体可包括上述hsa-miR-125b碱基序列，并具有调节色素形成以及色素形成基因表达功能的序列。
本发明的一实施例中，提供具有与SEQNO.1的miRNA互补的碱基序列，并可与所述miRNA杂交的SEQNO.2反义引物的核酸分子。SEQNO.2反义引物的核酸分子可作为miR-125b的抑制剂，与所述miRNA杂交。并且，miR-125b抑制剂包括SEQNO.2的碱基序列，并能与所述miRNA杂交的序列。
5'-ucacaaguuagggucucaggga-3'(SEQNO.2)
本发明提供一种包含SEQNO.1的miRNA或者SEQNO.2的反义引物核酸分子作为有效成分的调节色素形成以及色素形成基因表达的组合物。
本发明的组合物可抑制或者促进色素形成基因的表达，且所述色素形成基因是酪氨酸mRNA。
本发明的组合物可抑制或者促进色素形成，所述miRNA可由选自SEQNO.1的碱基序列并包含cccugag的22个连续碱基序列组成的寡核苷酸分子中选择，并作为有效成分。并且，miRNA还包括包含SEQNO.1的碱基序列，并具有调节色素形成以及色素形成基因表达功能的序列。
本发明的组合物包括所述反义引物核酸分子，并作为有效成分，所述反义引物核酸分子由选自SEQNO.2的碱基序列的22个连续的碱基序列组成的寡核苷酸分子中选择。所述反义引物核酸分子可作为miR-125b的抑制剂，可与所述miRNA杂交。并且，miR-125b抑制剂包括包含SEQNO.2的碱基序列，并能与所述miRNA杂交的序列。
相对于组成物总重量，本发明可使用0.00001-30.0重量%的包含SEQNO.1的miRNA、SEQNO.2的反义引物核酸分子或者SEQNO.1或2的碱基序列的寡核苷酸分子。
具体地说，含有包含SEQNO.1的miRNA或者SEQNO.1的碱基序列作为有效成分的寡核苷酸的组合物，可通过抑制色素形成基因（尤其是酪氨酸mRNA）的表达，提供皮肤美白的效果。
并且，含有包含SEQNO.2的反义引物核酸分子或者SEQNO.2的寡核苷酸的组合物，可通过促进色素形成基因（尤其是酪氨酸mRNA）的表达，提供防止白发效果。
本发明的组合物可优选以化妆品组合物或者药物组合物等的形态剂型化，但不限于此。
本发明的组合物是化妆品剂型时，可包含化妆品领域中允许使用的介质或者基质（base）。其可以是适合于局部使用的所有剂型。例如可以是以溶液、凝胶、固体或者糊状无水物、在水相中分散油相获得的乳剂、混悬液、微乳剂、微胶囊、微粒剂、或者离子型（脂质体）及/或非离子型囊泡分散剂的形态、或者乳霜、化妆水、乳液、粉末、软膏、喷剂或硅橡胶棒的形态提供。所述组合物可通过本领域通常的方法制备。
本发明的组合物是药物组合物时，可将根据本发明一实施例的，包含SEQNO.1的miRNA或者SEQNO.2的反义引物核酸分子或者SEQNO.1或SEQNO.2碱基序列的寡核苷酸作为有效成分，添加常用的无机或者有机载体，以固体、半固体或者液体的形态，制备成非口服给药（注射、经皮给药或者外敷）形式的剂型。非口服给药的制剂包括局部注射用制剂、软膏、乳液、喷剂、混悬剂等。
为将根据本发明一实施例的组合物的有效成分制剂化，采用通常的方法可轻易进行制剂化，且还可使用表面活性剂、赋形剂、着色剂、芳香剂、防腐剂、稳定剂、缓冲剂、悬浮剂以及其他常用的辅助剂。
根据本发明一实施例的miRNA的给药量，根据接收治疗对象的年龄、性别、体重、需治疗的特定疾病或者病理状态、疾病或者病例状况的严重程度、给药途径以及医生的判断的不同而有所区别。决定基于上述因素的给药量，在本领域技术人员的能力范围之内。除了注射剂的制剂之外，其余制剂均能在本领域技术人员的能力范围内，将其在色素沉着的部位进行外敷；而注射剂则可局部注射于色素沉着的部位。
本发明的miRNA可由变形的核酸分子构成。例如可部分或全部包含2'-O-烷基(例如，甲基、乙基)、2'-O-烯丙基、2'-O-烯丙基等2'-替换核糖的核酸分子。并且，还可部分或全部包含具有替换的碱基的核酸分子。
本发明的一实施例中，提供一种调节色素形成以及色素形成基因表达物质的筛选方法，该方法是从试验物质中筛选能调节色素形成基因表达的物质的方法，所述方法包括：（a）将SEQNO.1的miRNA或者SEQNO.2反义引物的核酸分子转染至细胞的步骤；（b）用试验物质处理所述细胞的步骤；（c）确认所述试验物质是否抑制或促进色素形成基因表达的步骤；（d）确认细胞颜色是否变化的步骤。。
所述将SEQNO.1的miRNA或者SEQNO.2反义引物的核酸分子转染至细胞的步骤中，所述转染可以通过显微注射法、磷酸钙共沉淀法、电穿孔法或者利用脂质体的方法等实施，但并不限于此。
根据本发明一实施例的黑色素生成调节剂的筛选方法中，所述是否调节色素形成基因的表达，是通过本领域广泛公知的逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）或者酶联免疫吸附实验（ELISA）以及蛋白免疫印迹实验（immunoblot）决定的。
根据本发明一实施例的，利用色素形成基因表达程度的表达调节物质的筛选中，试验物质能否抑制或促进色素形成基因的表达，可通过免疫验证方法（例如，ELISA或蛋白免疫印迹实验）确认。
本发明一实施例中，提供一种调节色素形成以及色素形成基因表达物质的筛选方法，该方法包括：如上述确认结果为所述试验物质能增加细胞的色素形成，或增加色素形成基因的表达、活性或者功能时，判定为是色素形成基因的促进剂；所述试验物质减少细胞的色素形成，或减少色素形成基因的表达、活性或者功能时，判定为是色素形成基因的抑制剂。
具体实施方式
以下将依据下述实施例以及试验例，更加具体的说明本发明。但是下属实施例以及试验例仅是为了有助于对本发明的理解，而本发明的范围并不仅限于此。
[试验例1]由hsa-miR-125b的模仿体引起的酪氨酸酶mRNA的减少
本发明发明人为了hsa-miR-125b的获得功能性研究（gain-of-functionalstudy），利用了hsa-miR-125b模仿体。hsa-miR-125b模仿体是具有与hsa-miR-125b相同序列的寡核苷酸，转染至细胞内后可诱导hsa-miR-125b的过表达现象（overexpression）。
以20μM的浓度，将hsa-miR-125b模仿体（产品名:C-300595-03-0005,miRIDIANMimic,Humanhsa-miR-125bMIMAT0000423/MI0000446(hsa-miR-125b）,5nmol,Dharmacon,Inc.产品；实施例1），利用脂质体转染至黑色素瘤细胞株WM266-4的细胞内。作为对照组，使用了不添加任何寡核苷酸的样品（比较例1）；以及将与本发明miRNA完全没有重复的寡核苷酸（产品名：CN-001000-01-05,miRIDIANmicroRNAMimicNegativecontrol#1,Dharmacon.Inc.产品）转染的样品（比较例2）。转染后在37℃、5%CO2的孵箱中培养约60小时，之后用1ml的Trizol试剂分离RNA。用Trizol裂解细胞后，通过离心分离上层液。加入0.35ml异丙醇使核酸形成团块（pellet），用70%的酒精洗涤后，团块溶解于水，从而分离RNA。将1μg的RNA利用寡脱氧胸苷酸（oligodT）以及逆转录酶（reversetranscripase）制备cDNA后，利用对于酪氨酸酶mRNA特异性的引物（assayID：Hs01099965_ml），采用美国应用生物系统公司的水解探针法进行了实时聚合酶链式反应。所述聚合酶链式反应以以下方式进行：在95℃条件下反应10分钟后，95℃条件下10秒、60℃条件下1分钟，反复约45个循环。酪氨酸酶mRNA的表达量用管家（housekeeping）基因GAPDH的mRNA表达量（assayID：4333764F）进行归一化（normalization），其结果如图1所示。
从结果可知，将hsa-miR125b模仿体转染时（实施例1），酪氨酸酶mRNA的表达量与比较例1以及2相比发生了显著地减少（图1）。
[试验例2]由hsa-miR-125b的模仿体引起的酪氨酸酶蛋白质的减少
本发明发明人为了hsa-miR-125b的获得功能性研究，利用了hsa-miR-125b模仿体。hsa-miR-125b模仿体是具有与hsa-miR-125b相同序列的寡核苷酸，可转染至细胞内后诱导hsa-miR-125b的过表达现象。
以20μM的浓度，将hsa-miR-125b模仿体（产品名:C-300595-03-0005,miRIDIANMimic,Humanhsa-miR-125bMIMAT0000423/MI0000446(hsa-miR-125b）,5nmol,Dharmacon,Inc.产品；实施例1），利用脂质体转染至黑色素瘤细胞株WM266-4的细胞内。作为对照组，使用了不添加任何寡核苷酸的样品（比较例1）；以及将与本发明miRNA完全没有重复的寡核苷酸（产品名：CN-001000-01-05,miRIDIANmicroRNAMimicNegativecontrol#1,Dharmacon.Inc.产品）转染的样品（比较例2）。经转染后培养60小时，之后利用RIPA缓冲液裂解细胞膜，通过离心萃取包含蛋白质的上层液，利用BCA法定量了约10μg的蛋白质。对经定量的蛋白质进行蛋白免疫印记试验，此时利用酪氨酸酶的特异性抗体（upstate公司的05-647）观察酪氨酸酶蛋白质的量。酪氨酸酶蛋白质的表达量用管家基因GAPDH的蛋白质表达量进行归一化，其结果如图2所示。
从结果可知，将hsa-miR125b模仿体转染时（实施例1），酪氨酸酶蛋白质的表达量与比较例1以及2相比发生了显著地减少（图2）。
[试验例3]由hsa-miR-125b的抑制剂引起的酪氨酸mRNA的增加
本发明发明人为了hsa-miR-125b的抑制功能研究（loss-of-functionalstudy），利用了miR-125b的抑制剂。miR-125b的抑制剂是具有与miR-125b互补序列的寡核苷酸，其能通过与存在于细胞内的miR-125b结合，抑制其功能。
以75μM的浓度，将hsa-miR-125b抑制剂（产品名:IH-300595-05-0005,miRIDIANMimic,Humanhsa-miR-125bMIMAT0000423/MI0000446(hsa-miR-125b）,Dharmacon,Inc.产品；实施例2），利用脂质体转染至黑色素瘤细胞株WM115的细胞内。作为对照组，使用了将与本发明miRNA抑制剂完全没有重复的寡核苷酸（产品名：CN-001000-01-05,miRIDIANmicroRNAMimicNegativecontrol#1,Dharmacon.INC.产品）转染的样品（比较例2）；以及不添加任何寡核苷酸的样品（比较例1）。转染后在37℃、5%CO2的孵箱中培养约60小时，之后用1ml的Trizol试剂分离RNA。用Trizol裂解细胞后，通过离心分离上层液。加入0.35ml异丙醇使核酸形成团块（pellet），用70%的酒精洗涤后，将团块溶解于水，从而分离RNA。将1μg的RNA利用寡脱氧胸苷酸以及逆转录酶制备cDNA后，利用对于酪氨酸酶mRNA特异性的引物（assayID：Hs01099965_ml），采用美国应用生物系统公司的水解探针法进行了实时聚合酶链式反应。所述聚合酶链式反应以以下方式进行：在95℃条件下反应10分钟后，95℃条件下10秒、60℃条件下1分钟，反复约45个循环。酪氨酸酶mRNA的表达量用管家基因GAPDH的mRNA表达量（assayID：4333764F）进行归一化，其结果如图3所示。
从结果可知，将hsa-miR125b抑制剂转染时（实施例2），酪氨酸酶mRNA的表达量与比较例1以及2相比发生了显著地增加（图1）。
[试验例4]由毛喉素处理引起的hsa-miR-125b表达量的减少
本发明发明人利用已知的能增加色素形成相关基因的表达的毛喉素进行处理，从而通过毛喉素诱导色素形成基因表达量增加的条件后，确认了存在于细胞内的hsa-miR-125b的基本表达量是否发生变化。
将黑色素瘤细胞株WM266-4在没有FBS（胎牛血清）的培养基培养一夜后，使培养基内毛喉素的浓度分别为25μM和50μM，从而进行诱导。约6小时后，用1ml的Trizol试剂分离RNA，用Trizol裂解细胞后，通过离心分离上层液。加入0.35ml异丙醇使核酸形成团块（pellet），用70%的酒精洗涤后溶解于水，从而分离RNA。利用对于hsa-miR-125b特异性的引物（assayID：000449），采用美国应用生物系统公司的水解探针法进行了实时聚合酶链式反应。利用对hsa-miR-125b特异性的茎环反转录引物（stem-loopprimer）和逆转录酶制备对hsa-miR-125b特异性的cDNA，并利用对hsa-miR-125b特异性的引物观察hsa-miR-125b的mRNA的表达量。hsa-miR-125b的mRNA的表达量用管家基因rnu6b的小RNA（smallRNA）表达量进行归一化，其结果如图4所示。
从结果可知，用毛喉素处理时，存在于细胞内的has-miR-125b的表达量，随着毛喉素处理浓度的增加而减少（图4）。
[试验例5]由hsa-miR-125b的模仿体引起的色素形成减少
本发明发明人为了hsa-miR-125b的获得功能性研究，利用了hsa-miR-125b模仿体。hsa-miR-125b模仿体是具有与hsa-miR-125b相同序列的寡核苷酸，可转染至细胞内后诱导hsa-miR-125b的过表达现象。
以20μM的浓度，将hsa-miR-125b模仿体（产品名:C-300595-03-0005,miRIDIANMimic,Humanhsa-miR-125bMIMAT0000423/MI0000446(hsa-miR-125b）,5nmol,Dharmacon,Inc.产品；实施例1），利用脂质体转染至人来源的色素形成细胞（humanprimarymelanocyte）内。作为对照组，使用了不添加任何寡核苷酸的样品（比较例1）；以及将与本发明miRNA完全没有重复的寡核苷酸（产品名：CN-001000-01-05,miRIDIANmicroRNAMimicNegativeControl#1,Dharmacon.Inc.产品）转染的样品（比较例2）。转染7天后，用5ml的磷酸盐缓冲液洗涤2次细胞，再添加1ml的磷酸盐缓冲液后，利用细胞刮后收集细胞。以13000rpm离心分离5分钟，制备细胞团块（cellpellet）后，通过观察细胞团块的颜色比较色素形成程度。其结果如图5所示。
结果显示，比较例1和2中形成色素，细胞团块显示深棕色。与此相反，将hsa-miR125b模仿体转染时（实施例1），显著的抑制了色素形成程度，从而显示浅黄色（图5）。
因此，通过所述结果可确认，has-miR-125b以及其模仿体可调节色素形成。
本发明的包含SEQNO.1的miRNA作为有效成分的皮肤美白用组合物，虽然可通过下述剂型例进行制备，但并不限于此。
[剂型例1]营养化妆水
可通过下述表1的组成，采用通常的方法制备营养化妆水。
表1
原料名称 含量(重量%)
甘油 8.0
丁二醇 4.0
透明质酸提取物 5.0
β-葡聚糖 7.0
卡波姆 0.1
SEQ NO.1的miRNA 0.1
辛酸/癸酸三酸甘油酯 8.0
角鲨烷 5.0
鲸蜡硬脂基葡糖苷 1.5
山梨醇硬脂酸酯 0.4
鲸蜡硬脂醇 1.0
防腐剂 适量
香料 适量
色素 适量
三乙醇胺 0.1
纯净水 余量
[剂型例2]营养乳液
可通过下述表2的组成，采用通常的方法制备营养乳液。
表2
原料名称 含量(重量%)
纯净水 余量
甘油 3.0
丁二醇 3.0
液体石蜡 5.0
β-葡聚糖 7.0
卡波姆 0.1
SEQ NO.1的miRNA 3.0
辛酸/癸酸三酸甘油酯 3.0
角鲨烷 5.0
鲸蜡硬脂基葡糖苷 1.5
山梨醇硬脂酸酯 0.4
聚山梨醇酯60 1.5
防腐剂 适量
香料 适量
色素 适量
三乙醇胺 0.1
[剂型例3]营养霜
可通过下述表3的组成，采用通常的方法制备营养霜。
表3
原料名称 含量(重量%)
甘油 3.0
丁二醇 3.0
液体石蜡 7.0
β-葡聚糖 7.0
卡波姆 0.1
SEQ NO.1的miRNA 3.0
辛酸/癸酸三酸甘油酯 3.0
角鲨烷 5.0
鲸蜡硬脂基葡糖苷 1.5
山梨醇硬脂酸酯 0.4
聚山梨醇酯60 1.2
防腐剂 适量
香料 适量
色素 适量
三乙醇胺 0.1
纯净水 余量
[剂型例4]按摩霜
可通过下述表4的组成，采用通常的方法制备按摩霜。
表4
原料名称 含量(重量%)
甘油 8.0
丁二醇 4.0
液体石蜡 45.0
β-葡聚糖 7.0
卡波姆 0.1
SEQ NO.1的miRNA 1.0
辛酸/癸酸三酸甘油酯 3.0
蜜蜡 4.0
鲸蜡硬脂基葡糖苷 1.5
失水山梨醇倍半油酸酯 0.9
凡士林 3.0
防腐剂 适量
香料 适量
色素 适量
石蜡 1.5
纯净水 余量
[剂型例5]面膜
可通过下述表5的组成，采用通常的方法制备面膜。
表5
原料名称 含量(重量%)
甘油 4.0
聚乙烯醇 15.0
透明质酸提取物 5.0
β-葡聚糖 7.0
尿囊素 0.1
SEQ NO.1的miRNA 0.5
壬烷基酚聚乙二醇醚 0.4
聚山梨醇酯60 1.2
防腐剂 适量
香料 适量
色素 适量
乙醇 6.0
纯净水 余量
[剂型例6]软膏
可通过下述表6的组成，采用通常的方法制备软膏。
表6
原料名称 含量(重量%)
甘油 8.0
丁二醇 4.0
液体石蜡 15.0
β-葡聚糖 7.0
卡波姆 0.1
SEQ NO.1的miRNA 1.0
辛酸/癸酸三酸甘油酯 3.0
角鲨烷 1.0
鲸蜡硬脂基葡糖苷 1.5
山梨醇硬脂酸酯 0.4
鲸蜡硬脂醇 1.0
防腐剂 适量
香料 适量
色素 适量
蜜蜡 4.0
纯净水 余量
本发明的包含SEQNO.2的miRNA作为有效成分的防止白发用组合物，虽然可通过下述剂型例进行制备，但并不限于此。
[剂型例7]洗发香波
可通过下述表7的组成，采用通常的方法制备洗发香波。
表7
原料名称 含量(重量%)
月桂酸硫酸钠(30%) 20.0
棕桐油脂肪酸二乙醇酰胺 5.0
聚季铵盐-10 0.3
丙二醇 2.0
SEQ NO.2的miRNA 0.1
吡罗克酮乙醇胺 0.5
黄色203号 适量
对羟基苯甲酸酯 0.2
组合香料 适量
柠檬酸 适量
纯净水 余量
[剂型例8]护发素
可通过下述表8的组成，采用通常的方法制备护发素。
表8
原料名称 含量(重量%)
十六烷基三甲基氯化铵(29%) 7.0
二硬脂基二甲基氯化铵(75%) 4.0
十八醇十六醇混合物（Cetostearyl alcohol） 3.5
十八烷基聚氧乙烯基醚 1.0
液体石蜡 2.0
丙二醇 1.5
SEQ NO.2的miRNA 0.1
组合香料 适量
柠檬酸 适量
纯净水 余量
[剂型例9]头皮生发油
可通过下述表9的组成，采用通常的方法制备头皮生发油。
表9
原料名称 含量(重量%)
薄荷醇 0.1
D-泛醇 0.6
水杨酸 0.05
甘油 1.0
聚氧乙烯氢化蓖麻油 0.8
生育酚乙酸酯 0.03
组合香料 适量
SEQ NO.2的miRNA 0.1
乙醇 30.0
纯净水 余量
[剂型例10]头皮精华液
可通过下述表10的组成，采用通常的方法制备头皮精华液。
表10
原料名称 含量(重量%)
乙醇 30.0
聚山梨醇酯60 1.5
甘油 3.0
聚羧乙烯 0.1
三乙醇胺 0.2
SEQ NO.2的miRNA 0.1
防腐剂 适量
香料和色素 适量
纯净水 余量
[剂型例11]注射剂
可通过下述表11的组成，采用通常的方法制备注射剂。
[表11]
原料名称 重量比(每1ml)
氯化钠 9mg
羧甲基纤维素钠 30.0mg
吐温20 1.0mg
SEQ NO.2的miRNA 1mg
注射用蒸馏水 余量
[剂型例12]软膏
可通过下述表12的组成，采用通常的方法制备软膏。
表12
原料名称 含量(重量%)
辛酸/癸酸三酸甘油酯 10
液体石蜡 10
失水山梨醇倍半油酸酯 6
辛基十二醇聚醚-25 9
十六烷基己酸乙酯 10
角鲨烷 1
水杨酸 1
甘油 15
山梨醇 1
SEQ NO.2的miRNA 0.1
防腐剂、色素和香料 适量
纯净水 余量
[剂型例13]乳液
可通过下述表13的组成，采用通常的方法制备乳液。
表13
原料名称 含量(重量%)
SEQ NO.2的miRNA 0.1
蜜蜡 4.0
聚山梨醇酯60 1.5
失水山梨醇倍半油酸酯 1.5
液体石蜡 0.5
辛酸/癸酸三酸甘油酯 5.0
甘油 3.0
丁二醇 3.0
丙二醇 3.0
聚羧乙烯 0.1
三乙醇胺 0.2
防腐剂、色素和香料 适量
纯净水 余量
[剂型例14]喷剂
可通过下述表14的组成，采用通常的方法制备喷剂。
表14
原料名称 含量(重量%)
SEQ NO.2的miRNA 0.1
乙醇 80
吐温80 5
甘油 5
生育酚乙酸酯 1
防腐剂、色素和香料 适量
纯净水 余量
[序列表目录]
SEQNO.1是本发明中使用的调节色素形成基因表达的miRNA的碱基序列，由包含cccugag的连续的碱基序列构成。
SEQNO.2是本发明中使用的miR-125b的抑制剂，可与本发明中使用的miR-125b杂交。

Claims (10)

1.SEQNO.1的miRNA在制备用于调节色素形成以及色素形成基因表达的组合物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述色素形成基因是酪氨酸酶基因。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述miRNA抑制酪氨酸酶mRNA的表达。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物是化妆品组合物。
5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物是药物组合物。
6.SEQNO.2的反义核酸分子在制备用于调节色素形成以及色素形成基因表达的组合物中的用途，其特征在于，所述反义核酸分子具有与SEQNO.1的miRNA互补的核苷酸序列，并能与所述miRNA杂交。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述色素形成基因是酪氨酸酶基因。
8.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述miRNA刺激酪氨酸酶mRNA的表达。
9.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述组合物是化妆品组合物。
10.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述组合物是药物组合物。
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180032954A (ko) * 2016-09-23 2018-04-02 (주)아모레퍼시픽 Sh3bp4 억제 물질을 포함하는 피부 미백용 조성물 및 sh3bp4 억제 물질의 스크리닝 방법
KR102109976B1 (ko) 2017-07-25 2020-05-13 동국대학교 산학협력단 아르기나제 2 억제제를 유효성분으로 함유하는 색소형성 억제용 조성물
BR112020011670A2 (pt) 2017-12-15 2020-11-17 Flagship Pioneering Innovations Vi, Llc. composições compreendendo polirribonucleotídeos circulares e seus usos
CN111041082B (zh) * 2018-10-11 2023-11-07 伽蓝（集团）股份有限公司 一种以皮肤光老化靶标筛选改善皮肤光老化的活性物的方法及改善皮肤光老化的活性物
CN113543766A (zh) * 2019-03-01 2021-10-22 旗舰创业创新第六有限责任公司 多核糖核苷酸及其美容用途
CN110448567A (zh) * 2019-08-26 2019-11-15 佳木斯大学 miRNA125b纳米粒子的应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101569597A (zh) * 2007-10-29 2009-11-04 美洛生物科技股份有限公司 使用内含子的核醣核酸技术于新颖化妆品的设计与产品
CN101918594A (zh) * 2007-11-30 2010-12-15 俄亥俄州立大学研究基金会 肺癌中外周血中的微rna表达特征谱和靶向
CN101942502A (zh) * 2009-12-24 2011-01-12 北京命码生科科技有限公司 胰腺癌标记物及其检测方法、试剂盒和生物芯片

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4371812B2 (ja) * 2001-09-28 2009-11-25 マックス−プランク−ゲゼルシャフト・ツア・フェルデルング・デア・ヴィッセンシャフテン・エー・ファオ マイクロｒｎａ分子
US7504385B2 (en) 2003-12-17 2009-03-17 Avon Products, Inc. si-RNA-mediated gene silencing technology to inhibit tyrosinase and reduce pigmentation
US7635563B2 (en) * 2004-06-30 2009-12-22 Massachusetts Institute Of Technology High throughput methods relating to microRNA expression analysis
GB0502042D0 (en) * 2005-02-01 2005-03-09 Univ Glasgow Materials and methods for diagnosis and treatment of chronic fatigue syndrome
WO2008036776A2 (en) 2006-09-19 2008-03-27 Asuragen, Inc. Mir-15, mir-26, mir -31,mir -145, mir-147, mir-188, mir-215, mir-216 mir-331, mmu-mir-292-3p regulated genes and pathways as targets for therapeutic intervention
EP2245196A2 (en) 2008-02-01 2010-11-03 Memorial Health Inc. Molecular signatures and biomarkers associated with melanoma and methods of use thereof
KR101207561B1 (ko) * 2009-12-15 2012-12-04 주식회사 코리아나화장품 티로시나제의 발현을 저해하는 ｓｉＲＮＡ 올리고뉴클레오타이드 및 이를 함유하는 화장료 조성물

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101569597A (zh) * 2007-10-29 2009-11-04 美洛生物科技股份有限公司 使用内含子的核醣核酸技术于新颖化妆品的设计与产品
CN101918594A (zh) * 2007-11-30 2010-12-15 俄亥俄州立大学研究基金会 肺癌中外周血中的微rna表达特征谱和靶向
CN101942502A (zh) * 2009-12-24 2011-01-12 北京命码生科科技有限公司 胰腺癌标记物及其检测方法、试剂盒和生物芯片

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Mir-434-5p mediates skin whitening and lightening;David TS Wu et al.;《Clinical, Cosmetic and Investigational Dermatology》;20081231;第1卷;19-35 *
Specific MicroRNAs Are Preferentially Expressed by Skin Stem Cells To Balance Self-Renewal and Early Lineage Commitment;Liang Zhang et al.;《Cell Stem Cell》;20110303;第8卷;294-308 *

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