CN104045717B - 一种肿瘤血管阻断剂多肽、基因、表达载体及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种肿瘤血管阻断剂多肽，编码其的基因，表达其的表达载体以及其在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用。本发明的肿瘤血管阻断剂多肽从N端到C端依次包含：截断的组织因子tTF的氨基酸序列、连接子和肿瘤靶向分子pHLIP的氨基酸序列。本发明的肿瘤血管阻断剂多肽能够通过pHLIP定位到肿瘤血管内皮细胞表面，从而特异的在肿瘤血管产生血栓，阻断肿瘤部位血液供应，达到治疗肿瘤的目的；并且，由于其活性域(tTF)具有接近其天然的结构，因此与现有技术的肿瘤靶向肽介导组织因子相比具有更好的凝血活性。

Description

一种肿瘤血管阻断剂多肽、基因、表达载体及其应用
技术领域
本发明涉及肿瘤治疗的药物技术领域，尤其涉及一种肿瘤血管阻断剂多肽、基因、表达载体及其应用。
背景技术
肿瘤血管是肿瘤细胞获取营养物质及排除代谢产物的通道，也是肿瘤细胞逃逸、转移的重要途径之一，其形态学和功能都有别于机体的正常血管系统，因而是肿瘤靶向治疗的关键靶点之一。肿瘤血管靶向治疗主要包括两种模式：抑制新生血管生成和阻断已有肿瘤血管。其中阻断肿瘤已有血管疗法主要是通过选择性的破坏肿瘤已有的血管，切断肿瘤血供，诱发肿瘤细胞发生缺血性坏死，从而达到治疗肿瘤的目的。因此，如何实现特异的阻断肿瘤部位的血管，而对机体正常组织血管没有影响，成为研究的热点。
组织因子(TF)是一个分子量约为47kDa的跨膜糖蛋白，在血栓形成过程中起重要的作用。正常情况下，组织因子位于血管壁外膜细胞，不存在于循环中或不与循环血液接触。当血管壁的完整性遭到破坏时，组织因子就会暴露于循环血液，通过激活凝固级联反应发挥止血作用。组织因子由263个氨基酸残基组成，其中氨基端的219个氨基酸残基位于细胞膜外，是组织因子的活性部位。研究表明，当该区域处于游离状态时，并没有凝血活性；但当它被锚定在细胞膜上，并暴漏于血液中时，则会产生类似于全长因子的凝血活性，因此该段序列被称之为截断的组织因子(tTF)。
肿瘤靶向分子pHLIP是一种由35个氨基酸构成的多肽。当其在体内(pH＝7.35-7.45)循环时，处于自由伸展状态，并不能锚定于特定组织；但当其到达肿瘤(pH＜7)部位时，则会产生酸响应的构象变化，形成α-螺旋结构，并与细胞膜发生相互作用，插入细胞膜中从而锚定于内皮细胞表面。
发明内容
本发明的目的在于提出一种肿瘤血管阻断剂多肽，编码其的基因，表达其的表达载体以及其在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用；本发明的肿瘤血管阻断剂多肽的活性域——截断的组织因子tTF具有更接近天然的结构，因此具有更好的凝血活性，可以更有效地发挥肿瘤血管阻断作用。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种肿瘤血管阻断剂多肽，该肿瘤血管阻断剂多肽从N端到C端依次包含：截断的组织因子tTF的氨基酸序列、连接子和肿瘤靶向分子pHLIP的氨基酸序列。
作为优选，所述截断的组织因子tTF的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示；SEQIDNO：2所示的氨基酸序列(从N端到C端)如下：
SGTTNTVAAYNLTWKSTNFKTILEWEPKPVNQVYTVQISTKSGDWKSKCFYTTDTECDLTDEIVKDVKQTYLARVFSYPAGNVESTGSAGEPLYENSPEFTPYLETNLGQPTIQSFEQVGTKVNVTVEDERTLVRRNNTFLSLRDVFGKDLIYTLYYWKSSSSGKKTAKTNTNEFLIDVDKGENYCFSVQAVIPSRTVNRKSTDSPVECMGQEKGEFRE。
SEQIDNO：2所示的氨基酸序列即为组织因子位于细胞膜外的氨基酸残基序列，当其处于游离状态时，没有凝血活性；当其通过靶向肽定位于肿瘤血管内皮细胞膜上时，则会发挥组织因子的功能，激活凝血途径，诱发血栓形成。
优选地，所述肿瘤靶向分子pHLIP的氨基酸序列如SEQIDNO:4所示；SEQIDNO：4所示的氨基酸序列(从N端到C端)如下：
AEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGT。
所述肿瘤靶向分子pHLIP在肿瘤部位的微酸性环境中能够产生构象变化，形成α-螺旋结构，并穿过细胞膜，从而定位于肿瘤血管内皮细胞膜。
作为优选，所述连接子由4-8个、优选4-6个、更优选5个氨基酸构成；
进一步优选地，所述连接子具有如SEQIDNO:3所示的氨基酸序列。SEQIDNO：3所示的氨基酸序列(从N端到C端)如下：GGGGS。
所述连接子能够使表达得到的融合蛋白活性域(即截断的组织因子tTF)和靶向域(即肿瘤靶向分子pHLIP)的功能保持完整。
更进一步优选地，所述肿瘤血管阻断剂多肽具有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列；SEQIDNO：1所示的氨基酸序列(从N端到C端)如下：
SGTTNTVAAYNLTWKSTNFKTILEWEPKPVNQVYTVQISTKSGDWKSKCFYTTDTECDLTDEIVKDVKQTYLARVFSYPAGNVESTGSAGEPLYENSPEFTPYLETNLGQPTIQSFEQVGTKVNVTVEDERTLVRRNNTFLSLRDVFGKDLIYTLYYWKSSSSGKKTAKTNTNEFLIDVDKGENYCFSVQAVIPSRTVNRKSTDSPVECMGQEKGEFREGGGGSAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGT。
本发明所述肿瘤血管阻断剂多肽，能够响应肿瘤微酸性的特点，产生构象变化，形成α-螺旋结构，从而定位于肿瘤血管内皮细胞，并激活活性域——tTF的凝血活性，从而能够特异地在肿瘤血管形成血栓，达到抑制肿瘤生长的治疗目的；而在正常生理pH环境中，其靶向域不能形成α-螺旋结构，不具有穿膜功能，因此不能将活性域定位于细胞上，使得活性域不能发挥凝血活性，从而保证该药物分子在体内循环时，不会在正常部位血管形成血栓，避免副作用的产生。
第二方面，本发明提供了一种肿瘤血管阻断剂基因，其编码如第一方面任一项所述的肿瘤血管阻断剂多肽。
本领域的技术人员应理解，由于密码子的简并性，本发明编码所述肿瘤血管阻断剂多肽的核苷酸序列并不唯一，任何能够编码并表达所述肿瘤血管阻断剂多肽的核苷酸序列都应当理解为本发明的肿瘤血管阻断剂基因。
虽然如此，本发明仍然提供了一种肿瘤血管阻断剂基因，所述肿瘤血管阻断剂基因具有如SEQIDNO:5所示的核苷酸序列；SEQIDNO：5所示的核苷酸序列(从5’端到3’端)如下：
TCAGGCACTACAAATACTGTGGCAGCATATAATTTAACTTGGAAATCAACTAATTTCAAGACAATTTTGGAGTGGGAACCCAAACCCGTCAATCAAGTCTACACTGTTCAAATAAGCACTAAGTCAGGAGATTGGAAAAGCAAATGCTTTTACACAACAGACACAGAGTGTGACCTCACCGACGAGATTGTGAAGGATGTGAAGCAGACGTACTTGGCACGGGTCTTCTCCTACCCGGCAGGGAATGTGGAGAGCACCGGTTCTGCTGGGGAGCCTCTGTATGAGAACTCCCCAGAGTTCACACCTTACCTGGAGACAAACCTCGGACAGCCAACAATTCAGAGTTTTGAACAGGTGGGAACAAAAGTGAATGTGACCGTAGAAGATGAACGGACTTTAGTCAGAAGGAACAACACTTTCCTAAGCCTCCGGGATGTTTTTGGCAAGGACTTAATTTATACACTTTATTATTGGAAATCTTCAAGTTCAGGAAAGAAAACAGCCAAAACAAACACTAATGAGTTTTTGATTGATGTGGATAAAGGAGAAAACTACTGTTTCAGTGTTCAAGCAGTGATTCCCTCCCGAACAGTTAACCGGAAGAGTACAGACAGCCCGGTAGAGTGTATGGGCCAGGAGAAAGGGGAATTCAGAGAAGGTGGTGGTGGTTCTGCTGAACAGAACCCGATCTACTGGGCTCGTTACGCTGACTGGCTGTTCACCACCCCGCTGCTGCTGCTGGACCTGGCTCTGCTGGTTGACGCTGACGAAGGTACC。
第三方面，本发明提供了一种肿瘤血管阻断剂表达载体，其包含如第二方面所述的肿瘤血管阻断剂基因。
本领域的技术人员应理解，本发明对表达载体所采用的载体质粒并没有特别限制，因为本领域的技术人员在得知本发明的基因序列的基础上，结合本领域技术人员的公知常识能够选择合适的载体质粒用于本发明的基因表达。
虽然如此，本发明特别提供一种载体质粒，其为常用的pET30a载体质粒。因此，本发明的表达载体优选为采用pET30a载体质粒构建的表达载体。
第四方面，本发明提供了一种肿瘤血管阻断剂组合物，其包含如第一方面任一项所述的肿瘤血管阻断剂多肽、如第二方面任一项所述的肿瘤血管阻断剂基因或如第三方面任一项所述的肿瘤血管阻断剂表达载体。
第五方面，本发明提供了如第一方面任一项所述的肿瘤血管阻断剂多肽、如第二方面任一项所述的肿瘤血管阻断剂基因或如第三方面任一项所述的肿瘤血管阻断剂表达载体在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用。
本发明所述肿瘤血管阻断剂多肽具体可以通过设计相应的基因序列，构建融合蛋白表达质粒，并将其转入如BL21大肠杆菌中，IPTG诱导表达并纯化，得到具有肿瘤靶向性及凝血活性的肿瘤血管阻断剂。
本发明所述肿瘤血管阻断剂多肽，能够响应肿瘤微酸性的特点，产生构象变化，形成α-螺旋结构，从而定位于肿瘤血管内皮细胞，并激活活性域——tTF的凝血活性，从而能够特异地在肿瘤血管形成血栓，达到抑制肿瘤生长的治疗目的；而在正常生理pH环境中，其靶向域不能形成α-螺旋结构，不具有穿膜功能，因此不能将活性域定位于细胞上，使得活性域不能发挥凝血活性，从而保证该药物分子在体内循环时，不会在正常部位血管形成血栓，避免副作用的产生。
本发明所述肿瘤血管阻断剂多肽无需渗透到肿瘤组织中，在肿瘤血管处即可直接发挥作用，因此所用药量减少，且不易产生耐药性；多肽的主体部分来源于自身的组织因子胞外区，因此免疫原性小，能够很好的躲避免疫系统，减少药物在体内循环时被免疫清除。
此外，本发明所述肿瘤血管阻断剂多肽与已经报道的其他肿瘤靶向肽介导组织因子相比，更接近组织因子天然的构象，其凝血活性更好。
附图说明
图1是本发明肿瘤血管阻断剂多肽(融合蛋白)的结构示意图(A)和融合蛋白SDS-PAGE电泳鉴定结果(B)；图(A)显示，所述肿瘤血管阻断剂多肽包括活性域、连接域和靶向域三部分；图(B)中，M表示蛋白质标准分子量，1表示融合蛋白的泳道，箭头指示处即为融合蛋白。
图2是本发明肿瘤血管阻断剂通过尾静脉注入裸鼠乳腺癌肿瘤模型12小时后的治疗效果；其中，(A)为注射生理盐水(对照)后荷瘤小鼠体外形貌，(B)为对照肿瘤，(C)为对照肿瘤病理切片(箭头代表肿瘤血管，没有血栓形成)，(D)为注射肿瘤血管阻断剂后荷瘤小鼠体外形貌，(E)为注射肿瘤血管阻断剂后肿瘤、(F)为注射肿瘤血管阻断剂后肿瘤病理切片(箭头代表肿瘤血管，有明显血栓形成)。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述。本领域技术人员将会理解，以下实施例仅为本发明的优选实施例，以便于更好地理解本发明，因而不应视为限定本发明的范围。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所用的实验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂厂商购买得到的。
实施例1：融合蛋白质粒的构建
用全基因合成的方式，合成该融合蛋白的基因序列SEQIDNO：5，并在该融合蛋白基因序列的两端分别设计NdeI和XhoI酶切位点。然后，将融合蛋白基因通过上述酶切位点，连接入pET30a载体中，从而得到融合蛋白表达载体。
实施例2：融合蛋白的表达和纯化
(1)融合蛋白的表达
将上述融合蛋白表达载体转化入BL21大肠杆菌中，先接5μL菌液到5mLLB液体培养基中，37℃，200×rpm，摇床培养16h。将培养的菌液转接到500mLLB液体培养基中，37℃，200×rpm，培养至OD＝0.6～0.8，用IPTG(0.5mM)诱导表达4h。
(2)融合蛋白的纯化
将上述IPTG诱导表达的菌液离心(6000×rpm，5min)，弃上清，收菌。沉淀用25mL10mMTris-HCl(pH＝8.0)溶液吹散，超声破菌，12000×rpm，离心10min，上清去除干净，用25mL10mMTris-HCl(pH＝8.0)溶液重悬超声离心得到的沉淀，静置10min。重复上述操作一次，得到沉淀。加入少量的10mMTris-HCl(pH＝8.0)溶液重悬沉淀，再加8mL含8M尿素的10mMTris-HCl(pH＝8.0)溶液溶解蛋白，12000×rpm，离心10min，收集上清。
通过SDS-PAGE电泳鉴定融合蛋白，结果如图1(B)所示，可见形成清晰、纯净的条带，大小在30KDa以上，与预期相符。
实施例3：肿瘤血管阻断剂效果实验
将实施例2提供的肿瘤血管阻断剂多肽尾静脉注入裸鼠乳腺癌肿瘤模型(模型的构建参考文献：TianY,LiS,SongJ,ZhuM,JiT,NieG,WeiJandZhaoY.Adoxorubitiondeliveryplatformusingengineerednaturalmembranevesiclesexosomesfortargetedtumortherapy.Biomaterials(2013).)，12小时后观察治疗效果，以注射生理盐水作为对照组。结果如图2所示。
由图2可见，与注射生理盐水荷瘤小鼠(A)相比，本发明的肿瘤血管阻断剂能够引起肿瘤部位出现肉眼可见的深红色(D)；解剖后，可见对照组肿瘤(B)为正常的肉红色，而注射肿瘤血管阻断剂(E)的肿瘤则出现明显的血栓引起的暗红色；肿瘤病理切片则可以看出与对照组(C)相比，注射肿瘤血管阻断剂组(F)在肿瘤血管中形成了明显的血栓(箭头所示)。
上述结果表明，本发明的肿瘤血管阻断剂能够在肿瘤血管中形成血栓，切断肿瘤血供，诱发肿瘤细胞发生缺血性坏死，从而达到治疗肿瘤的目的。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细特征以及详细方法，但本发明并不局限于上述详细特征以及详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细特征以及详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明选用组分的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (11)

1.一种肿瘤血管阻断剂多肽，其特征在于，从N端到C端依次包含：截断的组织因子tTF的氨基酸序列、连接子和肿瘤靶向分子pHLIP的氨基酸序列，所述截断的组织因子tTF的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示；所述肿瘤靶向分子pHLIP的氨基酸序列如SEQIDNO：4所示。
2.根据权利要求1所述的肿瘤血管阻断剂多肽，其特征在于，所述连接子由4-8个氨基酸构成。
3.根据权利要求1所述的肿瘤血管阻断剂多肽，其特征在于，所述连接子由4-6个氨基酸构成。
4.根据权利要求1所述的肿瘤血管阻断剂多肽，其特征在于，所述连接子由5个氨基酸构成。
5.根据权利要求1-4任一所述的肿瘤血管阻断剂多肽，其特征在于，所述连接子的氨基酸序列如SEQIDNO：3所示。
6.一种肿瘤血管阻断剂基因，其编码如权利要求1-5任一项所述的肿瘤血管阻断剂多肽。
7.如权利要求6所述的肿瘤血管阻断剂基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNO：5所示。
8.一种肿瘤血管阻断剂表达载体，其包含如权利要求6或7所述的肿瘤血管阻断剂基因。
9.如权利要求8所述的肿瘤血管阻断剂表达载体，其特征在于，所述表达载体的基础载体为pET30a质粒载体。
10.一种肿瘤血管阻断剂组合物，其包含如权利要求1-5任一项所述的肿瘤血管阻断剂多肽、如权利要求6或7所述的肿瘤血管阻断剂基因或如权利要求8或9所述的肿瘤血管阻断剂表达载体。
11.权利要求1-5任一项所述的肿瘤血管阻断剂多肽的制备方法，其特征在于，将权利要求8或9所述的肿瘤血管阻断剂表达载体转入到表达系统中诱导表达得到所述肿瘤血管阻断剂多肽。
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US15/324,669 US9896498B2 (en) 2014-07-08 2015-09-08 Tumor vascular disrupting agent polypeptide, gene, expression vector, and use thereof
JP2017521279A JP6334061B2 (ja) 2014-07-08 2015-09-08 腫瘍血管遮断剤であるポリペプチド、遺伝子、発現ベクター、腫瘍血管遮断剤の組成物、及び腫瘍血管遮断剤であるポリペプチドの調製方法

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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20170267741A1 (en) * 2014-07-08 2017-09-21 Beijing Hua'an Innovation Biotechnology Co., Ltd. Tumor vascular disrupting agent polypeptide, gene, expression vector, and use thereof

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104387474B (zh) * 2014-11-17 2018-01-23 北京华安科创生物技术有限公司 一种肿瘤血管梗塞剂多肽、基因、表达载体及其应用
CN105218647A (zh) * 2015-10-28 2016-01-06 苏州普罗达生物科技有限公司 Vegfr2阻断剂多肽及其应用
CN105770901B (zh) * 2016-03-01 2017-05-31 中国人民解放军南京军区南京总医院 交联pH响应跨膜小肽的金纳米星材料及其应用
CN107400169B (zh) * 2017-08-01 2021-05-14 北京华安科创生物技术有限公司 一种肿瘤血管阻断剂融合蛋白的纯化方法
CN107686523B (zh) * 2017-09-15 2021-05-14 山西大学 一种肿瘤酸度响应自噬诱导多肽及其制备方法和应用
CN109467607B (zh) * 2017-12-28 2020-10-30 北京泽勤生物医药有限公司 一种靶向肿瘤的酸性敏感融合肽及其应用
CN109293780B (zh) * 2018-09-04 2021-05-07 厦门宏谱福生物科技有限公司 一种人组织因子凝血复合物及其制备方法
CN109467593A (zh) * 2018-11-30 2019-03-15 北京泽勤生物医药有限公司 低pH插入肽的胞外段作为抗原的应用
CN109517073A (zh) * 2018-11-30 2019-03-26 北京泽勤生物医药有限公司 一种靶向治疗肿瘤的融合肽及其应用
CN110790841A (zh) * 2019-11-11 2020-02-14 国家纳米科学中心 一种蛋白核酸复合物及其制备方法和应用
WO2021093881A1 (zh) * 2019-11-14 2021-05-20 上海鑫湾生物科技有限公司 用于调控酸性环境免疫应答的组合物、其制备方法和用途
CN112300264A (zh) * 2020-11-09 2021-02-02 青岛大学附属医院 一种新型放射性标记抗癌药的合成标记方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001003735A1 (en) * 1999-07-12 2001-01-18 Maine Medical Center Research Institute Cancer treatment using angiopoietins targeted to aminophospholipids
CN102153653A (zh) * 2010-12-30 2011-08-17 厦门大学 肿瘤血管靶向多肽与组织因子的融合蛋白及其制备方法
CN103705465A (zh) * 2012-10-09 2014-04-09 复旦大学 一种微酸环境靶向多肽修饰的肿瘤靶向纳米给药系统及其制备方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0771216B9 (en) * 1994-07-11 2003-01-02 The Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for the specific coagulation of tumoral vasculature
US20100184695A1 (en) * 2007-01-09 2010-07-22 Yuichi Koyamatsu Vascular endothelial cell-binding peptide
EP4098272A3 (en) * 2010-07-13 2023-03-08 University of Rhode Island Board of Trustees Compositions comprising a ph-sensitive membrane insertion polipeptide
CN104045717B (zh) * 2014-07-08 2016-07-06 北京华安科创生物技术有限公司 一种肿瘤血管阻断剂多肽、基因、表达载体及其应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001003735A1 (en) * 1999-07-12 2001-01-18 Maine Medical Center Research Institute Cancer treatment using angiopoietins targeted to aminophospholipids
CN102153653A (zh) * 2010-12-30 2011-08-17 厦门大学 肿瘤血管靶向多肽与组织因子的融合蛋白及其制备方法
CN103705465A (zh) * 2012-10-09 2014-04-09 复旦大学 一种微酸环境靶向多肽修饰的肿瘤靶向纳米给药系统及其制备方法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20170267741A1 (en) * 2014-07-08 2017-09-21 Beijing Hua'an Innovation Biotechnology Co., Ltd. Tumor vascular disrupting agent polypeptide, gene, expression vector, and use thereof
US9896498B2 (en) * 2014-07-08 2018-02-20 Beijing Hua'an Innovation Biotechnology Co., Ltd. Tumor vascular disrupting agent polypeptide, gene, expression vector, and use thereof

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