CN104031968B - 核桃多肽的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种核桃多肽及其制备方法和应用。所述的核桃多肽是由核桃饼粕粉碎所得的核桃饼粉经提取所得的核桃蛋白粉用植物蛋白水解专用酶酶解，灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥，即得；其中：所述植物蛋白水解专用酶的酶解条件为：底物浓度为3～30％(质量)，酶质量分数为0.005～10％，酶解温度为25～70℃，酶解时的pH值为7.5～12.0，酶解时间为2～30h。申请人发现由上述方法制得的核桃多肽在具有抗氧化能力的同时还具有很好的降血脂作用，体现了其在制备天然、无毒的抗氧化药物或保健品中具有良好的应用前景。

Description

核桃多肽的应用

技术领域

本发明涉及食品加工技术领域，具体涉及一种核桃多肽的应用。

背景技术

目前，我国高血脂患者达1.6亿人，包括高胆固醇血症、高甘油三脂血症及复合性高脂血症患者。血脂中的主要成份是甘油三酯和胆固醇。甘油三酯过高对人体的主要危害主要是引起动脉粥样硬化、造成血管堵塞和形成血栓。胆固醇是脂溶性的，无法直接溶于血液，必须与脂蛋白结合后才能通过血液运送到全身。运载胆固醇的脂蛋白包括高密度脂蛋白(有益成分)和低密度脂蛋白(有害成分)。当血液中低密度脂蛋白过多，沉积在动脉壁上，则形成血管狭窄、动脉硬化，导致全身血液无法顺畅流动，引发种种疾病，如：高血压、膜腺炎、老年痴呆等疾病。

目前在临床上常用的口服降血脂药物以他汀类(辛伐他汀、普伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀等)、烟酸类(烟肌酯、维生素E烟酸酯、阿昔莫司等)、贝特类(氯贝丁酯及其衍生药物苯扎贝特、吉非罗齐、益多酯等)等西药为主。这些药物长期使用会产生耐药性，或者是产生较严重的副作用等。因此，从天然药物中筛选可防治高血脂症的药物，已经为各国药物研究者所瞩目。我国科研人员从我们常用的中草药中发现了多种具有降血脂的药物，如：大黄、何首乌、山楂、绞股蓝、银杏叶、女贞子、三七、枸杞子、桑寄生、葛根、水蛭、茶叶、柴胡、茵陈、姜黄、虎杖、决明子、黄精、马齿苋、熊胆、月见草等。

核桃(Juglans regial L)原产于中亚，有胡桃、羌桃、合桃等别名，为“木本油料之王”，它与扁桃、开心果及榛子并列为世界四大干果。核桃营养丰富，有补肾、温肺、润肠、强身健脑、驻颜延年功能，又称“万岁子”、“长寿果”、“益智果”、“美容果”，被历代医学家和养生学家视为益寿精品。我国的核桃资源非常丰富，已有的研究表明，从核桃中提取的核桃油有显著降低血脂和降低动脉硬化危险性的作用(贾立君，马汇泉.核桃油综合保质技术研究[J].现代化农业，2013,1:40-41；谭新兰.国内核桃综合深加工开发现状与前景[J].新疆农机化，2008,4:20-21)，大量的核桃仁脱脂后的产物即核桃饼粕被作为饮料和肥料，甚至被丢弃。近年来，对核桃饼粕的深加工已逐步开展起来，主要是利用核桃饼粕制备核桃多肽，如公开号为CN103125735A的发明专利等。樊永波等人发现核桃饼粕能明显提高大鼠学习和记忆能力，改善大鼠的抗氧化功能，提高乙酰胆碱酯酶的活性(樊永波，陶兴无，马琳，等.核桃饼粕对大鼠学习、记忆和抗氧化功能的影响[J].食品科学，2013,34(17):323-326)。但至今尚未见有将核桃饼粕用于降血脂的公开报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种核桃多肽及其制备方法和应用。本发明所述方法简单易操作，所得核桃多肽在具有抗氧化能力的同时还具有降血脂的作用。

本发明所述的核桃多肽，它是由核桃饼粕粉碎所得的核桃饼粉经提取所得的核桃蛋白粉用植物蛋白水解专用酶酶解，灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥，得到核桃多肽粉；其中：

所述植物蛋白水解专用酶的酶解条件为：底物浓度为3～30％(质量)，酶质量分数为0.005～10％，酶解温度为25～70℃，酶解时的pH值为7.5～12.0，酶解时间为2～30h。

上述技术方案中，可采用现有常规方法由核桃饼粉得到核桃蛋白粉，优选地，按以下方法由核桃饼粉得到核桃蛋白粉：取核桃饼粉加水后在pH＝7.5～12.0的碱性条件下提取，提取液离心，收集上清液调其pH值至3.0～6.0，有沉淀析出，收集沉淀，水洗至中性，干燥，即得到核桃蛋白粉。其中，水的用量通常为核桃饼粉重量的5～50倍，通常采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾等碱的水溶液来调节核桃饼粉和水的混合液的pH值，优选是将其pH值调至8.0～10.0的条件下再进行提取；提取通常在20～50℃条件下进行，提取的方式可以是超声提取，也可以是常规的搅拌提取，提取的次数通常为1～3次，每次1～5h；离心时的参数通常为3000～20000r/min，离心时间为10～30min；离心所得上清液的pH值通常用无机酸(如磷酸、盐酸、硫酸等)调节，优选是将上清液的pH值调至3.5～5.5，这样更有利于沉淀的析出。

上述技术方案中，所述植物蛋白水解专用酶的酶活为20～200万U/g，所述的植物蛋白水解专用酶可以是南宁东恒华道生物科技有限责任公司生产的植物蛋白水解专用酶、南宁庞博生物工程有限公司生产的植物蛋白水解复合酶或广州市暨生元生物科技有限公司生产的植物蛋白水解酶等，优选采用南宁东恒华道生物科技有限责任公司生产的植物蛋白水解专用酶。

上述技术方案中，所述的灭酶操作与现有技术相同，通常是将酶解完成所得的酶解液煮沸5～30min灭酶。

本发明还包括上述核桃多肽的制备方法，包括以下步骤：

1)取核桃饼粕粉碎得到核桃饼粉，核桃饼粉经提取得到核桃蛋白粉；

2)将核桃蛋白粉用植物蛋白水解专用酶酶解，灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥，得到核桃多肽粉；其中：

所述植物蛋白水解专用酶的酶解条件为：底物浓度为5～30％(质量)，酶质量分数为0.005～10％，酶解温度为25～70℃，酶解时的pH值为7.5～12.0，酶解时间为2～30h。

上述制备方法的步骤1)中，由核桃饼粉得到核桃蛋白粉的方法可与现有技术相同，优选按以下方法由核桃饼粉制得核桃蛋白粉：取核桃饼粉加水后在pH＝7.5～12.0的碱性条件下提取，提取液离心，收集上清液调其pH值至3.0～6.0，有沉淀析出，收集沉淀，水洗至中性，干燥，即得到核桃蛋白粉。其中，水的用量通常为核桃饼粉重量的5～50倍，通常采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾等碱的水溶液来调节核桃饼粉和水的混合液的pH值，优选是将其pH值调至8.0～10.0的条件下再进行提取；提取通常在20～50℃条件下进行，提取的方式可以是超声提取，也可以是常规的搅拌提取，提取的次数通常为1～3次，每次1～5h；离心时的参数通常为3000～20000r/min，离心时间为10～30min；离心所得上清液的pH值通常用无机酸(如磷酸、盐酸、硫酸等)调节，优选是将上清液的pH值调至3.5～5.5，这样更有利于沉淀的析出。该步骤中，通常是将核桃饼粕粉碎至20～80目的核桃饼粉。

上述方法步骤2)中的酶解条件中，酶解优选是在40～60℃进行，在酶解时，底物浓度优选为10～20％(质量)，酶质量分数优选为0.01～5％，酶解时的pH值优选为8.0～11.0，在上述限定条件下，酶解的时间优选为8～20h。该步骤中酶解完成后的灭酶操作与现有技术相同，通常是将酶解完成所得的酶解液煮沸5～30min灭酶。

上述方法中所述的植物蛋白水解专用酶的酶活为20～200万U/g，所述的植物蛋白水解专用酶可以是南宁东恒华道生物科技有限责任公司生产的植物蛋白水解专用酶、南宁庞博生物工程有限公司生产的植物蛋白水解复合酶或广州市暨生元生物科技有限公司生产的植物蛋白水解酶等，优选采用南宁东恒华道生物科技有限责任公司生产的植物蛋白水解专用酶。本发明还包括上述核桃多肽在制备降血脂药物或保健品中的应用。

本发明进一步包括上述核桃多肽为有效成分制备得到的降血脂药物或保健品。

与现有技术相比，本发明的特点在于：

1、以核桃仁脱脂后的废弃物即核桃饼粕为原料进行提取，实现高附加值的利用，且有效的节约了资源，同时降低了生产成本；

2、方法简单易操作，适合工业化生产；

3、发现了由上述方法制得的核桃多肽在具有抗氧化能力的同时还具有很好的降血脂作用，体现了其在制备天然、无毒的抗氧化药物或保健品中具有良好的应用前景。

为了更好的理解本发明，下面通过实验进一步验证由本发明所述方法制得的核桃多肽的抗氧化能力和降血脂作用。

一、核桃多肽对衰老小鼠血脂的影响

1.实验材料与方法

1.1药品和试剂

核桃饼粕，购自青岛十相自在食品有限公司；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)测定试剂盒，南京建成生物工程研究所；总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)测定试剂盒，四川迈克；D-半乳糖，bioshapr公司；植物蛋白水解专用酶(酶活为30～40万U/g，以下简称专用酶)、植物蛋白水解酶(酶活为30～40万U/g，，以下简称：水解酶)、木瓜蛋白酶(酶活为﹥20万U/g)、碱性蛋白酶(酶活为200万U/g)，均为国产食品级酶制剂，其中专用酶和水解酶均购自南宁东恒华道生物科技有限责任公司，木瓜蛋白酶购自南宁庞博生物工程有限公司，碱性蛋白酶购自江苏锐阳生物科技有限责任公司；其余试剂均为国产分析纯。

1.2仪器

十两装高速中药粉碎机LG-500A(浙江瑞安市百信药机器械厂)；电子天平XS225A-SCS(Precisa)；HH-S型水浴锅(郑州长城科工贸有限公司)；KQ 3200DE型数控超声波清洗器(昆山市仪器有限公司)；pH计(深圳市柯迪达电子有限公司CT-6023)；TGL-16R型高速冷冻离心机(珠海黑马公司)；RT-9100型半自动生化分析仪(深圳雷杜生命科学股份有限公司)。

1.3实验动物

BALB/C小鼠，SPF级，体重18-22g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供。生产许可证号：SCXK(湘)2009-0004。

1.4核桃多肽的制备

核桃饼粕经粉碎过40目筛，得核桃粉，核桃粉加入相当于其重量20倍的去离子水，搅匀，用氢氧化钠水溶液调其pH＝9.0，30～35℃条件下提取4h，提取液离心(3000～5000r/min，20min)，收集上清液，用盐酸调其pH值至4.5，有沉淀析出，收集沉淀，水洗至中性，干燥，即得到核桃蛋白粉。

所得核桃蛋白分别经专用酶、水解酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶进行酶解，并分别进行灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥步骤，分别得到专用酶核桃多肽(以下简称：专用酶组)、水解酶核桃多肽(以下简称：水解酶组)、碱性核桃多肽(以下简称：碱性组)、木瓜核桃多肽(以下简称：木瓜组)；其中：

专用酶在酶解时的条件具体为：底物浓度为11％(质量)，酶质量分数为0.5％，酶解温度为55℃，酶解时的pH值为10.0，酶解时间为12h；

水解酶在酶解时的条件具体为：底物浓度为12％(质量)，酶质量分数为0.5％，酶解温度为55℃，酶解时的pH值为9.0，酶解时间为10h；

碱性蛋白酶在酶解时的条件具体为：底物浓度为4％(质量)，酶质量分数为5％，酶解温度为55℃，酶解时的pH值为9.0，酶解时间为5h；

木瓜蛋白酶在酶解时的条件具体为：底物浓度为4％(质量)，酶质量分数为5％，酶解温度为50℃，酶解时的pH值为7，酶解时间为4h。

上述水解酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶进行酶解时的条件均为所购酶的说明书中的最佳酶解条件。

1.5老年痴呆模型小鼠的建立

取BALB/C小鼠70只，随机分成7组：对照组、模型组、阳性组、专用酶组、水解酶组、碱性组、木瓜组。除对照组注射生理盐水外，其余各组小鼠每日按1500mg/kg腹腔注射D-半乳糖，连续注射6周。各给药组小鼠按生药量30g/kg灌胃给药，阳性组灌胃维生素E200mg/kg，对照组和模型组小鼠灌胃等量的蒸馏水，每天一次，连续6周。

1.6大脑血脂及大脑抗氧化能力的测定

第42天，小鼠禁食不禁水，称重，眼球取血，4℃保存备用。处死小鼠后，取大脑，用冰冷的0.9％的生理盐水研磨制成匀浆液，离心，取上清液，-20℃保存备用。血脂指标及大脑抗氧化能力指标的测定按试剂盒说明进行操作。

1.7统计学方法

采用SPSS13.0统计软件进行数据分析，实验数据均以表示，两个独立样本均数比较采用t检验，多个样本之间的两两比较采用单因素方差分析，P＜0.05为具有统计学意义。

2.结果

2.1核桃多肽对小鼠体重的影响

各核桃多肽对小鼠体重的影响结果如下述表1所示：

表1核桃多肽对小鼠体重的影响(n＝10)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01；与模型组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01。

由表1可见，连续给药第1、42天后，与正常组比较，模型组小鼠体重没有显著性影响(p﹥0.05)；与模型组比较，各给药组对小鼠体重没有显著性差异(p﹥0.05)。说明核桃多肽对小鼠体重没有影响。

2.2核桃多肽对小鼠大脑血脂的影响

各核桃多肽对小鼠大脑血脂的影响结果如下述表2所示：

表2核桃多肽对小鼠血脂的影响(n＝10)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01；

与模型组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01。

由表2可见，连续给药42天后，与正常组比较，模型组总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)升高，但没有统计学意义(p﹥0.05)；与模型组比较，专用酶组可降低TC(p﹤0.05)和TG(p﹤0.01)，有统计学意义；与模型组比较，水解酶组和木瓜组均升高TC和TG，没有显著差异(p﹥0.05)，而碱性组则升高TC和降低TG，没有显著差异(p﹥0.05)。说明专用酶组具有降血脂作用。

2.3核桃多肽对小鼠大脑抗氧化能力的影响

各核桃多肽对小鼠大脑抗氧化能力的影响结果如下述表3所示：

表3核桃多肽对小鼠大脑抗氧化能力的影响(n＝10)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01；与模型组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01

由表3可见，连续给药42天后，与正常对照组比较，模型组小鼠大脑T-AOC、SOD、MDA下降，没有统计学意义(p﹥0.05)；与模型组比较，各给药组均能升高小鼠大脑T-AOC活性，有统计学意义；与模型组比较，各给药组均能升高小鼠大脑SOD活性和降低小鼠大脑MDA含量，其中专用酶组有统计学意义。说明各给药组均能提高小鼠大脑抗氧化能力，其中专用酶组效果更为显著。

二、核桃多肽对高血脂小鼠血脂的影响

1.实验材料与方法

1.1药品和试剂

核桃(市售)；植物蛋白水解专用酶(酶活为30～40万U/g，以下简称专用酶)，购自南宁东恒华道生物科技有限责任公司；总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定试剂盒，四川迈克；其余试剂均为国产分析纯。

1.2仪器

十两装高速中药粉碎机LG-500A(浙江瑞安市百信药机器械厂)；电子天平XS225A-SCS(Precisa)；HH-S型水浴锅(郑州长城科工贸有限公司)；KQ 3200DE型数控超声波清洗器(昆山市仪器有限公司)；pH计(深圳市柯迪达电子有限公司CT-6023)；TGL-16R型高速冷冻离心机(珠海黑马公司)；RT-9100型半自动生化分析仪(深圳雷杜生命科学股份有限公司)。

1.3实验动物

昆明小鼠，SPF级，体重18-22g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供。生产许可证号：SCXK(湘)2009-0004。

1.4核桃多肽的制备方法

核桃仁壳分离，核桃仁脱外皮处理干燥后采用常规冷榨工艺榨油得核桃饼粕。

核桃饼粕经粉碎过60目筛，得核桃粉，核桃粉加入相当于其重量20倍的去离子水，搅匀，用氢氧化钠水溶液调其pH＝10.0，30～35℃条件下提取4h，提取液离心(3000～5000r/min，20min)，收集上清液，用盐酸调其pH值至4.5，有沉淀析出，收集沉淀，水洗至中性，干燥，即得到核桃蛋白粉。所得核桃蛋白经专用酶酶解，控制酶解条件为：底物浓度为11％(质量)，酶质量分数为0.5％，酶解温度为55℃，酶解时的pH值为10.0，酶解时间为12h；酶解完成后进行灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥步骤，得到核桃多肽。

1.5高脂饲料的配方

普通基础饲料：73.8％；蛋黄粉：10％；猪油：10％；胆固醇：1％：猪胆盐：0.2％；蔗糖：5％。

1.6高血脂小鼠模型的建立

取昆明小鼠60只，随机分成5组：对照组、模型组、专用酶低剂量组、专用酶中剂量组、专用酶高剂量组，适应性喂养3天后，取血测定TC、TG水平。除对照组给予正常饲料外，其余各组小鼠均给予高脂饲料，3周后采血检测TC、TG，检测模型是否成功。

高脂模型建成后，核桃多肽低、中、高剂量组小鼠按生药量15g/kg、30g/kg、60g/kg灌胃给药，对照组和模型组小鼠灌胃等量的蒸馏水，每天一次，连续3周。

1.7血脂的测定

小鼠禁食不禁水，称重，眼球取血，4℃保存备用。TC、TG、HDL-C、LDL-C指标的测定按试剂盒说明进行操作。

1.8统计学方法

采用SPSS 13.0统计软件进行数据分析，实验数据均以表示，两个独立样本均数比较采用t检验，多个样本之间的两两比较采用单因素方差分析，P＜0.05为具有统计学意义。

2.结果

2.1造模前各组小鼠血脂水平

造模前各组小鼠血脂水平如上述表4所示：

表4造模前各组小鼠血脂水平(n＝12)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01；与模型组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01

由表4可见，造模前各组小鼠TC、TG没有显著性差异(p﹥0.05)。

2.2造模后各组小鼠血脂水平

造模后各组小鼠血脂水平如下述表5所示：

表5造模后各组小鼠血脂水平(n＝12)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01；与模型组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01

由表5可见，造模后，与正常对照组比较，各组小鼠TC、TG值均升高，差异极显著，有统计学意义(p<0.01)，说明高血脂模型小鼠造模成功。

2.3给药后各组小鼠血脂水平

给药后各组小鼠血脂水平如下述表6所示：

表6核桃多肽对小鼠血脂的影响(n＝10)

注：与正常对照组比较，*p<0.05，**p<0.01；与模型组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01

由表6可见，连续给药3周后，与模型组比较，专用酶各剂量组均可显著降低TC、TG浓度，有统计学意义；与模型组比较，专用酶各剂量组还能够升高HDL-C，降低LDL-C，其中中、高剂量组升高HDL-C有统计学意义。说明专用酶组具有降血脂作用。

上述动物实验经重复实验证明效果可靠。由试验可知，本研究中衰老小鼠及高血脂小鼠的血脂水平都会比正常小鼠高，经过专用酶组成分处理后，其总胆固醇和甘油三酯水平下降，说明该由专用酶处理后所得的核桃多肽可用于高血脂症的治疗。

具体实施方式

下面以具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。

实施例1

1)核桃饼粕经粉碎过40目筛，得核桃粉，核桃粉加入相当于其重量20倍的去离子水，搅匀，用氢氧化钠水溶液调其pH＝9.0，30～35℃条件下提取4h，提取液离心(3000～5000r/min，20min)，收集上清液，用盐酸调其pH值至4.5，有沉淀析出，收集沉淀，水洗至中性，干燥，即得到核桃蛋白粉；

2)所得核桃蛋白粉用植物蛋白水解专用酶酶解，控制酶解条件为：底物浓度为20％(质量)，酶质量分数为0.1％，酶解温度为40℃，酶解时的pH值为9.0，酶解时间为15h；酶解完成后将酶解液煮沸20min灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥步骤，得到核桃多肽。

实施例2

1)核桃饼粕经粉碎过20目筛，得核桃粉，核桃粉加入相当于其重量30倍的去离子水，搅匀，用氢氧化钠水溶液调其pH＝10.0，45℃条件下提取2h，提取液离心(5000～10000r/min，15min)，收集上清液，用磷酸调其pH值至3.0，有沉淀析出，收集沉淀，水洗至中性，干燥，即得到核桃蛋白粉；

2)所得核桃蛋白粉用植物蛋白水解专用酶酶解，控制酶解条件为：底物浓度为10％(质量)，酶质量分数为0.5％，酶解温度为55℃，酶解时的pH值为10.0，酶解时间为10h；酶解完成后将酶解液煮沸10min灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥步骤，得到核桃多肽。

实施例3

1)核桃饼粕经粉碎过60目筛，得核桃粉，核桃粉加入相当于其重量8倍的去离子水，搅匀，用氢氧化钠水溶液调其pH＝12.0，50℃条件下提取1h，提取液离心(5000～8000r/min，30min)，收集上清液，用磷酸调其pH值至5.0，有沉淀析出，收集沉淀，水洗至中性，干燥，即得到核桃蛋白粉；

2)所得核桃蛋白粉用植物蛋白水解专用酶酶解，控制酶解条件为：底物浓度为5％(质量)，酶质量分数为0.005％，酶解温度为60℃，酶解时的pH值为8.0，酶解时间为20h；酶解完成后将酶解液煮沸30min灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥步骤，得到核桃多肽。

实施例4

1)核桃饼粕经粉碎过80目筛，得核桃粉，核桃粉加入相当于其重量50倍的去离子水，搅匀，用氢氧化钠水溶液调其pH＝7.5，20℃条件下提取4h，提取液离心(10000～20000r/min，20min)，收集上清液，用磷酸调其pH值至6.0，有沉淀析出，收集沉淀，水洗至中性，干燥，即得到核桃蛋白粉；

2)所得核桃蛋白粉用植物蛋白水解专用酶酶解，控制酶解条件为：底物浓度为30％(质量)，酶质量分数为10％，酶解温度为70℃，酶解时的pH值为12.0，酶解时间为5h；酶解完成后将酶解液煮沸5min灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥步骤，得到核桃多肽。

实施例5

1)核桃饼粕经粉碎过100目筛，得核桃粉，核桃粉加入相当于其重量40倍的去离子水，搅匀，用氢氧化钠水溶液调其pH＝9.0，30℃条件下提取5h，提取液离心(8000～10000r/min，20min)，收集上清液，用磷酸调其pH值至4.0，有沉淀析出，收集沉淀，水洗至中性，干燥，即得到核桃蛋白粉；

2)所得核桃蛋白粉用植物蛋白水解专用酶酶解，控制酶解条件为：底物浓度为15％(质量)，酶质量分数为5％，酶解温度为25℃，酶解时的pH值为7.5，酶解时间为30h；酶解完成后将酶解液煮沸20min灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥步骤，得到核桃多肽。

Claims (5)

1.一种通过如下方法制备的核桃多肽在制备降血脂药物或保健品中的应用，该方法包括以下步骤：

1)取核桃饼粕粉碎得到核桃饼粉，取核桃饼粉加水后在pH＝7.5～12.0的碱性条件下提取，提取液离心，收集上清液调其pH值至3.0～6.0，有沉淀析出，收集沉淀，水洗至中性，干燥，得到核桃蛋白粉；

2)将核桃蛋白粉用植物蛋白水解专用酶酶解，灭酶，过滤，滤液浓缩、干燥，得到核桃多肽粉；其中：

所述植物蛋白水解专用酶的酶解条件为：底物浓度为3～30％(质量)，酶质量分数为0.005～10％，酶解温度为25～70℃，酶解时的pH值为7.5～12.0，酶解时间为2～30h。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：步骤1)所述核桃饼粉加水后在pH＝8.0～10.0的碱性条件下提取。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：步骤1)收集的上清液调其pH值至3.5～5.5。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：步骤2)中的酶解条件中，酶质量分数为0.01～5％。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：步骤2)中的酶解条件中，酶解时的pH值为8.0～11.0。