CN105560310B - 华山矾多糖的药物应用及其组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了华山矾多糖在制备预防、治疗降血脂和降血压药物中的应用。以华山矾多糖作为活性成分之一或唯一活性成分用于制备预防、治疗降血脂和降血压的药物制剂。本发明的华山矾多糖能有效降低高脂血症小鼠血清中总胆固醇TC、甘油三酯TG、LDL‑C含量，这对调节脂类代谢，预防AS将具有积极作用。HDL‑C的作用是将血中胆固醇运到肝脏，使其转变为胆汁酸或直接通过胆汁排出体外，本发明的华山矾多糖组小鼠血中HDL‑C明显增高，说明华山矾多糖可促进HDL‑C将血中胆固醇运到肝脏，促进转化和排泄，从而使血中胆固醇降低，减少冠心病和动脉粥样硬化的危险。

Description

华山矾多糖的药物应用及其组合物
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种华山矾多糖的药物应用及其组合物。
背景技术
华山矾Symplocoschinensis(Lour.)Druce为山矾科(Symplocaceae)山矾属SymplocosJacq.植物，又称土常山、狗屎木、华灰木，主要分布于我国江南各省区，果实、枝叶和根均可供药用，主要功用为清热利湿、化痰截疟、解毒。而且该植物为有毒中草药，服用过量会出现恶心、呕吐、头晕和胸闷等症状。
目前，国内外对华山矾的化学成分研究较少，相关研究主要集中在三萜类化学成分及其抗肿瘤活性的研究。迄今为止，并未有人对华山矾多糖进行研究，也没有对相关药用价值进行研究，更没有报道华山矾多糖具有降血脂及抗氧化活性的效果。
由此可见，亟需对华山矾多糖进行进一步的研究，发现其更多的药用价值，发挥其在医药领域的应用。
发明内容
本发明的目的是提供华山矾多糖在制备预防、治疗降血脂和降血压药物中的应用以及其的应用组合物。其充分利用华山矾提取物华山矾多糖，开发了华山矾多糖在降血脂及抗氧化活性药用用途，降血脂效果显著，且不良反应低的有点。
为解决上述技术问题，本发明华山矾多糖在制备预防、治疗降血脂和降血压药物中的应用。
上述所述的应用，以华山矾多糖作为活性成分之一或唯一活性成分用于制备预防、治疗降血脂和降血压的药物制剂。
上述所述的应用，所述华山矾多糖制备方法如下：
步骤一：取一定量的华山矾干品粉碎过筛，获得华山矾粉末；
步骤二：将所述华山矾粉末通过75℃-90℃热水浸提，将浸提液经过离心、过滤得到滤液；
步骤三：将所述滤液浓缩至原体积的1/7-1/5，得到浓缩液，并调节该浓缩液的含醇量为80％，得到沉淀物；
步骤四：将所述沉淀物干燥得到华山矾粗多糖A；
步骤五：将所述华山矾粗多糖复溶后，脱除蛋白得到华山矾粗多糖B；
步骤六：将所述华山矾粗多糖B经洗涤、干燥后得到华山矾精制多糖。
上述所述的应用，所述步骤一中，所述华山矾粉末的粒径为100-200微米。
上述所述的应用，所述步骤一中，所述华山矾干品的含水率≤5％。
上述所述的应用，所述步骤二中，所述热水浸提的次数为2-5次，每次1-3h。
上述所述的应用，所述步骤五中，所述华山矾粗多糖加蒸馏水复溶后，经过氯仿和正丁醇混合溶液脱去蛋白；
其中，氯仿和正丁醇的体积比为3:1-10:1。
上述所述的应用，所述步骤六中，所述华山矾粗多糖B先后经过2-5倍的95％乙醇，再经无水乙醇、丙酮及乙醚洗涤，最后经抽滤、干燥后得到华山矾精制多糖。
本发明还提供一种药物组合物，其包括物质的重量配比如下：何首乌3-5份，丹参3-5份，山楂3-5份，绞股蓝3-5份，草决明5-8份，菊花8-15份和枸杞子8-15份和权利要求1或2所述的华山矾多糖3-5份。
上述所述的药物组合物在制备预防、治疗降血脂和降血压药物中的应用。
本发明的有益效果为：
本发明通过实验以高脂肪乳剂建立实验性高脂血症小鼠模型，研究华山矾多糖对血脂的影响。本发明的华山矾多糖能有效降低高脂血症小鼠血清中总胆固醇TC、甘油三酯TG、LDL-C含量，这对调节脂类代谢，预防AS将具有积极作用。HDL-C的作用是将血中胆固醇运到肝脏，使其转变为胆汁酸或直接通过胆汁排出体外，本发明的华山矾多糖组小鼠血中HDL-C明显增高，说明华山矾多糖可促进HDL-C将血中胆固醇运到肝脏，促进转化和排泄，从而使血中胆固醇降低，减少冠心病和动脉粥样硬化的危险。
2、本发明的华山矾多糖能改善高血脂小鼠自由基代谢异常，对预防高血脂并发症发生具有益处。
3、本发明中华山矾多糖的提取方法操作简单、易懂、溶剂配制简易。
附图说明
图1为本发明的华山矾多糖对各组小鼠血脂的影响柱状图；
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明的保护范围不限于实施例。
实施例1：
本发明华山矾多糖药物组合物在制备预防、治疗降血脂和降血压药物中的应用，组合物按照重量份数比计为华山矾多糖3份，何首乌3份，丹参3份，山楂5份，绞股蓝5份，草决明8份，菊花8份和枸杞子8份。将上述组合物按照常规工艺制成片剂或颗粒剂。
本发明的华山矾多糖的制备方法为：
步骤一：取含水率为5％的华山矾干品，粉碎后过筛，取过筛后粒径为100微米的华山矾粉末用75℃热水浸提2次，每次1h，然后先后经过离心、抽滤、合并滤液，再将滤液真空浓缩至原有体积的1/7，调节滤液含醇量为80％后收集沉淀，最后真空干燥即得华山矾粗多糖A；
步骤二：将步骤一得到的华山矾粗多糖A加蒸馏水复溶后经过氯仿：正丁醇体积比为3:1的试剂除蛋白，直到完全脱除蛋白为止，得到华山矾粗多糖溶液B；
步骤三：将步骤二得到的华山矾粗多糖B溶液加入2倍95％乙醇，然后使用无水乙醇、丙酮及乙醚反复洗涤，再经抽滤、干燥后得到华山矾精制多糖。
实施2：
本发明华山矾多糖药物组合物，组合物按照重量份数比计为华山矾多糖5份，何首乌5份，丹参5份，山楂3份，绞股蓝3份，草决明5份，菊花15份和枸杞子8份。将上述组合物按照常规工艺制成胶囊剂或丸剂。
其中，华山矾多糖的制备方法为：
步骤一：取含水率为4％的华山矾干品，粉碎后过筛，取过筛后粒径为200微米的华山矾粉末用90℃热水浸提5次，每次3h，然后先后经过离心、抽滤、合并滤液，再将滤液真空浓缩至原有体积的1/5，调节滤液含醇量为80％后收集沉淀，最后真空干燥即得华山矾粗多糖A；
步骤二：将步骤一得到的华山矾粗多糖A加蒸馏水复溶后经过氯仿：正丁醇体积比为10:1的试剂除蛋白，直到完全脱除蛋白为止，得到华山矾粗多糖溶液B；
步骤三：将步骤二得到的华山矾粗多糖B溶液加入5倍95％乙醇，然后使用无水乙醇、丙酮及乙醚反复洗涤，再经抽滤、干燥后得到华山矾精制多糖。
实施例3
一种华山矾多糖的药物组合物，组合物按照重量份数比计为华山矾多糖4份，何首乌4份，丹参4份，山楂4份，绞股蓝4份，草决明6份，菊花12份和枸杞子13份。将上述组合物按照常规工艺制成注射剂。
其中，华山矾多糖的制备方法为：
步骤一：取含水率为3％的华山矾干品，粉碎后过筛，取过筛后粒径为100-200微米的华山矾粉末用80℃热水浸提3次，每次2h，然后先后经过离心、抽滤、合并滤液，再将滤液真空浓缩至原有体积的1/6，调节滤液含醇量为80％后收集沉淀，最后真空干燥即得华山矾粗多糖A；
步骤二：将步骤一得到的华山矾粗多糖A加蒸馏水复溶后经过氯仿：正丁醇体积比为5:1的试剂除蛋白，直到完全脱除蛋白为止，得到华山矾粗多糖B溶液；
步骤三、将步骤二得到的华山矾粗多糖B溶液加入3倍95％乙醇，然后使用无水乙醇、丙酮及乙醚反复洗涤，再经抽滤、干燥后得到华山矾精制多糖。
实施例4：对华山矾多糖的降血脂活性的评价
1、采用的动物：SPF级昆明小鼠，雌雄各半，体质量18-22g，由广西医科大学实验动物中心提供，生产许可证号:SCXK(桂)2003-0003。
2、华山矾多糖的提取和纯化：取华山矾干品,用粉碎机粉碎并过40目筛，取过筛后的华山矾粉末放90℃热水浸提3次每次2h,然后先后经过离心、抽滤、合并滤液，将滤液真空浓缩至原有体积的1/6，调节含醇量为80％溶液静置过夜，收集沉淀，真空干燥即得华山矾粗多糖；华山矾粗多糖加蒸馏水复溶后经过Sevag试剂(氯仿∶正丁醇＝5∶1)除蛋白，连续操作多次，直到完全脱除蛋白为止；将脱蛋白后的华山矾多糖溶液中加入3倍95％乙醇，用无水乙醇、丙酮及乙醚反复洗涤沉淀，最后经抽滤、干燥后得到华山矾精制多糖。
3、本发明采用的试剂为：辛伐他汀；胆固醇；丙基硫氧嘧啶；吐温-80；总胆固醇(TC)测定试剂盒；甘油三酯(TG)测定试剂盒；低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定试剂盒；高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定试剂盒；丙二醛(MDA)测定试剂盒；超氧化物歧化酶(SOD)测试盒。本发明采用的仪器有紫外可见分光光度计(美国Agilent公司)；电子分析天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)；多歧管冷冻干燥机(北京博医康实验仪器有限公司)；电子恒温水浴锅(北京泰克仪器有限公司)。
4、本发明的高脂肪乳剂的配制：取猪油22.0g置烧杯中，在电炉上加热融化，将12.0g胆固醇充分研磨后加入猪油中溶化，再取丙基硫氧嘧啶1g研细加入，再加入吐温-805mL，充分均匀研磨，最后加热水20mL，均匀研磨即成。冰箱保存，使用时于37℃水浴中融化。
5、本发明的动物分组及给药，取90只(体质量18-22g，雌雄兼用)健康小鼠随机分成6组，每组15只，A组为空白对照组，B组为高血脂模型组，C为阳性对照组(辛伐他汀片20mg/kg)，D、E、F组依次为华山矾多糖高剂量组(300mg/kg)、中剂量组(200mg/kg)、低剂量组(100mg/kg)，每天早上空白对照组和高血脂模型组ig生理盐水0.2mL/10g,，其余给药组ig相应药物,下午空白对照组继续ig生理盐水0.2mL/10g,其余各组ig高脂肪乳剂(0.2mL/10g)，连续给药14d。
6、本发明的指标检测：末次给药后1h，小鼠眼眶后静脉丛取血，静置后，3500r/min离心，取血清，按总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、超氧化物歧化酶、丙二醛测定试剂盒说明分别测定血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、超氧化物歧化酶、丙二醛含量。
7、本发明的结果分析：各组数据用
Figure DEST_PATH_IMAGE001
表示，组间均值比较采用t检验。对高脂血症小鼠血脂的影响见如下表1。
表1华山矾多糖对各组小鼠血脂的影响
Figure DEST_PATH_IMAGE002
注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。
请配合表1和图1所示，模型组与空白组比较，模型组小鼠血清的TC、TG、LDL-C浓度均显著高于空白组(P<0.05或P<0.01)，HDL-C显著降低(P<0.05)，说明高脂血症小鼠模型造模成功。与模型组比较，
华山矾多糖高、中、低剂量组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平显著降低(P<0.05或P<0.01)，本发明的华山矾多糖能有效降低高脂血症小鼠血清中TC、TG、LDL-C含量；华山矾多糖高、中、低剂量组小鼠血清中HDL-C水平显著升高(P<0.05)，华山矾多糖可促进HDL-C将血中胆固醇运到肝脏，促进转化和排泄，从而使血中胆固醇降低，减少冠心病和动脉粥样硬化的危险。
本发明华山矾多糖对高脂血症小鼠抗氧化作用的影响见如下表2：
表2华山矾多糖对各组小鼠SOD活性和MDA含量的影响
Figure DEST_PATH_IMAGE003
注：与模型组比较，*P<0.05,**P<0.01。
请配合参阅表2所示，与空白对照组比较，模型组小鼠SOD活性明显降低(P<0.01)，MDA含量明显增加(P<0.01)，表明模型组小鼠抗氧化能力明显低于正常对照组。与模型组比较，辛伐他汀组、华山矾多糖组小鼠SOD活性显著升高(P<0.01)，MDA含量明显降低(P<0.01)，华山矾多糖能改善高血脂小鼠自由基代谢异常，对预防高血脂并发症发生具有益处。
以上仅为本发明的较佳实施例，当不得以此限定本发明实施的技术范围，因此凡参考本发明的说明书内容所作的简单等效变化与修饰，皆应仍属本发明的保护范围。

Claims (2)

1.华山矾多糖在制备预防、治疗高血脂药物中的应用，其特征在于：
所述华山矾多糖制备方法如下：
步骤一：取一定量的华山矾干品粉碎过筛，获得华山矾粉末；
步骤二：将所述华山矾粉末通过75℃-90℃热水浸提，将浸提液经过离心、过滤得到滤液；
步骤三：将所述滤液浓缩至原体积的1/7-1/5，得到浓缩液，并调节该浓缩液的含醇量为80％，得到沉淀物；
步骤四：将所述沉淀物干燥得到华山矾粗多糖A；
步骤五：将所述华山矾粗多糖复溶后，脱除蛋白得到华山矾粗多糖B；
步骤六：将所述华山矾粗多糖B经洗涤、干燥后得到华山矾精制多糖；
所述步骤一中，所述华山矾粉末的粒径为100-200微米；所述华山矾干品的含水率≤5％；
所述步骤二中，所述热水浸提的次数为2-5次，每次1-3h；
所述步骤五中，所述华山矾粗多糖加蒸馏水复溶后，经过氯仿和正丁醇混合溶液脱去蛋白；其中，氯仿和正丁醇的体积比为3:1-10:1；
所述步骤六中，所述华山矾粗多糖B先后经过2-5倍的95％乙醇，再经无水乙醇、丙酮及乙醚洗涤，最后经抽滤、干燥后得到华山矾精制多糖。
2.根据权利要求1所述的应用，以华山矾多糖作为活性成分之一或唯一活性成分用于制备预防、治疗高血脂的药物制剂。
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