CN102512438B - 太子参多糖在制备预防、治疗糖尿病药物和保健食品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及太子参多糖提取物在预防、治疗糖尿病和保健食品中的应用，太子参粉碎，用乙醇提取后的残渣，再经水提取、乙醇沉淀，减压浓缩，除蛋白，沉淀离心、干燥，研磨成粉末，即得太子参多糖，本发明首次发现了太子参多糖具有预防和治疗糖尿病的有效分子量范围，其疗效显著；本发明提供了一个方法简单，经济有效的太子参多糖分级提取处理方法；本发明的太子参原料来源广泛，适合于工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及制药技术领域，特别涉及太子参多糖提取物在预防、治疗糖尿病和保健食品中的应用。
背景技术
一项“全国糖尿病流行病学调查（2007~2008）”显示，在我国20 岁以上的人群中，男性和女性的糖尿病患病率分别达10.6%和8.8%，总体糖尿病患病率为9.7%，由此，推算出全国糖尿病总患病人数约为9200 万人，已经超过印度，成为世界上糖尿病患者最多的国家。此项调查由中日友好医院内分泌代谢病中心教授杨文英牵头组织，其研究成果2010年3月25日在国际著名医学期刊《新英格兰医学杂志》上发表。
据杨文英介绍，糖尿病前期患病率已高达15.5%，糖尿病前期患病率是指空腹血糖受损或糖耐量受损，或两者同时存在的情况，调查推算出全国糖尿病前期的患病人数约1.48亿人。据与1994年进行的全国调查相比，本次调查显示，中青年人糖尿病患病率增长更快，25 岁~34 岁人群糖尿病患病率增加8倍，55 岁~64 岁人群患病率增加3 倍。目前，美国每名糖尿病患者的年治疗费用达11744美元，是非糖尿病患者的2倍多。在过去的5年中，政府为糖尿病患者支付的费用增加了32%，达1740 亿美元。其中，1160 亿美元用于和糖尿病相关的医疗支出，580 亿美元是由于患者治疗、误工、过早死亡等间接损失。仅在美国夏威夷一个地区，每年为糖尿病患者的支出就达十亿美元。
如果不能及早发现，到糖尿病并发症出现的时候再进行治疗，饮食和运动的效果会非常有限，必须用药。中国2002 年用于糖尿病的支出约占健康支出的4%，共计188.2 亿元。一般糖尿病每人每年平均花费3726 元，一旦出现并发症，平均花费高达13897 元。
因此，寻找有效的糖尿病预防、治疗药物，特别是对亚健康的“伪糖尿病人”给予一定的安全的有效的药物或者保健食品进行干预，就显得非常重要。中药是我国的医药瑰宝，只要确证其有效性，在安全性方面具有化学药品无法比拟的优势。
太子参为石竹科孩儿参属植物孩儿参的干燥块根， 别名孩儿参， 童参， 双批七， 四叶参或米参， 为常用中药。全国各地均有分布，主产于江苏、安徽、山东、福建等省。太子参为常用中药，《中国药典》收载具有益气补脾，生津润肺之功效，临床常用于脾虚体倦、食欲不振、小儿体弱、消化不良、病后虚弱、气阴不足、自汗口渴、肺燥干咳等症。
太子的化学成分研究从70年代开始陆续开展研究，到90年代，对太子参的成分进行了较为系统的研究。其化学成分主要有微量元素、氨基酸、糖类（主要是太子参多糖）、苷类（太子参中苷类成分主要为太子参皂苷A）、磷脂类、环肽类、脂肪酸类、油脂类、挥发油类、甾醇类。具有抗疲劳、抗应激作用、免疫促进作用、抗衰老和延长寿命等作用。
《太子参多糖对四氧嘧啶糖尿病小鼠的治疗作用》选用雄性小鼠，尾静脉注射四氧嘧啶90mgkg- 1建立小鼠糖尿病模型，太子参多糖按0.375、0.75、1.5gkg-1三种剂量给药，可显著降低糖尿病小鼠血糖，增加体重，增加肝糖原含量，增加脾脏和胸腺指数。太子参多糖具有明显的降糖作用，四氧嘧啶是胰岛细胞的化学损伤剂，太子参多糖可能在一定程度上保护模型小鼠胰岛β细胞从而降低血糖。
《太子参多糖对糖尿病大鼠糖、脂代谢的影响》通过观察太子参多糖不同剂量（1.2、0.6、0.3g/Kg）对注射四氧嘧啶200mg/Kg糖尿病模型糖尿病大鼠，认为太子参多糖有降血糖作用外，还能有效降低血脂水平，改善脂质代谢紊乱，提示其对糖尿病心血管病并发症可能具有预防作用。
《三种中药对糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响》用STZ诱导糖尿病小鼠模型，用氢化可的松琥珀酸钠(小时CSS)建立胰岛素抵抗模型，认为太子参水提物（相当于20g/Kg的太子参）对小时CSS诱导小鼠产生胰岛素抵抗均有显著的改善( P < 0. 01);对链脲菌素(STZ)诱导形成的糖尿病模型也表现出明显的降血糖作用(P<0.01) ，对该模型的胰岛素敏感性有显著的改善作用。
上述文献在一定程度上提示太子参对糖尿病的治疗作用，但均使用太子参的粗多糖或者水提取物，多糖的分子量范围较大，总所周知并不是所有多糖都是有效的，并未揭示其有效的分子量范围；文献由于采用了不同的模型和受试物，在对胰岛素抵抗作用的结论上存在一定的冲突，深入研究并未开展。
发明内容
为了克服现有技术中存在的上述不足之处，本发明的目的在于提供了一种从太子参中药中提取的具有一定分子量范围的预防、治疗糖尿病药物和保健食品。
为了达到上述之目的，本发明采用如下具体技术方案：一种具有预防、治疗糖尿病和保健食品应用的太子参多糖提取物，是由太子参中提取到的太子参多糖为主要成份，应用于预防和治疗糖尿病药物和保健食品作用。
所述提取、分离方法具体步骤在于：
（1）将太子参粉碎，按一定的料液比1/3—1/8，加入90%乙醇溶液，室温下浸泡0.5—2小时，加热到80℃提取1—4次，0.5—2小时/次，过滤，收集残渣。
（2）残渣挥干乙醇，按一定的料液比1/3—1/8，加入水，浸泡0.5—2小时，加热到100℃提取2—4次，0.5—2小时/次，过滤，合并滤液，减压浓缩，除蛋白，收集上清液。
（3）上清液浓缩，浓缩液用乙醇沉淀，乙醇终浓度为20%—50%，静置，沉淀离心、干燥，研磨成粉末，即得太子参多糖。
所述上清液的后处理也可以采用上清液用终浓度90%乙醇沉淀，静置，离心，分离沉淀获得粗多糖，得到粗多糖后用适量的水溶解，用乙醇沉淀，乙醇终浓度为20%—50%，静置，沉淀离心、干燥，研磨成粉末，即得太子参多糖。
所述的药物和保健食品为加入药学可接受的辅料制备而成的供口服使用的各种制剂。
所述的糖尿病为临床医学分类为II型糖尿病。
所述的太子参多糖主要成分为分子量5～21万的太子参多糖。
与现有的技术相比，本发明具有以下突出优点和效果：
1. 本发明首次发现了太子参多糖具有预防和治疗糖尿病的有效分子量范围，其疗效显著；
2. 本发明提供了一个方法简单，经济有效的太子参多糖分级提取处理方法；
3. 本发明的太子参原料来源广泛，适合于工业化生产。
具体实施方式
实施例1
将太子参粉碎，按一定的1/5料液比加入90%乙醇溶液，室温下浸泡2小时，加热（80℃）提取2次，2小时/次，过滤，收集残渣。残渣挥干乙醇，按一定的1/5料液比加入水，浸泡0.5-2小时，加热（100℃）提取3次，2小时/次，过滤，合并滤液，减压浓缩，除蛋白，收集上清液。上清液浓缩，浓缩液依次用不同浓度的乙醇沉淀，乙醇终浓度为40%、60%、80%、90%，静置，沉淀离心、干燥，研磨成粉末，即得不同分子量级别的太子参多糖（分别编号为1#、2#、3#、4#）。
取太子参多糖3.0mg，溶解于1mL的0.5mol/L NaCl溶液中，用0.5mol/L NaCl溶液以0.3mL/min洗脱，分部收集流出液（1mL/管），苯酚硫酸法检测糖峰，测得洗脱体积Ve，代入标曲求得分子量，1#太子参多糖其分子量为5～21万，2#太子参多糖其分子量为1～4.8万,3#太子参多糖分子量0.7～1万，4#太子参多糖分子量0.3万。
实施例2
将太子参粉碎，按一定的1/5料液比加入90%乙醇溶液，室温下浸泡2小时，加热（80℃）提取2次，2小时/次，过滤，收集残渣。残渣挥干乙醇，按一定的1/5料液比加入水，浸泡0.5-2小时，加热（100℃）提取3次，2小时/次，过滤，合并滤液，减压浓缩，除蛋白，收集上清液。上清液用终浓度90%乙醇沉淀，静置，离心，分离沉淀获得粗多糖。粗多糖用适量的水溶解，用乙醇沉淀，乙醇终浓度为40%、60%、80%、90%，静置，沉淀离心、干燥，研磨成粉末，即得不同分子量级别的太子参多糖（分别编号为1#、2#、3#、4#）。
按照实施例1的方法测得1#太子参多糖其分子量为5.26～21.2万，2#太子参多糖其分子量为1.22～5.16万,3#太子参多糖分子量0.75～0.98万，4#太子参多糖分子量0.43万。
实施例3
采用喂养高糖高脂饲料加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)的方法实验性糖尿病动物模型。选择血糖值大于11.1mmol/L大鼠作为实验性糖尿病动物模型，将其随机分为模型对照组、太子参多糖高、中、低剂量组。大鼠连续灌胃30天后，各组均禁食不禁水12小时，测定空腹血糖值。太子参多糖灌胃给药30 d，1#太子参多糖的各剂量组的降糖效果均显著，与模型组相比具有显著性差异（P＜0.01）；2#—4#太子参多糖具有一定的降糖效果，但与模型组对比无统计学意义，数据见下表。
实施例4
胰岛素耐量实验:选择降糖效果较好的1#进行糖耐量实验。大鼠禁食3小时取血样(0时)，腹腔注射胰岛素溶液1.0u/kg，于注射后0.5、1.0、2h眼眶丛取血，测定血糖值，见表7、图5。观察模型对照组与受试组给胰岛素后各时间点血糖的变化，大鼠注射胰岛素后15-30min，其血糖浓度比空腹时有所下降，但未到50%；在60-90min内各组均恢复到空腹血糖水平。
从表2可见，模型组血清胰岛素显著增高，1#太子参多糖高剂量组可降低血清胰岛素，与模型对照组相比有显著性差异（P<0.01），作用与二甲双胍阳性对照相当；1#太子参多糖中、低剂量组不能显著降低血清胰岛素，没有改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗作用。
实施例5
血脂五项指标:取1#太子参多糖试验组大鼠血液，进行血脂五项指标包括空腹血糖（GLU）、总胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）测定。表3列出GLU、CHOL、TG、HDL-C、LDL-C血脂五项的测定结果。1#太子参多糖对2型糖尿病大鼠CHOL、TG、LDL-C水平改变不大，但能使HDL增加。
Claims (3)
1.一种具有制备预防、治疗糖尿病药物和保健食品应用的太子参多糖提取物，其特征在于：太子参中提取到的太子参多糖主要成分为分子量5～21万的太子参多糖，具有制备预防和治疗糖尿病药物和保健食品作用；
其提取、分离方法的具体步骤如下：
1）将太子参粉碎，按一定的料液比1/3—1/8，加入90%乙醇溶液，室温下浸泡0.5—2小时，加热到80℃提取1—4次，0.5—2小时/次，过滤，收集残渣；
2）残渣挥干乙醇，按一定的料液比1/3—1/8，加入水，浸泡0.5—2小时，加热到100℃提取2—4次，0.5—2小时/次，过滤，合并滤液，减压浓缩，除蛋白，收集上清液；
3）上清液浓缩，浓缩液用乙醇沉淀，乙醇终浓度为20%—50%，静置，沉淀离心、干燥，研磨成粉末，即得太子参多糖提取物产品。
2.一种具有制备预防、治疗糖尿病药物和保健食品应用的太子参多糖提取物，其特征在于：太子参中提取到的太子参多糖主要成分为分子量5～21万的太子参多糖，具有制备预防和治疗糖尿病药物和保健食品作用；
其提取、分离方法的具体步骤如下：
1）将太子参粉碎，按一定的料液比1/3—1/8，加入90%乙醇溶液，室温下浸泡0.5—2小时，加热到80℃提取1—4次，0.5—2小时/次，过滤，收集残渣；
2）残渣挥干乙醇，按一定的料液比1/3—1/8，加入水，浸泡0.5—2小时，加热到100℃提取2—4次，0.5—2小时/次，过滤，合并滤液，减压浓缩，除蛋白，收集上清液；
3）上清液用终浓度90%乙醇沉淀，静置，离心，分离沉淀获得粗多糖，得到粗多糖后用适量的水溶解，用乙醇沉淀，乙醇终浓度为20%—50%，静置，沉淀离心、干燥，研磨成粉末，即得太子参多糖提取物产品。
3.一种如权利要求1所述的太子参多糖提取物的应用，其特征在于：把太子参多糖提取物应用于制备预防、治疗糖尿病药物和保健食品，所述药物和保健食品为加入药学可接受的辅料制备而成的供口服使用的各种制剂。
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