CN103070880A - 白簕多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了白簕多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用，本发明通过实验证明，白簕多糖可明显增加糖尿病小鼠的体重，其对体重的恢复能力与二甲双胍接近，还证明白簕多糖具有较好的降血糖作用，白簕多糖不影响正常小鼠的血糖，且对糖尿病小鼠的血糖恢复效果明显，高剂量组与对照药物二甲双胍的治疗效果最为接近。而白簕是一种纯天然的植物，传统中药的耐药性通常较低，在糖尿病治疗过程中增添重要的使用，可降低西药带来的副作用；且白簕中多糖含量最高的是其茎部，具有价格低廉的优点，因此白簕降糖作用的开发具有极高的经济价值。
Description
技术领域
本发明涉及白簕多糖的一种新用途，具体涉及白簕多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。
背景技术
目前，糖尿病已成为继肿瘤、心血管病变之后第三大严重威胁人类健康的慢性疾病，糖尿病在发达国家以及发展中国家均是一个日益严重的问题，它造成了严重而代价巨大的后果，包括失明、心脏病、肾病以及糖尿病引起的并发症。目前，在我国40岁以上人群中糖尿病患病率为5.89%，且呈明显的上升趋势，根据国际糖尿病联盟的估计，在未来20年内中国的糖尿病患者数目将突破5000万。现在的糖尿病有扩大化和年轻化的倾向，如何防治糖尿病已成为目前医药界重点关注的一大课题。
目前市面上推广使用的治疗糖尿病药物，其作用机制主要：1）刺激胰岛β-细胞分泌胰岛素；2）降低肠道对葡萄糖吸收；3）抑制肝糖产生；4）增强周缘组织对胰岛素敏感性。且现有的糖尿病治疗药物仍以西药为主，而西药比较常见的缺点是具有耐药性和副作用，同时现有市面可见的糖尿病治疗西药，副作用小的通常价格较高。
白簕(Acanthopanan trifoliatus ( L . ) Merr . )又称鹅掌簕、三加皮、刺三加等为五加科(Araliaceae)五加属(Acant hopanan )攀援状灌木。白簕化学成分丰富，含有黄酮、皂苷、强心苷、多糖、香豆素等药用成分。白簕中多糖含量高，尤其是茎部的多糖含量，目前尚没有白簕多糖具有降低血糖的活性的报道。
发明内容
本发明的目的在于为现有制备治疗糖尿病药物技术领域提供一种新途径，提供白簕多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。
本发明采用的技术方案是：
白簕多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。
优选的，白簕多糖的提取工艺：将干燥的白簕药材粉碎，然后水提，得到的水提液依次进行浓缩、除蛋白、醇沉、过滤、干燥，得白簕多糖。
优选的，水提方法：向粉碎后的白簕中加3～5倍重量的水，70～90℃水浴浸提，过滤，得水提液。
优选的，除蛋白方法：向浓缩后的水提液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量为15～25万IU/g干燥的白簕药材，40～60℃水浴，然后加热除酶。
优选的，白簕多糖的提取工艺：将干燥的白簕药材粉碎，加入3～5倍重量的水，70～90℃水浴浸提5～7 h，过滤，得到的水提液浓缩，加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量为15～25 万IU/g干燥的白簕药材，40～60℃水浴3～5 h，然后加热除酶，冷却后，加入75～95%乙醇进行醇沉，过滤，干燥，得白簕多糖。
优选的，白簕多糖的提取工艺：将干燥的白簕药材粉碎，加入40倍重量的水，80℃水浴浸提6 h，过滤，得到的水提液浓缩，加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量为20万IU/g干燥的白簕药材，50℃水浴4 h，然后加热除酶，冷却后，加入95%乙醇进行醇沉，过滤，干燥，得白簕多糖。
优选的，白簕药材为五加科五加属植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.的根、根皮、茎、叶中的至少一种。
优选的，白簕药材为五加科五加属植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.的茎。由于白簕（五加科五加属植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.）茎部的多糖含量最高，优选从白簕茎部提取多糖。
优选的，白簕茎多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用，所述白簕茎多糖是从五加科五加属植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.的茎中提取的多糖。
优选的，白簕多糖与药学上可接受的辅料相结合，制备成任何一种药学上可接受的剂型。
本发明通过动物实验说明白簕多糖可明显增加糖尿病小鼠的体重，白簕多糖高低两个剂量组的体重与二甲双胍组相比，体重的增长率较为接近，说明白簕多糖对体重的恢复能力与二甲双胍接近。
本发明通过动物实验说明白簕多糖不影响正常小鼠的血糖。白簕多糖低、高剂量组对小鼠的血糖恢复效果明显，高剂量组的血糖恢复效果最好，与对照药物二甲双胍的治疗效果最为接近，其血糖值和正常组相比无显著性差异，说明白簕多糖具有较好的降血糖作用。
本发明的有益效果是：
本发明通过实验证明，白簕多糖可明显增加糖尿病小鼠的体重，其对体重的恢复能力与二甲双胍接近，还证明白簕多糖具有较好的降血糖作用，白簕多糖不影响正常小鼠的血糖，且对糖尿病小鼠的血糖恢复效果明显，高剂量组与对照药物二甲双胍的治疗效果最为接近。而白簕是一种纯天然的植物，传统中药的耐药性通常较低，在糖尿病治疗过程中增添重要的使用，可降低西药带来的副作用；且白簕中多糖含量最高的是其茎部，具有价格低廉的优点，因此白簕降糖作用的开发具有极高的经济价值。
具体实施方式
下面结合具体的实验对本发明作进一步的说明，但并不局限于此。
白簕多糖的提取
称取干燥的粉状的白簕药材（五加科五加属植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.的茎）430g，加入4倍重量的蒸馏水，80℃恒温水浴锅中浸提6h，过滤残渣，再抽滤滤液以去除沉淀，在80℃下浓缩至原来溶液体积的1/4，向浓缩后的水提液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量为20万IU/g干燥的粉状的白簕药材，50℃水浴4h，加热除酶（100℃置于30s），冷却后，加4倍体积的95%乙醇进行醇沉，置于4℃过夜，3500r/min离心10min，取沉淀，然后抽滤、烘干，得到白簕多糖，4℃密封干燥保存。按蒽酮-硫酸法测定所得白簕多糖中多糖含量为46.6%，按原料白簕药材重量计，白簕多糖中多糖含量为9.203mg/g。
糖尿病小鼠模型的制作
取80只20～22g健康昆明种雄性小鼠适应性喂养三天，禁食（不禁水）8小时，一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）150mg/kg，对照组注射等体积生理盐水，72h后，禁食12h，剪尾取血采用血糖仪测定空腹血糖值，以血糖值大于11.1mmol/L的小鼠为糖尿病小鼠，选取STZ造模成功的小鼠进行降血糖实验。
实验分组及处理
将昆明种雄性小鼠分为6组：正常对照组、高血糖模型组、二甲双胍治疗组、白簕多糖低剂量、高剂量治疗组、白簕多糖高剂量对照组，每组9只小鼠。其中，二甲双胍治疗组灌胃125 mg·kg-1·d-1二甲双胍，白簕多糖高、低剂量治疗组分别灌胃200 mg·kg-1·d-1、100 mg·kg-1·d-1白簕多糖，白簕多糖高剂量对照组灌胃200 mg·kg-1·d-1白簕多糖，正常对照组和高血糖模型组灌胃等体积生理盐水，正常对照组和白簕多糖高剂量对照组的小鼠均为正常小鼠，非糖尿病小鼠，其余各组小鼠均为STZ造模成功的小鼠，即糖尿病小鼠。各组小鼠自由饮水进食，连续给药14天。最后一次给药后禁食12h，剪尾取血，通过血糖仪测定空腹血糖。测定后，心脏取血，并解剖摘取肝、脾、肾及胸腺四个脏器，称重。血清分离，用试剂盒测定小鼠的生化指标。
数据处理
各组实验结果以表示，采用SPSS(17.0)软件进行t检验，比较组间差异，P<0.05为显著性差异，P<0.01为极显著性差异。
白簕多糖对小鼠体重的影响：
通过14天的持续观察，实验发现正常小鼠的体重均快速增加至约30g后处于稳定状态，且活动敏捷，毛色更有光泽。STZ造模72h后，糖尿病小鼠均出现“三多一少”的典型症状，即饮水增多、进食增多、排尿增多、体重减轻。随着白簕多糖及二甲双胍的治疗进行，“三多一少”的症状逐渐缓解，体重逐步缓慢增加，而高血糖模型组小鼠体型消瘦，体重明显较低。各组连续给药14天后，各组小鼠的体重结果见表1和表2。
注：与正常对照组相比：**：P＜0.01，*：P＜0.05
与高血糖模型组相比：##：P＜0.01，#：P＜0.05
由表1可见，正常对照组和白簕多糖高剂量对照组均为正常的小鼠，由两组小鼠的体重变化可知，连续灌胃200 mg·kg-1·d-1白簕多糖对正常小鼠体重值不会造成显著性影响，表明白簕多糖不会影响正常小鼠的体重增长。
由表2可见，给药前的结果显示，注射STZ后，高血糖模型组、二甲双胍组和白簕多糖低、高剂量组的体重与正常对照组组相比，具有极显著差异（P＜0.01），说明STZ可导致显著的体重减轻。给药后的结果可见，白簕多糖低、高剂量组的体重值与高糖模型组相比均有较大增加，其中，高剂量组具有显著性差异（P＜0.05），说明白簕多糖可明显增加糖尿病小鼠的体重。白簕多糖高低两个剂量组的体重与二甲双胍组相比，体重的增长率较为接近，说明白簕多糖对体重的恢复能力与二甲双胍接近。
白簕多糖对小鼠空腹血糖的影响
STZ造模成功后的小鼠空腹血糖值显著高于正常值，经过14天灌胃白簕多糖，白簕多糖高低剂量组小鼠的空腹血糖值均显著下降，明显低于高血糖模型组。各组小鼠空腹血糖值的结果见表3和表4。
注：与正常对照组相比：**：P＜0.01，*：P＜0.05
与高血糖模型组相比：##：P＜0.01，#：P＜0.05
由表3可知，小鼠的灌胃200 mg·kg-1·d-1白簕多糖溶液14天，对正常小鼠血糖值不会造成显著性的影响，这样就表明了200 mg·kg-1·d-1白簕多糖不影响正常小鼠的血糖。
由表4可知，给药前的结果显示，注射STZ后，高血糖模型组、二甲双胍组和白簕多糖低、高剂量组的血糖值与正常对照组相比具有极显著差异（P＜0.01），说明STZ所致糖尿病模型是成功的。给药后的结果可以看出，高血糖模型组的血糖值较为稳定，没有出现自我恢复的现象。二甲双胍组的血糖值与高血糖模型组相比具有极显著性差异（P＜0.01），说明实验方法是有效的。分析各个剂量组的情况，低、高剂量组治疗效果明显，高剂量组的血糖恢复效果最好，与对照药物二甲双胍的治疗效果最为接近，其血糖值和正常组相比无显著性差异，说明白簕多糖具有较好的降血糖作用。
Claims (9)
1.白簕多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。
2.根据权利要求1的应用，其特征在于：白簕多糖的提取工艺：将干燥的白簕药材粉碎，然后水提，得到的水提液依次进行浓缩、除蛋白、醇沉、过滤、干燥，得白簕多糖。
3.根据权利要求2的应用，其特征在于：水提方法：向粉碎后的白簕中加3～5倍重量的水，70～90℃水浴浸提，过滤，得水提液。
4.根据权利要求2的应用，其特征在于：除蛋白方法：向浓缩后的水提液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量为15～25 万IU/g干燥的白簕药材，40～60℃水浴，然后加热除酶。
5.根据权利要求2的应用，其特征在于：白簕多糖的提取工艺：将干燥的白簕药材粉碎，加入3～5倍重量的水，70～90℃水浴浸提5～7 h，过滤，得到的水提液浓缩，加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量为15～25万IU/g干燥的白簕药材，40～60℃水浴3～5 h，然后加热除酶，冷却后，加入75～95%乙醇进行醇沉，过滤，干燥，得白簕多糖。
6.根据权利要求2～5任一项所述的应用，其特征在于：白簕药材为五加科五加属植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.的根、根皮、茎、叶中的至少一种。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：白簕药材为五加科五加属植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.的茎。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：白簕茎多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。
9.根据权利要求1的应用，其特征在于：白簕多糖与药学上可接受的辅料相结合，制备成任何一种药学上可接受的剂型。
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