CN108586632B - 一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用 - Google Patents
一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108586632B CN108586632B CN201810686604.4A CN201810686604A CN108586632B CN 108586632 B CN108586632 B CN 108586632B CN 201810686604 A CN201810686604 A CN 201810686604A CN 108586632 B CN108586632 B CN 108586632B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- polysaccharide
- asparagus
- preparation
- group
- drying
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 111
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 105
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 105
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 18
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 18
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 241000206611 Gracilariopsis lemaneiformis Species 0.000 title description 13
- 241000234427 Asparagus Species 0.000 claims abstract description 90
- 235000005340 Asparagus officinalis Nutrition 0.000 claims abstract description 90
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 claims abstract description 9
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 claims abstract description 9
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 23
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 18
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 14
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 12
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 12
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 11
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 11
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 10
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 8
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 6
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 claims description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 6
- 238000007605 air drying Methods 0.000 claims description 5
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 4
- 230000000055 hyoplipidemic effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000012466 permeate Substances 0.000 claims description 3
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 17
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 35
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 24
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 19
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 19
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 18
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 17
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 17
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 13
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 11
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 11
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 8
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 7
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 7
- 241000703939 Gracilariopsis longissima Species 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 6
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 6
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 6
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 5
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OJRHUICOVVSGSY-RXMQYKEDSA-N (2s)-2-chloro-3-methylbutan-1-ol Chemical compound CC(C)[C@H](Cl)CO OJRHUICOVVSGSY-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 4
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 229960001770 atorvastatin calcium Drugs 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 4
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 230000007863 steatosis Effects 0.000 description 4
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 4
- -1 DPPH free radical Chemical class 0.000 description 3
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 3
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 2
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 2
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 102000016622 Dipeptidyl Peptidase 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100026693 FAS-associated death domain protein Human genes 0.000 description 1
- 101000930822 Giardia intestinalis Dipeptidyl-peptidase 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000911074 Homo sapiens FAS-associated death domain protein Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 210000000918 epididymis Anatomy 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 108060006184 phycobiliprotein Proteins 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M sodium cholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Abstract
本发明公开了一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用,属于龙须菜深加工领域。本发明所提取的龙须菜多糖的分子量为20~35 kDa,硫酸基含量达20~28wt%。所述制备方法为将龙须菜干燥粉碎后,通过预均质、有机酸结合动态高压微射流技术提取、碱中和、超滤、离子交换树脂分离、浓缩和醇沉,从而制得龙须菜多糖。该龙须菜多糖的制备方法简单高效,适用于工业化生产,所得龙须菜多糖具有显著的降血脂活性,可用于制备降血脂药物或保健品。
Description
技术领域
本发明属于龙须菜深加工领域,具体涉及一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用。
背景技术
龙须菜(GracialriaLemaneofimrsi)属红藻门,江篱属(Gracaialri)植物,主要生产于我国广东、海南、山东等地,含有丰富的膳食纤维、维生素和微量元素,脂肪含量低,同时含有多糖、藻胆蛋白和不饱和脂肪酸等活性成分。龙须菜在中国东部地区有悠久的食用历史,传统中医认为龙须菜具有“利便、治瘿结热气”的功效,现代医学研究者则认为其具有助消化、解积腻、清肠胃、止血、降压的功效。
早期由于龙须菜产量稀少,因此国内对于龙须菜的研究报道主要集中在种植和加工方面,旨在提高其产量及繁殖率,而近年来关于龙须菜的研究重点逐渐由生产转移到了对其活性物质的提取及生理功能的研究方面,已见报道的有抗氧化活性、降血糖活性、免疫活性和抗肿瘤活性等。如朱益生公开了一种提高龙须菜萃取液的抗氧化成份的方法(专利申请号201010188414.3);广东药科大学公开了一种龙须菜提取物及其制备方法和应用,该提取物对DPPH自由基、羟自由基、超氧离子自由基的清除率在90%以上(专利申请号201611024913.2)。国家海洋局第三海洋研究所公开了一种龙须菜琼胶寡糖及其制备方法,可应用于抗氧化、抗紫外线保健品和化妆品中(专利申请号201210347105.5);华南理工大学公开了一种龙须菜多糖提取物及其制备方法与应用,所得多糖具有较好的抑制二肽基肽酶IV的活性,该多糖可应用于降血糖药物或保健品的研发中(专利申请号201410252784.7);上海水产大学公开了一种龙须菜多糖的制备方法,所得多糖对小鼠淋巴细胞具有较高的增殖效果(专利申请号200710044610.1);上海交通大学公开了一种龙须菜多糖的应用,该多糖可用于制备诱导细胞中的FADD和GADD基因的表达的抑制剂中的应用,在抗肿瘤药物或防癌保健品的制备中具有应用前景(专利申请号201610082951.7)。
发明内容
为了提高龙须菜的深加工技术,拓宽龙须菜的应用范围,本发明的首要目的在于提供一种龙须菜多糖。
本发明的另一目的在于提供上述龙须菜多糖的制备方法。
本发明的再一目的在于提供上述龙须菜多糖的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现。
一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖的制备方法,包含以下步骤:
(1)将龙须菜洗净、风干、粉碎过筛,得到龙须菜粉;
(2)向龙须菜粉中加入有机酸溶液,经过预均质处理后,结合动态高压微射流技术提取龙须菜粉,然后用碱中和,过滤,得到滤渣和提取液;
(3)将步骤(2)所述提取液进行超滤,舍弃透过液,收集截留液;
(4)用离子交换树脂分离所述截留液,取降血脂活性最高的组分进行真空浓缩,得浓缩液;
(5)将所述浓缩液与乙醇混合,静置,过滤得到多糖沉淀;
(6)将所述多糖沉淀进行干燥,得到所述龙须菜多糖。
优选的,步骤(1)所述粉碎过筛为粉碎后过20~80目筛。
优选的,步骤(2)所述有机酸溶液的pH值为2.0~4.0。
优选的,步骤(2)所述有机酸溶液为柠檬酸溶液或苹果酸溶液。
优选的,步骤(2)所述有机酸溶液的质量为所述龙须菜粉质量的20~40倍。
优选的,步骤(2)所述预均质处理的参数为:20~50MPa,1~3分钟,均质次数为1~2次;
优选的,步骤(2)所述动态高压微射流提取的控制条件为:微射流压力为120~180MPa,提取温度为75~100℃,提取时间为80~160分钟,提取次数为1~2次。
优选的,步骤(3)所述超滤采用截留分子量1kDa的超滤膜。
优选的,,步骤(4)所述离子交换树脂的型号为DEAE-fast flow或DEAE-52。
优选的,步骤(4)所述真空浓缩所得浓缩液为所述截留液体积的1/10~1/5。
优选的,步骤(5)所述乙醇的用量占所述浓缩液与乙醇混合后总体积的60%~90%,
优选的,步骤(5)所述静置是在2~8℃下静置8~14小时。
优选的,步骤(6)所述干燥为真空冷冻干燥或喷雾干燥。
由以上所述的制备方法制得的一种龙须菜多糖,所述龙须菜多糖的分子量为20~35kDa,硫酸基含量达20~28wt%。
以上所述的一种龙须菜多糖在制备降血脂药物或保健品中的应用。
相对于现有技术,本发明具有如下的优点及效果:
(1)本发明采用有机酸结合动态高压微射流技术提取龙须菜多糖,其提取率比传统水提法提高3~5倍,可大幅缩短提取时间、降低能耗。
(2)本发明所得龙须菜多糖具有较好的降血脂功效。
附图说明
图1a~图1e分别为NC、HF、HF+AT、HF+LGP、HF+HGP组小鼠肝脏组织的油红o染色切片照片(200×)。
图2a~图2e分别为NC、HF、HF+AT、HF+LGP、HF+HGP组小鼠肝脏组织的HE染色切片照片(400×)。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
一种龙须菜多糖提取物,其制备方法如下:
(1)龙须菜洗净、风干粉碎后过20目筛,取筛下粉末备用;
(2)取50g龙须菜粉置于容器中,与pH 2.0的柠檬酸按1:30的质量比混合均匀,30MPa预均质2次,每次均质2分钟,均质后,结合动态高压微射流技术提取,微射流压力125MPa,提取温度90℃,提取时间150分钟,提取2次,用NaOH中和至pH值为中性,过滤得滤渣和提取液;
(3)将步骤(2)所得的提取液用截留分子量1kDa的膜进行超滤,舍弃透过液,收集截留液;
(5)用离子交换树脂DEAE-Fast flow型号分离截留液,取降血脂活性最高的组分,真空浓缩至截留液体积的1/10,得浓缩液;
(6)在浓缩液中加入无水乙醇至乙醇终浓度为85wt%,混合均匀后,在6℃下静置12小时,过滤,除去上层清液部分,得多糖沉淀;
(7)将所得多糖沉淀冷冻干燥,得到所述龙须菜多糖,记为1#提取物。
实施例2
一种龙须菜多糖提取物,其制备方法如下:
(1)龙须菜洗净、风干、粉碎后过40目筛,取筛下粉末备用;
(2)取50g龙须菜粉置于容器中,与pH 3.5的柠檬酸按1:20的质量比混合均匀,25MPa预均质3次,每次均质1分钟,均质后,结合动态高压微射流技术提取,微射流压力160MPa,提取温度80℃,提取时间100分钟,提取1次,用NaOH中和至pH值为中性,过滤得滤渣和提取液;
(3)将步骤(2)所得的提取液用截留分子量1kDa的膜进行超滤,舍弃透过液,收集截留液;
(5)用离子交换树脂DEAE-52型号分离截留液,取降血脂活性最高的组分,真空浓缩至截留液体积的1/8,得浓缩液;
(6)在浓缩液中加入无水乙醇至乙醇终浓度为68wt%,混合均匀后,在4℃下静置10小时,过滤,除去上层清液部分,得多糖沉淀;
(7)将所得多糖沉淀冷冻干燥,得到所述龙须菜多糖,记为2#提取物。
实施例3
一种龙须菜多糖提取物,其制备方法如下:
(1)龙须菜洗净、风干、粉碎后过60目筛,取筛下粉末备用;
(2)取50g龙须菜粉置于容器中,与pH 3.0的柠檬酸按1:40的质量比混合均匀,45MPa预均质1次,每次均质3分钟,均质后,结合动态高压微射流技术提取,微射流压力148MPa,提取温度96℃,提取时间130分钟,提取1次,用NaOH中和至pH值为中性,过滤得滤渣和提取液;
(3)将步骤(2)所得的提取液用截留分子量1kDa的膜进行超滤,舍弃透过液,收集截留液;
(5)用离子交换树脂DEAE-Fast flow型号分离截留液,取降血脂活性最高的组分,真空浓缩至截留液体积的1/5,得浓缩液;
(6)在浓缩液中加入无水乙醇至乙醇终浓度为75wt%,混合均匀后,在2℃下静置8小时,过滤,除去上层清液部分,得多糖沉淀;
(7)将所得多糖沉淀冷冻干燥,得到所述龙须菜多糖,记为3#提取物。
对比例1传统水提法制备龙须菜多糖提取物
一种龙须菜多糖提取物,采用传统水提法进行制备,其制备方法如下:
(1)龙须菜洗净、风干、粉碎后过40目筛,取筛下粉末备用;
(2)取龙须菜粉于容器中煮沸120分钟后,过滤得滤渣和提取液;
(3)将步骤(2)所得的最终提取液用截留分子量1kDa的膜进行超滤,舍弃透过液,收集截留液;
(4)用离子交换树脂DEAE-Fast flow型号分离截留液,取降血脂活性最高的组分,真空浓缩至截留液体积的1/8,得浓缩液;
(5)在浓缩液中加入无水乙醇至乙醇终浓度为80wt%,混合均匀后,在0~4℃下静置12小时,过滤,除去上层清液部分,得多糖沉淀;
(6)将所得多糖沉淀冷冻干燥,得到龙须菜多糖,记为4#提取物。
实验例1测定多糖提取率
测定实施例及对比例中各龙须菜多糖的多糖提取率。
采用苯酚-硫酸法测定1#~4#提取物中的多糖含量,计算多糖提取率,公式为:多糖提取率(%)=(提取液中多糖含量(g)/原料重量(g))×100。
各龙须菜多糖提取物测定计算结果如表1所示:
表1
提取物 | 1#提取物 | 2#提取物 | 3#提取物 | 4#提取物 |
多糖提取率(%) | 23.65±0.27 | 19.80±0.62 | 20.31±0.80 | 5.46±0.52 |
注:表内数据为平均值±标准偏差(n=3)
从表1中数据可知,本发明所述方法的龙须菜多糖提取率明显高于传统水提法的多糖提取率。
实验例2龙须菜多糖的降血脂实验
本实验利用高胆固醇高脂饲料饲养雄性昆明小鼠造成高血脂模型,从而评价按前述方法制备得到的龙须菜多糖的降血脂作用。
1.实验材料
1.1药物及试剂:高胆固醇高脂饲料(蔗糖20%、猪油15%,胆固醇1.2%,胆酸钠0.2%、酪蛋白10%、磷酸氢钙0.6%、石粉0.4%、预混料0.4%,基础饲料52.2%;总能量4.4kcal/g;由广东省医学动物中心提供),小鼠灌胃针管,一次性无菌注射器,离心管,无菌生理盐水,阿托伐他汀钙片(辉瑞制药有限公司,产品批号:S90890),甘油三酯测试盒(南京建成生物科技有限公司,生产批号:20180420),总胆固醇测试盒(南京建成生物科技有限公司,生产批号:20180420),低密度脂蛋白测试盒(南京建成生物科技有限公司,生产批号:20180426),高密度脂蛋白测试盒(南京建成生物科技有限公司,生产批号:20180426),游离脂肪酸测试盒(南京建成生物科技有限公司,生产批号:20180420)龙须菜多糖(GLP)由本实验室按前述制备方法自制。
1.2实验主要仪器:低速离心机,酶标仪,移液枪。
1.3实验动物:昆明种小鼠,雄性,体重22~24g,购于广东省医学动物中心。
2.供试液样品
实施例1中制备的龙须菜多糖。
3.各供试样品液的配制:
3.1他汀药液的配制:取7片阿托伐他汀钙片(含阿托伐他汀140mg),以350mL无菌生理盐水混悬,配制成浓度为0.4mg/mL(以阿托伐他汀含量计)的药液样品。
3.2低剂量龙须菜多糖药液的配制:精密称取3.57g龙须菜多糖。以350mL无菌生理盐水溶解,配制成多糖含量为6.0mg/mL的药液样品。
3.3高剂量龙须菜多糖药液的配制:精密称取13.37g龙须菜多糖。以350mL无菌生理盐水溶解,配制成多糖含量为22.5mg/mL的药液样品。
4.实验方法
4.1造模阶段:昆明种小鼠102只,22-24g,雄性,随机分成两组,一组24只,为正常对照组,以普通饲料喂养;另一组78只,为高血脂模型组(以下简称模型组),以高胆固醇高脂饲料喂养,自由饮水摄食,饲养6周后,每组各随机选取6只小鼠,禁食不禁水8h后,采用摘眼球采血法,离心分离血清,按照试剂盒说明书操作,分别测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、游离脂肪酸(FFA)的含量,根据上述指标判断造模是否成功。
4.2实验阶段:造模成功后,将模型组随机分为4组,每组18只,分别为:模型对照组(HF)、阿托伐他汀干预组(HF+AT)、低剂量龙须菜多糖干预组(HF+LGP)、高剂量龙须菜多糖干预组(HF+HGP)。灌胃给药。正常对照组(NC)和模型对照组每日按0.1mL/10g灌胃无菌生理盐水,给药组每日灌胃给予0.1mL/10g体积的相应药物。共给药42天。分别在给药14,28和42天后,每组随机选取6只小鼠禁食不禁水8h后,采用摘眼球采血法采血,脱颈椎处死小鼠后,取附睾周脂肪称重,取肝脏作组织切片病理学分析;采血2h内离心分离血清按照测试盒说明书操作,分别测定TC、TG、LDL-C、HDL-C、FFA的含量。
4.3数据处理与分析方法:以下实验数据均以“平均值±标准差”来表示。采用SPSS19.0进行one-way ANOVA进行单因素方差分析和差异显著性分析,方差之间无/有显著差异时以LSD/Dunnett's T3方法进行分析。
5.实验结果
5.1经测定,用于本实验例中的龙须菜多糖提取率为23.65±0.27wt%,经苯酚硫酸法检测得到多糖纯度为59.01±0.91wt%,经BCA试剂盒检测得到蛋白质含量仅为1.57±0.37wt%,硫酸基含量为22.85±0.70wt%,分子量为31.45±5.21kDa。
5.2龙须菜多糖对小鼠血清总胆固醇(TC)含量的影响(mmol/L)、甘油三酯(TG)含量的影响(mmol/L)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量的影响(mmol/L)、高密度脂蛋白(HDL-C)含量的影响(mmol/L)、游离脂肪酸(FFA)含量的影响(mmol/L)、动脉粥样硬化指数(AI)的影响(mmol/L)、附睾周脂重指数的影响(×10-2g/g)见表2~表8。
表2
注:*p<0.05,高脂组与正常对照组比较;**p<0.01,高脂组与正常对照组比较;不同字母表示高脂小鼠各组之间存在显著性差异(p<0.05)。下同。
表3
表4
表5
表6
表7
注:AI=LDL-C/HDL-C
表8
图1a~图1e分别为NC、HF、HF+AT、HF+LGP、HF+HGP组小鼠肝脏组织的油红o染色切片照片(200×)。
图2a~图2e分别为NC、HF、HF+AT、HF+LGP、HF+HGP组小鼠肝脏组织的HE染色切片照片(400×)。
6.分析与讨论
从0d结果来看,模型与空白组相比,TC的浓度有显著性升高(p<0.05),而TG、LDL-C的浓度均有极显著性升高(p<0.01),HDL-C浓度分别有显著性降低(p<0.05)和极显著性降低(p<0.01),该结果表明实验动物造模成功。在干预42d后TC浓度变化方面,与模型组相比,龙须菜多糖低、高剂量组,具有显著性差异(p<0.05),阿托伐他汀组虽有降低,但无显著性差异(p>0.05)。在干预42d后TG浓度变化方面,与模型组相比,龙须菜多糖低、高剂量组,具有显著性差异(p<0.05)。在干预14d后LDL-C浓度变化方面,与模型组相比,他汀组具有显著性降低作用(p<0.05),而龙须菜多糖低、高剂量组不具有显著性降低作用(p>0.05),随着干预时间增加直至42d,高脂小鼠的LDL-C浓度均有下降趋势,但各组之间无显著性差异(p>0.05)。在干预42d后HDL-C浓度变化方面,与模型组相比,阿托伐他汀组和龙须菜低剂量组,具有显著性升高作用(p<0.05),龙须菜高剂量组不具有显著性升高作用(p>0.05)。在干预42d后FFA浓度变化方面,与模型组相比,龙须菜多糖低剂量组具有显著性降低性作用(p<0.05),阿托伐他汀组和龙须菜高剂量组不具有显著性降低作用(p>0.05)。在干预42d后血清动脉粥样硬化指数(AI=LDL-C/HDL-C)变化方面,与模型组相比,龙须菜低、高剂量组具有显著性降低作用(p<0.05),阿托伐他汀组不具有显著性降低作用(p>0.05)。在干预42d后附睾周脂重指数(附睾周脂肪重量/体重,×10-2g/g)变化方面,与模型组相比,阿托伐他汀组、龙须菜低、高剂量组均具有显著性降低作用(p<0.05)。
从图1a~e的各组小鼠肝脏组织油红o染色切片结果可见:NC组呈正常肝形态,仅有少量肝细胞含细点状橘染脂滴;HF组呈弥漫性滴状深橘红色,坏死区小片状深橘红色,提示大量肝细胞内含大脂滴且坏死处脂滴融合;HF+AT组呈弥漫点状、小滴状粉染,与模型组相比脂滴有所减小,但数量减少不明显;HF+LGP组呈灶性浅橘色,提示含脂滴的肝细胞数量及脂滴大小较模型组明显减少,减脂效果显著;HF+HGP组呈巢片性点状橘色,脂滴较模型组减少、减小,减脂效果明显。
从图2a~e的各组小鼠肝脏组织HE染色切片结果可见:NC组肝细胞排列规则,无脂肪变性,无炎症坏死情况;HF组肝细胞排列紊乱,胞质内可见数量不等,大小不一的脂肪空泡(箭头标注1),有重度脂肪变性情况出现,有重度肝细胞水样变性情况(箭头标注2),同时有炎性细胞灶性浸润(箭头标注3),提示模型组肝脏有大量脂肪积累,同时有中度炎症坏死情况;HF+AT组肝细胞排列稍有规则,有脂肪空泡(箭头标注1)、肝细胞水样变性(箭头标注2)和少量炎症细胞分布(箭头标注3),提示他汀干预组有中度脂肪变性情况,同时有轻度炎症情况出现;HF+LGP组肝细胞排列规则,未见脂肪空泡,但有多处局灶性炎性细胞浸润,提示低剂量龙须菜多糖干预后脂肪积累情况有明显好转,但炎症有加重,可能处于机体修复后期;HF+HGP组肝细胞排列规则,有少量脂肪空泡(箭头标注1),脂肪空泡体积较模型组的明显减小,有轻度脂肪变性情况,未见炎症出现,提示HF+HGP组肝脏脂肪积累情况较模型组有明显好转。
以上实验结果表明,低剂量(多糖含量为6.0mg/mL)的龙须菜多糖对高血脂小鼠的TC、TG、FFA和AI指数均有明显降低作用,并对HDL-C有显著性升高作用;高剂量(多糖含量为22.5mg/mL)的龙须菜多糖对高血脂小鼠的TC、TG和AI指数均有显著降低作用。综上,龙须菜多糖具有显著的降血脂功能,并能有效降低患动脉粥样硬化的风险。
实验例3龙须菜多糖与阿托伐他汀致肝损伤毒副作用比较
1.实验材料
1.1药品试剂:阿托伐他汀钙片(辉瑞制药有限公司,产品批号:S90890),谷丙转氨酶(GPT)试剂盒(南京建成生物科技有限公司,生产批号:20180420),谷草转氨酶(GOT)试剂盒(南京建成生物科技有限公司,生产批号:20180420),龙须菜多糖(GLP)由本实验室自制。
1.2实验仪器:低速离心机,酶标仪,移液枪,
1.3实验动物:昆明种小鼠,雄性,体重22~24g,购于广东省医学动物中心。
2.实验样品的制备
实施例1中制备的龙须菜多糖。
3.实验样品的配制
3.1阳性对照药阿托伐他汀药液的配制:取7片阿托伐他汀钙片(含阿托伐他汀140mg),以350mL无菌生理盐水混悬,配制成浓度为0.4mg/mL(以阿托伐他汀含量计)的药液样品。
3.2低剂量龙须菜多糖药液的配制:精密称取3.57g龙须菜多糖。以350mL无菌生理盐水溶解,配制成多糖含量为6.0mg/mL的药液样品。
3.3高剂量龙须菜多糖药液的配制:精密称取13.37g龙须菜多糖。以350mL无菌生理盐水溶解,配制成多糖含量为22.5mg/mL的药液样品。
4.实验方法
4.1造模阶段:昆明种小鼠102只,22-24g,雄性,随机分成两组,一组24只,为正常对照组,以普通饲料喂养;另一组78只,为高血脂模型组(以下简称模型组),以高胆固醇高脂饲料喂养,自由饮水摄食,饲养6周后,每组各随机选取6只小鼠,禁食不禁水8h后,采用摘眼球采血法,离心分离血清,按照总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、游离脂肪酸(FFA)试剂盒说明书操作,分别测定TC、TG、LDL-C、HDL-C、FFA的含量,根据上述指标判断造模是否成功。
4.2实验阶段:造模成功后,将模型组随机分为4组,每组18只,分别为:模型对照组(HF)、他汀对照组(HF+AT)、低剂量龙须菜多糖组(HF+LGP)、高剂量龙须菜多糖组(HF+HGP)。灌胃给药。正常对照组(NC)和模型对照组每日按0.1mL/10g灌胃无菌生理盐水,给药组每日灌胃给予0.1mL/10g体积的相应药物。共给药42天。分别在给药14,28和42天后,每组随机选取6只小鼠禁食不禁水8h后,采用摘眼球采血法,离心分离血清,按照谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)试剂盒说明书操作,分别测定GPT、GOT的活力。
4.3数据处理与分析方法:以下实验数据均以“平均值±标准差”来表示。采用SPSS19.0进行one-way ANOVA进行单因素方差分析和差异显著性分析,方差之间无/有显著差异时以LSD/Dunnett's T3方法进行分析。
5.实验结果
5.1经测定,用于本实验例中的龙须菜多糖提取率为23.65±0.27wt%,经苯酚硫酸法检测得到多糖纯度为59.01±0.91wt%,经BCA试剂盒检测得到蛋白质含量仅为1.57±0.37wt%,硫酸基含量为22.85±0.70wt%,分子量为31.45±5.21kDa。
5.2根据实验例2的实验结果,模型与空白组相比,TC的浓度有显著性升高(p<0.05),而TG、LDL-C的浓度均有极显著性升高(p<0.01),HDL-C浓度分别有显著性降低(p<0.05)和极显著性降低(p<0.01),该结果表明实验动物造模成功。
表9
*p<0.05,高脂组与正常对照组比较;**p<0.01,高脂组与正常对照组比较;不同字母表示高脂小鼠各组之间存在显著性差异(p<0.05)。下同。
表10
6.分析与讨论
在干预42d后GPT活力变化方面,与正常组相比,高脂小鼠组均具有极显著性升高(p<0.01);与模型对照组相比,龙须菜多糖低、高剂量组均有显著性降低(p<0.05),但与阿托伐他汀组相比,龙须菜多糖各组均无显著性差异(p>0.05)。在干预42d后GOT活力变化方面,与正常组相比,模型对照组有极显著性升高(p<0.01);与模型对照组相比,阿托伐他汀组、龙须菜多糖低、高剂量组均具有显著性降低作用(p<0.05);与阿托伐他汀组相比,龙须菜多糖低剂量组具有显著降低作用(p<0.05)。
以上结果表明,龙须菜多糖与阿托伐他汀在致肝损伤毒副作用方面存在差异,低剂量(多糖含量为6.0mg/mL)的龙须菜多糖比阿托伐他汀更安全。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:
(1)将龙须菜洗净、风干、粉碎过筛,得到龙须菜粉;
(2)向龙须菜粉中加入有机酸溶液,经过预均质处理后,结合动态高压微射流技术提取龙须菜粉,然后用碱中和,过滤,得到滤渣和提取液;所述预均质处理的参数为:20~50MPa,1~3分钟,均质次数为1~2次,且动态高压微射流提取的控制条件为:微射流压力为120~180MPa,提取温度为75~100℃,提取时间为80~160分钟,提取次数为1~2次;
(3)将步骤(2)所述提取液进行超滤,舍弃透过液,收集截留液;
(4)用离子交换树脂分离所述截留液,取降血脂活性最高的组分进行真空浓缩,得浓缩液;
(5)将所述浓缩液与乙醇混合,静置,过滤得到多糖沉淀;
(6)将所述多糖沉淀进行干燥,得到所述龙须菜多糖,所述龙须菜多糖的分子量为20~35kDa,硫酸基含量达20~28wt%。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述粉碎过筛为粉碎后过20~80目筛。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述有机酸溶液的pH值为2.0~4.0;所述有机酸溶液为柠檬酸溶液或苹果酸溶液;所述有机酸溶液的质量为所述龙须菜粉质量的20~40倍。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)所述超滤采用截留分子量1kDa的超滤膜。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(4)所述离子交换树脂的型号为DEAE-fast flow或DEAE-52;所述真空浓缩所得浓缩液为所述截留液体积的1/10~1/5。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(5)所述乙醇的用量占所述浓缩液与乙醇混合后总体积的60%~90%;所述静置是在2~8℃下静置8~14小时。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(6)所述干燥为真空冷冻干燥或喷雾干燥。
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810686604.4A CN108586632B (zh) | 2018-06-28 | 2018-06-28 | 一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用 |
PCT/CN2018/113239 WO2020000828A1 (zh) | 2018-06-28 | 2018-10-31 | 一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用 |
SG11202012298VA SG11202012298VA (en) | 2018-06-28 | 2018-10-31 | Gracilaria lemaneiformis polysaccharide with significant hypolipidemic activity, preparation method thereof and use therefor |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810686604.4A CN108586632B (zh) | 2018-06-28 | 2018-06-28 | 一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN108586632A CN108586632A (zh) | 2018-09-28 |
CN108586632B true CN108586632B (zh) | 2021-08-06 |
Family
ID=63634813
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201810686604.4A Active CN108586632B (zh) | 2018-06-28 | 2018-06-28 | 一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN108586632B (zh) |
SG (1) | SG11202012298VA (zh) |
WO (1) | WO2020000828A1 (zh) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108586632B (zh) * | 2018-06-28 | 2021-08-06 | 华南理工大学 | 一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用 |
CN110368400A (zh) * | 2019-08-01 | 2019-10-25 | 大连工业大学 | 一种龙须菜多糖低聚物的制备方法及其应用 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101397346B (zh) * | 2008-09-17 | 2010-08-11 | 上海海洋大学 | 一种具有免疫调节作用的龙须菜纯多糖的制备方法 |
CN104086664B (zh) * | 2014-06-09 | 2017-01-25 | 华南理工大学 | 一种龙须菜多糖提取物及其制备方法与应用 |
CN104710541A (zh) * | 2015-03-31 | 2015-06-17 | 广西还珠海洋生物科技有限公司 | 一种从海带中制备海带多糖的方法 |
CN106868072B (zh) * | 2017-03-13 | 2020-12-01 | 珀莱雅化妆品股份有限公司 | 一种小分子量铁皮石斛多糖的制备方法 |
CN108586632B (zh) * | 2018-06-28 | 2021-08-06 | 华南理工大学 | 一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用 |
-
2018
- 2018-06-28 CN CN201810686604.4A patent/CN108586632B/zh active Active
- 2018-10-31 WO PCT/CN2018/113239 patent/WO2020000828A1/zh active Application Filing
- 2018-10-31 SG SG11202012298VA patent/SG11202012298VA/en unknown
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
动态超高压微射流技术在玉米花粉多糖提取中的应用;涂宗财 等;《食品工业科技》;20100625;第212页 * |
龙须菜多糖的制备及降血糖活性研究;张云林;《中国优秀硕士学位论文(工程科技I辑)》;20170215;第35,37,75页 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2020000828A1 (zh) | 2020-01-02 |
CN108586632A (zh) | 2018-09-28 |
SG11202012298VA (en) | 2021-01-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104829738A (zh) | 草叶马尾藻多糖提取物在改善肠道菌群防治糖尿病中的应用 | |
CN108047343B (zh) | 伊贝母总多糖的制备方法及其应用 | |
Song et al. | Immunomodulatory effects of crude phenylethanoid glycosides from Ligustrum purpurascens | |
CN108586632B (zh) | 一种具有显著降血脂活性的龙须菜多糖及其制备方法与应用 | |
CN109400741B (zh) | 一种灵芝孢子多糖的分离纯化方法 | |
CN103169788B (zh) | 大枣叶提取物及其在制备防治肝损伤药物及保健食品中的应用 | |
CN106084087A (zh) | 一种瓜蒌多糖的制备方法 | |
CN106749729B (zh) | 一种鹿药多糖及其制备方法和应用 | |
CN107854507B (zh) | 一种从艾叶中提取黄酮类成分的方法 | |
CN107286264A (zh) | 大枣营养物质分离的深加工方法 | |
CN102872015B (zh) | 一种白药子总生物碱提取物及其制备方法及应用 | |
CN105902562A (zh) | 一种葡甘露聚糖在制备防治白细胞减少症药物中的应用 | |
CN107722131B (zh) | 一种具有显著辅助抗肿瘤活性的全灵芝孢子粉精制多糖及其制备方法和应用 | |
CN111840349A (zh) | 一种从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法 | |
CN106883306A (zh) | 一种具有抗肿瘤活性的向日葵茎芯多糖的提取分离方法 | |
CN102247413B (zh) | 续断总皂苷及木通皂苷d的降血脂作用 | |
CN108969580B (zh) | 蓝布正总鞣质的制备方法及应用 | |
CN107056959A (zh) | 菊芋中抗hsv‑1、rsv、ev‑71成分及制备 | |
CN108159146B (zh) | 一种用于降血脂的中药组合物及制备方法 | |
CN105560310B (zh) | 华山矾多糖的药物应用及其组合物 | |
CN104523851A (zh) | 一种水红花子果皮总黄酮提取物的制备方法 | |
CN110964126A (zh) | 一种麦冬降解提取物及其在制备防治心血管药物中的应用 | |
CN103735599A (zh) | 臭灵丹提取物及组合物在抗甲型病毒性流感药物中的应用 | |
CN114790251B (zh) | 一种具有免疫活性的滇重楼多糖及其组合物和应用 | |
CN113713016B (zh) | 代代花在制备改善脂肪肝药物中的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |