CN104004106A - 一种桦褐孔菌中有效物质提取方法和茶包的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种桦褐孔菌中有效物质提取方法和茶包的制备方法，包括：选用桦褐孔菌原料经过破碎处理、水浸泡、加热水煮、热水浸提辅助超声提取并离心过滤得到以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖；滤渣用乙醇浸泡、乙醇恒温浴、再辅助超声提取并离心过滤得到桦褐孔菌中的齐墩果酸三萜类化合物。将得到的以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖提取液和齐墩果酸三萜类化合物提取液以1∶1均匀混合得到桦褐孔菌混合提取液；桦褐孔菌混合提取液经过旋转蒸发得到浓缩液；滤渣经过烘干，筛选，炒制，提取液一次附型，一次鼓风干燥，二次附型，二次鼓风干燥，称量包装即得成品。其最终制的茶包中的有效成份含量最高。该方法开发的桦褐孔菌茶包利于功效成分的利用，饮用方便。

Description

一种桦褐孔菌中有效物质提取方法和茶包的制备方法

技术领域

本发明涉及一种桦褐孔菌袋泡茶及其配方的研究，此外，本发明还公开这种桦褐孔菌中以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖及齐墩果酸三萜类化合物的提取工艺。

背景技术

桦褐孔菌，又叫白桦茸、桦癌褐孔菌、斜管纤孔菌、褐多孔菌。生于白桦、银桦、榆树、赤杨等活立木的树皮下或砍伐后树木的枯干上，其菌核可以在砍伐后的枯干上生存达6年之久。在国内主要分布于黑龙江省、吉林省长白山地区、等地区。其成分主要含有羊毛甾醇型三萜类、桦褐孔菌醇和桦褐孔菌素、黑色素类、叶酸衍生物，以及芳香物质、木质素、栓菌酸、单宁等化学成分，其中起主要药理作用的为羊毛甾醇型三萜类、桦褐孔菌醇、桦褐孔菌素和木质素.具有抵抗肝癌、胃癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌、皮肤癌、直肠癌、淋巴等多种肿瘤细胞，以及抗艾滋病病毒、抗感染、治疗糖尿病、降血压调节血脂、抗机体衰老、增强免疫力等药理作用。

袋泡茶，可以长期储存，使用开水冲泡，简单方便，易于携带。桦褐孔菌茶包中不添加任何其他材料，滤渣烘干炒熟再与浓缩液混合，原滋原味，保持了桦褐孔菌最原始的状态，坚持纯天然的饮用。

发明内容

本发明针对桦褐孔菌中有效物质营养价值高，利用桦褐孔菌和茶包结合而开发新型产品，本发明公开了桦褐孔菌中有效物质提取方法和茶包的制备方法。

根据本发明的第一目的，本发明提供了一种桦褐孔菌中有效物质提取方法，其主要包括以下的步骤：

选用桦褐孔菌原料经过破碎处理、水浸泡、加热水煮、热水浸提辅助超声提取并离心过滤得到以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖；

滤渣用乙醇浸泡、乙醇恒温浴、再辅助超声提取并离心过滤得到桦褐孔菌中的齐墩果酸三萜类化合物。

优选的是，对桦褐孔菌原料经过破碎处理中，选取非机械化处理工艺。

优选的是，水浸泡的条件：比例是1∶10(w/v)，常温浸泡，24小时。

优选的是，乙醇浸泡的条件：比例是1∶10(w/v)，常温浸泡，24小时，乙醇浓度是90％。

优选的是，加热水煮和热水浸提辅助超声提取的条件：

水浸泡后的桦褐孔菌原料与水混合直至煮沸后持续10min；超声提取的条件是60℃，1小时。

优选的是，乙醇恒温浴和超声提取的条件是：

滤渣与乙醇水溶液混合，70℃恒温加热30min；超声提取条件是60℃，1小时。

根据本发明的第二目的，本发明提供了一种桦褐孔菌茶包的制备方法，其主要步骤包括：

将以上方法得到的以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖提取液和齐墩果酸三萜类化合物提取液以1∶1均匀混合得到桦褐孔菌混合提取液；

桦褐孔菌混合提取液经过旋转蒸发得到浓缩液；滤渣经过烘干，筛选，炒制，提取液一次附型，一次鼓风干燥，二次附型，二次鼓风干燥，称量包装即得成品。

优选的是，桦褐孔菌提取液经过旋转蒸发浓缩，浓缩液浓度为2.2波美度。

优选的是，滤渣经过60℃恒温干燥4h，筛选颗粒大小在0.2-0.3mm后经过低温炒制。

优选的是，将桦褐孔菌提取液浸泡在炒制后的桦褐孔菌颗粒上，进行一次付型，颗粒与提取液的比例为料液比1∶2.5，进行一次干燥后，再进行桦褐孔菌提取液二次付型，比例也为料液比1∶2.5，再经过二次鼓风干燥后即得成品。

本发明采取了上述方案以后，其最终制的茶包中的有效成份含量最高，具有降糖，降血压，抗癌等功效，而且袋泡茶经过温水冲泡后，其中有效成份容易被人体吸收，并能起到良好的功效。

附图说明

下面结合附图对本发明进行详细的描述，以使得本发明的上述优点更加明确。

图1是本发明桦褐孔菌中有效成分提取方法及茶包制备工艺方法的流程示意图；

图2是本发明原料手动切丁和超微粉碎处理比较示意图；

图3是本发明一个实施例中乙醇浸泡中四种方案提取含量比较-C18色谱柱检测比较图；

图4是本发明一个实施例中乙醇浸泡中四种方案提取含量比较-氨基柱色谱柱检测比较图；

图5是本发明一个实施例中水浸泡中四种方案提取含量比较-C18色谱柱检测比较图；

图6是本发明一个实施例中水浸泡中四种方案提取含量比较-氨基柱色谱柱检测比较图。

具体实施方式

以下将结合附图及实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。需要说明的是，只要不构成冲突，本发明中的各个实施例以及各实施例中的各个特征可以相互结合，所形成的技术方案均在本发明的保护范围之内。

如图1所示，图1是本发明桦褐孔菌中有效成分提取方法及茶包制备工艺方法的流程示意图，根据流程图所示，其主要方案如下：

选用桦褐孔菌原料经过破碎处理、水浸泡、加热水煮、热水浸提辅助超声提取并离心过滤得到以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖；

滤渣用乙醇浸泡、乙醇恒温浴、再辅助超声提取并离心过滤得到桦褐孔菌中的齐墩果酸三萜类化合物。

优选的是，对桦褐孔菌原料经过破碎处理中，选取非机械化处理工艺。

优选的是，水浸泡的条件：比例是1∶10(w/v)，常温浸泡，24小时。

优选的是，乙醇浸泡的条件：比例是1∶10(w/v)，常温浸泡，24小时，乙醇浓度是90％。

优选的是，加热水煮和热水浸提辅助超声提取的条件：

水浸泡后的桦褐孔菌原料与水混合直至煮沸后持续10min；超声提取的条件是60℃，1小时。

优选的是，乙醇恒温浴和超声提取的条件是：

滤渣与乙醇水溶液混合，70℃恒温加热30min；超声提取条件是60℃，1小时。

其中，根据图1所示，一种桦褐孔菌茶包的制备方法，其主要步骤包括：

将以上方法得到的以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖提取液和齐墩果酸三萜类化合物提取液以1∶1均匀混合得到桦褐孔菌混合提取液；

桦褐孔菌混合提取液经过旋转蒸发得到浓缩液；滤渣经过烘干，筛选，炒制，提取液一次附型，一次鼓风干燥，二次附型，二次鼓风干燥，称量包装即得成品。

优选的是，桦褐孔菌提取液经过旋转蒸发浓缩，浓缩液浓度为2.2波美度。

优选的是，滤渣经过60℃恒温干燥4h，筛选颗粒大小在0.2-0.3mm后经过低温炒制。

优选的是，将桦褐孔菌提取液浸泡在炒制后的桦褐孔菌颗粒上，进行一次付型，颗粒与提取液的比例为料液比1∶2.5，进行一次干燥后，再进行桦褐孔菌提取液二次付型，比例也为料液比1∶2.5，再经过二次鼓风干燥后即得成品。

本发明采取了上述方案以后，其最终制的茶包中的有效成份含量最高，具有降糖，降血压，抗癌等功效，而且袋泡茶经过温水冲泡后，其中有效成份容易被人体吸收，并能起到良好的功效。

具体来说，在具体的实施例中，所选用桦褐孔菌原料经过破碎处理，先以一定料液比进行水浸泡，之后采用加热一定时间，热水浸提辅助超声提取桦褐孔菌多糖，其中以β-葡聚糖为主，离心过滤处理得到上清液即为桦褐孔菌多糖，滤渣用乙醇浸泡，采用加热保温一定时间，再辅助超声提取桦褐孔菌中齐墩果酸三萜类化合物，经离心过滤得到上清液即为含有齐墩果酸的提取液。

其中，为了使得破碎处理对桦褐孔菌多糖和齐墩果酸三萜类化合物的成份影响较少，因此选用非机械化处理工艺。

为了证明上述的实验事实，在一个实施例中，所选用桦褐孔菌原料经过破碎处理，分别以一定料液比进行水浸泡和乙醇浸泡，并分别用四种提取方法分别处理提取其中多糖类及三萜类组分，通过高效液相色谱技术作为检测手段对其中的有效成分的含量进行评价。

其中，桦褐孔菌茶包制备具体步骤包括：将以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖提取液和齐墩果酸三萜类物质提取液以1∶1混合得到桦褐孔菌提取液，混合提取液经过旋转蒸发得到浓缩液，滤渣经过烘干，筛选，炒制，提取液一次附型，一次鼓风干燥，二次附型，二次鼓风干燥，称量包装即得桦褐孔菌茶包成品。

根据本发明的一个实例，所述桦褐孔菌前期处理如下：

桦褐孔菌破碎处理进行非机械处理和机械处理两种方法比较。

并根据高效液相色谱法检测选择一种提取成份含量较高的提取方法；之后并且分别针对不同提取成分选用水浸泡和醇浸泡。水浸泡的条件为：比例是1∶10(w/v)，常温浸泡，24小时；乙醇浸泡的条件：比例是1∶10(w/v)，常温浸泡，24小时，乙醇浓度是90％。

根据本发明的第二个实例，最终确定有效成份的提取工艺采用加热水煮再超声方法提取桦褐孔菌多糖，滤渣乙醇浸泡后再进行醇浴超声方法提取桦褐孔菌中齐墩果酸三萜类化合物。加热水煮再超声工艺条件：原料与水混合直至煮沸后持续10min，超声条件是60℃，60min；醇浴超声工艺条件：原料与乙醇水溶液混合，70℃恒温加热30min，超声条件是60℃，60min。

根据本发明的第三个实例，提取液经过高效液相检测，分别用氨基柱和C18两种型号的色谱柱进行检测，其中氨基柱主要针对桦褐孔菌多糖成份进行检测，而C18主要针对桦褐孔菌中齐墩果酸三萜类化合物进行检测。

根据本发明的第四个实例，上述方案中选择最有效的提取方法进行有效物质提取方法，分别提取多糖类和三萜类物质，均匀混合，进而进行旋转蒸发浓缩使得浓缩液波美度为2.2。

根据本发明的第五个实例，所述桦褐孔菌茶包制备方法中，滤渣经过烘干，炒制，筛选，提取液一次附型，一次鼓风干燥，二次附型，二次鼓风干燥，称量包装即得桦褐孔菌袋泡茶成品。将桦褐孔菌提取液浸泡在炒制后的桦褐孔菌颗粒上，进行一次附型，颗粒与提取液的比例为1∶2.5。以保证提取液能够充分被吸附到桦褐孔菌颗粒内部，进行一次干燥后，再进行桦褐孔菌提取液二次附型，比例同上，再经过二次鼓风干燥后即得成品。

根据本发明的第六个实例，取3g桦褐孔菌茶包泡于200ml水中，采用高效液相技术对桦褐孔菌茶水进行定性和定量分析。

试验样品：

主要原料：

桦褐孔菌，食品级乙醇，蒸馏水，色谱级乙腈，色谱级甲醇

试验设备：超声提取仪器

高效液相色谱仪

C18色谱柱

氨基柱

旋转蒸发仪

超微粉碎机

电磁炉

桦褐孔菌原料前处理条件优化：

分别采用超微粉碎处理和非机械方法处理桦褐孔菌原料，如下所述：

1.超微粉碎处理：将桦褐孔菌超微粉碎1min，得到桦褐孔菌粉末。

2.非机械处理：采用人工方法将桦褐孔菌进行一定力度的破碎。

根据图1可知，非机械处理与超微粉碎处理相比，桦褐孔菌原材料采用非机械处理，其中有效成份损失较少。

桦褐孔菌多糖提取条件优化：

采用以下方案分别提取以以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖：

方案1：桦褐孔菌水浸泡后过滤直接对提取液进行高效液相检测；

方案2：桦褐孔菌水浸泡后，加热直至煮沸持续10min，对提取液进行高效液相检测；

方案3：桦褐孔菌水浸泡后，进行辅助超声提取，提取条件为60℃，60min；

方案4：桦褐孔菌水浸泡后，加热直至煮沸持续10min，辅助超声提取，提取条件为60℃，60min。

根据图6得到方案四中桦褐孔菌多糖提取量最高。

桦褐孔菌三萜类化合物提取条件优化：

根据上述方案四提取桦褐孔菌多糖后，经过离心过滤得到滤渣，分别进行以下四种方案提取以齐墩果酸三萜类化合物：

方案1：桦褐孔菌滤渣经过乙醇水溶液浸泡后过滤直接对提取液进行高效液相检测；

方案2：桦褐孔菌滤渣经过乙醇水溶液浸泡后，加热直至70℃维持30min，进过离心过滤后，对提取液进行高效液相检测；

方案3：桦褐孔菌滤渣经过乙醇水溶液浸泡后，进行辅助超声提取，提取条件为60℃，60min；

方案4：桦褐孔菌滤渣经过乙醇水溶液浸泡后，加热直至70℃维持30min，辅助超声提取，提取条件为60℃，60min。

根据图3得到方案四中桦褐孔菌多糖提取量最高。

最终确定有效成份的提取工艺采用加热水煮再超声方法提取桦褐孔菌多糖，滤渣乙醇浸泡后再进行醇浴超声方法提取桦褐孔菌中齐墩果酸三萜类化合物。加热水煮再超声工艺条件：原料与水混合直至煮沸后持续10min，超声条件是60℃，60min；醇浴超声工艺条件：原料与乙醇水溶液混合，70℃恒温加热30min，超声条件是60℃，60min。

结论：

根据附图2可以看出，其为非机械处理和超微粉碎处理比较图，其中，原料经过手动切丁检测其中的有效成分的峰高要远高于超微粉碎，说明超微粉碎对于桦褐孔菌中有效成分损失很大。因此手动切丁是首选处理方法。

根据附图3，其采用C18色谱柱检测，1号表示先水浴再超声处理；2号表示超声处理；3号表示水浴；4号表示浸泡后未经过处理，其中，可以发现，乙醇浸泡桦褐孔菌，经过四种提取方法处理后，经过C18色谱柱进行检测，发现提取量由大到小依次如下：先水浴再超声处理>超声处理>水浴处理>浸泡后未经过处理。而C18色谱柱能够检测出在紫外光下具有一定吸收峰的物质。说明所检测的吸收峰中可能是提取出的三萜类物质。根据出峰时间，6.5和12.5min左右和溶剂峰的出峰时间相同，可以判断此为杂质，可以判断在20,27,31.5及41.5min左右出峰的物质可能是从桦褐孔菌中提取出来的有效物质。

根据附图4，其采用氨基柱色谱柱检测，1号表示先水煮再超声处理；2号表示超声处理；3号表示水煮；4号表示浸泡后未经过处理，醇浸泡桦褐孔菌，经过氨基柱色谱柱检测没有峰出现，也就是说醇提没有将其中的多糖有效成分提取出来。

根据附图5，其采用C18色谱柱检测，1号表示先水煮再超声处理；2号表示超声处理；3号表示水煮；4号表示浸泡后未经过处理。水浸泡桦褐孔菌，经过C18色谱柱检测没有峰出现，因为在紫外光下没有吸收峰，也就是说水提没有将其中的三萜类有效成分提取出来。

根据附图6，其采用氨基柱色谱柱检测，1号表示先水煮再超声处理；2号表示超声处理；3号表示水煮；4号表示浸泡后未经过处理。经过氨基柱检测，在10min左右有峰出现，说明水提后溶液中有糖类成分，而且发现提取量由大到小依次如下：先水煮再超声处理>超声处理>水煮处理>浸泡后未经过处理。

由此可见，醇提能够将桦褐孔菌中三萜类物质提取出来，而水提能够将桦褐孔菌中多糖类成分提取出来，而且桦褐孔菌经过浸泡后经过水煮再超声和醇提水浴再超声提取效果最好。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种桦褐孔菌中有效物质提取方法，其特征在于，包括：

选用桦褐孔菌原料经过破碎处理、水浸泡、加热水煮、热水浸提辅助超声提取并离心过滤得到以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖；

滤渣用乙醇浸泡、乙醇恒温浴、再辅助超声提取并离心过滤得到桦褐孔菌中的齐墩果酸三萜类化合物。

2.根据权利要求1所述的桦褐孔菌中有效物质提取方法，其特征在于，对桦褐孔菌原料经过破碎处理中，选取非机械化处理工艺。

3.根据权利要求1或2所述的桦褐孔菌中有效物质提取方法，其特征在于，水浸泡的条件：比例是1∶10(w/v)，常温浸泡，24小时。

4.根据权利要求1或2所述的桦褐孔菌中有效物质提取方法，其特征在于，乙醇浸泡的条件：比例是1∶10(w/v)，常温浸泡，24小时，乙醇浓度是90％。

5.根据权利要求1所述的桦褐孔菌中有效物质提取方法，其特征在于，加热水煮和热水浸提辅助超声提取的条件：

水浸泡后的桦褐孔菌原料与水混合直至煮沸后持续10min；超声提取的条件是60℃，1小时。

6.根据权利要求1所述的桦褐孔菌中有效物质提取方法，其特征在于，乙醇恒温浴和超声提取的条件是：

滤渣与乙醇水溶液混合，70℃恒温加热30min；超声提取条件是60℃，1小时。

7.一种桦褐孔菌茶包的制备方法，其特征在于，将按照权利要求1～6任一方法得到的以β-葡聚糖为主的桦褐孔菌多糖提取液和齐墩果酸三萜类化合物提取液以1∶1均匀混合得到桦褐孔菌混合提取液；

桦褐孔菌混合提取液经过旋转蒸发得到浓缩液；滤渣经过烘干，筛选，炒制，提取液一次附型，一次鼓风干燥，二次附型，二次鼓风干燥，称量包装即得成品。

8.根据权利要求7所述的桦褐孔菌茶包制备方法，其特征在于，桦褐孔菌提取液经过旋转蒸发浓缩，浓缩液浓度为2.2波美度。

9.根据权利要求7所述的桦褐孔菌茶包制备方法，其特征在于，滤渣经过60℃恒温干燥4h，筛选颗粒大小在0.2-03mm后经过低温炒制。

10.根据权利要求9所述的桦褐孔菌茶包制备方法，其特征在于，将桦褐孔菌提取液浸泡在炒制后的桦褐孔菌颗粒上，进行一次付型，颗粒与提取液的比例为料液比1∶2.5，进行一次干燥后，再进行桦褐孔菌提取液二次付型，比例也为料液比1∶2.5，再经过二次鼓风干燥后即得成品。