CN103983707B - 一种用于检测肉品中药物残留的方法及其前处理试剂盒 - Google Patents

一种用于检测肉品中药物残留的方法及其前处理试剂盒 Download PDF

Info

Publication number
CN103983707B
CN103983707B CN201410183213.2A CN201410183213A CN103983707B CN 103983707 B CN103983707 B CN 103983707B CN 201410183213 A CN201410183213 A CN 201410183213A CN 103983707 B CN103983707 B CN 103983707B
Authority
CN
China
Prior art keywords
kit
leacheate
volume
carry out
supernatant
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201410183213.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103983707A (zh
Inventor
王宏卫
郭黎明
饶钦雄
张宝
李宗进
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Hua Dou Broiler Chicken Co
Original Assignee
Beijing Hua Dou Broiler Chicken Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Hua Dou Broiler Chicken Co filed Critical Beijing Hua Dou Broiler Chicken Co
Priority to CN201410183213.2A priority Critical patent/CN103983707B/zh
Publication of CN103983707A publication Critical patent/CN103983707A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103983707B publication Critical patent/CN103983707B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本申请提供一种用于检测肉品中药物残留的试剂盒，其包括混合型阳离子交换固相萃取柱，所述金刚烷胺、喹诺酮类和磺胺类药物的萃取液，第一淋洗液、第二淋洗液、洗脱液和复溶液。本发明还提供了使用该试剂盒进行药物残留的检测方法。本发明将这三类药物的前处理方法进行了整合，设计出能同时进行金刚烷胺、喹诺酮类、磺胺类药物残留检测的前处理方法试剂盒，本方法试剂盒可以对以上三类药物同时进行前处理。前处理后即可使用常规技术进行样品的色谱或质谱分析。

Description

一种用于检测肉品中药物残留的方法及其前处理试剂盒
技术领域
本发明涉及一种药物残留检测，尤其涉及一种用于检测肉品中药物残留的方法及其前处理试剂盒。
背景技术
目前许多肉品企业都要进行金刚烷胺、喹诺酮类和磺胺类药物的残留检测，样品的前处理是残留检测的重要步骤，也是最消耗时间和试剂的步骤。但是现有肉品中金刚烷胺、喹诺酮类和磺胺类药物的残留检测的前处理只能做单种药物残留的前处理，效率低，需要很长的时间进行处理，有机试剂的消耗量大，造成肉品企业应用时成本很高。
发明内容
本发明旨在解决现有技术中的肉品中金刚烷胺、喹诺酮类和磺胺类药物残留检测的前处理只能做单类药物残留的前处理的问题，进而提出一种对这三类药物的前处理方法进行了整合，设计出能同时进行金刚烷胺、喹诺酮类和磺胺类药物的残留检测的前处理方法的试剂盒。
本申请提供了一种用于肉品前处理的试剂盒，其包括混合型阳离子交换固相萃取柱，金刚烷胺、喹诺酮类和磺胺类药物的萃取液，第一淋洗液、第二淋洗液、洗脱液和复溶液。
其中，所述试剂盒还包括50mL聚丙烯材质可立离心管和10mL聚丙烯材质离心管。
其中，所述试剂盒还包括过滤器。
其中，所述过滤器为0.22微米过滤器。
所述萃取液含有2-5体积％的甲酸、乙酸或三氯乙酸，50-70体积％的甲醇，以及其余体积的水。
所述第一淋洗液为1-5体积％盐酸或甲酸的水溶液；
所述第二淋洗液为色谱级甲醇或乙腈；
所述洗脱液为50-80体积％氨水的甲醇溶液；
所述复溶液为乙酸/甲醇/水溶液，所述乙酸/甲醇/水溶液中的乙酸、甲醇和水体积比1：20：79。
本发明还提供了一种用于检测肉品中药物残留的方法，该方法包括以下步骤：
(1)萃取分离
将样品放入所述萃取液中振荡，然后进行离心分离，得到上清液；
(2)所述上清液的处理
所述上清液通过所述混合型阳离子交换固相萃取柱，然后依次使用第一淋洗液和第二淋洗液进行淋洗，再使用所述洗脱液进行洗脱处理，浓缩后用所述复溶液进行复溶，得到待检测的样品溶液；
(3)检测分析
所述样品溶液进行色谱分析和/或质谱分析。
(4)结果处理与分析
其中，所述上清液的具体处理步骤包括：取适量上清液通过混合型阳离子交换固相萃取柱，使用1-5％盐酸或甲酸的水溶液，色谱级甲醇或乙腈依次淋洗；50-80体积％氨水的甲醇溶液进行洗脱处理，收集洗脱液，70℃下旋蒸或氮气吹干，用所述复溶液进行复溶。
其中，所述上清液的处理步骤还包括：使用过滤器对所述样品溶液进行过滤。
其中，所述样品溶液进行色谱分析的条件为:柱温：42℃；样品室温度10℃；进样体积10μL；流动相A为含0.1％(体积分数)甲酸的水，流动相B为乙腈，梯度洗脱；
所述样品溶液进行质谱分析的条件为:离子源:电喷雾电离(ESI+)；IonSprayvoltage5500V；温度600℃；IonSourceGas60L/h；气帘气35L/h；碰撞气:氮气，采用多反应监测(MRM)模式。
与有关技术相比，本发明实施例的有益效果如下：
(1)本发明将这三类药物的前处理方法进行了整合，设计出能同时进行金刚烷胺、喹诺酮类、磺胺类药物残留检测的前处理方法试剂盒，本方法试剂盒可以对以上三类药物同时进行前处理；前处理完成后即可使用常规技术进行样品的色谱或质谱分析。
(2)本方法可以减少3/4有机试剂的消耗；
(3)本方法采用了优化的固相萃取柱填料量和管径的比值，在保证吸附效果的同时，样本过柱速度提高1倍；
(4)使残留检测的前处理更为方便、高效、标准。
具体实施方式
以下将以实施例的方式对本发明做出进一步的说明。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互任意组合。
实施例1(鸡肉中金刚烷胺、氧氟沙星、磺胺嘧啶多残留检测)
(1)试剂盒包括：
50mL离心管为聚丙烯材质带0.5毫升分度刻度的可立离心管，20支；
10mL离心管为聚丙烯材质带0.1毫升分度刻度的离心管，20支；
固相萃取柱：混合型阳离子交换固相萃取柱(填料质量为60mg，柱体积为6毫升，无需激活，提取上清液可直接过柱)；
0.22微米滤器，采用尼龙膜或聚四氟乙烯膜针式滤器；
提取液：5％体积的甲酸，45％体积的甲醇，其余体积为水，20mL，20支；
第一淋洗液：3％盐酸溶液，60mL，1瓶；
第二淋洗液：色谱级甲醇，60mL，1瓶；
洗脱液：氨水甲醇溶液，60mL(50/50，V/V)，1瓶；
复溶液：乙酸/甲醇/水(1/20/79体积比)溶液，30mL,1瓶；
(2)前处理操作步骤
取均质好的鸡肉2克于50mL聚丙烯材质离心管中，加入提取液1支，振荡提取5-10分钟，3000-4000转离心5-10分钟获取上清液；
取上清液10mL通过混合型阳离子交换固相萃取柱，取2mL第一淋洗液和2mL第二淋洗液依次进行淋洗；取3mL洗脱液过柱，并收集洗脱液于10mL聚丙烯材质带刻度离心管中；70℃下旋蒸或氮气吹干至小于0.2mL，使用样品复溶液复溶并定容至1mL，得到待检测的样品溶液；使用0.22微米滤器过滤样品溶液，并分装于进样小瓶中，可供色谱或质谱分析。
实施例2(猪肉中金刚烷胺、诺氟沙星、磺胺甲噁唑多残留检测)
(1)试剂盒包括：
50mL离心管为聚丙烯材质带0.5毫升分度刻度的可立离心管，20支；。
10mL离心管为聚丙烯材质带0.1毫升分度刻度的离心管，20支；
固相萃取柱：混合型阳离子交换固相萃取柱(填料质量为60mg，柱体积为6毫升，无需激活，提取上清液可直接过柱)；
0.22微米滤器，采用尼龙膜或聚四氟乙烯膜针式滤器；
提取液：2％体积的三氯乙酸，48％体积的甲醇，其余体积为水，20mL，20支；
第一淋洗液：5％甲酸酸溶液，60mL，1瓶；
第二淋洗液：色谱级甲醇，60mL，1瓶；
洗脱液：氨水甲醇溶液，60mL(50/50，V/V)，1瓶；
复溶液：乙酸/甲醇/水(1/20/79体积比)溶液，30mL,1瓶；
(2)前处理操作步骤
取均质好的猪肉2克于50mL聚丙烯材质离心管中，加入提取液1支，振荡提取5-10分钟，3000-4000转离心5-10分钟获取上清液；
取上清液15mL通过混合型阳离子交换固相萃取柱，取3mL第一淋洗液和3mL第二淋洗液依次进行淋洗；取5mL洗脱液过柱，并收集洗脱液于10mL聚丙烯材质带刻度离心管中；70℃下旋蒸或氮气吹干至小于0.1mL，使用样品复溶液复溶并定容至0.75mL，得到待检测的样品溶液；使用0.22微米滤器过滤样品溶液，并分装于进样小瓶中，可供色谱或质谱分析。
实施例3(鸭肉中环丙沙星、恩诺沙星和磺胺二甲嘧啶多残留检测)
(1)试剂盒包括：
50mL离心管为聚丙烯材质带0.5毫升分度刻度的可立离心管，20支；。
10mL离心管为聚丙烯材质带0.1毫升分度刻度的离心管，20支；
固相萃取柱：混合型阳离子交换固相萃取柱(填料质量为60mg，柱体积为6毫升，无需激活，提取上清液可直接过柱)；
0.22微米滤器，采用尼龙膜或聚四氟乙烯膜针式滤器；
提取液：2％体积的三氯乙酸，48％体积的甲醇，其余体积为水，20mL，20支；
第一淋洗液：5％甲酸酸溶液，60mL，1瓶；
第二淋洗液：色谱级甲醇，60mL，1瓶；
洗脱液：氨水甲醇溶液，60mL(50/50，V/V)，1瓶；
复溶液：乙酸/甲醇/水(1/20/79体积比)溶液，30mL,1瓶；
(2)前处理操作步骤
取均质好的鸭肉2克于50mL聚丙烯材质离心管中，加入提取液1支，振荡提取5-10分钟，3000-4000转离心5-10分钟获取上清液；
取上清液5mL通过混合型阳离子交换固相萃取柱，取1mL第一淋洗液和2mL第二淋洗液依次进行淋洗；取5mL洗脱液过柱，并收集洗脱液于10mL聚丙烯材质带刻度离心管中；70℃下旋蒸或氮气吹干至小于0.1mL，使用样品复溶液复溶并定容至0.5mL，得到待检测的样品溶液；使用0.22微米滤器过滤样品溶液，并分装于进样小瓶中，可供色谱或质谱分析。
测试例
(1)对实施例1-3的样品进行检测分析，其检测分析条件如下：
液相色谱条件：
仪器为岛津液相色谱，色谱柱:AgilentPoroshell120EC-C18(30+50mm×2.1mmi.d.,1.7μm)；柱温：42℃；样品室温度10℃；进样体积10μL；流动相A为含0.1％(体积分数)甲酸的水，流动相B为乙腈，梯度洗脱，洗脱程序见表1。
表1
时间 流速 A％ B％
0 0.5 90 10
0.2 0.5 90 10
5 0.5 80 20
7 0.5 10 90
7.1 0.5 90 10
9 0.5 90 10
质谱条件：
AB5500质谱，离子源:电喷雾电离(ESI+)；IonSprayvoltage5500V；温度600℃；IonSourceGas60L/h；气帘气35L/h；碰撞气:氮气。采用多反应监测(MRM)模式,各种物质的采集参数见表2。
表2
注：“*”为定量离子
(2)试剂盒检测药物残留的重复性和变异系数
金刚烷胺、喹诺酮类、磺胺类药物的重复性和变异系数
称取经测定空白试样2g，分别加入5，10和50ng/g浓度水平的金刚烷胺、喹诺酮类、磺胺类药物混合标准溶液，充分混匀,按照实施例1的方法进行测定,每个添加水平平行测定6份。所有药物回收率，变异系数见表3。
表3
虽然本发明所揭露的实施方式如上，但所述的内容只是为了便于理解本发明而采用的实施方式，并非用以限定本发明。任何本发明所属技术领域内的技术人员，在不脱离本发明所揭露的精神和范围的前提下，可以在实施的形式上及细节上作任何的修改与变化，但本发明的专利保护范围，仍须以所附的权利要求书所界定的范围为准。

Claims (9)

1.一种用于肉品前处理的试剂盒，其特征在于，其包括混合型阳离子交换固相萃取柱，金刚烷胺、喹诺酮类和磺胺类药物的萃取液，第一淋洗液、第二淋洗液、洗脱液和复溶液，其中，所述萃取液含有2-5体积％的甲酸、乙酸或三氯乙酸，50-70体积％的甲醇，以及其余体积的水，所述第一淋洗液为1-5体积％盐酸或甲酸的水溶液；所述第二淋洗液为色谱级甲醇或乙腈；所述洗脱液为50-80体积％氨水的甲醇溶液。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括50mL聚丙烯材质可立离心管和10mL聚丙烯材质离心管。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括过滤器。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其中，所述过滤器为0.22微米过滤器。
5.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述复溶液为乙酸/甲醇/水溶液，所述乙酸/甲醇/水溶液中的乙酸、甲醇和水体积比1：20：79。
6.一种用于检测肉品中药物残留的方法，其特征在于，使用权利要求1-5中任一所述的试剂盒进行样品前处理；所述药物残留为中金刚烷胺、喹诺酮类和磺胺类药物残留，该检测方法包括以下步骤：
(1)萃取分离
将样品放入所述萃取液中振荡，然后进行离心分离，得到上清液；
(2)所述上清液的处理
所述上清液通过所述混合型阳离子交换固相萃取柱，然后依次使用第一淋洗液和第二淋洗液进行淋洗，再使用所述洗脱液进行洗脱处理，浓缩后用所述复溶液进行复溶，得到待检测的样品溶液；
(3)检测分析
所述样品溶液进行色谱分析和/或质谱分析。
(4)结果处理与分析。
7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述上清液的具体处理步骤包括：取适量上清液通过混合型阳离子交换固相萃取柱，使用1-5％盐酸或甲酸的水溶液，色谱级甲醇或乙腈依次淋洗；50-80体积％氨水的甲醇溶液进行洗脱处理，收集洗脱液，70℃下旋蒸或氮气吹干，用所述复溶液进行复溶。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其中，所述上清液的处理步骤还包括：使用过滤器对所述样品溶液进行过滤。
9.根据权利要求6或7所述的方法，其中，所述样品溶液进行色谱分析的条件为:色谱柱:AgilentPoroshell120EC-C18，柱温：42℃；样品室温度10℃；进样体积10μL；流动相A为含0.1％(体积分数)甲酸的水，流动相B为乙腈，梯度洗脱；
所述样品溶液进行质谱分析的条件为:离子源:电喷雾电离(ESI+)；IonSprayvoltage5500V；温度600℃；IonSourceGas60L/h；气帘气35L/h；碰撞气:氮气，采用多反应监测(MRM)模式。
CN201410183213.2A 2014-04-30 2014-04-30 一种用于检测肉品中药物残留的方法及其前处理试剂盒 Active CN103983707B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410183213.2A CN103983707B (zh) 2014-04-30 2014-04-30 一种用于检测肉品中药物残留的方法及其前处理试剂盒

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410183213.2A CN103983707B (zh) 2014-04-30 2014-04-30 一种用于检测肉品中药物残留的方法及其前处理试剂盒

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103983707A CN103983707A (zh) 2014-08-13
CN103983707B true CN103983707B (zh) 2016-01-20

Family

ID=51275759

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410183213.2A Active CN103983707B (zh) 2014-04-30 2014-04-30 一种用于检测肉品中药物残留的方法及其前处理试剂盒

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103983707B (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104155398B (zh) * 2014-08-21 2016-01-20 江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所 一种检测畜禽毛发中抗病毒药物残留量的方法
CN104596824A (zh) * 2015-02-14 2015-05-06 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心 含金刚烷胺和利巴韦林的鸡肉基体标准物质及其制备方法
CN106546671B (zh) * 2016-10-17 2019-05-14 浙江省食品药品检验研究院 基于三柱二维液质联用法测定肉制品中残留磺胺类药物的方法
CN108931599B (zh) * 2018-05-25 2021-06-01 无锡微色谱生物科技有限公司 一种利用dpx枪头式分散固相微萃取柱萃取及分析磺胺类药物的方法
RU2697203C1 (ru) * 2018-11-12 2019-08-13 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина" (ФГБОУ ВО Омский ГАУ) Способ определения содержания каррагинана в мясных продуктах
RU2696010C1 (ru) * 2018-12-06 2019-07-30 федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности" (ФГБНУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") Способ определения бацитрацина в мясе и мясных продуктах с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии
CN109738559A (zh) * 2019-03-06 2019-05-10 烟台大学 甲醇盐析分相提取肉类产品中喹诺酮类残留前处理方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101241114A (zh) * 2008-03-18 2008-08-13 北京锦绣大地农业股份有限公司 动物源性食品中磺胺类药物残留的基质固相分散-高效液相色谱测定方法
CN102175784A (zh) * 2011-01-19 2011-09-07 浙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心 固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定猪肉中54种药物残留的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101241114A (zh) * 2008-03-18 2008-08-13 北京锦绣大地农业股份有限公司 动物源性食品中磺胺类药物残留的基质固相分散-高效液相色谱测定方法
CN102175784A (zh) * 2011-01-19 2011-09-07 浙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心 固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定猪肉中54种药物残留的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LC-APCI-MS 同时检测猪肉中7 种磺胺类药物残留;郭伟，张春晖，臧勇军;《食品研究与开发》;20061031;第27卷(第10期);120-123 *
固相萃取-高效液相色谱在兽药残留分析中的应用研究;艾连峰;《中国优秀硕士学位全文数据库》;20061215(第12期);第8页倒数第1段、第40页第1段 *
液相色谱－串联质谱法测定动物组织中金刚烷胺和金刚乙胺的残留量;陈慧华，韦敏珏，周炜，朱聪英，应永飞;《质谱学报》;20130731;第34卷(第4期);226-232 *
猪肉组织中7种氟喹诺酮类药物残留检测高效液相色谱-串联质谱法研究;孙雷 等;《中国兽药杂志》;20080331;第42卷(第3期);材料与方法部分第1.4.5节 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN103983707A (zh) 2014-08-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103983707B (zh) 一种用于检测肉品中药物残留的方法及其前处理试剂盒
CN104483427A (zh) 一种分离富集并同时检测饮用水源水中12种抗生素的方法
CN107688067B (zh) 通窍鼻炎片的含量测定方法
CN107543876A (zh) 一种固相萃取‑液相色谱串联质谱法同时检测水体中9种雌激素类物质的方法
CN107290470B (zh) 一种快速测定鸡蛋中磺胺类和喹诺酮类药物残留的方法
CN104502518B (zh) 一种治疗小儿厌食症的中药制剂的检测方法
CN103543221A (zh) 同时检测牛奶中多种霉菌毒素的方法
CN104535702A (zh) 一种同时检测饮用水中多种痕量药物污染物的方法
CN106596780A (zh) 高压液相色谱‑质谱联用检测水中多种抗生素含量的方法
CN105203654A (zh) 一种用于测定中兽药散剂中11种非法添加药物含量的方法
CN104965042A (zh) 地表水体中若干种痕量糖皮质激素及其衍生物的检测方法
CN105784858B (zh) 环境土壤中PPCPs的测定方法
CN104155398A (zh) 一种检测畜禽毛发中抗病毒药物残留量的方法
CN110455961B (zh) 一种保健酒中多成分的高通量检测方法
CN105866315B (zh) 一种电子烟烟液中氨基酸的测定方法
CN104749292A (zh) 一种分散固相萃取富集环境水样品中痕量汞的方法
CN113655135A (zh) 一种马兜铃酸i的定量检测方法与限量方法
CN109884199B (zh) 一种蜂蜜中黄酮类成分的含量测定方法
CN103969383A (zh) 一种化妆品中氟喹诺酮类抗生素的测定方法
CN103063792B (zh) 小儿化痰止咳颗粒的检测方法
CN105628826A (zh) 一种用于检测海水及海洋沉积物中金刚烷胺残留量的高效液相色谱-串联质谱方法
CN103336080A (zh) 一种同时检测水中四环素类抗生素的方法
CN111337610A (zh) 一种复杂环境基质中痕量雌激素、壬基酚及双酚a的检测方法
CN107748211B (zh) 一种使用深共融溶剂提取测定玛咖中5种玛咖酰胺的方法
CN104569265B (zh) 一种舒筋风湿酒的质量检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant