CN103940929A - 一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法 - Google Patents
一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103940929A CN103940929A CN201410185200.9A CN201410185200A CN103940929A CN 103940929 A CN103940929 A CN 103940929A CN 201410185200 A CN201410185200 A CN 201410185200A CN 103940929 A CN103940929 A CN 103940929A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- acid
- chinese medicine
- traditional chinese
- reference substance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法,该检测方法包括丹参和红花药材的薄层鉴别方法,5-羟甲基糠醛、总固体及重金属及有害元素等检查方法,以及丹参素钠、原儿茶醛、4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A高效液相以及紫外测定总酚含量的方法。本发明所建立的中药注射液的质量检测方法,稳定性和重复性好,并能准确的定性、定量检测各有效组分及杂质成分含量,可以较全面,客观评价中药注射液的质量,最终确保其临床用药安全及疗效。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法,具体涉及检测方法包括鉴别方法、检查方法、高效液相及紫外含量中药注射液有效成分含量测定方法,属于医药技术领域。
背景技术
心脑血管疾病包括心肌梗塞、脑栓塞、脑出血及脑血管痉挛等,临床上发病率、死亡率、致残率均较高,是严重威胁人类健康的疾病之一。中医药在治疗心脑血管疾病方面历史悠久,在预防、治疗、康复方面都有明显的效果。中药注射液是我国独创药物剂型,具有生物利用度较高,起效迅速等特点。已广泛应用于危重疾病的急救及感染性、心脑血管和恶性肿瘤等疾病的治疗,特别是在心脑血管疾病方面,存在巨大的市场需求。但近年来中药注射剂不良反应病例报道频频发生,尤其可能造成过敏性休克和死亡等严重后果,对于中药注射剂的安全性问题,已经引起社会各界人士的广泛关注。由于中药注射剂中有效物质成分较多,既有治病的有效成分,又存在产生致敏反应及毒副作用的杂质成分,因此,建立更加全面严格质量检测控制指标,对保证中药注射液产品的质量有着重大的意义。
丹红注射液为菏泽步长制药有限公司独家生产品种,在临床中治疗心脑血管疾病效果显著,该药物是由丹参、红花药材制备而成,具有活血化瘀,通脉舒络的功效。主要用于瘀血闭阻所致的胸痹及中风,并见胸痛,胸闷,心悸,口眼歪斜,言语蹇涩,肢体麻木,活动不利等症,并对冠心病、心绞痛、心肌梗塞、瘀血型肺心病、缺血性脑病、脑血栓患者有较好的疗效。丹红注射液的批准文号为国药准字Z20026866,对于该中药注射液我们先申请了公开号CN102233001A的专利,其公开了处方制备工艺及质量检测方法,而目前对该中药注射液的现行质量标准中仅对丹参素钠、原儿茶醛和总黄酮含量进行控制,该标准指标不全面、方法专属性不强、且不能全面控制本品的内在质量。
丹红注射液在生产过程中,丹参药材经过“水煮”、“醇沉”制备生产中会产生5-羟甲基糠醛,5-羟甲基糠醛是葡萄糖等在高温或酸性条件下脱水产生的醛类化合物。据文献报道,该化合物对人体的横纹肌和内脏有损害。为了保证中药注射液的安全性,建立5-羟甲基糠醛杂质限量方法是非常有必要。中药注射液中的总固体包含悬浮性总固体和溶解性总固体,是指样品在一定条件下溶剂蒸干后所残留的物质,总固体含量在一定程度上能够反映出丹红注射液含量的稳定程度。本发明通过测定一定批次的丹红注射液总固体的含量,从侧面考查丹红注射液生产工艺的稳定性。中药材经过提取,纯化后,中药注射液中残留物质会影响产品的质量,但由于中药在栽培、贮存、炮制等过程中可能不同程度受到有毒有害物质的污染,故对重金属及有害元素限量显得尤为重要。
本发明从丹红注射液的安全性、有效性考虑,对中药注射液中杂质含量控制、有效成分含量测定进行多方面深入研究,并取得了显著的技术改进,其中,增加了丹参药材的薄层鉴别,改进了红花药材的鉴别条件,检查方法中对5-羟甲基糠醛、总固体、重金属及有害元素含量、异常毒性、过敏反应等检查方法,并建立了丹参素钠、原儿茶醛、4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A的高效液相及总酚含量的紫外测定方法。
为了进一步提高所述中药注射液的质量标准,尤其是在安全性、有效性和稳定性试验方面,最终有效的确保本注射剂的临床用药安全和疗效。
发明内容
本发明目的在于提供一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法,该检测方法包括丹参和红花药材的薄层鉴别项,5-羟甲基糠醛、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子、总固体、重金属及有害元素、热原、异常毒性、过敏反应、溶血与凝聚和无菌的检查项,以及丹参素钠、原儿茶醛、4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A和总酚的含量测定项。
本发明本品指所述的中药注射液,均是指由菏泽步长制药有限公司生产的丹红注射液。
该中药注射液具体的制备方法如下:取丹参750g,红花50g,加水煎煮二次,每次1小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.20~1.30(65℃)的清膏,放冷,加乙醇使含醇量达75~80%,冷藏,取上清液,回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20~1.30(65℃)的清膏,放冷,加乙醇使含醇量达80~85%,冷藏,取上清液,加入约为投料量1%的活性炭,搅拌30分钟,静置,滤过,滤液回收乙醇至无醇味,加注射用水至配置量,搅匀,加热煮沸40~50分钟,冷藏,滤过,滤液浓缩至配置量的1/3,冷藏,滤过,滤液用NaOH溶液调节pH值至6.5~7.5,加热煮沸40~50分钟,加入约为药液量0.5%的活性炭,搅匀,药液温度降至50℃,静置,滤过,滤液经超滤后,加入约为药液量0.5%的活性炭,滤过,滤液加注射用水至1000ml,调节pH值至6.5~7.5,滤过,灌封,灭菌,即得。
以下是上述中药注射液的检测方法,包括薄层鉴别项、检查项以及含量测定项,其具体内容为:
1.本发明检测方法的薄层鉴别项:
⑴取所述的注射液5ml,用稀盐酸调节pH值至2,用乙酸乙酯10ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,蒸干,残渣加无水乙醇2ml使溶解,作为供试品溶液。另取丹参对照药材0.5g,加水25ml,水浴回流2小时,放冷,滤过,滤液至分液漏斗中,用稀盐酸调节pH值至2,用乙酸乙酯20ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,蒸干,残渣加无水乙醇2ml使溶解,作为对照药材溶液。再取丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B对照品适量,加20%甲醇制成每1ml各含1mg、0.5mg和1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为2:3:2:0.5:2的甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-98%甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,置碘蒸气中熏至斑点显色清晰,置日光下检视,供试品色谱中,在与对照药材和对照品色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点。
⑵取红花对照药材0.5g,加水25ml,回流2小时,放冷,滤过,滤液用稀盐酸调节pH值至2,用乙酸乙酯20ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,蒸干,残渣加无水乙醇1ml使溶解,作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述鉴别(1)项下的供试品溶液及上述对照药材溶液各10μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为10:0.5:0.5的三氯甲烷-丙酮-98%甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
2.本发明检测方法的检查项包括以下内容:
⑴5-羟甲基糠醛:取注射液每1ml含5-羟甲基糠醛不得过0.15mg。
⑵蛋白质:取注射液1ml,加新配制的30%磺基水杨酸溶液1ml,摇匀,放置5分钟,不得出现浑浊。
⑶鞣质:取注射液1ml,加新配制的含1%鸡蛋清的生理盐水5ml,放置10分钟,不得出现浑浊或沉淀。
⑷树脂:取注射液5ml,置分液漏斗中,加三氯甲烷10ml振摇提取,分取三氯甲烷液,置水浴上蒸干,残渣加冰醋酸2ml使溶解,置具塞试管中,加水3ml,混匀,放置30分钟,不得出现沉淀。
⑸草酸盐、钾离子:照中国药典2010年版一部附录IX S注射剂有关物质检查法检查,应符合规定。
⑹炽灼残渣:取注射液10ml,依中国药典2010年版一部附录ⅨJ法检查,不得过1.5%g/ml。
⑺总固体:精密量取注射液10ml,置已干燥至恒重的蒸发皿中,水浴上蒸干,在105℃干燥3小时,移置干燥器中,冷却30分钟,迅速精密称定重量,计算,遗留残渣为2.0%~4.0%g/ml。
⑻重金属及有害元素:照中国药典2010年版一部附录IX B原子吸收分光光度法或附录XI D电感耦合等离子体质谱法测定中药注射液中铅、镉、砷、汞、铜含量,每1L注射液含铅不得过0.15mg,镉不得过37.5g,砷不得过75g、汞不得过25g,铜不得过0.6mg。
⑼热原:取注射液,依中国药典2010年版一部附录XIII A法检查,剂量按家兔体重每1kg注射3ml,应符合规定。
⑽异常毒性:取注射液,依中国药典2010年版一部附录XIII E法检查,按静脉注射法给药,应符合规定。
⑾过敏反应:取注射液,依中国药典2010年版一部附录XIII G法检查,应符合规定。
⑿溶血与凝聚:取健康家兔血液,放入含玻璃珠的锥形瓶中,振摇10分钟,以除去纤维蛋白原,使成脱纤血液。加入生理盐水溶液,摇匀,离心,除去上清液,沉淀的红细胞再用生理氯化钠溶液按上述方法洗涤2~3次,至上清液不显红色为止。将所得的红细胞用生理盐水溶液制成2%的混悬液,供试验用。取洁净试管5支,编号,1~3号管分别加入供试品0.3ml及生理盐水2.2ml,4号管加入生理盐水2.5ml作为阴性对照管,5号管加入蒸馏水2.5ml为阳性对照管,并置37℃±0.5℃的恒温箱中进行温育,观察3小时,应无溶血和凝聚反应现象。
⒀无菌:取注射液,用薄膜过滤法处理,以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌,依中国药典2010年版一部附录ⅩⅢB薄膜过滤法法检查,应符合规定。
⒁其他:应符合中国药典2010年版一部附录ⅠU注射剂项下有关的各项规定。
3、本发明检测方法的含量测定项包括如下内容:
⑴丹参素钠、原儿茶醛、4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A的测定:
(a)参照物溶液的制备:取丹参素钠对照品、原儿茶醛对照品、4-香豆酸对照品、迷迭香酸对照品、丹酚酸B对照品和丹酚酸A对照品适量,置棕色量瓶中,精密称定,加0.2%冰乙酸的10%甲醇溶液制成每1ml含丹参素钠0.25mg、原儿茶醛30μg、4-香豆酸10μg、迷迭香酸30μg、丹酚酸B40μg和丹酚酸A30μg的混合溶液,即得。
(b)供试品溶液的制备:精密量取所述的注射液2ml,置10ml量瓶中,加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,即得。
(c)色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流速为每分钟0.8ml,柱温为40℃,检测波长为288nm,理论板数按丹酚酸A峰计算应不低于200000,以乙腈为流动相A,以0.05%三氟乙酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱;
其中梯度洗脱如下:
0~65min时,乙腈所占的体积比为2→30%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为98→70%;
65~75min时,乙腈所占的体积比为30%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为70%;
75~76min时,乙腈所占的体积比为30→2%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为70→98%。
(d)测定法:分别精密吸取上述(a)和(b)中所制备的溶液各5μl,注入液相色谱仪,按照上述(c)中所述的色谱条件测定,即得。
⑵总酚含量测定:
Ⅰ对照品溶液的制备:取丹参素钠对照品适量,精密称定,加水制成每1ml含0.1mg的溶液,即得。
Ⅱ标准曲线的制备:精密量取对照品溶液2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml,分别置10ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法,在280nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
Ⅲ测定法:精密量取所述的注射液1ml,置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置25ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中丹参素钠的重量,计算;每1ml注射液含总酚以分子式为C9H9O5Na丹参素钠计,应为8.0~18.0mg。
其中所述的检查项⑴中5-羟甲基糠醛的限量测定方法为:
⑴取5-羟甲基糠醛对照品适量,精密称定,加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释制成每1ml含24μg的溶液,作为对照品溶液。
⑵供试品溶液的制备:精密量取所述的注射液2ml,置10ml量瓶中,加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,即得。
⑶色谱条件:该条件如“含量测定项下中丹参素钠、原儿茶醛、4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A的含量测定”色谱条件相同;
(d)测定法:分别精密吸取上述(1)和(2)中所制备的溶液,注入液相色谱仪,按照上述(c)中所述的色谱条件测定,即得。
本发明建立的检测方法是在本企业药品质量标准的基础上,对丹红注射液质量标准进行大量的研究而制定的,并且增加了多项限量指标,如5-羟甲基糠醛、总固体、重金属及有害元素的限度。具体有以下有益效果:
1、本发明建立的丹参和红花药材定性薄层鉴别试验,操作简便,快速,准确,并可以用于丹红注射液的真伪鉴别。
2、在质量检查方法中,我们增加了5-羟甲基糠醛、总固体、重金属及有害元素的限度检测,其中本品每1ml含5-羟甲基糠醛不得过0.15mg,遗留残渣应为2.0%~4.0%(g/ml),这将有监控对生产工艺过程稳定性,降低本品的质量风险。
3、建立了本品中的铅、镉、砷、汞、铜5种重金属及有害元素的含量测定方法。实验结果:5种测定元素的方法检测限在0.004~0.016mg·L-1,精密度RSD在1.3%~3.1%,重复性RSD在1.9%~3.6%,且5种元素加样回收率在98.76%~103.3%,样品溶液在消解后2d内各元素稳定性良好。这些数据表明,本发明所建立方法灵敏度高,专属性好,可为监控及制订中药注射液中有害元素的限量提供参考。
4、建立丹参素钠、原儿茶醛、4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A的高效液相含量测定结果表明,精密度、重复性、稳定性良好(RSD﹤0.3%),且回收率在98.56%~101.3%之间,并且进一步限定中药注射液中有效成分的含量,即每1ml本品含丹参以丹参素钠(C9H9O5Na)计,不得少于0.80mg;以原儿茶醛(C7H6O3)计,不得少于0.10mg;以迷迭香酸(C18H16O8)计,不得少于0.10mg;以丹酚酸B(C36H30O16)计,不得少于0.16mg;以丹酚酸A(C26H22O10)计,不得少于0.10mg。含红花以4-香豆酸(C9H8O3)计,不得少于20μg。对这些定量指标的控制,有效保证中药注射液中有效物质成分稳定性。
5、本发明紫外法测定中药注射液中总酚含量,实验结果表明,精密度、重复性的RSD均<2%,平均回收率为99.43%。说明此方法具有简便、准确等优点。经过大量试验验证,本品每1ml含总酚以丹参素钠(C9H9O5Na)计,含量控制在8.0~18.0mg之间,此类更加有效控制产品的质量,保证中药注射液制备工艺过程中的稳定性。
本发明建立的检测方法用于企业对丹红注射液内在质量检测,所建立的方法具有重现性良好、稳定性可靠的特点,并可以对本品的质量的安全性、有效性进行评价。
具体实施方式
为了更加充分理解本发明的实施,下面通过典型的实施例对本发明做进一步的说明。
除非另作定义,本发明专利申请说明书以及权利要求书中使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域内具有一般技能的人士所理解的通常意义。
实施例1:中药注射液鉴别方法
⑴取本品5ml,用稀盐酸调节pH值至2,用乙酸乙酯10ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,蒸干,残渣加无水乙醇2ml使溶解,作为供试品溶液。另取丹参对照药材0.5g,加水25ml,水浴回流2小时,放冷,滤过,滤液至分液漏斗中,用稀盐酸调节pH值至2,用乙酸乙酯20ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,蒸干,残渣加无水乙醇2ml使溶解,作为对照药材溶液。再取丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B对照品适量,加20%甲醇制成每1ml各含1mg、0.5mg和1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为2:3:2:0.5:2的甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-98%甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,置碘蒸气中熏至斑点显色清晰,置日光下检视,供试品色谱中,在与对照药材和对照品色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点。
⑵取红花对照药材0.5g,加水25ml,回流2小时,放冷,滤过,滤液用稀盐酸调节pH值至2,用乙酸乙酯20ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,蒸干,残渣加无水乙醇1ml使溶解,作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述鉴别(1)项下的供试品溶液及上述对照药材溶液各10μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为10:0.5:0.5的三氯甲烷-丙酮-98%甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
实施例2:中药注射液检查方法
①5-羟甲基糠醛⑴取5-羟甲基糠醛对照品适量,精密称定,加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释制成每1ml含24μg的溶液,作为对照品溶液。⑵色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流速为每分钟0.8ml,柱温为40℃;检测波长为288nm,理论板数按丹酚酸A峰计算应不低于200000,以乙腈为流动相A,以0.05%三氟乙酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱;0~65min时,乙腈所占的体积比为2→30%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为98→70%;65~75min时,乙腈所占的体积比为30%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为70%;75~76min时,乙腈所占的体积比为30→2%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为70→98%;分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,即得,注射液每1ml含5-羟甲基糠醛不得过0.15mg。
④蛋白质取本品1ml,加新配制的30%磺基水杨酸溶液1ml,摇匀,放置5分钟,不得出现浑浊。
⑤鞣质取本品1ml,加新配制的含1%鸡蛋清的生理盐水5ml,放置10分钟,不得出现浑浊或沉淀。
⑥树脂取本品5ml,置分液漏斗中,加三氯甲烷10ml振摇提取,分取三氯甲烷液,置水浴上蒸干,残渣加冰醋酸2ml使溶解,置具塞试管中,加水3ml,混匀,放置30分钟,不得出现沉淀。
⑦草酸盐、钾离子照注射剂有关物质检查法(中国药典2010年版一部附录IX S)检查,应符合规定。
⑧炽灼残渣取本品10ml,依法检查(中国药典2010年版一部附录ⅨJ),不得过1.5%(g/ml)。
⑨总固体精密量取本品10ml,置已干燥至恒重的蒸发皿中,水浴上蒸干,在105℃干燥3小时,移置干燥器中,冷却30分钟,迅速精密称定重量,计算。遗留残渣应为2.0%~4.0%(g/ml)。
⑩重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法(中国药典2010年版一部附录IX B原子吸收分光光度法或附录XI D电感耦合等离子体质谱法)测定,每1L含铅不得过0.15mg,镉不得过37.5g,砷不得过75g、汞不得过25g,铜不得过0.6mg。
热原取本品,依法检查(中国药典2010年版一部附录XIII A),剂量按家兔体重每1kg注射3ml,应符合规定。
异常毒性取本品,依法检查(中国药典2010年版一部附录XIII E),按静脉注射法给药,应符合规定。
过敏反应取本品,依法检查(中国药典2010年版一部附录XIII G),应符合规定。
溶血与凝聚
2%红细胞混悬液的制备取健康家兔血液,放入含玻璃珠的锥形瓶中振摇10分钟,或用玻璃棒搅动血液,以除去纤维蛋白原,使成脱纤血液。加入0.9%氯化钠溶液约10倍量,摇匀,每分钟1000~1500转离心15分钟,除去上清液,沉淀的红细胞再用0.9%氯化钠溶液按上述方法洗涤2~3次,至上清液不显红色为止。将所得的红细胞用0.9%氯化钠溶液制成2%的混悬液,供试验用。
供试品溶液的制备取本发明中药注射液。
检查法取洁净试管5支,编号,1、2、3号管为供试品管,4号管为阴性对照管,5号管为阳性对照管。按下表1所示依次加入2%红细胞混悬液、0.9%氯化钠溶液或蒸馏水和供试品溶液,混匀后,立即置37℃±0.5℃的恒温箱中进行温育。3小时后观察溶血和凝聚反应。
表1溶血试验
如试管中的溶液呈澄明红色,管底无细胞残留或有少量红细胞残留,表明有溶血发生;如红细胞全部下沉,上清液澄明,则表明无溶血发生。若溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀,轻轻倒转3次仍不分散,表明可能有红细胞凝聚发生,应进一步置显微镜下观察,如可见红细胞聚集为凝聚。
结果判定当阴性对照管无溶血和凝聚发生,阳性对照管有溶血发生时,若供试品管中的溶液在3小时内不发生溶血和凝聚,判定供试品符合规定;若供试品管中的溶液在3小时内发生溶血和(或)凝聚,判供试品不符合规定。
无菌取本品,用薄膜过滤法处理,以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌,依法检查(中国药典2010年版一部附录ⅩⅢB薄膜过滤法),应符合规定。
溶液的颜色精密量取本品0.5ml,置25ml纳氏比色管中,加水稀释至25ml,摇匀,与黄色7号标准比色液(中国药典2010年版一部附录ⅪA第一法)比较,不得更深。
pH值应为4.5~6.5(中国药典2010年版一部附录Ⅶ)。
其他应符合注射剂项下有关的各项规定(中国药典2010年版一部附录ⅠU)。
实施例3:丹参素钠、原儿茶醛、4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B和丹酚酸A高效液相含量测定
⑴仪器与试剂
安捷伦1100系列高效液相色谱仪(Agilent Chemstation工作站)电子分析天平(型号BP211D,德国赛多利斯天平有限公司);超声波清洗器(型号:KQ-250DE型,昆山市超声仪器有限公司);Agilent ZORBAX Extend-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);丹参素钠对照品、原儿茶醛对照品、4-香豆酸对照品、迷迭香酸对照品、丹酚酸B对照品和丹酚酸A对照品购于中国生物制品检验所。
⑵试药
10批本发明中药注射液均由菏泽步长制药有限公司生产,10批样品编号分别为Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10,国药准字Z20026866,为注射液。水为娃哈哈牌纯净水,其他试剂均为分析纯。
⑶供试品溶液的制备精密量取注射液2ml,置10ml量瓶中,加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,即得。
⑷对照品溶液的制备取丹参素钠对照品、原儿茶醛对照品、4-香豆酸对照品、迷迭香酸对照品、丹酚酸B对照品和丹酚酸A对照品适量,置棕色量瓶中,精密称定,加0.2%冰乙酸的10%甲醇溶液制成每1ml含丹参素钠0.25mg、原儿茶醛30μg、4-香豆酸10μg、迷迭香酸30μg、丹酚酸B40μg和丹酚酸A30μg的混合溶液,即得。
⑸色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流速为每分钟0.8ml,柱温为40℃;检测波长为288nm,理论板数按丹酚酸A峰计算应不低于200000,以乙腈为流动相A,以0.05%三氟乙酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱;
其中梯度洗脱如下:
0~65min时,乙腈所占的体积比为2→30%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为98→70%;
65~75min时,乙腈所占的体积比为30%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为70%;
75~76min时,乙腈所占的体积比为30→2%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为70→98%。
⑹方法学考察:
Ⅰ精密度试验
精密吸取混合对照品溶液10μl注入液相色谱仪,连续进样6次,丹参素钠、原儿茶醛4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A峰面积的RSD分别为0.13%,0.16%,0.19%,0.23%,0.26%,0.18%。
Ⅱ重复性试验
取中药注射液样品Y5,5μl注入液相色谱仪,连续测定6次,丹参素钠、原儿茶醛4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A峰面积的RSD分别为0.16%,0.18%,0.21%,0.22%,0.23%,0.20%。
Ⅲ稳定性试验
精密吸取混合对照品溶液10μl注入液相色谱仪,分别于0h,4h,8h,12h,18h,24h,照“实施例3项下中(5)色谱条件”进行测定,测定24h内混合对照品溶液的峰面积RSD分别为0.21%,0.31%,0.27%,0.25%,0.19%,0.22%。
Ⅳ回收率试验
精密量取已知浓度的样品Y5注射液2ml,共计6份,置10ml量瓶中,分别精密加入丹参素钠5.16mg、原儿茶醛0.06mg、4-香豆酸12μg、迷迭香酸0.42mg、丹酚酸B0.08mg和丹酚酸0.8mg,用0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释至刻度。照“实施例3项下中(5)色谱条件”进行测定,进样量5μl,计算各待测成分的平均回收率分别为:98.87%,99.26%,101.30%,99.06%,98.56%,99.43%。
本品每1ml含丹参以丹参素钠(C9H9O5Na)计,不得少于0.80mg;以原儿茶醛(C7H6O3)计,不得少于0.10mg;以迷迭香酸(C18H16O8)计,不得少于0.10mg;以丹酚酸B(C36H30O16)计,不得少于0.16mg;以丹酚酸A(C26H22O10)计,不得少于0.10mg。含红花以4-香豆酸(C9H8O3)计,不得少于20μg。
实施例4总酚含量测定
⑴仪器与试剂
紫外分光光度计UV-2450(日本岛津公司);AY120电子分析天平(日本Shimadzu公司);总酚、丹参素钠购于中国生物制品检验所。
⑵对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量,精密称定,加水制成每1ml含0.1mg的溶液,即得。
⑶供试品溶液的制备精密量取本品1ml,置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置25ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
⑷标准曲线的制备精密量取对照品溶液2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml,分别置10ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版一部附录ⅤA),在280nm的波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
⑸方法学考察:
Ⅰ精密度试验
精密量取供试品溶液2ml,共计6份,置25ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中丹参素钠的重量,计算,即得。结果RSD<1.6%,表明该方法重现性良好。
Ⅱ重复性试验
精密吸取供试品溶液2ml,置25ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,依法测定吸光度,依法测定吸光度,重复测定6次,结果RSD<1.3%,结果表明,该方法重现性良好。
Ⅲ稳定性试验
精密吸取供试品溶液2ml,置25ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,依法测定吸光度,在0h、1h、2h、4h、8h、12h测定吸光度,结果RSD<1.8%,表明该方法重现性良好。
Ⅳ回收率试验
精密吸取供试品溶液2ml,共计6份,置25ml量瓶中,分别加入等量的丹参素钠对照品溶液4ml,加水稀释至刻度,摇匀,依法测定吸光度,计算回收率,实验结果为99.03%,98.26%,100.68%,98.75%,99.39%,100.47%。
本品每1ml含总酚以丹参素钠(C9H9O5Na)计,应为8.0~18.0mg。
以上的实验结果表明,该方法稳定性可靠,可作为控制本品的质量控制的方法,并可作为鉴别本品的真伪的鉴别方法。
最后应说明的是:本发明并不局限于上述的具体实施方案,上述的具体实施方案仅仅是示意性的、指导性的,而不是限制性的。本领域的普通技术人员在本说明书的启示下,但凡在本发明的精神和实质范围内,所作的任何改变、等同替换和改进,均在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法,所述的中药注射液是由750重量份的丹参和250重量份的红花原料药制备而成,其特征在于,该检测方法包括丹参和红花药材的薄层鉴别项,5-羟甲基糠醛、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子、总固体、重金属及有害元素、热原、异常毒性、过敏反应、溶血与凝聚和无菌的检查项,以及丹参素钠、原儿茶醛、4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A的高效液相和紫外测定总酚的含量测定项。
2.如权利要求1所述中药注射液的检测方法,其特征在于,所述的薄层鉴别项包括以下内容:
⑴取所述的注射液5ml,用稀盐酸调节pH值至2,用乙酸乙酯10ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,蒸干,残渣加无水乙醇2ml使溶解,作为供试品溶液;另取丹参对照药材0.5g,加水25ml,水浴回流2小时,放冷,滤过,滤液至分液漏斗中,用稀盐酸调节pH值至2,用乙酸乙酯20ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,蒸干,残渣加无水乙醇2ml使溶解,作为对照药材溶液;再取丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B对照品适量,加20%甲醇制成每1ml各含1mg、0.5mg和1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为2:3:2:0.5:2的甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-98%甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,置碘蒸气中熏至斑点显色清晰,置日光下检视,供试品色谱中,在与对照药材和对照品色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点;
⑵取红花对照药材0.5g,加水25ml,回流2小时,放冷,滤过,滤液用稀盐酸调节pH值至2,用乙酸乙酯20ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,蒸干,残渣加无水乙醇1ml使溶解,作为对照药材溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述鉴别(1)项下的供试品溶液及上述对照药材溶液各10μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为10:0.5:0.5的三氯甲烷-丙酮-98%甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯254nm下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
3.如权利要求1所述中药注射液的检测方法,其特征在于,所述的检查项包括以下内容:
⑴5-羟甲基糠醛:取注射液每1ml含5-羟甲基糠醛不得过0.15mg;
⑵蛋白质:取注射液1ml,加新配制的30%磺基水杨酸溶液1ml,摇匀,放置5分钟,不得出现浑浊;
⑶鞣质:取注射液1ml,加新配制的含1%鸡蛋清的生理盐水5ml,放置10分钟,不得出现浑浊或沉淀;
⑷树脂:取注射液5ml,置分液漏斗中,加三氯甲烷10ml振摇提取,分取三氯甲烷液,置水浴上蒸干,残渣加冰醋酸2ml使溶解,置具塞试管中,加水3ml,混匀,放置30分钟,不得出现沉淀;
⑸草酸盐、钾离子:照中国药典2010年版一部附录IX S注射剂有关物质检查法检查,应符合规定;
⑹炽灼残渣:取注射液10ml,依中国药典2010年版一部附录ⅨJ法检查,不得过1.5%g/ml;
⑺总固体:精密量取注射液10ml,置已干燥至恒重的蒸发皿中,水浴上蒸干,在105℃干燥3小时,移置干燥器中,冷却30分钟,迅速精密称定重量,计算,遗留残渣为2.0%~4.0%g/ml;
⑻重金属及有害元素:照中国药典2010年版一部附录IX B原子吸收分光光度法或附录XI D电感耦合等离子体质谱法测定中药注射液中铅、镉、砷、汞、铜含量,每1L注射液含铅不得过0.15mg,镉不得过37.5g,砷不得过75g、汞不得过25g,铜不得过0.6mg;
⑼热原:取注射液,依中国药典2010年版一部附录XIII A法检查,剂量按家兔体重每1kg注射3ml,应符合规定;
⑽异常毒性:取注射液,依中国药典2010年版一部附录XIII E法检查,按静脉注射法给药,应符合规定;
⑾过敏反应:取注射液,依中国药典2010年版一部附录XIII G法检查,应符合规定;
⑿溶血与凝聚:取健康家兔血液,放入含玻璃珠的锥形瓶中,振摇10分钟,以除去纤维蛋白原,使成脱纤血液,加入生理盐水溶液,摇匀,离心,除去上清液,沉淀的红细胞再用生理氯化钠溶液按上述方法洗涤2~3次,至上清液不显红色为止,将所得的红细胞用生理盐水溶液制成2%的混悬液,供试验用;取洁净试管5支,编号,1~3号管分别加入供试品0.3ml及生理盐水2.2ml,4号管加入生理盐水2.5ml作为阴性对照管,5号管加入蒸馏水2.5ml为阳性对照管,并置37℃±0.5℃的恒温箱中进行温育,观察3小时,应无溶血和凝聚反应现象;
⒀无菌:取注射液,用薄膜过滤法处理,以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌,依中国药典2010年版一部附录ⅩⅢB薄膜过滤法法检查,应符合规定;
⒁其他:应符合中国药典2010年版一部附录ⅠU注射剂项下有关的各项规定。
4.如权利要求1所述的中药注射液的检测方法,其特征在于,所述的含量测定项为如下方法:
⑴丹参素钠、原儿茶醛、4-香豆酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A的测定:
(a)参照物溶液的制备:取丹参素钠对照品、原儿茶醛对照品、4-香豆酸对照品、迷迭香酸对照品、丹酚酸B对照品和丹酚酸A对照品适量,置棕色量瓶中,精密称定,加0.2%冰乙酸的10%甲醇溶液制成每1ml含丹参素钠0.25mg、原儿茶醛30μg、4-香豆酸10μg、迷迭香酸30μg、丹酚酸B40μg和丹酚酸A30μg的混合溶液,即得;
(b)供试品溶液的制备:精密量取所述的注射液2ml,置10ml量瓶中,加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,即得;
(c)色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流速为每分钟0.8ml,柱温为40℃;检测波长为288nm,理论板数按丹酚酸A峰计算应不低于200000,以乙腈为流动相A,以0.05%三氟乙酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱;
其中梯度洗脱如下:
0~65min时,乙腈所占的体积比为2→30%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为98→70%;
65~75min时,乙腈所占的体积比为30%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为70%;
75~76min时,乙腈所占的体积比为30→2%,以0.05%三氟乙酸溶液占的体积比为70→98%;
(d)测定法:分别精密吸取上述(a)和(b)中所制备的溶液各5μl,注入液相色谱仪,按照上述(c)中所述的色谱条件测定,即得;
⑵总酚含量测定:
Ⅰ对照品溶液的制备:取丹参素钠对照品适量,精密称定,加水制成每1ml含0.1mg的溶液,即得,
Ⅱ标准曲线的制备:精密量取对照品溶液2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml,分别置10ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法,在280nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线;
Ⅲ测定法:精密量取所述的注射液1ml,置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置25ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中丹参素钠的重量,计算;每1ml注射液含总酚以分子式为C9H9O5Na丹参素钠计,应为8.0~18.0mg。
5.如权利要求3所述中药注射液的检测方法,其特征在于,所述的检查项⑴中5-羟甲基糠醛的限量测定方法为:
⑴取5-羟甲基糠醛对照品适量,精密称定,加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释制成每1ml含24μg的溶液,作为对照品溶液;
⑵供试品溶液的制备:精密量取所述的注射液2ml,置10ml量瓶中,加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,即得;
⑶色谱条件:该条件与权利要求4中所述的⑴中含量测定的色谱条件相同;
(d)测定法:分别精密吸取上述(1)和(2)中所制备的溶液,注入液相色谱仪,按照上述(c)中所述的色谱条件测定,即得。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410185200.9A CN103940929B (zh) | 2014-05-05 | 2014-05-05 | 一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410185200.9A CN103940929B (zh) | 2014-05-05 | 2014-05-05 | 一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103940929A true CN103940929A (zh) | 2014-07-23 |
CN103940929B CN103940929B (zh) | 2015-11-04 |
Family
ID=51188683
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201410185200.9A Active CN103940929B (zh) | 2014-05-05 | 2014-05-05 | 一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103940929B (zh) |
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105943605A (zh) * | 2016-06-29 | 2016-09-21 | 山东省科学院生物研究所 | 丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用 |
CN108195972A (zh) * | 2018-03-15 | 2018-06-22 | 北京红太阳药业有限公司 | 一种同时测定丹七制剂中多种酚酸类化合物含量的方法 |
CN109632928A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-04-16 | 上海微谱化工技术服务有限公司 | 一种盐酸阿芬太尼制剂的分析方法 |
CN109632933A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-04-16 | 上海微谱化工技术服务有限公司 | 一种脂肪乳注射液的分析方法 |
CN109668887A (zh) * | 2019-02-26 | 2019-04-23 | 云南中医学院 | 一种中药注射剂微量蛋白质的检查方法 |
CN109668886A (zh) * | 2019-02-26 | 2019-04-23 | 云南中医学院 | 一种中药注射剂微量鞣质的检查方法 |
CN110780018A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-02-11 | 广东红珊瑚药业有限公司 | 一种精肝颗粒的质量控制方法 |
CN111089919A (zh) * | 2019-12-29 | 2020-05-01 | 贵州景峰注射剂有限公司 | 一种丹参药物的质量检测方法 |
CN112540138A (zh) * | 2020-03-11 | 2021-03-23 | 中国中医科学院西苑医院 | 一种血浆中丹酚酸b、阿司匹林、水杨酸的联合定量测定方法 |
CN112946056A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-06-11 | 山东省食品药品检验研究院 | 一种丙氨酰谷氨酰胺注射液中铝元素的检测方法 |
CN113514595A (zh) * | 2021-04-27 | 2021-10-19 | 云南省农业科学院经济作物研究所 | 一种半定量测定羟基红花黄色素a的快速检测方法 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1689636A (zh) * | 2004-04-07 | 2005-11-02 | 北京奇源益德药物研究所 | 以丹参和红花制成的中药注射剂的质量控制方法 |
CN101040906A (zh) * | 2006-03-21 | 2007-09-26 | 北京因科瑞斯生物制品研究所 | 一种治疗心脑血管疾病的注射剂及其制备方法和质控方法 |
CN101181333A (zh) * | 2007-11-22 | 2008-05-21 | 咸阳步长医药科技发展有限公司 | 治疗心脑血管疾病的中药注射剂及其制法和质量控制方法 |
CN102621246A (zh) * | 2012-04-13 | 2012-08-01 | 浙江中医药大学 | 使用hplc-dad同时测定丹红注射液中6种有效成分含量的方法 |
CN102692462A (zh) * | 2012-06-03 | 2012-09-26 | 浙江大学 | 一种丹红注射液质量控制方法 |
CN103760254A (zh) * | 2014-01-03 | 2014-04-30 | 陕西步长制药有限公司 | 一种治疗冠心病的中药制剂的指纹图谱测定方法 |
-
2014
- 2014-05-05 CN CN201410185200.9A patent/CN103940929B/zh active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1689636A (zh) * | 2004-04-07 | 2005-11-02 | 北京奇源益德药物研究所 | 以丹参和红花制成的中药注射剂的质量控制方法 |
CN101040906A (zh) * | 2006-03-21 | 2007-09-26 | 北京因科瑞斯生物制品研究所 | 一种治疗心脑血管疾病的注射剂及其制备方法和质控方法 |
CN101181333A (zh) * | 2007-11-22 | 2008-05-21 | 咸阳步长医药科技发展有限公司 | 治疗心脑血管疾病的中药注射剂及其制法和质量控制方法 |
CN102621246A (zh) * | 2012-04-13 | 2012-08-01 | 浙江中医药大学 | 使用hplc-dad同时测定丹红注射液中6种有效成分含量的方法 |
CN102692462A (zh) * | 2012-06-03 | 2012-09-26 | 浙江大学 | 一种丹红注射液质量控制方法 |
CN103760254A (zh) * | 2014-01-03 | 2014-04-30 | 陕西步长制药有限公司 | 一种治疗冠心病的中药制剂的指纹图谱测定方法 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
冯彬彬 等: "丹七片的质量标准研究", 《浙江中医药大学学报》 * |
国家药品监督管理局: "《中华人民共和国国家药品监督管理局标准(试行) WS-11220(ZD-1220)-2002》", 16 November 2002 * |
李耿 等: "丹参类注射剂中主要成分含量的比较分析", 《中国药房》 * |
汪悦 等: "丹红注射液多元指纹图谱及多成分定量分析研究", 《中草药》 * |
Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105943605A (zh) * | 2016-06-29 | 2016-09-21 | 山东省科学院生物研究所 | 丹红注射液作为特非那定心脏不良反应拮抗剂的应用 |
CN108195972B (zh) * | 2018-03-15 | 2020-12-15 | 北京红太阳药业有限公司 | 一种同时测定丹七制剂中多种酚酸类化合物含量的方法 |
CN108195972A (zh) * | 2018-03-15 | 2018-06-22 | 北京红太阳药业有限公司 | 一种同时测定丹七制剂中多种酚酸类化合物含量的方法 |
CN109632928A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-04-16 | 上海微谱化工技术服务有限公司 | 一种盐酸阿芬太尼制剂的分析方法 |
CN109632933A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-04-16 | 上海微谱化工技术服务有限公司 | 一种脂肪乳注射液的分析方法 |
CN109632933B (zh) * | 2018-12-29 | 2021-11-16 | 上海微谱化工技术服务有限公司 | 一种脂肪乳注射液的分析方法 |
CN109668887A (zh) * | 2019-02-26 | 2019-04-23 | 云南中医学院 | 一种中药注射剂微量蛋白质的检查方法 |
CN109668886A (zh) * | 2019-02-26 | 2019-04-23 | 云南中医学院 | 一种中药注射剂微量鞣质的检查方法 |
CN110780018A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-02-11 | 广东红珊瑚药业有限公司 | 一种精肝颗粒的质量控制方法 |
CN111089919A (zh) * | 2019-12-29 | 2020-05-01 | 贵州景峰注射剂有限公司 | 一种丹参药物的质量检测方法 |
CN112540138A (zh) * | 2020-03-11 | 2021-03-23 | 中国中医科学院西苑医院 | 一种血浆中丹酚酸b、阿司匹林、水杨酸的联合定量测定方法 |
CN112946056A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-06-11 | 山东省食品药品检验研究院 | 一种丙氨酰谷氨酰胺注射液中铝元素的检测方法 |
CN113514595A (zh) * | 2021-04-27 | 2021-10-19 | 云南省农业科学院经济作物研究所 | 一种半定量测定羟基红花黄色素a的快速检测方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103940929B (zh) | 2015-11-04 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103940929B (zh) | 一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法 | |
KR20150001777A (ko) | 징코라이드의 추출 분리 방법 | |
CN109828059A (zh) | 桂枝芍药知母汤的检测方法 | |
CN102269751B (zh) | 六味能消制剂的检测方法 | |
CN107991425B (zh) | 一种治疗跌打损伤的中药组合物的检测方法 | |
CN104161847B (zh) | 一种治疗糖尿病视网膜病变的中药组合物的质量检测方法 | |
CN102353732B (zh) | 一种珍龙醒脑制剂的质量检测方法 | |
CN100418563C (zh) | 一种中药制剂的质量控制方法 | |
CN102269752B (zh) | 一种药物组合物制剂的检测方法 | |
CN102579734A (zh) | 骨愈灵中药组合物及其制备方法和检测方法 | |
CN110579545A (zh) | 清热宣肺的中药组合物的质量检测方法 | |
CN102397517A (zh) | 藏降脂制剂的质量控制方法 | |
CN104391072A (zh) | 一种治疗骨质疏松症的中药复方制剂的质量控制方法 | |
CN101700262A (zh) | 穿心莲滴丸的质量控制方法 | |
CN102914615A (zh) | 复方苁蓉益智胶囊的检测方法 | |
CN104483408A (zh) | 一种中药制剂心速宁胶囊的检测方法 | |
CN102397331A (zh) | 一种高纯度银黄可溶性粉的制备及质量检测方法 | |
CN101926889A (zh) | 芍杞颗粒剂的检测方法 | |
Chen et al. | Simultaneous determination of 5 phenolic acids in fried Fructus xanthii from different production sites and its dispensing granules by using ultra-pressure liquid chromatography | |
CN105806964A (zh) | 刺五加甘草制剂的检测方法及其应用 | |
CN101306129B (zh) | 一种治疗高血压的中药复方制剂及其制备方法 | |
CN103604898A (zh) | 益心舒制剂的指纹图谱检测方法及其指纹图谱 | |
CN111896637B (zh) | 一种金青中间体的检测方法及其指纹图谱构建方法 | |
CN113655166A (zh) | 一种金花清感颗粒中14种成分的高效液相检测方法 | |
CN110568120B (zh) | 基于双物质成分的桑寄生质量控制方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |