CN103596583A - 新型胰高血糖素类似物 - Google Patents

新型胰高血糖素类似物 Download PDF

Info

Publication number
CN103596583A
CN103596583A CN201280015759.6A CN201280015759A CN103596583A CN 103596583 A CN103596583 A CN 103596583A CN 201280015759 A CN201280015759 A CN 201280015759A CN 103596583 A CN103596583 A CN 103596583A
Authority
CN
China
Prior art keywords
amino
carboxyl
bytyry
carboxyl bytyry
glucagon
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201280015759.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103596583B (zh
Inventor
J.F.劳
T.克鲁塞
H.托格森
T.N.克罗格
U·森斯弗兹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Novo Nordisk AS
Original Assignee
Novo Nordisk AS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novo Nordisk AS filed Critical Novo Nordisk AS
Publication of CN103596583A publication Critical patent/CN103596583A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103596583B publication Critical patent/CN103596583B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/26—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/02—Antidotes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives

Abstract

本发明涉及在中性pH下具有改进稳定性和溶解性的新颖胰高血糖素肽，涉及所述化合物在治疗中的用途，涉及包括将所述化合物给其需要患者施用的治疗方法，和涉及所述化合物在制备药物中的用途。本发明的胰高血糖素肽特别相关于治疗高血糖症，糖尿病和肥胖，以及与高血糖症、糖尿病和肥胖有关的多种疾病或病况。

Description

新型胰高血糖素类似物
技术领域
本发明涉及具有改进物理稳定性和溶解性的胰高血糖素肽类似物的新型衍生物，涉及所述肽在治疗中的用途，涉及包括将所述肽给患者施用的治疗方法，和涉及所述肽在药物制备中的用途。
背景技术
对人类和其它哺乳动物的血糖水平的精确控制是至关重要的。十分确定的是胰岛素和胰高血糖素这两种激素对于维持适当的血糖水平很重要。胰岛素通过增加葡萄糖外周摄取和减少自肝脏输出的葡萄糖以降低血糖水平而作用于肝脏和外周组织，与此同时，胰高血糖素通过糖原异生和糖原分解的上调以提高血糖水平而主要作用于胰腺和肝脏。据报道，胰高血糖素也增加脂解作用，诱导酮症并降低血浆中的血浆甘油三酯水平[Schade和Eaton，Acta　Diabetologica，1977，14，62]。
人胰高血糖素是长度为29个残基的线性肽，胰高血糖素的大小和序列的独特组合导致在制备和使用中处理肽相当困难。该分子太小而不拥有大量且稳定性的三级结构，但又大到足以参与相变，例如形成β折叠样聚集体或纤维结构。人胰高血糖素在pH 3～9范围内具有固有的低溶解度，因而必须在酸性和碱性配方间作出选择。此外，由于天然胰高血糖素中存在易于碱催化脱酰胺的数个残基，胰高血糖素在高pH(>10)时仅可进行短时间处理。因此，处理溶液中胰高血糖素的问题起因于从更有特色的结构中分开完全随机构象的相当小的能量屏障，所述结构包括例如受体结合和激活的那些结构以及能够形成原纤维的那些结构。市售胰高血糖素(Eli Lilly和Novo Nordisk)主要用于胰岛素引起的低血糖(例如胰岛素休克)，其作为冻干固体供应，在使用前必须溶解。由于胰高血糖素在水溶液中不稳定，在几个小时后变为粘性或混浊，因此溶液必须在制备后马上注射。复杂和耗时的溶解过程被认为是可能需要迅速起作用以对抵低血糖的患者或亲属的主要问题。
胰高血糖素除了用于治疗急性低血糖症众所周知的用途外，最重要的应用是基于其对平滑肌的解痉作用，其在临床上与几种成像方法尤其是腹部X射线结合使用。
披露不同的基于胰高血糖素的类似物和GLP-1/胰高血糖素受体共同激动剂的几个专利申请是本领域已知的，例如专利WO2008/086086、WO2008/101017、WO2007/056362、WO2008/152403、W096/29342、WO09/155257、W010/011439和W010/148089。披露于这些专利中的一些GLP-1/胰高血糖素受体共同激动剂涉及相对于天然人胰高血糖素的特定突变。所披露的其它胰高血糖素类似物是聚乙二醇化的(例如WO2007/056362)或者是在天然人胰高血糖素的特定位置上酰化的(例如WO96/29342)。用于预防低血糖的胰高血糖素已披露于例如专利申请US 7314859中。
本发明的肽提供在溶液中具有改进物理稳定性的胰高血糖素肽类似物的新型衍生物。
发明概述
本发明涉及胰高血糖素肽类似物的新型衍生物，其在溶液中具有改进的物理稳定性和在中性pH时具有改进的溶解度，涉及所述肽在治疗中的用途，涉及包括给患者施用所述肽的治疗方法，和涉及所述肽在制备用于治疗糖尿病、肥胖以及相关疾病和病况如低血糖症的药物中的用途。
在第一种实施方案(实施方案1)中，本发明涉及式[I]的胰高血糖素肽类似物的衍生物、或其药学上可接受的盐、酰胺或羧酸：
His-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-X18-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29-X30　　[I]
包括连接到所述胰高血糖素肽位置X12、X16、X20、X21、X24、X28、X29、和/或X30中的氨基酸侧链氮的取代基，且其中所述取代基具有式II：
Y1-Y2-Y3-Y4-Y5-Y6-Y7-Y8-Y9-Y10-Y11-Y12　　[II]
其中
Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10和Y11各自缺失或各自代表氨基酸或i、ii、iii或iv，其具有立体化学构型L或D，或结构v
Figure DEST_PATH_IMAGE001
Y12缺失或代表C2-6酰基或琥珀酰基部分(succinoyl moiety)，条件为式II的取代基包含三至十个带负电荷的部分。
在另一实施方案(实施方案2)中，本发明涉及根据实施方案1的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中：
Y1缺失或代表氨基酸，例如但不限于Arg、ε-Lys或Gly；
Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10或Y11各自缺失或各自代表氨基酸或i或ii；
Figure 14538DEST_PATH_IMAGE002
和
Y12缺失或代表式vi、vii、viii、ix、x或xi的结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE003
。
在另一实施方案(实施方案3)中，本发明涉及根据实施方案1的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中：
Y1缺失或代表氨基酸，例如但不限于Arg、ε-Lys或Gly；
Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10或Y11各自缺失或各自代表i或ii；
Figure 993995DEST_PATH_IMAGE004
和
Y12缺失或代表式vi、vii、viii、ix、x或xi的结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE005
。
在另一实施方案(实施方案3A)中，本发明涉及根据实施方案1的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中：
Y1缺失或代表Arg、ε-Lys或Gly；
Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10或Y11各自缺失或各自代表i或ii；
Figure 773732DEST_PATH_IMAGE006
和
Y12缺失或代表式vi、vii、viii、ix、x或xi的结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE007
。
本发明的胰高血糖素肽类似物的衍生物能使液体制剂具有长期的稳定性，且包括连接至侧链的三至十个带负电荷的部分/基团。这种胰高血糖素肽能使液体制剂在笔式系统中，这是更方便和容易使用的，其相对于目前市售的胰高血糖素GlucaGen? HypoKit是一优点。
本发明进一步涉及本发明的胰高血糖素肽类似物的衍生物在治疗中的用途，涉及包括本发明化合物的药物组合物和本发明化合物在制备药物中的用途。
附图说明
图1显示出实施例2的溶解性和滞后时间(含量测定III)。
图2显示出实施例3的溶解性和滞后时间(含量测定III)。
图3显示出实施例4的溶解性和滞后时间(含量测定III)。
图4显示出GlucaGen? HypoKit (黑色, n = 5)和实施例2(灰色, n = 3)对G?ttingen小型猪SC给药后的药代动力学(A)和药效学(B)曲线。数据为平均值±SEM。
图5显示出配制的实施例5在多种条件存储下的远紫外CD光谱。
发明阐述
本发明进一步的实施方案如下：
4. 根据前述实施方案中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基选自下列结构之一：
Figure 231259DEST_PATH_IMAGE008
Figure 107948DEST_PATH_IMAGE010
Figure DEST_PATH_IMAGE011
Figure DEST_PATH_IMAGE013
Figure 259760DEST_PATH_IMAGE014
Figure DEST_PATH_IMAGE015
Figure 520977DEST_PATH_IMAGE016
Figure DEST_PATH_IMAGE017
其中*表示与肽连接的点。
5. 根据前述实施方案中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基选自下列结构之一：
Figure 252173DEST_PATH_IMAGE018
其中*表示与肽连接的点。
6. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中实施方案4～5的结构具有立体化学构型L(stereochemistry L)。
7. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中实施方案4～5的结构具有反向立体化学构型(即立体化学构型D)。
8. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基包含三至十个所述带负电荷的部分。
9. 根据实施方案8的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基包含四至十个所述带负电荷的部分。
10. 根据实施方案8的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基包含三至五个所述带负电荷的部分。
11. 根据实施方案8的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基包含四或五个所述带负电荷的部分。
12. 根据实施方案8的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基包含三个所述带负电荷的部分。
13. 根据实施方案8的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基包含四个所述带负电荷的部分。
14. 根据实施方案8的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基包含五个所述带负电荷的部分。
15. 根据实施方案8的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基包含十个所述带负电荷的部分。
16. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中末端带负电荷的部分为用C2-6酰基或琥珀酰基部分N-酰化的。
17. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中末端带负电荷的部分为用C2-6酰基N-酰化的。
18. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中末端带负电荷的部分为用琥珀酰基部分N-酰化的。
19. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基的所述带负电荷的部分由Glu和/或γGlu和/或Asp和/或βAsp、羧酸、磺酸或四唑部分表示。
20. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基的所述带负电荷的部分由Glu和/或γGlu表示。
21. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基的所述带负电荷的部分由Glu表示。
22. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基由Glu-Glu-Glu、Glu-Glu-Glu-Glu、Glu-Glu-Glu-Glu-Glu或Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu独立地表示。
23. 根据实施方案22的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基由Glu-Glu-Glu独立地表示。
24. 根据实施方案22的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基由Glu-Glu-Glu-Glu独立地表示。
25. 根据实施方案22的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基由Glu-Glu-Glu-Glu-Glu独立地表示。
26. 根据实施方案22的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基由Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu独立地表示。
27. 根据实施方案20的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述带负电荷的部分由γGlu部分表示。
28. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基由γGlu-γGlu-γGlu、γGlu-γGlu-γGlu-γGlu、γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu或γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu独立地表示。
29. 根据实施方案28的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基由γGlu-γGlu-γGlu表示。
30. 根据实施方案28的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基由γGlu-γGlu-γGlu-γGlu表示。
31. 根据实施方案28的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基由γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu表示。
32. 根据实施方案28的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基由Glu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu表示。
33. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X12、X16、X20、X21、X24、X28、X29、或X30中的氨基酸侧链。
34. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X12、X20、X24、X28、X29、或X30中的氨基酸侧链。
35. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X12或X24中的氨基酸侧链。
36. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X12的氨基酸侧链。
37. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X16的氨基酸侧链。
38. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X20的氨基酸侧链。
39. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X21的氨基酸侧链。
40. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X24的氨基酸侧链。
41. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X28的氨基酸侧链。
42. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X29的氨基酸侧链。
43. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X30的氨基酸侧链。
44. 根据实施方案33的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置12、16、20、21、24、28、29或30中的Lys侧链。
45. 根据实施方案35的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置12或24的Lys侧链。
46. 根据实施方案40的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置24的Lys侧链。
47. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中高达15个氨基酸残基的取代基。
48. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中零、一、二、三、四、五、六、七、八、九、十、十一、十二、十三、十四或十五个氨基酸残基的取代基。
49. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中零、三、四、五、七或十个氨基酸残基的取代基。
50. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中一个氨基酸残基的取代基。
51. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中二个氨基酸残基的取代基。
52. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中三个氨基酸残基的取代基。
53. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中四个氨基酸残基的取代基。
54. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中五个氨基酸残基的取代基。
55. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中六个氨基酸残基的取代基。
56. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中七个氨基酸残基的取代基。
57. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中八个氨基酸残基的取代基。
58. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中九个氨基酸残基的取代基。
59. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中十个氨基酸残基的取代基。
60. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中十一个氨基酸残基的取代基。
61. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中十二个氨基酸残基的取代基。
62. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中十三个氨基酸残基的取代基。
63. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中十四个氨基酸残基的取代基。
64. 根据实施方案46的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中十五个氨基酸残基的取代基。
65. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括高达15个氨基酸残基的取代基且其中：
X2代表Ser、Aib、Thr、Ala、或Gly；
X3代表Gln或His；
X10代表Tyr或Val；
X12代表Lys、Orn或Arg；
X15代表Asp或Glu；
X16代表Ser、Thr、Lys、Val、Tyr、Phe、Leu、Ile、Trp或Orn；
X18代表Arg、Lys、Ala或Orn；
X20代表Gln、Lys、Ala、Glu或Orn；
X21代表Asp、Glu、Lys或Orn；
X24代表Gln、Lys、或Orn；
X27代表Met或Leu；
X28代表Asn、Lys、Ser或Orn；
X29代表Thr、Lys或Orn和
X30缺失或代表Lys、Pro或Orn。
66. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中：X2代表Ser、Aib、Thr、Ala、或Gly；X3代表Gln或His；X10代表Tyr或Val；X12代表Lys、Orn或Arg；X15代表Asp或Glu；X16代表Ser、Thr、Val、Tyr、Phe、Leu、Ile、Trp、Orn或Lys；X18代表Arg、Lys、Ala或Orn；X20代表Gln、Lys、Ala、Glu或Orn；X21代表Asp、Glu、Lys或Orn；X24代表Gln、Lys、或Orn；X27代表Met或Leu；X28代表Asn、Lys、Ser或Orn；X29代表Thr、Orn或Lys和X30缺失或代表Lys、Orn或Pro。
67. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X2代表Ser、Aib、Thr、Ala或Gly。
68. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X3代表Gln或His。
69. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X10代表Tyr或Val。
70. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X12代表Lys或Arg。
71. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X15代表Asp或Glu。
72. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X16代表Ser、Thr、Val、Tyr、Phe、Leu、Ile、Trp或Lys
73. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X18代表Arg或Ala。
74. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X20代表Gln、Lys、Ala或Glu。
75. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X21代表Asp、Glu或Lys。
76. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X24代表Gln或Lys。
77. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X27代表Met或Leu。
78. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X28代表Asn、Ser或Lys。
79. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X29代表Thr或Lys。
80. 根据实施方案65的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中X30缺失或代表Lys或Pro。
本发明涉及对凝胶和原纤维形成具有改进溶解性和改进物理稳定性的新型胰高血糖素类似物。
肽可经历多种物理状态的变化。肽某些设定条件下，可例如由于因pH变化的氨基酸侧链排斥电荷的中和，由于缺乏溶解性而沉淀。另一种物理变化是淀粉样(amyloid)原纤维的形成，其涉及β-折叠丰富的大分子纤维结构的构象变化。由于聚集，通过较少的系统结构重复，可以形成其他大分子结构。在后两种情况中，肽物质可最终观察到沉淀。事实上，这些物理变化可能在一定程度上是相互关联的，例如溶解度对pH值和纤维形成是有关的[Schmittschmitt和Scholtz, Protein Science, 12, 10, 2374-2378, 2003]。此外，仅通过视觉检查是非常难以区分这些现象的，因此，这些变化的结果常常由普通的术语“沉淀”来描述。
物理状态的其他变化包括观察到溶液中肽含量损失的表面吸附，以及从液体溶液至凝胶的变化。然而，不顾凝胶的性质或形成，观察到的沉淀是在其储存和使用时间中药物注射时的问题。
胰高血糖素在中性pH时具有非常低的水溶性，其在中性pH时不能为药物制剂。即使在酸性pH下溶解时，胰高血糖素可能取决于浓度和温度而经历多种相变，因此是物理上非常不稳定的。在将胰高血糖素样品溶于盐酸中后，可出现滞后相，其中样品的粘度低，且溶液完全透明。在几个小时后，粘度开始增加-表示凝胶形成(Beaven等，European J. Biochem. 11 (1969) 37-42)。在到达稳定水平后，粘度又可开始下降，同时原纤维可出现并从溶液中沉淀出来。该过程是可接种的，加入少量预形成的凝胶可减少滞后相。凝胶的形成和原纤维形成是高度依赖于物理应力，例如加热和振荡，二者都提高该过程的速率。
本发明人惊奇地发现，本发明的化合物在中性pH或微碱性pH时显示改进的水溶解性。此外，本发明人还已经惊奇地发现，本发明的胰高血糖素类似物对水溶液中凝胶和原纤维的形成具有改进的稳定性。本发明化合物的稳定性可通过测量法(II)和测量法(III)来测量。
在一种实施方案中，本发明的胰高血糖素类似物可以与GLP-1类似物或胰岛素类似物共同配制，形成稳定的药物组合物。
根据人防御低血糖的体系，与胰岛素唯一疗法相比，胰岛素和胰高血糖素疗法的组合可能是有利的。通常，在餐后情况下，当血糖水平变低时，第一种激素反应是降低胰岛素生产。当血糖进一步下降时，二线反应是产生胰高血糖素—导致增加的葡萄糖肝脏输出。当糖尿病患者接受太高的外源剂量的胰岛素时，胰高血糖素升高的天然反应被存在的外源胰岛素所阻止，因为胰岛素对胰高血糖素产生具有抑制效应。因此，略微过量给药的胰岛素可引起低血糖。目前，许多糖尿病患者因担心可能是危及生命的低血糖事件，往往更倾向于使用稍低于最适的胰岛素。
本发明化合物在中性pH下可溶的事实，可允许与胰岛素共同配制，且允许更稳定的血糖水平和减少的低血糖事件次数，以及降低的糖尿病相关并发症的风险。
81. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽选自胰高血糖素(1-29)、胰高血糖素(1-29)酰胺、或其类似物。
82. 根据实施方案81的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽为胰高血糖素(1-29)或其类似物。
83. 根据实施方案81的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽为胰高血糖素(1-29)酰胺或其类似物。
84. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包含至多3个氨基酸残基的C-末端延伸。
85. 根据实施方案84的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包含至多2个氨基酸残基的C-末端延伸。
86. 根据实施方案84的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包含1个氨基酸残基的C-末端延伸。
87. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽为C-末端酰胺或C-末端羧酸。
88. 根据实施方案87的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽为C-末端酰胺。
89. 根据实施方案87的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽为C-末端羧酸。
90. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其选自化学式(Chem.)2、化学式3、化学式4、化学式5、化学式6、化学式7、化学式8、化学式9、化学式10、化学式11、化学式12、化学式13、化学式16、化学式17、化学式18、化学式19、化学式20、化学式21、化学式22、化学式23、化学式24、化学式25、化学式26、化学式27、化学式28、化学式29、化学式30、化学式31、化学式32、化学式33、化学式34、化学式35、化学式36、化学式37、化学式38、化学式39、化学式40、化学式41、化学式42、化学式43、化学式44、化学式45、化学式46、化学式47和化学式48、化学式49、化学式50、化学式51、化学式52、化学式53、化学式54、化学式55、化学式56、化学式57、化学式58、化学式59 化学式60、化学式61、化学式62、化学式63、化学式64、化学式65、化学式66、化学式67、化学式68和化学式69。
所谓“同时”给予本发明化合物的制剂和抗肥胖药或抗糖尿病药的制剂意指在单一剂型中施用这些化合物，或施用第一种药剂，随后施用第二种药剂，其时间间隔不超过15分钟、优选10分钟、更优选5分钟、更优选2分钟。可先施用任一种因素。
所谓“序贯”给予意指施用第一种药剂，随后施用第二种药剂，其时间间隔超过15分钟。可先施用两种单位剂型中的任一种。优选通过同一静脉通路注射两种产品。
正如已说明的一样，在所有上述公开的治疗方法或适应症中，均可单独施用本发明的化合物。然而，还可与一种或多种其它的治疗活性剂、物质或化合物组合序贯或同时地施用。
当用于根据本发明的方法时，本发明化合物一般剂量的范围为约0.001～约100mg/kg体重/天，优选约0.01～约10mg/kg体重，更优选约0.01～约5mg/kg体重/天，例如约0.05～约10mg/kg体重/天或约0.03～约5mg/kg体重/天，并以一个或多个剂量例如1-3个剂量施用。确切的剂量将取决于给药的频率和方式、受治疗受试者的性别、年龄、体重和一般状况、受治疗病况的性质和严重程度、待治疗的任何伴发疾病和本领域技术人员明白的其它因素。
采用本领域技术人员众所周知的技术，本发明的化合物可适宜配制成单位剂型。旨在每天口服施用一次或多次(例如每天1～3次)的一般单位剂型，可适宜含有约0.05～约1000mg、优选约0.1～约500mg、例如约0.5～约200mg的本发明的化合物。
本发明化合物包括被认为是极适于以长于例如一日一次的间隔施用的化合物，因此，适当配制的本发明化合物通过合适的给药途径(例如本文公开的途径之一)可适于例如一周两次或一周一次地施用。
如上所述，本发明的化合物可与一种或多种其它的治疗活性化合物或物质组合施用或应用，合适的其它化合物或物质可选自例如抗糖尿病药、抗高血脂药、抗肥胖药、抗高血压药和用于治疗由糖尿病产生的或与糖尿病有关的并发症的药物。
合适的抗糖尿病药包括胰岛素、胰岛素衍生物或类似物、GLP-1(胰高血糖素样肽-1)衍生物或类似物[例如WO 98/08871(Novo Nordisk A/S)中公开的那些、或其它GLP-1类似物例如艾塞那肽(Byetta，Eli Lilly/Amylin；AVE0010，Sanofi-Aventis)、他泊鲁肽(Roche)、阿比鲁肽(Syncria，GlaxoSmithKline)、胰淀素(amylin)、胰淀素类似物(例如SymlinTM/普兰林肽)以及口服活性降血糖药。
合适的口服活性降血糖药包括：二甲双胍、咪唑啉类；磺脲类；双胍类；美格列奈类；噁二唑烷二酮类(oxadiazolidinediones)；噻唑烷二酮类；胰岛素敏化剂；α-葡糖苷酶抑制剂；作用于胰β-细胞的ATP依赖的钾通道剂，例如钾通道开放剂，例如WO 97/26265、WO 99/03861和WO 00/37474(Novo Nordisk A/S)中公开的那些；钾通道开放剂，例如ormitiglinide(米格列奈)；钾通道阻滞剂，例如那格列奈或BTS-67582；胰高血糖素受体拮抗剂，例如WO 99/01423和WO 00/39088(Novo Nordisk A/S和Agouron Pharmaceuticals，Inc.)中公开的那些；GLP-1受体激动剂，例如WO 00/42026(Novo Nordisk A/S和Agouron Pharmaceuticals，Inc.)中公开的那些；胰淀素类似物(作用于胰淀素受体的激动剂)；DPP-IV(二肽基肽酶-IV)抑制剂；PTP酶(蛋白酪氨酸磷酸酶)抑制剂；葡糖激酶激活剂，例如描述于Hoffmann La Roche的WO 02/08209中的那些葡糖激酶激活剂；涉及刺激糖异生和/或糖原分解的肝酶的抑制剂；葡萄糖摄取调节剂；GSK-3(糖原合酶激酶-3)抑制剂；改变脂质代谢的化合物，例如抗高血脂药和抗血酯药(antilipidemic agents)；减少食物摄取的化合物；以及PPAR(过氧化物酶体增殖物激活受体)激动剂和RXR(类视黄醇X受体)激动剂例如ALRT-268、LG-1268或LG-1069。
合适的其它治疗活性物质的其它实例包括胰岛素或胰岛素类似物；磺脲类，例如甲苯磺丁脲、氯磺丙脲、妥拉磺脲、优降糖(glibenclamide)、格列吡嗪、格列美脲、格列齐特(glicazide)或格列本脲(glyburide)；双胍类，例如二甲双胍；及美格列奈类，例如瑞格列奈或色那列奈/那格列奈。
合适的其它治疗活性物质进一步的实例包括噻唑烷二酮类胰岛素敏化剂，例如曲格列酮、环格列酮、吡格列酮、罗格列酮、伊格列酮(isaglitazone)、达格列酮、恩格列酮、CS-011/CI-1037或T 174、或WO 97/41097(DRF-2344)、WO 97/41119、WO 97/41120、WO 00/41121和WO 98/45292(Dr. Reddy's Research Foundation)中公开的化合物。
合适的其它治疗活性物质的其它实例包括胰岛素敏化剂，例如GI 262570、YM-440、MCC-555、JTT-501、AR-H039242、KRP-297、GW-409544、CRE-16336、AR-H049020、LY510929、MBX-102、CLX-0940、GW-501516和以下中公开的化合物：WO 99/19313(NN622/DRF-2725)、WO 00/50414、WO 00/63191、WO 00/63192和WO 00/63193(Dr. Reddy's Research Foundation)、和WO 00/23425、WO 00/23415、WO 00/23451、WO 00/23445、WO 00/23417、WO 00/23416、WO 00/63153、WO 00/63196、WO 00/63209、WO 00/63190和WO 00/63189(Novo Nordisk A/S)。
合适的其它治疗活性物质的其它更多的实例包括：α-葡糖苷酶抑制剂，例如伏格列波糖、乙格列酯、米格列醇或阿卡波糖；糖原磷酸化酶抑制剂，例如WO 97/09040(Novo Nordisk A/S)中描述的化合物；葡糖激酶激活剂；作用于胰β-细胞的ATP依赖的钾通道剂，例如甲苯磺丁脲、优降糖、格列吡嗪、格列齐特、BTS-67582或瑞格列奈；
其它合适的其它治疗活性物质包括抗高血脂药和抗血酯药，例如消胆胺、考来替泊、氯贝丁酯、吉非贝齐、洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、普罗布考或右旋甲状腺素
适于作为其它治疗活性物质的其它药物包括抗肥胖药和食欲调节药。这样的物质可选自CART(可卡因-苯丙胺调节的转录物)激动剂、NPY(神经肽Y受体1和/或5)拮抗剂、MC3(黑皮质素受体3)激动剂、MC3拮抗剂、MC4(黑皮质素受体4)激动剂、食欲素受体拮抗剂、TNF(肿瘤坏死因子)激动剂、CRF(促肾上腺皮质素释放因子)激动剂、CRF BP(促肾上腺皮质素释放因子结合蛋白)拮抗剂、尿皮质素(urocortin)激动剂、神经调节肽U类似物(神经调节肽U受体亚型1和2的激动剂)、β3肾上腺素能激动剂例如CL-316243、AJ-9677、GW-0604、LY362884、LY377267或AZ-40140、MC1(黑皮质素受体1)激动剂、MCH(黑素细胞浓集激素(melanocyte-concentrating hormone))拮抗剂、CCK(缩胆囊素)激动剂、5-羟色胺再摄取抑制剂(例如氟西汀、赛乐特或西酞普兰)、5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂、5HT(5-羟色胺)激动剂、5HT6激动剂、5HT2c激动剂例如APD356(US6953787)、铃蟾肽激动剂、甘丙肽拮抗剂、生长激素、生长因子例如催乳素或胎盘催乳素、生长激素释放化合物、TRH(促甲状腺激素释放激素)激动剂、UCP 2或3(解偶联蛋白质2或3)调节剂、化学解偶联剂、瘦蛋白激动剂、DA(多巴胺)激动剂(溴隐亭、多普瑞新(doprexin))、脂肪酶/淀粉酶抑制剂、PPAR调节剂、RXR调节剂、TR β激动剂、肾上腺素能CNS刺激剂、AGRP(刺鼠相关蛋白质(agouti-related protein))抑制剂、组胺H3受体拮抗剂例如WO 00/42023、WO 00/63208和WO 00/64884中公开的那些、毒蜥外泌肽-4(exendin-4)类似物、GLP-1类似物、睫状神经营养因子、胰淀素类似物、肽YY3-36 (PYY3-36)(Batterham等，Nature 418，650-654(2002))、PYY3-36类似物、NPY Y2受体激动剂、NPY Y4受体激动剂和以组合NPY Y2和NPY Y4激动剂起作用的物质、FGF21及其类似物、μ-阿片类受体拮抗剂、胃泌酸调节素(oxyntomodulin)或其类似物。
更多合适的抗肥胖药为安非他酮(抗抑郁药)、托吡酯(抗惊厥药)、依考匹泮(多巴胺D1/D5拮抗剂)和纳曲酮(阿片类拮抗剂)、及其组合。这些抗肥胖药的组合可为例如：芬特明+托吡酯、安非他酮缓释制剂(sustained release，SR)+纳曲酮SR、唑尼沙胺SR和安非他酮SR。用于本发明方法的作为与本发明化合物组合的其它治疗活性物质的合适抗肥胖药的实施方案尤其为瘦蛋白和瘦蛋白的类似物或衍生物。
合适的抗肥胖药的其它实施方案为5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂，例如西布曲明。
合适抗肥胖药的其它实施方案为脂肪酶抑制剂，例如奥利司他。
合适的抗肥胖药更多的实施方案为肾上腺素能CNS刺激剂，例如右苯丙胺、苯丙胺、芬特明、马吲哚、苯甲曲秦、安非拉酮、芬氟拉明或右芬氟拉明。
合适的其它治疗活性化合物的其它实例包括抗高血压药。抗高血压药的实例为β-阻断剂例如阿普洛尔、阿替洛尔、噻吗洛尔、吲哚洛尔、普萘洛尔和美托洛尔，ACE(血管紧张素转化酶)抑制剂例如贝那普利、卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、喹那普利和雷米普利，钙通道阻断剂例如硝苯地平、非洛地平、尼卡地平、伊拉地平、尼莫地平、地尔硫和维拉帕米，以及α-阻断剂例如多沙唑嗪、乌拉地尔、哌唑嗪和特拉唑嗪。
本发明的化合物相对于本领域先前公开的肽具有较高的胰高血糖素受体选择性。本发明的肽还有延长的体内半衰期。本发明的化合物可为可溶的胰高血糖素受体激动剂，例如其溶解度为至少0.2 mmol/l、至少0.5 mmol/l、至少2 mmol/l、至少4 mmol/l、至少8 mmol/l、至少10 mmol/l、或至少15 mmol/l。
在本文中，如不另外说明，则术语“可溶的”、“溶解度”、“水溶液中可溶的”、“水溶性”、“水溶性的”、“水可溶的”、“水溶解度”和“水溶性”是指化合物在水中或在含水盐溶液或水性缓冲溶液(例如10mM磷酸盐溶液)中或在含有其它化合物但无有机溶剂的水溶液中的溶解度。
本文所用术语“多肽”和“肽”意指包括通过肽键连接的至少5个组分氨基酸的化合物。组分氨基酸可来自由遗传密码编码的氨基酸，和它们可以是非由遗传密码编码的天然氨基酸、以及合成的氨基酸。非由遗传密码编码的天然氨基酸为例如羟脯氨酸、γ-羧基谷氨酸、鸟氨酸、磷酸丝氨酸、D-丙氨酸和D-谷氨酰胺。合成的氨基酸包括通过化学合成制备的氨基酸，即由遗传密码编码的氨基酸的D-异构体，例如D-丙氨酸和D-亮氨酸、Aib(α-氨基异丁酸)、Abu(α-氨基丁酸)、Tle(叔丁基甘氨酸)、β-丙氨酸、3-氨甲基苯甲酸、邻氨基苯甲酸。
本文提及多肽使用的术语“类似物”意指修饰的肽，其中肽的一个或多个氨基酸残基被其它氨基酸残基取代和/或其中一个或多个氨基酸残基被从肽中删除和/或其中一个或多个氨基酸残基被从肽中删除和或其中一个或多个氨基酸残基被添加至肽中。氨基酸残基的这类添加或缺失可发生在肽的N端和/或肽的C端。一种简单的系统用来描述类似物。使用按照IUPAC-IUB命名法所用的氨基酸标准单字母或三字母的缩写，绘制肽类似物及其衍生物的化学式。
本文所用的与肽有关的术语“衍生物”意指化学修饰的肽或其类似物，其中至少一个于未修饰的肽或其类似物中的取代基不存在，即被共价修饰了的肽。一般的修饰为酰胺、碳水化合物、烷基、酰基、和酯等。
所有未说明旋光异构体的氨基酸应理解为意指L-异构体。
本文所用术语“胰高血糖素肽”意指胰高血糖素化合物、胰高血糖素类似物、胰高血糖素肽类似物、胰高血糖素肽类似物的衍生物、胰高血糖素类似物的衍生物、胰高血糖素肽的衍生物、胰高血糖素肽衍生物、根据本发明的化合物、本发明的化合物、化合物、氨基酸序列SEQ ID 1、式I的氨基酸序列、式I的肽、通式的胰高血糖素肽、SEQ ID 1胰高血糖素类似物、胰高血糖素衍生物或SEQ ID 1的衍生物、人胰高血糖素(1-29)、胰高血糖素(1-30)、胰高血糖素(1-31)、胰高血糖素(1-32)及其保持胰高血糖素活性的类似物、融合肽和衍生物。
至于胰高血糖素化合物的位置编号：为本发明目的，相对于天然人胰高血糖素(1-29)(SEQ ID 1)的序列，标明任何氨基酸的取代、删除和/或添加。在本文中人胰高血糖素氨基酸位置1-29与氨基酸位置X1-X29相同。人胰高血糖素(1-29)序列为His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (SEQ ID 1)。
胰高血糖素(1-30)意指在C端具有1个氨基酸延伸的人胰高血糖素，胰高血糖素(1-31)意指在C端具有2个氨基酸延伸的人胰高血糖素，和胰高血糖素(1-32)意指在C端具有3个氨基酸延伸的人胰高血糖素。
本文所用的术语“带负电荷的部分”意指可带有负电荷的化学部分，例如但不限于氨基酸部分如Glu、γGlu、Asp或βAsp，羧酸，磺酸或四唑部分。
本文所用术语“取代基”意指置换氢的化学部分或基团。
本文所用的术语“C2-6酰基”意指具有2至6个碳原子的支链或非支链的酰基：
Figure DEST_PATH_IMAGE019
其中*表示与相邻位置连接的点。
本文所用的术语琥珀酰基是指以下部分：
Figure 307854DEST_PATH_IMAGE020
其中*表示与相邻位置连接的点。
本文所用术语“亲脂部分”意指具有超过6个和小于30个碳原子的脂族或环状碳氢化合物的部分，其中所述碳氢化合物部分可包含另外的取代基。
本发明进一步的实施方案涉及：
91. 快速作用的根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽的衍生物，其皮下给药后具有相当于天然胰高血糖素的升高血糖效应(hyperglycemic effect)的起始作用。
92. 快速作用的根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽的衍生物，其皮下或肌肉内给药后具有相当于天然胰高血糖素的升高血糖效应的起始作用。
93. 快速作用的根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽的衍生物，其在皮下给药后具有改善的生物利用度。
94. 根据前述实施方案中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其在皮下或肌肉内给药后具有改善的生物利用度。
95. 根据前述实施方案中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽是DPPIV保护的化合物。
96. 根据前述实施方案中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽是DPPIV稳定的。
97. 根据前述实施方案中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽是胰高血糖素受体激动剂。
98. 根据实施方案97的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽是具有EC50<1 nM的胰高血糖素受体激动剂。
99. 根据前述实施方案中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定法中具有超过70％的回收率。
100. 根据实施方案1～98的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定法中具有超过90％的回收率。
101. 根据实施方案1～98的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定法中具有约100％的回收率。
102. 根据前述实施方案中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定法中具有超过7个小时的滞后时间。
103. 根据前述实施方案中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定法中具有超过20个小时的滞后时间。
104. 根据前述实施方案中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其中所述胰高血糖素肽在ThT原纤维形成测定法中具有超过45个小时的滞后时间。
本文提及多肽使用的术语“DPP-IV保护的”意指多肽，其经化学修饰以使所述化合物对血浆肽酶二肽基氨基肽酶-4(DPP-IV)具有抗性。已知血浆中的DPP-IV酶参与若干肽激素例如胰高血糖素、GLP-1、GLP-2、胃泌酸调节素等的降解。因此，正进行相当多的努力以开发对DPP-IV介导的水解敏感性多肽类似物和衍生物以降低DPP-IV的降解速率。
本文所用的术语“胰高血糖素激动剂”是指完全或部分激活人胰高血糖素受体的任何胰高血糖素肽。在优选的实施方案中，“胰高血糖素激动剂”为任何胰高血糖素肽，其按本领域已知方法测量时，优选以低于1μM、例如低于100nM或低于1nM的亲和常数(KD)或效价(EC50)与胰高血糖素受体结合并显示促胰岛素活性，其中促胰岛素活性可通过本领域普通技术人员已知的体内或体外测定法测量。例如，可将胰高血糖素激动剂给动物施用，并测量随时间变化的胰岛素浓度。
在本文中，术语“激动剂”旨在表示激活所述受体类型的物质(配体)。
在本文中，术语“药学上可接受的盐”旨在表示对患者无害的盐。这样的盐包括药学上可接受的酸加成盐、药学上可接受的金属盐、铵盐和烷基化铵盐。酸加成盐包括无机酸以及有机酸的盐。合适无机酸的代表性实例包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸、硫酸、和硝酸等。合适有机酸的代表性实例包括甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、肉桂酸、柠檬酸、富马酸、乙醇酸、乳酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、草酸、苦味酸、丙酮酸、水杨酸、琥珀酸、甲磺酸、乙磺酸、酒石酸、抗坏血酸、双羟萘酸、双亚甲基-水杨酸、乙烷二磺酸、葡萄糖酸、柠康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、EDTA、乙醇酸、对氨基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、和对甲苯磺酸等。药学上可接受的无机酸或有机酸加成盐的其它实例包括J.Pharm.Sci.(1977)66，2中列出的药学上可接受的盐。相关金属盐的实例包括锂盐、钠盐、钾盐和镁盐等。烷基化铵盐的实例包括甲基铵、二甲基铵、三甲基铵、乙基铵、羟基乙基铵、二乙基铵、丁基铵和四甲基铵盐等。
本文所用术语化合物的“治疗有效量”是指足以治愈、减轻或部分阻止指定疾病和/或其并发症的临床表现的量。将适于实现这一目的的量定义为“治疗有效量”。对于各目的而言，有效量将取决于疾病或损伤的严重程度以及受试者的体重和一般状况。应理解的是，采用常规实验，通过构建值的矩阵并测定矩阵中的不同点，可实现合适剂量的确定，所有这些都在受过训练的医师或兽医的普通技能水平内。
本文所用的术语“治疗”、“医疗”及其其它变体是指为了对抗病况(例如疾病或病症)的目的而对患者进行的管理和护理。该术语旨在包括对患者所患的指定病况的全面治疗，例如给予所述活性化合物(们)以减轻其症状或并发症，延迟疾病、病症或病况的进展，治愈或消除疾病、病症或病况，和/或预防病况，其中预防应理解为为了对抗疾病、病况或病症的目的而对患者进行的管理和护理，并包括给予所述活性化合物(们)以预防症状或并发症的发作。待治疗的患者优选为哺乳动物，特别是人类，但其它动物如狗、猫、牛、马、绵羊、山羊或猪等的治疗也在本发明的范围内。
本文所用的术语“溶剂化物”是指在溶质(在本情形中为根据本发明的化合物)和溶剂之间形成的确定化学计量的复合物。举例来说，溶剂可包括水、乙醇、或乙酸。
本发明的其它实施方案涉及药物组合物：
105. 药物组合物，其包含根据实施方案1～104中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
106. 根据实施方案105的药物组合物，其还包含一种或多种其它的治疗活性化合物或物质。
107. 根据实施方案105-106中任一的药物组合物，其呈单位剂量形式，包含约0.05mg～约1000mg，例如约0.1mg～约500mg、约0.011 mg～约5mg、约0.5mg～约2mg、约0.5 mg～5mg, 例如约0.5mg～约200 mg的根据实施方案1～104中任何的化合物。
108. 根据实施方案107中任一的药物组合物，其呈单位剂量形式，包含约0.01 mg～约4 mg的根据实施方案1～104中任何的化合物。
109. 根据实施方案107中任一的药物组合物，其呈单位剂量形式，包含约0.05 mg～约3 mg的根据实施方案1～104中任何的化合物。
110. 根据实施方案107中任一的药物组合物，其呈单位剂量形式，包含约0.05 mg～约2 mg的根据实施方案1～104中任何的化合物。
111. 根据实施方案107中任一的药物组合物，其呈单位剂量形式，包含约0.1 mg～约1 mg的根据实施方案1～104中任何的化合物。
112. 根据实施方案107中任一的药物组合物，其呈单位剂量形式，包含约0.1 mg～约2 mg的根据实施方案1～104中任何的化合物。
113. 根据实施方案105-112中任一的药物组合物，其适合于肠胃外给药。
114. 根据实施方案1～104中任一的胰高血糖素肽，其用于治疗。
本发明进一步的实施方案涉及如下：
115. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防高血糖症(hyperglycemia)、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病和肥胖。
116. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于延迟或防止2型糖尿病的疾病进展。
117. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗肥胖或预防超重。
118. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于减少食物摄取。
119. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于增加能量消耗。
120. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于减轻体重。
121. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于延迟从葡萄糖耐量减低(IGT)到2型糖尿病的进展。
122. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于延迟从2型糖尿病到需要胰岛素的糖尿病的进展。
123. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于调节食欲。
124. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于引起饱满感。
125. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于在成功减轻体重后防止体重恢复。
126. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗与超重或肥胖有关的疾病或状态。
127. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗易饿病(bulimia)。
128. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗暴饮暴食(binge-eating)。
129. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗动脉粥样硬化。
130. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗高血压。
131 . 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗2型糖尿病。
132. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗葡萄糖耐量减低。
133. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗血脂异常。
134. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗冠心病。
135. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗肝脂肪变性。
136. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗肝脂肪变性。
137. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗β-阻断剂中毒。
138. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于抑制胃肠道运动，有用于与应用技术如X射线、CT-和NMR-扫描的胃肠道检查相结合。
139. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防低血糖。
140. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防胰岛素诱导的低血糖。
141 . 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防反应性低血糖。
142. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防糖尿病性低血糖。
143. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防非糖尿病性低血糖。
144. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防空腹低血糖。
145. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防药物诱导的低血糖。
146. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防胃旁路术诱发性低血糖。
147. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防妊娠期低血糖。
148. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防酒精诱发性低血糖。
149. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防胰岛素瘤。
150. 根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物，其任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合，用于治疗或预防Von Girkes病(I型糖原累积病)。
本发明进一步的实施方案涉及以下的方法：
151. 治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病和肥胖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
152. 延迟或防止2型糖尿病的疾病进展的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
153. 治疗肥胖或预防超重的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
154. 减少食物摄取的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
155. 用于增加能量消耗的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
156. 用于减轻体重的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
157. 用于延迟从葡萄糖耐量减低(IGT)到2型糖尿病的进展的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
158. 用于延迟从2型糖尿病到需要胰岛素的糖尿病的进展的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
159. 用于调节食欲的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
160. 用于引起饱满感的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
161. 用于在成功减轻体重后防止体重恢复的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
162. 用于治疗与超重或肥胖有关的疾病或状态的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
163. 用于治疗易饿病的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
164. 用于治疗暴饮暴食的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
165. 用于治疗动脉粥样硬化的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
166. 用于治疗高血压的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
167. 用于治疗2型糖尿病的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
168. 用于治疗葡萄糖耐量减低的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
169. 用于治疗血脂异常的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
170. 用于治疗冠心病的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
171. 用于治疗肝脂肪变性的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
172. 用于治疗β-阻断剂中毒的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
173. 用于抑制胃肠道运动的方法，所述抑制有用于与应用技术如X射线、CT-和NMR-扫描的胃肠道检查相结合，所述方法包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
174. 用于治疗或预防低血糖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
175. 用于治疗或预防胰岛素诱导的低血糖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
176. 用于治疗或预防反应性低血糖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
177. 用于治疗或预防糖尿病性低血糖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
178. 用于治疗或预防非糖尿病性低血糖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
179. 用于治疗或预防空腹低血糖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
180. 用于治疗或预防药物诱导的低血糖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
181. 用于治疗或预防胃旁路术诱发性低血糖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
182. 用于治疗或预防妊娠期低血糖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
183. 用于治疗或预防酒精诱发性低血糖的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
184. 用于治疗或预防胰岛素瘤的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
185. 用于治疗或预防Von Girkes病的方法，其包括给有需要的患者施用任选与一种或多种其它治疗活性化合物组合的有效量的根据实施方案1～104中任何的胰高血糖素肽类似物的衍生物。
本发明进一步的实施方案涉及以下的用途：
186. 根据实施方案1～104中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物在制备药物中的用途。
187. 根据实施方案1～104中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物在制备药物中的用途，其中所述药物用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病和肥胖。
188. 根据实施方案1～104中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物在制备药物中的用途，其中所述药物用于延迟或防止2型糖尿病的疾病进展、治疗肥胖或预防超重、减少食物摄取、增加能量消耗、减轻体重、延迟从葡萄糖耐量减低(IGT)到2型糖尿病的进展；延迟从2型糖尿病到需要胰岛素的糖尿病的进展；调节食欲；引起饱满感；在成功减轻体重后防止体重恢复；治疗与超重或肥胖有关的疾病或状态；治疗易饿病；治疗暴饮暴食；治疗动脉粥样硬化、高血压、2型糖尿病、IGT、血脂异常、冠心病、肝脂肪变性、治疗β-阻断剂中毒、用于在与应用技术如X射线、CT-和NMR-扫描的胃肠道检查结合中有用的抑制胃肠道运动。
189. 根据实施方案1～104中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物在制备药物中的用途，所述药物用于抑制胃肠道运动，有用于结合应用技术如X射线、CT-和NMR-扫描的胃肠道检查。
190. 根据实施方案1～104中任一的胰高血糖素肽类似物的衍生物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防低血糖、胰岛素诱导的低血糖、反应性低血糖、糖尿病性低血糖、非糖尿病性低血糖、空腹低血糖、药物诱导的低血糖、胃旁路术诱发性低血糖、妊娠期低血糖、酒精诱发性低血糖、胰岛素瘤和Von Girkes病。
在一种实施方案中，本发明的胰高血糖素制剂可在即用型笔式装置中用于胰高血糖素给药。
在一种实施方案中，本发明的胰高血糖素制剂可在泵中用于胰高血糖素给药。
本发明的胰高血糖素制剂通过肠胃外给药可用于糖尿病或低血糖的治疗中。
建议由医生来选择给患者施用的本发明胰高血糖素制剂的剂量。
胃肠外给药可以用注射器(任选笔型注射器)，通过皮下、肌内、腹膜内或静脉内注射进行。或者，胃肠外给药可以用输注泵进行。作为又一选择，含有本发明胰高血糖素化合物的胰高血糖素制剂还可适于经皮给药，例如通过无针注射或贴剂、任选离子电渗贴剂经皮给药，或者经粘膜(例如颊)给药。
根据本发明的胰高血糖素制剂可在几种部位给需要这类治疗的患者施用，所述部位例如在局部部位例如皮肤和粘膜部位，在避开吸收的部位例如在动脉中、静脉中、心脏中给药，以及在涉及吸收的部位，例如在皮肤中、在皮肤下、在肌肉中或在腹部给药。
在本发明的用途和方法的某些实施方案中，本发明的胰高血糖素肽可与一种以上的上述合适的其它治疗活性化合物或物质组合施用或应用，例如与以下活性化合物或物质组合：二甲双胍和磺酰脲例如格列本脲；磺酰脲和阿卡波糖；那格列奈和二甲双胍；阿卡波糖和二甲双胍；磺酰脲、二甲双胍和曲格列酮；胰岛素和磺酰脲；胰岛素和二甲双胍；胰岛素、二甲双胍和磺酰脲；胰岛素和曲格列酮；胰岛素和洛伐他汀；等等。
特别地，在为了与治疗或预防肥胖或超重有关(即与减轻或防止过度肥胖有关)的目的而施用任选与一种或多种上文公开的其它治疗活性化合物或物质组合的本发明胰高血糖素肽的情况下，为了实现体重减轻或防止体重增加的目的，采用这类给药与手术介入的组合，例如与肥胖病手术介入的组合，可能是适当的。常用肥胖病手术技术的实例包括但不限于下列：垂直遮断胃成形术(亦称“胃缝合”)，其中将一部分胃缝合以产生较小的用作新胃的前胃囊；胃囊带术，例如采用可调节胃束带系统(例如Swedish　Adjustable　Gastric　Band(SAGB)、LAP-BAND TM或MIDband TM)，其中使用可由患者调节大小的弹性体(例如硅酮)带，产生小的用作新胃的前胃囊；和胃旁路手术，例如“Roux-en-Y”旁路术，其中应用缝合装置产生小的胃囊并将其连接至远端小肠，小肠上部被重新连接成Y型结构。
本发明的胰高血糖素肽(任选与一种或多种上文公开的其它治疗活性化合物或物质组合)的给药可发生在进行所述肥胖病手术介入前的一段时间和/或其之后的一段时间。在许多情况下，在进行肥胖病手术介入后开始施用本发明的化合物可能是优选的。
术语“肥胖”意指脂肪组织过量。当能量摄取超过能量消耗时，过量的卡路里被储存在脂肪组织，如果持续这种净的正平衡，便导致肥胖，即体重平衡有两组分，任一方(摄取或消耗)异常都可导致肥胖。在这方面，肥胖最好被视为任何程度的赋予健康风险的过量脂肪组织。正常和肥胖个体之间的区别可能仅仅是大约的，但肥胖赋予的健康风险可能随脂肪组织增加而持续。然而，在本发明的背景下，体重指数(BMI＝体重千克数除以身高米数的平方)超过25的个体被视为肥胖。
在一种实施方案中，本发明涉及式[I]的胰高血糖素肽的衍生物或其药学上可接受的盐、酰胺或羧酸：
His-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-X18-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29-X30　　[I]
包括连接到所述胰高血糖素肽的氨基酸侧链的取代基，所述取代基包括三至十个带负电荷的部分，条件为所述取代基不包括亲脂部分。
在另一实施方案中，本发明涉及式[I]的胰高血糖素肽的衍生物或其药学上可接受的盐、酰胺或羧酸：
His-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-X18-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29-X30　　[I]
包括连接到所述胰高血糖素肽的氨基酸侧链的取代基，所述取代基包括三至十个带负电荷的部分，条件为所述取代基不包括-(CH2)n-部分，其中n≥6)部分。
在另一实施方案中，本发明涉及式[I]的胰高血糖素肽的衍生物或其药学上可接受的盐、酰胺或羧酸：
His-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-X18-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29-X30　　[I]
包括连接到所述胰高血糖素肽的氨基酸侧链的取代基，所述取代基包括三至十个带负电荷的部分，条件为所述取代基不包括-(CH2)6-部分。
在另一实施方案中，本发明涉及式[I]的胰高血糖素肽的衍生物或其药学上可接受的盐、酰胺或羧酸：
His-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-X18-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29-X30　　[I]
包括连接到所述胰高血糖素肽的氨基酸侧链的取代基，所述取代基包括三至十个带负电荷的部分，条件为所述取代基不包括选自以下的部分：
Figure DEST_PATH_IMAGE021
Figure 127430DEST_PATH_IMAGE022
Figure DEST_PATH_IMAGE023
Figure 926759DEST_PATH_IMAGE024
其中*表示相邻位置连接的点。
在另一实施方案中，本发明涉及式[I]的胰高血糖素肽的衍生物或其药学上可接受的盐、酰胺或羧酸：
His-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-X18-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29-X30　　[I]
包括连接到所述胰高血糖素肽的氨基酸侧链的取代基，所述取代基包括三至十个带负电荷的部分，条件为所述取代基不包括选自式II的部分：
Z1-Z2-Z3-Z4　　[II]
其中
Z1代表根据式IIa、IIb或IIc之一的结构
Figure DEST_PATH_IMAGE025
其中式IIa中的n为6～20,
式IIc中的m为5～11
式IIc中的COOH基团可以连接至苯环上的位置2、3或4，
式IIa、IIb或IIc中的符号*代表与Z2中的氮连接的点；
如果Z2是不存在的，Z1在符号*连接Z3的氮，和如果Z2和Z3是不存在的，Z1在符号*连接Z4的氮
Z2是不存在的或代表根据式IId、IIe、IIf、IIg、IIh、IIi、IIj或IIk之一的结构；
Figure DEST_PATH_IMAGE027
Figure 942305DEST_PATH_IMAGE028
其中各氨基酸部分独立地具有立体化学构型L或D；
其中Z2经*表示的碳原子连接至*表示的Z3氮；
如果Z3是不存在的，Z2经*表示的碳原子连接至*表示的Z4氮；
和如果Z3和Z4是不存在的，Z2经*表示的碳连接至胰高血糖素肽的赖氨酸的ε氮或鸟氨酸的δ氮。
Z3是不存在的或代表根据式IIm、IIn、IIo或IIp之一的结构；
Figure DEST_PATH_IMAGE029
Figure 246247DEST_PATH_IMAGE030
Z3经Z3符号*的碳连接至Z4符号*的氮，如果Z4是不存在的，Z3经符号*的碳连接至胰高血糖素肽的赖氨酸的ε氮或鸟氨酸的δ氮。
Z4是不存在的或代表根据式IId、IIe、IIf、IIg、IIh、IIi、IIj或IIk之一的结构；其中各氨基酸部分独立为L或D, 其中Z4经符号*的碳连接至胰高血糖素肽的赖氨酸的ε氮或鸟氨酸的δ氮。
在另一实施方案中，本发明涉及式[I]的胰高血糖素肽的衍生物或其药学上可接受的盐、酰胺或羧酸：
His-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-X18-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29-X30　　[I]
包括连接到所述胰高血糖素肽的氨基酸侧链的取代基，所述取代基包括三至十个带负电荷的部分，条件为所述取代基不包括选自以下的化合物：
胰高血糖素(1-29)Lys(N-ε-((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-(19-羧基十九烷酰基氨基)-丁酰氨基)-丁酰氨基)-丁酰氨基)-丁酰))-酰胺；
N-ε24-([(4S)-5-羟基-4-[[(4S)-5-羟基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-5-羟基-4-[(18-羟基-18-氧代十八烷酰基)氨基]-5-氧代戊酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]-5-氧代戊酰基]氨基]-5-氧代戊酰基])[Lys24,Leu27]；
N-ε28-([(4S)-5-羟基-4-[[(4S)-5-羟基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-5-羟基-4-[(18-羟基-18-氧代十八烷酰基)氨基]-5-氧代戊酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]-5-氧代戊酰基]氨基]-5-氧代戊酰基]) [Leu27,Lys28]胰高血糖素；
N-ε29-([(4S)-5-羟基-4-[[(4S)-5-羟基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-5-羟基-4-[(18-羟基-18-氧代十八烷酰基)氨基]-5-氧代戊酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]-5-氧代戊酰基]氨基]-5-氧代戊酰基])[Leu27,Lys29]；
N-ε30-([(4S)-5-羟基-4-[[(4S)-5-羟基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-5-羟基-4-[(18-羟基-18-氧代十八烷酰基)氨基]-5-氧代戊酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]-5-氧代戊酰基]氨基]-5-氧代戊酰基])[Leu27,Lys30]；
N{ε-28}-[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]-[Leu27,Lys28]-胰高血糖素；
N{ε-28}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]-[Leu27,Lys28]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]-[Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素；
N{ε-16}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys16,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Arg12,Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-25}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys25,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-16}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]-[Lys16,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-16}-[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]-[Lys16,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-28}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Leu27,Lys28]-胰高血糖素；
N{ε-12}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Leu27,Pro29]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27,Pro29]-胰高血糖素；
N{ε-28}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Leu27,Lys28]-胰高血糖素基-Pro；
N{ε-12}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素基-Pro；
N{ε-27}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys27,Pro29]-胰高血糖素；
{ε-28}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Leu27,Lys28,Pro29]-胰高血糖素；
N{ε-27}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Arg12,Lys27,Pro29]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(2S)-4-羧基-2-[[(2S)-4-羧基-2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(2S)-4-羧基-2-[[(2S)-4-羧基-2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-4-羧基-2-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Glu21 ,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Glu9,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Glu20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(15-羧基十五烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(11 -羧基十一烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(13-羧基十三烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-20}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys20,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[D-Phe4,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素；
N{ε-16}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys16,Glu21,Arg25,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Glu20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Gln27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Glu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(19-羧基十九烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(7-羧基庚酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素；
N{α}([His24,Leu27]-胰高血糖素基)-N{ε}[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]Lys；
N{ε-24}-[(4S)-4-羧基-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七烷酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]丁酰基]-[Lys24,Glu27]-胰高血糖素；
N{α}([Acb2]-胰高血糖素基)-N{ε}[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(2R)-6-氨基-2-[[(4S)-4-羧基-4-(十六烷酰基氨基)丁酰基]氨基]己酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]Lys酰胺；
N{α}([Aib2]-胰高血糖素基)-N{ε}[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(2R)-6-氨基-2-[[(4S)-4-羧基-4-(十六烷酰基氨基)丁酰基]氨基]己酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]Lys酰胺；
本文中所用的氨基酸缩写具有下列含义：
Figure DEST_PATH_IMAGE031
以D-开始的接着三字母代码的氨基酸缩写，例如D-Ser、D-His等，是指相应氨基酸的D-对映异构体，例如D-丝氨酸、D-组氨酸等。
本发明进一步的实施方案为：
1C. 胰高血糖素肽或其药学上可接受的盐、酰胺、羧酸或药物前体，其包括连接到所述胰高血糖素肽的氨基酸侧链的取代基，所述取代基包括三至十个带负电荷的部分，条件为所述取代基不包括亲脂部分。
2C. 根据实施方案1C的胰高血糖素肽，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X10、X12、X16、X17、X18、X20、X21、X24、X25、X27、X28、X29、和/或X30中的氨基酸侧链。
3C. 根据实施方案1C～2C的胰高血糖素肽，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X24的氨基酸侧链。
4C. 根据实施方案1C～3C中任一的胰高血糖素肽，其中X24代表Lys。
5C. 根据实施方案1C～4C中任一的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包括在所述胰高血糖素肽中高达15个氨基酸残基的取代基，且其中所述取代基可以在下列氨基酸位置X2、X3、X4、X9、X10、X12、X15、X16、X17、X18、X20、X21、X24、X25、X27、X28、X29和/或X30。
6C. 根据实施方案1C～5C中任一的胰高血糖素肽，其中所述取代基具有式II：
Y1-Y2-Y3-Y4-Y5-Y6-Y7-Y8-Y9-Y10　　[II]
其中
Y1代表蛋白原(proteinogenic)的氨基酸或式iv的结构、或式v的结构或不存在
Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8和Y9各自代表结构i、ii、iii或不存在和Y10代表经酰胺键连接的结构vi或不存在
Figure DEST_PATH_IMAGE033
其中*代表连接的点
条件为Y1-Y2-Y3-Y4-Y5-Y6-Y7-Y8-Y9-Y10包含至少三个带负电荷的部分，且其各氨基酸i、ii、和iii独立地具有立体化学构型L或D。
7C. 根据实施方案1C～6C中任一的胰高血糖素肽，其选自：化学式1、化学式2、化学式3、化学式4、化学式5、化学式6、化学式7、化学式8、化学式9、化学式10、化学式11、化学式12、化学式13、化学式14、化学式15、化学式16、化学式17、化学式18、化学式19、化学式20、化学式21、化学式22、化学式23、化学式24、化学式25、化学式26、化学式27、化学式28、化学式29、化学式30、化学式31、化学式32、化学式33、化学式34、化学式35、化学式36、化学式37、化学式38、化学式39、化学式40、化学式41、化学式42、化学式43、化学式44、化学式45、化学式46、化学式47和化学式48、化学式49、化学式50、化学式51、化学式52、化学式53、化学式54、化学式55、化学式56、化学式57、化学式58、化学式59、化学式60、化学式61、化学式62、化学式63、化学式64、化学式65、化学式66、化学式67、化学式68 和化学式69。
8C. 药物组合物，其包括根据实施方案1C～7C中任一的胰高血糖素肽。
9C. 根据实施方案8C的药物组合物，其进一步包含一种或多种其它治疗活性化合物或物质。
10C. 根据实施方案8C～9C中任何一项的药物组合物，其适合于肠胃外给药的。
11C. 根据任何实施方案1C～7C中任一的胰高血糖素肽，其用于治疗。
12C. 根据实施方案1C～7C中任一的胰高血糖素肽在制备药物中的用途。
13C. 根据实施方案1C～7C中任一的胰高血糖素肽在制备药物中的用途，其中所述药物用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病和肥胖。
14C. 根据实施方案1C～7C中任一的胰高血糖素肽在制备药物中的用途，其中所述药物用于延迟或防止2型糖尿病的疾病进展、治疗肥胖或预防超重、减少食物摄取、增加能量消耗、减轻体重、延迟从葡萄糖耐量减低(IGT)到2型糖尿病的进展；延迟从2型糖尿病到需要胰岛素的糖尿病的进展；调节食欲；引起饱满感；在成功减轻体重后防止体重恢复；治疗与超重或肥胖有关的疾病或状态；治疗易饿病；治疗暴饮暴食；治疗动脉粥样硬化、高血压、2型糖尿病、IGT、血脂异常、冠心病、肝脂肪变性、治疗β-阻断剂中毒、用于胃肠道运动抑制，所述抑制有用于结合应用技术如X射线、CT-和NMR-扫描的胃肠道检查。
15C. 根据实施方案1C～7C中任一的胰高血糖素肽在制备药物中的用途，其中所述药物用于治疗或预防低血糖、胰岛素诱导的低血糖、反应性低血糖、糖尿病性低血糖、非糖尿病性低血糖、空腹低血糖、药物诱导的低血糖、胃旁路术诱发性低血糖、妊娠期低血糖、酒精诱发性低血糖、胰岛素瘤和Von Girkes病。
药物组合物
包含根据本发明化合物的药物组合物可通过常规技术制备，所述技术例如描述于Remington's　Pharmaceutical　Sciences,　1985或Remington：The　Science　and　Practice　of　Pharmacy,　第19版，1995。
正如已提及的一样，本发明的一个方面是提供包含以下列浓度存在的根据本发明化合物的药物制剂：约0.01mg/mL～约25mg/mL，例如约0.1mg/mL～约5mg/mL和约2mg/mL～约5mg/mL，且其中所述制剂的pH为2.0～10.0。药物制剂可包含以约0.1mg/ml～约50mg/ml的浓度存在的根据本发明的化合物，且其中所述制剂的pH为2.0～10.0。所述制剂还可包含缓冲系统、防腐剂、等渗剂、螯合剂、稳定剂和表面活性剂。在本发明的一种实施方案中，所述药物制剂是含水制剂，即包含水的制剂。这样的制剂通常是溶液剂或混悬剂。在本发明的又一种实施方案中，药物制剂是含水溶液剂。术语“含水制剂”定义为包含至少50％w/w水的制剂。同样地，术语“含水溶液剂”定义为包含至少50％w/w水的溶液剂，术语“含水混悬剂”定义为包含至少50％w/w水的混悬剂。
在另一种实施方案中，药物制剂是冻干制剂，在使用前医师或患者向其中加入溶剂和/或稀释剂。
在另一种实施方案中，药物制剂是无需任何预先溶解便可准备使用的干燥制剂(例如冷冻干燥或喷雾干燥)。
在又一个方面，本发明涉及药物制剂，其包含根据本发明化合物的含水溶液、和缓冲剂，其中所述化合物以0.1mg/ml或以上的浓度存在，且其中所述制剂的pH为约2.0～约10.0。
在又一个方面，本发明涉及药物制剂，其包含根据本发明化合物的含水溶液、和缓冲剂，其中所述化合物以0.1mg/ml或以上的浓度存在，且其中所述制剂的pH为约7.0～约8.5。在本发明的又一个方面，所述制剂的pH为约6.0～约7.5或约5.0～约7.5。
在本发明的另一种实施方案中，制剂的pH选自2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9和10.0。优选地，制剂的pH离根据本发明化合物的等电点至少1个pH单位，甚至更优选制剂的pH离根据本发明化合物的等电点至少2个pH单位。
在本发明的又一种实施方案中，缓冲剂选自乙酸钠、碳酸钠、柠檬酸盐、甘氨酰甘氨酸、组氨酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、和三(羟基甲基)-氨基甲烷、羟乙基哌嗪乙磺酸(hepes)、N,N-二(羟乙基)甘氨酸(bicine)、三(羟甲基)甲基甘氨酸(tricine)、苹果酸、琥珀酸盐、马来酸、富马酸、酒石酸、天冬氨酸或其混合物。每种这些特定的缓冲剂都构成本发明备选的实施方案。
在本发明的又一种实施方案中，所述制剂还包含药学上可接受的防腐剂。在本发明的又一种实施方案中，防腐剂选自苯酚、邻甲酚、间甲酚、对甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、2-苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸丁酯、2-苯基乙醇、苯甲醇、乙醇、三氯叔丁醇、和硫柳汞(thiomerosal)、溴硝丙二醇、苯甲酸、咪脲、氯己定、脱氢醋酸钠、氯甲酚、对羟基苯甲酸乙酯、苄索氯铵、氯苯甘醚(chlorphenesine)(3-对-氯苯氧基丙烷-1,2-二醇)或其混合物。在本发明的又一种实施方案中，防腐剂以0.1 mg/ml～30 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一种实施方案中，防腐剂以0.1 mg/ml～20 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一种实施方案中，防腐剂以0.1 mg/ml～5 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一种实施方案中，防腐剂以5 mg/ml～10 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一种实施方案中，防腐剂以10 mg/ml～20 mg/ml的浓度存在。每种这些特定的防腐剂都构成本发明备选的实施方案。药物组合物中防腐剂的使用是技术人员众所周知的。为了方便起见，参考Remington：The　Science　and　Practice　of　Pharmacy，第19版，1995。
在本发明的又一种实施方案中，所述制剂还包含等渗剂。在本发明的又一种实施方案中，等渗剂选自盐(例如氯化钠)、糖或糖醇、氨基酸(例如L-甘氨酸、L-组氨酸、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸)、多羟糖醇(例如甘油(丙三醇)、1,2-丙二醇(丙二醇)、1,3-丙二醇、1,3-丁二醇)、聚乙二醇(例如PEG400)、或其混合物。可以使用任何糖例如单糖、二糖或多糖，或水溶性葡聚糖，包括例如果糖、葡萄糖、甘露糖、山梨糖、木糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、葡聚糖、支链淀粉(pullulan)、糊精、环糊精、可溶性淀粉、羟乙基淀粉和羧甲基纤维素-Na。在一种实施方案中，糖添加剂为蔗糖。糖醇定义为具有至少一个-OH基团的C4-C8碳氢化合物，包括例如甘露醇、山梨糖醇、肌醇、半乳糖醇(galacititol)、卫矛醇、木糖醇、和阿拉伯糖醇。在一种实施方案中，糖醇添加剂为甘露醇。上述糖或糖醇可单独或组合使用。用量无固定的限制，只要糖或糖醇可溶于液体制剂，并且不会不利地影响采用本发明方法所实现的稳定作用即可。在一种实施方案中，糖或糖醇的浓度介于约1 mg/ml和约150 mg/ml之间。在本发明的又一种实施方案中，等渗剂以1 mg/ml～50 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一种实施方案中，等渗剂以1 mg/ml～7 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一种实施方案中，等渗剂以8 mg/ml～24 mg/ml的浓度存在。在本发明的又一种实施方案中，等渗剂以25 mg/ml～50 mg/ml的浓度存在。每种这些特定的等渗剂构成本发明的备选实施方案。药物组合物中等渗剂的使用是技术人员众所周知的。为了方便起见，参考Remington：The　Science　and　Practice　of　Pharmacy，第19版，1995。
在本发明的又一种实施方案中，所述制剂还包含螯合剂。在本发明的又一种实施方案中，螯合剂选自乙二胺四乙酸(EDTA)盐、柠檬酸和天冬氨酸、及其混合物。在本发明的又一种实施方案中，螯合剂以0.1mg/ml～5mg/ml的浓度存在。在本发明的又一种实施方案中，螯合剂以0.1mg/ml～2mg/ml的浓度存在。在本发明的又一种实施方案中，螯合剂以2mg/ml～5mg/ml的浓度存在。每种这些特定的螯合剂都构成本发明的备选实施方案。药物组合物中螯合剂的使用是技术人员众所周知的。为了方便起见，参考Remington：The　Science　and　Practice　of　Pharmacy，第19版，1995。
在本发明的又一种实施方案中，所述制剂还包含稳定剂。药物组合物中稳定剂的使用是技术人员众所周知的。为了方便起见，参考Remington：The　Science　and　Practice　of　Pharmacy，第19版，1995。
更具体地，本发明的组合物是稳定的液体药物组合物，其治疗活性组分包括在液体药物制剂保存期间可能出现聚集体形成的多肽。所谓“聚集体形成”意指导致寡聚体形成的多肽分子间的物理相互作用，该寡聚物可保持可溶性，或者是从溶液中沉淀出的大的可见聚集物。所谓“保存期间”意指一旦制备的液体药物组合物或制剂不会立即给予受试者。更确切地讲，在制备后，将其以液体形式、冷冻结态，或以稍后重构成液体形式的干燥形式或以适于给予受试者的其它形式包装保存。所谓“干燥形式”意指液体药物组合物或制剂通过以下方法干燥：冷冻干燥(即冻干；参见例如Williams和Polli (1984) J. Parenteral Sci. Technol. 38：48-59)、喷雾干燥(参见Masters (1991)，载于Spray-Drying Handbook (第5版；Longman Scientific and Technical, Essez, U.K.)，第491-676页；Broadhead等(1992) Drug Devel. Ind. Pharm. 18：1169-1206；以及Mumenthaler等(1994) Pharm. Res. 11：12-20)、或风干(Carpenter和Crowe (1988) Cryobiology 25：459-470；及Roser (1991) Biopharm. 4：47-53)。在液体药物组合物保存期间多肽的聚集体形成可不利地影响该多肽的生物活性，导致药物组合物的治疗效能损失。此外，聚集体形成可引起其它问题，例如当使用输注系统给予含有多肽的药物组合物时阻塞管道、滤膜或泵。
本发明的药物组合物还可包含足以减少组合物保存期间多肽聚集体形成的氨基酸碱(amino acid base)的量。所谓“氨基酸碱”意指氨基酸或氨基酸的组合，其中任何给定的氨基酸以其游离碱的形式或以其盐的形式存在。在使用氨基酸组合时，全部氨基酸可以其游离碱形式存在，可以全部以其盐形式存在，或者一些可以其游离碱形式存在，而另一些以其盐形式存在。在一种实施方案中，用于制备本发明组合物的氨基酸是具有带电荷侧链的氨基酸，例如精氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、和谷氨酸。在一种实施方案中，用于制备本发明组合物的氨基酸是甘氨酸。具体氨基酸(例如甲硫氨酸、组氨酸、咪唑、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸和其混合物)的任何立体异构体(即L或D)或这些立体异构体的组合都可存在于本发明的药物组合物中，只要具体的氨基酸以其游离碱形式或其盐形式存在。在一种实施方案中，使用L-立体异构体。本发明的组合物还可用这些氨基酸的类似物配制。所谓“氨基酸类似物”意指天然存在的氨基酸的衍生物，其产生减少本发明液体药物组合物保存期间多肽的聚集体形成的预期效果。合适的精氨酸类似物包括例如氨基胍、鸟氨酸和N-单乙基L-精氨酸，合适的甲硫氨酸类似物包括乙硫氨酸和丁硫氨酸(buthionine)，和合适的半胱氨酸类似物包括S-甲基-L半胱氨酸。与其它氨基酸一样，氨基酸类似物以其游离碱形式或其盐形式掺入组合物中。在本发明的又一种实施方案中，以足以防止或延迟蛋白质聚集的浓度，使用氨基酸或氨基酸类似物。
在本发明的又一种实施方案中，当用作治疗剂的多肽是包含至少一个易受氧化的甲硫氨酸残基的多肽时，可加入甲硫氨酸(或其它含硫氨基酸或氨基酸类似物)以抑制甲硫氨酸残基氧化成甲硫氨酸亚砜。所谓“抑制”意指甲硫氨酸氧化后的物质随时间推移发生的最小积累。抑制甲硫氨酸氧化导致多肽以其适合的分子形式保留更多。可以使用甲硫氨酸的任何立体异构体(L、D或其混合物)。加入的量应是足以抑制甲硫氨酸残基氧化的量，使得甲硫氨酸亚砜的量可被管理机构接受。通常地，这意味着组合物含有不超过约10%～约30%的甲硫氨酸亚砜。一般地，这可通过加入甲硫氨酸，使得所加甲硫氨酸与甲硫氨酸残基之比的范围为约1：1～约1000：1、例如10：1～约100：1来实现。
在本发明的又一种实施方案中，所述制剂还包含选自高分子量聚合物或低分子量化合物的稳定剂。在本发明的又一种实施方案中，稳定剂选自聚乙二醇(例如PEG 3350)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮、羧基/羟基纤维素或其衍生物(例如HPC、HPC-SL、HPC-L和HPMC)、环糊精、含硫物质如单硫代甘油、巯基乙酸和2-甲基硫代乙醇、和不同的盐(例如氯化钠)。每种这些特定的稳定剂都构成本发明的备选实施方案
药物组合物还可包含其它稳定剂，其进一步提高其中的治疗活性多肽的稳定性。对本发明特别有益的稳定剂包括但不限于甲硫氨酸和EDTA，其保护多肽免受甲硫氨酸氧化；以及非离子型表面活性剂，其保护多肽免于与冻融或机械剪切有关的聚集。
在本发明的又一种实施方案中，所述制剂还包含表面活性剂。在本发明的又一种实施方案中，表面活性剂选自洗涤剂、乙氧基化蓖麻油、聚乙二醇化(polyglycolyzed)甘油酯、乙酰化单甘油酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物(例如泊洛沙姆例如Pluronic? F68、泊洛沙姆188和407、Triton X-100)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇酐脂肪酸酯、星形PEO、聚氧乙烯和聚乙烯衍生物例如烷基化和烷氧基化衍生物(吐温例如Tween-20、Tween-40、Tween-80和Brij-35)、聚氧乙烯羟基硬脂酸酯、单甘油酯或其乙氧基化衍生物、二甘油酯或其聚氧乙烯衍生物、醇类、甘油、凝集素类(lecitins)和磷脂类(例如磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、双磷脂酰甘油和鞘磷脂)、磷脂衍生物(例如二棕榈酰磷脂酸)和溶血磷脂(例如棕榈酰溶血磷脂酰-L-丝氨酸和乙醇胺、胆碱、丝氨酸或苏氨酸的1-酰基-sn-甘油-3-磷酸酯)及溶血磷脂酰胆碱和磷脂酰胆碱的烷基、烷氧基(烷基酯)、烷氧基(烷基醚)-衍生物，例如溶血磷脂胆碱的月桂酰和肉豆蔻酰衍生物、二棕榈酰磷脂酰胆碱、以及极性头基团(即胆碱类、乙醇胺类、磷脂酸、丝氨酸类、苏氨酸类、甘油、肌醇)的修饰物，和带正电的DODAC、DOTMA、DCP、BISHOP、溶血磷脂酰丝氨酸和溶血磷脂酰苏氨酸、以及甘油磷脂类(例如脑磷脂)、甘油糖脂类(例如吡喃型半乳糖苷(galactopyransoide))、鞘糖脂类(例如神经酰胺、神经节苷脂)、十二烷基磷酸胆碱、鸡蛋溶血卵磷脂、夫西地酸衍生物-(例如牛磺二氢夫西地酸钠等)、长链脂肪酸及其C6-C12盐(例如油酸和辛酸)、酰基肉碱类及衍生物、赖氨酸、精氨酸或组氨酸的Nα-酰化衍生物、或者赖氨酸或精氨酸的侧链酰化衍生物、包括赖氨酸、精氨酸或组氨酸与中性或酸性氨基酸的任何组合的二肽的Nα-酰化衍生物、包括一个中性氨基酸与两个带电氨基酸的任何组合的三肽的Nα-酰化衍生物、DSS(多库酯钠，CAS登记号[577-11-7])、多库酯钙，CAS登记号[128-49-4])、多库酯钾，CAS登记号[7491-09-0])、SDS (十二烷基硫酸钠或月桂基硫酸钠)、辛酸钠、胆酸或其衍生物、胆汁酸及其盐和甘氨酸或牛磺酸缀合物、熊脱氧胆酸、胆酸钠、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠、甘氨胆酸钠、N-十六烷基-N,N-二甲基-3-铵基-1-丙磺酸盐、阴离子(烷基-芳基-磺酸盐类)单价表面活性剂、两性离子表面活性剂(例如N-烷基-N,N-二甲基铵基-1-丙磺酸盐、3-氯酰氨基-1-丙基二甲基铵基-1-丙磺酸盐、阳离子表面活性剂(季铵碱)(例如溴化十六烷基三甲铵、氯化十六烷基吡啶)、非离子型表面活性剂(例如十二烷基β-D-吡喃葡萄糖苷)、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物(poloxamine) (例如Tetronic's)，其为衍生自依次将环氧丙烷和环氧乙烷加成至乙二胺的四官能嵌段共聚物，或者所述表面活性剂可选自咪唑啉衍生物或其混合物。每种这些具体的表面活性剂都构成本发明的备选实施方案。
药物组合物中表面活性剂的使用是技术人员众所周知的。为了方便起见，参考Remington：The　Science　and　Practice　of　Pharmacy，第19版，1995。
其它成分也可存在于本发明的药物制剂中。这样的其它成分可包括润湿剂、乳化剂、抗氧化剂、填充剂、张度改性剂(tonicity modifier)、螯合剂、金属离子、油性溶媒、蛋白质(例如人血清白蛋白、明胶或蛋白质)和两性离子(例如氨基酸，例如甜菜碱、牛磺酸、精氨酸、甘氨酸、赖氨酸和组氨酸)。当然，这样的其它成分不应不利地影响本发明药物制剂的整体稳定性。
含有根据本发明化合物的药物组合物可在几种部位给需要这类治疗的患者施用，所述部位例如在局部部位例如皮肤和粘膜部位，在避开吸收的部位例如在动脉中、静脉中、心脏中给药，以及在涉及吸收的部位，例如在皮肤中、在皮肤下、在肌肉中或在腹部给药。
根据本发明的药物组合物给需要这类治疗的患者的施用可以通过几种给药途径，例如舌部、舌下、颊、口内、口服、胃肠中、鼻、肺(例如通过细支气管和肺泡或其组合)、表皮、真皮、透皮、阴道、直肠、眼(例如通过结膜)、输尿管和胃肠外给药。
本发明的组合物可以以几种剂型给予，例如为溶液剂、混悬剂、乳剂、微乳剂、复合型乳剂、泡沫剂、油膏剂(salves)、糊剂、硬膏剂(plaster)、软膏剂、片剂、包衣片剂、冲洗剂、胶囊剂(例如硬明胶胶囊剂和软明胶胶囊剂)、栓剂、直肠胶囊剂、滴剂、凝胶剂、喷雾剂、粉剂、气雾剂、吸入剂、滴眼剂、眼用软膏剂、眼用冲洗剂、阴道栓剂(vaginal pessaries)、阴道环(vaginal rings)、阴道软膏剂、注射用溶液剂、原位转化溶液剂(in situ transforming solution) (例如原位凝胶化、原位沉降、原位沉淀、原位结晶)、输液剂和植入剂。
本发明的组合物还可例如通过共价、疏水性和静电相互作用与药物载体、药物递送系统和高级药物递送系统混合或连接，以进一步提高化合物的稳定性、增加生物利用度、增加溶解度、降低不良作用、实现本领域技术人员熟知的时间疗法、及增加患者依从性或其任何组合。载体、药物递送系统和高级药物递送系统的实例包括但不限于聚合物(例如纤维素和衍生物)、多糖(例如葡聚糖和衍生物)、淀粉和衍生物、聚乙烯醇、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯聚合物、聚乳酸和聚乙醇酸及其嵌段共聚物、聚乙二醇、载体蛋白质例如白蛋白、凝胶(例如热胶凝系统、例如本领域技术人员熟知的嵌段共聚物系统)、胶束、脂质体、微球、纳米颗粒、液晶及其分散体、脂质-水系统的相特性领域技术人员熟知的L2相及其分散体、聚合物胶束、复合型乳剂、自乳化、自微乳化、环糊精和其衍生物、以及树枝状高分子(dendrimer)。
使用例如定量吸入器、干粉吸入器和喷雾器(均为本领域众所周知的装置)，本发明的组合物用于固体剂、半固体剂、粉剂和溶液剂的制剂中以经肺施用化合物。
本发明的组合物特别有用于控释、缓释、延长释放、迟释、和慢释药物递送系统的制剂。更具体地，但不限于，组合物有用于本领域技术人员众所周知的胃肠外控释和缓释系统(两个系统均导致许多倍减少给药次数)的制剂。甚至更优选为皮下给药的控释和缓释系统。在不限制本发明范围的情况下，有用的控释系统和组合物的实例为水凝胶、油性凝胶、液晶、聚合物胶束、微球、纳米粒。
用于本发明组合物的生产控释系统的方法包括但不限于结晶、缩合、共结晶、沉淀、共沉淀、乳化、分散、高压匀浆、包囊、喷雾干燥、微囊化、凝聚、相分离、溶剂蒸发以产生微球、挤出和超临界流体法。一般参考为Handbook of Pharmaceutical Controlled Release (Wise, D.L.主编. Marcel Dekker, New York, 2000)和Drug and the Pharmaceutical Sciences 第99卷：Protein Formulation and Delivery (MacNally, E.J.主编Marcel Dekker, New York, 2000)。
胃肠外给药可以用注射器(任选笔型(pen-like)注射器)，通过皮下、肌内、腹膜内或静脉内注射进行。替代选择地，胃肠外给药可以用输注泵进行。另外的选择是可为溶液剂或混悬剂的组合物以鼻或肺喷雾剂的形式施用根据本发明化合物。作为又一选择，含有本发明化合物的药物组合物也可适于例如通过无针注射或贴剂、任选离子电渗贴剂经皮给药，或者经粘膜(例如颊)给药。
术语“稳定的制剂”是指具有增加的物理稳定性、增加的化学稳定性、或增加的物理和化学稳定性的制剂。
本文所用的蛋白质制剂的术语“物理稳定性”是指所述蛋白质由于蛋白质暴露至热-机械应力和/或与失稳的表面和界面(例如疏水表面和界面)的相互作用，形成蛋白质的生物失活和/或不溶性聚集体的趋势。在不同温度下多种时期内，将装于合适的容器(例如药筒或小瓶)中的制剂暴露于机械/物理应力(例如搅拌)后，通过视觉检查和/或浊度测定，评估水性蛋白质制剂的物理稳定性。制剂的视觉检查在黑暗背景下于聚焦强光中进行。制剂的浊度通过将浑浊度分级为例如评分0至3(未呈现混浊的制剂相应于目视评分0，而在日光中呈现可视混浊的制剂相应于目视评分3)的目视评分来表征。当其在日光中呈现可视混浊时，制剂被分类为关于蛋白聚集的物理不稳定。或者，制剂的浊度可通过技术人员众所周知的简易浊度测量来评估。水性蛋白质制剂的物理稳定性还可通过使用蛋白构象状态的光谱剂或探针来评估。所述探针优选为优先结合至蛋白的非天然构象异构体的小分子。蛋白结构的小分子光谱探针的一个实例为硫磺素T。硫磺素T为已广泛用于检测淀粉样原纤维的荧光染料。在存在原纤维以及还可能的其它蛋白构型下，硫磺素T在结合原纤维蛋白形式时在约450 nm下产生新的激发极值并在约482 nm下增强发射。未结合的硫磺素T在所述波长下基本上无荧光。
其它小分子可用作蛋白结构从天然状态向非天然状态变化的探针。例如优先结合蛋白外露疏水补丁(hydrophobic patch)的“疏水补丁”探针。所述疏水补丁通常埋藏于处于其天然状态的蛋白三级结构之内，但随着蛋白开始解折叠或变性而暴露。这些小分子光谱探针的实例为芳族疏水染料，例如蒽(antrhacene)、吖啶、或菲咯啉等。其它光谱探针为金属-氨基酸络合物，例如疏水氨基酸(例如苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、和缬氨酸)的钴金属络合物等。
本文所用蛋白质制剂的术语“化学稳定性”是指蛋白结构的化学共价变化，所述变化导致形成与天然蛋白结构相比具有潜在较小生物效力和/或潜在增加免疫原性的化学降解产物。依赖天然蛋白的类型和性质以及所述蛋白暴露的环境，可形成多种化学降解产物。如本领域技术人员所熟知，几乎不可能完全避免化学降解的消除，并且在储存和使用蛋白质制剂期间常常见到化学降解产物的量不断增加。多数蛋白质易发生脱酰胺化的过程，其中谷氨酰胺酰或天冬酰胺酰残基的侧链酰胺基被水解以形成游离羧酸。其它降解途径涉及高分子量转化产物的形成，其中两个或更多个蛋白分子通过转酰胺基作用和/或二硫化物相互作用相互共价结合，导致形成共价结合的二聚体、寡聚体和多聚体降解产物(Stability　of　Protein　Pharmaceuticals,　Ahern.　T.J.和Manning　M.C.,　Plenum　Press,　New　York　1992)。作为化学降解的另一种变型，可提及氧化(例如甲硫氨酸残基的氧化)。通过测量暴露在不同环境条件(降解产物的形成通常可通过例如增加温度来加速)后各时间点化学降解产物的量，可评估蛋白质制剂的化学稳定性。通常利用多种色谱技术(例如SEC-HPLC和/或RP-HPLC)，根据分子大小和/或电荷，通过分离降解产物，测量各个体降解产物的量。
因此，如上文所概述，“稳定的制剂”是指具有增加的物理稳定性、增加的化学稳定性、或增加的物理和化学稳定性的制剂。总之，制剂在使用和存储(依照推荐的使用和保存条件)期间必须稳定直至达到失效期。
在本发明的一种实施方案中，包含根据本发明化合物的药物制剂对于超过6周的使用和超过3年的存储是稳定的。
在本发明的另一种实施方案中，包含根据本发明化合物的药物制剂对于超过4周的使用和超过3年的存储是稳定的。
在本发明的另一种实施方案中，包含根据本发明化合物的药物制剂对于超过4周的使用和超过2年的存储是稳定的。
在本发明的又一种实施方案中，包含化合物的药物制剂对于超过2周的使用和超过2年的存储是稳定的。
在本发明的又一种实施方案中，包含化合物的药物制剂对于超过24周的使用和超过18个月的存储是稳定的。
含有根据本发明的胰高血糖素肽的药物组合物可给需要这类治疗的患者胃肠外施用。胃肠外给药可以用注射器(任选笔型注射器)，通过皮下、肌内或静脉内注射进行。或者，胃肠外给药可以用输注泵进行。另一选择是以经鼻或经肺喷雾剂的形式给予胰高血糖素肽的组合物，其可为粉剂或液体剂。作为又一个选择，本发明的胰高血糖素肽还可透皮给药例如由贴剂、任选离子电渗贴剂或者跨黏膜(例如颊)给药。
因此，本发明的胰高血糖素肽的注射用组合物可采用制药工业的常规技术制备，所述常规技术涉及适当时溶解并混合各成分，以得到所需的最终产物。
按照本发明的一种实施方案，提供适于通过注射给药的组合物形式的胰高血糖素肽。这类组合物可以是即用型注射用溶液剂，或者可以是一定量的固体组合物，例如冻干产物，其在可注射前，必须溶于溶剂中。
本发明的胰高血糖素肽可用于治疗多种疾病。待使用的具体胰高血糖素肽和用于任何患者的最佳剂量水平将取决于待治疗的疾病和多种因素，包括所用具体肽衍生物的功效、患者的年龄、体重、体力活动和饮食，取决于与其它药物的可能组合，并取决于病例的严重程度。建议由本领域技术人员来确定用于各个体患者的本发明胰高血糖素肽的剂量。
特别地，预期所述胰高血糖素肽将有用于制备具有延长作用特征的用于治疗非胰岛素依赖性糖尿病和/或用于治疗肥胖的药物。
在另一个方面，本发明涉及根据本发明的化合物在制备药物中的用途。
在一种实施方案中，本发明涉及根据本发明的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病、肥胖、高血压、X综合征、血脂异常、β-细胞凋亡、β-细胞缺乏症、心肌梗死、炎症性肠综合征、消化不良、认知障碍例如认知增强、神经保护、动脉粥样硬化(atheroschlerosis)、冠心病和其它心血管疾病。
在另一种实施方案中，本发明涉及根据本发明的化合物在制备用于治疗小肠综合征、炎症性肠综合征或克罗恩病的药物中的用途。
在另一种实施方案中，本发明涉及根据本发明的化合物在制备用于治疗高血糖症、1型糖尿病、2型糖尿病或β-细胞缺乏症的药物中的用途。
根据本发明化合物的治疗还可与例如选自以下的第二种或更多种药理活性物质结合：抗糖尿病药、抗肥胖药、食欲调节药、抗高血压药、用于治疗和/或预防由糖尿病导致的或与糖尿病有关的并发症的药物和用于治疗和/或预防由肥胖导致的或与肥胖有关的并发症和病症的药物。在本文中，措辞“抗糖尿病药”包括用于治疗和/或预防胰岛素抵抗和其中胰岛素抵抗是病理生理机制的疾病的化合物。
这些药理活性物质的实例为：胰岛素，GLP-1激动剂，磺脲类(例如甲苯磺丁脲、优降糖、格列吡嗪和格列齐特)，双胍类例如二甲双胍、美格列奈类，葡糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖(acorbose))，胰高血糖素拮抗剂，DPP-IV(二肽基肽酶-IV)抑制剂，涉及刺激糖异生和/或糖原分解的肝酶的抑制剂，葡萄糖摄取调节剂，噻唑烷二酮类例如曲格列酮和环格列酮，改变脂质代谢的化合物例如抗高血脂药如HMG CoA抑制剂(他汀类)，减少食物摄取的化合物，RXR激动剂和作用于β细胞的ATP依赖性钾通道的药物例如优降糖、格列吡嗪、格列齐特和瑞格列奈；消胆胺、考来替泊、氯贝丁酯、吉非贝齐、洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、普罗布考、右旋甲状腺素、那格列奈(neteglinide)、瑞格列奈；β-阻断剂例如阿普洛尔、阿替洛尔、噻吗洛尔、吲哚洛尔、普萘洛尔和美托洛尔，ACE(血管紧张素转化酶)抑制剂例如贝那普利、卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、法西多曲(alatriopril)、喹那普利和雷米普利；钙通道阻断剂例如硝苯地平、非洛地平、尼卡地平、伊拉地平、尼莫地平、地尔硫卓和维拉帕米，及α-阻断剂例如多沙唑嗪、乌拉地尔、哌唑嗪和特拉唑嗪；CART(可卡因-苯丙胺调节的转录物)激动剂，NPY(神经肽Y)拮抗剂，MC4(黑皮质素4)激动剂，食欲素拮抗剂，TNF(肿瘤坏死因子)激动剂，CRF(促肾上腺皮质素释放因子)激动剂，CRF BP(促肾上腺皮质素释放因子结合蛋白)拮抗剂，尿皮质素激动剂，β3激动剂，MSH(促黑素细胞激素)激动剂，MCH(黑素细胞浓集激素)拮抗剂，CCK(缩胆囊素)激动剂，5-羟色胺再摄取抑制剂，5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂，混合的5-羟色胺和去甲肾上腺素能化合物，5HT(5-羟色胺)激动剂，铃蟾肽激动剂，甘丙肽拮抗剂，生长激素，生长激素释放化合物，TRH(促甲状腺素释放激素)激动剂，UCP2或3(解偶联蛋白质2或3)调节剂，瘦蛋白激动剂，DA激动剂(溴隐亭、多普瑞新)，脂肪酶/淀粉酶抑制剂，RXR(类视黄醇X受体)调节剂，TR β激动剂；组胺H3拮抗剂。
应理解，根据本发明的化合物与一种或多种上述化合物和任选一种或多种其它药理活性物质的任何合适组合都视为落在本发明的范围内。
通过下列实施例对本发明作进一步说明，然而，所述实施例不应解释为限制保护的范围。上述说明书和下列实施例中公开的特征可以单独地和它们的任何组合地为以其不同形式实现本发明的素材。
实施例
缩略语表
BOC：　　　　　　叔丁基氧基羰基
DCM：　　　　　　二氯甲烷
DIC：　　　　　　 二异丙基碳二亚胺
Fmoc：　　　　　  9-芴基甲基氧基羰基
HOAt：　　　　　　1-羟基-7-氮杂苯并三唑
HPLC：　　　　　　高效液相色谱法
LCMS：　　　　　　液相色谱质谱法
MeCN：　　　　　　乙腈
Mtt：　　　　　　　 4-甲基三苯甲基
NMP：　　　　　　 N-甲基吡咯烷酮
Oxyma Pure：　　　 氰基-[肟基]乙酸乙酯
RP：　　　　　　　 反相
RP-HPLC：　　　　 反相高效液相色谱法
RT：　　　　　　　 室温
Rt：　　　　　　　 保留时间
SPPS：　　　　　　 固相肽合成
TFA：　　　　　　  三氟乙酸
TIPS：　　　　　　  三异丙基甲硅烷
UPLC：　　　　　　 超高效液相色谱法。
一般方法
本部分涉及用于合成树脂结合肽的方法(SPPS方法，包括氨基酸脱保护的方法、从树脂上分开肽及其纯化的方法)、以及用于检测和表征所得肽的方法(LCMS和UPLC方法)。
SPPS一般方法
所用Fmoc保护的氨基酸衍生物是推荐的标准物：Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(BOC)-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Trp(BOC)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH和Fmoc-Val-OH, Fmoc-Lys(Mtt)-OH，由例如Anaspec、Bachem、Iris Biotech或Novabiochem供应。
在Protein Technologies(Tucson, AZ 85714 U.S.A.)的Prelude固相肽合成仪上，用基于Fmoc的化学完成了SPPS。用于制备C-末端羧酸的合适树脂是预装柱的可获自NovabioChem的低负载王氏(Wang)树脂(例如低负载fmoc-Thr(tBu)-王氏树脂，LL，0.27 mmol/g)。用于合成C-末端酰胺的胰高血糖素类似物的合适树脂为可获自Matrix-Innovation的PAL-ChemMatrix树脂。N-末端α氨基用Boc进行了保护。当用组氨酸作为N-末端氨基酸时，使用了Boc-His(Trt)-OH。
用含20%哌啶的NMP达2 x 3分钟，实现了Fmoc-脱保护。偶联化学为是于NMP中的DIC/HOAt/三甲基吡啶或DIC/Oxyma Pure/三甲基吡啶。向树脂中加入氨基酸/HOAt溶液或氨基酸/OXYMA溶液(0.3 M/0.3 M在NMP中，以3-10倍摩尔过量)，随后加入相同摩尔当量的DIC(3 M在NMP中)，再随后加入三甲基吡啶(3 M在NMP中)。例如，在下列标度反应中，每次偶联使用了以下量的0.3 M氨基酸/HOAt溶液：标度/ml，0.05 mmol/1.5 mL、0.10 mmol/3.0 mL、0.25 mmol/7.5 mL。偶联时间为2 x 30分钟或1 x 240分钟。
使用Mtt保护的赖氨酸(Fmoc-Lys(Mtt)-OH)，实现了在赖氨酸ε-氮上的取代基的引入。通过将树脂用HFIP/DCM(75∶25)(2x 2分钟)洗涤，用DCM洗涤，并将树脂悬浮于HFIP/DCM(75∶25)(2x 20分钟)中，随后依次用哌啶/NMP(20∶80)、DCM(1x)、NMP(1x)、DCM(1x)、NMP(1x)洗涤，脱去了Mtt基团。
同样地，当侧链存在鸟氨酸上时，将要酰化的鸟氨酸的侧链δ氨基用Mtt保护(例如Fmoc-Orn(Mtt)-OH)。替代地，赖氨酸的ε-氮可用ivDde基团保护(Fmoc-Lys(ivDde)-OH)。鸟氨酸的δ氨基也同样可用ivDde基团保护(Fmoc-Orn(ivDde)-OH)。通过与氨基酸Fmoc-Glu-OtBu的偶联，实现了取代基中γ-Glu部分的引入。使用Boc-Lys(fmoc)-OH，实现了取代基中ε-Lys的引入。
使用延长偶联时间(1 x 6小时)，随后用乙酸酐或替代的乙酸/DIC/HOAt/三甲基吡啶封盖，实现了侧链上各部分的引入。使用在NMP中的乙酸酐(10当量)和三甲基吡啶(20当量)，实现了取代基上末端氮的乙酰化。使用琥珀酸酐，实现了琥珀酰基部分的引入。使用相应的羧酸/DIC/Oxyma Pure/三甲基吡啶(各10当量)，实现了其他C2-6酰基部分的引入。
从树脂上分开
在合成后，将树脂用DCM洗涤，通过用TFA/TIS/水(95/2.5/2.5)处理2-3小时，接着用乙醚沉淀，肽从树脂上被分开。沉淀物用乙醚洗涤。
纯化和定量测定
将粗制肽溶于水和MeCN的合适混合物(例如水/MeCN (4：1))中，在含有C18-硅胶的柱上，通过反相制备型HPLC (Waters Deltaprep 4000或Gilson)进行了纯化。用含有0.1% TFA的MeCN/水的递增梯度进行洗脱。相关流分用分析型HPLC或UPLC检查。将含有纯的目标肽的流分混合，减压浓缩。分析(HPLC、LCMS)所得溶液，使用化学发光的氮特异性HPLC检测器(Antek 8060 HPLC-CLND)或者通过测量280 nm下的UV吸收，定量测定产物。将产物分装入玻璃小瓶中。将小瓶用微孔玻璃纤维预滤器盖住。冻干得到三氟乙酸肽，为白色固体。
检测和表征的方法
LC-MS方法
方法：LCMS_2
从Perkin Elmer Series 200 HPLC系统中洗脱后，利用Perkin Elmer Sciex API 3000质谱仪鉴定样品的质量。洗脱液：A：含0.05％三氟乙酸的水；B：含0.05％三氟乙酸的乙腈。柱：Waters Xterra MS C-18X 3mm内径5μm。梯度：5％～90％B，1.5ml/分钟，在7.5分钟内。
方法：LCMS_4
LCMS_4在由Waters Acquity UPLC系统和来自Micromass的LCT Premier XE质谱仪组成的装置上进行。洗脱液：A：含0.1％甲酸的水；B：含0.1％甲酸的乙腈。在室温下，通过将适当体积的样品(优选2-10μl)注入柱上，并用A和B的梯度洗脱，进行了分析。UPLC条件、检测器设置和质谱仪设置为：柱：Waters Acquity UPLC BEH，C-18，1.7μm，2.1mm x 50mm。梯度：线性5％～95％乙腈，0.4ml/分钟，在4.0分钟(可选8.0分钟)内。检测：214nm(TUV(可调UV检测器)的模拟输出)。MS电离方式：API-ES。扫描：100-2000amu(可选500-2000amu)，步进0.1amu。
方法：LCMS_AP
在从包括Waters2525二元梯度模块、Waters2767样品管理器、Waters 2996光电二极管阵列检测器和Waters 2420 ELS检测器的HPLC系统中洗脱后，利用Micromass Quatro micro API质谱仪确定了样品质量。洗脱液：A：含0.1％三氟乙酸的水；B：含0.1％三氟乙酸的乙腈。柱：Phenomenex Synergi MAXRP，4um，75x4.6mm。梯度：5％～95％B，1.0ml/分钟，在7分钟内。
UPLC方法
方法04_A3_1
UPLC(方法04_A3_1)：利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：90％H2O、10％CH3CN、0.25M碳酸氢铵
B：70％CH3CN、30％H2O
使用下列线性梯度：75％A，25％B至45％A，55％B，在16分钟内，流速为0.35ml/分钟。
方法04_A4_1
UPLC(方法04_A4_1)：利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：90％H2O、10％CH3CN、0.25M碳酸氢铵
B：70％CH3CN、30％H2O
使用下列线性梯度：65％A，35％B至25％A，65％B，在16分钟内，流速为0.35ml/分钟。
方法：04_A2_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：90％H2O、10％CH3CN、0.25M碳酸氢铵；B：70％CH3CN、30％H2O。使用下列线性梯度：90％A，10％B至60％A，40％B，在16分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法：04_A6_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：10 mM TRIS、15mM硫酸铵、80％H2O、20％，pH 7.3；B：80％CH3CN、20％H2O。使用下列线性梯度：95％A，5％B至10％A，90％B，在16分钟内，流速为0.35ml/分钟。
方法：04_A7_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：10 mM TRIS、15mM硫酸铵、80％H2O、20％，pH 7.3；B：80％CH3CN、20％H2O。使用下列线性梯度：95％A，5％B至40％A，60％B，在16分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法：04_A9_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH Shield RP18, C18, 1.7um, 2.1 mm x 150 mm柱，60℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：含200 mM Na2S04 + 20 mM Na2HP04 + 20mM NaH2P04的90% H2O/10% CH3CN, pH 7.2；B：70% CH3CN、30% H20。使用下列线性梯度：90% A, 10% B～80% A, 20% B，在3分钟内；80% A, 20% B～50% A, 50% B，在17分钟内，流速为0.40 ml/分钟。
方法05_B5_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?, 1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：0.2M Na2SO4、0.04M H3PO4、10％CH3CN(pH 3.5)
B：70％CH3CN、30％H2O
使用下列线性梯度：60％A，40％B至30％A，70％B，在8分钟内，流速为0.35ml/分钟。
方法：05_B7_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：0.2M Na2SO4、0.04M H3PO4、10％CH3CN(pH 3.5)；B：70％CH3CN、30％H2O。使用下列线性梯度：80％A，20％B至40％A，60％B，在8分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法：05_B8_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：0.2M Na2SO4、0.04M H3PO4、10％CH3CN(pH 3.5)；B：70％CH3CN、30％H2O。使用下列线性梯度：50％A，50％B至20％A，80％B，在8分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法：05_B9_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：0.2M Na2SO4、0.04M H3PO4、10％CH3CN(pH 3.5)；B：70％CH3CN、30％H2O。使用下列线性梯度：70％A，30％B至20％A，80％B，在8分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法：05_B10_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：0.2M Na2SO4、0.04M H3PO4、10％CH3CN(pH 3.5)；B：70％CH3CN、30％H2O。使用下列线性梯度：40％A，60％B至20％A，80％B，在8分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法：07_B4_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：99.95％H2O、0.05％TFA；B：99.95％CH3CN、0.05％TFA。使用下列线性梯度：95％A，5％B至5％A，95％B，在16分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法：09_B2_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：99.95％H2O、0.05％TFA；B：99.95％CH3CN、0.05％TFA。使用下列线性梯度：95％A，5％B至40％A，60％B，在16分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法：09_B4_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：99.95％H2O、0.05％TFA；B：99.95％CH3CN、0.05％TFA。使用下列线性梯度：95％A，5％B至5％A，95％B，在16分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法08_B2_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：99.95％H2O、0.05％TFA
B：99.95％CH3CN、0.05％TFA
使用下列线性梯度：95％A，5％B至40％A，60％B，在16分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法08_B4_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：99.95％H2O、0.05％TFA
B：99.95％CH3CN、0.05％TFA
使用下列线性梯度：95％A，5％B至5％A，95％B，在16分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法10_B4_2
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，50℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：99.95％H2O、0.05％TFA
B：99.95％CH3CN、0.05％TFA
使用下列线性梯度：95％A，5％B至5％A，95％B，在12分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法10_B5_2
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。使用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，50℃，收集214nm和254nm的UV检测。
将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：
A：70％MeCN、30％水
B：0.2M Na2SO4、0.04M H3PO4、10％MeCN，pH 2.25
使用下列线性梯度：1分钟内40％，7分钟内40-->70％A，流速为0.40ml/分钟。
方法：10_B14_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH ShieldRP18, 1.7um，2.1mm x 150mm柱，50℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：99.95％H2O、0.05％TFA；B：99.95％CH3CN、0.05％TFA。使用下列线性梯度：70％A，30％B至40％A，60％B，在12分钟内，流速为0.40ml/分钟。
方法：AP_B4_1
利用配备双频段检测器的Waters UPLC系统进行了RP-分析。利用ACQUITY UPLC BEH130，C18，130?，1.7um，2.1mm x 150mm柱，30℃，收集了214nm和254nm下的UV检测。将UPLC系统与两个洗脱液贮器连接，所述洗脱液贮器装有：A：99.95％H2O、0.05％TFA；B：99.95％CH3CN、0.05％TFA。使用下列线性梯度：95％A，5％B至5％A，95％B，在16分钟内，流速为0.30ml/分钟。
实施例1
Nε24-[(2S)-2-[[(2S)-2-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式1：
Figure 289476DEST_PATH_IMAGE034
UPLC方法：08_B2_1：Rt = 9.7分钟
UPLC方法：08_B4_1：Rt = 6.5分钟
UPLC方法：05_B7_1：Rt = 6.0分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 10.5分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.8分钟，m/3 1255, m/4 = 942, m/5 = 754。
实施例2
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式2：
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.5分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.4分钟
UPLC方法：05_B7_1：Rt = 6.4分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 10.2分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.7分钟，m/3 = 1342, m/4 = 1007。
实施例3
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式3：
Figure 686959DEST_PATH_IMAGE036
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.6分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.4分钟
UPLC方法：05_B7_1：Rt = 6.6分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 10.7分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.7分钟，m/3 = 1336, m/4 = 1002。
实施例4
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式4：
Figure DEST_PATH_IMAGE037
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.8分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.6分钟
UPLC方法：05_B7_1：Rt = 6.8分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 11.1分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.8分钟，m/3 = 1317, m/4 = 988。
实施例5
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Glu15,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式5：
Figure 415881DEST_PATH_IMAGE038
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.5分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 8.5分钟
LC-MS方法：LCMS_4：RT= 2.8；m/3：1307；m/4：981；m/5：785。
实施例6
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Arg12,Glu15,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式6：
Figure DEST_PATH_IMAGE039
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.5分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 8.0分钟
LC-MS方法：LCMS_4：RT= 2.8；m/3：1317；m/4：988；m/5：791。
实施例7
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Thr16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式7：
Figure 557012DEST_PATH_IMAGE040
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.6分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 10.0分钟
LC-MS方法：LCMS_4：Rt = 3.6；m/z = 3921；m/3：1308；m/4：981；m/5：785。
实施例8
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Arg12,Ile16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式8：
Figure DEST_PATH_IMAGE041
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 7.2分钟
UPLC方法：04_A9_1. Rt = 13.2分钟
LC-MS方法：LCMS_4；RT = 3.8；m/3：1321；m/4：991；m/5：793。
实施例9
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Arg12,Thr16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式9：
Figure 131955DEST_PATH_IMAGE042
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.6分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 11.3分钟
LC-MS方法：LCMS_2：Rt = 4.6分钟，m/3：1317；m/4：988。
实施例10
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Val16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式10：
Figure DEST_PATH_IMAGE043
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 10.7分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 7.1分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 12.7分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 3.1分钟，m/3 = 1321 , m/4 = 991 , m/5 = 793。
实施例11
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Ile16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式11：
Figure 965918DEST_PATH_IMAGE044
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 11.0分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 7.3分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 13.2分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.0分钟，m/3 = 1326, m/4 = 994, m/5 = 796。
实施例12
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Phe16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式12：
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 11.1分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 7.3分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 13.1分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.0分钟，m/3 = 1337, m/4 = 1003, m/5 = 803。
实施例13
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式13：
Figure 978874DEST_PATH_IMAGE046
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.6分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.5分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 8.1分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.8分钟，m/3 = 1299, m/4 = 974, m/5 = 780。
实施例14
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式14：
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.5分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.4分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 8.5分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.7分钟，m/3 = 1242, m/4 = 932, m/5 = 745。
实施例15
Nε24-[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式15：
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.8分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.6分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 8.7分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.7分钟，m/3 = 1213, m/4 = 910, m/5 = 728。
实施例16
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Val16,Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式16：
Figure DEST_PATH_IMAGE049
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 10.1分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.7分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 11.5分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.9分钟，m/3 = 1346；m/4 = 1010；m/5 = 808。
实施例17
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Glu15,Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式17：
Figure 276180DEST_PATH_IMAGE050
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.5分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.4分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 8.2分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt =1.7分钟，m/3 = 1347；m/4 = 1010；m/5 = 809。
实施例18
Nε24-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式18：
Figure DEST_PATH_IMAGE051
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.7分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.5分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 9.1分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.7分钟，m/3 = 1299；m/4 = 974；m/5 = 780。
实施例19
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式19：
Figure 281045DEST_PATH_IMAGE052
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.4分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.3分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 9.4分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.7分钟，m/3 = 1345；m/4 = 1009；m/5 = 807。
实施例20
Nε24-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式20：
Figure DEST_PATH_IMAGE053
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.3分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.3分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 9.2分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.7分钟，m/3 = 1285；m/4 = 964；m/5 = 771。
实施例21
Nε24-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式21：
Figure 781297DEST_PATH_IMAGE054
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.3分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.3分钟
UPLC方法：04 _A9_1：Rt = 9.4分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.7分钟，m/3 = 1328；m/4 = 996；m/5 = 797。
实施例22
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Glu15,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式22：
Figure DEST_PATH_IMAGE055
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.8分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.6分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 9.0分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.8分钟，m/3 = 1343；m/4 = 1007；m/5 = 806。
实施例23
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Glu15,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式23：
Figure 264230DEST_PATH_IMAGE056
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.7分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.5分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 8.8分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.8分钟，m/3 = 1338；m/4 = 1003；m/5 = 803。
实施例24
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式24：
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.5分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.4分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 9.1分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.8分钟，m/3 = 1385；m/4 = 1039；m/5 = 832。
实施例25
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式25：
Figure 799117DEST_PATH_IMAGE058
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.4分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.3分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 8.7分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1 .8分钟，m/3 = 1601；m/4 = 1201；m/5 = 961。
实施例26
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Thr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素基(glucagonyl)-Pro
化学式26：
Figure DEST_PATH_IMAGE059
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 10.9分钟
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.9分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.8分钟，m/3 = 1380；m/4 = 1035；m/5 = 828。
实施例27
Nεl2-[(2S)-6-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-2-氨基己酰基]-[Leu27]-胰高血糖素
化学式27：
Figure 912567DEST_PATH_IMAGE060
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.7分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.6分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 9.8分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1 .8分钟，m/3 = 1385；m/4 = 1039；m/5 = 831。
实施例28
Nεl2-[2-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]乙酰基]-[Leu27]-胰高血糖素
化学式28：
Figure DEST_PATH_IMAGE061
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 6.8分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 10.0分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 9.6分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.9分钟，m/3 = 1361；m/4 = 1021。
实施例29
Nεl2-[(2S)-2-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-5-胍基戊酰基(carbamimidamidopentanoyl)]-[Leu27]-胰高血糖素
化学式29：
Figure 903044DEST_PATH_IMAGE062
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.7分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.6分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 9.6分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.8分钟，m/3 = 1394；m/4 = 1046；m/5 = 837。
实施例30
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Thr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式30：
Figure DEST_PATH_IMAGE063
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.9分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.6分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 10.6分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.9分钟，m/3 = 1338；m/4 = 1003；m/5 = 803。
实施例31
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Glu15,Thr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式31：
Figure 189669DEST_PATH_IMAGE064
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.7分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.5分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 9.6分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.9分钟，m/3 = 1346；m/4 = 1010；m/5 = 808。
实施例32
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Thr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式32：
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.7分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.5分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 10.8分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.9分钟，m/3 = 1341；m/4 = 1006；m/5 = 805。
实施例33
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Thr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式33：
Figure 313482DEST_PATH_IMAGE066
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.5分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 6.4分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 10.8分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.9分钟，m/3 = 1327；m/4 = 995；m/5 = 796。
实施例34
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Trp16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式34：
Figure DEST_PATH_IMAGE067
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 13.3分钟
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 10.6分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.1分钟，m/3 = 1366；m/4 = 1025；m/5 = 820。
实施例35
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Phe16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式35：
Figure 660150DEST_PATH_IMAGE068
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 13.1分钟
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 10.6分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.1分钟，m/3 = 1353；m/4 = 1015；m/5 = 812。
实施例36
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ile16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式36：
Figure DEST_PATH_IMAGE069
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 13.1分钟
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 10.6分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.1分钟，m/3 = 1342；m/4 = 1006；m/5 = 806。
实施例37
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Tyr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式37：
Figure 134994DEST_PATH_IMAGE070
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 11.5分钟
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 10.1分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.0分钟，m/3 = 1359；m/4 = 1019；m/5 = 816。
实施例38
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式38：
Figure DEST_PATH_IMAGE071
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 14.1分钟
UPLC方法：09_B4_1：Rt = 7.1分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.1分钟，m/3 = 1342；m/4 = 1007；m/5 = 806。
实施例39
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式39：
Figure 225310DEST_PATH_IMAGE072
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 14.1分钟
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 10.7分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.1分钟，m/3 = 1350；m/4 = 1013；m/5 = 811。
实施例40
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素基-Pro
化学式40：
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 14.0分钟
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 10.7分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.1分钟，m/3 = 1384；m/4 = 1038；m/5 = 831。
实施例41
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Thr2,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式41：
Figure 406892DEST_PATH_IMAGE074
UPLC方法：08_B2_1：Rt = 10.4分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 12.8分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.1分钟，m/3 = 1347；m/4 = 1010；m/5 = 808。
实施例42
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ala2,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式42：
UPLC方法：08_B2_1：Rt = 10.4分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 12.8分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.0分钟，m/3 = 1337；m/4 = 1002；m/5 = 802。
实施例43
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Val10,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式43：
UPLC方法：UPLC_AP：Rt = 7.16分钟
LCMS方法：LCMS_AP：Rt = 4.9分钟，m/2 = 1980；m/3 = 1320。
实施例44
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Val10,Glu15,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式44：
Figure DEST_PATH_IMAGE077
UPLC方法：UPLC_AP：Rt = 6.53分钟
LCMS方法：LCMS_AP：Rt = 4.8分钟，m/2 = 1973；m/3 = 1316。
实施例45
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Val10,Glu15,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式45：
UPLC方法：UPLC_AP：Rt= 6.57分钟
LCMS方法：LCMS_AP：Rt = 4.7分钟，m/2 = 1980；m/3 = 1320。
实施例46
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Gly2,His3,Val16,Ala20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式46：
Figure DEST_PATH_IMAGE079
UPLC方法：05_B4_1：Rt = 7.0分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.0分钟，m/3 = 1315；m/4 = 987；m/5 = 790
UPLC方法：01_A9_1：Rt = 16.5分钟。
实施例47
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ala2,His3,Val16,Ala20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式47：
Figure 252379DEST_PATH_IMAGE080
UPLC方法：05_B4_1：Rt = 7.0分钟
UPLC方法：01_A9_1：Rt = 16.6分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.0分钟，m/3 = 1320；m/4 = 990；m/5 = 792。
实施例48
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Aib2,His3,Val16,Ala20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式48：
Figure DEST_PATH_IMAGE081
UPLC方法：05_B4_1：Rt = 7.0分钟
UPLC方法：01_A9_1：Rt = 16.8分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.0分钟，m/3 = 1325；m/4 = 994；m/5 = 795。
实施例49
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Gly2,Val16,Ala20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式49：
Figure 554047DEST_PATH_IMAGE082
UPLC方法：05_B4_1：Rt = 7.0分钟
UPLC方法：01_A9_1：Rt = 16.4分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.0分钟，m/3 = 1313；m/4 = 985；m/5 = 788。
实施例50
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Gly2,His3,Val10,Val16,Ala20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式50：
Figure DEST_PATH_IMAGE083
UPLC方法：05_B4_1：Rt = 7.1分钟
UPLC方法：01_A9_1：Rt = 17.2分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.1分钟，m/3 = 1294；m/4 = 971；m/5 = 777。
实施例51
Nα([Leu27,Ser28]-胰高血糖素基)-Nε[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]Lys
化学式51：
Figure 976938DEST_PATH_IMAGE084
UPLC方法：LCMS_4 UPLC02v01：Rt = 6.22分钟；
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.80分钟；计算的m/z；4124.44；m/3 1375.81；m/4 1032.11；m/5 825.88；实测的m/z 4124.2；m/3 1375.6；m/4 1031.7；m/5 825.8。
实施例52
Nε29-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Leu27,Ser28,Lys29]-胰高血糖素
化学式52：
Figure DEST_PATH_IMAGE085
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.35分钟
LCMS方法：LCMS_4 Rt = 1.75 min。计算的m/z 4023.33；m/3 1342.11；m/4 1006.83；m/5 805.66；实测的m/z 4022.6；m/3 1341 .9；m/4 1006.4；m/5 805.6。
实施例53
Nε28-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Leu27,Lys28]-胰高血糖素
化学式53：
Figure 426374DEST_PATH_IMAGE086
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.26分钟
LCMS方法：LCMS_4；Rt =1.77分钟。计算的m/z 4037.36；m/3 1346.78；m/4 1010.34；m/5 808.47；实测的m/z 4036.9；m/3 1346.6；m/4 1010.2；m/5 808.4。
实施例54
Nε20-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys20,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式54：
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.76分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.85分钟。计算的m/z 3996.31；m/3 1333.10；m/4 1000.07；m/5 800.26；实测的m/z 3995.6；m/3 1332.9；m/4 999.7；m/5 800.2。
实施例55
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Gly2,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式55：
Figure 858493DEST_PATH_IMAGE088
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 10.49分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.01分钟。计算的m/z 3992.36；m/3 1331.78；m/4 999.09；m/5 799.47；实测的m/z 3992.2；m/3 1331.6；m/4 998.7；m/5 799.4。
实施例56
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式56：
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 11.05分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 2.10分钟。计算的m/z 3993.35；m/3 1332.11；m/4 999.33；m/5 799.67；实测的m/z 3993.1；m/3 1332.0；m/4 998.9；m/5 799.6。
实施例57
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Leu16,Glu20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式52：
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 10.93分钟；
LCMS方法：LCMS_4：计算的m/z 4051.39；m/3 1351.46；m/4 1013.84；m/5 811.27；实测的m/z 4050.7；m/3 1351.3；m/4 1013.4；m/5 811.2。
实施例58
Nε24-[(2S)-6-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-2-氨基己酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式58：
Figure DEST_PATH_IMAGE091
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 8.9分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 9.4分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.9分钟，m/4 = 1038.7；m/5 = 831.1；m/5 = 692.9。
实施例59
Nεl6-[(2S)-6-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-2-氨基己酰基]-[Lys16,Ala18,Leu27,Ser28]-胰高血糖素酰胺
化学式59：
UPLC方法：09_B2_1：Rt = 9.8分钟
UPLC方法：04_A9_1：Rt = 11.7分钟
LCMS方法：LCMS_4：Rt = 1.9分钟，m/3 = 1360；m/4 = 1020；m/5 = 816。
实施例60
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ala2,His3,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式60：
Figure DEST_PATH_IMAGE093
UPLC方法：UPLC AP Rt = 6.79分钟。
实施例61
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ala2,Val10,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式61：
Figure 279613DEST_PATH_IMAGE094
UPLC方法：UPLC_AP Rt = 7.38分钟。
实施例62
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ala2,His3,Val10,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式62：
Figure DEST_PATH_IMAGE095
UPLC方法：UPLC_AP Rt = 7,19分钟。
实施例63
Nε24-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(丙酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式63：
UPLC方法：UPLC_AP Rt = 7.24分钟。
实施例64
Nε24-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(2-甲基丙酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式64：
Figure DEST_PATH_IMAGE097
UPLC方法：UPLC_AP Rt = 7.31分钟。
实施例65
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-(丁酰基氨基)-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式65：
Figure 526103DEST_PATH_IMAGE098
UPLC方法：UPLC_AP：Rt= 7.31分钟。
实施例66
Nε24-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(3-羧基丙酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式66：
Figure DEST_PATH_IMAGE099
UPLC方法：UPLC_AP：Rt= 7.22分钟。
实施例67
Nε24-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(戊酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式67：
Figure 556376DEST_PATH_IMAGE100
UPLC方法：UPLC_AP：Rt= 7.38分钟。
实施例68
Nεl6-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys16,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式68：
Figure DEST_PATH_IMAGE101
UPLC方法：UPLC_AP：Rt= 6.50分钟。
实施例69
Nε21-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys21,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式69：
UPLC方法：UPLC_AP：t = 6.41分钟。
药理学方法
测定法(I)
胰高血糖素活性
将胰高血糖素受体克隆至具有膜结合cAMP生物传感器(ACTOne?)的HEK-293细胞中。将细胞(14000个/孔)在384孔板中温育(37℃，5% CO2)过夜。次日，使细胞负载只分布于胞质中的钙反应性染料。加入有机阴离子转运子抑制剂丙磺舒以防止染料离开细胞。加入PDE抑制剂以防止形成的cAMP降解。将板置于FLIPRTETRA中，加入胰高血糖素类似物。6分钟后收集终点数据。胞内cAMP的增加与胞质中钙浓度的增加成比例。当钙结合染料时，便产生荧光信号。用Prism5计算EC50值。
测定法(II)
用于评价肽制剂的物理稳定性的ThT原纤维形成的测定
肽的低物理稳定性可导致淀粉样原纤维形成，这可观察到样品中井然有序的丝状大分子结构最终形成凝胶。在传统上通过视觉检查样品来测量。然而，这种测量是非常主观的，并依赖于观测者。因此，应用小分子指示物探针要有利得多。硫磺素T(ThT)便是这样的探针，当与原纤维结合时，具有不同的荧光特性[Naiki等(1989) Anal. Bi°chem. 177, 244-249；LeVine (1999) Methods. Enzymol. 309, 274-284]。
用下列表达式，通过S形曲线可描述原纤维形成的时间过程[Nielsen等(2001 ) Bi°Chemistry 40, 6036-6046]：
Figure DEST_PATH_IMAGE103
方程式(1)
式中，F是时间t时的ThT荧光。常数t0是达到最大荧光50%所需要的时间。描述原纤维形成的两个重要参数是通过t0 - 2τ所计算的滞后时间和表观速率常数kapp 1/τ。
肽部分折叠的中间体形成被建议作为原纤维形成的一般引发机制。少量的这些中间体成核形成模板，更多的中间体可在其上装配，并继续进行原纤维形成。滞后时间相当于其中建立核临界质量的间隔，而表观速率常数是原纤维本身形成的速率。
样品在每次测定前新鲜制备。各样品的组成描述于图例中。用适当量的浓NaOH和HCl调节样品的pH至所需值。将硫磺素T自储液于H2O中加入样品中至终浓度1μM。
将200 μl等分量的样品置于96孔微量板(Packard OptiPlate?-96，白色聚苯乙烯)中。通常，将各样品一式4份或8份(相应一种试验条件)置于一列孔中。将板用Scotch Pad(Qiagen)密封。
在规定温度下孵育，振荡，在Fluoroskan Ascent FL荧光读板仪(Thermo Labsystems)中进行了ThT荧光发射的测量。调节温度至所需值，通常为30℃或37℃。在无振荡(无外部物理应力)或用调节至960 rpm、幅度为1 mm的定轨振荡下，将板孵育。采用444 nm滤光器激发和测量485 nm滤光器发射，进行了荧光测量。
将板在测定温度下孵育10分钟以开始各运行。在所需时期内每20分钟对板进行了测量。在每次测量之间，按照所述将板振荡和加热。
在ThT测定法完成后，合并各样品的一式4份或8份，在18℃下以20000 rpm离心30分钟。上清液通过0.22 μm过滤器过滤，将等分量转移至HPLC小瓶中。
使用合适的标准品作为参比，通过反相HPLC测定了初始样品中和经过滤的上清液中的肽浓度。过滤样品的浓度占初始样品浓度的百分比被报告为回收率。
将测量点存于Microsoft Excel格式中用于进一步处理，利用GraphPad Prism绘制曲线并拟合。在缺乏原纤维时来自ThT的背景发射可忽略。数据点通常为4或8个样品的平均值，用标准差误差棒表示。在同一曲线中仅提供同一实验(即同一板中的样品)中得到的数据，以确保实验之间原纤维形成的相对测量。
可将数据集拟合至方程式(1)。然而，通过视觉检查曲线，识别ThT荧光显著高于背景水平的时间点，可评价原纤维形成前的滞后时间。
测定法(III)
在不同pH下的ThT原纤维形成和溶解度
胰高血糖素类似物溶解至250 μΜ，将等分部分调节为不同的pH。样品在室温下平衡2～4天，随后离心。在离心溶液中肽的浓度以平衡后所述pH时的测量值显示。天然的人胰高血糖素以黑色和封闭正方形显示，胰高血糖素类似物以浅灰色和开放正方形显示。
此外，将200 μl各调整pH和平衡的样品在离心后移出，并转移至白色96孔微量板(Optiplate, Packard)。
将淀粉样原纤维指示剂硫磺素T(ThT)加入至1 μΜ。将板密封并在Fluoroskan Ascent FL荧光读板仪(Thermo Labsystems)中37℃孵育，并调节定轨振荡至960 rpm、幅度为1 mm。采用444 nm滤光器激发和测量485 nm滤光器发射，进行了荧光测量。将板在测定温度下孵育10分钟以开始各运行。在45小时内每20分钟对板进行了测量。在每次测量之间，按照所述将板振荡和加热。在ThT荧光(即淀粉样原纤维的形成)中任何增加前的滞后时间，在图形上使用右边y轴以及浅灰色折线和三角形进行了描绘。不存在增加的ThT荧光则记为滞后时间45小时。在沉淀区内的几个点没有观察到ThT荧光增加，但这归因于这一事实：所有的肽沉淀了，因此这些点没有描述滞后时间值。
Figure 491676DEST_PATH_IMAGE104
Figure DEST_PATH_IMAGE105
测定法 (IV)
SC给药后G?ttingen小型猪的PK/PD
在研究中使用了G?ttingen雄性小型猪(Ellegaard G?ttingen Minipigs A/S, Dalmose, Denmark)，大约7～10个月龄，体重约15～20 kg。小型猪各自安置，每天一次用SDS小型猪饲料(Special Diets Services, Essex, UK)限制性饲喂。经过至少2周的适应后，将两个永久性中心静脉导管植入每个动物的尾侧腔静脉或颅侧腔静脉，以能够获得无压力的血液样本。为了放置永久静脉导管，在麻醉期间，对猪进行了颈侧部扫描，将适用皮下注射的没有下面肌肉的区域标记了纹身，以确保化合物每次在同一地方皮下递送。在手术后允许这些动物1周的恢复期，然后将其在投药期间以合适的间歇期用于反复的药代动力学研究。
在整个研究过程中，这些动物在给药前禁食约18小时，但在所有时间随意饮水。将GlucaGen? HypoKit (NNC0025-8000)皮下(SC)投药给8头G?ttingen小型猪(3.5 nmol/kg)，将溶于乳糖溶液107mg/ml的NNC0025-8000经IV投药给8头G?ttingen小型猪(2 nmol/kg)。将实施例2的胰高血糖素衍生物溶解在50 mM磷酸钠、145 mM氯化钠、0.05%吐温80中，pH 7.4，并经IV投药给2头猪 (2 nmol/kg)和经SC投药给4头猪(3.5 nmol/kg)。化合物在用于IV和SC投药的给药溶液中的浓度分别为60和287 nmol/mL。
在给药后预定的时间点高达4小时内取血。血液样品收集在含有抑肽酶(14μΜ)的EDTA缓冲液 (8mM)中，然后在4℃和1942 G离心10分钟。将血浆转移到于干冰上的Micronic管中，并保持在-20℃，直至使用ELISA或类似的基于抗体的测定法分析各胰高血糖素衍生物的血药浓度。将10 μL的血浆转移至500μL的EBIO溶液中，并在 Biosen (生物传感器)自动分析仪(BIOSEN S_Line, EKF Diagnostics, Cardiff, UK)上根据制造商的说明测量。
SC GlucaGen? HypoKit组中的三头猪和SC组施用实施例2的1头猪是给药不正确的，因此从图形表示的数据和药代动力学分析中略去。
个体血药浓度-时间曲线通过非房室模型用WinNonlin v. 5.0 (Pharsight Inc., Mountain View, CA, USA)进行了分析，下表2中给出了选择的药动学参数。葡萄糖数据采用双因素方差分析进行了比较，选定的PK参数用t检验或非参数检验 (GraphPad Prism version 5.00 for Windows, GraphPad Software, San Diego California USA)进行了比较。
Figure DEST_PATH_IMAGE107
实施例2 的猪研究显示，与GlucaGen? HypoKit相比，在这个模型中尽管在药动学参数中存在显着差异，但可获得相当的药效学特性(图4，表2)。
测定法 (V)
长期储存稳定性
将实施例2、4、5、7、12都制成250 μΜ肽、184 mM丙二醇、58 mM苯酚、8 mM磷酸二钠，pH 7.4。将Aib类似物制成125 μΜ肽、184 mM丙二醇、58 mM苯酚、8 mM磷酸二钠，pH 7.4。
将这些制剂1毫升装在1.5 ml Penfill?。
将Penfill?不动地存储在5℃(24周)、25℃(4周、8周、16周、24周)和在37℃(4周)。
在各时间点，取回Penfill?，使用10.000 勒克斯光源目视检查。通过将Penfill?置于Hach 2100AN浊度仪中，测量了浊度。这些观察结果总结于表2中。
这些制剂中所有的实施例，除了Aib类似物I，在所有测量时间时，即在5℃和25℃24周以及在37℃4周，保持视觉上透明。然而，Aib类似物在25℃16周后沉淀，此外在5℃24周后沉淀。甚至在??普通的日光下目视和通过高浊度NTU读数，观察到这种情况。
Figure 419180DEST_PATH_IMAGE108
表3.NTU(比浊法浊度单位)：单一Penfill?在各时间点进行了测定。在“开始”处的值是所有配制肽的Penfill?的最小值和最大值。1 )和 2)表示两种单一Penfill?，1 )于16w和取回后观察，2)于16w时和在24w后取回观察。3)存在太多的气泡，不能进行有意义的浊度读数
Figure DEST_PATH_IMAGE109
*化合物包括参照物；w：周，Visual insp.：目视检查，沉淀：表示在Penfill中视觉可识别的沉淀物。本文所有实例中，即使在普通的日光下而无需使用10.000勒克斯光源，沉淀是可见的。
长期储存期间肽的二级结构的稳定性
将实施例5配制成250 μΜ肽、184 mM丙二醇、58 mM苯酚、8 mM磷酸二钠，pH 7.4。如测定法(V)所述，在多种温度和时间间隔装入和存储该制剂。在指定的时间点取回等分部分，记录远紫外圆二色(CD)光谱。减去单独使用制剂溶媒的背景，将所描绘的分子CD光谱使用测得的肽浓度和肽键的数目进行标准化，光路径长度为0.01cm。光谱的多种合谱显示在图5中。
远紫外CD光谱是对肽链的二级结构和折叠敏感的。在多种贮存条件下所有记录的实施例5的CD光谱实际上是相同的。这表明实施例5的二级结构在整个存储期间保持稳定和完整。此外，CD光谱的形状表明了实质上数量的α螺旋构象，光谱缺乏作为β折叠的肽折叠的特征[Manavalan和Johnson, Nature 305, 831 -832, 1983]，β折叠在淀粉样原纤维中是明显的。这些观察表明，实施例5在延长储存期间的高物理稳定性，导致形成淀粉样原纤维的低倾向。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　序列表
 
<110>  诺沃-诺迪斯克有限公司
 
<120>  新型胰高血糖素类似物
 
<130>  8330
 
<160>  1
 
<170>  PatentIn version 3.5
 
<210>  1
<211>  29
<212>  PRT
<213>  人类（Homo sapiens）
 
<400>  1
 
His Ser Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Ser
1                         5                              10                            15        
 
 
Arg Arg Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Met Asn Thr
                    20                              25                            

Claims (15)

1.式[I]的胰高血糖素肽的衍生物、或其药学上可接受的盐、酰胺或羧酸：
His-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-X18-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29-X30　　[I]
包括连接到所述胰高血糖素肽位置X12、X16、X20、X21、X24、X28、X29、和/或X30中的氨基酸侧链氮的取代基，且其中所述取代基具有式II：
Y1-Y2-Y3-Y4-Y5-Y6-Y7-Y8-Y9-Y10-Y11-Y12　　[II]
其中
Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10或Y11各自缺失或各自代表氨基酸或i、ii、iii、iv，其具有立体化学构型L或D，或结构v
Figure 666668DEST_PATH_IMAGE001
Y12缺失或代表C2-6酰基或琥珀酰基部分，条件为式II的取代基包含三至十个带负电荷的部分。
2.根据权利要求1的胰高血糖素肽的衍生物，其中
Y1缺失或代表氨基酸，例如但不限于Arg、ε-Lys或Gly；
Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10或Y11各自缺失或各自代表氨基酸或i或ii；
Figure 445793DEST_PATH_IMAGE002
和
Y12缺失或代表式vi、vii、viii、ix、x或xi的结构：
Figure 225530DEST_PATH_IMAGE003
。
3.根据权利要求2的胰高血糖素肽的衍生物，其中：
Y1缺失或代表Arg、ε-Lys或Gly；
Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10或Y11各自缺失或各自代表i或ii；
Figure 620739DEST_PATH_IMAGE004
和
Y12缺失或代表式vi、vii、viii、ix、x或xi的结构：
Figure 497428DEST_PATH_IMAGE005
。
4.根据权利要求1～3的胰高血糖素肽的衍生物，其中所述取代基连接到所述胰高血糖素肽位置X24的氨基酸侧链。
5.根据权利要求4的胰高血糖素肽的衍生物，其中X24代表Lys。
6.根据前述权利要求中任何一项的胰高血糖素肽的衍生物，其中所述胰高血糖素肽包括高达15个氨基酸残基的取代基且其中：
X2代表Ser、Aib、Thr、Ala、或Gly；
X3代表Gln、His；
X10代表Tyr、Val或；
X12代表Lys、Orn或Arg；
X15代表Asp或Glu；
X16代表Ser、Thr、Lys、Val、Tyr、Phe、Leu、Ile或Trp或Orn；
X18代表Arg、Lys、Ala或Orn；
X20代表Gln、Lys、Ala、Glu或Orn；
X21代表Asp、Glu、Lys或Orn；
X24代表Gln、Lys、或Orn；
X27代表Met或Leu
X28代表Asn、Lys、Ser或Orn；
X29代表Thr、Lys或Orn和
X30缺失或代表Lys、Pro或Orn。
7.根据前述权利要求中任何一项的胰高血糖素肽，其选自：
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式2：
Figure 319891DEST_PATH_IMAGE006
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式3：
Figure 852503DEST_PATH_IMAGE007
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式4：
Figure 51404DEST_PATH_IMAGE008
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Glu15,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式5：
Figure 579337DEST_PATH_IMAGE009
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Arg12,Glu15,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式6：
Figure 572701DEST_PATH_IMAGE010
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Thr16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式7：
Figure 592609DEST_PATH_IMAGE011
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Arg12,Ile16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式8：
Figure 329621DEST_PATH_IMAGE012
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Arg12,Thr16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式9：
Figure 712061DEST_PATH_IMAGE013
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Val16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式10：
Figure 141905DEST_PATH_IMAGE014
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Ile16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式11：
Figure 445848DEST_PATH_IMAGE015
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Phe16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式12：
Figure 986550DEST_PATH_IMAGE016
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式13：
Figure 630021DEST_PATH_IMAGE017
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Val16,Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式16：
Figure 827172DEST_PATH_IMAGE018
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Glu15,Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式17：
Nε24-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式18：
Figure 697225DEST_PATH_IMAGE020
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式19：
Figure 460782DEST_PATH_IMAGE021
Nε24-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式20：
Figure 232428DEST_PATH_IMAGE022
Nε24-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式21：
Figure 42121DEST_PATH_IMAGE023
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Glu15,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式22：
Figure 924627DEST_PATH_IMAGE024
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Glu15,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式23：
Figure 542690DEST_PATH_IMAGE025
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式24：
Figure 485238DEST_PATH_IMAGE026
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式25：
Figure 782227DEST_PATH_IMAGE027
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Thr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素基-Pro
化学式26：
Figure 202844DEST_PATH_IMAGE028
Nε12-[(2S)-6-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-2-氨基己酰基]-[Leu27]-胰高血糖素
化学式27：
Nεl2-[2-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]乙酰基]-[Leu27]-胰高血糖素
化学式28：
Figure 851180DEST_PATH_IMAGE030
Nεl2-[(2S)-2-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-5-胍基戊酰基]-[Leu27]-胰高血糖素
化学式29：
Figure 41990DEST_PATH_IMAGE031
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Thr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式30：
Figure 266298DEST_PATH_IMAGE032
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Glu15,Thr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式31：
Figure 189779DEST_PATH_IMAGE033
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Thr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式32：
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[His3,Thr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式33：
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Trp16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式34：
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Phe16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式35：
Figure 158555DEST_PATH_IMAGE037
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ile16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式36：
Figure 613808DEST_PATH_IMAGE038
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Tyr16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式37：
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式38：
Figure 938796DEST_PATH_IMAGE040
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式39：
Figure 506043DEST_PATH_IMAGE041
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素基-Pro
化学式40：
Figure 866617DEST_PATH_IMAGE042
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Thr2,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式41：
Figure 112791DEST_PATH_IMAGE043
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ala2,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式42：
Figure 544909DEST_PATH_IMAGE044
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Val10,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式43：
Figure 435505DEST_PATH_IMAGE045
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Val10,Glu15,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式44：
Figure 498139DEST_PATH_IMAGE046
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Val10,Glu15,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式45：
Figure 106975DEST_PATH_IMAGE047
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Gly2,His3,Val16,Ala20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式46：
Figure 154170DEST_PATH_IMAGE048
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ala2,His3,Val16,Ala20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式47：
Figure 227168DEST_PATH_IMAGE049
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Aib2,His3,Val16,Ala20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式48：
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Gly2,Val16,Ala20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式49：
Figure 291256DEST_PATH_IMAGE051
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Gly2,His3,Val10,Val16,Ala20,Glu21,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式50：
Figure 268440DEST_PATH_IMAGE052
Nα([Leu27,Ser28]-胰高血糖素基)-Nε[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]Lys
化学式51：
Figure 992682DEST_PATH_IMAGE053
Nε29-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Leu27,Ser28,Lys29]-胰高血糖素
化学式52：
Figure 131539DEST_PATH_IMAGE054
Nε28-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Leu27,Lys28]-胰高血糖素
化学式53：
Figure 980547DEST_PATH_IMAGE055
Nε20-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys20,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式54：
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Gly2,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式55：
Figure 74590DEST_PATH_IMAGE057
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式56：
Figure 446666DEST_PATH_IMAGE058
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Leu16,Glu20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式52：
Nε24-[(2S)-6-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-2-氨基己酰基]-[Lys24,Leu27]-胰高血糖素
化学式58：
Nεl6-[(2S)-6-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-2-氨基己酰基]-[Lys16,Ala18,Leu27,Ser28]-胰高血糖素酰胺
化学式59：
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ala2,His3,Leu16,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式60：
Figure 18800DEST_PATH_IMAGE062
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ala2,Val10,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式61：
Figure 311241DEST_PATH_IMAGE063
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Ala2,His3,Val10,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式62：
Figure 168339DEST_PATH_IMAGE064
Nε24-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(丙酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式63：
Figure 924942DEST_PATH_IMAGE065
Nε24-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(2-甲基丙酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式64：
Figure 576503DEST_PATH_IMAGE066
Nε24-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-(丁酰基氨基)-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式65：
Figure 887399DEST_PATH_IMAGE067
Nε24-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(3-羧基丙酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式66：
Figure 282608DEST_PATH_IMAGE068
Nε24-[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-[[(4S)-4-羧基-4-(戊酰基氨基)丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]氨基]丁酰基]-[Arg12,Leu16,Ala20,Lys24,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式67：
Figure 690456DEST_PATH_IMAGE069
Nεl6-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys16,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式68：
Figure 778498DEST_PATH_IMAGE070
Nε21-[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-[[(4S)-4-乙酰氨基-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]氨基]-4-羧基丁酰基]-[Lys21,Leu27,Ser28]-胰高血糖素
化学式69：
Figure 311110DEST_PATH_IMAGE071
。
8.药物组合物，其包括根据权利要求1～7中任何一项的胰高血糖素肽。
9.根据权利要求8的药物组合物，其进一步包含一种或多种其它治疗活性化合物或物质。
10.根据权利要求8～9中任何一项的药物组合物，其适合于肠胃外给药。
11.根据权利要求1～7中任何一项的胰高血糖素肽的衍生物，其用于治疗。
12.根据权利要求1～7中任何一项的胰高血糖素肽在制备药物中的用途。
13.根据权利要求1～7中任何一项的胰高血糖素肽在制备药物中的用途，其中所述药物用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病和肥胖。
14.根据权利要求1～7中任何一项的胰高血糖素肽在制备药物中的用途，其中所述药物用于延迟或防止2型糖尿病的疾病进展、治疗肥胖或预防超重、减少食物摄取、增加能量消耗、减轻体重、延迟从葡萄糖耐量减低(IGT)到2型糖尿病的进展；延迟从2型糖尿病到需要胰岛素的糖尿病的进展；调节食欲；引起饱满感；在成功减轻体重后防止体重恢复；治疗与超重或肥胖有关的疾病或状态；治疗易饿病；治疗暴饮暴食；治疗动脉粥样硬化、高血压、2型糖尿病、IGT、血脂异常、冠心病、肝脂肪变性、治疗β-阻断剂中毒、用于抑制胃肠道运动，有用于结合应用技术如X射线、CT-和NMR-扫描的胃肠道检查。
15.根据权利要求1～7中任何一项的胰高血糖素肽在制备药物中的用途，其中所述药物用于治疗或预防低血糖、胰岛素诱导的低血糖、反应性低血糖、糖尿病性低血糖、非糖尿病性低血糖、空腹低血糖、药物诱导的低血糖、胃旁路术诱发性低血糖、妊娠期低血糖、酒精诱发性低血糖、胰岛素瘤和Von Girkes病。
CN201280015759.6A 2011-03-28 2012-03-28 新型胰高血糖素类似物 Expired - Fee Related CN103596583B (zh)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161468285P 2011-03-28 2011-03-28
EP11159967.6 2011-03-28
EP11159967 2011-03-28
US61/468,285 2011-03-28
EP11182475.1 2011-09-23
EP11182475 2011-09-23
US201161539128P 2011-09-26 2011-09-26
US61/539,128 2011-09-26
PCT/EP2012/055481 WO2012130866A1 (en) 2011-03-28 2012-03-28 Novel glucagon analogues

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103596583A true CN103596583A (zh) 2014-02-19
CN103596583B CN103596583B (zh) 2016-07-27

Family

ID=46929510

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201280015759.6A Expired - Fee Related CN103596583B (zh) 2011-03-28 2012-03-28 新型胰高血糖素类似物

Country Status (13)

Country Link
US (2) US20140031278A1 (zh)
EP (1) EP2691108A1 (zh)
JP (1) JP2014510739A (zh)
KR (1) KR20140020292A (zh)
CN (1) CN103596583B (zh)
AU (1) AU2012234276A1 (zh)
BR (1) BR112013024076A2 (zh)
CA (1) CA2830974A1 (zh)
IL (1) IL227869A0 (zh)
MX (1) MX2013011175A (zh)
RU (1) RU2013145013A (zh)
WO (1) WO2012130866A1 (zh)
ZA (1) ZA201306514B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111683675A (zh) * 2017-12-07 2020-09-18 阿道恰公司 包含人胰高血糖素和共聚氨基酸的呈可注射水溶液形式的组合物
CN111936159A (zh) * 2018-01-23 2020-11-13 Xeris药物公司 使用微剂量的稳定胰高血糖素治疗减肥术后低血糖症

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8515257B2 (en) * 2007-10-17 2013-08-20 International Business Machines Corporation Automatic announcer voice attenuation in a presentation of a televised sporting event
DK2454282T3 (en) 2009-07-13 2015-05-04 Zealand Pharma As acetylated glucagonanaloger
JP6352806B2 (ja) 2011-09-23 2018-07-04 ノヴォ ノルディスク アー／エス 新規のグルカゴン類似体
MX356641B (es) 2012-05-03 2018-06-07 Zealand Pharma As Compuestos agonistas dobles de gip-glp-1 y procedimientos.
NZ704043A (en) 2012-07-23 2017-07-28 Zealand Pharma As Glucagon analogues
TWI608013B (zh) 2012-09-17 2017-12-11 西蘭製藥公司 升糖素類似物
RU2683039C2 (ru) 2013-04-18 2019-03-26 Ново Нордиск А/С Стабильные совместные агонисты рецептора глюкагоноподобного пептида-1/глюкагона пролонгированного действия для медицинского применения
PL3057984T3 (pl) 2013-10-17 2018-12-31 Zealand Pharma A/S Acylowane analogi glukagonu
US9988429B2 (en) 2013-10-17 2018-06-05 Zealand Pharma A/S Glucagon analogues
MX369770B (es) 2013-11-06 2019-11-21 Zealand Pharma As Compuestos agonistas triples de glucagón-glp-1-gip.
EP3065767B1 (en) 2013-11-06 2020-12-30 Zealand Pharma A/S Gip-glp-1 dual agonist compounds and methods
AR098616A1 (es) * 2013-12-18 2016-06-01 Lilly Co Eli Péptido para el tratamiento de hipoglicemia severa
CN106029088A (zh) * 2014-02-18 2016-10-12 诺和诺德股份有限公司 稳定的胰高血糖素类似物以及用于治疗低血糖的用途
CN106536547A (zh) 2014-06-04 2017-03-22 诺和诺德股份有限公司 用于医疗用途的glp‑1/胰高血糖素受体共激动剂
CA2965732A1 (en) 2014-10-29 2016-05-06 Zealand Pharma A/S Gip agonist compounds and methods
JP6989385B2 (ja) 2015-04-16 2022-01-05 ジーランド ファーマ アクティーゼルスカブ アシル化グルカゴン類似体
TWI622596B (zh) 2015-10-26 2018-05-01 美國禮來大藥廠 升糖素受體促效劑
JP7212171B2 (ja) * 2019-02-05 2023-01-24 イーライ リリー アンド カンパニー グルカゴン類似体アゴニストおよびその使用方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005012347A2 (en) * 2003-08-05 2005-02-10 Novo Nordisk A/S Novel insulin derivatives
WO2009030771A1 (en) * 2007-09-05 2009-03-12 Novo Nordisk A/S Peptides derivatized with a-b-c-d- and their therapeutical use
WO2009155257A1 (en) * 2008-06-17 2009-12-23 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting enhanced solubility and stability physiological ph buffers

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5869602A (en) 1995-03-17 1999-02-09 Novo Nordisk A/S Peptide derivatives
DE69626660T2 (de) 1995-09-08 2003-08-21 Novo Nordisk As 2-alkylpyrrolidine
CZ220498A3 (cs) 1996-01-17 1998-11-11 Novo Nordisk A/S Deriváty 1,2,4-thiadiazinu a 1,4-thiazinu, příprava a použití
EP0923580A1 (en) 1996-07-26 1999-06-23 Dr. Reddy's Research Foundation Thiazolidinedione compounds having antidiabetic, hypolipidaemic, antihypertensive properties, process for their preparation and pharmaceutical compositions thereof
DE69737479T4 (de) 1996-08-30 2010-05-06 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivate
RU2200161C2 (ru) 1996-12-31 2003-03-10 Др. Редди'З Рисерч Фаундейшн Новые производные азолидиндиона, способ их получения (варианты), фармацевтические композиции на их основе, способ предупреждения или лечения, способ снижения глюкозы и промежуточное соединение
DE69727837T2 (de) 1997-05-02 2004-12-30 Dr. Reddy's Research Foundation, Hyderabad Neue antidiabetische verbindungen mit hypolipidimischen und antihypertensiven eigenschaften, verfahren zu ihrer herstellung und ihre enthaltenden arzneimittel
US6613942B1 (en) 1997-07-01 2003-09-02 Novo Nordisk A/S Glucagon antagonists/inverse agonists
BR9810378A (pt) 1997-07-01 2000-08-29 Novo Nordisk As Composto,uso do mesmo, composição farmacêutica, e, processos de tratar a diabete do tipo i ou do tipo ii, de tratar a hiperglicemia, e de diminuir a glicose do sangue em um mamìfero
KR20010021936A (ko) 1997-07-16 2001-03-15 한센 핀 베네드, 안네 제헤르, 웨이콥 마리안느 융합된 1,2,4-티아디아진 유도체, 그의 제조와 사용
US6440961B1 (en) 1997-10-27 2002-08-27 Dr. Reddy's Research Foundation Tricyclic compounds and their use in medicine: process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
WO1999019313A1 (en) 1997-10-27 1999-04-22 Dr. Reddy's Research Foundation Novel tricyclic compounds and their use in medicine; process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
AU6966498A (en) 1997-12-02 1998-10-30 Dr. Reddy's Research Foundation Thiazolidinedione and oxazolidinedione derivatives having antidiabetic, hypol ipidaemic and antihypertensive properties
AU6325799A (en) 1998-10-21 2000-05-08 Dr. Reddy's Research Foundation New compounds, their preparation and use
JP2002527502A (ja) 1998-10-21 2002-08-27 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 新規化合物、それらの調製及び使用
WO2000023417A1 (en) 1998-10-21 2000-04-27 Novo Nordisk A/S New compounds, their preparation and use
AU6325599A (en) 1998-10-21 2000-05-08 Dr. Reddy's Research Foundation New compounds, their preparation and use
WO2000023415A1 (en) 1998-10-21 2000-04-27 Novo Nordisk A/S New compounds, their preparation and use
JP2002527507A (ja) 1998-10-21 2002-08-27 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 新規化合物類、それらの調製及び使用
HUP0104646A3 (en) 1998-12-18 2004-05-28 Novo Nordisk As Fused 1,2,4-thiadiazine derivatives, their preparation and use
WO2000041121A1 (en) 1999-01-07 2000-07-13 Ccrewards.Com Method and arrangement for issuance and management of digital coupons and sales offers
WO2000042026A1 (en) 1999-01-15 2000-07-20 Novo Nordisk A/S Non-peptide glp-1 agonists
WO2000042023A1 (en) 1999-01-18 2000-07-20 Novo Nordisk A/S Substituted imidazoles, their preparation and use
AU2953699A (en) 1999-04-16 2000-11-02 Dr. Reddy's Research Foundation Novel polymorphic forms of an antidiabetic agent: process for their preparation and a pharmaceutical composition containing them
WO2000063189A1 (en) 1999-04-16 2000-10-26 Novo Nordisk A/S Crystalline r- guanidines, arginine or (l) -arginine (2s) -2- ethoxy -3-{4- [2-(10h -phenoxazin -10-yl)ethoxy]phenyl}propanoate
WO2000063208A1 (en) 1999-04-16 2000-10-26 Novo Nordisk A/S Substituted imidazoles, their preparation and use
BR0010683A (pt) 1999-04-16 2003-07-01 Reddy Research Foundation Formas polimórficas de um agente antidiabético: processo para seu preparo e composições farmacêuticas contendo o mesmo
AU3958100A (en) 1999-04-20 2000-11-02 Novo Nordisk A/S New compounds, their preparation and use
EP1171431A1 (en) 1999-04-20 2002-01-16 Novo Nordisk A/S Compounds, their preparation and use
AU3958200A (en) 1999-04-20 2000-11-02 Novo Nordisk A/S New compounds, their preparation and use
EP1171414A1 (en) 1999-04-20 2002-01-16 Novo Nordisk A/S Compounds, their preparation and use
AU3957600A (en) 1999-04-26 2000-11-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh Piperidyl-imidazole derivatives, their preparations and therapeutic uses
ATE297907T1 (de) 2000-07-20 2005-07-15 Hoffmann La Roche Alpha-acyl- und alpha-heteroatom-substituierte benzenacetamide verwendbar als glucokinase- aktivatoren
US6953787B2 (en) 2002-04-12 2005-10-11 Arena Pharmaceuticals, Inc. 5HT2C receptor modulators
NZ541365A (en) 2002-12-27 2009-09-25 Diobex Inc Compositions and methods for the prevention and control of insulin-induced hypoglycemia
TWI362392B (en) * 2005-03-18 2012-04-21 Novo Nordisk As Acylated glp-1 compounds
KR20070120112A (ko) * 2005-03-18 2007-12-21 노보 노르디스크 에이/에스 연장형 ｇｌｐ-1 화합물
CN101534846B (zh) 2005-11-07 2014-11-05 印第安纳大学研究及科技有限公司 显示生理学溶解性和稳定性的胰高血糖素类似物
US8669228B2 (en) 2007-01-05 2014-03-11 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting enhanced solubility in physiological pH buffers
AU2008216265B2 (en) 2007-02-15 2014-04-03 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon/GLP-1 receptor co-agonists
JP5385266B2 (ja) 2007-06-15 2014-01-08 ジーランド ファーマ アクティーゼルスカブ グルカゴン類似体
PE20100255A1 (es) * 2008-06-17 2010-04-25 Univ Indiana Res & Tech Corp Co-agonistas del receptor de glucagon/glp-1
TWI474835B (zh) 2008-06-17 2015-03-01 Univ Indiana Res & Tech Corp 用於治療代謝病症及肥胖症之基於ｇｉｐ之混合激動劑
AU2010260058B2 (en) * 2009-06-16 2015-09-24 Indiana University Research And Technology Corporation GIP receptor-active glucagon compounds
EP2552951A1 (en) * 2010-03-26 2013-02-06 Novo Nordisk A/S Novel glucagon analogues

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005012347A2 (en) * 2003-08-05 2005-02-10 Novo Nordisk A/S Novel insulin derivatives
WO2009030771A1 (en) * 2007-09-05 2009-03-12 Novo Nordisk A/S Peptides derivatized with a-b-c-d- and their therapeutical use
WO2009155257A1 (en) * 2008-06-17 2009-12-23 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting enhanced solubility and stability physiological ph buffers

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111683675A (zh) * 2017-12-07 2020-09-18 阿道恰公司 包含人胰高血糖素和共聚氨基酸的呈可注射水溶液形式的组合物
CN111936159A (zh) * 2018-01-23 2020-11-13 Xeris药物公司 使用微剂量的稳定胰高血糖素治疗减肥术后低血糖症

Also Published As

Publication number Publication date
RU2013145013A (ru) 2015-05-10
ZA201306514B (en) 2014-05-28
WO2012130866A1 (en) 2012-10-04
AU2012234276A1 (en) 2013-08-29
BR112013024076A2 (pt) 2016-12-06
IL227869A0 (en) 2013-09-30
US20140031278A1 (en) 2014-01-30
US20150368313A1 (en) 2015-12-24
CN103596583B (zh) 2016-07-27
EP2691108A1 (en) 2014-02-05
JP2014510739A (ja) 2014-05-01
CA2830974A1 (en) 2012-10-04
KR20140020292A (ko) 2014-02-18
MX2013011175A (es) 2013-11-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103596583B (zh) 新型胰高血糖素类似物
CN102918056B (zh) 新的胰高血糖素类似物
KR102440323B1 (ko) 인크레틴 유사체 및 그의 용도
ES2653765T3 (es) Agonistas duales de GLP1/GIP o trigonales de GLP1/GIP/glucagón
JP6612251B2 (ja) エキセンジン−４に由来するペプチド二重ｇｌｐ−１／グルカゴン受容体アゴニスト
US20130053310A1 (en) Novel glucagon analogues
BR112013024706B1 (pt) Método para preparar análogos de exendina peguilada e análogo de exendina peguilada
WO2011104378A1 (en) Peptides for treatment of obesity
ES2767705T3 (es) Nuevos análogos de glucagón

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160727

Termination date: 20180328