CN103385850A - 恩诺沙星注射用原位凝胶及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属动物专用药物制剂领域，涉及一种恩诺沙星注射用原位凝胶制剂及其制备方法，其包含如下组分：恩诺沙星5.0-20.0重量份、P40714.5-32.5重量份、P1880.5-10.5重量份、水25.0-90.0重量份、高分子阻滞剂0.01-10.0重量份、防腐剂0.01-3.0重量份、pH调节剂适量。本发明制剂在室温下为自由流动的液体，肌肉注射或皮下注射给药后形成半固体凝胶，实现一个疗程仅给药一次，具有制备简单、性质稳定、给药方便、给药持效时间长，疗效确切，动物适应性强、无毒副作用和不良反应等优点。本发明制剂具有广谱抗菌作用，可作为防治猪、羊、犬、猫、牛等动物疾病用药。

Description

恩诺沙星注射用原位凝胶及其制备方法

技术领域

本发明属动物专用药物制剂领域，涉及一种具有适宜相变温度的恩诺沙星注射用原位凝胶及其制备方法。

背景技术

恩诺沙星(Enrofloxacin)，又名乙基环丙沙星，化学名称为：1-环丙基-6-氟-4氧代-1，4-二氢-7-(4-乙基-1-哌嗪基)-3-喹啉羧酸，为动物专用的第三代氟喹诺酮类药物。由德国拜耳公司研制，1987年在新西兰首次上市，我国于1993年研制成功并上市使用。

恩诺沙星抑杀病原微生物范围较广，对革兰氏阴性菌、阳性菌、支原体及衣原体均具有良好抗菌作用。敏感菌包括大肠杆菌、克雷白杆菌、沙门氏菌、变形杆菌、绿脓杆菌、嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、溶血性巴氏杆菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、化脓棒状杆菌、丹毒杆菌等。对感染畜禽的各种支原体均有高效杀灭作用，对禽败血支原体、滑液囊支原体、衣阿华支原体和火鸡支原体的MIC为0.01-1μg/mL，抗支原体效力比泰乐菌素和泰妙菌素强。

多数单胃动物内服恩诺沙星吸收迅速且较完全，0.5～2h达血药峰浓度，生物利用度为：鸽子92％，鸡62.2％～84％，火鸡58％，兔61％，犬、猪、未反刍犊牛80％～100％，但成年牛低于10％。肌注吸收迅速而完全，生物利用度为：鸽子87％，兔92％，猪91.9％，奶牛82％，骆驼92％，马大于100％。血清蛋白结合率为20％～40％，体内分布广泛，除中枢神经系统外，几乎所有组织中恩诺沙星浓度都高于其血浆。通过肾和非肾代谢方式消除，约15％～50％以原形从尿排出(肾小管分泌和肾小球的滤过作用)。肝脏代谢主要是脱去7-位哌嗪环的乙基生成环丙沙星，其次为氧化及葡萄糖醛酸结合。消除半衰期在不同种属动物和不同给药途径有较大差异，静注半衰期(h)：鸽子3.8，鸡5.26～10.3，火鸡4.1，兔2.2～2.5，犬2.4，猪3.45，牛1.7～2.3，马4.4，骆驼3.6。肌注半衰期(h)：猪4.06，奶牛5.9，马9.9，骆驼6.4。内服的半衰期(h)：鸡9.14～14.2，犬3.7～5.8，猪6.93。

恩诺沙星对革兰氏阴性菌、阳性菌及支原体抑杀作用强，且有优良的体内过程，自上市以来，在禽、猪、牛、羊、犬、兔等动物临床得到了广泛应用。猪：用于治疗链球菌病、仔猪黄痢和白痢、大肠杆菌性肠毒血症(水肿病)、沙门菌病、传染性胸膜肺炎、乳腺炎-子宫炎-无乳综合症、支原体性肺炎等。牛、羊：用于治疗大肠杆菌性腹泻、大肠杆菌性败血症、牛肺疫(霉形体性肺炎)、布氏杆菌病、多杀性巴氏杆菌病、牛炭疽、李氏杆菌病(包括出现神经症状者)及乳房炎、子宫炎等疾病。犬、猫：用于治疗犬的消化道、呼吸道、泌尿系统、生殖器官感染，皮肤感染，创伤化脓，外耳炎和大肠杆菌引起的出血性胃肠炎等疾病。

恩诺沙星已批准上市剂型及规格有：(1)恩诺沙星片：2.5mg；5mg。(2)恩诺沙星可溶性粉(以恩诺沙星计)：100g：2.5g；100g：5g。(3)恩诺沙星溶液(鸡)：2.5％；5％；10％。(4)恩诺沙星溶液(猪)：0.5％。(5)恩诺沙星注射液：10mL：50mg；10mL：0.25g；5mL：0.25g；10mL：0.5g；10mL：5g。

恩诺沙星已报道剂型尚有：口服混悬液、注射混悬液、缓释注射液、缓释片、肺靶向明胶微球、微胶囊、微丸、透皮剂、环糊精包合物、固体分散体片、纳米乳、外用凝胶剂(卡波姆为基质)、壳聚糖纳米粒等。未见恩诺沙星注射用原位凝胶的报道。

恩诺沙星相关剂型专利已公开的有：恩诺沙星可溶性粉、混悬液、微丸、肠溶微丸、微囊、长效注射液、泡腾颗粒、复乳剂、固体纳米粒、结肠靶向丸剂、明胶微球等。未见恩诺沙星注射用原位凝胶已公开专利。

注射型原位凝胶(injectable in situ gel)是将药物和聚合物溶解于适宜的溶剂中，局部皮下或肌注，在给药部位生理条件下，聚合物凝固而形成半固体或固体药物贮库凝胶，并通过聚合物的不断降解，药物不断的释放出来，达到长效缓释作用。注射型原位凝胶具有延长释药周期、减少给药次数、降低给药剂量和减小药物不良反应等优点，避免植入剂开刀植入痛苦，且工艺相对简单，并克服了普通乳剂、脂质体、微球和胶束制备工艺复杂，难以工业化大生产的缺点。根据胶凝机制可分温度敏感凝胶、离子敏感凝胶、pH敏感凝胶等。

温敏型原位凝胶多以泊洛沙姆为基质材料。非离子型表面活性剂泊洛沙姆407(P407)水溶液具有特殊的反向热胶凝性质，即低温时为液体，升高到一定温度后成为凝胶，且溶液的胶凝温度随体系中P407浓度增加而降低，当在P407凝胶体系中加入泊洛沙姆188(P188)，可提高胶凝温度，改变P407和P188的比例和浓度，再配合使用适当的高分子阻滞剂，即可调整体系黏度、机械强度和溶蚀速度等，获得理想的胶凝温度和适当的药物释放时间。当载药温敏凝胶皮下注射或肌肉注射时，即在注射部位发生相变，由自由流动液体变成半固体凝胶而缓慢释放药物。以泊洛沙姆为基质制备的注射用温敏原位凝胶具有毒性低，刺激性小，生物相容性好，体外流变学特征良好的优点，其制备简单、使用方便、黏膜组织亲和力强、滞留时间长，在药物制剂中应用广泛，是近年来缓控释制剂领域的研究热点。

选择合适的给药途径，保证患畜能够摄入足够的药量，能够维持有效血药浓度一定时间，是达到预期防治效果的前提。传统给药疗程中，维系有效血药浓度往往需要多次反复给药。囿于动物生病影响食欲、饮欲，加之多数药物粉末或其水溶液有不适味道，饮水或拌料(口服)给药受到限制；普通注射剂给药，一个疗程需要重复多次，频繁注射保定动物费时费事，且易造成动物应激反而抵消疗效甚至加重病情，影响药物疗效，不利于疾病转归。药物制成原位凝胶注射给药，一次即可维持较长时间的有效血液浓度，并能保持相对稳态的血液浓度，减少给药次数，提高用药依从性，有利于更好的发挥药物作用，减少药物不良反应，提高经济效益。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种恩诺沙星注射用原位凝胶。

本发明的另一目的是提供该恩诺沙星注射用原位凝胶的制备方法。

本发明的目的可通过如下技术方案实现：

恩诺沙星注射用原位凝胶包含如下组分：恩诺沙星5.0-20.0重量份、P407 14.5-32.5重量份、P188 0.5-10.5重量份、水25.0-90.0重量份、高分子阻滞剂0.01-10.0重量份、防腐剂0.01-3.0重量份、pH调节剂适量。

所述的凝胶基质选自P108、P124、P188、P237、P338、P407的任意一种或多种；优选P407 14.5-32.5重量份，P1880.5-10.5重量份。

所述的高分子阻滞剂选自聚乙烯醇、聚维酮K-30、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟乙纤维素、羟丙纤维素、羧甲基纤维素钠、卡波姆、透明质酸、黄原胶、壳聚糖、羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、磷脂的任意一种或多种；优选羧甲基纤维素钠0.05-2.0重量份、或聚维酮K-301.0-10.0重量份。

所述的防腐剂选自羟苯酯类、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、苯扎溴铵、苯扎氯铵、苯甲醇、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫柳汞等的任意一种或多种；优选苯扎溴铵0.01-0.5重量份。

所述的pH调节剂选自酒石酸及其钠盐、乳酸、醋酸及其钠盐、枸橼酸及其钠盐、盐酸、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、单乙醇胺等的任意一种或多种；优选氢氧化钠、盐酸适量。

所述的恩诺沙星注射用原位凝胶的制备方法包含如下步骤：取注射用水适量，加热至50-70℃，加入恩诺沙星，用适量氢氧化钠溶液使溶解，加入处方量的防腐剂，搅拌溶解后冷却；将选用的凝胶基质及高分子阻滞剂撒在上述液面上，4℃冷藏24h以上，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，定容，盐酸调pH值，微孔滤膜滤过，搅拌均匀，分装，既得。

有益效果：

本发明利用泊洛沙姆水溶液的温度敏感性质及不同型号泊洛沙姆的组合，制备了具有适宜相变温度的恩诺沙星注射用原位凝胶，使其在室温条件下以液体状态存在，肌注或皮下注射给药时，在注射部位形成凝胶。所制的恩诺沙星注射用原位凝胶与常规恩诺沙星注射液相比释药缓慢，血药浓度平稳，持效时间大大延长，动物给药一次，可维持持效期达5-6天，实现一个疗程只给药一次的目的。本发明制剂所用高分子材料生理相容性好，刺激性低，并可较快排出体外，安全性高；制备工艺简单；常规注射给药方便，减少给药次数，提高动物给药的顺应性，能更好的发挥药物作用。

附图说明

附图为恩诺沙星注射用原位凝胶体外释放度曲线。

具体实施方式

实施例1：

10％恩诺沙星注射用原位凝胶

制备方法：取注射用水适量，加热至50-70℃，加入恩诺沙星，用适量氢氧化钠溶液使溶解，加入处方量的苯扎溴铵，搅拌均匀，冷却；将选用的凝胶基质及羧甲基纤维素钠撤在上述液面上，4℃左右冷藏24h以上，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，定容，盐酸调pH值，微孔滤膜滤过，搅拌均匀，分装，既得。

将所制备的原位凝胶进行体外性能评价，包括胶凝温度、胶凝时间、热可逆性、释放度、黏度、pH值的测定等。各项目测定方法如下，其测定结果见表1，体外释放结果见附图。

凝胶温度测定采用试管倒转法。取储存于冰箱中的凝胶液3～4mL至试管，将温度计插入凝胶溶液中。将试管置于水浴中(水浴液面高出试管内容凝胶溶液3cm)，缓慢升温，升温速率约为每1min～2min升高1℃。将试管倾斜90°，观察内容物不流动时的温度即定义为胶凝温度。每个样品测定3次，结果取其平均值。

胶凝时间测定原位凝胶液25℃放置0.5h后，置于已预热至37℃的试管中并保温，记录相变时间。

热可逆性测定将凝胶加热至特定温度(30，35，40，45，50，55，60，70℃)，然后缓慢冷却至室温，即算作一次加热循环，检验直至凝胶不再具备温敏性或者成分发生改变，若重复10次仍具有温敏性，记做循环次数＞10。

释放度测定精密吸取10mL原位凝胶制剂，置于预先已称重的平底具塞刻度试管中，再行称重。将该试管置于37.3+0.2℃的恒温水浴振荡器中平衡10min，使聚合物溶液完全形成凝胶。小心加入经37℃预热的5mL缓冲液(pH7.4，含SDS0.5％)作为释放介质，在95次/min恒温水浴振荡，分别在15、40、60min，1.33、2、3、5、8、12、24、48、60、72、84、96h立即倾出全部释放介质，将容器内外表面用滤纸吸干，迅速称量并纪录，然后重新放入恒温水浴振荡器中平衡10min，再补充释放介质5mL。如此反复操作，直至实验结束。

黏度测定使用旋转式黏度计测定室温(25℃)下凝胶的黏度。

pH值测定用酸度计测定处方凝胶溶液室温下的pH值。

实施例2：

10％恩诺沙星注射用原位凝胶

制备方法：取注射用水适量，加热至50-70℃，加入恩诺沙星、卡波姆，(用适量氢氧化钠溶液使溶解，加入处方量苯甲醇，搅拌均匀，冷却；将选用的凝胶基质及聚维酮K-30撒在上述液面上，4℃冷藏24h以上，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，定容，盐酸调pH值，微孔滤膜滤过，搅拌均匀，分装，既得。体外性能评价方法同实施1。结果见表1，体外释放结果见附图。

实施例3：

10％恩诺沙星注射用原位凝胶

制备方法：取注射用水适量，加热至50-70℃，加入恩诺沙星，用适量氢氧化钠溶液使溶解，加入处方量的苯扎溴铵，搅拌均匀，冷却；将选用的凝胶基质及甲基纤维素、聚维酮K-30撒在上述液面上，4℃冷藏24h以上，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，定容，盐酸调pH值，微孔滤膜滤过，搅拌均匀，分装，既得。体外性能评价方法同实施1。结果见表1，体外释放结果见附图。

实施例4：

10％恩诺沙星注射用原位凝胶

制备方法：取注射用水适量，加热至50-70℃，加入恩诺沙星，用适量氢氧化钠溶液使溶解，加入处方量的苯扎溴铵，搅拌均匀，冷却；将选用的凝胶基质及聚维酮K-30撒在上述液面上，4℃冷藏24h以上，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，定容，盐酸调pH值，微孔滤膜滤过，搅拌均匀，分装，既得。体外性能评价方法同实施1。结果见表1，体外释放结果见附图。

实施例5：

10％恩诺沙星注射用原位凝胶

制备方法：取注射用水适量，加热至50-70℃，加入恩诺沙星，用适量氢氧化钠溶液使溶解，加入处方量的苯甲醇，搅拌均匀，冷却；将选用的凝胶基质及羧甲基纤维素钠、聚维酮K-30撒在上述液面上，4℃冷藏24h以上，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，定容，盐酸调pH值，微孔滤膜滤过，搅拌均匀，分装，既得。体外性能评价方法同实施1。结果见表1，体外释放结果见附图。

表1恩诺沙星注射用原位凝胶体外性能评价

Claims (6)

1.制备一种具有适宜相变温度的恩诺沙星注射用原位凝胶，其特征在于包含如下组分：恩诺沙星5.0-20.0重量份、P407 14.5-32.5重量份、P188 0.5-10.5重量份、水25.0-90.0重量份、高分子阻滞剂0.01-10.0重量份、防腐剂0.01-3.0重量份、pH调节剂适量。

2.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的恩诺沙星注射用原位凝胶，其特征在于所述的制剂中的温敏性凝胶基质选自泊洛沙姆中的P407和P188，其中P407为14.5-32.5重量份，P188为0.5-10.5重量份。调节不同型号泊洛沙姆之间用量及比例可控制该制剂的相变温度介于32℃-37℃之间。

3.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的恩诺沙星注射用原位凝胶，其特征在于所述的高分子阻滞剂选自聚乙烯醇、聚维酮K-30、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟乙纤维素、羟丙纤维素、羧甲基纤维素钠、卡波姆、透明质酸、黄原胶、壳聚糖、羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、磷脂的任意一种或多种；优选羧甲基纤维素钠0.05-2.0重量份、或聚维酮K-301.0-10.0重量份。

4.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的恩诺沙星注射用原位凝胶，其特征在于所述的防腐剂选自羟苯酯类、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、苯扎溴铵、苯扎氯铵、苯甲醇、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫柳汞等的的任意一种或多种；优选苯扎溴铵0.01-0.5重量份。

5.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的恩诺沙星注射用原位凝胶，其特征在于所述的pH调节剂选自酒石酸及其钠盐、乳酸、醋酸及其钠盐、枸橼酸及其钠盐、盐酸、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、单乙醇胺等的任意一种或多种；优选氢氧化钠、盐酸适量。

6.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的恩诺沙星注射用原位凝胶的制备方法，其特征在于包含如下步骤：取注射用水适量，加热至50-70℃，加入恩诺沙星，用适量氢氧化钠溶液使溶解，加入处方量的防腐剂，搅拌溶解后冷却；将选用的凝胶基质及高分子阻滞剂撒在上述液面上，4℃冷藏24h以上，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，定容，盐酸调pH值，微孔滤膜滤过，搅拌均匀，分装，既得。