CN109806273A - 泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂及其制备方法，属于兽用抗生素领域，其特征在于，由主药和辅料两部分组成，所述主药为泰拉霉素和加米霉素两种成分，所述辅料包括pH调节剂、抗氧剂、抑菌剂、溶剂，以及该复合溶液剂在治疗细菌性大叶肺炎方面很好的治疗应用；具有用量低、疗效显著、污染系数低的优点，便于农户使用、经济效用高。

Description

泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及兽用抗生素领域，具体涉及一种泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂及其制备方法与应用。

背景技术

随着全球经济一体化的高速发展，我国的养殖行业也呈现出规模化、集约化、标准化的局面。随着畜牧业生产规模不断扩大，养殖密度不断增加，畜禽感染病原机会增多，病原变异几率加大，新发疫病发生风险增加，并且随着人口增长、人民生活质量提高和经济发展方式转变，对养殖业生产安全、动物产品质量安全和公共卫生安全的要求不断提高。动物呼吸系统疾病易发生、难治疗，加之盲目用药、过量用药会导致养殖成本升高，产生耐药性以及药物残留影响食品安全等一系列问题，因此有必要开发高效安全新型兽药及技术来提高动物疫病的防控能力，提升兽药企业的市场竞争力。

加米霉素是一种新型的半合成大环内酯类兽用抗生素，是由法国梅里亚公司研发的第二代大环内酯类抗生素的代表药物之一，通过抑制细菌RNA依赖性蛋白合成而起到抑菌和杀菌的作用。加米霉素对引起牛呼吸系统疾病(BRD)的溶血性曼氏杆菌、多杀性巴氏杆菌及牛支原体等均有较高的抗菌活性。其抗菌谱广、抗菌活性强，具有吸收快、体内分布广泛、体内残留低、安全性高等优点，国外广泛应用于溶血性巴斯德菌、出血败血性巴斯德菌、嗜组织菌等细菌病原体导致的牛呼吸系统疾病临床治疗。与其他大环内酯类抗生素一样，加米霉素通过与敏感菌的核蛋白体50S亚基结合，阻止肽链延伸，影响细菌蛋白质的合成，从而起到抑菌和杀菌作用。此外，对牛传染性胸膜肺炎的病原体-丝状支原体丝状亚种、马链球菌兽疫亚种和对大环内酯类耐药和敏感的马红球菌、以及猪肺炎支原体和胸膜肺炎放线杆菌均具有较好的体外抗菌活性。

但是此类兽用抗生素价格高昂，而缩减药量则无法达到其治疗效果，这就为其推广应用带来一定困难。目前季节性气候变化、环境卫生、饲料因素及疾病原因，容易导致多发疾病如肺炎链球菌、葡萄球菌、肺型大肠杆菌等细菌性疾病，而肺炎链球菌是细菌性大叶性肺炎的主要病原体。肺泡内有大量纤维素性渗出物的急性纤维素性肺炎，波及一侧肺或全肺，称为大叶性肺炎。其病因是病原微生物感染，主要见于一些特殊性的传染病过程中，如牛肺疫、山羊、马传染性胸膜肺炎等引起的肺炎过程中，常伴发大叶性肺炎，而目前尚未有证据显示加米霉素及其他类抗生素对此类细菌性大叶肺炎有显著的治疗效果。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种用量低、疗效显著、污染系数低的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂及其制备方法，便于农户使用、经济效用高，以及该复合溶液剂在治疗细菌性大叶肺炎方面很好的治疗应用。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，其特征在于，由主药和辅料两部分组成，所述主药为泰拉霉素和加米霉素两种成分，所述辅料包括pH调节剂、抗氧剂、抑菌剂、溶剂。

进一步的，所述pH调节剂可采用磷酸盐、柠檬酸、琥珀酸，所述抗氧剂采用硫代甘油，所述抑菌剂采用苯酚、苯甲醇或苯甲酸，所述溶剂采用纯水和有机溶剂，有机溶剂采用聚乙二醇、丙二醇、甲醛缩甘油中的一种或两种以上组合。

更进一步的，所述泰拉霉素和加米霉素的质量比为1:2-5。

更进一步的，所述溶剂在复合溶液剂中的体积浓度为20％-60％，pH调节剂在复合溶液剂中的体积浓度为2％-10％，抗氧剂在复合溶液剂中的质量浓度为1％-5％，抑菌剂在复合溶液剂中的质量浓度为1％-5％。

及一种如上所述的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂的制备方法，其特征在于，步骤如下：将上述pH调节剂与部分溶剂混合，分别加入泰拉霉素和加米霉素，30℃-70℃下加热使完全溶解，然后加入抑菌剂，最后加入余量溶剂，过滤，即得泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂。

以及如上所述的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂的应用，其特征在于，用于治疗由肺炎链球菌、葡萄球菌、肺型大肠杆菌引起的大叶性肺炎。

本发明的有益效果是：

1.本发明的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，即兽用内服溶液剂型，利用泰拉霉素和加米霉素两者在牛呼吸系统的协同互补作用，不仅降低了单独给药加米霉素治疗溶血性曼氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌时的使用浓度和使用成本，而且对于由肺炎链球菌、葡萄球菌、肺型大肠杆菌等引起的大叶性肺炎意外地具有很好的治疗效果。

2.本发明的制备方法制得的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，利用缓冲盐、聚乙二醇、丙二醇、甲醛缩甘油等组成的复合溶媒，能有效提高泰拉霉素和加米霉素这两种主药成分在水中的溶解度，又能使主药在制剂中较为稳定，解决了泰拉霉素和加米霉素的水溶性问题，且制成的复合溶液剂稳定性良好，制剂在凉暗条件下有效期超过3年。

具体实施方式

实施例1

1L泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，含：

泰拉霉素：30g

加米霉素：150g

10％柠檬酸水溶液：100ml

硫代甘油：50g

苯酚：20g

丙二醇：600ml

余量为纯水。

制备方法如下：将上述pH调节剂与部分溶剂混合，分别加入泰拉霉素和加米霉素，30℃加热使完全溶解，然后加入抑菌剂，最后加入余量溶剂，过滤，即得泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂。

实施例2

1L泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，含：

泰拉霉素：10g

加米霉素：20g

30％磷酸二氢钠水溶液：20ml

硫代甘油：10g

苯甲醇：50g

聚乙二醇：200ml

余量为纯水。

制备方法如下：将上述pH调节剂与部分溶剂混合，分别加入泰拉霉素和加米霉素，50℃加热使完全溶解，然后加入抑菌剂，最后加入余量溶剂，过滤，即得泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂。

实施例3

1L泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，含：

泰拉霉素：20g

加米霉素：60g

20％琥珀酸水溶液：60ml

硫代甘油：30g

苯甲酸：30g

甲醛缩甘油：400ml

余量为纯水。

制备方法如下：将上述pH调节剂与部分溶剂混合，分别加入泰拉霉素和加米霉素，70℃加热使完全溶解，然后加入抑菌剂，最后加入余量溶剂，过滤，即得泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂。

对比例1

1L泰拉霉素口服溶液剂，含：

泰拉霉素：150g

20％柠檬酸水溶液：50ml

硫代甘油：15g

苯酚：15g

丙二醇：300ml

余量为纯水。

对比例2

1L加米霉素口服溶液剂，含：

加米霉素：200g

30％琥珀酸水溶液：50ml

硫代甘油：10g

苯甲醇：15g

甲醛缩甘油：300ml

余量为纯水。

本发明所用加米霉素采购自上海方度药业有限公司，所用泰拉霉素采购自天津中升挑战有限公司。

一、分别对实施例1-3的复合溶液剂进行含量、pH值、澄明度及溶液稳定性的测试。

1.采用高效液相色谱法测定复合溶液剂中泰拉霉素和加米霉素的含量

1)检测样品制备

供试品溶液：精密量取待测样品(实施例1、实施例2或实施例3制备的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液)1mL，置10mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，精密量取该溶液10mL置100mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，制备获得供试品溶液。

对照品溶液：另取泰拉霉素和加米霉素对照品适量，精密称定，加10mL乙腈使溶解后，用流动相定容至100mL刻度，稀释后制成对照溶液，制备获得泰拉霉素和加米霉素对照品溶液。

2)色谱条件与系统适用性试验

照高效液相色谱法(《中华人民共和国兽药典(2010年版)》一部高效液相色谱法)测定。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸氢二钾缓冲液(以磷酸调节pH至8.0)：乙腈(30:60)为流动相，检测波长为205nm，柱温为40℃，流速为每分钟1ml。

3)测定方法

取本品适量，精密称定，置10ml量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，制成每1ml含5mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液(平行制备2份)；取对照品约20mg，精密称定，置10ml容量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液(平行制备2份)。取上述对照品溶液及供试品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法计算含量。含泰拉霉素、加米霉素均应为标示量的90.0％～110.0％。

2.澄明度的测定：

取本品用水按体积比1：100的比例稀释后应完全溶解，按澄明度检查法(《中华人民共和国兽药典》2010版一部)检查，合格的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液混水后的溶液应澄清。

3.pH值的测定：

取溶液的澄明度测定项下稀释后的溶液，依法测定(《中华人民共和国兽药典》2010版一部)，合格的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液的pH值应为5～7。

4.泰拉霉素和加米霉素复合溶液剂的稳定性测试：

为了解研制的泰拉霉素和加米霉素复合溶液剂的稳定性情况，实验对实施例1、实施例2、实施例3制备的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂为样品，按市售包装(棕色西林瓶加盖丁基胶塞)分装，按兽药稳定性试验指导原则(《中国人民共和国兽药典》2010版一部)中有关制剂加速试验和长期试验要求，分别进行试验，测试结果见表1和表2。

加速试验：将样品置40℃±2℃的稳定性试验箱中存放6个月(0、1、2、3、6个月的时间点)，分别取样检测，考察样品的含量、性状和澄明度；

长期试验：将样品置25℃±2℃的稳定性试验箱中存放12个月(0、3、6、9、12个月的时间点)，分别取样检测，考察样品的含量、性状和澄明度。

表1泰拉霉素和加米霉素复合溶液剂的加速试验(40℃±2℃)数据

表2泰拉霉素和加米霉素复合溶液剂的长期试验(25℃±2℃)数据

由表1和表2数据可知，本发明的泰拉霉素和加米霉素复合溶液剂在40℃±2℃放置6个月的加速试验的样品均检验合格；在25℃±2℃放置12个月的长期试验的样品均检验合格，与起始点相比，泰拉霉素和加米霉素的最大减少量分别2.6％和2.7％，泰拉霉素和加米霉素的复合溶液的有效期可超过3年。

二、将上述实施1-3和对比例1、2分别进行药效对比：

大型养殖场中，选择由肺炎链球菌、葡萄球菌、肺型大肠杆菌等细菌性疾病引起的呼吸道综合症临床症状的猪，每头40kg左右，公母各半，共40头，分成5组，每组8头。分别口服给药等量(每天10mg/Kg体重)的实施例1、实施例2、实施例3、对比例1、对比例2的溶液为给药组。

(1)体温变化：在给药后0，1，2，4，6，12，24，36，48小时测定直肠温度，记录每组的体温平均值，结果见表3。

(2)临床症状：每天定时并记录猪的临床症状，共7天。以采食情况、精神状态、咳嗽和鼻分泌黏液程度为依据，按状态的严重程度分为四个等级评分，0-正常状态，1-轻度，2-中度，3-较严重，4-严重。结果见表4。

(3)病理检测：病理学特征表现为阶段性，出现充血水肿期、红色肝变期、灰色肝变期、消散期。肺泡壁毛细血管充血，肺泡内有大量浆液性渗出物。眼观病变的肺叶肿大，呈暗红色；切面湿润，按压时有大量血样泡沫状液体流出。颜色由暗红色转变为灰红色，最后转变为灰色，质硬如肝，病灶切面干燥呈颗粒状。家畜的纤维素性肺炎通常是融合性纤维素性肺炎，炎灶内以纤维素性渗出物为主。

(4)体重变化情况：给药7天后，称量各组猪体重变化情况，测得平均值，结果见表5。

表3体温变化情况

表4临床症状按等级平分结果

表5死亡及体重变化情况

由表3数据可知，只有给药泰拉霉素-加米霉素复合溶液剂口服药物后，发热和炎症才可同时消失，猪的身体也快速恢复，而给药泰拉霉素单成分及给药加米霉素单成分的猪恢复较慢，体温出现反复，说明炎症未消除，不能完全康复。

由表4数据可知，给药泰拉霉素-加米霉素复合溶液剂口服药物的猪第四天所有的临床症状基本消失；而给药泰拉霉素单成分或给药加米霉素单成分的猪第七天临床症状仍存在，且病症仍较严重。

由表5数据可知，给药5种药物感染呼吸道病的猪虽然都未死亡，但在体重的增重上可以看出给药泰拉霉素-加米霉素复合溶液剂口服药物的猪的增重量最大，说明治疗猪的呼吸道病时给药泰拉霉素-加米霉素复方口服药物组合物的效果明显优于给药泰拉霉素单成分或给药加米霉素单成分的治疗效果。

三、不同药物剂量的药效对比

大型养殖场中，选择由胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌引起的猪呼吸道疾病临床症状的猪，每头40kg左右，公母各半，共56头，分成7组，每组8头。分别口服上述实施例1-3及对比例2制得的溶液剂，不同给药剂量下的试验结果见表6。

(1)体温变化：在给药后0，1，2，4，6，12，24，36，48小时测定直肠温度，记录每组的体温平均值。

(2)临床症状：每天定时并记录猪的临床症状，共7天。以采食情况、精神状态、咳嗽和鼻分泌黏液程度为依据，按状态的严重程度分为四个等级评分，0-正常状态，1-轻度，2-中度，3-较严重，4-严重。

表6中，实施例1、2、3为不同给药剂量的泰拉霉素-加米霉素复合口服溶液剂，依次为低剂量组、中剂量组、高剂量组；对比例2为加米霉素口服溶液剂，实施不同的给药剂量。

表6不同给药剂量下的试验结果

由表6数据可知，本发明的实施例复合溶液剂按照5mg/Kg/天给药后，体温变化值48h内由42.7度降至41.0，临床症状7天后为3-较严重，说明低剂量组整体疗效不佳；而随着用药剂量的加大，尤其是用量在15mg/Kg/天时，体温变化于6小时可下降2度，之后温度趋于平稳，高剂量组即用量20mg/Kg/天的效果趋势优于中剂量组。临床症状，高剂量给药组5天后状态正常，中剂量给药组7天后状态正常。

对比例2为加米霉素单成分溶液剂，分为4组，剂量由低至高依次为5mg/Kg/天、15mg/Kg/天、20mg/Kg/天、30mg/Kg/天。其中5mg/Kg/天、15mg/Kg/天给药组的体温变化未达到正常状态，临床症状无改善。提高药量分别为20mg/Kg/天、30mg/Kg/天，体温变化和临床症状趋于正常，且高浓度组效果优于较低浓度组。由此可见，本发明的复合溶液剂及单独给药加米霉素单成分溶液剂均能对由胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌引起的猪呼吸道疾病起到治愈效果。所不同的是，采用本发明的复合溶液剂用量为15mg/Kg/天时即可达到有效治疗效果，而单独给药加米霉素药物剂量需增加给药浓度，使用剂量在20mg/Kg/天以上。考虑到加米霉素的自身成本高的问题，因此其经济成本及临床用药成本均高于复合溶剂，会产生较多不良因素，对企业生产造成成本增加，对环境造成用药污染。因此，本发明的复合溶液剂在治疗由胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌引起的猪呼吸道疾病方面，能够大大降低高成本的加米霉素的使用剂量，从而大大降低用药成本，利于提高企业效益，具备显著的进步。

Claims (9)

1.一种泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，其特征在于，由主药和辅料两部分组成，所述主药为泰拉霉素和加米霉素两种成分，所述辅料包括pH调节剂、抗氧剂、抑菌剂、溶剂。

2.根据权利要求1所述的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，其特征在于，所述pH调节剂可采用磷酸盐、柠檬酸、琥珀酸。

3.根据权利要求1所述的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，其特征在于，所述抗氧剂采用硫代甘油。

4.根据权利要求1所述的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，其特征在于，所述抑菌剂采用苯酚、苯甲醇或苯甲酸。

5.根据权利要求1所述的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，其特征在于，所述溶剂采用纯水和有机溶剂，有机溶剂采用聚乙二醇、丙二醇、甲醛缩甘油中的一种或两种以上组合。

6.根据权利要求1所述的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，其特征在于，所述泰拉霉素和加米霉素的质量比为1:2-5。

7.根据权利要求1所述的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂，其特征在于，所述溶剂在复合溶液剂中的体积浓度为20％-60％，pH调节剂在复合溶液剂中的体积浓度为2％-10％，抗氧剂在复合溶液剂中的质量浓度为1％-5％，抑菌剂在复合溶液剂中的质量浓度为1％-5％。

8.如权利要求1所述的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂的制备方法，其特征在于，步骤如下：将上述pH调节剂与部分溶剂混合，分别加入泰拉霉素和加米霉素，30℃-70℃下加热使完全溶解，然后加入抑菌剂，最后加入余量溶剂，过滤，即得泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂。

9.如权利要求1所述的泰拉霉素和加米霉素的复合溶液剂的应用，其特征在于，用于治疗由肺炎链球菌、葡萄球菌、肺型大肠杆菌引起的大叶性肺炎。