CN105878176A - 一种盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂及其制备方法，所用原料的重量体积百分比如下，所述重量体积百分比指各原料的重量与溶液的体积百分比，单位为g/100mL，盐酸沃尼妙林1.0％‑10.0％，泊洛沙姆407 20.0％‑30.0％，泊洛沙姆188 0.5％‑10.0％，抑菌剂0.01％‑1.0％,抗氧化剂0.01％‑1.0％,高分子阻滞剂1.0％‑5.0％，溶剂43.0％‑77.4％。本制剂维持时间长，生物利用度高，能减少给药次数，治疗成本低，使用方便。

Description

一种盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂及其制备方法，属于动物药物制剂领域。

背景技术

沃尼妙林(Valnemulin)是新一代截短侧耳素(pleuromutilin)类半合成抗生素，属二萜烯类，临床用药为盐酸沃尼妙林，是动物专用抗生素。沃尼妙林抗菌谱广，对G+,G-和支原体菌均有作用，主要用于预防与治疗由猪痢疾短螺旋体引起的痢疾、猪肺炎支原体引起的肺炎、结肠菌毛样短螺旋体引发的猪结肠炎、细胞内劳森菌引发的猪增生性回肠炎，由禽败血支原体引起的慢性呼吸道疾病，由多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌引起的继发性肺炎，溶血性巴氏杆菌引起的羊和牛的肺炎，由猪滑液支原体多发性关节炎等。沃尼妙林味苦，刺激性较大，存在适口性的问题，动物服用困难。目前沃尼妙林的剂型是预混剂。

注射型原位凝胶是将药物和聚合物溶解于适宜的溶剂中，局部皮下或肌肉注射，在给药部位聚合物凝固而形成半固体或固体药物贮库凝胶，并通过聚合物的不断降解，药物不断的释放出来，达到长效缓释作用。此剂型可减少给药次数、降低给药剂量和减小药物不良反应等，在药物制剂中应用广泛，是近年来缓控释制剂领域的研究热点。

盐酸沃尼妙林相关剂型专利中报己公开的有:盐酸沃尼妙林溶液剂、包衣颗粒、肠溶微丸、油乳注射剂、纳米乳制剂、颗粒剂、肠溶性固体分散体、靶向微球、结肠靶向微丸剂、卵黄抗体等。未见盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶的报道及公开专利，相关文献中也没有盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶的报道。

由于盐酸沃尼妙林有明显的苦味，饮水或拌料给药受到一定限制，且由于生病，动物食欲、饮欲下降甚或拒食、拒饮，影响动物摄药量，继而影响了疗效；药物以原位凝胶注射剂给药，一次给药可维持较长时间的有效血液浓度，并能保持相对稳态的血液浓度，有利于更好的发挥药物作用，提高药物利用度，减少给药次数，减少药物不良反应，提高经济效益。

盐酸沃尼妙林的制备方法，包括：以截短侧耳素为原料，合成磺化侧耳素；然后以磺化侧耳素制备14-O-[(1-氨基-2-甲基丙基-2-y1)乙酸基]目特林；用D-缬氨酸合成D-缬氨酸邓盐；最后将14-O-[(1-氨基-2-甲基丙基-2-yl)乙酸基]目特林、D-缬氨酸邓盐、N-甲基吗啉、氯甲酸烯丙酯以一定顺序、一定条件混合反应生成混酐，经酰化、水解、分离、干燥等后续步骤得到沃尼妙林盐酸盐。具体参考专利申请公开号CN 101735123 A。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂及其制备方法，本制维持留时间长，生物利用度高，能减少给药次数，治疗成本低，使用方便。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂，所用原料的重量体积百分比如下，所述重量体积百分比指各原料的重量与溶液的体积百分比，单位为g/100mL，

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，所述抑菌剂选自三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、苯扎溴铵、苯扎氯铵中的任意一种。

进一步，所述抗氧化剂选自亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、柠檬酸、维生素C、维生素E中的任意一种。

进一步，所述高分子阻滞剂选自甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟乙纤维素、羟丙纤维素、羧甲基纤维素钠、卡波姆、壳聚糖、海藻酸钠中的任意一种。

进一步，所述溶剂选自生理盐水、注射用水中的任意一种。

本发明还提供一种如上所述的盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂的制备方法，包括：

向43-77ml溶剂中加入抗氧化剂、抑菌剂和高分子阻滞剂，搅拌溶解，再加入盐酸沃尼妙林，搅拌溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，向所得滤液中加入泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，加溶剂定容至100mL，静置5-20min，搅拌均匀，置4℃冰箱中12-48h，即得盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂，本发明制备的盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂的胶凝温度为30-37℃。

上述所用盐酸沃尼妙林采用专利申请公开号CN101735123A的方法制备。

本发明制备的盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂与传统的盐酸沃尼妙林预混剂相比，具有以下优点：

(1)该制剂以液体状态给药后，在体温的作用下较快的胶凝而形成具有缓释作用的凝胶，达到在注射部位缓慢释放药物的目的，提高了药物生物利用度，进而减少了给药次数，缓解了动物的应激性；

(2)传统预混剂适口性差而使动物常可能在药物治疗剂量下使用，导致防治效果不好，而该制剂恰好克服了这一缺点；

(3)该制剂制备方法简单易行，利于大生产，治疗成本较低，载药能力较高。

附图说明

图1为实施例1原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图；

图2为实施例1药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图；

图3为实施例1不同时间点原位凝胶累积溶蚀率对药物累积释放率线性回归曲线图；

图4为实施例2原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图；

图5为实施例2药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图；

图6为实施例2不同时间点原位凝胶累积溶蚀率对药物累积释放率线性回归曲线图；

图7为实施例3原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图；

图8为实施例3药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图；

图9为实施例3不同时间点原位凝胶累积溶蚀率对药物累积释放率线性回归曲线图；

图10为实施例4原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图；

图11为实施例4药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图；

图12为实施例4不同时间点原位凝胶累积溶蚀率对药物累积释放率线性回归曲线图；

图13为实施例5原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图；

图14为实施例5药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图；

图15为实施例5不同时间点原位凝胶累积溶蚀率对药物累积释放率线性回归曲线图；

图16为实施例6原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图；

图17为实施例6药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图；

图18为实施例6不同时间点原位凝胶累积溶蚀率对药物累积释放率线性回归曲线图；

图19为实施例7原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图；

图20为实施例7药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图；

图21为实施例7不同时间点原位凝胶累积溶蚀率对药物累积释放率线性回归曲线图。

具体实施方式

以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。

实施例1

将0.01g苯甲醇，0.01g亚硫酸氢钠，0.1g甲基纤维素溶于50mL生理盐水中，搅拌溶解；然后加入2g盐酸沃尼妙林，搅拌溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，向所得滤液中加入20g泊洛沙姆407和2.0g泊洛沙姆188，加生理盐水定容至100mL，静置5min，搅拌均匀；置4℃冰箱中12h，得到澄清、分散均匀的溶液，即得质量体积比为2％盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂。

对所制备的注射用原位凝胶制剂进行体外性能检测，包括胶凝温度、胶凝时间、热可逆性、释放度、粘度等。各项目测定方法如下，其测定结果见表1，原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图、药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图、不同时间点原位凝胶累积溶蚀率对药物累积释放率线性回归曲线图分别见图1、图2、图3。

凝胶温度测定采用试管倒转法，即取分散均匀的凝胶溶液2-3mL至试管，将温度计插入凝胶溶液中。将试管置于水浴中(水浴液面高出试管内容凝胶溶液3cm)，缓慢升温，升温速度为1℃/min。将试管倾斜90°，观察内容物不流动时的温度即为胶凝温度。每个样品测定3次，结果取其平均值。

胶凝时间测定将原位凝胶溶在25℃条件下放置0.5h，置于已预热至37℃的试管中并保温，记录相变时间。

热可逆性测定将凝胶加热至特定温度(30，35，40，45，50，55，60，70℃)，然后缓慢冷却至25℃，即算作一次加热循环，检验直至凝胶不再具备温敏性或者成分发生改变，若重复10次仍具有温敏性，记做循环次数>l0。

释放度测定精密吸取10mL原位凝胶制剂，置于预先已称重的平底具塞刻度试管中，再行称重。将该试管置于37℃的控温摇床中预热10min，使溶液完全凝胶。之后加入经预热的37℃5mL磷酸盐缓冲液(pH7.4)作为释放介质，在50r/min转速下振荡，每隔一段时间，倾出全部释放介质，将容器内外表面用滤纸吸干，迅速称量并纪录，然后重新放入控温摇床中预热10min，再补充释放介质5mL。如此反复操作，直至实验结束，相邻时间点的样品重量差异即为此期间的凝胶溶蚀量。计算不同时间点凝胶的累积溶蚀率，以不同时间点原位凝胶的累积溶蚀率对时间作图，进行线性拟合后得到原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图。

在考察凝胶溶蚀动力学的同时测定药物释放度：将溶蚀试验得到的样品稀释后，采用高效液相色谱法测定药物浓度，并计算药物累积释放率。以不同时间点药物累积释放率对时间作图，进行线性拟合后得到药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图。

以本发明原位凝胶制剂的累积溶蚀率为横坐标，药物累积释放率为纵坐标进行线性回归后得到不同时间点累积溶蚀率对累积释放率线性回归曲线图。

粘度测定采用旋转式粘度计测定室温下(25℃)原位凝胶的粘度。

实施例2

将0.02g苯乙醇，0.02g硫代硫酸钠，0.2g羟丙甲基纤维素溶于50mL生理盐水中，搅拌溶解；然后加入4g盐酸沃尼妙林，搅拌溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，向所得滤液中加入21g泊洛沙姆407和1.5g泊洛沙姆188，加生理盐水定容至100mL，静置10min，搅拌均匀；置4℃冰箱中16h，得到澄清、分散均匀的溶液，即质量体积比为4％盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂。

体外性能检测方法同实施例1，其测定结果见表1，原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图、药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图、不同时间点累积溶蚀率对累积释放率线性回归曲线图分别见图4、图5、图6。

实施例3

将0.04g三氯叔丁醇，0.04g柠檬酸，0.4g羟乙纤维素溶于50mL注射用水中，搅拌溶解；然后加入5g盐酸沃尼妙林，搅拌溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，向所得滤液中加入22g泊洛沙姆407和2.0g泊洛沙姆188，加注射用水定容至100mL，静置15min，搅拌均匀；置4℃冰箱中20h，得到澄清、分散均匀的溶液，即质量体积比为5％盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂。

体外性能检测方法同实施例1，其测定结果见表1，原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图、药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图、不同时间点累积溶蚀率对累积释放率线性回归曲线图分别见图7、图8、图9。

实施例4

将0.08g苯扎溴铵，0.08g维生素C，0.6g羧甲基纤维素钠溶于50mL注射用水中，搅拌溶解；然后加入6g盐酸沃尼妙林，搅拌溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，向所得滤液中加入23g泊洛沙姆407和1.0g泊洛沙姆188，加注射用水定容至100mL，静置15min，搅拌均匀；置4℃冰箱中24h，得到澄清、分散均匀的溶液，即质量体积比为6％盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂。

体外性能检测方法同实施例1，其测定结果见表1，原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图、药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图、不同时间点累积溶蚀率对累积释放率线性回归曲线图分别见图10、图11、图12。

实施例5

将1.0g苯扎氯胺，1.0g维生素E，1.0g海藻酸钠溶于50mL生理盐水中，搅拌溶解；然后加入8g盐酸沃尼妙林，搅拌溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，向所得滤液中加入24g泊洛沙姆407和1.5g泊洛沙姆188，加生理盐水定容至100mL，静置5min，搅拌均匀；置4℃冰箱中30h，得到澄清、分散均匀的溶液，即质量体积比为8％盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂。

体外性能检测方法同实施例1，其测定结果见表1，原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图、药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图、不同时间点累积溶蚀率对累积释放率线性回归曲线图分别见图13、图14、图15。

实施例6

将1.2g苯扎溴铵，1.2g焦亚硫酸钠，1.2g卡波姆溶于50mL注射用水中，搅拌溶解；然后加入1g盐酸沃尼妙林，搅拌溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，向所得滤液中加入26g泊洛沙姆407和3g泊洛沙姆188，加注射用水定容至100mL，静置10min，搅拌均匀；置4℃冰箱中36h，得到澄清、分散均匀的溶液，即质量体积比为1％盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂。

体外性能检测方法同实施例1，其测定结果见表1，原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图、药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图、不同时间点累积溶蚀率对累积释放率线性回归曲线图分别见图16、图17、图18。

实施例7

将0.05g苯甲醇，0.05g亚硫酸氢钠，1.5g羟丙甲基纤维素溶于50mL生理盐水中，搅拌溶解；然后加入10g盐酸沃尼妙林，搅拌溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，向所得滤液中加入28g泊洛沙姆407和1.0g泊洛沙姆188，加生理盐水定容至100mL，静置15min，搅拌均匀；置4℃冰箱中48h，得到澄清、分散均匀的溶液，即质量体积比为10％盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂。

体外性能检测方法同实施例1，其测定结果见表1，原位凝胶累积溶蚀率随时间变化线性回归曲线图、药物累积释放率随时间变化线性回归曲线图、不同时间点累积溶蚀率对累积释放率线性回归曲线图分别见图19、图20、图21。

表1盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂体外性能检测结果

表1结果显示，通过此方法制备的盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶释放时间在30-50h，胶凝温度低于37℃，该制剂以液体状态给药后，在体温的作用能较快的胶凝而形成具有缓释作用的凝胶，实现在注射部位缓慢释放药物的作用。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂，其特征在于，所用原料的重量体积百分比如下，所述重量体积百分比指各原料的重量与溶液的体积百分比，单位为g/100mL，

2.根据权利要求1所述的盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂，其特征在于，所述抑菌剂选自三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、苯扎溴铵、苯扎氯铵中的任意一种。

3.根据权利要求1所述的盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂，其特征在于，所述抗氧化剂选自亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、柠檬酸、维生素C、维生素E中的任意一种。

4.根据权利要求1所述的盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂，其特征在于，所述高分子阻滞剂选自甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟乙纤维素、羟丙纤维素、羧甲基纤维素钠、卡波姆、壳聚糖、海藻酸钠中的任意一种。

5.根据权利要求1所述的盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂，其特征在于，所述溶剂选自生理盐水、注射用水中的任意一种。

6.一种如权利要求1-5任一所述的盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂的制备方法，其特征在于，包括：

向43-77ml溶剂中加入抗氧化剂、抑菌剂和高分子阻滞剂，搅拌溶解，再加入盐酸沃尼妙林，搅拌溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，向所得滤液中加入泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，加溶剂定容至100mL，静置5-20min，搅拌均匀，置4℃冰箱中12-48h，即得盐酸沃尼妙林注射用原位凝胶制剂。