CN103006617A - 一种癸氧喹酯口服微囊制剂及其制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种癸氧喹酯口服微囊制剂及其制备方法，是一种微囊制剂以癸氧喹酯为囊心物，海藻酸钠-壳聚糖为复合囊材的新型禽用球虫药制剂的制备方法与产品，其中海藻酸盐含量在60％-75％之间，壳聚糖的含量为10％-20％之间，微囊制剂为球形或椭球形，粒径在40-80μm之间。该方法利用海藻酸钠-壳聚糖对癸氧喹酯的包被以改善癸氧喹酯的亲水性问题，所制备的微囊具有明显的缓释作用，且载药量较高。

Description

一种癸氧喹酯口服微囊制剂及其制备工艺

技术领域

本发明属于兽药制剂技术领域，涉及一种癸氧喹酯口服微囊制剂及其制备工艺。

背景技术

鸡球虫病是由艾美尔属(Eimeria)的一种或多种单细胞寄生虫寄生于鸡肠道上皮细胞内，鸡球虫病是一种对养鸡业危害极大的寄生虫疾病。该病的发病率相当高，达50％～70％，死亡率20％～30％，严重时高达80％。针对此病，目前虽然有一些球虫病疫苗研究成功，但主要还是采用药物防治为主，至今已经超过40种药物用来防治球虫。但随着球虫药的长期和不合理的使用，球虫耐药性的发生愈来愈严重，耐尼卡巴嗪、氨丙啉、妥曲珠利、地克珠利等药物的球虫株的出现陆续被报道出来，因此，在研究新的抗球虫途径的同时，选择一种更加有效，安全性高，使用方便的新型的球虫药显得尤为重要。

癸氧喹酯(Decoquinate)是一种喹啉类抗球虫药物，又名地考喹酯、敌球素，20世纪60年代由英国May-Baker公司研制首先合成，其广谱抗球虫活性，使之成为预防和治疗鸡球虫病效果较好的一种喹啉类药物，可用于防治鸡的柔嫩、毒害、堆型、巨型、变位和布氏艾美耳球虫等引起的球虫病。另外，癸氧喹酯对隐孢子虫引起的动物腹泻也可起到缓解和治疗作用。自2006年美国礼来公司在中国首先上市销售癸氧喹酯，并引起了国内兽药界的广泛关注，其原因是该药有如下一些特点：(1)在中国使用时间较短，无抗药性，是最理想的轮换用药，杀灭球虫很好，促进生长，改善着色，具有优异的抗球虫效果和促生长表现；(2)在球虫生活史的早期开始发挥作用，且持续作用时间最长；(3)对危害最大的6种鸡球虫都有良好的治疗效果；(4)在适宜的温度和湿度条件下，癸氧喹酯可在3年内保持品质稳定；(5)与目前中国允许使用的兽药饲料添加剂无任何配伍禁忌；(6)本品毒性低，耐受性好。使用推荐量的80倍仍安全，代谢快，停药3d后，各组织中残留药物浓度低于1×10^-6，是全球唯一同时被日本、欧盟、美国、中国政府批准使用的化学合成型抗球虫药。综上所述，癸氧喹酯作为一种新型低毒广谱抗虫药物，具有广阔的市场前景。

然而，由于癸氧喹酯性质比较特殊，不溶于水以及绝大部分有机溶剂，其制剂比较单一，市场上主要是应用其预混剂，限制了癸氧喹酯的应用。目前在国外，癸氧喹酯只有预混剂和溶液剂，美国药典已经收录了1％～10％癸氧喹酯预混剂。从临床角度来看，预混剂使用不方便，且容易混料不匀，从而影响药物吸收，降低抗虫效果；溶液剂采用有机溶媒制备而成，含量低，生产成本高，且有机溶剂不容易代谢，容易残留，易产生刺激和毒性。国内市场上，陆续有癸氧喹酯的可溶性粉、溶液剂等剂型相继被报道，譬如，固体分散技术制备的癸氧喹酯可溶性粉载药量低，辅料成本高，稳定性差；癸氧喹酯混悬液制剂同样存在载药量不高的问题，在5％左右，而且混悬液易受水质中的离子影响，容易沉淀，影响给药浓度，且混悬液存贮、运输、使用都不及可溶性粉方便。

微胶囊技术应用于医药领域，可实现药物的靶向输送，将药物用高分子材料包囊，使药物进入到人体后在一定的时间内释放，达到对药物治疗剂量进行有效控制的目的。微囊凭着其缓释、靶向性及隔离等优点，自二十世纪问世以来就受到医药领域的关注。研究发现，微囊除能改变药物的性状，增强药物的稳定性外，它所发挥的靶向缓释机制可提高药物的生物利用度，避免首过效应，减少毒副作用。相比之下，微囊技术在动物医学领域的研究相对滞后，进入二十一世纪后兽药的微囊化才引起越来越多的人的重视，目前，在兽用生物制剂、饲料添加剂、水产药物等方面得到广泛的研究。目前，药物微囊化技术在抗寄生虫药上的研究还比较少，主要集中在吡喹酮和伊维菌素这两种药物上面。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的缺陷，提供一种癸氧喹酯口服微囊制剂及其制备工艺，具体地说，是一种微囊制剂以癸氧喹酯为囊心物，海藻酸钠-壳聚糖为复合囊材的新型禽用球虫药制剂的制备方法与产品。该方法利用海藻酸钠-壳聚糖对癸氧喹酯的包被以改善癸氧喹酯的亲水性问题，所制备的微囊具有明显的缓释作用，且载药量较高。

其技术方案为：

一种癸氧喹酯口服微囊制剂，以癸氧喹酯为囊心物，海藻酸钠-壳聚糖为复合囊材，海藻酸盐含量在60％-75％之间，壳聚糖的含量为10％-20％之间，微囊制剂为球形或椭球形，粒径在40-80μm之间。

一种癸氧喹酯口服微囊制剂的制备方法，包括以下步骤：

1)称取0.04-0.08g癸氧喹酯原料药置于研钵中，加入0.3ml乙醇，研磨均匀后加入10ml％-2.5％海藻酸钠水溶液后充分研磨，形成均匀混悬液；

2)取6毫升蓖麻油置于烧杯中，加入0.12-0.48ml司盘80，在磁力搅拌器上以300转/分钟缓慢搅拌至均与混合；

3)将步骤1)所得的混悬液按1∶3的比例范围内的具体缓慢滴入步骤2)所得的连续相，调整磁力搅拌器转速在600-1400r/min之间，搅拌乳化60-80min，将乳化后的乳液按1∶4的比例滴入0.5％的氯化钙溶液中，边搅拌边滴入，搅拌50min充分固化海藻酸钠微粒；

4)静置，下层水层按1∶3的比例加入到外水相0.1％-0.5％的壳聚糖水溶液中，充分搅拌；

5)加入1.2ml戊二醛或甲醛的一种，交联固化微囊；

6)抽滤，石油醚进行洗涤，异丙醇干燥，收集干燥后的粉末。

进一步优选，步骤3)中所述磁力搅拌器转速为1000r/min。

本发明与现有技术相比的有益效果

本发明所选取的囊材海藻酸钠与壳聚糖均为无毒、生物相容性好、可生物降解的天然高分子材料，具较好的成膜及成型性，广泛应用于药物载体领域。由于海藻酸钠和壳聚糖是通过正负电荷之间的静电力相互作用形成微囊，静电相互作用是一种弱相互作用力，不涉及热交联过程中的高温及化学交联过程中的共价键形成，对包载物的性质无甚影响，且采用本发明中所采用的包被技术，能明显提高制剂的载药量。壳聚糖-海藻酸钠微囊对pH较为敏感，囊材在动物消化道中随pH的变化而溶解，具有一定的肠靶向作用。相对于溶液剂与固体分散技术制备的可溶性粉，本发明明显的提高了载药量。现已知的溶液剂的药物含量为3％，固体分散技术制备的可溶性粉载药量为6％左右，通过高效液相色谱法检测得载药量达到15％-20％，回收率55％-65％。载药量有明显的提高。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步说明。

实施例1

将0.08g癸氧喹酯原料药加入0.3ml无水乙醇研磨均匀，再加入10ml2％海藻酸钠水溶液，充分研磨，得到稳定的混悬液，6ml蓖麻油中加入0.36ml的司盘-80，低速搅拌混合均匀，将转速调整到1000r/min，取2ml制备的药物混悬液缓慢滴入油相中，乳化80min。按1∶4的比例滴入氯化钙水溶液中，搅拌50min，静置，下层水层按1∶3的比例滴入到适量的外水相(0.2％的壳聚糖水溶液)中，充分搅拌，1.2ml戊二醛进行交联固化。抽滤，用石油醚和异丙醇反复洗涤和脱水，室温条件下干燥。制备得到包被有癸氧喹酯药物的海藻酸钠-壳聚糖微囊干燥粉末。

实施例2

将0.04g癸氧喹酯原料药加入0.3ml无水乙醇研磨均匀，再加入10ml 1％海藻酸钠水溶液，充分研磨，得到稳定的混悬液，6ml蓖麻油中加入0.36ml的司盘-80，低速搅拌混合均匀，将转速调整到1000r/min，取2ml制备的药物混悬液缓慢滴入油相中，乳化60min。按1∶4的比例滴入氯化钙水溶液中，搅拌50min，静置，下层水层按1∶3的比例滴入到外水相(0.1％的壳聚糖水溶液)中，充分搅拌，1.2ml戊二醛进行交联固化。抽滤，用石油醚和异丙醇反复洗涤和脱水，室温条件下干燥。制备得到包被有癸氧喹酯药物的海藻酸钠-壳聚糖微囊干燥粉末。

实施例3

0.08g癸氧喹酯原料药加入0.3ml无水乙醇研磨均匀，再加入10ml 2％海藻酸钠水溶液，充分研磨，得到稳定的混悬液，6ml蓖麻中加入0.48ml的司盘-80，低速搅拌混合均匀，将转速调整到600r/min，取2ml制备的药物混悬液缓慢滴入油相中，乳化80min。按1∶4的比例滴入氯化钙水溶液中，搅拌50min，静置，下层水层按1∶3的比例滴入到外水相(0.2％的壳聚糖水溶液)中，充分搅拌，1.2ml甲醛进行交联固化。抽滤，用石油醚和异丙醇反复洗涤和脱水，室温条件下干燥。制备得到包被有癸氧喹酯药物的海藻酸钠-壳聚糖微囊干燥粉末。

实施例4

0.08g的癸氧喹酯原料药加入0.3ml无水乙醇研磨均匀，再加入10ml 2％海藻酸钠水溶液，充分研磨，得到稳定的混悬液，6ml蓖麻油中加入0.36ml的司盘-80，低速搅拌混合均匀，将转速调整到600r/min，取2ml制备的药物混悬液缓慢滴入油相中，乳化60min。按1∶4的比例滴入氯化钙水溶液中，搅拌50min，静置，下层水层按1∶3的比例滴入到外水相(0.2％的壳聚糖水溶液)中，充分搅拌，1.2ml戊二醛进行交联固化。抽滤，用石油醚和异丙醇反复洗涤和脱水，室温条件下干燥。制备得到包被有癸氧喹酯药物的海藻酸钠-壳聚糖微囊干燥粉末。

实施例5

0.06g癸氧喹酯原料药加入0.3ml无水乙醇研磨均匀，再加入10ml2％海藻酸钠水溶液，充分研磨，得到稳定的混悬液，6ml蓖麻油中加入0.36ml的司盘-80，低速搅拌混合均匀，将转速调整到1400转/min，取2ml制备的药物混悬液缓慢滴入油相中，乳化80min。按1∶4的比例滴入氯化钙水溶液中，搅拌50min，静置，下层水层按1∶3的比例滴入到外水相(0.2％的壳聚糖水溶液)中，充分搅拌，1.2ml戊二醛进行交联固化。抽滤，用石油醚和异丙醇反复洗涤和脱水，室温条件下干燥。制备得到包被有癸氧喹酯药物的海藻酸钠-壳聚糖微囊干燥粉末。

实施例6

0.08g癸氧喹酯原料药加入0.3ml无水乙醇研磨均匀，再加入10ml2.5％海藻酸钠水溶液，充分研磨，得到稳定的混悬液，6ml油相中加入0.12ml的司盘-80，低速搅拌混合均匀，将转速调整到1000r/min，取2ml制备的药物混悬液缓慢滴入油相中，乳化80min。按1∶4的比例滴入氯化钙水溶液中，搅拌50min，静置，下层水层按1∶3的比例滴入到外水相(0.2％的壳聚糖水溶液)中，充分搅拌，1.2ml戊二醛进行交联固化。抽滤，用石油醚和异丙醇反复洗涤和脱水，室温条件下干燥。制备得到包被有癸氧喹酯药物的海藻酸钠-壳聚糖微囊干燥粉末。

药效学实验

为验证本发明的抗球虫效果，将本发明产品与市售癸氧喹酯溶液剂产品做药效学比较，具体方案如下：

1、实验动物：

12日龄雏鸡180只。

2、实验药品

市售癸氧喹酯溶液(青岛康地恩药业有限公司产)和本发明实例1所述癸氧喹酯微囊。

3、试验分组

将180只雏鸡随机分为6组，每组30只，分别为：健康对照组，不感染不给药；阳性对照组，感染不给药；药物低剂量组，饮水7.5mg/L(按癸氧喹酯计)；药物中剂量组，饮水15mg/L(按癸氧喹酯计)；药物高剂量组，饮水30mg/L(按癸氧喹酯计)；药物对照组，按产品推荐剂量，每升水加0.5ml药物溶液，自由饮水。

4、试验方案

实验鸡只空腹重新编号，并称重，除健康对照组，其余各组于12日龄人工感染鸡艾美尔球虫，每只攻孢子化卵囊7×10⁴个。给药组感染第2天开始给药，连续给药4天。记录精神状况、饮食状况，第3天开始检查粪便，每天数次并记录实验组的血便堆数，直至第8天剖杀为止，第5天收集粪便，集中检查出每组的卵囊总数。对人工接种第3天后死亡的雏鸡进行称重、剖杀，查明死因。第8天将所有实验雏鸡进行剖杀，剖杀前进行称重，剖杀后重点检查盲肠病变。盲肠按实验组分别消化或制成匀浆，盲肠卵囊计数。

5、评价指标

相对增重率：相对增重率(％)＝(感染用药组或感染不用药组平均增重/不感染不用药组平均增重)×100。不感染不用药组鸡的相对增重率为100％。(注：每组鸡只需要在试验前及试验结束后逐只编号、称重，期间死亡鸡只也要称重(其体重加在试验结束后称重总量中，计算平均体重)，即试验前后计算平均体重的鸡只数量相同(均为试验前鸡只数量))

存活率：存活率(％)＝(组内存活鸡数/组内总鸡数)×100。

病变记分及病变值：按Johnson和Reid(1970)制定的标准对盲肠病变进行评定记分。病变值＝组内平均病变记分×10。

具体记分办法为：

两侧盲肠病变不一致时，以严重的一侧为准。

0分，无肉眼病变；

+1分，盲肠壁有很少量散在的瘀血点，肠壁不增厚内容物正常；

+2分，病变数量较多，盲肠内容物明显带血，盲肠壁增厚，内容物正常；

+3分，盲肠内容物多量血液或有盲肠芯(血凝块或灰白色干酪样的香蕉型块状物)，盲肠壁肥厚明显，盲肠中粪便含量少；

+4分，因充满大量血液或肠芯而盲肠肿大，肠芯中含有粪渣或不含粪渣。死亡鸡只也记+4分。

注：试验期间死亡鸡只(确定为球虫感染致死)均记为+4分，其值加入总病变记分中换算平均每只鸡病变(鸡只数量同试验前)。

卵囊值：试验结束后，将剩余存活鸡只剖杀，取盲肠内容物，计算存活鸡只每克盲肠卵囊数，根据表1所示标准计算卵囊值。

表1每鸡平均卵囊数与卵囊值对照表

粪便记分：参照杨茂生(2001)的5分制标准对各组鸡的粪便进行评定记分。

按5分制标准

0分，粪中无血；

+1分，粪中有少量血；

+2分，粪中有较多量血，其他为正常粪；

+3分，粪中有较多量血，其他为白色粘液，或1/3是血，只有少量正常粪；

+4分，粪中全部是血，或2/3是血，其他为白色粘液。

抗球虫指数：ACI＝(相对增重率+存活率)-(病变值+卵囊值+血粪扣分)。药效判定标准为：ACI在180以上者为高效；180～160者为中效；160～120者为低效；120以下者为无效。

6、试验结果与分析

如表2所述：

表2抗球虫指数测定结果计算

有结果可知，第3天开始，感染不给药组和低剂量给药组的部分鸡只精神沉郁，食欲不振。第5天上午，感染不给药组出现大批死亡情况，便血，死亡鸡只经解剖，盲肠肿大，呈暗红色，有的直肠出现红肿，其它组织器官较正常。取回盲肠剖开后，内容物呈暗红色，含有大量血液，涂片镜检，在40倍镜下，可见深色圆形的小点，为红细胞，并有大量浅颜色的卵圆形小颗粒，为球虫卵囊，盲肠肠粘膜脱落，变薄，有大量出血点。死亡鸡只确定死于球虫病。第5天，第6天，低剂量组组和感染不给药组，精神沉郁，呆立，食欲不振，鸡只大量死亡，便血严重。第7天开始，血便明显减少，各组剩下来的鸡大多状态有所好转。结合表中数据可以看出，癸氧喹酯可以有效的缓解鸡球虫病的症状，具有良好的抗球虫效果。中、高剂量组和癸氧喹酯溶液对照组的抗球虫指数均高于180，说明癸氧喹酯微囊制剂的治疗效果能达到溶液剂相当的效果，本发明为粉剂，相对于溶液剂更利于运输和保存，所选用辅料均为有机高分子材料，无毒无残留，生物安全性高，临床应用无刺激。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，本发明的保护范围不限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员，在本发明披露的技术范围内，可显而易见地得到的技术方案的简单变换或等效替换均落入本发明的保护范围内。

Claims (3)

1.一种癸氧喹酯口服微囊制剂，其特征在于，以癸氧喹酯为囊心物，海藻酸钠-壳聚糖为复合囊材，海藻酸盐含量在60％-75％之间，壳聚糖的含量为10％-20％之间，微囊制剂为球形或椭球形，粒径在40-80μm之间。

2.一种权利要求1所述癸氧喹酯口服微囊制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)称取0.04-0.08g癸氧喹酯原料药置于研钵中，加入0.3ml乙醇，研磨均匀后加入10ml 1％-2.5％海藻酸钠水溶液后充分研磨，形成均匀混悬液；

2)取6毫升蓖麻油置于烧杯中，加入0.12-0.48ml司盘80或吐温85，在磁力搅拌器上以300r/min缓慢搅拌至均与混合；

3)将步骤1)所得的混悬液按1∶3的比例缓慢滴入步骤2)所得的连续相，调整磁力搅拌器转速在600-1400r/min之间，搅拌乳化60-80min，将乳化后的乳液按1∶4的比例滴入0.5％的氯化钙溶液中，边搅拌边滴入，搅拌50min充分固化海藻酸钠微粒；

4)静置，下层水层按1∶3范围内的比值加入到外水相0.1％-0.5％的壳聚糖水溶液中，充分搅拌；

5)加入1.2毫升戊二醛或甲醛的一种，交联固化微囊；

6)抽滤，石油醚进行洗涤，异丙醇干燥，收集干燥后的粉末。

3.根据权利要求2所述癸氧喹酯口服微囊制剂的制备方法，其特征在于，步骤3)中所述磁力搅拌器转速为1000r/min。