CN102970871A

CN102970871A - 药物组合物及其制备方法

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Publication number: CN102970871A
Application number: CN2011800333447A
Authority: CN
Inventors: M.K.古普塔
Original assignee: Glaxo Wellcome Manufacturing Pte Ltd
Current assignee: Glaxo Wellcome Manufacturing Pte Ltd
Priority date: 2010-05-05
Filing date: 2011-05-05
Publication date: 2013-03-13
Also published as: ZA201208265B; PE20130217A1; EP2566331A1; KR20130071434A; CR20120556A; TW201206908A; EA201291168A1; UY33367A; EP2566331A4; IL222751A0; NZ603411A; MX2012012837A; MA34286B1; CO6640262A2; AU2011247995B2; US20150231265A1; AR081364A1; US20110281901A1; CL2012003075A1; US20120028918A1

Abstract

本发明涉及药物组合物，其包含：约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物和约2至约13重量%的改性环糊精，以及涉及制备该药物组合物的方法。

Description

药物组合物及其制备方法

发明领域

本发明涉及药物组合物及其制备方法，特别是适于眼睛给药的药物制剂。

背景

帕唑帕尼是以下多种物质的高生物利用度的多酪氨酸激酶抑制剂：血管内皮生长因子受体(VEGFR)-1、-2、-3，血小板衍生因子受体(PDGFR)-α、-β，细胞因子受体(cKit)，白介素-2受体可诱导的T-细胞激酶(Itk)，白细胞-特异性蛋白酪氨酸激酶(Lck)，以及跨膜糖蛋白受体酪氨酸激酶(c-Fms)。WO2007/064752公开了帕唑帕尼用于治疗年龄相关的黄斑变性的用途。需要提供一种稳定的帕唑帕尼滴眼剂，其中帕唑帕尼溶解于该制剂中。帕唑帕尼是水溶性差的药物，其在温度为大约25°C、pH为5.0的磷酸盐缓冲液中的溶解度大约为0.000006mg/mL(1.37x10^-8mol/L)。

环糊精用于药物制剂中作为增溶剂，因其与其他水溶性差的药物形成水溶性包合络合物的能力。表示药物和环糊精之间相互作用强度的一个基本的性质是结合常数(或稳定性常数)K。环糊精利用值(U_CD)是一个无量纲的数值，其可用于评价药物剂型中利用环糊精的可行性。U_CD使得公式可以确定水溶性差的药物制剂中的环糊精是否有可能带来显著的增溶优势。U_CD通过以下方程式计算：

U_CD=(KS_o/1+KS_o)(m_CD/m_D)(MW_D/MW_CD)

其中：

m_D是药物的剂量；

m_CD是环糊精的剂量；

MW_D是药物分子量；

MW_CD是环糊精分子量；且

K_o为结合常数。

当所述无量纲数值U_CD大于或等于1时，环糊精与药物的络合带来充足的增溶作用。当所述无量纲数值小于1时，络合本身并不足以带来完全的增溶作用。对于眼用制剂，环糊精的可行量m_CD可取决于溶液所需要的张力。参见V.M.Rao&V.J.Stella,WhenCanCyclodextrins Be Considered forSolubilization Purposes?,J.Pharm.Sci.,Vol.92,No.5(2003)。

在视觉与眼科学研究协会(ARVO)的年度会议中公开于2009年5月6日的标题为“A Multi-Targeted Receptor Tyrosine Kinase Inhibitorforthe TreatmentofNeovascular AMD:Preclinical Support ofClinical Development ofPazopanibEye Drops”的报告(“ARVO报告”)报道了用于眼睛的滴眼剂在狗和兔子中的毒性研究。该报告报道了包含7%的改性环糊精、磷酸钠、氯化钠和0.01%的苯扎氯铵(注意目前的临床制剂不含苯扎氯铵)、pH为5的制剂。该报告报道了2和5mg/ml浓度的帕唑帕尼。

在临床前毒性研究中，制剂不改变(掩盖或增强)活性成分的毒性作用是十分重要的。之所以十分重要，是因为在用于动物安全性评价的剂型组合物中,在很多情况下最终临床制剂可颇为不同。例如最终临床制剂需要具有长期稳定性，以使其得以生产、发明、送到药店、分发至患者手中，并且患者能够在整个疗程中将这一指定的处方给药。这个时间可能只有一至两个月，或长达6个月，或长达一年或一年以上。相反，用于临床前毒性研究的制剂没有长期稳定性，而是制成给药几天的制剂。

经过一系列的假设，U_CD数值可基于ARVO报告中用于毒性研究的制剂计算。帕唑帕尼分子量为437.5，改性环糊精例如

(β-环糊精磺丁基醚)分子量为2,200。帕唑帕尼的结合常数的值K，确定为大约10,000。如前所述，在温度为大约25°C、pH为5的磷酸盐缓冲液中帕唑帕尼的溶解度为0.000006mg/mL，其相应于1.37x10^-8mol/L。对于使用7重量%

(磺丁基醚-环糊精)的2mg/mL帕唑帕尼制剂，在pH为5时U_CD值为0.001。对于使用7重量%

(磺丁基醚-环糊精)的5mg/mL帕唑帕尼制剂，在pH为5时U_CD值为0.0004。如前文所引用的Rao的论文，U_CD使得公式可以确定水溶性差的药物制剂中的环糊精是否有可能带来显著的增溶优势。当所述无量纲数值小于1时，络合本身并不足以带来完全的增溶作用。鉴于这些临床前毒性研究制剂U_CD值极低，不可能期待这样的制剂能够表现出临床试验所用制剂所需的稳定性。

需要提供一种稳定的滴眼剂，其中帕唑帕尼的酸加成盐的量相当于10mg/mL帕唑帕尼游离碱增溶在制剂中。

发明概述

在本发明的一个方面中公开了一种药物组合物，其包含：约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；约2.0至约13.0重量%的改性环糊精，对所述改性环糊精进行选择使得所述改性环糊精将帕唑帕尼与所述改性环糊精在水中的pK_a低于帕唑帕尼单独在水中的pK_a；使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和水。所述组合物稳定至少2个月。

在本发明的另一个方面中公开了一种药物组合物，其包含：约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；约2.0至约13.0重量%的改性环糊精；使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和水。所述组合物适于给药至人眼且在大约25°C的温度U_CD值范围为0.0002至0.6。所述组合物稳定至少2个月。

在本发明的又一个方面中公开了一种药物组合物，其包含：约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；约2.0至约13.0重量%的改性环糊精；使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和水。其中所述组合物为帕唑帕尼的过饱和水溶液。所述组合物稳定至少2个月。

在本发明的另一个方面中公开了一种药物组合物，其包含：约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；约2.0至约13.0重量%的改性环糊精；使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和水。

在本发明的另一个方面中公开了制备过饱和组合物的方法，其包括：形成帕唑帕尼的酸加成盐和改性环糊精的水溶液，和调节所述溶液pH至约4-5，以得到帕唑帕尼的过饱和溶液，其稳定至少2个月。

发明详述

如本文中所用，“过饱和溶液”是指在给定的温度和压力条件下，溶液含有的溶质多于饱和溶液含有的溶质。

如本文中所用，“稳定”是指根据美国药典(USP)<789>“眼用溶液中的颗粒”，当组合物包装在吹填封(blow-fill sealed)单次使用容器中(该容器使用空白流动包装铝箔进行外包装，且该制剂的温度保持在5°C)时，所述组合物在物理上是稳定的。

在本发明的一个方面中公开了一种药物组合物，其包含：约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；约2.0至约13.0重量%的改性环糊精，对所述改性环糊精进行选择使得改性环糊精将帕唑帕尼与所述改性环糊精在水中的pK_a低于帕唑帕尼单独在水中的pK_a；使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和水。所述组合物稳定至少2个月。

在本发明这一方面的一些实施方式中，对所述改性环糊精进行选择使得所述改性环糊精将帕唑帕尼与所述改性环糊精在水中的pK_a比帕唑帕尼单独在水中的pK_a低至少0.4。在本发明这一方面的其他实施方式中，对所述改性环糊精进行选择使得所述改性环糊精将帕唑帕尼与给定量的改性环糊精在水中的pK_a比帕唑帕尼在水中的pK_a低至少0.8。

帕唑帕尼与给定量的改性环糊精在水中的pK_a可通过实施例7所述的电位测定法来测量。10mg/mL帕唑帕尼水溶液的pK_a理论上可通过使用本领域技术人员已知的ACD预测软件来测量。

在本发明的又一个方面中公开了一种药物组合物，其包含：约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；约2.0至约13.0重量%的改性环糊精；使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和水。其中所述组合物是帕唑帕尼的过饱和水溶液。所述组合物稳定至少2个月。

在本发明的另一个方面中公开了制备过饱和组合物的方法，其包括：形成帕唑帕尼的酸加成盐和改性环糊精的水溶液，和调节所述溶液pH至约4至约5，以得到帕唑帕尼的过饱和溶液，其稳定至少2个月。

本发明多个方面所述的药物组合物，优选适于局部给药至人眼。在一些实施方式中，本发明多个方面所述的药物组合物适于作为滴眼剂局部给药至人眼。本领域技术人员可使用任何可用的方法来确定所述组合物是否适于局部给药至人眼和适于作为滴眼剂局部给药至人眼。

如本文中所用，化学名称“帕唑帕尼”指化合物5-[[4-[(2,3-二甲基-2H-吲唑-6-基)甲基氨基]-2-嘧啶基]氨基]-2-甲基苯磺酰胺，该化合物由结构I表示：

在本发明多个方面的一些实施方式中，式(I)化合物的酸加成盐为盐酸盐。在一个具体实施方式中，式(I)化合物的酸加成盐为式(I')所示的单盐酸盐。

式(I)化合物的单盐酸盐的化学名称是5-[[4-[(2,3-二甲基-2H-吲唑-6-基)甲基氨基]-2-嘧啶基]氨基]-2-甲基苯磺酰胺单盐酸盐。

在其他实施方式中，式(I)化合物的酸加成盐为式(I)化合物的单盐酸盐单水合物。所述式(I)化合物的单盐酸盐单水合物的化学名称是5-({4-[(2,3-二甲基-2H-吲唑-6-基)甲基氨基]-2-嘧啶基}氨基)-2-甲基苯磺酰胺单盐酸盐单水合物，如式(I″)所示。

式(I)化合物的游离碱、盐和溶剂合物可例如根据以下文献或者本文所述的操作制备：国际专利申请No.PCT/US01/49367(提交于2001年12月19日，公布于2002年8月1日，公布号为WO02/059110)，以及国际专利申请No.PCT/US03/19211(提交于2003年6月17日，公布于2003年12月24日，公布号为WO03/106416)。

如本文所用，术语“酸加成盐”是由式(I)化合物的取代基上的一个或多个氮原子得到的盐。代表性的盐包括以下盐：乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、依地酸钙盐、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐、柠檬酸盐、二盐酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯月桂硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰基对氨基苯基砷酸盐、己基间苯二酚盐、哈胺盐(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、羟萘甲酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、马来酸单钾盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、N-甲基葡糖胺、草酸盐、双羟萘酸盐、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、钾盐、水杨酸盐、钠盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱、甲苯磺酸盐、三乙基碘、三甲基铵盐和戊酸盐。

帕唑帕尼为水溶性差的药物，在25°C的磷酸盐缓冲液中的溶解度大约如下：在pH为5.0时为0.000006mg/mL(1.37x10^-8mol/L)，在pH4.5时为0.000025mg/mL(5.71x10^-8mol/L)；在pH4.25时为0.000534mg/mL(1.22x10^-6mol/L)；在pH4.0时为0.001043mg/mL(2.38x10^-6)；和在pH3.5时为0.02mg/mL(4.57x10^-5mol/mL)。

环糊精利用值(U_CD)是一个无量纲的数值，其可用于评价药物剂型中利用环糊精的可行性。U_CD是一个集中的参数，其由以下组成：药物剂量，CD的可行量，结合常数，和CD不存在时的药物溶解度。U_CD可用于预测可电离药物的溶解度，所述可电离药物由于离子化和络合的作用使溶解度出现协同性增加。参见Rao，V.M.，Stella，V.J.，JPharmSci，92，5927，May2003。U_CD通过以下方程式计算：

U_CD=(KS_o/1+KS_o)(m_CD/m_D)(MW_D/MW_CD)

其中，

m_D是药物的剂量；

m_CD是环糊精的剂量；

MW_D是药物分子量；

MW_CD是环糊精分子量；和

K_o为结合常数。

在一些实施方式中，在25°C的温度，U_CD值的范围是：下限为约0.0002、0.0003、0.0004、0.0005、0.0006、0.0007、0.0008、0.0009、0.001、0.0015、0.002、0.0025、0.003、0.0035、0.004、0.0045、0.005、0.0055、0.006、0.0065、0.007、0.0075、0.008、0.0085、0.009、0.0095、0.01、0.015、0.02、0.025、0.03、0.035、0.04、0.045、0.05、0.055、0.06、0.065、0.07、0.075、0.08、0.085、0.09、0.095、0.1、0.105、0.11、0.115、0.12、0.125、0.13、0.135、0.14、0.145、0.15、0.155、0.16、0.165、0.17、0.175、0.18、0.185、0.19、0.195、0.2、0.205、0.21、0.215、0.22、0.225、0.23、0.235、0.24、0.245、0.25、0.255、0.26、0.265、0.27、0.275、0.28、0.285、0.29、0.295、0.3、0.305、0.31、0.315、0.32、0.325、0.33、0.335、0.34、0.345、0.35、0.355、0.36、0.365、0.37、0.375、0.38、0.385、0.39、0.395或0.4，至上限为约0.2、0.205、0.21、0.215、0.22、0.225、0.23、0.235、0.24、0.245、0.25、0.255、0.26、0.265、0.27、0.275、0.28、0.285、0.29、0.295、0.3、0.305、0.31、0.315、0.32、0.325、0.33、0.335、0.34、0.345、0.35、0.355、0.36、0.365、0.37、0.375、0.38、0.385、0.39、0.395、0.4、0.405、0.41、0.415、0.42、0.425、0.43、0.435、0.44、0.445、0.45、0.455、0.46、0.465、0.47、0.475、0.48、0.485、0.49、0.495、0.5、0.505、0.51、0.515、0.52、0.525、0.53、0.535、0.54、0.545、0.55、0.555、0.56、0.565、0.57、0.575、0.58、0.585、0.59、0.595或0.6。

优选选择改性环糊精，使得在眼用药物组合物中，改性环糊精适于给药至人眼。至于改性环糊精是否适于给药至人眼，可用任何可用的方法和本领域技术人员已知的操作来确定组合物和成分是否适于给药至人眼。

在本发明多个方面的一些实施方式中，改性环糊精选自羟基丙基-β-环糊精、甲基-β-环糊精、β-环糊精磺丁基醚及其组合。在其他实施方式中，改性环糊精为β-环糊精磺丁基醚。β-环糊精磺丁基醚的市售商品名为

在本发明多个方面的一些实施方式中，改性环糊精的量的范围为：下限为约2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9或9.0重量%，至上限为约8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、10.1、10.2、10.3、10.4、10.5、10.6、10.7、10.8、10.9、11.0、11.1、11.2、11.3、11.4、11.5、11.6、11.7、11.8、11.9、12.0、12.1、12.2、12.3、12.4、12.5、12.6、12.7、12.8、12.9或13.0重量%。

美国药典(USP)<1151>，标题为“药物剂型：眼用制剂”，关于眼用溶液等渗性提供了以下的指导。

关于等渗值，USP<1151>阐述泪液与血液是等渗的，其等渗值相当于0.9%的氯化钠溶液。理想状况下，眼用溶液应具有这样的等渗值；但眼睛可承受的等渗值最低相当于0.6%氯化钠溶液，最高相当于2.0%氯化钠溶液，而没有显著的不适。这些值大致相当于重量克分子渗透压浓度值200mOsm(0.6%w/v NaCl水溶液)，290mOsm(0.9%w/v NaCl水溶液)，和631mOsm(2.0%w/v NaCl水溶液)。然而，FDA调查了经批准的眼用制品，这些制品包括

(马来酸噻吗洛尔眼用胶体溶液)，

(双氯芬酸钠眼用溶液)，

(酒石酸溴莫尼定眼用溶液)，

(氟比洛芬钠眼用溶液，USP)，(曲伏前列素眼用溶液)，

(曲氟尿苷眼用溶液)，(吡嘧司特钾眼用溶液)，

(盐酸莫西沙星眼用溶液)，和

(醋酸泼尼松龙，硫酸新霉素，硫酸多粘菌素B眼用溶液，USP)。调查发现这些获批的产品重量克分子渗透压浓度的范围为240mOsm至350mOsm，最集中在290mOsm附近。因此，需要具有重量克分子渗透压浓度范围为约200至约400mOsm的眼用制剂。

在本发明多个方面的一些实施方式中，所述组合物的重量克分子渗透压浓度的范围为：下限为约200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320或330mOsm，至上限为约250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390或400mOsm。改性环糊精增加了药物组合物的张力。例如申请人已发现

(β-环糊精磺丁基醚)以以下的方式增加了重量克分子渗透压浓度：

表1

Captisol%(w/v)	重量克分子渗透压浓度(mOsm)
		2	20
3	50
		4	80
5	110
		6	140
7	170
		8	201
9	231
		10	261
11	291
		12	321
13	351

由于改性环糊精促进重量克分子渗透压浓度，而且重量克分子渗透压浓度需要小于或等于400mOsm的事实，使得用于在药物组合物中用于增溶帕唑帕尼的改性环糊精的量需要一个上限。

张力是有效的重量克分子渗透压浓度，其等于有能力施加跨膜渗透力的溶质的浓度总和。用于本发明的实施方式的张力调节剂可为本领域技术人员已知的任何适于包含在眼睛给药组合物中以给药至人眼的张力调节剂。例如美国药典29-NF-24裂解五种赋形剂归类为“张力”剂，包括右旋糖，甘油，甘露醇，氯化钾和氯化钠。本领域技术人员当然理解其他赋形剂可作为张力调节剂用于制剂中。例如缓冲剂例如磷酸盐缓冲液(例如磷酸钠或磷酸钾缓冲液)不仅使溶液的pH缓冲，也起张力调节剂的作用。在一些实施方式中，张力调节剂选自右旋糖，甘油，甘露醇，氯化钾，氯化钠和磷酸盐缓冲液。通常，张力剂的量足以使药物组合物的重量克分子渗透压浓度下限为200至上限为400mOsm。在一些实施方式中，张力调节剂为氯化钠。在一些实施方式中，氯化钠的量的范围为：下限为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40mM，至上限为约30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149或150mM。其他张力调节剂的量可为：对于重量克分子渗透压浓度的增加而言，与所公开的氯化钠带来近似的效果所需的张力调节剂的具体量。在一些实施方式中，使用张力调节剂的组合。

在本发明的一些实施方式中，所述药物组合物还包括缓冲剂。缓冲剂可为本领域技术人员已知的用于眼用制剂的任何缓冲剂。例如缓冲剂可为磷酸盐缓冲液，所述磷酸盐例如磷酸钠或磷酸钾。在一些实施方式中，缓冲剂的量的范围为：下限为10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40mM，至上限为约30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50mM。在一些实施方式中，使用缓冲剂的组合。

pH调节剂可为本领域技术人员已知的任何适于包含在眼睛给药组合物中以给药至人眼的此类物质。在本发明的多个方面的一些实施方式中，pH调节剂选自氢氧化钠、盐酸及其组合。

美国药典(USP)<1151>，标题为“药物剂型：眼用制剂”，关于眼用溶液的pH提供了以下的指导。正常泪液的pH为7。一些情况下，眼用溶液的pH可在3.5至8.5之间变化。因此，需要眼用制剂的pH范围为3.5至8.5.

在本发明多个方面的一些实施方式中，所述组合物的pH范围为：下限为约3.5、3.55、3.6、3.65、3.7、3.75、3.8、3.85、3.9、3.95、4.0、4.05、4.1、4.15、4.2、4.25、4.3、4.35、4.4、4.45、4.5、4.55、4.6、4.65、4.7、4.75、4.8、4.85、4.9、4.95或5.0，至上限为约5.0、5.05、5.1、5.15、5.2、5.25、5.3、5.35、5.4、5.45、5.5、5.55、5.6、5.65或5.7。尽管USP<1151>指出可用于眼用制剂的pH至多为8.5，但帕唑帕尼的溶解度随着pH而变化，其溶解度随着pH的增加而降低。因此，pH高于5.7时，帕唑帕尼的溶解度过低，使得在而不使制剂的张力超过400mOsm的上限的情况下，改性环糊精的量不可能增加至足以使帕唑帕尼增溶的水平。

在本发明多个方面的一些实施方式中，所述组合物稳定至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12个月或12个月以上的时间。

以下实施例仅为示例性，且并非意在以任何方式限制本发明的范围。

实施例

实施例1：组合物

下面的表2给出了帕唑帕尼单盐酸盐溶液组合物。pH可调节至所需pH，例如其pH范围为约3.5至约5.7。

表2

实施例2：10mg/mL帕唑帕尼单盐酸盐溶液组合物的制备方法

上述实施例1所述制剂由此处的实施例2的方法来制备。在C级环境中制备本体溶液(bulk solution)。将β-环糊精磺丁基醚(例如

购自CydexPharmaceuticals，Inc.，Lenexa，KS)加入含有注射用水(WFI)的适当容器中，温和地混合直至可见溶解。然后按顺序逐步将活性成分(单盐酸盐形式的帕唑帕尼)和单水合磷酸二氢钠加入容器中，温和地搅拌并使之溶解，然后继续添加。用WFI将溶液添加至其体积并温和地搅拌。若需要，使用1N盐酸或1N氢氧化钠溶液将溶液调节至所需pH，例如约3.5至约5.7的pH。所得溶液使用两个无菌的0.22μm灭菌滤器(以系列)过滤，然后在吹-填-封装置中使用第三个0.22μm滤器过滤，然后填充。

10mg/mL盐酸帕唑帕尼溶液的生产方法的流程图

实施例3：测定10mg帕唑帕尼/mL组合物的稳定性

出于实施例3的目的，测定了10mg帕唑帕尼/mL(“标示量”)的帕唑帕尼单盐酸盐组合物的物理稳定性，例如所述实施例1中包装于吹填封单次使用容器(该容器使用空白流动包装铝箔进行外包装)中的组合物的物理稳定性，所述测定是通过所述组合物的澄清度、颜色、pH、帕唑帕尼占标示量的含量、≥10μm的颗粒计数以及≥25μm的颗粒计数进行的。

方法

澄清度和颜色

装置

i.药瓶：无色、透明、中性玻璃的相同药瓶

ii.吸量管：A级玻璃或数字玻璃(Digital)

iii.试管：13mm x100mm，硼硅酸盐，(Baxter T-1290-4)

iv.荧光光源：Macbeth SpectraLight II Booth

v.白/黑板

试剂

i.浓盐酸(HCl)：分析级(37%)

ii.氯化钴(CoCl2.6H₂O)：试剂级

iii.硫酸铜(CuSO4.5H₂O)：试剂级

iv.氯化铁(FeCl3.6H₂O)：试剂级

v.去离子水：Barnstead NanoPure

溶液

储备溶液

1%w/v盐酸溶液：用水将135mL的浓HCl稀释至5升。

红色溶液(氯化钴，CS)

蓝色溶液(硫酸铜，CS)

黄色溶液(氯化铁，CS)

根据现行USP的试剂、溶液、比色溶液(CS)项的要求进行操作。适当地将溶液储存于防腐、密封的容器中，在黑暗中储存于5°C。每隔12个月再校准一次CS溶液。这些溶液用于制备用于颜色比较的比色标准品，如USP<631>颜色和消色项下所述。

比色标准溶液

使用上述三种储备CS溶液，制备以下所列举的五种标准溶液。将标准溶液储存于紧密密封的玻璃容器中。当在黑暗中储存于5°C时，这些溶液稳定12个月。

标准溶液

对照溶液

如下表所定义，将上述4.2部分所列举的五种标准溶液之一的等分试样加入单个的50-mL容量瓶中。用1%HCl稀释至50mL。将对照溶液储存于紧密密封的玻璃容器中。对照溶液在室温稳定12个月。

对照溶液	标准溶液B(mL)
		B1	37.5
B2	25.0
		B3	18.75
B4	12.5
		B5	6.25
B6	2.5
		B7	1.25
B8	0.75
		B9	0.5

对照溶液	标准溶液BY(mL)
		BY1	50.0
BY2	37.5
		BY3	25.0
BY4	12.5
		BY5	6.25
BY6	2.5
		BY7	1.25

对照溶液	标准溶液Y(mL)
		Y1	50.0
Y2	37.5
		Y3	25.0
Y4	12.5
		Y5	6.25
Y6	2.5
		Y7	1.25

对照溶液	标准溶液GY(mL)
		GY1	12.5
GY2	7.5
		GY3	4.25
GY4	2.5
		GY5	1.5
GY6	0.75
		GY7	0.375

对照溶液	标准溶液R(mL)
		R1	50.0

R2	37.5
		R3	25.0
R4	18.75
		R5	12.5
R6	6.25
		R7	2.5

方法

目测所有剂量单元，观察到整个样品是均匀的。若整个样品呈均匀状，则选择一份样品来进行详细检查。若整个样品不均匀，则选择两份样品进行详细检查，这两份样品代表了所观察变化范围的两个极端。

澄清度

在使用白色和黑色背景的类似容器中将溶液样品与相同体积的水进行比较，从而确定了溶液澄清度。

颜色

颜色的比较根据药典所述的测试进行，优选在配对的比色管或在适宜的比色计中、在确保比色对照溶液和所测试样本在各方面都得到相同处理的条件下进行。颜色的比较最好在深度相等的层中进行，并且在荧光下相对于白色背景来横向观察。尤为重要的是，溶液在相同温度，优选25°C进行比较。

将溶液样品与等体积水在相似容器中比较，来确定溶液的颜色。若没有差别，溶液记录为无色。若溶液不同于水，将其与对照溶液B9、BY7、Y7、GY7和R7比较；若样品浅于这些对照溶液则记录为无色。否则，选择相当于样品溶液的对照溶液，并与相同组的其他对照溶液比较(例如Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6和Y7)，以将所测试的溶液归类。记录与样品最为匹配的对照溶液的同一性。若样品的颜色介于两种对照溶液之间，则将该结果记录为介于这两种对照溶液的值之间。

将不呈现颜色(与水相同)或呈现浅于对照溶液B9、BY7、Y7、GY7或R7的颜色的溶液，记录为“无色”。

pH

用本领域技术人员所理解的适宜的方法测量pH。

帕唑帕尼含量(%标示量)

装置

平衡器：Mettler MT5或MX5

色谱：能够进行梯度洗脱的HPLC系统，配有可变波长的UV检测器

柱：Phenomenex Develosil RPAqueous-3，C-30，3μm，150mm x4.6mm

数据采集系统：Atlas或Empower

滤器：Millex-GV PVDF，0.22μm，直径33mm，灭菌注射器式滤器；或Acrodisc Nylon，0.2μm，直径25mm的注射器式滤器

注射器：Becton and Dickinson，10mL，塑料

试剂

帕唑帕尼：分析对照标准品

乙腈(ACN)：HPLC级

三氟甲酸(TFA)：HPLC级

水：去离子水，Milli-Q或HPLC级

溶液的制备

溶解溶剂的制备

制备体积比为50:50:0.1的ACN:水:TFA的混合物。例如充分混合1mL的TFA和500mL的水。加入500mL的乙腈并充分混合。

流动相A的制备

制备体积比为90.5:9.5:0.1的水:ACN:TFA的混合物。例如充分混合1mLTFA和905mL的水。加入95mL ACN并充分混合。使用前脱气。

流动相B的制备

制备体积比为40.5:59.5:0.1的水:ACN:TFA的混合物。例如充分混合1mLTFA和405mL的水。加入595mLACN并充分混合。使用前脱气。

标准溶液的制备(一式两份)

通过转移精确称量的大约10.8±1.1mg的GW786034B分析对照标准品(根据所需的纯度调整重量)至100mL容量瓶中，在溶解溶剂中制备0.1mg/mL(游离碱)的GW786034B对照标准溶液。不要在容量瓶中留下称量舟皿(weightboat)。用溶解溶剂稀释至大约2/3的体积，并超声处理至少5分钟或直至溶解。将其平衡至室温，然后用溶解溶剂稀释至所述体积。标准溶液在5°C或室温稳定至少40天，不需在实验室避光保存。

注：可使用所得最终浓度相当的其他制备方案。

敏感性检查溶液的制备

用溶解溶剂将5mL的标准溶液稀释至100mL。再将1mL份的该溶液稀释至100mL容量瓶中，得到0.05%(v/v)的敏感性检查标准溶液。该溶液在室温稳定至少8天，不需在实验室避光保存。

注：可使用所得最终浓度相当的其他制备方案。

工作活性样品溶液和安慰剂样品溶液的制备

使用分别的储备溶液一式两份地制备样品溶液。

滴眼剂溶液的制备

样品制备方案

剂量规格	用于稀释的等量体积	稀释体积	目标终浓度
				10mg/mL	2mL	200mL	0.1mg/mL

以2mg/mL制备的工作样品溶液在室温稳定至少2天，不需在实验室避光保存。以5mg/mL、8mg/mL、10mg/mL和12mg/mL制备的工作样品溶液在室温稳定至少7天，不需在实验室避光保存。

注：可使用所得最终浓度相同或者在该方法的线性范围内的浓度的同样的样品溶液的其他制备操作。

实验操作

仪器参数

测试操作

进样空白溶液、标准品和样品溶液。分析之后，柱子应在保存之前用50:50乙腈:水混合物冲洗至少30分钟。柱子应保存在50:50乙腈:水中。若可能，应使用洗针瓶以使不同的进样之间帕唑帕尼的残留达到最小。HPLC空白色谱中发现的任何峰均不应妨碍对感兴趣的可记录峰进行积分，且应排除在样品色谱图之外。空白色谱中残留的帕唑帕尼应小于或等于0.1%。若大量残留，则用异丙醇洗涤HPLC系统以及HPLC进样器。

同一性试验

若样品溶液中帕唑帕尼峰的保留时间与对照标准色谱图中帕唑帕尼峰的保留时间相差±3%以内，则确定样品是相同的。安慰剂溶液的同一性可如下确定：在相同的保留时间未出现帕唑帕尼对照物色谱图中的主峰，或安慰剂样品中所计算的含量小于或等于2mg/mL的活性剂量的0.1%。

帕唑帕尼含量的计算

响应因子，K

K=(PxSxC_S)/A_S

其中：

A_S=标准溶液单次进样所响应的峰面积

P=GW786034B对照标准品的纯度(以小数计)。

S=盐酸帕唑帕尼转化为等量游离碱的因子(即0.923)。

Cs=标准溶液中的帕唑帕尼的浓度(mg/mL)。

%标示量

Au x Kav x Du x(1/L)x100=%标示量

其中

Au=标准溶液所响应的峰面积

Kav=对于标准溶液所有进样的平均响应因子

Du=样品溶液的稀释因子

L=标示量

颗粒计数

方法A

颗粒计数根据美国药典(USP)<789>“眼用溶液中的颗粒物质”来测定。

方法B

装置

颗粒计数器：HIAC-Royco9703

数据采集系统：PharmSpec

试剂

水：无颗粒去离子水

溶液的制备

对于所有样品的制备操作，请参考USP<789>“眼用溶液中的颗粒物质”。

滴眼剂溶液的气泡排除操作

颗粒试验前，必须将滴眼剂样品溶液脱气，其使用真空干燥器，通过以下操作进行：

1.轻轻用盖子将散装样品容器盖上，并置于真空干燥器中。

2.盖上干燥器盖，并确保放气阀是打开的。

3.将校准压力计连接至干燥器，并将干燥器连接至真空抽头。

4.打开真空抽头，直至标度压力达到-20至-25英寸Hg柱，然后关掉真空抽头。可能需要周期性地打开和关闭真空抽头，以保证抽真空期间真空压力范围为-20至-25英寸Hg柱。

5.5分钟后，慢慢释放真空。

6.重新达到常压后，打开干燥器盖。

7.随即进行颗粒试验。

颗粒计数的结果记录为颗粒数/mL。

颗粒计数/mL=(平均颗粒数(≥10μm或≥25μm))/体积

其中：体积=5mL

方法C

方法C类似于上述方法B，区别在于应特别地小心(例如样品制备前应用无颗粒水清洗手套；样品容器只能用无颗粒水清洗；不用的时候将取样针浸没于无颗粒水中)以在样品制备中避免任何颗粒污染，并避免将空气引入抽样针的可能性。

结果

10mg帕唑帕尼/mL(“标示量”)的帕唑帕尼单盐酸盐组合物，例如实施例1所述组合物(pH4.0)的物理稳定性，示于表4中。

表4

10mg帕唑帕尼/mL(“标示量”)的帕唑帕尼单盐酸盐组合物，例如实施例1所述组合物(pH4.25)的物理稳定性，示于表5中。

表5

10mg帕唑帕尼/mL(“标示量”)的帕唑帕尼单盐酸盐组合物，例如实施例1所述组合物(pH4.5)的物理稳定性，示于表6中。

表6

实施例4：帕唑帕尼结合常数K_b的测定

方法

药物和络合剂的结合常数，使用Connors所述的光谱法和其中的参考文献来进行测定(Kenneth A.Connors:“Binding Constants”,Wiley-Interscience;1.edition(April1987))。

帕唑帕尼(下述方程式1中的034)药物和β-环糊精磺丁基醚(例如

购自Cydex Pharmaceuticals，Inc.，Lenexa，KS)之间络合的简化的平衡式见于方程式1中，其中K_d为解离常数且K_b为结合常数，034_(s)为帕唑帕尼的固体沉淀，034_(aq)为未结合的帕唑帕尼(无络合的游离态)的水中浓度，Captisol_(aq)为初始Captisol浓度和药物与帕唑帕尼络合态中Captisol的浓度之差。Captisol_(aq)为帕唑帕尼与034·Captisol(络合态)的络合物的浓度。

方程式1

K_{d} = \frac{[034_{(aq)}] \times [{Captisol}_{(aq)}]}{[034 \cdot {Captisol}_{(aq)}]}

K_{b} = \frac{1}{K_{d}}

使用帕唑帕尼(大约0.05mg/ml，10^-4M)溶液，通过不同浓度的β-环糊精磺丁基醚溶液进行滴定实验，并测定所得溶液的荧光强度(在342nm激发，在375nm发射)。选择初始Captisol浓度来适当地描述整个滴定曲线并防止帕唑帕尼在溶液中成核和沉淀。通常初始Captisol浓度的范围是从不大于大约0.05mg/ml到至少大约3.5mg/ml。

所测量的荧光强度与络合态034·Captisol(aq)的浓度直接相关，因为未络合的帕唑帕尼034(aq)和Captisol(aq)具有可忽略不计的荧光产率。所测量的荧光强度使用非线性单一拟合程序来拟合，以确定结合常数K_b的值。根据Benesi和Hildebrandt绘制荧光强度曲线，其为β-环糊精磺丁基醚浓度的函数，以确定结合的化学计量数。这些测定在特定pH值和温度下的溶液中进行。

仪器：

Varian Cary Eclipse荧光分光光度计(SN：EL05043801)，其配有1cm比色杯和垂直的检测几何形状(detection geometry)或等效的形状。溶液温度通过控制比色杯的温度并且确保良好的接触而得以控制。

结果

在pH为4和温度为40°C时，荧光强度作为β-环糊精磺丁基醚浓度的函数示于图1中，并得到结合常数K_b为9763mol^-1。

在pH为5和温度为25°C时，荧光强度作为β-环糊精磺丁基醚浓度的函数示于图2中，并得到结合常数K_b为9130mol^-1。

实施例5：作为pH的函数的帕唑帕尼溶解度的确定

方法

1)制备25mM磷酸盐缓冲液(使用单水合磷酸二氢钠)，使用1NNaOH/HCl将该缓冲溶液调节至不同的目标pH。

2)向上述溶液中加入过量的帕唑帕尼游离碱(每10mL缓冲溶液约20mg游离碱)，振荡该溶液并充分混合。测量所溶解溶液的pH，若需要则将pH调节至目标值。

3)将所溶解的溶液置于5°C恒温的室内。伴随搅拌平衡该溶液5天。

4)5天后立即测量所溶解溶液的pH并记录该pH，并使用0.22μm PVDF滤器将该溶液过滤入试管中。

5)用50:50:0.1的水:乙腈:TFA(v/v/v)稀释液以1∶1(v/v)稀释该溶液，并充分混合。

6)所述溶液的溶解度通过268nm检测波长下的HPLC来测定。

HPLC参数：

流动相A：100:0.1(v/v)水:TFA

流动相B：100:0.1(v/v)乙腈:TFA

柱：Phenomenex Develosil RPAqueous-3，C-30，3μm，150mm x4.6mm

柱温：35°C

流速：1.0mL/分钟的恒定流速，A/B=60/40

检测器波长：268nm

进样量：10μL

总运行时间：4分钟

结果

在25°C的溶解度使用与前文所述相同或相似的操作通过以下测定：在pH为5.0时0.000006mg/mL(1.37x10^-8mol/L)，在pH4.5时0.000025mg/mL(5.71x10^-8mol/L)；在pH4.25时0.000534mg/mL(1.22x10^-6mol/L)；在pH4.0时0.001043mg/mL(2.38x10^-6mol/L)；和在pH3.5时0.02mg/mL(4.57x10^-5mol/mL)。

实施例6：U_CD的计算

U_CD=(KS_o/1+KS_o)(m_CD/m_D)(MW_D/MW_CD)

药物的剂量，m_D

环糊精的剂量，m_CD

药物分子量，MW_D

环糊精分子量，MW_CD

结合常数K，如上述实施例4所述。

溶解度S_o，如上述实施例5所述。

来自Rao，V.M.，Stella，V.J.，JPharm Sci，92，5927，May2003。

对于不同pH水平的10mg/mL帕唑帕尼和9%

(β-环糊精磺丁基醚)溶液的UCD的计算，见表7。

表7

*将保守值10,000用于这些计算。较低的K值，例如上述实施例4测定的较低的K值可产生更低的U_CD值。

对于不同pH水平的10mg/mL帕唑帕尼和13%

(β-环糊精磺丁基醚)溶液的UCD的计算，见表8。

表8

对于不同pH水平的10mg/mL帕唑帕尼和2%

(β-环糊精磺丁基醚)溶液的UCD的计算，见表9。

表9

如背景部分引用Rao的文章所述，U_CD使得公式可以确定水溶性差的药物制剂中的环糊精是否有可能带来显著的增溶优点。当所述无量纲数值U_CD小于1时，络合本身并不足以带来完全的增溶作用。鉴于10mg/mL组合物的U_CD值低，不可能期待组合物能够表现出临床试验所用制剂所需的稳定性。

实施例7通过电势测定滴定测量帕唑帕尼pK_a2

材料

(β-环糊精磺丁基醚)得自Cydex Pharmaceuticals，Inc.，Lenexa，KS。盐酸帕唑帕尼得自GlaxoSmithKline，Pennsylvania，PA。氢氧化钠(NaOH)滴定标准品由

0.1mol/L标准品制备，且氯化钠(NaCl，批次号K40817904012)得自Merck Chemicals(Darmstadt，Germany)。苯甲酸热化学标准片剂得自BDH Limited(Poole，England)。苯甲酸ACS试剂和苯丙氨酸甲酯盐酸盐得自Sigma-Aldrich(St Louis，USA)。所有固体储存于干燥器中。pH校准标准品以一次性使用袋装形式购自MetrohmAG(Zofigen，Switzerland)。氩气(5.0级)得自BOC gases(North Ryde，NSW，Australia)。

装置

将Metrohm AG907Titrando^TM电势测定自动滴定器系统用于所有电势测定滴定。Titrando^TM配有800Dosino^TM剂量单元和iUnitrode pH电极(钠响应极低)，后者充满了3mol/L KCl内部电解液。该系统通过Tiamo^TM light version2.2自动滴定软件控制。

所有滴定和pH电极校准均在Metrohm AG的双层玻璃恒温滴定容器(最大体积90mL)中进行。滴定容器的外部是恒温的，使用配有Heto HMT200恒温泵的Heto CBN8-30水浴测量温度。所有连接软管均是分离的，以使与环境的热交换达到最小化。滴定容器的内容物用MetrohmAG802推进搅拌器搅拌。

方法

用于确定pK_a的滴定标准品的制备

小心地制备0.1000N NaOH标准滴定剂是通过电势测定滴定准确测定pK_a的关键。另外，从NaOH标准品消除二氧化碳(CO₂)对于滴定准确性而言也是关键的。因此，滴定标准品必须在氩气下用无碳酸水制备，并在氩气下储存。

为制备无碳酸水，用900mL的

水装满1L玻璃瓶中，并伴随搅拌煮沸30分钟。瓶的顶空部充满氩气，然后将盖子轻轻盖上，使水冷却。冷却后，顶空部充满氩气并将盖子拧紧。

当所述去碳酸水的温度接近室温时(约等于或低于25°C)，制备NaOH滴定标准品。在氩气氛下，将含有

溶液的塑料安瓿插入1L容量瓶的颈部，根据生产商的说明书调配溶液。用去碳酸水从安瓿中清洗出余下的NaOH溶液。当NaOH溶液和去碳酸水的温度都达到20°C时，用去碳酸水将NaOH溶液补足至体积，然后彻底混合。瓶的顶空部充满氩气，然后将其连接至Dosino滴定剂量单元，所述剂量单元配有钠石灰保护管。任何未使用的NaOH溶液均在氩气下保存，以防止系统吸收CO₂。

pH电极的校准

每次滴定前进行校准操作，所述操作在滴定实验将要进行的温度下进行。此外，平衡样品溶液以在滴定开始前和过程中测量温度。

在独立的、干净并且干燥的恒温滴定容器中调配各校准标准溶液(标称pH4和pH7)。将标准溶液平衡至实验温度。将含有pH4标准溶液的容器转移至自动滴定器中，开始校准。使氩气流缓慢的通过滴定容器的进气孔。使用Tiamo^TM软件，将搅拌器的速率设置为1(任意地缓慢搅拌)。pH读数稳定后(由软件自动检测)，移除pH4溶液，且电极用

水清洗，然后用

纸巾小心地擦干。然后使用pH7校准标准品重复这些步骤。在“测量”模式下，通过测量pH4对照标准品的pH来检验是否校准。任何滴定开始前，检查Dosino^TM中的标准品体积以确保有充足的0.1000N NaOH标准品以完成滴定。关于NaOH标准品制备的详情，参见0部分。

通过使用对照化合物进行电势测定滴定来验证pK_a的测定

苯甲酸(pK_a=4.20)(一级标准品)和苯丙氨酸甲酯盐酸盐(pK_a=7.11)(二级标准品)，是文献中准确报道其pK_a值的化合物¹。使用

自动滴定系统测定这两种对照化合物的pK_a值(精度为±0.03)，以适当地验证

存在下的帕唑帕尼pK_a2的电势测定。应注意，所有测试溶液在任何滴定开始前均应平衡至实验温度。在配有一对匹配好的水银-玻璃温度计的滴定容器中测量温度，并校正突出部分(emergent stem)。

苯甲酸标准品的制备

使用玛瑙研钵和研棒将苯甲酸(热化学标准品)片剂磨碎。然后将苯甲酸粉末转移至套管瓶(shell vial)中。在活化硅胶干燥器中储存磨碎的粉末过夜。在干净的玻璃烧杯中称取大约61.5mg苯甲酸粉末。小心将粉末敲入恒温玻璃滴定容器中，再次称量烧杯，以计算转移入恒温滴定容器中的粉末重量。在Tiamo^TM软件中记录放入滴定容器中的物质的质量。向苯甲酸粉末中滴加两滴乙醇，以辅助溶解。用A级50mL容量的玻璃吸量管，将50.0mL的

水加入滴定容器中。搅拌容器的内容物，直至苯甲酸完全溶解。

电势测定滴定前，如前所述校准pH电极。当所述苯甲酸溶液已平衡至测量温度时，将含有苯甲酸溶液的容器置于自动滴定器上。将Tiamo软件设置在搅拌速率为1(慢速搅拌，任意单位)，NaOH加样的间隔为60秒。滴定终点设置在pH6。后续滴定前，如前所述将pH电极重新校准。

苯丙氨酸甲酯盐酸盐标准品的制备

将大约107mg的苯丙氨酸甲酯盐酸盐称量于干净的玻璃烧杯中。小心将粉末敲入恒温玻璃滴定容器中，再次称量烧杯，以计算转移入恒温滴定容器中的粉末重量。在Tiamo^TM软件中记录放入滴定容器中的物质的质量。

用50mL容量的玻璃吸量管，将50.0mL的

水加入滴定容器中。搅拌容器的内容物，直至苯丙氨酸甲酯盐酸盐溶解。

电势测定滴定前，根据0部分所述来校准pH电极。当所述苯丙氨酸甲酯盐酸盐溶液已平衡至测量温度时，将含有苯丙氨酸甲酯盐酸盐溶液的容器置于自动滴定器上。将Tiamo^TM软件设置在搅拌速率为1(慢速)，NaOH加样的间隔为60秒。滴定终点设置在pH=9。

后续滴定前，根据0部分所述来将pH电极重新校准。

通过电势测定滴定测量帕唑帕尼pK_a2

含有帕唑帕尼的

溶液的制备

通过称量标称70g的

于干净和干燥的1L容量瓶中制备70mg/mL的Captisol溶液。将

水加入瓶中至总体积的2/3。通过搅拌该瓶使

水补足至最终体积。在所有

溶液的制备中，当称量

粉末时，

中的水含量(7-8重量%，由KarlFischer滴定(独立的实验方案)所测定)也要考虑到。

在干净和干燥的250mL容量瓶中，称量大约1.354g的盐酸帕唑帕尼(记录盐酸帕唑帕尼的实际重量以计算盐酸帕唑帕尼的最终浓度)。将70mg/mL的

溶液加入盐酸帕唑帕尼中，充满瓶子至总体积的大约2/3。然后通过超声处理溶解盐酸帕唑帕尼，仔细检查任何未溶解的颗粒。随后，加入365.25mg的NaCl，并且搅拌直至溶解。将溶液补足至一定体积，如果不立即使用则储存于冰箱中。溶液中盐酸帕唑帕尼的目标终浓度为5.417mg/mL，NaCl的目标终浓度为1.461mg/mL。

在

的存在下测定帕唑帕尼pK_a2

加入单独的夹套容器中，将其保持在与pH校准相同的温度下。使用20.00mL和25.00mL的A级玻璃吸量管，向平衡至测量温度的恒温玻璃滴定容器中加入45.0mL的70mg/mL盐酸帕唑帕尼溶液(如部分0所述而制备)。在盐酸帕唑帕尼溶液平衡的过程中进行pH电极校准。

使用Tiamo软件并将搅拌速率设为1(慢)来进行滴定，且每次加样之间的等待时间设为60秒。滴定终点为pH=7.5。后续滴定前，根据0部分所述来将pH电极重新校准。

在5、10、15、20、25、30和35°C进行盐酸帕唑帕尼溶液电势测定滴定。以一式三份重复测量，或直至pK_a2结果的重现性在±0.03之内为止。

帕唑帕尼pK_a2的数据分析和计算

电势测定滴定数据(pH值，其为加样NaOH的函数)的分析，使用针对水合氢离子浓度、氢氧根离子浓度和平均离子活度系数进行全校正(fullcorrections)的Henderson-Hasselbalch方程式，如Albert和Serjeant²所述，并记载于其他文献中：

pKa = ph + {\frac{[Y] - [H^{+}] - [{Na}^{+}] + [{OH}^{-}]}{[H^{+}] + [{Na}^{+}] - [{OH}^{-}]}} - \log γ_{&PlusMinus;}

平均离子活度系数使用全Debye-Hückel方程式计算：

- \log γ_{&PlusMinus;} = A | z_{+} z_{-} | \frac{\sqrt{I}}{1 + {Ba}_{o} \sqrt{I}}

其中I为离子强度，A和B为查表常数(tabulated constant)，其值依赖于温度和介电常数，且a_o为离子大小参数，其设为3单位。如参考文献1所述，[H⁺]和离子强度(I)的相互依存的计算重复了五次，以确保达到会聚(convergence)；所述会聚通常在第三次重复后发生。用

进行计算。

参考文献

1.Prankerd,R.J.,Critical compilation of Ionisation Constants.In:Brittain,H.B.Ed.Profiles of drug substances,exipients and relatedmethodology.San Diego:Academic Press-Elsevier;Vol33,2007.

2.Albert AA,Serjeant EP，The Determination of Ionisation Constants,3^rd Ed.,Chapman and Hall,London UK(1984),Chs.2and3)

尽管详细描述了本发明的具体实施方式，但本发明并不限于此。上述详细说明仅仅作为本发明的示例性说明，不应理解为对本发明进行任何限制。其修改对本领域技术人员而言是显而易见的，且所有不偏离本发明的精神的修改均应被包括在本发明所附权利要求书的范围之内。

Claims

1.药物组合物，其包含：

约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；

约2.0至约13.0重量%的改性环糊精，对所述改性环糊精进行选择使得所述改性环糊精将帕唑帕尼与所述改性环糊精在水中的pK_a低于帕唑帕尼单独在水中的pK_a；

使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；

使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和

水；

其中所述组合物稳定至少2个月。

2.根据权利要求1的药物组合物，其中所述组合物的pH为约4至约4.5。

3.根据权利要求1或2的药物组合物，其中所述组合物的重量克分子渗透压浓度为约270至约330mOsm。

4.根据权利要求1至3中任一项的药物组合物，其中对所述改性环糊精进行选择使得所述改性环糊精将帕唑帕尼与所述改性环糊精在水中的pK_a比帕唑帕尼单独在水中的pK_a低至少0.4，所述改性环糊精在10mg帕唑帕尼/mL水溶液中产生帕唑帕尼的pK_a。

5.根据权利要求1至4中任一项的药物组合物，其中对所述改性环糊精进行选择使得所述改性环糊精将帕唑帕尼与所述改性环糊精在水中的pK_a比帕唑帕尼单独在水中的pK_a低至少0.8。

6.根据权利要求1至5中任一项的药物组合物，其中改性环糊精的量为约6.0至约10.0重量%。

7.根据权利要求1至6中任一项的药物组合物，其中改性环糊精选自羟基丙基-β-环糊精、甲基-β-环糊精、β-环糊精磺丁基醚及其组合。

8.根据权利要求1至7中任一项的药物组合物，其中改性环糊精为β-环糊精磺丁基醚。

9.根据权利要求1至8中任一项的药物组合物，其中所述组合物稳定至少6个月。

10.根据权利要求1至9中任一项的药物组合物，其中所述组合物稳定至少12个月。

11.根据权利要求1至10中任一项的药物组合物，其还包含缓冲剂。

12.根据权利要求11的药物组合物，其中所述缓冲剂为磷酸盐缓冲剂。

13.根据权利要求1至12中任一项的药物组合物，其中所述pH调节剂选自氢氧化钠、盐酸及其组合。

14.根据权利要求1至13中任一项的药物组合物，其中所述改性环糊精适于给药至人眼。

15.根据权利要求1至14中任一项的药物组合物，其中所述组合物为适于给予人的滴眼剂。

16.药物组合物，其包含：

约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；

约2.0至约13.0重量%的改性环糊精；和

使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；

使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和

水；

其中在25°C的温度所述组合物的U_CD值范围为0.0002至0.6，且其中所述组合物稳定至少2个月。

17.根据权利要求16的药物组合物，其中所述改性环糊精选自羟基丙基-β-环糊精、甲基-β-环糊精、β-环糊精磺丁基醚及其组合。

18.根据权利要求16或17的药物组合物，其中所述改性环糊精为β-环糊精磺丁基醚。

19.根据权利要求16至18中任一项的药物组合物，其中改性环糊精的量的范围为约6.0%至约10.0重量%。

20.根据权利要求16至19中任一项的药物组合物，其中所述组合物的重量克分子渗透压浓度的范围为270至330mOsm。

22.根据权利要求16至20中任一项的药物组合物，其还包含缓冲剂。

23.根据权利要求22的药物组合物，其中所述缓冲剂为磷酸盐缓冲剂。

24.根据权利要求16至23中任一项的药物组合物，其中所述pH调节剂选自氢氧化钠，盐酸及其组合。

25.根据权利要求16至24中任一项的药物组合物，其中所述眼用组合物的pH的范围为4.0至4.5。

26.根据权利要求16至25中任一项的药物组合物，其中所述组合物稳定至少6个月。

27.根据权利要求16至26中任一项的药物组合物，其中所述组合物稳定至少12个月。

28.根据权利要求16至27中任一项的药物组合物，其中所述改性环糊精适于给药至人眼。

29.根据权利要求16至18中任一项的药物组合物，其中所述组合物为适于给予人的滴眼剂。

30.药物组合物，其包含：

约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；

约2.0至约13.0重量%的改性环糊精；和

使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；

使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和

水；

其中所述组合物为帕唑帕尼的过饱和水溶液，且其中所述组合物稳定至少2个月。

31.根据权利要求30的药物组合物，其中所述改性环糊精选自羟基丙基-β-环糊精、甲基-β-环糊精、β-环糊精磺丁基醚及其组合。

32.根据权利要求30或31的药物组合物，其中所述改性环糊精为β-环糊精磺丁基醚。

33.根据权利要求30至32中任一项的药物组合物，其中改性环糊精的量的范围为约6.0%至约10.0重量%。

34.根据权利要求30至33中任一项的药物组合物，其中所述组合物的重量克分子渗透压浓度的范围为270至330mOsm。

35.根据权利要求30至34中任一项的药物组合物，其还包含缓冲剂。

36.根据权利要求35的药物组合物，其中所述缓冲剂为磷酸盐缓冲剂。

37.根据权利要求30至36中任一项的药物组合物，其中所述pH调节剂选自氢氧化钠、盐酸及其组合。

38.根据权利要求30至37中任一项的药物组合物，其中所述眼用组合物的pH的范围为约4.0至约4.5。

39.根据权利要求30至37中任一项的药物组合物，其中所述组合物稳定至少6个月。

40.根据权利要求30至39中任一项的药物组合物，其中所述组合物稳定至少12个月。

41.根据权利要求30至40中任一项的药物组合物，其中所述改性环糊精适于给药至人眼。

42.根据权利要求30至41中任一项的药物组合物，其中所述组合物为适于给予人的滴眼剂。

43.药物组合物，其包含：

约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；

约2.0至约13.0重量%的改性环糊精；

使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；

使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和

水。

44.根据权利要求43的药物组合物，其中所述改性环糊精选自羟基丙基-β-环糊精、甲基-β-环糊精、β-环糊精磺丁基醚及其组合。

45.根据权利要求43或44的药物组合物，其中所述改性环糊精为β-环糊精磺丁基醚。

46.根据权利要求43至45中任一项的药物组合物，其中改性环糊精的量的范围为约6.0%至约10.0重量%。

47.根据权利要求43至45中任一项的药物组合物，其中所述组合物的重量克分子渗透压浓度的范围为270至330mOsm。

48.根据权利要求43至47中任一项的药物组合物，其还包含缓冲剂。

49.根据权利要求48的药物组合物，其中所述缓冲剂为磷酸盐缓冲剂。

50.根据权利要求43至49中任一项的药物组合物，其中所述pH调节剂选自氢氧化钠、盐酸及其组合。

51.根据权利要求43至50中任一项的药物组合物，其中所述眼用组合物的pH范围为约4.0至约4.5。

52.根据权利要求43至50中任一项的药物组合物，其中所述改性环糊精适于给药至人眼。

53.根据权利要求43至52中任一项的药物组合物，其中所述组合物为适于给予人的滴眼剂。

54.药物组合物，其包含：

约10mg帕唑帕尼/mL所述组合物；

约9%β-环糊精磺丁基醚；

使pH为3.5至5.7所需的pH调节剂；

使重量克分子渗透压浓度为200至400mOsm所需的张力调节剂；和

水。

55.根据权利要求54的药物组合物，其中所述组合物为适于给予人的滴眼剂。

56.制备帕唑帕尼的过饱和溶液的方法，所述方法包括：

形成适用于眼用制剂的帕唑帕尼的酸加成盐和改性环糊精的水溶液；和

调节所述溶液pH至约3.5至5.7，以得到帕唑帕尼的过饱和溶液，其中帕唑帕尼的酸加成盐在过饱和溶液中增溶的浓度相当于约10mg/mL的帕唑帕尼。

57.根据权利要求56的方法，其中所述帕唑帕尼的酸加成盐为盐酸帕唑帕尼。

58.根据权利要求56或57的方法，其中所述改性环糊精选自羟基丙基-β-环糊精、甲基-β-环糊精、β-环糊精磺丁基醚及其组合。

59.根据权利要求56至58中任一项的方法，其中所述改性环糊精为β-环糊精磺丁基醚。

60.根据权利要求56至59中任一项的方法，其中改性环糊精的量的范围为约2.0%至约13.0重量%。

61.根据权利要求56至60中任一项的方法，其中改性环糊精的量的范围为约6.0%至约10.0重量%。