CN102627688B - 一种高纯度环肽化合物及其制备方法和用途 - Google Patents

一种高纯度环肽化合物及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种高纯度的环肽化合物，化学结构如式I所示，其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子，纯度大于等于99.0％。还公开了上述高纯度环脂肽化合物的制备方法以及用途。

Description

一种高纯度环肽化合物及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及一种高纯度环肽化合物及其制备方法，也涉及到这种高纯度环肽化合物的用途。
背景技术
真菌感染已经成为免疫缺陷病人发病率和死亡率居高不下的主要原因。在过去的20年里，霉菌感染的发病率显著增加。真菌感染的高危人群包括重症病人，外科病人以及那些患有HIV感染，血癌和其它肿瘤疾病的病人。那些经过器官移植的病人同样是真菌感染的高危人群。
棘球白素作为一类新的抗真菌药物，在治疗由念珠菌或曲霉引起的感染方面效果良好。这类药物又以卡泊芬净和米卡芬净为代表。棘球白素类药物通过抑制1，3-β糖苷键的形成来抑制真菌，从而更好地减小了对人体的伤害，在高效的同时尽可能的降低了副作用，因此它们在使用过程中比传统抗真菌药更安全。
FK463，又名米卡芬净钠，为如式II所示的化合物(R为钠离子)，由日本藤泽公司(Japan Fujisawa Toyama Co.，Ltd，Takaoka Plant)开发，其商品名为米开民(Mycamine)，目前作为静脉给药的抗真菌药在多个国家销售。它是以FR901379，如式III所示化合物(R为钠离子或氢离子)为前体通过酶解除掉侧链后得到FR179642，如式I所示化合物，(R为氢离子或钠离子)，(具体方法参见美国专利US5376634，EP0431350及中国专利CN1161462C，)然后经过化学修饰得到的，具体制备及纯化方法参见专利公开WO9611210，WO9857923，WO2004014879。
具体路线如下：
然而，本发明人通过HPLC对现有的米卡芬净制剂进行分析，发现制剂中主要含有杂质6a、杂质7a、杂质8a，杂质9a和杂质10a，并通过制备柱对上述杂质6a、杂质7a、杂质8a，杂质9a和杂质10a进行小量制备，经MS以及1H-NMR进行结构确证，其结构如式IVa、V a、VIa、VIIa、VIIIa所示：
杂质6a，其化学名5-[(1S，2S，3S)-4-[(1S，2R)-4-氨基-1-[[(2S，3S，4S)-2-氨甲酰-3-羟基-4-甲基-1-吡咯基]羰基]-2-羟基-4-氧代丁基]氨基]-3-[[[(2S，4R)-1-[(2S，3R)-2-[[[(2S，4R)-4，5-二二羟基-1-[4-[5-[4-(戊氧基)苯基]-3-异恶唑]苯甲酰基]-2-吡咯]羰基]氨基]-3-羟基丁酰基]-4-羟基-2-吡咯]羰基]氨基]-1，2-二羟基-4-氧代丁基]-2-羟基苯硫酸钠
IVa(杂质6a)
杂质6a的MS与1H-NMR数据如下：
MS：1314.5[M+Na]+
1H-NMR(DMSO-d6)：0.81-1.03(6H，m)，1.12(3H，d)，1.3-1.7(4H，m)，1.7-2.1(5H，m)，2.11-2.41(3H，m)，2.52-2.62(1H，m)，3.03-3.14(1H，m)，3.62-4.65(15H，m)，4.70-5.22(10H，m)，5.24(1H，d)，5.53(1H，d)，6.53-6.71(3H，m)，7.12-7.70(7H，m)，7.82(2H，d)，7.83-8.24(5H，m)，8.61-9.11(2H，m)
杂质7a的化学名为5-[(1S，2S)-2-[(3S，6S，9S，11R，15S，18S，20R，21R，24S，25S)-3-[(R)-2-氨甲酰基-1-羟基乙基]-11，20，21，25-四羟基-15-[(R)-1-羟基乙基]-2，5，8，14，17，23-六羰基-18-[4-[5-(4-戊氧基苯基)异噁唑-3-基]苯甲酰胺]-1，4，7，13，16，22-六氮杂三环[22.3.0.09，13]二十七烷-6-基]-1，2-二羟乙基]-2-羟基苯硫酸钠
Va(杂质7a)
杂质7a的MS与1H-NMR数据如下：
MS：1300.5[M+Na]+
1H-NMR(DMSO-d6)：0.87(3H，t)，1.12(3H，d)，1.42-1.65(4H，m)，1.62-2.16(6H，m)，2.11-2.43(3H，m)，2.51-2.65(1H，m)，3.04-3.11(1H，m)，3.62-4.63(15H，m)，4.71-5.23(10H，m)，5.24(1H，d)，5.69(1H，d)，6.51-6.72(3H，m)，7.11-7.74(7H，m)，7.83(2H，d)，7.84-8.11(4H，m)，8.26(1H，d)，8.61-9.12(2H，m)
杂质8a的化学名为5-[(1S，2S)-2-[(3S，6S，9S，11R，15S，18S，20R，21R，24S，25S，26S)-3-[(R)-2-氨甲酰基-1-羟基乙基]-11，20，21，25-四羟基-15-[(R)-1-羟甲基]-26-甲基-2，5，8，14，17，23-六羰基-18-[4-[5-(4-戊氧基苯基)异噁唑-3-基]苯甲酰胺]-1，4，7，13，16，22-六氮杂三环[22.3.0.09，13]二十七烷-6-基]-1，2-二羟基乙基]-2-羟基苯硫酸钠，
VIa(杂质8a)
杂质8a的MS与1H-NMR数据如下：
MS：1300.4[M+Na]+
1H-NMR(DMSO-d6)：0.83-1.02(6H，m)，1.32-1.72(4H，m)，1.75-2.14(6H，m)，2.13-2.46(3H，m)，2.52-2.64(1H，m)，3.01-3.13(1H，m)，3.62-4.64(15H，m)，4.72-5.22(10H，m)，5.24(1H，d)，5.53(1H，d)，6.52-6.73(3H，m)，7.11-7.75(7H，m)，7.85(2H，d)，7.85-8.17(4H，m)，8.27(1H，d)，8.65-9.12(2H，m)
杂质9a的化学名5-[(1S，2S)-2-[(3S，6S，9S，11R，15S，18S，20R，21S，24S，25S，26S)-3-[(R)-2-氨甲酰基-1-羟基乙基]-11，20，21，25-四羟基-15-[(R)-1-羟基乙基]-26-甲基-2，5，8，14，17，23-六羰基-18-[4-[5-(4-戊氧基苯基)异噁唑-3-基]苯甲酰胺]-1，4，7，13，16，22-六氮杂三环[22.3.0.09，13]二十七烷-6-基]-1，2-二羟基乙基]-2-羟基苯硫酸钠，
VIIa(杂质9a)
杂质9a的MS与1H-NMR数据如下：
MS：1314.4[M+Na]+
1H-NMR(DMSO-d6)：0.87-1.11(6H，t)，1.13(3H，d)，1.41-1.61(4H，m)，1.62-2.17(6H，m)，2.11-2.43(3H，m)，2.53-2.65(1H，m)，3.05-3.11(1H，m)，3.62-4.63(15H，m)，4.71-5.23(10H，m)，5.26(1H，d)，5.69(1H，d)，6.53-6.72(3H，m)，7.11-7.72(7H，m)，7.81(2H，d)，7.86-8.11(4H，m)，8.28(1H，d)，8.62-9.12(2H，m)
杂质10a的化学名5-[(1S，2S)-2-[(3S，6S，9S，11R，15S，18S，20R，21R，24S，25S，26S)-3-[(R)-2-氨甲酰基-1-羟基乙基]-11，21，25-三羟基-15-[(R)-1-羟基乙基]-26-甲基-2，5，8，14，17，23-六羰基-18-[4-[5-(4-戊氧基苯基)异噁唑-3-基]苯酰胺]-1，4，7，13，16，22-六氮杂三环[22.3.0.09，13]二十七烷-6-基]-1，2-二羟基乙基]-2-羟基苯硫酸钠，
VIIIa(杂质10a)
杂质10a的MS与1H-NMR数据如下：
MS：1298.4[M+Na]+
1H-NMR(DMSO-d6)：0.87-1.11(6H，t)，1.13(3H，d)，1.41-1.61(4H，m)，1.62-2.17(8H，m)，2.11-2.43(3H，m)，2.53-2.65(1H，m)，3.05-3.11(1H，m)，3.62-4.63(14H，m)，4.71-5.23(10H，m)，5.26(1H，d)，5.69(1H，d)，6.53-6.72(3H，m)，7.11-7.72(7H，m)，7.81(2H，d)，7.86-8.11(4H，m)，8.28(1H，d)，8.62-9.12(2H，m)
其中杂质6a的含量高于0.3％，杂质7a和8a的总含量大于0.6％，杂质9a的含量高于0.2％，杂质10a的含量高于0.2％，米卡芬净的含量只有98.0％左右。但是FDA要求API尽可能不含有杂质，这样才能更安全地应用于临床。例如：FDA要求一些杂质的含量在0.1％以下，详细参见ICH Good ManufacturingPractice Guide for Active Pharmaceutical Ingredients，Q7A，Current Step4Version(November 10，2000)。
WO03018615描述了米卡芬净钠(例如式II所示的化合物)的结晶方法，该结晶方法具有一定的纯化效果。但是其申请人日本藤泽制药公司利用此方法获得的米卡芬净生产的市售的米卡芬净钠制剂纯度只有98.0％左右，应用于临床存在一定的风险性。
本领域众所周知，药物中间体的纯度越高，经过化学修饰最终药物产品的纯度也会越高。同样道理，作为中间体的式I化合物纯度越高，经化学修饰得到的反应后式II化合物(FK463)纯度也会越高。如果经化学修饰得的式II化合物(FK463)纯度高，那么就可以极大程度地减轻式II化合物纯化步骤的工艺压力，利用简便的纯化工艺得到高纯度的最终药物产品，式II化合物(FK463)。从米卡芬净结构类似物，例如杂质6、杂质7、杂质8、杂质9、杂质10的结构中可以判断，上述米卡芬净的这些结构类似物，基本上是由式I化合物的结构类似物经化学修饰反应而来。
IV杂质6
V杂质7
VI杂质8
VII杂质9
VIII杂质10
然而，式I化合物的结构类似物，分离纯化的难度非常大，尤其要在纯化过程中同时兼顾纯度和收率，就更加困难了。CN91104847描述了式I化合物的纯化分离，其中主要的纯化手段采用YMC GEL ODS-AM 120作为填料，利用高压制备液相进行式I化合物纯化分离。从式I化合物的结构式可以看出，式I化合物的极性很强亲水性好，在YMC GEL ODS-AM 120填料上的保留性很弱。因此式I化合物在以YMC GEL ODS-AM 120填料高压制备液相也得不到很好的纯化效果。利用CN91104847描述的纯化方法，得到的式I化合物纯度只有97.51％。
此外，发明人还尝试了多种本领域常用的纯化方法，包括离子交换树脂、大孔型吸附树脂，以及C18硅胶键合的反相制备色谱和球型硅胶的正相制备色谱对式I化合物进行层析纯化，都无法得到总纯度99.0％以上的式I化合物。
通过结晶和/或重结晶等纯化手段，本发明人可以将纯度97％左右的式I化合物提高到总纯度99.0％以上，(更佳的总纯度99.8％以上)单一杂质均小于0.25％。结晶纯化过程中收率高，非常适合工业化生产。
WO9611210，WO03018615和WO2004014879报道了有关米卡芬净的合成以及纯化工艺。其中WO9611210报道采用制备柱进行分离制备，但该方法需要大量的有机溶剂，对环境造成严重污染，不易放大生产；并且得到产物的纯度并不高。WO03018615，WO2004014879采用结晶的方法进行纯化，但结晶的结果不能有效去除杂质6、杂质7、杂质8、杂质9和杂质10。
因此，本发明人急切的希望在药物中间体阶段，利用特定的纯化手段，将药物中间体即式I化合物制备为高纯度中间体。然后经过化学修饰得到高纯度的式II化合物(FK463)，制备符合FDA要求的高纯度的米卡芬净。
发明内容
本发明的一个目的旨在提供一种高纯度的物质，如式I化合物。
本发明的另一个目的是提供所述高纯度的物质(式I化合物)的制备方法。
本发明的第三个目的是提供所述高纯度的物质(式I化合物)的用途。
本发明的第四个目的是提供另一种高纯度的物质(式II化合物)。
本发明的第五个目的是提供另一种高纯度的物质(式II化合物)的制备方法。
高纯度式I化合物
本发明提供了一种高纯度的式I化合物，纯度大于等于99.0％；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子；优选H、钠离子或二异丙基乙胺离子。
在本发明的一个优选例中，所述式I化合物纯度大于等于99.2％。
在本发明的一个优选例中，所述式I化合物纯度大于等于99.5％。
在本发明的另一优选例中，所述式I化合物纯度大于等于99.8％。
其中，所述式I化合物的纯度用HPLC测定。
其中，所述式I化合物纯度和/或杂质含量的计算方法为：在HPLC图中式I化合物和/或某个杂质的峰曲线下面积除以HPLC图的总曲线下面积。
其中，所述HPLC测定方法如下：
色谱柱：ACE 3AQ，150×4.6mm，3μm
流动相：A：1000ml水，10ml甲醇，100μl三氟乙酸
B：600ml水，400ml甲醇，100μl三氟乙酸
流速：0.55ml/min
柱温：50℃
梯度：
  时间   流动相A   流动相B
  分钟   ％   ％
  0   100   0
  25   100   0
  55   55   45
  56   0   100
  61   0   100
  62   100   0
  70   100   0
进样温度：5℃
检测波长：225nm
在本发明的另一优选例中，所述高纯度式I化合物中杂质A的含量小于等于0.25％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质A在HPLC上的相对保留时间(简称RRT)约为0.45，即0.45±0.02。
在本发明的另一优选例中，所述杂质A的含量小于等于0.10％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质A的含量小于等于0.05％。
在本发明的另一优选例中，所述高纯度式I化合物中杂质B的含量小于等于0.25％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质B在HPLC上的相对保留时间(简称RRT)约为0.65，即0.65±0.02。
在本发明的另一优选例中，所述杂质B的含量小于等于0.15％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质B的含量小于等于0.10％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质B的含量为0.03％-0.10％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质B的含量小于等于0.03％。
在本发明的另一优选例中，所述高纯度式I化合物中杂质C的含量小于等于0.25％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质C在HPLC上的相对保留时间(简称RRT)约为0.88，即0.88±0.02。
在本发明的另一优选例中，所述杂质C的含量小于等于0.15％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质C的含量小于等于0.10％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质C的含量为0.02％-0.10％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质C的含量小于等于0.02％。
在本发明的另一优选例中，所述高纯度式I化合物中杂质D的含量小于等于0.20％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质D在HPLC上的相对保留时间(简称RRT)约为1.08，即1.08±0.02。
在本发明的另一优选例中，所述杂质D的含量小于等于0.15％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质D的含量小于等于0.10％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质D的含量为0.04％-0.10％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质D的含量小于等于0.04％。
在本发明的另一优选例中，所述高纯度式I化合物中杂质E的含量小于等于0.15％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质E在HPLC上的相对保留时间(简称RRT)约为1.29，即1.29±0.02。
在本发明的另一优选例中，所述杂质E的含量小于等于0.10％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质E的含量小于等于0.05％。
在本发明的另一优选例中，所述高纯度式I化合物中杂质F的含量小于等于0.15％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质F在HPLC上的相对保留时间(简称RRT)约为1.92，即1.92±0.02。
在本发明的另一优选例中，所述杂质F的含量小于等于0.10％。
在本发明的另一优选例中，所述杂质F的含量小于等于0.05％。
在本发明的另一优选例中，其特征在于，所述高纯度式I化合物中其他相关杂质含量均小于等于0.10％，所述其他相关杂质指A-F以外可能存在的杂质。
在本发明的另一优选例中，所述其他相关杂质含量均小于等于0.05％。
在本发明的另一优选例中，所述其他相关杂质含量为0％。
高纯度式I化合物的制备
发明人经过研究惊奇的发现，式I化合物溶解在水或与水相互溶解的低级醇的混合溶液中，且含式I化合物的溶解液维持在饱和溶解度附近。这时控制溶解液的pH在规定的范围内，式I化合物形成形态优异的晶体。此结晶过程具有很好的纯化效果，由此制备出高纯度的式I化合物。此外由于式I化合物为环肽化合物，氨基酸在缩合时形成的肽键在高温溶液水解断裂。因此式I化合物在结晶的过程中应该控制一定的温度范围，以保证环肽物质不会开环降解。本制备方法在结晶溶剂的筛选方面做了大量细致的工作，其中在甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中或混合溶液中结晶，式I化合物形成形态优异的晶体，结晶过程具有不错的纯化效果。而在像丙酮、乙腈、乙酸乙酯等溶剂中结晶，式I化合物形成无定形沉淀，且上述沉淀过程达不到纯化去除杂质的效果。
本发明所述制备方法包括以下步骤：
(a)将如式I所示化合物粗品溶解在水或有机溶剂(i)的水性溶液中，控制溶解液pH；
(b)通过降温和/或添加有机溶剂(i)得到所述高纯度式I化合物。
其中，步骤(a)中所述溶解的温度为10至50℃，优选20至40℃。
其中，步骤(a)中所述有机溶剂(i)的水性溶液中，有机溶剂(i)与水的体积比0.01至100，优选0.1至10，更优选0.5-3.0。
其中，步骤(a)中所述溶解液的总体积计，其中含有如式I所示化合物10至500mg/ml，优选100至400mg/ml。
其中，步骤(a)中所述溶解液pH控制在2.0-5.0，优选3.5-4.5。
其中，步骤(b)中所述的降温的温度为-40至35℃，优选-10至35℃，更优选-5至30℃，最优的5至10℃。
其中，步骤(b)中所述有机溶剂(i)与步骤(a)所述溶解液的体积比为0.1至50，优选0.1至10，最优选为1至5。
其中，步骤(a)和/或(b)中所述的有机溶剂(i)为C1-C4的低级醇；优选自：甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或多种的混合物。
其中，步骤(b)得到的高纯度式I化合物为晶体。
其中，步骤(b)之后还可以进行以下步骤：
(c)离心或过滤；
(d)去除溶剂和大部分水(干燥)，得到高纯度式I化合物。
其中，步骤(a)-(b)可以重复一次或以上进行重结晶，优选1-4次。
在本发明的一个实施方式中，采用以下步骤来获得高纯度式I化合物：
(a)将如式I所示化合物溶解在水中，控制溶解液pH；
(b)降低溶解液温度得到式I化合物晶体；
(c)离心或过滤；
(d)干燥，得到高纯度式I化合物。
其中，步骤(a)中所述溶解的温度为10至50℃，优选20至40℃。
其中，步骤(a)中所述溶解液的总体积计，其中含有如式I所示化合物10至500mg/ml，优选100至400mg/ml。
其中，步骤(a)中所述溶解液pH控制在2.0-5.0，优选3.5-4.5。
其中，步骤(b)中所述的降温的温度为-10至35℃，优选-5至30℃，最优的5至10℃。
在本发明的另一个实施方式中，采用下述步骤来获得高纯度式I化合物：
(a)将如式I所示化合物溶解在水中，控制溶解液pH；
(b)加入有机溶剂(i)使得式I化合物晶体完全析出；
(c)离心或过滤；
(d)干燥晶体，得到高纯度式I化合物。
其中，步骤(a)中所述溶解的温度为10至50℃，优选20至40℃。
其中，步骤(a)中所述溶解液的总体积计，其中含有如式I所示化合物10至500mg/m1，优选50至300mg/ml。
其中，步骤(a)中所述溶解液pH控制在2.0-5.0，优选3.5-4.5。
其中，步骤(b)中所述的有机溶剂(i)为C1-C4的低级醇；优选自：甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或多种的混合物。
其中，步骤(b)中所述有机溶剂(i)与步骤(a)所述溶解液的体积比为0.1至50，优选0.1至10，最优选为1至5。
在本发明的另一个实施方式中，采用下述步骤来获得高纯度式I化合物：
(a)将如式I所示化合物溶解在水中，控制溶解液pH；
(b)降低溶液温度，同时加入有机溶剂(i)使得式I化合物晶体完全析出；
(c)离心或过滤；
(d)干燥晶体，得到高纯度式I化合物。
其中，步骤(a)中所述溶解的温度为10至50℃，优选20至40℃。
其中，步骤(a)中所述溶解液的总体积计，其中含有如式I所示化合物10至500mg/ml，优选50至300mg/ml。
其中，步骤(a)中所述溶解液pH控制在2.0-5.0，优选3.5-4.5。
其中，步骤(b)中所述的有机溶剂(i)为C1-C4的低级醇；优选自：甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或多种的混合物。
其中，步骤(b)中所述的降温的温度为-40至35℃，优选-10至35℃，更优选-5至30℃，最优的5至10℃。
其中，步骤(b)中所述有机溶剂(i)与步骤(a)所述溶解液的体积比为0.1至50，优选0.1至10，最优选为1至5。
在本发明的另一个实施方式中，采用下述步骤来获得高纯度式I化合物：
(a)将如式I所示化合物溶解在有机溶剂(i)的水性溶液中，控制溶解液pH；
(b)降低溶液温度使得式I化合物晶体完全析出；
(c)离心或过滤；
(d)干燥晶体，得到高纯度式I化合物。
其中，步骤(a)中所述溶解的温度为10至50℃，优选20至40℃。
其中，步骤(a)中所述有机溶剂(i)的水性溶液中，有机溶剂(i)与水的体积比0.01至100，优选0.1至10，更优选0.5-3.0。
其中，步骤(a)中所述溶解液的总体积计，其中含有如式I所示化合物10至500mg/ml，优选100至400mg/ml。
其中，步骤(a)中所述溶解液pH控制在2.0-5.0，优选3.5-4.5。
其中，步骤(a)中所述的有机溶剂(i)为C1-C4的低级醇；优选自：甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或多种的混合物。
其中，步骤(b)中所述的降温的温度为-40至35℃，优选-10至35℃，更优选-5至30℃，最优的5至10℃。
在本发明的另一个实施方式中，采用下述步骤来获得高纯度式I化合物：
(a)将如式I所示化合物溶解在有机溶剂(i)的水性溶液中，控制溶解液pH；
(b)加入有机溶剂(i)使得式I化合物晶体完全析出；
(c)离心或过滤；
(d)干燥晶体，得到高纯度式I化合物。
其中，步骤(a)中所述溶解的温度为10至50℃，优选20至40℃。
其中，步骤(a)中所述有机溶剂(i)的水性溶液中，有机溶剂(i)与水的体积比0.01至100，优选0.1至10，更优选0.5-3.0。
其中，步骤(a)中所述溶解液的总体积计，其中含有如式I所示化合物10至500mg/ml，优选100至400mg/ml。
其中，步骤(a)中所述溶解液pH控制在2.0-5.0，优选3.5-4.5。
其中，步骤(b)中所述有机溶剂(i)与步骤(a)所述溶解液的体积比为0.1至10，优选为1至5。
其中，步骤(a)和(b)中所述的有机溶剂(i)为C1-C4的低级醇；优选自：甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或多种的混合物。
在本发明的另一个实施方式中，采用下述步骤来获得高纯度式I化合物：
(a)将如式I所示化合物溶解在有机溶剂(i)的水性溶液中，控制溶解液pH；
(b)降低溶液温度，同时加入有机溶剂(i)使得式I化合物晶体完全析出；
(c)离心或过滤；
(d)干燥晶体，得到高纯度式I化合物。
其中，步骤(a)中所述溶解的温度为10至50℃，优选20至40℃。
其中，步骤(a)中所述有机溶剂(i)的水性溶液中，有机溶剂(i)与水的体积比0.01至100，优选0.1至10，更优选0.5-3.0。
其中，步骤(a)中所述溶解液的总体积计，其中含有如式I所示化合物10至500mg/ml，优选100至400mg/ml。
其中，步骤(a)中所述溶解液pH控制在2.0-5.0，优选3.5-4.5。
其中，步骤(b)中所述的降温的温度为-40至35℃，优选-10至35℃，更优选-5至30℃，最优的5至10℃。
其中，步骤(b)中所述有机溶剂(i)与步骤(a)所述溶解液的体积比为0.1至50，优选0.1至10，最优选为1至5。
其中，步骤(a)和(b)中所述的有机溶剂(i)为C1-C4的低级醇；优选自：甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或多种的混合物。
本发明提供的方法制备得到的式I化合物纯度高，因此用于制备式II化合物将更好。
高纯度式II化合物
本发明一方面提供了一种高纯度的式II化合物，其HPLC纯度大于等于98.8％，优选大于等于99.0％，更优选大于等于99.5％；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子；优选H、钠离子或二异丙基乙胺离子。
其中，所述式II化合物的纯度用HPLC测定。
其中，所述式II化合物纯度和/或杂质含量的计算方法为：在HPLC图中式II化合物和/或某个杂质的峰曲线下面积除以HPLC图的总曲线下面积。
所述式II化合物的液相纯度通过HPLC方法测定，HPLC方法如下：
HPLC分析柱：YMC-ODS 250*4.6mm，5μm
流动相：乙腈∶磷酸盐缓冲液＝70∶45
洗脱程序：等度
流速：1.15ml/min
柱温：35℃
检测波长：210nm
运行时间：45min
稀释液：水的磷酸盐缓冲液
在本发明的一个优选例中，所述高纯度的式II化合物中杂质6(结构如式IV所示)的含量小于0.2％，较佳为小于0.1％，更佳为小于0.05％；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子；优选H、钠离子或二异丙基乙胺离子。
IV杂质6
在本发明的另一优选例中，所述高纯度的式II化合物中杂质7(结构如式V所示)和杂质8(结构如式VI所示)的总含量小于0.5％，较佳为小于0.3％，更佳为小于0.1％；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子；优选H、钠离子或二异丙基乙胺离子。
V杂质7
VI杂质8
在本发明的另一优选例中，所述高纯度的式II化合物中杂质9(结构如式VII所示)的含量小于0.2％，较佳为小于0.1％；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子；优选H、钠离子或二异丙基乙胺离子。
VII杂质9
在本发明的另一优选例中，所述高纯度的式II化合物中杂质10(结构如式VIII所示)的含量小于0.2％，较佳为小于0.1％；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子；优选H、钠离子或二异丙基乙胺离子。
VIII杂质10
在本发明的另一优选例中，所述高纯度的式II化合物中杂质11的含量小于等于0.15％，较佳为小于等于0.1％，最佳为小于等于0.05％，所述杂质11在HPLC上的相对保留时间(简称RRT)约为0.96，即0.96±0.02。
在本发明的另一优选例中，所述高纯度的式II化合物中其他相关杂质的含量均小于等于0.02％，较佳为小于等于0.01％，最佳为0％；所述其他相关杂质指杂质6-11以外可能存在的杂质。
高纯度式II化合物的制备方法
一种制备高纯度式II化合物的方法，其特征在于，使用如权利要求1-11任一所述的高纯度环肽化合物作为原料，制备如式II所示的化合物，R表示H、二异丙基乙胺或者其他能形成药学上可接受的盐的阳离子。
合成路线在多个专利如W09611210，9857923，2604014879等中均有报道。
高纯度式I化合物的用途及其组合物
在本发明中，提供高纯度式I化合物的用途。一方面可以用于方便地制备高纯度的式II化合物，R表示H、二异丙基乙胺或者其他能形成药学上可接受的盐的阳离子。
另一方面，本发明提供的高纯度式I化合物也可以直接用于制备治疗真菌感染的药物。可以提供一种含有高纯度式I化合物，和药学上可接受的载体的药物组合物。
高纯度式II化合物的用途及其组合物
在本发明中，提供高纯度式II化合物的用途。本发明提供的高纯度式II化合物也可以直接用于制备治疗真菌感染的药物。可以提供一种含有高纯度式II化合物，和药学上可接受的载体的药物组合物。
在本发明中，提供含有高纯度式II化合物的药物组合物的制备方法：
将本发明的高纯度式II化合物和药学上可接受的载体混合，得到含有高纯度式II化合物的药物组合物。
如本文所用，“如式I所示化合物”或“式I化合物”可以互换使用，都是指具有以下结构式的化合物或其药学上可接受的盐：
其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子，优选H、钠离子或二异丙基乙胺离子。
药学上可接受的盐优选：包括金属盐例如碱金属盐(如钠盐、钾盐)、碱土金属盐(如钙盐、镁盐等)、铵盐、与有机碱形成的盐(如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己铵盐、N，N’-二苄基乙二胺盐、二异丙基乙胺盐等)等、有机酸加成盐(如甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐等)、无机酸加成盐(如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、磷酸盐等)、与氨基酸(如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等)形成的盐等。
如本文所用，“如式II所示化合物”或“式II化合物”可以互换使用，都是指具有以下结构式的化合物或其药学上可接受的盐：
其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子，优选H、钠离子或二异丙基乙胺离子。
药学上可接受的盐优选：包括金属盐例如碱金属盐(如钠盐、钾盐)、碱土金属盐(如钙盐、镁盐等)、铵盐、与有机碱形成的盐(如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己铵盐、N，N’-二苄基乙二胺盐、二异丙基乙胺盐等)等、有机酸加成盐(如甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐等)、无机酸加成盐(如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、磷酸盐等)、与氨基酸(如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等)形成的盐等。
如本文所用，“如式I所示化合物的纯度”、“化合物I的纯度”或“化合物I的HPLC纯度”可以互换使用，都是指在本发明提供的高效液相色谱(HPLC)检测条件下，测得的化合物I的峰面积和所有峰的峰面积之和的百分比。
如本文所用，“如式II所示化合物的纯度”、“化合物II的纯度”或“化合物II的HPLC纯度”可以互换使用，都是指在本发明提供的高效液相色谱(HPLC)检测条件下，测得的化合物II的峰面积和所有峰的峰面积之和的百分比。
如本文所用，“如式I所示化合物的粗品”或“化合物I的粗品”可以互换使用，都是指在本发明提供的高效液相色谱(HPLC)检测条件下，化合物I的含量＜98％的混合物。可以使用本领域现有的方法得到化合物I的粗品。例如但不限于，以微生物发酵产物式III化合物为起始原料。通过脱酰基酶去酰基化生成一种半合成衍生物(例如，式I化合物)，再经过分离纯化，得到化合物I的粗品。参见US5376634，EP0431350及CN1161462C描述的制备化合物I粗品的方法；也可以通过商业渠道获得，例如但不限于，如日本藤泽公司。
本文所用的术语“相对保留时间(RRT)”是指在一定HPLC条件下某峰相对于主峰的保留时间之比，例如，在一定HPLC条件下，主峰的保留时间是1分钟，而另一峰的保留时间是2分钟，则后者的相对保留时间(RRT)是2。
本文所用的术语“相对保留时间(RRT)”可以在规定的范围内波动。众所周知，高效液相由于系统适应性问题，可能存在一定的系统偏差，导致相对保留时间(RRT)发生偏移。一般规定可以接受的范围在±0.02。例如国家食品药品监督管理局进口药品注册标准，对注射用米卡芬净钠及相关杂质的相对保留时间(RRT)所规定的范围。
如本文所用，“C1-C4的低级醇”是指碳原子数量在1-4个的醇类物质。
如本文所用，“药学上可接受的盐”优选：包括金属盐例如碱金属盐(如钠盐、钾盐)、碱土金属盐(如钙盐、镁盐等)、铵盐、与有机碱形成的盐(如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己铵盐、N，N′-二苄基乙二胺盐、二异丙基乙胺盐等)等、有机酸加成盐(如甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐等)、无机酸加成盐(如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、磷酸盐等)、与氨基酸(如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等)形成的盐等。
如本文所用，术语“药学上可接受的载体”指用于治疗剂给药的载体，包括各种赋形剂和稀释剂。该术语指这样一些药剂载体：它们本身并不是必要的活性成分，且施用后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。在Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.，N.J.1991)中可找到关于药学上可接受的赋形剂的充分讨论。在组合物中药学上可接受的载体可包括液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如崩解剂、润湿剂、乳化剂、pH缓冲物质等。
本发明的主要优点在于：
1.本发明极大地提高了式I化合物的纯度，极大地减少了其中的杂质，获得了非常高纯度的式I化合物，解决了现有技术中迄待解决的技术问题。
2.本发明通过对制备条件的反复多次实验，选择了特定的制备条件，产生了预想不到的技术效果，提供了制备高纯度式I化合物的方法，且所述方法非常适合规模化生产，收率高。
3.本发明提供了一种制备高纯度式II化合物的新方法，利用高纯度的前体式I化合物制备式II化合物，极大程度地减轻了式II化合物纯化步骤的工艺压力，利用简便的纯化工艺得到高纯度的最终药物产品——式II化合物，同时收率也获得了大幅度地提高，产生了预料不到的技术效果。
附图说明
图1所示为式I化合物粗品的HPLC分析图谱；其中
  名称   保留时间(分钟)   相对保留时间   峰面积   峰面积％
  1   杂质A   4.954   0.45   29154   0.42
  2   其他杂质   6.381   0.58   5553   0.08
  3   杂质B   7.162   0.65   34014   0.49
  4   其他杂质   8.413   0.76   3470   0.05
  5   杂质C   9.783   0.88   46509   0.67
  6   化合物I   11.057   1.00   6768798   97.51
  7   杂质D   11.929   1.08   19436   0.28
  8   杂质E   14.305   1.29   20824   0.30
  9   杂质F   21.285   1.92   13883   0.20
图2所示为实施例5获得的高纯度式I化合物的HPLC分析图谱；其中
  名称   保留时间(分钟)   相对保留时间   峰面积   峰面积％
  1   杂质B   7.173   0.65   2828   0.03
  2   杂质C   9.659   0.88   7540   0.08
  3   化合物I   11.074   1.00   9406415   99.81
  4   杂质D   11.946   1.08   4716   0.05
  5   杂质E   14.304   1.29   2826   0.03
图3所示为实施例17获得的高纯度式II化合物的HPLC分析图谱；其中
  保留时间(分钟)   相对保留时间   峰面积   峰面积％
  1   8.518   0.44   8752   0.03
  2   10.519   0.54   14586   0.05
  3   11.145   0.57   11669   0.04
  4   11.990   0.62   14597   0.05
  5   17.980   0.92   49594   0.17
  6   18.709   0.96   23338   0.08
  7   19.425   1.00   28925210   99.15
  8   22.089   1.13   61263   0.21
  9   24.550   1.26   37925   0.13
  10   26.333   1.35   14593   0.05
  11   31.764   1.63   11637   0.04
图4所示为比较例3获得的式I I化合物的HPLC分析图谱；其中
  保留时间(分钟)   相对保留时间   峰面积   峰面积％
  1   8.028   0.44   30180   0.21
  2   9.953   0.54   25868   0.18
  3   10.980   0.61   5748   0.04
  4   11.828   0.64   4311   0.03
  5   13.517   0.73   10060   0.07
  6   16.956   0.92   41677   0.29
  7   17.645   0.95   37365   0.26
  8   18.380   1.00   13760629   95.75
  9   20.021   1.09   116408   0.81
  10   20.671   1.13   205511   1.43
  11   21.501   1.17   24431   0.17
  12   23.535   1.27   40239   0.28
  13   25.579   1.39   54611   0.38
  14   27.442   1.49   8622   0.06
  15   32.768   1.78   5748   0.04
图5所示为实施例22获得的高纯度式II化合物的HPLC分析图谱；其中
图6所示为比较例8中市售米卡芬净钠制剂的HPLC分析图谱；其中
  保留时间   相对保留时间   峰面积   峰面积比值(％)   峰高
  1   13.298   0.72   152314   0.34   7118
  2   15.690   0.84   47990   0.11   2493
  3   16.759   0.90   318200   0.71   14054
  4   17.682   0.95   80605   0.18   3880
  5   18.578   1.0   43831048   98.01   1881149
  6   20.248   1.09   125658   0.28   4405
  7   20.688   1.11   94283   0.21   3923
  8   24.520   1.32   28024   0.06   1075
  9   26.834   1.44   32031   0.07   1080
  10   31.425   1.69   10991   0.02   331
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。
本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是指在100毫升的溶液中溶质的重量。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
所述式I化合物的液相纯度通过HPLC方法测定，HPLC方法如下：
色谱柱：ACE 3AQ，150×4.6mm，3μm
流动相：A：1000ml水，10ml甲醇，100μl三氟乙酸
B：600ml水，400ml甲醇，100μl三氟乙酸
流速：0.55ml/min
柱温：50℃
梯度：
  时间   流动相A   流动相B
  分钟   ％   ％
  0   100   0
  25   100   0
  55   55   45
  56   0   100
  61   0   100
  62   100   0
  70   100   0
进样温度：5℃
检测波长：225nm
所述式II化合物的液相纯度通过HPLC方法测定，HPLC方法如下：
HPLC分析柱：YMC-ODS 250*4.6mm，5μm
流动相：乙腈∶磷酸盐缓冲液＝70∶45
洗脱程序：等度
流速：1.15ml/min
柱温：35℃
检测波长：210nm
运行时间：45min
稀释液：水的磷酸盐缓冲液
其中，式II化合物及其相关杂质相对保留时间
  名称   相对保留时间
  杂质6   0.71-0.74
  杂质7   0.90-0.93
  杂质8   0.90-0.93
  式II化合物   1.00
  杂质9   1.08-1.10
  杂质10   1.11-1.13
  杂质11   0.94-0.98
实施例1
制备化合物I粗品
参照美国专利5376634实施例1的方法，制备制得化合物I的固体粉末76g，HPLC测定含量97.51％，参见图1的HPLC分析图谱。
表1
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.42   0.49   0.67   0.28   0.30   0.20
实施例2
制备高纯度式I化合物
30℃下，将3.6g由实施例1制得的化合物I粗品，溶于25ml水和20ml正丙醇的混合溶液中，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至3.5，将溶液冷却至15℃，化合物I的晶体析出，在15℃继续搅拌5小时，使得化合物I的晶体逐渐长大。滴加正丙醇90ml，滴加完毕后，在15℃下搅拌1小时。抽滤，真空干燥，得到化合物I 3.5g，用HPLC测定纯度为99.00％。其中主要相关杂质含量，见表2。
表2
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.16   0.22   0.20   0.19   0.13   0.04
实施例3
制备高纯度式I化合物
40℃下，将3.5g由实施例2制得的化合物I(实施例2制备的化合物I，HPLC纯度为99.00％)，溶于19ml水和16ml正丙醇的混合溶液中，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至2.0，将溶液冷却至15℃，化合物I的晶体析出，在15℃继续搅拌5小时，使得化合物I的晶体逐渐长大。滴加正丙醇70ml，滴加完毕后，在15℃下搅拌1小时。抽滤，真空干燥，得到化合物I 3.4g，用HPLC测定纯度为99.23％。其中相关杂质含量，见表3。
表3
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.12   0.19   0.17   0.16   0.10   0.03
实施例4
制备高纯度式I化合物
40℃下，用8ml水和7ml正丙醇的混合溶液，冰乙酸调pH至5.0，继续溶解化合物I(实施例3制备的化合物I，HPLC纯度为99.23％)，搅拌，使化合物I完全溶解。将溶液冷却至15℃，化合物I的晶体析出。在15℃继续搅拌5小时，使得化合物I的晶体逐渐长大。滴加正丙醇30ml，滴加完毕后，在15℃下搅拌1小时。抽滤，真空干燥，得到化合物I 3.3g。用HPLC测定纯度为99.57％。其中相关杂质含量，见表4。
表4
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.06   0.13   0.06   0.10   0.05   0.03
实施例5
制备高纯度式I化合物
40℃下，用8ml水和7ml正丙醇的混合溶液，冰乙酸调pH至4.0，继续溶解化合物I(实施例4制备的化合物I，HPLC纯度为99.57％)，搅拌，使化合物I完全溶解。将溶液冷却至15℃，化合物I的晶体析出。在15℃继续搅拌5小时，使得化合物I的晶体逐渐长大。滴加正丙醇30ml，滴加完毕后，在15℃下搅拌1小时。抽滤，真空干燥，得到化合物I 3.2g。用HPLC测定纯度为99.81％。其中相关杂质含量，见表5以及图2的HPLC分析图谱。
表5
  杂质名称  杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间  0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％  0   0.03   0.08   0.05   0.03   0
实施例6
制备高纯度式I化合物
30℃下，将2.6g由实施例1制得的化合物I，溶于8ml水，冰乙酸调pH至3.8，搅拌，使化合物I完全溶解。缓慢滴加正丙醇10ml，化合物I的晶体析出，15℃下继续搅拌2小时。然后缓慢滴加正丙醇醇35ml，滴加完毕后，将含有化合物I的溶解液慢慢降温15℃，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，得到式I化合物湿固体。在30℃下，再用8ml水，冰乙酸调pH至3.8，继续溶解化合物I湿的固体，搅拌，使化合物I完全溶解。将溶液冷却至15℃，缓慢滴加正丙醇10ml，化合物I的晶体析出。15℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加正丙醇35ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，得到式I化合物湿固体。重复上述重结晶步骤，经过三次重结晶后。抽滤，将得到的化合物I，进行真空干燥，得到2.4g化合物I。总收率为92.3％，化合物I经过HPLC检测纯度为99.81％。
实施例7
制备高纯度式I化合物
30℃下，将1.6g由实施例1制得的化合物I，溶于80ml水和80ml乙醇的混合溶液中，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至2.8，然后慢慢降温至-20℃，-20℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加乙醇450ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，真空干燥，得到化合物I 1.5g，用HPLC测定纯度为98.89％。其中相关杂质含量，见表6。
表6
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.24   0.23   0.21   0.19   0.14   0.10
实施例8
制备高纯度式I化合物
30℃下，将1.5g由实施例7制得的化合物I，溶于80ml水和80ml乙醇的混合溶液中，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至3.0，然后慢慢降温至-20℃，-20℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加乙醇450ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，真空干燥，得到化合物I 1.4g，用HPLC测定纯度为99.36％。其中相关杂质含量，见表7。
表7
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.16   0.12   0.12   0.13   0.06   0.05
实施例9
制备高纯度式I化合物
30℃下，将1.4g由实施例8制得的化合物I，溶于80ml水和80ml乙醇的混合溶液中，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至3.0，然后慢慢降温至-20℃，-20℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加乙醇450ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，真空干燥，得到化合物I 1.3g，用HPLC测定纯度为99.68％。其中相关杂质含量，见表8。
表8
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.10   0.04   0.10   0.04   0.02   0.02
实施例10
制备高纯度式I化合物
10℃下，将1.8g由实施例1制得的化合物I，溶于10ml水中，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至3.5，将溶液冷却至2℃，2℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加异丙醇40ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，真空干燥，得到1.5g化合物I，经过HPLC检测纯度为98.89％，其中相关杂质含量，见表9。
表9
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.20   0.24   0.23   0.15   0.14   0.15
实施例11
制备高纯度式I化合物
10℃下，将1.5g由实施例10制得的化合物I，溶于10ml水中，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至3.5，将溶液冷却至2℃，2℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加异丙醇40ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，真空干燥，得到1.4g化合物I，经过HPLC检测纯度为99.41％，其中相关杂质含量，见表10。
表10
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.09   0.15   0.14   0.09   0.06   0.06
实施例12
制备高纯度式I化合物
10℃下，将1.4g由实施例11制得的化合物I，溶于10ml水中，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至3.5，将溶液冷却至2℃，2℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加异丙醇40ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，真空干燥，得到1.3g化合物I，经过HPLC检测纯度为99.73％，其中相关杂质含量，见表11。
表11
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.03   0.07   0.06   0.07   0.02   0.02
实施例13
制备高纯度式I化合物
10℃下，将1.3g由实施例12制得的化合物I，溶于10ml水中，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至3.5，将溶液冷却至2℃，2℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加异丙醇40ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，真空干燥，得到1.2g化合物I，经过HPLC检测纯度为99.90％，其中相关杂质含量，见表12。
表12
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.0   0.04   0.02   0.04   0.0   0.0
实施例14
制备高纯度式I化合物
20℃下，将2.0g由实施例1制得的化合物I，溶于5ml水和15ml甲醇的混合溶液中，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至4.5，将溶液冷却至10℃，化合物I的晶体析出，然后慢慢降温至-40℃，-40℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加甲醇80ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，得到式I化合物湿固体。在20℃下，用5ml水和16ml甲醇的混合溶液，冰乙酸调pH至4.5，继续溶解化合物I湿的固体，搅拌30分钟，使化合物I完全溶解。将溶液冷却至10℃，化合物I的晶体析出，然后慢慢降温至-40℃，在-40℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加甲醇80ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物晶体完全析出。抽滤，得到式I化合物湿固体。重复上述重结晶步骤，经过三次重结晶后。抽滤，将得到的化合物I，进行真空干燥，得到1.5g化合物I固体。总收率为89.0％，化合物I经过HPLC检测纯度为99.83％，其中相关杂质含量，见表13。
表13
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.01   0.03   0.02   0.10   0.01   0
实施例15
制备高纯度式I化合物
50℃下，将5.0g由实施例1制得的化合物I，溶于10ml水，搅拌，使化合物I完全溶解。冰乙酸调pH至5.0，将溶液冷却至30℃，化合物I的晶体析出，再慢慢降温至2℃，2℃下继续搅拌10小时。抽滤，得到式I化合物湿固体。50℃下，在50℃下，用9ml水，冰乙酸调pH至5.0，继续溶解化合物I湿的固体，搅拌30分钟，使化合物I完全溶解。溶液冷却至30℃，化合物I的晶体析出，再慢慢降温至2℃，2℃下继续搅拌10小时。抽滤，得到式I化合物湿固体。重复上述重结晶步骤，经过三次重结晶后。抽滤，将得到的化合物I，进行真空干燥，得到3.0g化合物I固体。总收率为85.0％，化合物I经过HPLC检测纯度为99.85％，其中相关杂质含量，见表14。
表14
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.02   0.05   0.01   0.01   0.02   0.04
比较例1
pH对制备高纯度式I化合物的影响
40℃下，将1.8g由实施例1制得的化合物I，溶于8ml水和6ml异丙醇的混合溶液中，搅拌，使化合物I完全溶解。调pH至6.5，将溶液冷却至20℃，化合物I的固体析出，20℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加异丙醇35ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物固体完全析出。抽滤，得到式I化合物湿固体。在40℃下，用8ml水和6ml异丙醇的混合溶液，调pH至6.5，继续溶解化合物I湿的固体，搅拌，使化合物I完全溶解。将溶液冷却至20℃，化合物I的析出固体，20℃下继续搅拌2小时。缓慢滴加异丙醇35ml，滴加完毕后，再搅拌2小时，使得式I化合物固体完全析出。抽滤，得到式I化合物湿固体。重复上述“重结晶”步骤，经过四次“重结晶”后。抽滤，将得到的化合物I，进行真空干燥，得到1.5g化合物I。总收率为83.6％，化合物I经过HPLC检测纯度为98.90％，其中相关杂质含量，见表15。
表15
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.07   0.27   0.03   0.23   0.30   0.20
比较例2
不同溶剂对制备高纯度式I化合物的影响
30℃下，将2.4g由实施例1制得的化合物I，溶于7ml水，冰乙酸调pH至3.8，搅拌，使化合物I完全溶解。慢慢加入乙腈15ml搅拌两小时有固体析出，显微镜下观察固定的微观结构，几乎是无规则固体。抽滤，将得到的化合物I，进行真空干燥。HPLC分析化合物I固体纯度为97.57％，其中相关主要杂质含量，见表16，几乎无变化。
表16
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.42   0.48   0.64   0.26   0.40   0.23
18℃下，将2.1g由实施例1制得的化合物I，溶于7ml水，冰乙酸调pH至3.8，搅拌，使化合物I完全溶解。慢慢加入丙酮20ml搅拌两小时有固体析出，显微镜下观察固定的微观结构，几乎是无规则固体。抽滤，将得到的化合物I，进行真空干燥。HPLC分析化合物I固体纯度为97.79％，其中相关主要杂质含量，见表17，几乎无变化。
表17
  杂质名称   杂质A   杂质B   杂质C   杂质D   杂质E   杂质F
  相对保留时间   0.45   0.65   0.88   1.08   1.29   1.92
  含量％   0.40   0.41   0.60   0.30   0.31   0.19
实施例16
用高纯度式I化合物制备高纯度式II化合物
参照WO2004014879中的米卡芬净合成工艺，由式I化合物进行式II化合物的合成
将本申请实施例2所得到的式I化合物(HPLC检测纯度为99.00％(1.00g，1.07mmol))溶解于DMF12ml，冰浴冷却至0℃以下，加入二异丙基乙胺(0.22g，1.67mmol)，保持温度在0℃，缓慢加入MKC-8(1-[4-[5-(4-戊氧基苯基)异噁唑-3-基]苯甲酰氧基]-1H-1，2，3-苯并三氮唑)(0.53g，1.14mmol)，反应升温至2-6℃，反应4小时，反应结束后直接将60ml乙酸乙酯加入反应液中，继续搅拌1小时，过滤，得米卡芬净二异丙基乙胺盐。将该盐溶于丙酮30ml和乙酸乙酯30ml，浆洗，过滤。真空干燥米卡芬净二异丙基乙胺盐去除残留的有机溶剂，HPLC分析米卡芬净二异丙基乙胺盐纯度为98.81％，收率90.6％。HPLC分析图谱上5分钟以前的色谱峰为溶剂峰和反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，在WO2004014879介绍的纯化工艺中很容易去除。其中相关主要杂质含量，见表18。
表18
实施例17
用高纯度式I化合物制备高纯度式II化合物
参照WO2004014879中的米卡芬净合成工艺，由式I化合物进行式II化合物的合成
将本申请实施例3所得到的式I化合物(HPLC检测纯度为99.23％(1.00g，1.07mmol))溶解于DMF12ml，冰浴冷却至0℃以下，加入二异丙基乙胺(0.22g，1.67mmol)，保持温度在0℃，缓慢加入MKC-8(1-[4-[5-(4-戊氧基苯基)异噁唑-3-基]苯甲酰氧基]-1H-1，2，3-苯并三氮唑)(0.53g，1.14mmol)，反应升温至2-6℃，反应4小时，反应结束后直接将60ml乙酸乙酯加入反应液中，继续搅拌1小时，过滤，得米卡芬净二异丙基乙胺盐。将该盐溶于丙酮30ml和乙酸乙酯30ml，浆洗，过滤。真空干燥米卡芬净二异丙基乙胺盐去除残留的有机溶剂，HPLC分析米卡芬净二异丙基乙胺盐纯度为99.15％，收率91.6％。参见图3的HPLC分析图谱，其中HPLC分析图谱上5分钟以前的色谱峰为溶剂峰和反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，在WO2004014879介绍的纯化工艺中很容易去除。其中相关主要杂质含量，见表19。
表19
参考例1
式II化合物粗品中杂质6-10的制备
用实施例1中获得的化合物I的粗品作为原料，参照WO2004014879实施例中的米卡芬净合成和纯化工艺，制备得到米卡芬净的钠盐约23g。
将米卡芬净的钠盐约5g，溶解于50ml纯水，分10批进样，通过制备柱(Prep7.8*300mm)进行制备，乙腈∶水＝70∶45进行洗脱，分别收集相对保留时间为0.71-0.74、0.90-0.93、1.08-1.10、1.11-1.13的流出液，分别进行浓缩，干燥，经MS和1H-NMR分析，上述相对保留时间对应的杂质分别为杂质6、杂质7和8的混合物、杂质9以及杂质10。结构式分别如式IV，式V，式VI，式VII和式VIII所示。
制备条件为：
HPLC制备柱：Prep7.8*300mm
流动相：乙腈∶水＝70∶45
洗脱程序：等度
流速：4ml/min
柱温：35℃
运行时间：40min
稀释液：纯水
实施例18
用高纯度式I化合物制备高纯度式II化合物且单一杂质均小于0.1％
参照WO2004014879中的米卡芬净合成工艺，由式I化合物进行式II化合物的合成
将本申请实施例4所得到的式I化合物(HPLC检测纯度为99.57％(1.00g，1.07mmol))，溶解于DMF12ml，冰浴冷却至0℃以下，加入二异丙基乙胺(0.22g，1.67mmol)，保持温度在0℃，缓慢加入MKC-8(1-[4-[5-(4-戊氧基苯基)异噁唑-3-基]苯甲酰氧基]-1H-1，2，3-苯并三氮唑)(0.53g，1.14mmol)，反应升温至2-6℃，反应4小时，反应结束后直接将60ml乙酸乙酯加入反应液中，继续搅拌1小时，过滤，得米卡芬净二异丙基乙胺盐。将该盐溶于丙酮30ml和乙酸乙酯30ml，浆洗，过滤。真空干燥米卡芬净二异丙基乙胺盐去除残留的有机溶剂，HPLC分析米卡芬净二异丙基乙胺盐纯度为99.49％，收率95.1％。其中相关主要杂质含量，见表20。
表20
实施例19
用高纯度式I化合物制备高纯度式II化合物且单一杂质均小于0.1％
参照WO2004014879中的米卡芬净合成工艺，由式I化合物进行式II化合物的合成
将本申请实施例5所得到的式I化合物(HPLC检测纯度为99.81％(1.00g，1.07mmol))溶解于DMF12ml，冰浴冷却至0℃以下，加入二异丙基乙胺(0.22g，1.67mmol)，保持温度在0℃，缓慢加入MKC-8(1-[4-[5-(4-戊氧基苯基)异噁唑-3-基]苯甲酰氧基]-1H-1，2，3-苯并三氮唑)(0.53g，1.14mmol)，反应升温至2-6℃，反应4小时，反应结束后直接将60ml乙酸乙酯加入反应液中，继续搅拌1小时，过滤，得米卡芬净二异丙基乙胺盐。将该盐溶于丙酮30ml和乙酸乙酯30ml，浆洗，过滤。真空干燥米卡芬净二异丙基乙胺盐去除残留的有机溶剂，HPLC分析米卡芬净二异丙基乙胺盐纯度为99.80％，收率97.5％。其中相关主要杂质含量，见表21。
表21
比较例3
用式I化合物粗品制备式II化合物
参照WO2004014879中的米卡芬净合成工艺，由式I化合物进行式II化合物的合成
将本申请实施例1所得到的式I化合物(HPLC检测纯度为97.51％(10.7mmol))溶解于DMF12ml，冰浴冷却至0℃以下，加入二异丙基乙胺(2.2g，16.7mmol)，保持温度在0℃，缓慢加入MKC-8(1-[4-[5-(4-戊氧基苯基)异噁唑-3-基]苯甲酰氧基]-1H-1，2，3-苯并三氮唑)(5.3g，11.4mmol)，反应升温至2-6℃，反应4小时，反应结束后直接将600ml乙酸乙酯加入反应液中，继续搅拌1小时，过滤，得米卡芬净二异丙基乙胺盐。将该盐溶于丙酮300ml和乙酸乙酯300ml，浆洗，过滤。真空干燥米卡芬净二异丙基乙胺盐去除残留的有机溶剂，HPLC分析米卡芬净二异丙基乙胺盐纯度为95.75％，摩尔收率75.2％。参见图4的HPLC分析图谱，其中HPLC分析图谱上5分钟以前的色谱峰为溶剂峰和反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，在WO2004014879介绍的纯化工艺中很容易去除。其中相关主要杂质含量，见表22。
表22
实施例20
用高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐制备高纯度米卡芬净钠
参照WO2004014879中的实施例6制备工艺，由米卡芬净二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠盐。
将本申请实施例16制备的米卡芬净二异丙基乙胺盐固体(0.97mmol)，全部溶解在15ml，75％的甲醇水溶液中。将含有米卡芬净二异丙基乙胺盐的溶解液，上样于30ml UBK510L离子交换树脂上，用75％的甲醇水溶液洗脱，洗脱至米卡芬净钠低于1.0g/L停止收集。用0.1mol/L的氢氧化钠控制收集液的pH至6.0。纯化水稀释收集液至甲醇浓度为35％，上样，用预先处理的50mlHP20ss大孔吸附树脂进行吸附。先用35％的甲醇水溶液洗涤100ml，然后用80％的甲醇水溶液洗脱，80％的甲醇水溶液用量200ml。洗脱收集，米卡芬净钠大于0.5g/L开始收集，洗脱至末尾小于0.5g/l停止收集，收集符合浓度规定的含有米卡芬净钠的组分，HPLC定量分析米卡芬净钠(0.90mmol)，收率93％。避光，直接减压蒸馏含有米卡芬净钠的组分合并液，得到固体，真空干燥，HPLC分析米卡芬净钠纯度99.00％。其中反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，被完全的去除。相关主要杂质含量，见表23。
表23
比较例4
用比较例3制备的二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠
参照WO2004014879中的实施例6制备工艺，由米卡芬净二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠盐。
将本申请比较例3制备的米卡芬净二异丙基乙胺盐固体(0.97mmol)，全部溶解在15ml，75％的甲醇水溶液中。将含有米卡芬净二异丙基乙胺盐的溶解液，上样于30ml UBK510L离子交换树脂上，用75％的甲醇水溶液洗脱，洗脱至米卡芬净钠低于1.0g/L停止收集。用0.1mol/L的氢氧化钠控制收集液的pH至6.0。纯化水稀释收集液至甲醇浓度为35％，上样，用预先处理的50mlHP20ss大孔吸附树脂进行吸附。先用35％的甲醇水溶液洗涤100ml，然后用80％的甲醇水溶液洗脱，80％的甲醇水溶液用量200ml。洗脱收集，米卡芬净钠大于0.5g/L开始收集，洗脱至末尾小于0.5g/l停止收集，收集符合浓度规定的含有米卡芬净钠的组分，HPLC定量分析米卡芬净钠(0.88mmol)，收率91％。避光，直接减压蒸馏含有米卡芬净钠的组分合并液，得到固体，真空干燥，HPLC分析米卡芬净钠纯度只有96.17％。其中反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，被完全的去除。相关主要杂质含量，见表24。
表24
从实施例20和比较例4可以明显的得出，利用高纯度式I化合物(纯度99.0％)制备的高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐，经过简单的纯化步骤，即可得到纯度在98.99％的米卡芬净钠。利用美国专利5376634实施例1制备的式I化合物(纯度97.51％)，制备的高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐，经过相同的纯化步骤得到的米卡芬净钠纯度只有96.17％。高纯度式I化合物制备米卡芬净钠在纯度上具有显著的优势。
实施例21
用高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐制备高纯度米卡芬净钠
参照WO2004014879中的实施例6制备工艺，由米卡芬净二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠盐。
将本申请实施例17制备的米卡芬净二异丙基乙胺盐固体(0.98mmol)，全部溶解在15ml水溶液中。将含有米卡芬净二异丙基乙胺盐的溶解液，上样于30ml UBK510L离子交换树脂上，用纯化水溶液洗脱，洗脱至米卡芬净钠低于1.0g/L停止收集。用0.1mol/L的氢氧化钠控制收集液的pH至6.0。上样，用预先处理的40ml SP-207ss大孔吸附树脂进行吸附。先用35％的乙醇水溶液洗涤120ml，然后用80％的乙醇水溶液洗脱，80％的乙醇水溶液用量150ml。洗脱收集，米卡芬净钠大于0.5g/L开始收集，洗脱至末尾小于0.5g/l停止收集，收集符合浓度规定的含有米卡芬净钠的组分，HPLC定量分析米卡芬净钠(0.92mmol)，收率93.9％。避光，直接减压蒸馏含有米卡芬净钠的组分合并液，得到固体，真空干燥，HPLC分析米卡芬净钠纯度99.40％。其中反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，被完全的去除。相关主要杂质含量，见表25。
表25
比较例5
用比较例3制备的二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠
参照WO2004014879中的实施例6制备工艺，由米卡芬净二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠盐。
将本申请比较例3制备的米卡芬净二异丙基乙胺盐固体(0.98mmol)，全部溶解在15ml水溶液中。将含有米卡芬净二异丙基乙胺盐的溶解液，上样于30mlUBK510L离子交换树脂上，用纯化水溶液洗脱，洗脱至米卡芬净钠低于1.0g/L停止收集。用0.1mol/L的氢氧化钠控制收集液的pH至6.0。上样，用预先处理的40ml SP-207ss大孔吸附树脂进行吸附。先用35％的乙醇水溶液洗涤120ml，然后用80％的乙醇水溶液洗脱，80％的乙醇水溶液用量150ml。洗脱收集，米卡芬净钠大于0.5g/L开始收集，洗脱至末尾小于0.5g/l停止收集，收集符合浓度规定的含有米卡芬净钠的组分，HPLC定量分析米卡芬净钠(0.84mmol)，收率86.1％。避光，直接减压蒸馏含有米卡芬净钠的组分合并液，得到固体，真空干燥，HPLC分析米卡芬净钠纯度只有96.16％。其中反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，被完全的去除。相关主要杂质含量，见表26。
表26
从实施例21和比较例5可以明显的得出，利用高纯度式I化合物(纯度99.23％)制备的高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐，经过简单的纯化步骤，即可得到纯度在99.40％的米卡芬净钠。利用美国专利5376634实施例1制备的式I化合物(纯度97.51％)，制备的高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐，经过相同的纯化步骤得到的米卡芬净钠纯度只有96.16％。高纯度式I化合物制备米卡芬净钠在纯度上具有显著的优势。
实施例22
用高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐制备单一杂质均小于0.1％的米卡芬净钠
参照WO2004014879中的实施例6制备工艺，由米卡芬净二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠盐。
将本申请实施例18制备的米卡芬净二异丙基乙胺盐固体(1.01mmol)，全部溶解在15ml水溶液中。将含有米卡芬净二异丙基乙胺盐的溶解液，上样于30ml UBK510L离子交换树脂上，用纯化水溶液洗脱，洗脱至米卡芬净钠低于1.0g/L停止收集。用0.1mol/L的氢氧化钠控制收集液的pH至6.0。上样，用预先处理的40ml SP-700大孔吸附树脂进行吸附。先用30％的丙酮水溶液洗涤100ml，然后用80％的丙酮水溶液洗脱，80％的丙酮水溶液用量150ml。洗脱收集，米卡芬净钠大于0.5g/L开始收集，洗脱至末尾小于0.5g/l停止收集，收集符合浓度规定的含有米卡芬净钠的组分，HPLC定量分析米卡芬净钠(0.92mmol)，收率91.1％。避光，直接减压蒸馏含有米卡芬净钠的组分合并液，得到固体，真空干燥，HPLC分析米卡芬净钠纯度99.79％。其中反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，被完全的去除。HPLC图谱见图5，相关主要杂质含量，见表27。
表27
比较例6
用比较例3制备的二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠
参照WO2004014879中的实施例6制备工艺，由米卡芬净二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠盐。
将本申请比较例3制备的米卡芬净二异丙基乙胺盐固体(1.01mmol)，全部溶解在15ml水溶液中。将含有米卡芬净二异丙基乙胺盐的溶解液，上样于30mlUBK510L离子交换树脂上，用纯化水溶液洗脱，洗脱至米卡芬净钠低于1.0g/L停止收集。用0.1mol/L的氢氧化钠控制收集液的pH至6.0。上样，用预先处理的40ml SP-700大孔吸附树脂进行吸附。先用30％的丙酮水溶液洗涤100ml，然后用80％的丙酮水溶液洗脱，80％的丙酮水溶液用量150ml。洗脱收集，米卡芬净钠大于0.5g/L开始收集，洗脱至末尾小于0.5g/l停止收集，收集符合浓度规定的含有米卡芬净钠的组分，HPLC定量分析米卡芬净钠(0.83mmol)，收率82.1％。避光，直接减压蒸馏含有米卡芬净钠的组分合并液，得到固体，真空干燥，HPLC分析米卡芬净钠纯度96.29％。其中反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，被完全的去除。相关主要杂质含量，见表28。
表28
从实施例22和比较例6可以明显的得出，利用高纯度式I化合物(纯度99.57％)制备的高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐，经过简单的纯化步骤，即可得到纯度在99.79％的米卡芬净钠。利用美国专利5376634实施例1制备的式I化合物(纯度97.51％)，制备的高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐，经过相同的纯化步骤得到的米卡芬净钠纯度只有96.29％。高纯度式I化合物制备米卡芬净钠在纯度上具有显著的优势。
实施例23
用高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐制备单一杂质均小于0.1％的米卡芬净钠
参照WO2004014879中的实施例6制备工艺，由米卡芬净二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠盐。
将本申请实施例19制备的米卡芬净二异丙基乙胺盐固体(1.04mmol)，全部溶解在15ml水溶液中。将含有米卡芬净二异丙基乙胺盐的溶解液，上样于25ml UBK510L离子交换树脂上，用纯化水溶液洗脱，洗脱至米卡芬净钠低于1.0g/L停止收集。用0.1mol/L的氢氧化钠控制收集液的pH至6.0。上样，用预先处理的40ml HP2MG大孔吸附树脂进行吸附。先用30％的乙醇水溶液洗涤200ml，然后用70％的乙醇水溶液洗脱，70％的乙醇水溶液用量200ml。洗脱收集，米卡芬净钠大于0.5g/L开始收集，洗脱至末尾小于0.5g/l停止收集，收集符合浓度规定的含有米卡芬净钠的组分，HPLC定量分析米卡芬净钠(0.92mmol)，收率88.5％。避光，直接减压蒸馏含有米卡芬净钠的组分合并液，得到固体，真空干燥，HPLC分析米卡芬净钠纯度99.88％。其中反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，被完全的去除。相关主要杂质含量，见表29。
表29
比较例7
用比较例3制备的二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠
参照WO2004014879中的实施例6制备工艺，由米卡芬净二异丙基乙胺盐制备米卡芬净钠盐。
将本申请比较例3制备的米卡芬净二异丙基乙胺盐固体(1.04mmol)，全部溶解在15ml水溶液中。将含有米卡芬净二异丙基乙胺盐的溶解液，上样于25mlUBK510L离子交换树脂上，用纯化水溶液洗脱，洗脱至米卡芬净钠低于1.0g/L停止收集。用0.1mol/L的氢氧化钠控制收集液的pH至6.0。上样，用预先处理的40ml HP2MG大孔吸附树脂进行吸附。先用30％的乙醇水溶液洗涤200ml，然后用70％的乙醇水溶液洗脱，70％的乙醇水溶液用量200ml。洗脱收集，米卡芬净钠大于0.5g/L开始收集，洗脱至末尾小于0.5g/l停止收集，收集符合浓度规定的含有米卡芬净钠的组分，HPLC定量分析米卡芬净钠(0.86mmol)，收率82.7％。避光，直接减压蒸馏含有米卡芬净钠的组分合并液，得到固体，真空干燥，HPLC分析米卡芬净钠纯度96.29％。其中反应副产物1-羟基苯并三唑(HOBT)，被完全的去除。相关主要杂质含量，见表30。
表30
从实施例23和比较例7可以明显的得出，利用高纯度式I化合物(纯度99.81％)制备的高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐，经过简单的纯化步骤，即可得到纯度在99.88％的米卡芬净钠。利用美国专利5376634实施例1制备的式I化合物(纯度97.51％)，制备的高纯度米卡芬净二异丙基乙胺盐，经过相同的纯化步骤得到的米卡芬净钠纯度只有96.29％。高纯度式I化合物制备米卡芬净钠在纯度上具有显著的优势。
比较例8
与市售制剂产品杂质含量比较
市售制剂产品：商品名称：米开民
通用名：注射用米卡芬净钠
厂家：安斯泰来富山株式会社
批号：0901
表31本发明制备高纯度式II化合物与市售制剂产品杂质含量比较
-：表示未检测到该杂质
由表31看出，本发明获得的高纯度的米卡芬净钠的纯度明显高于市售的制剂产品，其中杂质6，杂质7、杂质8，杂质9、杂质10以及杂质11的含量都大大低于市售的制剂产品。其HPLC图谱见附图5，市售的制剂产品HPLC图谱见附图6。
实施例24
化合物I药物组合物的制备
 高纯度化合物I   乳糖   无水柠檬酸   氢氧化钠
  2.5g   20g   适量   适量
将乳糖在低于50℃加热下溶于纯水(200ml)。冷却至20℃一下后，向乳糖溶液中加入实施例3获得的高纯度化合物I，在温和搅拌下避免产生气泡。在加入2％柠檬酸水溶液(0.95ml)后，向溶液中加入0.4％氢氧化钠水溶液(约24ml)，以调节pH5.5，然后用纯水稀释，产生给定的体积(250ml)。将所得的溶液分装到100个10ml体积的管形瓶中，每个管形瓶2.5ml。用常规方法，用冻干机将各个管形瓶中的溶液冻干，以获得各含25mg化合物I的冻干组合物。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。

Claims (33)

1.一种高纯度环肽化合物，其结构如式I所示，其特征在于，所述环肽化合物纯度大于等于99.2％，其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子； 
2.如权利要求1所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，其中式I化合物的纯度用HPLC测定。 
3.如权利要求2所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，所述HPLC测定方法为： 
色谱柱：ACE 3AQ，150×4.6mm，3μm； 
流动相：A：1000ml水，10ml甲醇，100μl三氟乙酸； 
       B：600ml水，400ml甲醇，100μl三氟乙酸； 
流速：0.55ml/min； 
柱温：50℃； 
梯度： 
时间/分钟   流动相A   流动相B 0   100％   0 25   100％   0 55   55％   45％ 56   0   100％ 61   0   100％ 62   100％   0 70   100％   0
样品稀释剂：纯水； 
进样温度：5℃； 
检测波长：225nm。 
4.如权利要求3所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，所述高纯度环肽化合物中杂质A的含量小于等于0.25％，所述杂质A在HPLC上的相对保留时间约为0.45。 
5.如权利要求3所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，所述高纯度环肽化合物中杂质B的含量小于等于0.25％，所述杂质B在HPLC上的相对保留时间约为0.65。 
6.如权利要求3所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，所述高纯度环肽化合物中杂质C的含量小于等于0.25％，所述杂质C在HPLC上的相对保留时间约为0.88。 
7.如权利要求3所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，所述高纯度环肽化合物中杂质D的含量小于等于0.20％，所述杂质D在HPLC上的相对保留时间约为1.08。 
8.如权利要求3所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，所述高纯度环肽化合物中杂质E的含量小于等于0.15％，所述杂质E在HPLC上的相对保留时间约为1.29。 
9.如权利要求3所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，所述高纯度环肽化合物中杂质F的含量小于等于0.15％，所述杂质F在HPLC上的相对保留时间约为1.92。 
10.如权利要求4-9任一项所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，所述高纯度环肽化合物中其他相关杂质含量均小于等于0.10％，所述其他相关杂质指A-F以外可能存在的杂质。 
11.如权利要求2-9任一项所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，其中式I化合物纯度和/或杂质含量的计算方法为：在HPLC图中式I化合物和/或某个杂质的峰曲线下面积除以HPLC图的总曲线下面积。 
12.一种制备如权利要求1-11任一项所述的高纯度环肽化合物的方法，其特征在于，所述的方法包括步骤： 
(a)将如式I所示化合物粗品溶解在水或有机溶剂(ⅰ)的水性溶液中，控制溶解液pH； 
(b)通过降温和添加有机溶剂(ⅰ)得到所述高纯度环肽化合物； 
其中，所述步骤(a)的溶解液pH控制在2.0-5.0；溶解液中式I化合物的浓度为10-500mg/ml；所述步骤(a)和/或(b)中有机溶剂(ⅰ)选自：甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或多种；所述步骤(a)-(b)可以重复一次以上；步骤(b)中所述的降温的温度为-40至15℃。 
13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)的溶解液pH控制在3.5-4.5。 
14.一种如权利要求1-11任一项所述的高纯度环肽化合物的用途，其特征在于，用于制备高纯度的式Ⅱ化合物； 
15.一种高纯度的环脂肽化合物，结构如式II所示，其特征在于，所述环脂肽化合物的纯度大于等于98.8％；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子； 
16.如权利要求15所述的高纯度的环脂肽化合物，其特征在于，其中式II化合物的纯度用HPLC测定。 
17.如权利要求15所述的高纯度的环脂肽化合物，其特征在于，其中式II化合物中杂质6的含量小于0.3％，其结构如式IV所示；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子； 
18.如权利要求15所述的高纯度的环脂肽化合物，其特征在于，其中式II化合物中杂质7和8的总含量小于0.5％，其结构如式V，式VI所示；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子； 
19.如权利要求15所述的高纯度的环脂肽化合物，其特征在于，其中式II化合物中杂质9含量小于0.2％，其结构如式VII所示；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子； 
20.如权利要求15所述的高纯度的环脂肽化合物，其特征在于，其中式II化合物中杂质10含量小于0.2％，其结构如式VIII所示；其中，R表示H或者能形成药学上可接受的盐的阳离子； 
21.如权利要求15所述的高纯度的环脂肽化合物，其特征在于，其中式II化合物的纯度通过HPLC方法测定，HPLC测定方法为： 
HPLC分析柱：YMC-ODS 250*4.6mm，5μm； 
流动相：乙腈：磷酸盐缓冲液＝70:45； 
流速：1.15ml/min； 
柱温：35℃； 
检测波长：210nm； 
运行时间：45min； 
稀释液：水的磷酸盐缓冲液。 
22.如权利要求21所述的高纯度的环脂肽化合物，其特征在于，其中式II化合物中杂质11的含量小于等于0.15％，所述杂质11在HPLC上的相对保留时间约为0.96。 
23.如权利要求17-20、22中任一项所述的高纯度的环脂肽化合物，其特征在于，其 中式II化合物中其他相关杂质含量均小于等于0.02％；所述其他相关杂质指杂质6-11以外可能存在的杂质。 
24.一种制备权利要求15-23任一项所述高纯度的环脂肽化合物的方法，其特征在于，使用如权利要求1-11任一项所述的高纯度环肽化合物作为原料，制备如式Ⅱ所示的化合物； 
25.一种如权利要求15-23任一项所述的高纯度的环脂肽化合物的用途，其特征在于，用于制备治疗真菌感染的药物。 
26.一种治疗真菌感染的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物中含有如权利要求15-23任一项所述的高纯度的环脂肽化合物和药学上可接受的载体。 
27.一种如权利要求26所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，所述的方法包括步骤： 
将如权利要求15-23任一项所述的高纯度的环脂肽化合物和药学上可接受的载体混合，得到如权利要求26所述的药物组合物。 
28.如权利要求10所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，其中式I化合物纯度和/或杂质含量的计算方法为：在HPLC图中式I化合物和/或某个杂质的峰曲线下面积除以HPLC图的总曲线下面积。 
29.如权利要求1所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，所述环肽化合物纯度大于等于99.5％。 
30.如权利要求1所述的高纯度环肽化合物，其特征在于，所述环肽化合物纯度大于等于99.8％。 
31.如权利要求16所述的高纯度的环脂肽化合物，其特征在于，所述环脂肽化合物的纯度大于等于99.0％。 
32.如权利要求16所述的高纯度的环脂肽化合物，其特征在于，所述环脂肽化合物的纯度大于等于99.5％。 
33.一种制备如权利要求1-11任一项所述的高纯度环肽化合物的方法，其特征在于，所述的方法包括步骤： 
(a)将如式I所示化合物粗品溶解在水中，控制溶解液pH； 
(b)通过降温得到所述高纯度环肽化合物； 
其中，所述步骤(a)的溶解液pH控制在2.0-5.0；溶解液中式I化合物的浓度为10-500mg/ml；所述步骤(a)-(b)重复三次以上；步骤(b)中所述的降温的温度为2至10℃。 
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AU2013242651A AU2013242651A1 (en) 2012-03-30 2013-03-29 High purity cyclopeptide compound as well as preparation method and use thereof
KR1020147030658A KR20140139122A (ko) 2012-03-30 2013-03-29 고순도 고리형 펩티드 화합물 및 그 제조방법과 용도
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US14/389,351 US20150065417A1 (en) 2012-03-30 2013-03-29 High purity cyclopeptide compound as well as preparation method and use thereof
RU2014143722/04A RU2603345C2 (ru) 2012-03-30 2013-03-29 Циклопептидное соединение высокой чистоты, а также способ его получения и его применение
EP13769311.5A EP2832745A4 (en) 2012-03-30 2013-03-29 HIGH-PURITY CYCLOPEPTIDE COMPOUND AND PROCESS FOR THE PREPARATION AND USE THEREOF
JP2015502080A JP6091596B2 (ja) 2012-03-30 2013-03-29 高純度シクロペプチド化合物およびその製造方法と使用
CA2868988A CA2868988A1 (en) 2012-03-30 2013-03-29 High purity cyclopeptide compound as well as preparation method and use thereof
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106866790A (zh) * 2015-12-11 2017-06-20 北大方正集团有限公司 达托霉素RS-5/6、RS-7和RS-7a/7b杂质的制备方法

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102627688B (zh) * 2012-03-30 2014-12-31 上海天伟生物制药有限公司 一种高纯度环肽化合物及其制备方法和用途
CN102627689B (zh) * 2012-03-30 2014-08-06 上海天伟生物制药有限公司 一种环肽类化合物的水合物及其制备方法和用途
CN106518980B (zh) * 2013-08-28 2019-04-09 重庆乾泰生物医药有限公司 一种高纯度环己肽类化合物的制备方法
CN105254721B (zh) * 2014-05-13 2021-05-18 江苏豪森药业集团有限公司 米卡芬净的纯化转盐方法
CN108276478B (zh) * 2014-05-29 2021-09-28 上海天伟生物制药有限公司 环肽类化合物的晶体及其制备方法和用途
CN105777869B (zh) * 2014-12-24 2019-09-27 上海天伟生物制药有限公司 环肽类化合物的组合物
CN105481952B (zh) * 2014-12-24 2020-12-29 上海天伟生物制药有限公司 一种含氮杂环六肽前体的组合物及其制备方法和用途
CN105968173B (zh) * 2016-06-28 2019-12-03 成都雅途生物技术有限公司 米卡芬净前体fr901379的纯化方法
WO2019066485A1 (ko) * 2017-09-27 2019-04-04 ㈜로제타엑소좀 크기 배제 크로마토그래피를 이용한 세포밖 소포체의 순도 분석 방법
CN113087775B (zh) * 2018-05-31 2022-07-08 杭州中美华东制药有限公司 米卡芬净钠新晶型ii及其制备方法
CN111378013B (zh) * 2018-12-29 2023-04-25 上海天伟生物制药有限公司 一种高纯度环肽化合物的制备方法
CN111434675A (zh) * 2019-01-11 2020-07-21 苏州纳微科技股份有限公司 一种米卡芬净母环的分离纯化方法
CN111044636A (zh) * 2019-12-30 2020-04-21 卓和药业集团有限公司 米卡芬净含量的分析方法
CN112710753A (zh) * 2020-12-18 2021-04-27 卓和药业集团有限公司 米卡芬净有关物质的分析方法
CN115785226A (zh) * 2021-09-09 2023-03-14 上海天伟生物制药有限公司 一种棘白菌素药物杂质及其制备、纯化方法和应用
CN115494184B (zh) * 2022-05-09 2023-07-28 浙江海正药业股份有限公司 一种同时检测药物中异丙苯磺酸甲酯、异丙苯磺酸乙酯的方法

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR901379A (fr) 1943-09-10 1945-07-25 Télégraphie par variations de fréquence
GB8925593D0 (en) 1989-11-13 1990-01-04 Fujisawa Pharmaceutical Co Fr901379 substance and preparation thereof
IL98506A (en) 1990-06-18 1996-09-12 Fujisawa Pharmaceutical Co Peptides, of antibiotics, processes for their preparation and pharmaceutical preparations containing them
US5336756A (en) * 1991-05-01 1994-08-09 Merck & Co., Inc. Process for crystalline cyclic lipopeptides
US6107458A (en) 1994-10-07 2000-08-22 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Cyclic hexapeptides having antibiotic activity
CN1161462A (zh) 1995-03-31 1997-10-08 大宇电子株式会社 带有温度补偿层的薄膜致动的反射镜阵列
WO1998057923A1 (fr) 1997-06-18 1998-12-23 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Nouveau procede de preparation
ATE338060T1 (de) * 1999-03-03 2006-09-15 Lilly Co Eli Bildung und anionenaustausch von inneren kristallinen ammoniumsalzen des echinocandins b
WO2002068456A1 (en) * 2001-02-26 2002-09-06 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Echinocandin derivatives, pharmaceutical compositions containing same and use thereof as drugs
JP2005053782A (ja) 2001-08-31 2005-03-03 Fujisawa Pharmaceut Co Ltd 環状リポペプチド化合物の新規結晶
FR2833596B1 (fr) * 2001-12-14 2005-02-18 Aventis Pharma Sa Procede de preparation de derives d'echinocandine
JP4784093B2 (ja) * 2002-08-08 2011-09-28 アステラス製薬株式会社 イソオキサゾリル安息香酸の製造法
KR20110011704A (ko) * 2008-06-25 2011-02-08 테바 기오기스제르갸르 자르트쾨렌 뮈쾨되 레스즈베니타르사사그 카스포펀진 불순물 ａ를 함유하지 않는 카스포펀진
CN101648994B (zh) * 2009-08-06 2012-09-05 上海天伟生物制药有限公司 一种氮杂环己肽或其药学上可接受的盐及其制备方法和用途
CN102219832B (zh) * 2010-04-15 2013-08-21 上海天伟生物制药有限公司 一种氮杂环六肽或其盐的纯化方法
JP6000254B2 (ja) * 2010-09-29 2016-09-28 上海天偉生物制薬有限公司 環状リポペプチド化合物又はその塩の精製方法
AU2011307733B2 (en) * 2010-09-30 2015-03-26 Shanghai Techwell Biopharmaceutical Co., Ltd. Method for purifying cyclic lipopeptide or salt thereof
CN102775476B (zh) * 2011-05-12 2015-01-07 上海天伟生物制药有限公司 一种米卡芬净钠盐的制备方法
CN102952178B (zh) * 2011-08-24 2016-04-27 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 一种高纯度棘白霉素类化合物的制备方法
CN102627688B (zh) * 2012-03-30 2014-12-31 上海天伟生物制药有限公司 一种高纯度环肽化合物及其制备方法和用途

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106866790A (zh) * 2015-12-11 2017-06-20 北大方正集团有限公司 达托霉素RS-5/6、RS-7和RS-7a/7b杂质的制备方法

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