CN102526550A - 一种抗乳腺增生的中药制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种抗乳腺增生的中药制备方法，该中药组分有筋骨草、白英、瓜子金、当归、合欢皮、白柴胡、琥珀、化橘红、薏苡仁、橘核。本发明的优点在于：本方十味药合用有清肝理气，清热活血，散癖散癃之功，通过标本兼治达到治疗目的。通过溶纤冲剂的理气作用。抗乳腺增生作用、活血化瘀作用、清热利湿作用、健脾护肾作用及镇痛作用，试验表明该新药具有清肝理气，健脾护肾提高免疫功能，抗乳腺增增生，改善血液微循环，以及抗炎镇痛作用。

Description

一种抗乳腺增生的中药制备方法

技术领域

本发明涉及一种抗乳腺增生的中药制备方法，尤其是一种抗乳腺增生的中药制备方法。

背景技术

乳腺增生是女性最常见的乳房疾病，其发病率占乳腺疾病的首位。近些年来该病发病率呈逐年上升的趋势，年龄也越来越低龄化。乳腺增生症是正常乳腺小叶生理性增生与复旧不全，乳腺正常结构出现紊乱，属于病理性增生，它是既非炎症又非肿瘤的一类病。多发于30-50岁女性，发病高峰为35-40岁。乳腺增生属中医“乳癖”范畴。《外科医案汇编》云：“治乳从一气字着笔，各方之中夹理气疏络之品，使其乳络疏通……自然壅者易通，郁者易达，结者易散，坚者易软” 。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗乳腺增生的中药制备方法，该药能较好治疗乳腺增生。

本发明的技术方案为：一种抗乳腺增生的中药制备方法，该中药的重量组分为：900-1100份筋骨草、900-1100份白英、450-550份瓜子金、350-450份当归、300-350份合欢皮、300-350份白柴胡 、80-120份琥珀、 300-350份化橘红、600-700份薏苡仁、450-550份橘核。

该中药的制备方法:琥珀粉碎过100目筛，备用；化橘红水蒸气蒸馏提取挥度发油，收油10ml，药渣备用；将化橘红药渣和其他药材加10倍水煎煮两次，每次2小时，合并二次煎煮液，过滤，减压浓缩至80℃热测比重为 1.2，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时；取上清液，回收乙醇并浓缩至80℃热测比重为1.20，经干燥成粉，与琥珀粉及辅料混匀，喷入挥发油，制成颗粒。也可以经干燥成粉，与琥珀粉及辅料混匀，装成胶囊。 

本发明的优点在于：本方十味药合用有清肝理气，清热活血，散癖散癃之功，通过标本兼治达到治疗目的。通过溶纤冲剂的理气作用。抗乳腺增生作用、活血化瘀作用、清热利湿作用、健脾护肾作用及镇痛作用，试验表明该新药具有清肝理气，健脾护肾提高免疫功能，抗乳腺增增生，改善血液微循环，以及抗炎镇痛作用。

现代中医大家倪大钧在疏肝为主治疗冲任失调型乳癖屡屡奏效的启发下，拟定出疏肝理气、化痰散瘀、通经活络治则，认为完全可以从肝施治乳癖冲任不调型。其理论根据为冲任之脉系于肝肾，肝藏血，主疏泄，冲为血海，血海盈亏有赖于肝之藏血和调节，故冲任与肝肾必然在病理上也互相影响。金草继承中医药文化的精髓，通过临床实验摸索出清肝理气，活血化瘀，化癃消瘤处方，处方由筋骨草、白柴胡、当归、白英、橘核、化橘红、合欢皮、瓜子金、琥珀、薏苡仁组成。因肝藏血，主疏泄，肝的经脉绕前阴，抵小腹与女子的生理密切相关，故有“肝司血海，女子以肝为先天”之说。本方筋骨草、白英、桔核甘寒入肝经，清热散结，消癃：筋骨草亦入肝经有增强白英、橘核的清肝散结之功，且二者药性平和，重用，久用既可清肝理气，消癃散结，又不伤及正气，且有活血调经之效；化橘红化痰散结，瓜子金清热消肿，薏苡仁健脾，利湿消肿。诸药多能，入肝经，行肝气，疏肝止痛，肝气条达则气机舒畅，气行则血亦行。 

【性状】本品为淡黄棕色至棕色颗粒；味甜，微苦涩。

【含量测定】用高效液相色谱法测定。

  色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；甲醇-乙酸-水(37:4:61)为流动相；检测波长为283nm。理论塔板数按柚皮苷峰计算应不低于1000。

    对照品溶液的制备：精密称定在110℃干燥至恒重的柚皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含柚皮苷40μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：本品研细后，取约1.0g[同时另取本品粉末测定水份]，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(60℃-90℃)80m1置水浴上加热回流2-3小时，弃去石油醚，药渣挥去石油醚，加甲醇80m1，再置水浴上加热回流3小时至提取液无色，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法：分别精密称取对照品溶液10u1、供试品溶液3-lOul(视含量高低而定)注入液相色谱仪测定，即得。

本品按干燥品计算，每1g含化橘红以柚皮苷(C₂₇H₃₂0₁₄)计不得少于1.2mg。

对大鼠乳腺增生模型的影响

方法：

1）分组及剂量

取 SD雌性未孕大鼠 90只 ,随机分为6组，每组15只，分别为本处方颗粒10.0、3.0、1.0 g/kg剂量组，乳增宁片0.54 g/kg剂量组，空白对照组，模型对照组。

2）造模

空白对照组动物肌肉注射生理盐水 0.1ml/只，每天 1次，连续 30天，其他各组肌肉注射苯甲酸雌二醇 0.5mg/kg，每天 1次，连续 25天，随后肌肉注射黄体酮4mg/kg，每天 1次，连续 5天 。

3）给药

从造模结束起，本处方颗粒组和乳增宁片组灌胃相应浓度药液 , 每天1次，每次给药容积为2.0ml/100g，空白对照组和模型对照组灌胃等体积蒸馏水，连续给药 30天。

4）指标检测

末次给药后1h，大鼠腹主动脉采血5ml，3000r/min离心15min，分离血清2.0ml，于-18℃冰箱保存。

用精密游标卡尺测量所有大鼠的第 2对乳头高度，计算均值。再取下第2对完整的乳房，用 10%福尔马林固定。乳腺组织石蜡包埋，切片，HE染色，光学显微镜下观察乳腺组织细胞增生层数、乳腺导管扩张情况、乳腺小叶和腺泡增生情况，且拍照。其判断标准为：（-）乳腺小叶不增生，腺体数量极少，腺泡不扩张，处于静止状态；（+）乳腺小叶无明显增生，个别腺泡有轻度增生，无扩张；（+ +） 乳腺小叶大部分增生，部分腺泡明显扩张；（+ + +） 乳腺小叶明显增生，腺泡处于极度扩张状态，腺上皮细胞呈扁平状 ，腺泡内及导管内有大量的分泌物。

用放射免疫法测定血清雌二醇、孕酮的含量。

5）统计

用t检验和Ridit法，进行组间差异比较。

结果

大鼠在造模过程中由于对模型药耐受性的差异，部分动物出现死亡现象，再加上灌胃致死等操作因素，共死亡动物为11只。其中：本处方颗粒1.0 g/kg剂量组2只，3.0g/kg剂量组3只，10.0 g/kg剂量组3只，乳增宁片0.54 g/kg剂量组3只。

1)对乳头高度的影响

大鼠注射雌激素后，乳房明显肿胀，表现为乳头明显增高等现象。本处方颗粒各剂量组皆能降低乳头高度，与模型组比较，差异具有显著性（p＜0.05），具体见表1。

2)对血清性激素水平的影响

与空白对照组比较，乳腺增生模型组动物血清雌二醇含量明显升高，孕酮含量明显降低。本处方颗粒10.0、3.0g/kg剂量组能降低血清雌二醇含量，与模型组比较，差异具有显著性意义（p＜0.05）；10.0、3.0、1.0 g/kg剂量组能升高血清中孕酮含量，与模型组比较，差异具有非常显著性意义（p＜0.01）。具体见表2。

3)对乳腺组织病理组织学的影响 

光镜下观察 ，空白对照组动物乳腺细胞无增生性病变，腺泡少，导管无分泌，管腔无扩张；模型对照组小叶明显增多、增大，腺泡数增多，细胞增生，层数增多，腺泡腔和腺导管腔扩张。本处方颗粒各剂量组小叶缩小，腺泡数减少，腺泡腔和腺导管腔扩张不明显，分泌物减少，且10.0、3.0g/kg剂量组经Ridit统计检验，与模型组比较，差异具有显著性意义（p＜0.05）。表明：本处方颗粒对乳腺组织增生病理改变有明显的改善作用。统计结果见表 3。

对大鼠足肿胀模型的影响 ^[3]

方法：

1)分组及剂量

取 SD雌性未孕大鼠60只 ,随机分为6组，每组10只，分别为本处方颗粒10.0、3.0、1.0g/kg剂量组，阿司匹林肠溶片0.18g/kg剂量组，空白对照组，模型对照组。

2)给药

按体重分别灌胃给予相应组别的对照品和供试品，空白对照组、模型对照组给予等体积的蒸馏水，2.0ml/100g体重，连续给药10d，每日1次。

3)观察方法 

末次给药前1小时用外径千分尺测量大鼠左足的厚度，给药后1小时左足爪中部皮下注射10％鸡蛋清0.1ml/爪，左足注射鸡蛋清0.1ml/爪，然后于0.5、1、2、4、6小时用外径千分尺各测量一次左足的厚度，测量时均在同一部位。

4)观察指标 

大鼠足肿胀度（同一观察时间点，同一部位）；

足肿胀度=注射蛋清后左足的厚度—注射蛋清前左足的厚度。

5)统计方法 

t检验，进行组间差异比较。

结果

大鼠在造模过程中由于灌胃致死等操作因素，共死亡动物为4只。其中：本处方颗粒3.0 g/kg剂量组2只，1.0g/kg剂量组1只，乳增宁片0.54 g/kg剂量组1只。

与空白对照组比较，模型组动物注射鸡蛋清后0.5、1、2、4、6小时，其左足注射部位肿胀明显，在0.5、1小时达到高峰，其后肿胀变轻，但至6小时仍未消退。本处方颗粒各剂量组有减轻足肿胀的作用，但1.0 g/kg 剂量组作用较弱，10.0、3.0g/kg剂量组作用较明显，其各时间段足肿胀度与模型组比较，差异具有显著性或非常显著性意义（p＜0.05或0.01）。具体见表4.1和表4.2。

对家兔乳腺增生模型的影响

方法：

1）分组及剂量

取 SD雌性未孕家兔 60只 ,随机分为6组，每组10只，分别为本处方颗粒5.0、1.5、0.5g/kg剂量组，乳增宁片0.27g/kg剂量组，空白对照组，模型对照组组。

2）造模

空白对照组动物肌肉注射生理盐水 0.1ml/只，每天 1次，连续 30天，其他各组肌肉注射苯甲酸雌二醇 0.2mg/kg，每天 1次，连续 25天，随后肌肉注射黄体酮1mg/kg，每天 1次，连续 5天 。

3）给药

从造模第5天起，本处方颗粒组和乳增宁片组灌胃相应浓度药液 , 每天1次，每次给药容积为4.0ml/kg，空白对照组和模型对照组灌胃等体积蒸馏水，连续给药30天。

4）指标检测

末次给药后1h，心脏采血5ml， 3000r/min离心15min，分离血清。

取第2对完整的乳房，用 10%福尔马林固定。乳腺组织石蜡包埋，切片，HE染色，光学显微镜下观察乳腺组织细胞增生层数、乳腺导管扩张情况、乳腺小叶和腺泡增生情况，其判断标准为：（-）乳腺小叶不增生，腺体数量极少，腺泡不扩张，处于静止状态；（+）乳腺小叶无明显增生，个别腺泡有轻度增生，无扩张；（+ +） 乳腺小叶大部分增生，部分腺泡明显扩张；（+ + +） 乳腺小叶明显增生，腺泡处于极度扩张状态，腺上皮细胞呈扁平状 ，腺泡内及导管内有大量的分泌物。

用放射免疫法测定血清雌二醇、孕酮的含量。

5）统计

用t检验和Ridit法，进行组间差异比较。

结果

家兔在造模过程中由于对模型药耐受性的差异，以及灌胃给药误灌于气管的原因，部分动物出现死亡现象，共死亡动物为10只。其中：本处方颗粒5.0 g/kg剂量组2只，1.5g/kg剂量组2只，0.5g/kg剂量组1只，乳增宁片0.27g/kg剂量组2只，模型组2只，空白对照组1只。

1)对血清性激素水平的影响

与空白对照组比较 ,乳腺增生模型组动物血清雌二醇含量明显升高，孕酮含量明显降低。本处方颗粒5.0、1.5、0.5g/kg剂量组能降低血清雌二醇含量，与模型组比较，差异具有显著性意义（p＜0.05）；5.0、1.5、0.5g/kg剂量组能升高血清中孕酮含量，与模型组比较，差异具有显著性意义（p＜0.05）。具体见表5。

2)对乳腺组织病理组织学的影响 

光镜下观察 ，空白对照组动物乳腺细胞无增生性病变 ，腺泡少 ，导管无分泌 ，管腔无扩张；模型对照组小叶明显增多、增大，腺泡数增多，细胞增生，层数增多，腺泡腔和腺导管腔扩张。本处方颗粒各剂量组小叶缩小，腺泡数减少，腺泡腔和腺导管腔扩张不明显，分泌物减少，且5.0、1.5g/kg剂量组经Ridit统计检验，与模型组比较，差异具有显著性意义（p＜0.05）。表明：本处方颗粒对乳腺组织增生病理改变有明显的改善作用。统计结果见表6。

具体实施方式

实例1：

100克琥珀粉碎过100目筛，备用。333.3克化橘红水蒸气蒸馏提取挥发油，收油适量，药渣备用；将上述药渣和1000克筋骨草、1000克白英、500克瓜子金、400 克当归、333.3 克合欢皮、333.3克白柴胡、666.7克薏苡仁 加10倍水煎煮两次，每次2小时，合并二次煎煮液，过滤，减压浓缩至比重为 1.2(80℃热测)，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时；取上清液，回收乙醇并浓缩至比重为1.20(80℃热测)，经干燥成粉，与琥珀粉及辅料混匀，制成颗粒，喷入挥发油，制成1000g，即得。

实例2：

琥珀粉碎过100目筛，备用；化橘红水蒸气蒸馏提取挥度发油，收油10ml，药渣备用；将化橘红药渣和其他药材加10倍水煎煮两次，每次2小时，合并二次煎煮液，过滤，减压浓缩至80℃热测比重为 1.2，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时；取上清液，回收乙醇并浓缩至80℃热测比重为1.20，经干燥成粉，与琥珀粉及辅料混匀，喷入挥发油，装成胶囊。

Claims (2)

1.一种抗乳腺增生的中药制备方法，其特征在于：该中药的重量组分为：

筋骨草 900-1100；白英 900-1100；瓜子金 450-550；当归 350-450；合欢皮 300-350；

白柴胡 300-350；琥珀 80-120；化橘红 300-350；薏苡仁 600-700；橘核 450-550；

该中药的制备方法：琥珀粉碎过100目筛，备用；化橘红水蒸气蒸馏提取挥度发油，收油10ml，药渣备用；将化橘红药渣和其他药材加10倍水煎煮两次，每次2小时，合并二次煎煮液，过滤，减压浓缩至80℃热测比重为 1.2，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时；取上清液，回收乙醇并浓缩至80℃热测比重为1.20，经干燥成粉，与琥珀粉及辅料混匀，喷入挥发油，制成颗粒。

2.根据权利要求1所述的抗乳腺增生的中药制备方法，其特征在于：该中药的制备方法：琥珀粉碎过100目筛，备用；化橘红水蒸气蒸馏提取挥度发油，收油10ml，药渣备用；将化橘红药渣和其他药材加10倍水煎煮两次，每次2小时，合并二次煎煮液，过滤，减压浓缩至80℃热测比重为 1.2，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时；取上清液，回收乙醇并浓缩至80℃热测比重为1.20，经干燥成粉，与琥珀粉及辅料混匀，喷入挥发油，装成胶囊。