CN105327069A - 一种疏肝中草药组合物的配方、制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于中草药产品领域，尤其涉及一种疏肝中草药组合物的配方、制备方法及应用。本发明提供了一种疏肝中草药组合物，所述组合物的原料包括：香附、当归、川芎、白芍和陈皮。本发明还提供了包括以上所述组合物的制备方法，包括：步骤一、提取；步骤二、浓缩；步骤三、干燥。同时，本发明还提供了包括以上组合物以及制备方法得到的产品在乳腺疾病治疗和/或缓解抑郁中的应用。

Description

一种疏肝中草药组合物的配方、制备方法及应用
技术领域
本发明属于中药产品领域，尤其涉及一种疏肝中草药组合物的配方、制备方法及应用。
背景技术
肝主疏泄是肝的最核心的生理功能，疏泄本身寓有疏通、外达和发泄，从而获得某种满足和心身愉悦之意。特别的，对女性而言，中医理论认为，肝与乳在生理上紧密联系，“足厥阴肝经上膈，布胸胁绕乳头而行”、“女子乳头属肝”。肝藏血，主疏泄，可直接调节冲任血海之盈亏，若忧思恼怒，则肝郁不达，冲任之气血失于条达，气滞血瘀，经前之气血聚于冲任，经脉壅阻，故乳痛加剧，肿块增大；经后血海空虚，乳痛稍减，但由于血脉凝滞，久而不散，故乳房结块不消。
西方医学认为，乳腺增生等乳腺疾病主要与卵巢内分泌失衡有关。有学者发现，周期性乳痛症患者有雌激素水平升高，孕激素水平降低或雌孕激素比例失衡，从而导致乳腺腺体增生过度或复旧不全而发生纤维化引发乳痛。在西医领域，常规治疗乳腺增生症的西药为激素类，如雄性激素、黄体酮以及雌激素等，但激素治疗存在着副作用大、易复发、容易导致内分泌紊乱以及不宜常规应用的缺点。
有鉴于此，从发病机理上治疗乳腺增生等乳腺疾病的中药手段克服了上述激素治疗的缺点，受到了越来越多的关注和研究。中医认为乳腺增生等乳腺疾病是由于情志不舒、肝气郁结、正气虚弱和气血运行不畅而导致气滞痰凝血瘀，凝滞于乳房，搏结不散，日积月累而成。因此，在治疗的方法上多采用疏肝理气、调摄冲任和活血化瘀为治则，同时，中医以整体观念对本病辨证论治，辨病与辨证相结合，整体与局部相结合，内治与外治相结合，长期治疗与短期治疗相结合，标本兼治。市面上的用于治疗乳腺增生等乳腺疾病的药物产品较多，但此类药物存在着：产品药味较多、制备工艺复杂、服用剂量较大、不宜长期服用以及消费者顺应性差的缺点。
现代医学认为，抑郁症病理改变主要与中枢神经系统、免疫和神经内分泌功能相关，确切发病机制尚不清楚。目前主要有单胺假说、神经递质受体假说、神经内分泌功能改变假说和免疫系统异常假说等争论。目前临床常用的抗抑郁症药包括三环类、四环类、神经递质类抑制剂和单胺氧化酶抑制剂等药物。但此类抗抑郁西药存在着副作用大、疗效不理想、依从性差以及价格昂贵放入缺点，从而制约了临床应用。
有鉴于此，从发病机理上治疗抑郁症的中药手段克服了上述西药抑郁症药物的缺点，与西药抑郁症药物相比，具有疗效相当、起效较快、能提高患者生活质量、减少复发率、副反应少以及患者依从性好等明显的优势，有广泛的开发及应用的空间，受到了越来越多的关注和研究。抑郁症是一种典型的生物、心理、社会等多种因素作用而致的疾病，可引起人体多系统、多层次的病理反应。因而，单一作用、靶点明确的药物治疗不可避免地具有一些缺点，并普遍存在不良反应和复发情况，多层次、多靶点的中医治疗具有一定的潜力和优势。在抑郁症缓解方面，传统中医理论认为抑郁症属于“郁证”范畴，五脏气机失调是郁证的基本病机。五脏中肝与郁证的关系最为密切，肝主疏泄又主藏血，肝主疏泄是指肝具有疏通、舒畅、条达以保持全身气机疏通畅达，通而不滞，散而不郁的作用。肝主疏泄，还有条畅情致的作用。肝主疏泄对全身各脏腑组织的气机升降出入之间的平衡协调，起着重要的作用，故《读医随笔》说“凡脏腑十二经之气化，皆必藉肝胆之气化以鼓舞之，始能调畅而不病”，可见肝的疏泄功能正常，则气机调畅、气血和调、经络通利，脏腑组织的活动也就正常协调。在正常生理情况下，肝的疏泄功能正常，肝气升发，既不亢奋，也不抑郁，舒畅条达，则人就能较好地协调自身的精神情志活动，表现为精神愉快，心情舒畅，理智清朗，思维灵敏，气和志达，血气和平。若肝失疏泄，则气机郁滞，随之出现一系列抑郁症的临床表现。然而，对于中药产品缓解抑郁确只是一个理论上的推断和研究，目前并没有成熟的中药组方用于缓解抑郁症的应用
综上所述，现有的针对乳腺增生等乳腺疾病的中药组方产品药味较多、制备工艺复杂、服用剂量较大、不宜长期服用以及消费者顺应性差的缺点，而缓解抑郁的中药产品缺乏。因此，研发出一种配方简单、制备工艺简单、服用剂量小、可以长期服用以及消费者顺应性好，可以同时起到治疗乳腺增生等乳腺疾病和缓解抑郁的中药组合物及其制备方法，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种疏肝中草药组合物的配方、制备方法及应用，用于解决现有的针对乳腺增生等乳腺疾病的中药组方产品药味较多、制备工艺复杂、服用剂量较大、不宜长期服用以及消费者顺应性差的缺点，而缓解抑郁的中药产品缺乏的问题。
本发明提供了一种疏肝中草药组合物，所述组合物的原料包括：香附、当归、川芎、白芍和陈皮。
优选地，所述组合物的原料还包括绿茶提取物。
优选地，以质量份计，所述组合物的原料包括：香附20～50份、当归10～30份、川芎10～30份、白芍5～20份和陈皮5～20份。
优选地，以质量份计，所述组合物的原料还包括：绿茶提取物0.5～10份。
优选地，所述绿茶提取物中茶多酚含量不低于30％。
本发明还提供了一种包括以上任意一项疏肝中草药组合物的制备方法，包括：步骤一、提取：向所述香附、当归、川芎、白芍和陈皮的混合物中加入第一份量溶剂，第一次提取，过滤收集第一滤液；继续加入第二份量溶剂，第二次提取，过滤收集第二滤液；合并所述第一滤液和第二滤液得提取液；步骤二、浓缩；步骤三、干燥。优选地，所述溶剂选自水、乙醇或其它溶剂。
优选地，所述制备方法还包括：所述干燥得到的产物与绿茶提取物的混合。
优选地制备方法是按比例将香附、当归、川芎、白芍和陈皮混合制得粉末，或将香附、当归、川芎、白芍和陈皮的粉末按比例混合均匀。
优选地，将混合粉末再与绿茶提取物提取物混合均匀，得到本发明所述产品。
优选地，所述第一份量溶剂与所述混合物的质量比为(9～12):1，所述第一次提取的时间为1～3h，所述第一次提取的条件为保沸；所述第二份量溶剂与所述混合物的质量比为(7～10):1，所述第二次提取的时间为0.5～1.5h，所述第二次提取的条件为保沸，所述浓缩的方法为取所述提取液经减压浓缩，得浓缩产品；所述浓缩产品的固形物含量为20～30％。
优选地，所述溶剂选自水、乙醇或其它溶剂。
优选地，所述制备方法还包括：所述干燥得到的产物制成口服制剂，所述口服制剂的剂型选自：口服液、粉剂、颗粒剂、片剂和胶囊剂中的一种或多种。
本发明还提供了包括以上任意一项疏肝中草药组合物或任意一项制备方法得到的产品在乳腺疾病治疗和/或缓解抑郁中的应用。
综上所述，本发明从导致乳腺增生等乳腺疾病和抑郁症的中药理论基础出发，辅之以中药药性的配伍，发明了一种疏肝中草药组合物的配方和制备方法，用于解决现有的针对乳腺增生等乳腺疾病的中药组方产品药味较多、制备工艺复杂、服用剂量较大、不宜长期服用以及消费者顺应性差的缺点，而缓解抑郁的中药产品缺乏的问题。本发明首创了一种可以同时治疗乳腺疾病和缓解抑郁的中药产品，对于中药产品的研发具有里程碑式的意义。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的；附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例8正常对照组的乳腺切片在显微镜下的照片；
图2为本发明实施例8模型对照组的乳腺切片在显微镜下的照片；
图3为本发明实施例8乳癖消片组的乳腺切片在显微镜下的照片；
图4为本发明实施例8专利组方组的乳腺切片在显微镜下的照片。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
为了更详细说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种中药组合物的配方、制备方法及应用，进行具体地描述。
实施例1
称取香附30g、当归20g、川芎20g、白芍10g和陈皮10g，共计90g混合物。加入0.9Kg水后在100℃条件下加热1.5h，过滤收集滤液，再向滤渣中加入0.72Kg水后在100℃条件下加热1h，过滤收集滤液，合并两次滤液。采用常规减压浓缩方法，将合并的滤液浓缩至固形物含量为20％后，采取常规喷雾干燥手段干燥得细粉。将得到的细粉与绿茶提取物(绿茶提取物购自陕西嘉禾植物化工有限责任公司，绿茶提取物茶多酚的含量大于等于98％)2g混合后，得产品1。
实施例2
称取香附50g、当归10g、川芎10g、白芍20g和陈皮5g，共计95g混合物。加入0.95Kg水后在100℃条件下加热3h，过滤收集滤液，再像滤渣中加入0.665Kg水后在100℃条件下加热1.5h，过滤收集滤液，合并两次滤液。采用常规减压浓缩方法，将合并的滤液浓缩至固形物含量为30％后，采取常规喷雾干燥手段干燥得细粉。将得到的细粉与绿茶提取物(绿茶提取物购自陕西嘉禾植物化工有限责任公司，绿茶茶多酚的含量为30％)8克混合后，得产品2。
实施例3
称取香附20g、当归30g、川芎30g、白芍5g和陈皮20g，共计105克混合物。加入1Kg水后在100℃条件下加热1h，过滤收集滤液，再像滤渣中加入1.05Kg水后在100℃条件下加热1h，过滤收集滤液，合并两次滤液。将合并的滤液浓缩至固形物含量为20％后，采取常规喷雾干燥手段干燥得细粉。将得到的细粉与绿茶提取物(绿茶提取物购自陕西嘉禾植物化工有限责任公司，茶多酚的含量为60％)0.5g混合后，得产品3。
实施例4
称取香附35克、当归15克、川芎15克、白芍15克和陈皮10克，共计90克混合物。加入0.9Kg水后在100℃条件下加热1h，过滤收集滤液，再像滤渣中加入0.72Kg水后在100℃条件下加热1h，过滤收集滤液，合并两次滤液。采用常规减压浓缩方法，将合并的滤液浓缩至固形物含量为30％后，采取常规喷雾干燥手段干燥得细粉。将得到的细粉与绿茶提取物(绿茶提取物购自陕西嘉禾植物化工有限责任公司，茶多酚的含量为90％)1克混合后，制成片剂产品4。
实施例5
称取香附25克、当归25克、川芎25克、白芍10克和陈皮15克，共计100克混合物。加入1.2Kg水后在100℃条件下加热3h，过滤收集滤液，再像滤渣中加入1Kg水后在100℃条件下加热1.5h，过滤收集滤液，合并两次滤液。将合并的滤液浓缩至固形物含量为20％后，采取常规喷雾干燥手段干燥得细粉。将得到的细粉与绿茶提取物(绿茶提取物购自陕西嘉禾植物化工有限责任公司，茶多酚的含量为98％)2g混合后，制成胶囊剂产品5。
实施例6
称取香附30g、当归20g、川芎20g、白芍10g和陈皮10g，共计90g混合物。加入0.9Kg水后在100℃条件下加热1.5h，过滤收集滤液，再向滤渣中加入0.72Kg水后在100℃条件下加热1h，过滤收集滤液，合并两次滤液。采用常规减压浓缩方法，将合并的滤液浓缩至固形物含量为20％后，采取常规喷雾干燥手段干燥得细粉，得产品6。
实施例7
称取香附50g、当归10g、川芎10g、白芍20g和陈皮5g，共计95g混合物。加入0.95Kg水后在100℃条件下加热3h，过滤收集滤液，再像滤渣中加入0.665Kg水后在100℃条件下加热1.5h，过滤收集滤液，合并两次滤液。采用常规减压浓缩方法，将合并的滤液浓缩至固形物含量为30％后，采取常规喷雾干燥手段干燥得细粉，得产品7。
实施例8
称取香附20g、当归30g、川芎30g、白芍5g和陈皮20g，共计105克混合物。加入1Kg水后在100℃条件下加热1h，过滤收集滤液，再像滤渣中加入1.05Kg水后在100℃条件下加热1h，过滤收集滤液，合并两次滤液。将合并的滤液浓缩至固形物含量为20％后，采取常规喷雾干燥手段干燥得细粉。将得到的细粉，得产品8。
实施例9
称取香附35克、当归15克、川芎15克、白芍15克、陈皮10克和5g绿茶，混合制成均匀粉末，得产品9。
实施例10
称取香附25克、当归25克、川芎25克、白芍10克和陈皮15克，共计100克混合物。加入1.2Kg乙醇后在沸腾回流条件下加热3h，过滤收集滤液，再像滤渣中加入1Kg乙醇后在沸腾回流条件下加热1.5h，过滤收集滤液，合并两次滤液。将合并的滤液浓缩至固形物含量为20％后，采取常规喷雾干燥手段干燥得细粉，得产品10。
实施例11
将实施例1制得的产品1根据常规制剂方法，分别制得口服液、粉剂、颗粒剂、片剂和胶囊剂中的任意一种。
同理，实施例2～10制得的产品2～10也可根据常规制剂方法，分别制得口服液、粉剂、颗粒剂、片剂和胶囊剂中的任意一种。
实施例12
本实施例提供了产品1用于乳腺增生动物治疗实验研究。
1实验材料
1.1供试品
由实施例1制得的产品1，外观为棕黄色粉末，有本品特有的香气。
1.2阳性对照物
乳癖消片，购自辽宁好护士药业(集团)有限责任公司，批号121122，服用方法为口服，服用剂量为一次6片、一日3次，重量为0.32g/片。
1.3试剂及药品
苯甲酸雌二醇注射液、黄体酮注射液、大鼠雌二醇酶联免疫检测试剂盒、大鼠催乳素酶联免疫检测试剂盒，大鼠孕酮酶联免疫检测试剂盒、大鼠促卵泡激素酶联免疫检测试剂盒、大鼠促黄体生成激素酶联免疫检测试剂盒、0.9％氯化钠注射液。
2实验方法
2.1动物分组
取SPF级SD雌性大鼠60只，随机均分成6组，每组10只，分别为正常对照组、模型对照组、产品1高、中、低剂量组、乳癖消片组。
2.2剂量设置
产品1高剂量组：752.32mg·kg-1/日，加蒸馏水研磨配制
产品1中剂量组：376.16mg·kg-1/日，加蒸馏水研磨配制
产品1低剂量组：188.08mg·kg-1/日，加蒸馏水研磨配制
乳癖消片组：960.00mg·kg-1/日，实验时加蒸馏水按剂量研磨配制。
2.3实验统计方法
所有计量资料以均数加减标准差表示。多组间均数的比较采用单因素方差分析(One-WayANOVA)，组间均数两两比较，方差齐时采用SNK法；方差不齐时采用Dunnett’sT3法。数据统计由SPSSl5.0软件完成。
2.4给药方法
产品1高、中、低剂量组及乳癖消片组按剂量灌胃给药，给药体积10ml·kg-1，每天1次，连续30天，正常对照组、模型对照组同法灌胃给予蒸馏水10ml·kg-1。
2.5测定方法
除正常对照组外，其余五组大鼠，肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg·kg-1,每天一次,连续25天。随后，改用肌肉注射黄体酮4mg·kg-1,每天一次,连续5天。正常对照组，不注射激素，仅给予大鼠肌肉注射生理盐水0.2ml/只,连续30d。同时，产品2高、中、低剂量组及乳癖消片组按剂量灌胃给药，正常对照组、模型对照组灌胃给予等体积蒸馏水，每天1次，连续30天。
最后一次给药1h后，用游标卡尺测量第2对乳头的直径及高度,并观察其外观。动物眼眶静脉丛取血，分离血清，测定动物血清中雌二醇E2、孕酮P、催乳素PRL、促黄体生成激素LH以及促卵泡激素FSH含量。以8％硫化钠局部脱毛处理，动物处死后完整剥离并取下大鼠胸部第2对乳房。10％甲醛溶液固定,石蜡包埋切片,第2对乳腺组织苏木素-伊红(HE)染色光镜观察。
3实验结果
3.1对乳腺增生大鼠第2对乳头直径及高度的影响
与正常对照组相比，模型对照组大鼠第2对乳头直径、乳头高度均显著增大(P<0.01)。与模型对照组相比，产品2高、中、低剂量组及乳癖消片组大鼠第2对乳头直径、乳头高度均明显缩小(P<0.01)。具体实验结果请参见表1。
表1：对乳腺增生大鼠第2对乳头直径及高度的影响(n＝10)
注:与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较#P<0.05，##P<0.01。
3.2对乳腺增生大鼠血清雌二醇E2、孕酮P含量的影响
与正常对照组相比，模型对照组大鼠雌二醇E2、孕酮P含量均显著升高(P<0.01)。与模型对照组相比，中草药复方高、中、低剂量组和乳癖消片组大鼠雌二醇E2、孕酮P含量明显降低(P<0.01或P<0.05)。具体实验结果请参见表2。
表2：对乳腺增生大鼠血清雌二醇E2、孕酮P含量的影响(n＝10)
注:与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较#P<0.05，##P<0.01。
3.3对乳腺增生大鼠血清催乳素PRL、促黄体生成激素LH、促卵泡激素FSH含量的影响
与正常对照组相比，模型对照组大鼠催乳素PRL、促黄体生成激素LH、促卵泡激素FSH均显著升高(P<0.01)。与模型对照组相比，产品1高、中、低剂量组和乳癖消片组大鼠催乳素PRL、促黄体生成激素LH和促卵泡激素FSH含量明显降低(P<0.01)。具体实验结果请参见表3。
表3：对乳腺增生大鼠血清PRL、LH、FSH含量的影响(n＝10)
注:与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较#P<0.05，##P<0.01。
3.4对乳腺增生大鼠第2对乳头病理形态观察
大体观察。正常对照组的乳头形态与试验开始时一样,隔毛看不见乳头位置,将毛分开后,仅见乳头呈小米样,紧贴在皮肤上,苍白、柔软、个别稍隆起(1mm左右)。模型对照组，形态学改变特征为乳头竖起,较坚实,充血,增高(2～3mm)。给药组，大鼠乳头形态表现为乳头竖起、充血明显减少。
镜下观察。正常对照组，乳腺小叶及腺泡均未见明显增生,腺泡数4～5个,腺泡腔不扩大。模型对照组，乳腺小叶数量明显增多,腺泡数明显增多,有的腺泡腔扩大,内有分泌物；有的乳腺导管上皮细胞增生明显,局部呈乳头状或复层增生,管腔扩张,内有脱落上皮细胞及分泌物,伴间质纤维组织增生。给药组，大鼠乳腺小叶数量明显减少,腺泡数明显减少,乳腺导管上皮细胞增生明显减少。
从实施例4可以得出，实施例1制得的产品1是一种良好的治疗乳腺增生的药物，实施例1的高、中、低剂量对大鼠乳腺增生均有明显的抑制作用，实施例1的低剂量组对大鼠乳腺增生的治疗效果与市售药物乳癖消片相当，而服用剂量仅为乳癖消片的1/5，可以显著减少服用剂量。
将实施例2～10制得的产品，重复进行上述实验，均得到相类似的实验结果，在此不再赘述。
实施例13
本实施例提供了产品6用于乳腺增生动物治疗实验研究。
1实验材料
1.1供试品
由实施例6制得的产品6，外观为棕黄色粉末，有本品特有的香气。
1.2阳性对照物
乳癖消片，购自辽宁好护士药业(集团)有限责任公司，批号121122，服用方法为口服，服用剂量为一次6片、一日3次，重量为0.32g/片。
1.3试剂及药品
苯甲酸雌二醇注射液、黄体酮注射液、大鼠雌二醇酶联免疫检测试剂盒、大鼠催乳素酶联免疫检测试剂盒，大鼠孕酮酶联免疫检测试剂盒、大鼠促卵泡激素酶联免疫检测试剂盒、大鼠促黄体生成激素酶联免疫检测试剂盒、0.9％氯化钠注射液。
2实验方法
2.1动物分组
取SPF级SD雌性大鼠40只，随机均分成4组，每组10只，分别为正常对照组、模型对照组、产品6组、乳癖消片组。
2.2剂量设置
产品6组：342.83mg·kg-1/日，实验时加蒸馏水按剂量研磨配制。
乳癖消片组：960.00mg·kg-1/日，实验时加蒸馏水按剂量研磨配制。
2.3实验统计方法
所有计量资料以均数加减标准差表示。多组间均数的比较采用单因素方差分析(One-WayANOVA)，组间均数两两比较，方差齐时采用SNK法；方差不齐时采用Dunnett’sT3法。由SPSSl5.0软件完成。
2.4给药方法
产品6组及乳癖消片组按剂量灌胃给药，给药体积10ml·kg-1，每天1次，连续30天，正常对照组、模型对照组同法灌胃给予蒸馏水10ml·kg-1。
2.5测定方法
除正常对照组外，其余三组大鼠，肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg·kg-1,每天一次,连续25天。随后，改用肌肉注射黄体酮4mg·kg-1,每天一次,连续5天。正常对照组，不注射激素，仅给予大鼠肌肉注射生理盐水0.2ml/只,连续30d。同时，产品6剂量组及乳癖消片组按剂量灌胃给药，正常对照组、模型对照组灌胃给予等体积蒸馏水，每天1次，连续30天。
最后一次给药1h后，用游标卡尺测量第2对乳头的直径及高度,并观察其外观。动物眼眶静脉丛取血，分离血清，测定动物血清中雌二醇E2、孕酮P、催乳素PRL、促黄体生成激素LH以及促卵泡激素FSH含量。以8％硫化钠局部脱毛处理，动物处死后完整剥离并取下大鼠胸部第2对乳房。10％甲醛溶液固定,石蜡包埋切片,第2对乳腺组织苏木素-伊红(HE)染色光镜观察。
3、实验结果
3.1对乳腺增生大鼠第2对乳头直径及高度的影响
表4显示，与正常对照组相比，模型对照组大鼠第2对乳头直径、乳头高度均显著增大(P<0.01)。与模型对照组相比，产品6组、乳癖消片组大鼠第2对乳头直径、乳头高度均明显缩小(P<0.01)。
表4对乳腺增生大鼠第2对乳头直径及高度的影响(n＝10)
注:与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较#P<0.05，##P<0.01。
3.2对乳腺增生大鼠血清雌二醇E2、孕酮P含量的影响
表4显示，与正常对照组相比，模型对照组大鼠雌二醇E2、孕酮P含量均显著升高(P<0.01)。与模型对照组相比，产品6组、乳癖消片组大鼠雌二醇E2含量明显降低(P<0.01)；产品6组、乳癖消片组大鼠孕酮P含量明显降低(P<0.01或P<0.05)。
表5对乳腺增生大鼠血清雌二醇E2、孕酮P含量的影响(n＝10)
注:与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较#P<0.05，##P<0.01。
3.3对乳腺增生大鼠血清催乳素PRL、促黄体生成激素LH、促卵泡激素FSH含量的影响
表6显示，与正常对照组相比，模型对照组大鼠催乳素PRL、促黄体生成激素LH、促卵泡激素FSH均显著升高(P<0.01)。与模型对照组相比，产品6组、乳癖消片组大鼠催乳素PRL、促黄体生成激素LH、促卵泡激素FSH含量明显降低(P<0.01或P<0.05)。
表6对乳腺增生大鼠血清PRL、LH、FSH含量的影响(n＝10)
注:与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较#P<0.05，##P<0.01。
3.4对乳腺增生大鼠第2对乳头病理形态观察
大体观察
正常对照组的乳头形态与试验开始时一样,隔毛看不见乳头位置,将毛分开后,仅见乳头呈小米样,紧贴在皮肤上,苍白、柔软、个别稍隆起(1mm左右)。乳腺增生病大鼠模型组形态学改变特征为乳头竖起,较坚实,充血,增高(2～3mm)。给药组大鼠乳头形态表现为乳头竖起、充血明显减少。
镜下观察
正常对照组:乳腺小叶及腺泡均未见明显增生,腺泡数4～5个,腺泡腔不扩大。模型对照组:乳腺小叶数量明显增多,腺泡数明显增多,有的腺泡腔扩大,内有分泌物；有的乳腺导管上皮细胞增生明显,局部呈乳头状或复层增生,管腔扩张,内有脱落上皮细胞及分泌物,伴间质纤维组织增生。产品6组大鼠乳腺小叶数量明显减少,腺泡数明显减少,乳腺导管上皮细胞增生明显减少。
将实施例1～5以及7～10制得的产品，重复进行上述实验，均得到相类似的实验结果，在此不再赘述。
实施例14
本实施例提供了产品1用于临床乳腺患者志愿者病情改善的实验研究。
招募对象：参照《中药新药临床研究指导原则》《中医外科学》(第6版)制定。本实施例招募的志愿者，均具有乳房疼痛、乳房肿块的临床表现，结合乳腺彩色超声检查见乳腺内腺体组织回声紊乱或回声增强欠均匀，导管可见囊状扩张，临床诊断为乳腺增生病。结合产品特点，特将乳腺彩超纳入分组标准界为：乳腺未见明显异常为乳疼组，彩超显示节结或囊肿小于1CM以下为乳腺增生组。
本实施例招募的志愿者，年龄在25～50岁之间，女性，月经周期和经期基本有规律，月经周期为(28±7)d。入组时视觉模拟评分法0＜(VAS)＞7分的受试者，疼痛为轻度，或中度疼痛。既往有周期性经前乳痛症状，B超结果及手诊属于乳疼症、轻度乳腺增生，1个月以内未接受乳腺病的治疗，半年以内未使用激素类制剂者。
通过招募，共获得165例进行临床试验。其中乳痛症52例，乳腺增生113例。
从总体情况来看，受试者服用三个月产品后，总有效率达到68.9％，其中在改善程度方面，痊愈的达到总样本的32.9％，显效的5.5％，有效的30.5％。临床疗效综合评价，本发明产品对于乳痛症及乳腺增生有肯定的疗效，服用期间无1例病人出现明显的副作用，证明本发明产品是一种安全有效治疗乳腺增生的药物。
将实施例2～10制得的产品，重复进行上述实验，均得到相类似的实验结果，在此不再赘述。
实施例14
本实施例提供了产品1用于改善抑郁动物抑郁情况的实验研究。
1实验动物及分组
实验动物为体重200±10g的SD大鼠，由中山大学动物实验中心提供，许可证号SCXK(粤)2011-0029，实验前于SPF级动物房检疫室饲养1周，经检疫合格后进行第一次开场实验。随机分为模型组60只和正常对照组10只，模型组单笼饲养，即：每笼1只老鼠，正常对照组5只/笼。适应性饲养1周后，模型组采用慢性温和不可预见性应激(ChronicUnpredictableMildStress，CUMS)程序造模3周，正常对照组不施加任何刺激，正常饲养。3周后根据糖水消耗实验筛选结果相接近的大鼠50只进入模型，并进行第二次开场实验，随机将模型组分为模型对照组、阳性对照组、产品1低剂量组、产品1中剂量组和产品1高剂量组，每组各10只大鼠，单笼饲养，即：每笼1只老鼠。
2实验剂量
产品1高剂量组576mg·kg-1，加蒸馏水研磨配制。
产品1中剂量组288mg·kg-1，加蒸馏水研磨配制。
产品1低剂量组144mg·kg-1，加蒸馏水研磨配制。
阳性对照组大鼠给予丙咪嗪15mg/kg，加蒸馏水研磨配制。
模型对照组大鼠给予蒸馏水5ml/kg。
3实验方法
实验为期12周，第1周适应性饲养，模型组和正常对照组大鼠均充足摄食和饮水；2-4周模型组进行CUMS模型造模，对模型组大鼠每天随机进行下列至少一种应激：禁食(24h)、禁水(24h)、夹尾(1min)、昼夜颠倒、潮湿垫料(垫料：水＝1:1)、鼠笼倾斜(45°)、冰水游泳(4℃，5min)和合笼(5只/笼，24h)，每天随机给予刺激，且前后两天刺激不能相同，使大鼠不能预料刺激的发生种类，避免产生适应现象。3周后，根据糖水消耗实验筛选结果相接近的大鼠50只进入实验模型，并进行第二次开场试验，随机将模型组分为模型对照组、阳性对照组、产品1高、中、低剂量组，并从造模第4周开始给药，模型对照组每日灌胃蒸馏水，阳性对照组每日丙咪嗪15mg/kg，中草药复方每日分别灌胃低、中、高剂量，各组动物连续给药8周，给药同时继续每日刺激。
4观察指标
4.1糖水消耗实验
记录每组大鼠的1％蔗糖水消耗量(g)以及给药后糖水偏好程度。
4.2强迫游泳实验
记录每组大鼠的强迫游泳实验记录大鼠4min内游泳时间(s)及漂浮不动时间(s)。
4.3悬尾实验
悬尾实验后，记录大鼠6min内的后4min的累计不动时间(s)。
4.4资料统计处理
所有数据均以均值±标准差(mean士S.E.M.)表示，数据处理用SPSS17.0统计软件。两组之间检验方差齐时使用t检验，方差不齐时采用t′检验，多组间比较方差齐时使用方差分析，方差不齐时进行数据转换后再进行方差分析，然后进行LSD(方差齐)或Dunnett′sT3(方差不齐)多重比较。p<0.05表示差异具有统计学意义，p<0.01表示差异具有显著的统计学意义。
5实验结果
5.1糖水消耗实验
5.1.1给药后糖水消耗量
给药前即造模后，模型组各组糖水消耗量均低于正常对照组，差异具有统计学意义(p＜0.05)，模型组各组之间无统计学差异；给药2周后，模型组各组糖水消耗量均低于正常对照组，差异具有统计学意义(p＜0.05)。产品1中剂量组和产品1高剂量组，糖水消耗量高于模型对照组，差异具有统计学意义(p＜0.05)；给药5周后，模型对照组糖水消耗量低于正常对照组及各药物组，差异具有统计学意义(p＜0.05)；给药8周后，模型对照组糖水消耗量仍低于正常对照组及各药物组，差异具有统计学意义(p＜0.05)，而各药物组与正常对照组无统计学差异。具体实验结果请参阅表4。
表7：给药前后大鼠糖水消耗量的比较(单位：g)
注：与正常对照组比较*，p＜0.05；与模型对照组比较#，p＜0.05。
5.1.2给药后糖水偏好程度
给药前，各组糖水偏好程度无统计学差异；给药2周后，模型对照组糖水偏好程度低于正常对照组、阳性对照组、产品1中剂量组，差异具有统计学意义(p＜0.05)，产品2低剂量组糖水偏好程度低于正常对照组，差异具有统计学意义(p＜0.05)；给药5周后，模型对照组糖水偏好程度低于正常对照组及各药物组，差异具有统计学意义(p＜0.05)；给药8周后，模型对照组糖水偏好程度低于正常对照组及各药物组，差异具有统计学意义(p＜0.05)，而各药物组与正常对照组无统计学差异。具体实验结果请参阅表5。
表8：给药前后大鼠糖水偏好程度的比较(％)
注：与正常对照组比较*，p＜0.05；与模型对照组比较#，p＜0.05。
5.2强迫游泳实验
与模型对照组相比，给药前，各药物组大鼠游泳不动时间与模型对照组无统计学差异；给药后，各药物组大鼠游泳不动时间缩短，低于模型对照组，差异具有统计学意义(p＜0.05)，且随中草药复方剂量的增加，游泳不动时间呈降低趋势。具体实验结果请参阅表6。
表9：给药前后大鼠游泳不动时间的变化(单位：s)
注：与正常对照组比较*，p＜0.05；与模型对照组比较#，p＜0.05。
5.3悬尾实验
与模型对照组相比，给药前，各药物组大鼠悬尾不动时间与模型对照组无统计学差异；给药后，各药物组大鼠游泳不动时间缩短，低于模型对照组，差异具有统计学意义(p＜0.05)。具体实验结果请参阅表7。
表10：给药前后大鼠悬尾不动时间的变化(单位：s)
注：与正常对照组比较*，p＜0.05；与模型对照组比较#，p＜0.05。
抑郁症是指以情绪低落、思维迟缓并伴有兴趣减低、主动性下降等精神运动性迟滞症状为主要临床表现的一类心境障碍综合征。有报道称，以孤养结合长期不可预见的中等强度应激造成的大鼠抑郁症模型表现出一系列情绪行为改变，与人类抑郁症有一定程度的相似性，可引起实验动物快感缺失、兴趣缺乏、精神运动迟缓等症状，可通过开场实验、糖水消耗实验、强迫游泳实验和悬尾实验结果来判定CUMS造模效果及中草药复方对CUMS抑郁大鼠的抗抑郁功效。
综上所述，连续的CUMS程序能引起大鼠的快感缺乏，表现为糖水消耗量的减少，提示CUMS抑郁模型造模成功。连续8周疏肝解郁植物提取物的给予，在一定程度上可改善CUMS抑郁大鼠的抑郁症状，有向正常对照组改善的趋势，表现为药物组大鼠糖水消耗量高于模型对照组，而强迫游泳不动时间、悬尾不动时间相对模型对照组缩短(p＜0.05)，因此可认为该中草药复方在一定程度上具有抗抑郁的功效。
将实施例2～10制得的产品，重复进行上述实验，均得到相类似的实验结果，在此不再赘述。
综上所述，本发明从导致乳腺增生等乳腺疾病和抑郁症的中药理论基础出发，辅之以中药药性的配伍，发明了一种中药组合物的配方和制备方法，用于解决现有的针对乳腺增生等乳腺疾病的中药组方产品药味较多、制备工艺复杂、服用剂量较大、不宜长期服用以及消费者顺应性差的缺点，而缓解抑郁的中药产品缺乏的问题。本发明首创了一种可以同时治疗乳腺疾病和缓解抑郁的中药产品，对于中药产品的研发具有里程碑式的意义。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种疏肝中草药组合物，其特征在于，所述组合物的原料包括：香附、当归、川芎、白芍和陈皮。
2.根据权利要求1所述的疏肝中草药组合物，其特征在于，所述组合物的原料还包括绿茶提取物。
3.根据权利要求1所述的疏肝中草药组合物，其特征在于，以质量份计，所述组合物的原料包括：香附20～50份、当归10～30份、川芎10～30份、白芍5～20份和陈皮5～20份。
4.根据权利要求3所述的疏肝中草药组合物，其特征在于，以质量份计，所述组合物的原料还包括：绿茶提取物0.5～10份。
5.根据权利要求4所述的疏肝中草药组合物，其特征在于，所述绿茶提取物中茶多酚含量大于等于30％。
6.一种权利要求1至5任意一项所述的疏肝中草药组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
步骤一、提取；
步骤二、浓缩；
步骤三、干燥。
7.一种权利要求1至5任意一项所述的疏肝中草药组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法是按比例将香附、当归、川芎、白芍和陈皮混合制得粉末，或将香附、当归、川芎、白芍和陈皮的粉末按比例混合均匀。
8.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：所述提取浓缩干燥得到的产物与绿茶提取物的混合均匀。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：所述干燥得到的产物制成口服制剂，所述口服制剂的剂型选自：口服液、粉剂、颗粒剂、片剂和胶囊剂中的一种或多种。
10.一种包括权利要求1至5任意一项疏肝中草药组合物或权利要求6～9任意一项制备方法得到的产品在乳腺疾病治疗和/或缓解抑郁中的应用。
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