CN102523915A - 一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法 - Google Patents

一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102523915A
CN102523915A CN2011104193512A CN201110419351A CN102523915A CN 102523915 A CN102523915 A CN 102523915A CN 2011104193512 A CN2011104193512 A CN 2011104193512A CN 201110419351 A CN201110419351 A CN 201110419351A CN 102523915 A CN102523915 A CN 102523915A
Authority
CN
China
Prior art keywords
test tube
female
edible fungi
hypha
mycelia
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2011104193512A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102523915B (zh
Inventor
邹向英
赵洪斌
苏延友
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Binzhou Polytechnic
Original Assignee
Binzhou Polytechnic
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Binzhou Polytechnic filed Critical Binzhou Polytechnic
Priority to CN201110419351.2A priority Critical patent/CN102523915B/zh
Publication of CN102523915A publication Critical patent/CN102523915A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102523915B publication Critical patent/CN102523915B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Abstract

本发明涉及生物领域，特别公开了一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法。该食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）制备无菌水和试管斜面；（2）制备母种菌丝悬液；（3）扩接；（4）培养。本发明食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法的有益效果是：所需设备简单，操作方法简易，成本低廉；接种速度快，5mL菌丝悬液可扩接100支母种，用时10～15min；可大幅度缩短食用菌单一型菌丝类母种扩繁时的发菌时间，菌龄短且一致，菌丝活力旺盛，尤其是珍稀食用菌更加明显，为食用菌生产提供良好的基础，能使母种快速扩繁，满足食用菌大规模生产所需的优质、复壮母种。

Description

一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法
       
（一）      技术领域
    本发明涉及生物领域，特别涉及一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法。
（二）      背景技术
    食用菌的大规模生产，离不开母种的扩大繁殖。母种是食用菌生产的基础，优质复壮的母种是食用菌高产栽培的先决条件。食用菌单一型菌丝类母种通常采用传统的一点式接种方法，发菌时间偏长，既影响生产，又因菌龄长、菌丝弱，造成再次扩繁时菌种活性下降，特别是珍稀食用菌尤为严重，因此必须要改进母种的接种方法。
（三）      发明内容
    本发明为了弥补现有技术的不足，提供了一种操作方法简易、接种速度快、发菌时间短的食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法。
本发明是通过如下技术方案实现的：
一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）制备无菌水和试管斜面：
a.在三角瓶中加入水，瓶口用牛皮纸扎口；
b.玻璃试管使用18×180mm或20×200mm，棉塞使用梳棉，要求干燥、洁净，松紧适度；培养基采用加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基，其制备方法为：先将马铃薯洗净去皮，再称取200g切碎，加80g麦麸，加水1000 mL文火煮沸20～30分钟后，用四层纱布过滤，再加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g和琼脂20g，继续加热搅拌混匀至琼脂融化，再补足水量至1000mL，在温度不低于70℃时将培养基分装至试管长度的1/4～1/5，试管口加梳棉塞，然后用牛皮纸在试管口棉塞外捆扎；
c.将盛有水的三角瓶和盛有加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基的试管立即装入高压锅，0.11～0.12MPa高压灭菌30 min，灭菌后在5 min内将加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基摆成顶端距试管口30～50mm的斜面，摆成斜面培养基长度130mm，将无菌水和加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基冷却后备用；
（2）制备母种菌丝悬液：被扩母种最好是选用组织分离培养的优质健壮的母种，质量符合食用菌菌种通用技术要求NY/T 1742—2009标准，在无菌条件下，用无菌移液管或注射器在被扩母种试管内注入无菌水，用接种针拌碎生长有被扩母种的培养基，制成母种菌丝悬液；
（3）扩接：在无菌条件下，用无菌移液管或注射器抽取母种菌丝悬液5mL，在每一支步骤（1）制备的盛有加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基的扩接试管内注入2滴（约0.05mL）母种菌丝悬液摆平；
（4）培养：将扩接试管放入恒温培养箱内，按食用菌菌种通用技术要求（NY/T 1742—2009）恒温培养，可比常规接种方法缩短一半发菌时间，珍稀食用菌单一型菌丝类母种一般6～8d菌丝即可长满130mm的试管斜面培养基。
本发明食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法的有益效果是：所需设备简单，操作方法简易，成本低廉；接种速度快，5mL菌丝悬液可扩接100支母种，用时10～15 min；可大幅度缩短食用菌单一型菌丝类母种扩繁时的发菌时间，菌龄短且一致，菌丝活力旺盛，尤其是珍稀食用菌更加明显，为食用菌生产提供良好的基础，能使母种快速扩繁，满足食用菌大规模生产所需的优质、复壮母种。
（四）      具体实施方式
实施例1：黄伞母种的扩繁：
（1）制备无菌水和试管斜面：
a.在250mL三角瓶中加入100mL水，用牛皮纸扎口；
b.试管选用18×180mm，棉塞使用梳棉，干燥、洁净，松紧适度；培养基采用加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基，其制备方法为：先将马铃薯洗净去皮，再称取200g切碎，加80g麦麸，加水1000 mL文火煮沸20～30分钟后，用四层纱布过滤，再加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g和琼脂20g，继续加热搅拌混匀至琼脂融化，再补足水量至1000mL，在温度不低于70℃时将培养基分装至试管长度的1/4～1/5；试管口加棉塞，松紧适度，以提起棉塞试管不脱落，拔出棉塞有轻微的声音为适宜，然后7支试管为1组，用牛皮纸在试管口棉塞外捆扎在一起；
c.将盛有水的三角瓶和盛有加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基的试管立即装入高压锅，0.11～0.12MPa高压灭菌30 min，灭菌后5 min内将加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基摆成顶端距试管口30～50mm的斜面，摆成斜面培养基长度130mm，将无菌水和加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基冷却后备用；
（2）制备母种菌丝悬液：被扩母种采用组织分离的母种，菌丝白色至微黄色，长满试管斜面12～14d，栽培生物学效率大于70%，在无菌条件下，用无菌注射器在发好菌的被扩黄伞母种试管内注入10mL无菌水，用接种针拌碎生长有被扩黄伞母种的培养基，制成母种菌丝悬液；
（3）扩接：在无菌条件下，用无菌注射器抽取母种菌丝悬液5mL，在每一支步骤（1）制备的盛有加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基的扩接试管内注入2滴（约0.05mL）母种菌丝悬液摆平，5mL菌丝悬液可扩接100多支试管母种；
（4）培养：将扩接试管放入恒温培养箱内，25℃恒温培养6d即可，常规接种方法相同的试管菌丝发满需12.3d。
实施例2：白灵菇母种的扩繁：
（1）制备无菌水和试管斜面：
a.在250mL三角瓶中加入100mL水，用牛皮纸扎口；
b.试管选用18×180mm，棉塞使用梳棉，干燥、洁净，松紧适度；培养基采用加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基，其制备方法为：先将马铃薯洗净去皮，再称取200g切碎，加80g麦麸，加水1000 mL文火煮沸20～30分钟后，用四层纱布过滤，再加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g和琼脂20g，继续加热搅拌混匀至琼脂融化，再补足水量至1000mL，在温度不低于70℃时将培养基分装至试管长度的1/4～1/5；试管口加棉塞，松紧适度，以提起棉塞试管不脱落，拔出棉塞有轻微的声音为适宜，然后7支试管为1组，用牛皮纸在试管口棉塞外捆扎在一起；
c.将盛有水的三角瓶和盛有加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基的试管立即装入高压锅，0.11～0.12MPa高压灭菌30 min，灭菌后5 min内将加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基摆成顶端距试管口30～50mm的斜面，摆成斜面培养基长度130mm，将无菌水和加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基冷却后备用； 
（2）制备母种菌丝悬液：被扩母种采用组织分离的母种，菌丝洁白、健壮、棉毛状，表面均匀、舒展、平整，边缘整齐，背面无色素，长满试管斜面12～15d，栽培生物学效率大于30%，在无菌条件下，用无菌注射器在发好菌的被扩白灵菇母种试管内注入10mL无菌水，用接种针拌碎生长有被扩白灵菇母种的培养基，制成母种菌丝悬液；
（3）扩接：在无菌条件下，用无菌注射器抽取母种菌丝悬液5mL，在每一支步骤（1）制备的盛有加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基的扩接试管内注入2滴（约0.05mL）母种菌丝悬液摆平，5mL菌丝悬液可扩接100多支试管母种；
（4）培养：将扩接试管放入恒温培养箱内，25℃恒温培养7d即可，相同的试管在常规接种方法下菌丝发满需15d。

Claims (1)

1.一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）制备无菌水和试管斜面：
a.在三角瓶中加入水，瓶口用牛皮纸扎口；
b.培养基采用加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基，其制备方法为：先将马铃薯洗净去皮，再称取200g切碎，加80g麦麸，加水1000 mL文火煮沸20～30 min后，用四层纱布过滤，再加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g和琼脂20g，继续加热搅拌混匀至琼脂融化，再补足水量至1000mL，在温度不低于70℃时将培养基分装至试管长度的1/4～1/5，试管口加梳棉塞，然后用牛皮纸在试管口棉塞外捆扎；
c.将盛有水的三角瓶和盛有加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基的试管立即装入高压锅，0.11～0.12MPa高压灭菌30 min，灭菌后5 min内将加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基摆成顶端距试管口30～50mm的斜面，摆成斜面培养基长度130mm，将无菌水和加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基冷却后备用；
（2）制备母种菌丝悬液：选用组织分离培养的优质健壮的母种，在无菌条件下，用无菌移液管或注射器在被扩母种试管内注入无菌水，用接种针拌碎生长有被扩母种的培养基，制成母种菌丝悬液；
（3）扩接：在无菌条件下，用无菌移液管或注射器抽取母种菌丝悬液5mL，在每一支步骤（1）制备的盛有加富综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基的扩接试管内注入0.05mL母种菌丝悬液摆平；
（4）培养：将扩接试管放入恒温培养箱内恒温培养，食用菌单一型菌丝类母种6～8天菌丝即可长满130mm的试管斜面培养基。
CN201110419351.2A 2011-12-15 2011-12-15 一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法 Active CN102523915B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110419351.2A CN102523915B (zh) 2011-12-15 2011-12-15 一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110419351.2A CN102523915B (zh) 2011-12-15 2011-12-15 一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102523915A true CN102523915A (zh) 2012-07-04
CN102523915B CN102523915B (zh) 2015-01-14

Family

ID=46332973

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201110419351.2A Active CN102523915B (zh) 2011-12-15 2011-12-15 一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102523915B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104429583A (zh) * 2013-09-13 2015-03-25 孙君莲 一种食用菌液体菌种培养方法
CN107244952A (zh) * 2017-05-11 2017-10-13 驻马店市农业科学院 一种香菇母种培养基的制备方法及香菇母种培养基
CN107801568A (zh) * 2017-11-29 2018-03-16 四川山水美地农业投资有限公司 一种黑皮鸡枞菌母种的快速扩繁方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1440637A (zh) * 2003-04-01 2003-09-10 刘永昶 生产食用菌液体菌种的方法和装置
CN101063086A (zh) * 2006-04-24 2007-10-31 刘永昶 食用菌液体菌种专用母种的制备方法
CN101130755A (zh) * 2007-07-19 2008-02-27 青岛大学 崂山食用牛肝菌液体菌种的培养方法
CN101627701A (zh) * 2009-08-14 2010-01-20 郑杰辉 一种蛹虫草菌种选育方法
CN101653081A (zh) * 2009-06-25 2010-02-24 浙江三禾生物工程有限公司 纤细炭角菌的人工培养方法
CN102050673A (zh) * 2010-11-11 2011-05-11 刘晋才 食用菌木株母种培养基的制备方法及其产品

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1440637A (zh) * 2003-04-01 2003-09-10 刘永昶 生产食用菌液体菌种的方法和装置
CN101063086A (zh) * 2006-04-24 2007-10-31 刘永昶 食用菌液体菌种专用母种的制备方法
CN101130755A (zh) * 2007-07-19 2008-02-27 青岛大学 崂山食用牛肝菌液体菌种的培养方法
CN101653081A (zh) * 2009-06-25 2010-02-24 浙江三禾生物工程有限公司 纤细炭角菌的人工培养方法
CN101627701A (zh) * 2009-08-14 2010-01-20 郑杰辉 一种蛹虫草菌种选育方法
CN102050673A (zh) * 2010-11-11 2011-05-11 刘晋才 食用菌木株母种培养基的制备方法及其产品

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
田果廷，等: "金耳有效菌种的制备技术研究", 《西南农业学报》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104429583A (zh) * 2013-09-13 2015-03-25 孙君莲 一种食用菌液体菌种培养方法
CN107244952A (zh) * 2017-05-11 2017-10-13 驻马店市农业科学院 一种香菇母种培养基的制备方法及香菇母种培养基
CN107801568A (zh) * 2017-11-29 2018-03-16 四川山水美地农业投资有限公司 一种黑皮鸡枞菌母种的快速扩繁方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN102523915B (zh) 2015-01-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103598010B (zh) 桑黄原生态仿野生栽培方法
CN106472104B (zh) 一种桑黄栽培的制作方法
CN103430776B (zh) 提高产量和质量的蚕蛹虫草培养方法
CN101933456B (zh) 铁皮石斛蒴果快繁育苗方法
CN105532266B (zh) 一种鸡枞菌栽培方法
CN102119655B (zh) 铁皮石斛自然光快繁育苗方法
CN101861797B (zh) 一种离褶伞菌液体菌种的培养方法
CN106244469B (zh) 一种金针菇单细胞选育优良菌株的方法
CN101215527A (zh) 一种蚕蛹虫草的培育方法
CN103283492B (zh) 一种栽培银耳的方法
CN104145719A (zh) 一种冬虫夏草菌菌丝体发酵生产方法
CN102037856B (zh) 一种简易蛹虫草菌种复壮的方法
CN103766135A (zh) 一种高产、稳产栽培天麻的新技术
CN102845225A (zh) 海鲜菇液体菌种发酵工艺方法
CN104335820A (zh) 一种天麻伴生菌蜜环菌菌种的制作方法
CN102523915B (zh) 一种食用菌单一型菌丝类母种的快速扩繁方法
CN110184200A (zh) 一种高产绣球菌菌丝体发酵培养基及制备方法
CN106434368A (zh) 一种云南白灵芝液体菌种的培养方法
CN103430755A (zh) 一种甘蔗健康种子研制的方法
CN104945129A (zh) 一种香菇培养基质
CN105838621B (zh) 一种灰树花液体菌种的培养液以及培育方法
CN105519353B (zh) 一种双孢菇菌种的制备方法
CN104221709B (zh) 一种金针菇菌种的生产方法
CN103598093B (zh) 一种蓝莓胚状体的诱导方法
CN105145351A (zh) 铁皮石斛组培一步成苗批量化生产的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant