CN102423487A - 一种骨关节保健组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及保健品、食品或药物领域，具体而言，涉及一种骨关节保健组合物及其在制备用于治疗或预防关节炎的药物或食品或保健品中的应用。本发明的骨关节保健组合物包含原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺作为活性成分，其中所述原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的重量比为0.03～0.08∶0.5～0.7，优选为0.04～0.06∶0.6，其中所述葡萄糖胺的重量以硫酸葡萄糖胺计。本发明解决了单独使用胶原蛋白或葡萄糖胺所需的剂量大，经济负担大、长期使用会给病人带来很多副作用，且只对轻微的关节炎有作用，整体效果不好的问题。

Description

一种骨关节保健组合物及其应用

技术领域

本发明涉及保健品、食品或药物领域，具体而言，涉及一种骨关节保健组合物及其在制备用于治疗或预防关节炎的药物或食品或保健品中的应用。

背景技术

骨关节病是一种以局部关节软骨退变，骨质丢失，关节边缘骨刺形成及关节畸形和软骨下骨质致密为特征的慢性关节疾病，又称骨关节炎，退行性骨关节病，增生性关节炎，老年性关节炎。本病好发于40岁以上人群，女性多于男性，是影响中老年人健康的常见疾病。在亚洲，约3人中就有1人患有骨关节病，而在大多数发达国家，它比心脏病、癌症、糖尿病更常见，严重影响中老年人的生活质量。

关节是骨与骨的“铰链”关节软骨决定骨骼的成长，同时软骨能缓冲人体的重量避免骨与骨的接触和摩擦保护关节组织。在关节软骨中胶原蛋白占60％，蛋白多糖(以氨基葡萄糖为原料)占30％，是关节软骨的主要成分。因此单纯补钙不补充胶原蛋白和氨基葡萄糖并不能抑制钙的流失反而会造成各种弊端：一是吸收的钙不能被沉积在骨骼中，补充的钙质白白的流失掉了；二是骨骼的脆性增强，韧性减弱更易造成骨折；三是若钙质在肠道形成不溶性沉淀，就极易造成胆结石等疾病反而影响身体健康。

胶原蛋白是构成组织框架的主要成分，由胶原纤维、弹性纤维和网状纤维组成，胶原纤维在载荷下维持组织的强度和刚度，弹性纤维使组织具有延伸性，网状纤维提供容积。胶原蛋白能促进钙、磷等无机矿物质在骨骼上的沉积，修复组织，与蛋白多糖在组织中相互作用，阻止细胞基质的钙化，使软骨及韧带组织富有弹性，在保持软骨及韧带组织整体功能方面发挥着极其重要的生物学作用。I型和II型胶原构成韧带胶原及关节软骨的主要成分之一，在人体中分布不同。I型胶原主要作用是吸收和传递应力，适合于牵拉变形、维持张力，但耐受压力的作用较弱；II型胶原主要是承受和吸收压力，维持组织抗压应力，关节软骨外基质的主要成分由II型胶原构成，其在关节软骨中排列成网状，中间容纳蛋白质分子，构成具有黏弹性的结构，起到缓冲垫的作用，赋予关节以抗压耐磨的特性。有研究发现人类随着年龄的增长，正常关节软骨中胶原含量逐渐降低，胶原蛋白与膝关节的退变有一定的关系。生理状态下，人体组织胶原蛋白的生成与降解保持相对平衡，当人或动物步入老年阶段后，全身激素水平逐渐降低，关节软骨及韧带组织基质合成和分解失衡，引起组织弹性下降，随之发生裂缝，组织完整性遭到破坏，逐步形成骨性关节炎，严重影响人们的日常生活。Raisz研究表明绝经后骨质疏松患者体内雌激素水平下降，骨髓中细胞因子的调节平衡被扰乱，同时雌激素启动破骨细胞凋亡的作用丧失，使生成的胶原被过度地降解，从而引起骨关节疾病的发生。II型胶原是软骨组织最主要的成分，可作为软骨的表型标记，决定了关节软骨特性，是评价软骨修复质量的标志之一。

另一方面，胶原蛋白与钙的吸收也有一定的相关性。35岁以后体内胶原蛋白大大减少，老化量和流失量却在大大增加，所以钙就难以被粘固产生骨质疏松等各种病痛。最科学的方法是同时补充钙与胶原蛋白。这样，钙才能在胶原蛋白的粘合下沉积在骨骼，极大加强骨的韧性、硬度。也就是说，只有摄取足够的胶原蛋白，人体对吸收的钙才能够正常甚至更好的利用。骨质疏松、关节疼痛的问题才能得到缓解。国内外很多文献报道口服II型胶原蛋白产生免疫耐受可使类风湿性关节炎和骨质疏松的发病受到抑制，在动物实验和临床观察中均发现令人鼓舞的结果。2006年美国Murray州立大学的研究指出，医学研究证实天然II型胶原蛋白在减轻关节炎症状，缓解关节疼痛、僵硬和快速改善器官功能和关节炎WOMAC指数方面的效果非常明显。由于胶原蛋白主要负责承载软骨细胞，调节细胞的增殖和分化，缓冲关节应力，占软骨干重60％～80％，而这其中的胶原蛋白有95％为II型胶原蛋白。但是一般II型胶原蛋白是经高温或酸碱水解后制成，是为变性胶原蛋白，蛋白质的三&四级结构完全遭到破坏，而原型(非变性)II胶原蛋白完整保有胶原三股螺旋结构，二者的结构对比请参见图1。

哈佛大学医学院Dr.David Trentham称“II型胶原蛋白必须是原型(非变性)的才具有功效(Type II collagen must be in its native(undenatured)form to be effective inthis capacity)”。原型II型胶原蛋白(Native Type II Collagen)，也称非变性II型胶原蛋白，其抗关节炎的功效依赖于其蛋白结构的完整性。目前的医学研究证实，只有与构成人体关节组织的胶原蛋白具有共同结构和完整抗原成分的原性骨胶原才能够作用于人体的免疫系统，调节免疫功能，关闭自身变态反应对关节攻击和破坏的进程。市售II型胶原蛋白或复合胶原蛋白大多为变性或水解II型胶原蛋白，其蛋白质的立体结构和抗原成分受到破坏。有研究结果证明变性II型胶原蛋白(Denatured Type IICollagen)在类风湿性关节炎的应用中不能发挥其应有的功效。原型II型胶原蛋白主要有减缓关节疼痛与发炎、停止软骨骨骼遭侵腐、改善关节灵活性、修复及重建软骨、促进骨关节长期健康等作用。

美国马里兰大学医学中心的研究，原型II型胶原蛋白与西药比较具有如下优势：

1、减轻疼痛比安慰剂和NSAID(特别是布洛芬)更有效；

2、改善疼痛的持续时间比止痛药更长；

3、减少对NSAID和其它止痛药的需求；

4、增加关节灵活性，减少关节肿胀；

5、减少关节积液，增加步行间距，缓解疾病进展。

葡萄糖胺(Glucosamine)又名氨基葡萄糖，普遍存在人体的软骨、肌腱等关节组织中，是形成软骨细胞的重要营养素，也是软骨基质和关节液的基本成份，它能刺激软骨细胞生成更多的胶原蛋白、糖蛋白和糖胺多醣。软骨中葡萄糖胺越多，新生的胶原蛋白、糖蛋白和糖胺多醣就越多，能吸收的润滑液也越多，关节软度自然也就越健康。随着人体的老化，葡萄糖胺的合成的速度无法赶上分解的速度，使体内及关节逐渐缺乏葡萄糖胺，近而影响关节的新陈代谢，所以，只要身体活动，便出现僵硬、发炎及令人难耐的疼痛症状。因此，只有补充足够的葡萄糖胺，才可以刺激受伤的软骨组织开始进行重建工作，亦能促进软骨组织的新陈代谢以预防退化的发生。藉由重建僵硬与耗损的关节组织，可以减轻关节的疼痛、肿胀，使关节变得更柔软、更有弹性。

葡萄糖胺的具体效果为：

(1)促进骨骼关节的新陈代谢。

(2)提供骨关节所需的营养。

(3)具有润滑作用，减少骨头间的摩擦受损，减轻疼痛。

(4)抑制骨关节退化。

目前，传统治疗关节炎的做法是利用消炎药或止疼药，虽然可以缓解发炎与疼痛的症状，却无法使病变的关节恢复健康，并可能会造成胃肠不适、溃疡，并增加肝肾的负担。而利用胶原蛋白和葡萄糖胺来补给关节的营养所需，及作为关节炎的治疗的方法，也越来越被医学界乃至临床医师所重视。国内外已有一些研究和报道从关节营养的高度来着手解决关节病变的问题，尤其II型胶原蛋白和葡萄糖胺这两种物质治疗关节炎的机理，经多年研究和临床试验已经非常明确，也被广泛应用于关节炎疾病的治疗中。但II型胶原蛋白和葡萄糖胺这两种物质在以往都是单独用来制备药物或保健品来防治关节炎，另一方面目前市售II型胶原蛋白大多为变性或水解II型胶原蛋白，其蛋白质的立体结构和抗原成分受到破坏，丧失了大部分的保健功效。根据进一步试验研究发现它们单独应用于治疗关节炎上存在一些弊端：

1、II型胶原蛋白粉摄入量大，每天需要4.5克，连续服用半年，才能达到预期的效果，而且II型胶原蛋白粉价格昂贵，大剂量长期服用会给患者带来很大的经济负担。

2、葡萄糖胺口服剂也存在摄入剂量大的问题，每天需服用1.5克，大剂量药物长期使用可能会给患者带来很多副作用，如：困倦、食欲不振、胃烧灼和轻度或暂时的消化不良等。而且单独使用葡萄糖胺只对轻微的关节炎有作用，整体效果不好。

目前为止还没有发现用II型胶原蛋白和葡萄糖胺结合起来制成药物或保健品来治疗关节炎的先例。

虽然现有技术中公开了某些制剂可包含胶原蛋白和葡萄糖胺，如公开号为CN101648008A的中国专利公开了一种用于关节保健的复合制剂，其包含氨基葡萄糖(即葡萄糖胺)、硫酸软骨素、二甲基砜以及胶原蛋白作为活性成分，公开号为CN102150836A的中国专利公开了一种氨糖多肽软胶囊，其包含氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、胶原蛋白肽、碳酸钙和玉米油。但这些专利申请包含的活性成分过多，增加了成本以及制备的复杂性。此外，其也并未公开或暗示II型胶原蛋白和葡萄糖胺的组合在治疗关节炎时具有协同作用，更未公开原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的组合。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种骨关节保健组合物，所述组合物包含原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺作为活性成分，本发明的组合物有益于骨关节健康。

本发明的组合物中，所述原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的重量比为0.03～0.08∶0.5～0.7，优选为0.04～0.06∶0.6，其中所述葡萄糖胺的重量以硫酸葡萄糖胺计。

本发明的另一个目的在于提供上述骨关节保健组合物在制备用于治疗或预防关节炎的药物或食品或保健品中的应用。

本发明组合物可单独作为药品使用也可应用到食品(包括液态或固态食品)或保健品领域，优选富含钙质的食品如：牛奶、奶粉等。

本发明的目的是解决单独使用胶原蛋白或葡萄糖胺所需的剂量大，经济负担大、长期使用会给病人带来很多副作用，且只对轻微的关节炎有作用，整体效果不好的问题。

附图说明

图1：原型与变性II胶原蛋白微观电子照片对比图；其中左侧为原型(非变性)II胶原蛋白，右侧为变性II胶原蛋白。

图2：患者服用本发明组合物前后膝关节X-ray照片结果。

具体实施方式

本发明人意外地发现原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的联合使用可以克服二者单独使用时剂量大、存在明显的副作用且治疗效果不佳等缺点，由此得到了本发明。

在一个方面，本发明提供了一种骨关节保健组合物，所述组合物的活性成分是原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺。所述原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的重量比为0.03～0.08∶0.5～0.7，优选为0.04～0.06∶0.6，其中所述葡萄糖胺的重量以硫酸葡萄糖胺计。如果原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的重量比小于0.03∶0.7，则治疗关节炎的效果不佳；如果原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的重量比大于0.08∶0.5，则增加治疗费用。

本发明所述原料中II型胶原蛋白为原型(非变性)II型胶原蛋白，优选来源于鸡胸软骨，因为鸡胸软骨与人体关节软骨组成十分相似。目前制备II型胶原蛋白的工艺有酸、碱、酶法等，不同制备工艺决定产品的质量，酸、碱法和酶法(须高温灭酶)会导致胶原蛋白变性，氨基团分子结构造成破坏，从适合人体吸收的三肽结构变性为杂乱的肽链结构，吸收率下降，产品功能降低，即为变性II型胶原蛋白。

而本发明所述的原型II型胶原蛋白的立体结构和抗原成分没有受到破坏，这是因为其通常是于低温条件下经萃取而制得，其制备方法例如参见美国专利US5750144(Method for alleviating the symptoms of arthritis in mammals)、US5645851、US5637321和US5529786。此外，本发明的原型II型胶原蛋白还可采用现有的市售产品，例如上海统园食品技术有限公司的商标为UC-II的产品，或美国Inter Health公司的产品或優捷力公司的产品。

本发明所用的原型II型胶原蛋白的分子量优选在1500-3000道尔顿之间，更优选为2200～3000道尔顿，这个分子量范围的胶原蛋白活性最强，使用后吸收效果也是最好的。分子量在3000道尔顿以下则易于被人体吸收，分子量在2200道尔顿以上则胶原蛋白比较稳定，有益于发挥其功能性。

该原型II型胶原蛋白完整保有胶原三股螺旋结构，利用免疫治疗的机制，改善并治疗关节炎。原型II胶原蛋白含有可以被抗体辨识/结合的地方-抗原决定位(Epitope或antigenic determinant)，经胃酸和胃蛋白酵素部份水解后，形成长短不一的可溶性胶原。此胶原仍然维持三股螺旋形式，亦使抗原决定位大量暴露出来，胃蛋白酶不会切解含有缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸氨基酸的键结，原型II胶原蛋白含有大量的甘氨酸，因此可确保原型结构不会遭受破坏。抗原决定位与小肠派尔氏版(Pyere’s Patch)所产生的T细胞形成锁钥机制(a lock and key mechanism)，进而控制免疫反应及发炎反应。

本发明所述原料中葡萄糖胺又称氨基葡萄糖或葡糖胺，是葡萄糖的一个羟基被氨基取代后的化合物。其结构式如下：

葡萄糖胺是形成虾蟹外壳甲壳质的胶质成分，工业上经常是从天然的甲壳素中提取出的一种海洋生物制品，此外，也存在利用真菌和谷物发酵而制备的葡萄糖胺。葡萄糖胺也存在人体内，分布于软骨、指甲、韧带及皮肤等处，是负责结合细胞间及组织间的结缔组织。研究认为，葡萄糖胺可以在体内经由葡萄糖合成转成醣蛋白，刺激软骨细胞生产胶原蛋白，修复软骨组织，改善及增加关节里滑液的多醣体成分，减缓关节炎疼痛。氨基葡萄糖是糖胺多糖(粘多糖)的前体，而后者是关节软骨的主要成分，所以氨基葡萄糖常被用于骨关节炎的辅助治疗。补充氨基葡萄糖可能可以帮助重建软骨并治疗关节炎

本发明的组合物中，葡萄糖胺可以是以上所示氨基单糖的形式，也可以是盐酸盐或硫酸盐的形式，但最优选为硫酸盐的形式。这是因为硫酸葡萄糖胺的纯度比盐酸葡萄糖胺通常更高，且没有过多的氯、钠离子，适合长期服用，避免了钠、氯等离子对肝、肾脏的可能损害。

本发明组合物成人每天的食用量是0.53～0.78克(以原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的总和计)，优选食用量是0.64～0.66克。

本发明组合物还优选包含一定比例的钙元素，钙的添加量为所述原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的总重量的0.69～1.4％。所述钙可以是碳酸钙、醋酸钙、乳酸钙、葡萄糖酸钙、柠檬酸钙、天冬氨酸钙、乳钙的形式，但最优选以乳钙的形式提供。当钙以乳钙的形式提供时，乳钙含量为所述原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的总重量的3～5％(乳钙中的钙含量为23％～28％)。乳钙也叫乳清钙，是乳清无机盐浓缩物，是从牛奶中提取的钙质，经过脱水、脱脂、干燥喷雾后得到的一类矿物盐的结合，其成分包括柠檬酸钙、磷酸钙、离子钙，还含有锌、磷、蛋白质、免疫球蛋白、生长因子、乳铁蛋白等丰富的营养成分，对于肠胃功能都非常脆弱的婴幼儿和孕产妇、老年人来说，乳钙相对于其他矿物元素钙的刺激性小得多，基本无排斥和过敏现象。

本发明组合物可包含药学上可接受的载体或赋形剂，如填充剂、润滑剂、崩解剂等，或包含食品学上常见的添加剂，如酸度调节剂、抗结剂、消泡剂、抗氧化剂、漂白剂、膨松剂、着色剂、护色剂、增味剂、营养强化剂、防腐剂、甜味剂、增稠剂、香料等。

本发明的组合物可制成片剂、粉剂、胶囊剂、颗粒剂等常规口服剂型。并且在本发明的组合物中，原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺可以混合在一起，也可以单独分别存在，只要其能够提供0.03～0.08g每日剂量的原型II型胶原蛋白与0.5～0.7g每日剂量的葡萄糖胺即可。优选将本发明的组合物制成能够提供0.03～0.08g每日剂量的原型II型胶原蛋白与0.5～0.7g每日剂量的葡萄糖胺的单位剂型的形式。

在另一方面，本发明还提供了上述骨关节保健组合物在制备用于治疗或预防关节炎的药物或食品或保健品中的应用。本组合物可单独作为药品使用也可应用到食品领域(包括液态或固态食品)或保健品领域，优选富含钙质的食品如：牛奶、奶粉等。

本发明的有益效果在于，本发明通过实验将原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺有机的结合起来克服以往的单独使用II型胶原蛋白或葡萄糖胺过程中存在的弊端，同时也更加充分的发挥了II型胶原蛋白和葡萄糖胺在预防和治疗关节炎上的协同效果。如：1、预防和治疗骨质疏松。2、提供骨关节所需的营养，从而预防关节炎。3、具有润滑作用，减少骨头间的摩擦受损等。

另外，本发明中原型II型胶原蛋白和葡萄糖胺复合配方，协同作用效果更佳，对关节炎的症状具有很大的改善作用。同时与单独服用葡萄糖胺口服剂相比克服了单独使用的弊端，既提高了治疗的功效又降低了单独使用存在的副作用，同时本组合物降低了各组分的使用量，降低了消费者的经济负担。

实施例

下面列举一部分具体实施例对本发明进行说明，有必要在此指出的是以下实施例只用于本发明作出进一步说明，不代表对本发明保护范围的限制。其他人基于本发明的精神做出的修改和调整仍属于本发明的保护范围。

本发明实施例所用的原料与来源：

原型II型胶原蛋白：购自上海统园食品技术有限公司，商标为UC-II，分子量为2200～3000；

硫酸葡萄糖胺：商品名：D-氨基葡萄糖硫酸盐，购自深圳市星纪贸易有限公司；

草莓香精：购自广州市名花香料有限公司公司；

麦芽糊精：购自山东西王集团有限公司；

木糖醇：购自郑州百和食品化工有限公司；

乳钙：购自丹麦阿拉食品原料有限公司，商标

型号：Capolac MM-0525；

低聚果糖粉：购自江门市量子高科生物股份有限公司；

实施例1：

一种骨关节保健粉，包括：原型II型胶原蛋白0.5克，硫酸葡萄糖胺6克，草莓香精0.02克，麦芽糊精2.48克，木糖醇1克。1、产品为10克盒装，并有独立包装1g/包。

2、保质期：24个月

3、食用方法：每日1次，饭后食用，每次1小包。

实施例2：

一种骨关节保健钙粉，包括：原型II型胶原蛋白0.4克，硫酸葡萄糖胺6克，乳钙0.3克，麦芽糊精3.25克和草莓香精0.05克。

1、产品为10克盒装，并有独立包装1g/包。

2、保质期：24个月

3、食用方法：每日1次，饭后食用，每次1小包。

实施例3：

一种骨关节保健钙粉，包括：原型II型胶原蛋白0.3克，硫酸葡萄糖胺6克，乳钙0.28克，麦芽糊精3.37克和草莓香精0.05克。

1、产品为10克盒装，并有独立包装1g/包。

2、保质期：24个月

3、食用方法：每日1次，饭后食用，每次1小包。

实施例4：

一种骨关节保健钙粉，包括：原型II型胶原蛋白0.8克，硫酸葡萄糖胺6克，乳钙0.32克，麦芽糊精2.83克和草莓香精0.05克。

1、产品为10克盒装，并有独立包装1g/包。

2、保质期：24个月

3、食用方法：每日1次，饭后食用，每次1小包。

实施例5：

一种骨关节保健奶粉，它由下列原料配制而成：

全脂奶粉95克、原型II型胶原蛋白0.3克、硫酸葡萄糖胺3克、乳钙0.16克、低聚果糖粉1.54克。

1、称量：按照重量份称取各原料。

2、将称量好的各原料在干混机中混合约20分钟，混好后收粉、检验、包装和贮存。

3、产品包装为20g/袋。

4、保质期：24个月

5、食用方法：每日1次，每次20克，用200mL温开水冲调搅拌均匀后即可饮用。

对照例：

根据以上方法，用相同数量的蔗糖代替原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺，来制备对照样品。

比较例1：

根据CN102150836A的实施例2的组分、方法以及步骤，制备比较例1的产品。其组分具体包括以下：氨基葡萄糖盐酸盐102克、硫酸软骨素68克、胶原蛋白肽68克、碳酸钙25.5克、玉米油586.5克，制成软胶囊1000粒。

本发明的组合物对关节炎功效的对比实验：

(一)人体功效实验

实验人群：每组8人，男女各4名，年龄在45～68岁。

实验方法：根据检测膝关节液IL-1浓度来判断关节炎治疗效果。

IL-1是检测关节炎水平的一个重要指标，实验人员关节液IL-1水平上升证明关节炎程度高，相反IL-1水平下降即实验人员的关节炎程度也随之下降。具体步骤如下：

(1)确定以下实验人员每组8人，男女各4名，A组为正常对照组：无关节炎的人员，给其未添加原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺的食物(对照组样品，称安慰剂)；B-D2组为患有关节炎组，其中B组为只添加硫酸葡萄糖胺的食物；C组为只添加原型II型胶原蛋白的食物；D1组为原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺复合配方食物组，其中原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺的用量低于上述本发明的每日剂量；D2组为原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺复合配方食物组，其中原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺的用量在本发明的每日剂量的范围内；E组为患有关节炎组，但只给安慰剂。详细情况如下表：

表1实验各组原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺用量表

注：g/100g为每千克食物样品中II型胶原蛋白或硫酸葡萄糖胺的用量。

(2)根据上表，每天给各实验人群食用一次不同食物，每次为20克，两个月后检测每组人员的关节液IL-1水平，结果如下表：

表2各组人员关节液IL-1含量(N＝8)

由上述结果可以得出以下结论：

1.患有关节炎E组(给安慰剂)与A组(给安慰剂)无关节炎组有非常显著的差异(p＜0.01)，IL-1含量明显异常。

2.B和C组原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺单独使用时与E组患有关节炎(给安慰剂)的相比较，含量有所下降，但无显著差异(p＜0.05)，证明单独使用原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺时降低关节炎的程度不明显。

3.D1与D2组与E组比较发现，原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺组合物对于降低水平比单独使用这两种物质更有效果；比较D1与D2组，D2组IL-1含量明显降低，有非常显著的差异(p＜0.01)，IL-1水平几乎降到正常范围。由此可见本发明所述的原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的比例和食用量对关节炎有非常明显的治疗效果。

因此，本发明的预防和治疗骨关节炎的组合物，不仅解决了以往单独使用II型胶原蛋白或葡萄糖胺时存在的问题，还成分发挥了原型II型胶原蛋白和葡萄糖胺在治疗和预防关节炎方面的协同作用，使其达到最佳的治疗和预防效果。

原型II型胶原蛋白与变性、I型、IV型胶原蛋白对比试验：

实验人员：患有关节炎人员，每组10人，男女各5名。

实验方法：根据检测膝关节液IL-1浓度来判断关节炎治疗效果。具体步骤如下：

(1)确定以下实验人员每组10人，患有关节炎的人员共40人，第一组给其I型胶原蛋白(购自北京航科靓彩呈科技发展有限公司)和硫酸葡萄糖胺复合配方食物组，第二组给其原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺复合配方食物组；第三组给其变性II型胶原蛋白(购自北京航科靓彩呈科技发展有限公司)和硫酸葡萄糖胺复合配方食物组；第四组给其IV型胶原蛋白(购自北京航科靓彩呈科技发展有限公司)和硫酸葡萄糖胺(复合配方食物组。上述四组所给食物其中的胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺为本发明制备过程所需的量，详细情况如下表：

表3不同胶原蛋白与硫酸葡萄糖胺组合物用量表

注：g/kg为每千克食物样品中II型胶原蛋白或硫酸葡萄糖胺的用量。

(2)根据表3，每天给各组人员喂一次不同食物，每次为50克，两个月后为每组人员检测关节液IL-1水平，结果如下表：

表4各组人员关节液IL-1含量实验前后对比表(N＝10)

由表3可以得出以下结论：

上述四组人员实验后IL-1含量水平都有所下降，但二、三组较其他两组实验后IL-1含量更低，一组和四组实验后IL-1含量与表2中单独给葡萄糖胺组相当，这说明I型胶原蛋白和IV型胶原蛋白对于治疗关节炎基本没有效果。第二组与第三组相比较，第二组实验前后IL-1含量水平有非常显著的差异(p＜0.01)，实验后实验组人员的IL-1含量恢复正常，而第三组实验后IL-1含量虽然与单独给葡萄糖胺组相比较低，但效果不明显，因此，可以得出结论只有原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的组合在治疗关节炎上才具有明显的协同作用。

本发明原型II型胶原蛋白和硫酸葡萄糖胺的组合物与现有专利(比较例1)对比试验：

实验人员：每组10人(均患有关节炎)。

实验方法：根据检测膝关节液IL-1浓度来判断关节炎治疗效果。详细实验如下：

(1)确定以下人员共20人，分为两组，每组10人，第一组给其实施例2的产品，第二组给其比较例1的胶囊。详细情况如下表：

(2)每天给各组人员食用一次实施例2的产品或比较例1的胶囊，每次为1克，两个月后为各组人员检测关节液IL-1水平，结果如下表：

表5各组人员关节液IL-1含量实验前后对比表(N＝10)

实验组	第一组	第二组
			实验前IL-1含量(pg/ml)	126.96±30.02	127.01±30.10
实验后IL-1含量(pg/ml)	7.68±0.26	41.60±18.23

由表4可以得出以下结论：

上述两组实验后人员的IL-1含量水平都有所下降，但第一组较第二组实验后IL-1含量更低，这说明不添加硫酸软骨素对于治疗关节炎没有影响，由于本发明组合物中胶原蛋白为原型II型胶原蛋白，因此本发明组合物治疗关节炎效果更佳。由此，可以得出结论原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的组合在治疗关节炎上具有明显的协同作用。

(二)人体疼痛试验：

1、疼痛是骨关节炎最重要的症状，因此对疼痛和治疗改善疼痛效果的检测便成为研究改善症状药物治疗的随机对照试验的首要结果变量。视觉模拟评分法(VAS)是一种简单实用的疼痛评价量表，能够准确地表达患者的感觉。在临床以疼痛为结局指标的研究中VAS法被认作是测量疼痛最敏感和可靠的方法。WOMAC指数是由美国风湿性关节炎临床研究组创建并推荐的测量工具，是评估疼痛、僵硬和身体功能障碍的一个多维的疾病特异性自我评估问卷

调查量表，是目前用于评估髋关节或膝关节骨关节炎应用最广泛的测评工具，经多方研究证实此指标有效、可靠且敏感，与视觉模拟评分法(VAS)结合，能更好地量化观测指标，了解本发明组合物的临床疗效。具体实验步骤如下：

(1)被诊断为类风湿性关节炎的10名患者，年龄58-78岁，服用本发明的骨关节保健奶粉(实施例5)，每日2次，每次10克奶粉，每日共20克奶粉(其中包含0.6克原型II型胶原蛋白与0.06克葡萄糖胺)，用200mL温开水冲调后饮用，连续7周。采用国际公认的VAS评分、WOMAC骨关节炎指数作为临床观察指标，进行评分，每周1次，对所测数据进行统计学分析，观察患者治疗前后各项指标的变化及治疗前后的疗效。

(2)视觉模拟评分法(VAS)：在纸上划一条10cm的横线，横线的一端为0，表示无痛；另一端为10，表示剧痛；中间部分表示不同程度的疼痛。让病人根据自我感觉在横线上划一记号，表示疼痛的程度。0分：无痛；3分以下：有轻微的疼痛，患者能忍受；4分～6分：患者疼痛并影响睡眠，尚能忍受；7分～10分：患者有渐强烈的疼痛，疼痛难忍。

(3)指导患者回答48h内关节的每一个情况。评分说明：没有困难0；轻微1；中等2；非常3；极端4。第一部分疼痛：①在平地上走路时②上下楼梯时③晚上睡觉时④坐起或者躺下时⑤站立时；第二部分僵直：①早晨刚醒来时②在以后时间内坐、卧或休息之后时；第三部分进行日常活动的难度：①下楼时②上楼时③从座位上站起来时④站立时⑤向前弯腰时⑥在平地上行走时⑦进出小轿车或者上下公共汽车时⑧购物时⑨穿袜时⑩起床时(11)脱袜时(12)躺在床上时(13)进出浴缸时(14)坐着时(15)坐马桶上或从马桶上站起来(16)干重体力家务活时(17)干轻体力家务活时。

(4)疗效判定标准：参考《中药新药治疗骨性关节炎的临床研究指导原则》，临床痊愈：疼痛、肿胀等症状、体征积分减少≥95％，关节活动正常。显效：疼痛、肿胀等症状、体征积分减少≥70％，关节活动不受限。有效：疼痛、肿胀等症状、体征积分减少≥30％，＜70％关节活动改善。无效：疼痛、肿胀等症状、体征积分减少不足30％，关节活动无变化。

(5)治疗结果：患者治疗前后VAS、WOMAC指数评分，详见表1，表2。

表6治疗前后VAS评分对比情况(X±S，分，N＝10)

表7治疗前后WOMAC指数对比情况(X±S，分，N＝10)

表8患者临床疗效比较(N＝10)

痊愈	显效	有效	无效	总有效率
					5	4	1	0	100％

从上述各表可以看出本发明组合物对关节炎有非常明显的治疗效果。

2、一位女患者61岁，患有退化性软骨和骨刺疾病，膝盖关节严重疼痛，以致无法行动，服用本发明实施例5的骨关节保健组合物连续一年，服用量为每日2次，每次10克奶粉。图2X-ray照片结果显示：服用一年后，软骨组织逐渐增生、无明显的骨刺，并且疼痛感逐渐消失。

Claims (9)

1.一种骨关节保健组合物，其特征在于，所述组合物包含原型II型胶原蛋白和葡萄糖胺作为活性成分。

2.如权利要求1所述的骨关节保健组合物，其特征在于，所述原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的重量比为0.03～0.08∶0.5～0.7，优选为0.04～0.06∶0.6，其中所述葡萄糖胺的重量以硫酸葡萄糖胺计。

3.如权利要求1所述的骨关节保健组合物，其特征在于，所述组合物包含能够提供0.03～0.08克每日剂量的原型II型胶原蛋白和0.5～0.7克每日剂量的葡萄糖胺，优选包含能够提供0.04～0.06克每日剂量的原型II型胶原蛋白和0.6克每日剂量的葡萄糖胺，其中所述葡萄糖胺的重量以硫酸葡萄糖胺计。

4.如权利要求1～3中任一项所述的骨关节保健组合物，其特征在于，所述原型II型胶原蛋白的分子量为1500-3000，优选2200～3000。

5.如权利要求1～3中任一项所述的骨关节保健组合物，其特征在于，所述组合物包含以所述原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的总重量计，重量比为0.69～1.4％的钙元素。

6.如权利要求4所述的骨关节保健组合物，所述钙以乳钙的形式提供，所述乳钙为所述原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的总重量的3～5％，并且所述乳钙中的钙含量为23.0％～28％。

7.权利要求1～6中任一项所述的骨关节保健组合物在制备用于治疗或预防关节炎的药物或食品或保健品中的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述食品为牛奶或奶粉。

9.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物或食品或保健品的成人食用量以原型II型胶原蛋白与葡萄糖胺的总和计为每日0.53～0.78克，优选为0.64～0.66克。

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